食道癌 食道癌是指好发生于食道颈、胸、腹段的恶性肿瘤。食管癌的扩散与转移有三种形式： ①直接扩散：一般是沿粘膜向下层扩散。由于食管无浆膜，肌层如受累，病变容易穿透肌层，延伸至食管内外并可侵犯到邻近器官如肺、气管、支气管、胸膜、心包、主动脉等。 ②淋巴道转移：转移发生一般较早，以低分化鳞癌及未分化癌多见，可转移到锁骨上区、肺门淋巴结、后纵膈、膈下及腹腔淋巴结。 ③血道转移：转移一般发生较晚，常见转移部位有胃、肝、肺、肾、胸膜、腹膜、肾上腺及胰腺等。 食管癌的早期有吞咽噎感、吞咽痛、咽干发紧、胸骨后痛、食管内异物感、胸后闷胀、食物通过缓慢及停滞感、剑突下、上腹痛等症状。食管癌发展到中晚期，则可感到进行性吞咽困难、梗阻加重、明显恶液质及出现转移病灶。 诊断: X线食道钡透及摄片，是食管癌定位诊断的重要方法。食管拉网检查可取脱落细胞及活检作病理检查，是明确诊断的主要方法。 治疗: 食管癌明确诊断后，应及时到医院请专科医生治疗。食管癌的早期一般采取外科手术治疗，不适合动手术的中晚期病人常用$^{60}$钴或直线加速器放疗。 预防: 食管癌的预防主要与饮食、情志有关。平时不吃霉变食品，少吃腌制品，少吃油炸熏制食物；多吃新鲜肉类、瓜果、蔬菜，再则就是要戒除烟酒。对生活应抱有乐观的态度，因势利导去除各种不利因素，当自觉烦闷时，应学会调整自己的情绪，使精神从压抑状态下解脱出来。 食道癌能出现便秘吗? 食道癌是指原发于食道的癌瘤,主要包括鳞癌、腺癌、未分化小细胞癌、癌肉瘤等。临床表现为咽下困难,进食时胸骨后不适、摩擦感、微痛或异物停留感,吞咽疼痛,消瘦及恶病质等,一部分病人可出现便秘。造成食道癌患者便秘的原因较为复杂,首先是病人由于吞咽困难或疼痛而进食减少,尤其是纤维素含量高的食物摄入减少,食物对胃肠的机械性、化学性及温度刺激减弱,胃肠粘膜的感受器兴奋性降低,蠕动减少。另一原因是病人疲倦,乏力,运动量减少,人体各个系统的活动水平均降低,肠平滑肌处于松弛状态,结肠运动减弱,致粪便在肠内停留时间过久,水分被吸收过度,大便排出困难。 哪些食道癌患者可出现便秘? 食道癌属于中医学“噎膈”病之范畴,其基本病机为食道阻滞、胃气不降,但有标本虚实气血之分,病之标为气滞、痰阻、血瘀及其相互兼杂,病之本指津亏、血耗、阴阳虚损。一般瘀血内结型、阴虚津枯型及脾肾阳虚型易出现便秘。便秘出现的基本机理是津液不足,水少舟停, 或气阳虚衰,无力推动所致,因热邪内郁所致便秘者偶见。 瘀血内结型食道癌便秘表现如何,怎样治疗? 瘀血内结是食道癌常见证型,出现便秘症状者较多,临床表现为便秘,干结如球,腹胀,胸膈疼痛拒按,痛有定处,吞咽困难,甚则食水难下,面色晦暗,肌肤甲错枯燥,嗳气不适,舌暗或有瘀点、瘀斑,治疗当活血化瘀、理气通便,可用通幽汤加减,药用熟地、生地、当归、桃仁、红花、三棱、莪术、生牡蛎、杏仁、升麻、大黄、枳实、何首乌、肉苁蓉等,水煎服。本方活血化瘀,养血润燥,攻补兼施,祛邪而不伤正,扶正而不恋邪。若病人服药即吐,难以咽下者,可选用玉枢丹或六神丸含化,然后频频含服上方。 阴虚津枯型食道癌便秘表现如何, 怎样治疗? 阴虚津枯型食道癌最常见便秘,大便多干结,吞咽困难,食饮难下,甚则滴水难入,勉强下咽,疼痛明显,食后呕吐,呕吐物中夹有粘痰涎沫,口渴咽干,形体消瘦,五心烦热,潮热盗汗,舌质红绛少津,苔少或无。治疗以养阴润燥,增液通便为主,根据不同患者的不同情况,选用以下方法。 ①若阴虚为主,大便艰难不下,可用玄参、生地、麦冬各10～20克,水煎服,可少量频服,一天服完,大便不下者上方加元明粉10克,继服,以大便下为度。 ②若阴液枯竭,热邪仍盛的便秘,可用清营汤加减,方用水牛角粉20～30克(代犀角)、玄参、麦冬、生地、银花、连翘、黄连、竹叶、丹参等,本方清营热,养阴液,透热转气,为清养兼用之方,方中无通便之品,而整方确能使大便畅快,尤其对营热津枯者更为适用。有报道说,清营汤可用于癌性疼痛的治疗,有较好疗效。 ③若气津两虚,神疲乏力,大便干结者,可用生黄芪、玄参、麦冬、元参、白术、枳实、贝母、瓜蒌、桃仁、干蟾皮、党参等。 食道癌患者出现便秘如何用大黄? 大黄是中医治疗便秘的常用药物之一,具有泻热毒,破积滞,行瘀血功能,主要用于热结便秘。食道癌患者多是虚实兼挟之证,单纯热结者少见,常是阴虚者多,因此大黄并不适用阴虚便秘, 但可配合其它药物用,如增液承气汤就是由大黄、甘草、芒硝、元参、麦冬、生地组成,具有增液生津,通下导便作用。如果食道癌患者腹胀明显,便秘不下为主要痛苦,可用生大黄泡水代茶饮用,但是便下即停服,不可久服,否则犯虚虚之戒,使患者健康状况更差。 食道癌脾肾阳虚型便秘临床表现如何 ,怎样治疗? 脾为土脏,肾为水火之脏,脾土得肾阳的温煦方能运化正常。一般来说,脾肾阳虚多见大便稀溏或五更泻泄,但是脾肾阳虚也可出现便秘,在食道癌患者可大便干结,小便不利或清长,脘腹冷痛、喜暖喜按,饮食难下,气短懒言,畏寒肢冷,下肢浮肿,舌淡胖有齿痕,舌苔薄白。脾肾阳虚之大便秘结是由于阳气不足,不能温化,肠道推动无力所致,多表现为大便初硬后溏,排出艰难 ,治疗当温补脾肾之阳,益气通便,可用五噎丸加减,药用附子、干姜、肉桂、吴萸、细辛、人参、白术、砂仁、白芍、陈皮、肉苁蓉、当归、何首乌等。也可用精硫黄0.5～1克,研细末 ,冲服。硫黄大辛大热,为“火中精”,具有温阳通便之功,但性烈有毒,用时慎重,最好在中医师指导下服用。
我还是建议手术治疗，如果可以耐受手术的话。可以来找我。
对于食管癌的治疗，我们主要是根据，食管癌的分早中晚，来进行不同的治疗方法的。早期因为肿瘤主要是位于粘膜层内，这个时候，肿瘤侵犯还不是很深，有时直接用腔镜下拨出内膜，或者是把内膜切掉，就可以达到非常好的治疗效果，但是对于那些超出粘膜层下面的肿瘤，主要还是选择外科手术的治疗，术后必要时根据肿瘤的侵犯情况，再配合放疗或者是化疗。对于一些中期以后的肿瘤，还是强调以手术为主的综合治疗，就是说可以做一种术前放化疗。然后肿瘤缩小一些再给予手术，或者直接手术之后再给予放化疗。目前主要的治疗方式，还是手术和放化疗。在肿瘤晚期的时候，可能做不了手术的，就会单纯的放疗，或者是化疗，或者是结合放化疗的治疗手段。目前一些新的像靶向治疗在食管癌里面暂时还不是很成熟，尚在实验阶段。
单细胞测序分析CD45+的细胞（免疫细胞）→利用经典标记对免疫细胞注释，研究免疫细胞的成分差异→阐明免疫细胞改变的分子机制→研究免疫细胞TCR序列的变化，克隆性，说明起源问题→研究髓系细胞，TAMs（肿瘤相关巨噬细胞），WCGNA研究细胞分子特征→细胞间相互作用（scTHI）
我们获得了一个详细的单细胞分辨率的食管鳞状细胞癌（ESCC）免疫细胞图谱。阐述了哪些免疫细胞处于休眠状态，哪些免疫细胞处于增值状态，以及这些细胞与免疫抑制之间的关系。
①食管癌在组织学上可分为两个亚型：腺癌（EAC）和鳞状细胞癌（ESCC）。食管鳞癌是食管癌的主要亚型，约占全世界食管癌的90% ②最近，PD-1抗体用于晚期食管癌一线化疗失败的患者显示，与化疗相比，总体生存率只有中度的改善。 ③我们用高维（high-dimensional）scRNA序列分析了从七个切除的食管鳞癌肿瘤及其邻近组织中分离的总免疫细胞。同时进行T细胞受体（TCR）测序，以获得T细胞克隆性的信息 ④相较于癌旁正常组织，肿瘤组织T细胞明显扩增。 ⑤我们在这些肿瘤中发现了耗尽的T细胞、耗尽的NK细胞、调节性T（Treg）细胞、交替激活的巨噬细胞（M2）和耐受性树突状细胞（tDCs），表明ESCC中 存在炎症但免疫抑制的TME 。 ⑥我们鉴定出了一个与预后相关的基因集
①我们分析了从7对新鲜、手术切除的肿瘤和ESCC邻近组织中分离出CD45+细胞进行单细胞测序。过滤后，共80787个细胞（每个样品3248-9078），中位基因数1170个。 ②我们将所有样本的单细胞数据进行标准化和汇总，并进行无监督聚类以识别可区分的群体，用的是Seuratv3.0 ③我们利用典型标记对这些细胞进行了注释；这些细胞类型的经典标记物的表达与注释一致
④我们发现肿瘤中的t细胞和单核/巨噬细胞增多。与此相反，B细胞和NK细胞的百分率降低
（S133、S134和S150）--在这些肿瘤中，T细胞所占的比例不到总细胞的2%。 （S135、S149、S158、S159）--这些肿瘤中，免疫谱在PCA中呈现显著变化，其中6–12%的细胞是T细胞。
①T细胞和NK细胞是TME中主要的细胞毒性免疫细胞，我们对来自所有样本的T细胞和NK细胞进行无监督聚类，我们鉴定了6个CD4 T细胞簇，7个CD8 T细胞簇，1个CD4和CD8双阴性T细胞簇和3个NK细胞簇
②在T细胞中，我们使用已知的功能性标记来提示CD4 T细胞群，包括天真、记忆、效应、耗尽的T细胞和Tregs。这些标记物还鉴定了CD8T细胞群，包括记忆、效应、细胞毒性和耗尽的T细胞。
④我们进一步分析了与GFBP2、LAG3和FOXP37表达高度相关的基因。前50个基因用于细胞毒性、衰竭和Treg的分配。然后我们使用这些特征分析T细胞簇，发现富集分数与公布的特征一致。 ⑤CD4群体中存在着谱系联系，exhaustion和Treg评分的可视化证实了这两个簇之间的重叠 ⑥细胞毒性和耗尽的CD8 T细胞都表达许多效应分子，如GnY和GZMH，而耗尽的DCD8 T细胞表达的IFNG水平高于细胞毒性细胞（图2f），这表明耗尽的T细胞仍表达高水平的某些效应分子并试图对肿瘤细胞作出反应； 这些结果提示CD8-C5-CCL5处于衰竭早期，CD8-C7-TIGIT处于衰竭期，CD8-C6-STMN1可能是CD8-C5-CCL5与CD8-C7-TIGIT的过渡期。
①我们比较了肿瘤和邻近组织中的T细胞簇。CD45+细胞中的 （Treg cluster CD4-C6-FOXP3） and （exhausted CD4 T cells CD4-C5-STMN1 ）的百分比与匹配的邻近组织相比显著增加； 流式细胞术也证实了在ESCC肿瘤中Tregs的富集。 同样，耗尽的cd8t细胞在肿瘤中富集。
②在ESCC中，PD1在CD8 T细胞中的表达一直较高（图3f）。肿瘤组织中Tregs和耗尽的DCD4和CD8 T细胞显著增加表明存在免疫抑制环境 ③我们还观察到，与匹配的邻近组织相比，肿瘤组织中的NK细胞显著减少； NK-C1-NCR3表达高水平的NCR3、CD266、NKG7和LAMP1（图3h）。 相反，NK-C3-KLRC1和NK-C2-STMN1簇高水平表达KLRC1和ITGA1抑制性受体（图3h）。 流式细胞术分析证实，与邻近组织相比，ESCC中NKG2A（KLRC1）在NK细胞中的表达增加（图3i）。事实上，NK-C3-KLRC1和NK-C2-STMN1的细胞毒性分数极低；相反，衰竭分数升高（图3j），这表明在ESCC中NK细胞不足，功能受损
①根据TCR结果我们共观察到15654个独特的tcr序列。观察到克隆扩展，克隆大小从2到2600（图4a）。 如预期的那样，患者之间没有发现共享克隆。与其他癌症类型的研究一致，大多数TCR是独特的。然而，TCR基因型的组成在患者中是高度可变的
②S149和S150肿瘤中有65%和68%的T细胞具有两个以上细胞共用的TCR，这表明这些肿瘤中T细胞的高度克隆性扩增（图4b）。与匹配的邻近组织相比，7名患者的肿瘤中有4人的扩增克隆数增加。
④CD8 T细胞的克隆性细胞明显多于CD4 T细胞，并且幼稚的CD4-C1-CCR7簇显示出非常有限的克隆性扩增（图4d）。 ⑤CD8-C1-NKG7是CD8 T细胞中的细胞毒性簇，在邻近组织中具有较高的频率，在邻近组织中也显示出比肿瘤组织中更高的克隆扩增（图4e）。
⑥然而，与邻近组织相比，肿瘤中的Tregs克隆数增加（图4f），这表明特异性克隆细胞的扩张可能是肿瘤中Tregs高百分比的原因。 ⑦我们在CD4细胞的所有簇（包括Tregs）和CD8细胞的所有簇（C2除外）中发现了TCR序列的共享（图4g，h） ⑧CD8-C7-TIGIT与CD8-C5-CCL5和CD8-C6-STMN1共有的克隆数分别为166（9.0%）和156（8.4%）（图4i）。 ⑨Treg簇CD4-C6-FOXP3在肿瘤中也有相同的趋势，与CD4-C1-CCR7共有的克隆型占14.4%，在邻近组织中占40.7%（图4j和补充图8c）
①接下来，我们对髓系细胞进行无监督聚类。十四个簇被鉴定，包括9簇单细胞/巨噬细胞和5簇树突状细胞（图5a）。 ②利用已发表的信号特征：单核细胞（Mono）、经典活化巨噬细胞（M1）、交替活化巨噬细胞（M2）和髓源性抑制细胞（MDSCs）； ③我们使用Monocle，一种无监督的推断方法，来构建细胞转化的潜在发展轨迹。另一种算法Slingshot的结果（s9b）； 巨噬细胞中M1和M2信号之间的显著相关性（补充图。9c），表明ESCC中存在一个复杂的巨噬细胞极化过程，这与其他研究一致 Mono-C1-VCAN显示出强大的单核细胞信号（图5b）。
④我们用wgcna对单核/巨噬细胞进行加权相关网络分析 我们发现绿松石模块与单核细胞簇、单核细胞C1-VCAN和单核细胞C2-IL1B正相关，与M2簇宏C3-CSF1和MDSC簇MDSC-C1-C1QC、MDSC-C2-APOE负相关（图5d，e）;我们进一步分析了这个模块中的基因以及它们与Mono-C1-VCAN的关联（图5f），以选择最相关的前50个基因，形成一个特征集； 有趣的是，这一特征与ESCC（图5g）以及宫颈鳞状细胞癌和肺鳞状细胞癌（补充图9g）的高无进展生存率密切相关，这表明这一特征可作为ESCC和其他组织鳞状细胞癌的预后生物标志物。
①五个DC簇表达热图（图6a）;DC-C3-LAMP3癌旁组织中富集（图6b）。
②发现LAMP3+DC与其他树突状细胞亚群相比具有更高的活性和迁移能力，同时其还富集到了耐受性特征（图6c）
④流式显示：LAMP3+DC表达的CD83、CCR7和PDL1明显高于LAMP3 DC（图6e，f）、提示LAMP3+DCs的成熟、迁移和调控能力。 ⑤多色ihc染色也证实了肿瘤组织中CD11C+LAMP3+PDL1+IDO+DCs的存在（图6g）。 ⑥我们进一步用IFNγ和LPS治疗dc。有趣的是，我们发现IFNγ和lps刺激诱导dc表达PDL1和IDO（图6h）； 当DCs与CD4+CD45RA+幼稚T细胞共培养时，诱导FOXP3表达的能力增强（图6i）。 提示IFNγ和LPS可能在体外诱导耐受性DCs
①我们基于已知配体-受体对在任何两种肿瘤浸润性免疫细胞中的共同表达，对潜在的细胞-细胞相互作用进行了系统分析 scTHI--另一种广泛使用的方法--分析巨噬细胞和Tregs的相互作用 ②我们发现巨噬细胞和Tregs之间TNF-TNFSF1B、CCL4-CCR8和IL-1β-IL1R2的相互作用具有较高的相互作用得分，并且Tregs在肿瘤中表达高水平的TNFSF1B、CCR8和IL1R2（图7a–c）
③肿瘤中分离的树突状细胞中IL1R2的表达高于癌旁组织，多色IHC也证实了IL1R2在Tregs中的表达。（图7d）
通过scrna-seq分析巨噬细胞中LILRB1的表达，并通过FACS进一步验证。我们发现，与邻近组织相比，ESCC中巨噬细胞中LILRB1的表达增加（图7h，i和补充图7）。
①在这里，我们结合了深链RNA序列和TCR序列，并阐明了整个免疫景观，包括ESCC和邻近组织中固有的和适应性的免疫细胞图谱；描述了ESCC免疫细胞的分类、比例、功能变化及机制、细胞间相互作用 ②ESCC富含免疫抑制细胞：Tregs, exhausted CD8 T,CD4 T and NK cells, M2 macrophages, and tDCs；促进免疫逃避和肿瘤进展 ③我们证明耗尽的CD4、CD8 T细胞和NK细胞是主要的肿瘤内增殖免疫细胞室，尽管这些细胞富含耗尽基因。 与耗尽簇（CD8-C7-TIGIT）相比，预耗尽簇CD8-C5-CCL5和CD8-C6-STMN1可能是更好的免疫治疗靶点，因为耗尽簇处于永久性和不易逆转的耗尽阶段，由于其表观遗传变化，使其更耐检查点抑制。 ④发现肿瘤浸润的NK细胞不仅在ESCC中普遍减少，而且还表达高水平的检查点分子，包括NKG2A和CD49d，提示处于耗尽状态；据报道，抗NKG2A和抗CD49d是促进抗肿瘤活性的检查点抑制剂 ⑤T细胞的TCR序列共享，提示T细胞启动后有着广泛的分化。 ⑥衰竭的CD8 T细胞（CD8-C7-TIGIT）与其他CD8簇具有更高比例的共享克隆，尤其是衰竭前簇CD8-C5-CCL5和CD8-C6-STMN1，这与这些簇的相关状态和多步衰竭假说相一致。 相反，CD8-C1-NKG7是细胞毒性最强的CD8 T细胞簇，在肿瘤中克隆性T细胞明显减少 最近在膀胱癌中也有类似的发现，细胞毒性cd8t细胞（FGFBP2+clusterin）在正常组织中的克隆性比在膀胱癌中的克隆性强。 另一方面，食管细胞毒性细胞的克隆扩增可能是由于食管中的非肿瘤抗原的偶然暴露，并且相邻组织中的大多数CD8-C1-NKG7细胞表达低水平的CD39，这表明它们是旁观者CD8 T细胞。 幼稚的CD8 T细胞可能不常渗入食管或被局部环境激活，因此不太可能被检测为独立的群体。 ⑦单核细胞/巨噬细胞在肿瘤中的关键作用已经在肝癌、乳腺癌和肺癌中用scRNA-seq进行了描述； 通常，巨噬细胞的活化分为炎症前M1状态或与炎症溶解相关的M2状态； 我们的分析显示单核细胞/巨噬细胞存在于单核细胞、M1和M2状态的光谱中；M1相关基因和M2相关基因经常在同一细胞中共同表达；M1和M2信号的共存表明TAMs比经典的M1/M2模型更复杂，这种现象在乳腺癌和肝癌中也有发现 当使用WGCNA分析单核/巨噬细胞的基因相关性时，我们发现一组基因与单核细胞呈正相关，在ESCC和其它类似的病理类型肿瘤有着较好的预测预后能力 ⑧cDC2特别参与MHCⅡ类介导的抗原提呈和cd4t的活化和扩增细胞.cDC1也是抗肿瘤免疫所必需的。最近，一些文献报道了TME中的DCs，发现大多数与我们的数据一致。 比较了不同癌肿之间的这种差异，对分析出来的细胞做了些功能分析。 ⑨我们的工作进一步证实了树突状细胞与巨噬细胞之间的相互作用； 在Treg上表达的IL1R2可能通过阻断IL1β依赖性效应T细胞的活化而增强Treg的功能; IL1R2在活化的肿瘤树突状细胞上表达，并与肺腺癌的预后不良相关。 我们的研究还表明，Tregs可能通过hhla-A、B、C和LILRB1相互作用调节巨噬细胞的功能。 研究TAMs中这种免疫抑制MHC类I-LILRB1信号轴的机制将有助于开发恢复巨噬细胞功能的疗法。 总之，我们的ESCC和邻近组织免疫细胞的转录图谱提供了一个了解免疫状态的框架，并揭示了ESCC环境中免疫细胞的动态特性。此外，我们还从多个方面阐述了食管鳞癌的免疫抑制状态，这些都是食管鳞癌及其他癌症免疫治疗的潜在新靶点
TCR测序方法简介 TCR测序干货 WGCNA
王献增副院长致辞: 尊敬的秦院长，各位领导，各位专家，各位同仁： 大家好！ 在这辞旧迎新之际，我们齐聚一堂，在这里召开“第二届食管癌研讨会 暨林州市红旗渠食管癌论坛”，我感到无比高兴，我谨代表院党委对数年奋战在食管癌诊治一线的各位同仁表示深切的慰问，对多年来取得的辉煌成绩表示衷心祝贺！ 在食管癌方面，我们已经积累了数十万病例的诊治经验。搭建这个平台，就是让各位专家将数十年来在食管癌领域诊治方面的宝贵经验广泛交流，共同提高。其宗旨就是“传承食管癌文化，弘扬林医精神，再塑‘国家食管癌诊治示范基地’新形象”，达到“依托品牌，宣传科室，推介专家，带动新人，承上启下，惠及病患”的目的。 在此，我也向参会的院领导在百忙中抽出时间莅临会场，现场指导表示衷心感谢，向多年来支持食管癌相关学科发展的各位同仁表示深深谢意！ 食管癌诊治取得的成就，离不开院党委的大力支持，离不开各学科的积极配合。在科技迅猛发展的今天，成绩的背后，该学科仍有许多未知，仍存在一定的壁垒，仍需要我们相互学习，相互探索，相互配合。应推崇综合治疗以及循证医学的理念，方可再造佳绩。 今天，我们综合了全院食管癌治疗的多个学科专家学者，可谓群英荟萃，我们有理由相信，通过这次会议，将会喷发出极大的学术热情，会使我们在食管癌诊治方面更上一层楼。 最后，预祝会议圆满成功。会议议程与专家风采: 胸二科王太增主任:林州市人民医院食管癌研究历程 核磁室李东启主任:肝脏转移的MRI表现 胸一科主任李海峰:食管癌围手术期营养代谢的时机与策略 胸一科申成玉主治医师:胸腔镜治疗食管癌的优势胸三科杨翠林护士长:食管癌术后呼吸衰竭的护理 放射科申斌主任:食管癌支架置入术后并发症分析化疗科主任王画普:食管癌的综合治疗与合理用药 王付增副主任医师:吻合器粘膜吻合技术 刘海峰副主任医师:食管癌外科治疗进展杨增周主任:早期食管癌的诊断治疗 赵永福主任:食管癌的诊断与放射治疗新进展 CT室主任石海斌:CT在食管癌诊治中的作用 放疗一科主任宋祥玉:食管癌的放射治疗 王成吉主任:食管癌放疗后复发的外科治疗 CT室郭胜男主治医师:食管癌淋巴结CT分区王献增副院长最后作总结发言:这次会议的召开，汇聚了各位专家的心血与智慧，圆满完成了会议议程，达到了预期目的，体现了“团结协作，无私奉献”的红旗渠精神；同时，又是“博爱，敬业，奉献，进取”的林医精神的集中体现。这次会议，锻炼了队伍，体现了创新，展现了风采，为我们奉送了一份营养丰富的大餐，将使我院治疗食管癌再上一个新的台阶。为我院承担国家食管癌会议奠定了良好的基础。 感谢会议秘书处的申成玉，常俊华，付广华，郝增辉四位医生的辛勤付出。 会议花絮:王献增综述总结，时间及能力有限，如有不当之处请联系我。 2018.01.08
我从不相信有任何药可治食道癌.不吃以下食物,油榨,腌制,可乐,牛奶,糖,汉堡,坚果,豆类,荤菜.多喝水日3000毫升,多吃青菜.自会慢慢好转,乃至康复.
食 管 癌——治疗一、基本治疗方案目前对食管癌的治疗，首选处科手术，其次还包括抗癌的化学药物的治疗、放射治疗、内镜下治疗、生物治疗和中医治疗等。其最终的治疗效果取决于上述治疗方法的合理综合运用。其规范的综合治疗方案为：0期，病变范围限于粘膜，无转移；Ⅰ期，病变长度＜3cm，侵及粘膜下层，无转移；Ⅱ期，病变长度3～5cm，侵及肌层，无转移者，以手术为首选；中医宜根据辨证予以中药治疗。Ⅲ期，病变长度＞5cm，侵及肌层及外层，有区域淋巴结转移，可予放射治疗及中医辨证论治。Ⅳ期，病变长度＞5cm，明显外侵，伴转移者，可以化学治疗、中医治疗、免疫治疗为主。中西医综合治疗食管癌是我国肿瘤研究的成就，从辨证论治出发，调整机体功能，改善症状，减轻放、化疗毒副反应，综合了整体与局部结合的观点，把扶正祛邪、攻与补相结合，取长补短，提高了临床疗效。二、中医治疗（一）辨病治疗胡光慈编著的《杂论证治新义》对噎膈一病的治疗结语中指出："宋以前医籍皆以病原于七情忧患，故主以调和气血为治，后世医家则多责之气血亏损，津液枯干，故宜补益气血、滋血润燥为主，痰结者并清痰散结，血结者宜滋血破瘀为治。"从这里可以看出古人对噎膈治疗的概貌，也启示我们历代医家在医疗实践中对本病的治法不断修正、补充、发展。我们通过学习历代众多医家的研究成果，结合临床实践，针对本病病机之根本为阳气虚弱，机体功能下降，主强治疗宜温阳益气，扶助正气，提高机体功能，所以治疗主方要体现这一中医治疗原则。食管癌主方：人参6g，黄芪15g，桂枝20g，薤白15g，炮附子30～60g，（先煎），女贞子15g，川芎12g，鸡血藤20g，当归12g，鹿茸3g，北豆根20g，鸡内金10g。(二)辨证分型治疗关于食管癌的分证各有不同，立法用药亦随之而异。但治法总不离疏肝理气、降逆化瘀、活血化瘀、软坚散结、扶正培本、生津润燥、清热解毒、抗癌止痛、温阳益气等。1.气滞型主证：早期食管癌的表现，无明显吞咽困难，只为吞咽时感食管内挡噎、异物感或灼痛，胸郁闷不适及背部沉紧感，时隐时沉的吞咽不利感。X线检查主要为早期食管癌的病变。舌质淡黯，舌苔薄白，脉弦细。治法：疏肝理气，温阳益气，扶正抑瘤。方药：食管癌主方合逍遥散加减。即食管癌主方加柴胡15g、白术15g、白芍15g、当归15g、茯苓15g、陈皮10g、生姜3片、大枣5枚。 2.梗噎型主证：症状单纯，轻度梗噎或吞咽不利。X线检查多属早、中期髓质型、蕈伞型食管癌。舌质黯青，苔黄白，脉弦细。治法：抗癌散结，理气降逆，温阳扶正。方药：食管癌主方选加：枳实10g、苏梗10g、枳壳10g、厚朴10g、佛手10g、木香10g、郁金10g、香附10g、旋覆花10g、代赭石30g等。3.血瘀型主证：症状除吞咽不利外，以胸痛为主，且痛有定外，或伴口臭等。X线检查多为中、晚期髓质型、溃疡型食管癌。舌质紫黯，舌面有瘀点或瘀斑，舌下静脉怒张，舌苔黄腻，脉沉涩而紧。治法：活血化瘀，温阳益气，通经止痛。方药：食管癌主方结合活血化瘀法，即食管癌主方选加归尾10g、赤芍10g、刘寄奴10g、红花10g、急性子10g、乳香10g、没药10g、三七5g、威灵仙10g等。若为溃疡型疼痛明显或呕血者，可加用腐植酸制剂口服或静脉注射；也可以用白及粉60g、三七粉15g、元胡粉30g、普鲁卡因0.5,加氢氧化铝凝胶混匀，使呈半糊状，头低位分次口服。还可加云南白药、止血粉及其他止血、镇痛剂等。4.痰湿型主证：吞咽困难，痰涎壅盛，胸咽噎塞，膈肋胀满，浊气上逆，舌质黯青，舌体肥大，周有齿印，苔白厚腻多津，脉象滑细。X线检查多为晚期髓质型、缩窄型食管癌。治法：温阳益气，健脾祛湿，降逆化瘀。方药：食管癌主方选加薏苡仁30g、山药20g、扁豆15g、白蔻仁10g、橘红10g、半夏10g、旋覆花10g、代赭石30g等。5.阴枯阳衰主证：病期已晚，咽下困难，近于梗阻，呕恶气逆，形体消瘦，气短乏力，烦热唇燥，大便干如粪，舌质黯绛，瘦小，少苔乏津或无苔，也有苔黄黑干而裂者，脉细数或沉细无力。治法：滋阴补阳，益气养血。方药：食管癌主方可加倍用量，再选加白术15g，白扁豆30g、麦冬15g、山茱萸10g、枸杞子15g、何首乌15g、仙灵脾15g。偏阴虚者重用沙参15g、天冬15g、天花粉15g、石斛10g、玉竹10g、玄参15g、生地10g；大便干加火麻仁10g及郁李仁、大黄适量，减少食管癌主方温阳燥烈药物及其剂量。提高以上各证疗效，尽快减轻症状，可配合以下抗癌腐癌药物：硇砂10g，硼砂20g，火硝20g，沉香10g，冰片5g，礞石10g。鸡内金10g，蜈蚣5g。用法：共研细末，每次1~1.5g含化缓咽，共服2~4或4~8次，根据病情轻重不同而选择，一般应用3~5天，或间隔应用。6.壅阻型主证：咽下完全梗阻或近于全梗阻，干呕或伴口吐粘液，舌绛干裂或黯淡胖太多津，苔黄而厚腻或少苔，脉沉细。治法：开道通管，疏壅透膈。方药：牛黄1.5g，白术1.5g，沉香2g，礞石2g，硇石9g，火硝20g，月石20g，冰片6g。共研细末，每次1含服，每日5~10次。上述我们辨证分型的目的是为了临床用药的参考。在一个病人身上，可能以某一证型为主，某一证型为辅；也可能同时几个证型都存在；可能这一段时间是这一证型，而到另一段时间又是那一证型。故必须根据不同的病人，不同阶段的不同主症，有的放矢地灵活组方用药。(三)单方验方治疗食管癌的单方验方，我国民间已积累了许多，在食管癌的治疗方面具有一定参考价值。1.冬凌草50~90g，沸水落石出冲泡加白糖，每天1次口服，2~3个月为一疗程。2.斑蝥1只，鸡蛋1只。先将斑蝥塞进鸡蛋内，蒸煮半小时，取出鸡蛋中斑蝥服食，每日1只。3.斑蝥2g，蜈蚣10条，大枣（去核）12g，山豆根炭125g，广木香9g，白糖75g。共为细粉，炼蜜为丸，每丸重9g，每次服1丸，每日3次。4.硇砂10g，月石30g，朴硝20g，青黛20g，冰片5g，木香1g。共研细末，每次服3，每日2次。功能：软坚散结，适用于食管癌梗阻严重者。5.开关散 牛黄2g，麝香2g，海南沉香10g，礞石10g，硇砂10g，火硝30g，月石40g，冰片10g。共研细粉，装瓶密封。每次1.5g含服，每日5~10次。6.治膈散 山慈菇200g，硼砂80g，硇砂20g，三七20g，冰片30g，沉香50g。共研细粉，每次10g，每日4次，10天为一疗程，后改为每次服10g，每日2次，以巩固疗效。7.消炎解痉液 0.25%普鲁卡因200ml，疏酸庆大霉素32万U，麻黄素针60mg，山莨菪碱针10mg，地塞米松针10~15mg或泼尼松80mg研细面。上药共混匀，每次徐徐咽下3~5ml，每日10次。（四）中成药1.冬凌草制剂 冬凌草片，每次口服4片，每天3次，2~3个月为一疗程。或冬凌草糖浆，每次口服30ml，每日3次，2~3个月为一疗程。2.斑蝥素片 每次0.25~0.5mg，每日口服3次，240mg为一疗程。3.消癌平注射液 100ml，加入5%葡萄糖注射液中静脉滴注，每日1次，3 500~4 500ml为一疗程。4.华蟾素针剂 每次4ml，每日2次，肌内注射，1~2个月为一疗程；10~20ml加入5%葡萄糖注射液100ml静脉滴注，每日1次，30天为一疗程。5.平消胶囊 每次口服4~8粒，每日3次。6.古稀胶囊 每次口服2~4粒，每日3次。（五）针灸治疗1.针刺基本方 主穴为天鼎、天突、膻中、上脘、内关、足三里、膈俞、合谷，病灶在颈段者加配穴扶突、气舍、大杼、风门等；在中段者加配穴气户、俞府、承满、肺俞、心俞等。在下段者加配穴期门、不容、承满、梁门等。如兼胸骨后痛配华盖，背痛配外关、后溪。进食困难或滴水不入者重刺内关，针锋向上，使针感达到胸部。食管内出血者，配尺泽、列缺、曲泽。痰多者炙大椎、中府、中魁，针大杼、风门、肺俞、列缺、合谷。 2.耳针 耳部压痛点耳诊测定敏感点，对症取穴。3.炙法与汤药合用 有学者给患者治以旋覆代赭汤加减时，配合以足三里隔姜炙，曾使1例患者宽0.7cm、长8cm的癌灶消失。4.激光血卟啉治癌机体表穴位照射 取穴膻中、巨阙、膈俞、中脘、足三里，每穴射5分钟，每周照1次，6次为一疗程。据乔玉珍报道，共治疗食管癌5例，显效3例，好转1例，无效1例。 （六）外治法1.蟾酥膏：由蟾酥、生川乌、七叶一枝花、红花、莪术、冰片等20种中药制成，外观如橡皮膏，镇痛有效率可达92.5%。2.金仙膏：《理渝骈文》方是由苍术、白术、川乌、生半夏、生大黄、生五灵脂、生延胡索、枳实、当归、黄芩、巴亚仁、莪术、三棱、连翘、防风、芫花、大等百余种中药制成的药膏，按病情分次摊膏纸上，外敷病处或选穴外贴。可用于噎膈、反胃等多种病证。3.复方荆芥液：荆芥、川乌各20g，川芎、荜茇各30g，马钱子15g。研成细末，浸泡于75%酒精400ml内密闭7日，滤渣取液再放入冰片粉15g备用。用棉球蘸药液涂抹痛处，每日1次或数次，用药后一般10~20分钟可收到止痛效果。（七）推拿疗法早在1959年，黑龙江省就有人采用推拿疗法治疗2例食管癌，使其症状缓解。自此以后，各地已先后将推拿疗法作为一种辅助治疗的手段运用于食管癌。一般认为推拿背部腧穴可以减轻胸背部的癌性疼痛；揉按合谷、足三里、涌泉可以扶正固本，启膈降逆。（八）气功疗法浙江中医学院附属医院刘鲁明等，将包括食道癌在内的恶性肿瘤患者82人分为两组，一组施以单纯化疗，一组施以气功加化疗。经对比观察，习练周天命门功和铜钟功的40名患者，其生存期免疫功能均优于单纯采用化学疗法的42名患者。上海气功研究所也证实：以气功治疗食管癌、胃癌患者，可明显提高1年及5年生存率。（九）饮食调养1.韭汁牛乳饮：韭汁、牛乳。有痰加姜汁；血膈去牛乳加陈酒。2.膈噎膏：人参、牛乳、蔗汁、梨汁、芦根汁、龙眼肉汁、姜汁、人乳。熬膏，密收。3.猪脂方：杏仁、松子仁、白蜜、橘饼各125g，猪脂熬净1杯，同捣食之，有填精血，滋枯燥之功。4.五汁饮：梨汁、藕汁、蔗汁，韭菜汁、乳汁（人乳或牛乳）不拘量兑服。5.白鹅（鸭）血：一人将白鹅或白鸭两翅及两腿紧握，另一人将其颈宰断即令患者口含其颈部、饮其热血，五七日一次。6.放疗患者食疗方：食管癌患者在接受放射治疗时若出现阴液灼伤，热毒亢毒征象，可及时给予甘寒之饮食作辅助性治疗。 常用食品有西瓜、生梨、荸荠、鲜藕、金银花露等。7.化疗患者食疗方：化疗病人，当骨髓受到抑制，白细胞和血小板计数下降时，可食甘温补脾养血之品，如扁豆、山药、红枣、桂圆肉、阿胶、鹿角胶、冬虫夏草炖老鸭等。以促进骨髓功能恢复，改善造血功能或预防因白细胞降低、血小板减少而产生的各种合并症。三、手术治疗（一）手术适应证食管癌诊断一旦成立，且病变较局限，无远处转移，尤其是中下段食管癌，应首先考虑外科手术治疗。（二）手术禁忌证 1.疑有锁骨上淋巴结转移、肝转移、肺转移、腹腔转移并有腹水等广泛转移者。2.癌肿已直接侵入邻近脏器，且已形成食管一气管瘘、肺脓肿、纵隔炎症、脓肿等合并症者。出现恶病质，特别是高度恶病质者。患者身体重要脏器如心、肺、肾有疾病及其功能严重损害，病人不能耐受手术者。但有学者认为，对单纯伴有的冠心病、心律不齐、无频发性早搏及心房纤颤、无心力衰竭、各项心功能检查在正常范围或轻度异常者，并非手术禁忌证，但有心脏瓣膜病及曾患心肌梗死者，术后有发生脑栓塞的危险者，仍属于手术禁忌证。（三）手术类型根据病人具体情况，可采用以下3种手术类型。1.癌肿根治性切除手术 于食管癌比较局限时，可以切除瘤体及其淋巴结，进行根治性切除手术。2.姑息性切除手术 食管癌已属晚期，与周围器官粘连较紧密，或已有广泛淋巴结转移，虽瘤体可以切除，但其周围淋巴结转移及浸润往往不能彻底清除，只能做姑息切除手术。3.减轻症状手术 由于癌肿不能切除，病人又不能进食者，可施行胃食管转流术、食管-空肠（或结肠）-胃吻合术，食管腔内塑料管内置术，对一般情况更差者。可行胃空肠造瘘术，从而达到病人能进食、补充营养、延长生命的目的。（四）手术方法1.颈段食管癌 先从颈部切开探查与切除，癌切除后，可利用颈部皮片或结肠或空肠做食管成形术；现在有学者切除癌肿后，上下充分游离食管，必要时头颈外科、胸外科配合，行食管端吻合术。如果病人情况不佳，可行分期手术，也可横断气管，使手术视野开阔，游离食管就比较容易，此时可做全食管切除后，行胃咽吻合术，将胃吻合于环咽肌平面以上的食管开口部。2.胸上段食管癌 第一种经左胸手术，手术切口位于第5肋间。首先探查食管肿瘤是否可以切除，如可切除时首先开始腹部操作，打开膈肌探查肝脏、腹腔淋巴结有无转移，然后将胃游离，提入胸腔经贲门水平离断食管，再将食管瘤体自膈剥离，将食管经主动脉后方提到胸膜顶部，再送至颈部切口做食管胃底部端侧吻合。第二种是经右胸手术，左侧卧位，稍向后仰300，于第5肋间后外侧切口切断奇静脉，在肺门后显露食管，进行癌肿剥离，决定能否切除。然后或另一组手术者同时行腹部手术。待游离食管，扩大膈肌裂孔，送入胸腔，并经食管床送至左颈部切口，与食管上部进行吻合。3.胸中段食管癌 经左胸手术，癌肿切除后，于主动脉弓上或胸膜顶部进行食管胃吻合手术。现在为了达到根治目的，一般倾向于食管胃在颈部行吻合术。4.胸下段食管癌 经左胸手术，癌肿切除后，于主动脉弓下方做食管胃吻合手术。现亦倾向于颈部行食管胃吻合术。 5.贲门癌 经左胸第6或7肋间切口，切除瘤体及近端胃体大部。行食管残胃端侧吻合手术。食管癌的切除长度，一般距肿瘤上下缘各5cm以上，包括食管周围结缔组织及肿大淋巴结亦也清扫。现在有学者研究：食管癌病人有部分沿粘膜下转移，甚或有第二原发癌；病理切片发现，食管各段癌灶以外发现其他段有癌者高达45%左右。故食管切除原则：不论食管癌发生于哪一段，均行食管次全切除，食管胃颈部吻合术。早期食管癌手术切除率可达100%，5年生存率可达90%左右，中晚期食管癌疗效都不高，5年生存率在30%左右。（五）手术与中医药配合1.术前应用扶正中药可改善病人的一般状况，有利于手术的顺利进行，如四君子汤、八珍汤、十全大补汤、保元汤、六味地黄汤等，再结合中医辨证加减，将提高手术切除率。有学者研究发现消化道肿瘤病人术前用黄芪注射液，能增强末梢血中白细胞总数及T淋巴细胞的活性，可增强患者抗感染能力和细胞免疫能力。2.活血中药和手术结合 上海医科大学华山医院林建华等，在题为"应用丹参改善食管、贲门癌手术后甲皱微循环与血液流变性"的论文中指出：如果在手术时并用丹参，可改善术后仍然存在的甲皱微循环及血粘度异常。经随机分组对比观察，发现加丹参组的血液流变性、全血还原粘度均有明显改善，与对照组相比，差异十分显著（P<0.01）。他们认为恶性肿瘤患者多有"血瘀证"，当患者的血液处于高凝状态时，血液中的有形成分便容易在癌灶和癌细胞周围聚集，从而导致癌灶增长、癌细胞转移。所以只要采取适当措施（例如丹参与手术并施）遏制血小板的异常凝集、改善微循环功能，就可以增强手术效果，在一定程度上预防癌变复发，提高生存率。另外，林氏还注意到使用丹参注射液（24g/日）并未增加手术后的出血机会，因此认为肿瘤手术并用丹参是有积极意义的，也是安全的。山东中医学大学附属医院的齐元富与上海中医药大学的钱伯文教授在《肿瘤血瘀证及活血化瘀治疗的现代研究进展》中，亦指出活血化瘀药物配合应用的必要性。3.中医药治疗术后虚弱证 术后患者多表现为气血双亏或气阴两伤，脾胃不和。用补益气血、健脾益肾中药可使机体免疫力得发恢复，改善症状。气血双亏者以补气养血为主，气阴两伤者以补气养阴为主，脾胃不和，以舒肝健脾和胃为主，常用方剂以八珍汤、六味地黄汤、逍遥散为主加减，根据我们现在的理论及实践认识，应以温阳益气的食管癌主方为主，随证加减，贯穿治疗的始终，一般2年左右。4.中医药治疗术后并发症 这是中西医结合治疗的又一热点。这方面的研究从20世纪80年代起进展较快，目前已形成两大特点：一是采用中医药治疗的并发症正在增多，二是治疗并发症的方法正在增多。以食管癌术后出现吻合口瘘的治疗为例。1991年，潘立群在《江苏中医》上发表了题为"食管癌术后颈部吻合口瘘的中医外治疗法"的文章，报道了根据不同病情，予以提毒祛腐、解毒填塞、发敛填塞等外治法使病人恢复经口饮食的经过，所治5例吻合口瘘，均在3周左右愈合。耿朝义在《中西医结合杂志》上发表了"白及糊剂内服20日，每日3次，每次10g，使2例均获痊愈"的经验。这些均说明了只要以科学的态度和方法继承发扬前人的医学遗产，就可以在食管癌术后并发症的治疗上取得突破性进展。目前，采用中医药治疗的术后并发症除了吻合口瘘，还有腹泻、反流性食管炎，呼吸道感染等。兹分述如下：（1）严重腹泻：食管癌切除术后肠功能紊乱而再现严重腹泻者，其发生率各家报道不一，低者9%，高者可达54%。按传统观点，多认为本症与迷走神经切断、胃泌素浓度增高有关。近年来有人提出系伪膜性肠炎所致，主张口服丙谷胺200~400mg，每日3次，但治疗效果并不理想。河北磁县人民医院张兴锐等以自拟方治疗此种腹泻30例，疗效甚佳，用药2天痊愈者10人，3天痊愈者15人，5天以上痊愈者5人。处方：防风9~15g，白芍12~20g，炒白术9~12g，陈皮6~9g，葛根15~30g，炒车前子10~20g（包），炙甘草6~9g。水煎可分数次温服，每日1剂。伴气虚脉弱甚者加黄芪、太子参；伴里寒肢凉、舌淡脉缓加干姜、肉桂；伴内热口干苦、大便臭秽脉数有力者加黄连；腹痛腹胀甚者加当归、木香；脱水、电解质失调严重者配合静脉输液。另据报道，术后腹泻者治以西洋参、黄连、生甘草各5g，煨葛根、黄芩、白头翁、秦皮、煨木香、扁豆衣各10g，水煎服，日1剂，效果亦佳。(2)反流性食管炎：因于热者治宜泄肝和胃，苦辛通降，可选用化肝煎、左金丸之类；因于寒者治宜疏肝和胃，运脾燥湿，可选用四逆散、胃苓汤、吴茱萸汤一类加减。（3）功能性胸胃排空障碍：多属于"饮停于胃"之呕吐范畴，可选用小半夏汤或承气类方。（4）手术后呼吸道感染：表现为咳嗽，治疗宜分证型择药施治。属于痰湿蕴肺者，治以宣肺化痰止咳，用杏苏散加减；属于阴虚肺燥者，治以养阴润肺止咳。用半夏厚朴汤加味；属于腑气上逆者，治以通腑宣肺止咳，用宣白承气汤化裁；属于肺络损伤者，治以行瘀止咳，用花蕊石散加味。四、放射治疗食管癌大部分是鳞状细胞癌，对放射线敏感，尤其是用于老年体弱的食管上1/3及中1/3癌灶不能手术者，则可能取得一定疗效。放疗采用60CO、直线加速器、感应加速器进行外照射，腔内照射较少应用。疗效与照射剂量不成正比，提高照射剂量并不能提高生存率，也不能降低复发率，且可增加组织损伤及照射并发症。（一）单纯放疗适用于手术禁忌而肿块尚局限，无极度吞咽困难，或颈部及胸上段食管癌手术困难且疗效欠佳者。剂量50Gy（5 000~7 000rad），剂量过小，复发率高，剂量过大则增加放射损伤。单纯放疗，生存1年者可达40%左右，生存3年者可达20%左右，生存5年者可达10%左右；颈、胸上段食管癌的疗效，优于中、下段者；病程越短，疗效越好。目前，国内已开展食管腔内137Cs治疗，作为外放疗的补充，可以减少复发，延长生存期。（二）放疗与手术配合可在手术前和（或）术后结合放疗。术前行胸部CT检查，如食管癌已外侵或与邻近器官粘连，手术不能彻底切除，而且手术有增加癌扩散和种植的危险，这时应先做术前放疗，可使瘤体缩小，外侵的癌组织退变软化，与邻近器官的癌性粘连转变为纤维性粘连而便于手术切除，局部的淋巴转移灶也可能消失。同时适量的放疗还可能使瘤体周围的淋巴管及小血管闭合，癌细胞的活力降低，从而减少手术导致癌症扩散和种植的危险。术后放疗的目的主要是消灭残存的癌细胞，减少复发和转移。对姑息性切除后肿瘤残留、术后病理报告食管残端癌、切缘距肿瘤甚近、肿瘤切除后估计可能有亚临床病灶残留者，应进行术后放疗。此类病人如不放疗，等到肿瘤复发后再治疗，预后极差。同于手术后残留肿瘤的血运差，如手术与放疗隔时间太长，则纤维组织增加，血运进一步障碍，对放疗的抗拒性增加。所以切口愈合后立即放疗，消灭亚临床灶，术后照射量为50～55Gy。（三）放疗与化疗配合越来越多的资料证明，化疗与放疗联合可有效控制原发灶及转移灶，并提出化疗药物有放疗增敏的作用，可产生协同杀伤瘤细胞的作用。 （四）腔内放疗食管原发病灶未能控制是放疗失败的主要原因，可能是由于腔内癌灶区放射剂量不足所致。由于心脏肺组织、脊髓等不能耐受更高剂量，制约了外照射剂量的增加。为了解决这方面的问题，近几年来食管腔内近距离放疗得到重视和发展。腔内放疗主要配合根治性外照射及原位癌的根治性放疗，有其治疗的适应证及禁忌证。腔内放疗的特点是局部剂量高，特别是近放射源处剂量很高，然后剂量骤然下降，以减少对食管周围正常组织的损伤。腔内放疗时间短，操作简便，定位准确。由于后装腔内放疗的放射源的物理特性，周围正常组织所受的放射量低，这种方法成为外照射对食管腔内肿瘤区域剂量不足的有效补充，能提高局部控制率，并且改善生存质量。对外放射后局部复发的食管癌，通过再次腔内后治疗，也能起到改善症状、延长生存期的姑息治疗作用。 （五）放疗与中医药配合中医学认为放射线损伤属于毒热伤阴，耗损正气，气血失调，脾胃不运，治疗时宜扶正培本，补法当先，佐以凉血滋阴、清热解毒药物，如以归脾丸、六味地黄汤、十全大补汤等加减调理。如出现白细胞下降或（和）血小板下降时，应多予补气健脾、滋补肝肾的中药，配合凉血药物，常用的药物有黄芪、党参、黄精、鸡血藤、枸杞子、菟丝子、紫河车、当归、虎杖、山萸肉、女贞子、茜草根、丹皮、白及等。 五、化学治疗近年来由于肿瘤基础理论及抗肿瘤药物作用机制的深入研究，新的抗肿瘤药物不断出现及治疗方法的不断改进，食管癌的化学治疗水平不断提高。已从姑息性治疗向根治性治疗方向发展，使中、晚期食管癌患者症状缓解，部分病人瘤体缩小，甚至消失，生存期明显延长。（一）化疗适应证1.不宜手术或放疗的各期食管癌病人；2.术前、放疗前化疗；3.手术或放疗后的巩固治疗及手术或放疗后复发的食管癌病人；4.大剂量放疗后局部病灶未能控制者；5.预计生存时间约8周，心、肝、肾、骨髓功能正常，能进半流质饮食者。（二）化疗禁忌证1.老年体衰或恶病质患者；2.心、肝、肾功能严重障碍，有感染发热、食管癌出血或食管穿孔者。3.骨髓功能低下，白细胞低于3.0×109/L，血小板低于50×109/L，严重贫血或有出血倾向者。（三）单药化疗20世纪80年代以前食管癌的化疗以单一药物为主，只用于无法手术和放疗的晚期病例。（四）联合化疗实验和临床研究证明，根据细胞生物学、细胞增殖动力学及临床药理学理论，选择两三种有效的、作用机理不同的、毒性有别的抗癌药物组成联合化疗方案治疗实体瘤，比单一化疗药物效果好。联合化疗不是药物的堆积或任意组合，要在一定的理论或实践的基础上进行前瞻性的研究，原则上选用那些单药应用时有效，作用机理不同，而毒性又不重叠的几种药物联合，才能达到预期的目的。 1.药物选择与剂量治疗食管癌有一定疗效的药物虽有十几种之多，但临床较好的只有博莱霉素（BLM）、平阳霉素（PYM）、顺铂（DDP）等，故常作为首选药物。PYM、BLM副作用小，对骨髓及机体免疫功能影响不大，主要作用于G2期，常与作用于M期的长春新碱（VCR）、依托泊甙（VP-16）、长春地辛（VDS）等联合起同步化作用。DDP骨髓抑制副作用较轻，但有肾毒性及明显的消化道反应，采用水化及抗呕吐措施后，一般病人可耐受。而丝裂霉素（MMC）、氯尿嘧啶（5-FU）、甲氨蝶呤（MTX）、阿霉素（ADM）等骨髓抑制作用明显，ADM价格又昂贵，故多作为二线药物选用。各种方案药物选择的原则应主要根据病理类型、药物的作用、机理和在细胞增殖周期中的作用部位、单药疗效和主要毒性及病人的体质状况来决定。并可配合应用一些增敏剂、生物反应调节剂和减轻毒性的药物。尤其是第一疗程药物必须恰当，才可能提高缓解率。为了取得满意疗效，药物的用量应基本达到病人的最大耐受量。特别是第一个疗程必须足量，这不仅可能收到较好的疗效，而且初受药物副作用抑制的机体功能恢复也较快。但所规定的剂量必须根据病人的具体状况和在治疗中的反应及体重变化，酌情加减，及时修正，不能一成不变，更不是无原则的剂量越大越好，造成药物超量而加重毒性。 2.食管鳞癌的化疗（1）CFB方案（中国医学科学院肿瘤医院）：CTX（环磷酰胺）600mg/m2，静注，1次/周；5-FU 250～500mg，静滴，2～3次/周；BLM 30mg，肌注，2～3次/周。7～10天为一周期，4～6个周期为一疗程。治疗食管癌30例，完全缓解和部分缓解7例，有效率23%。（2）DMP方案（河南医科大学附属第一医院）：DDP 20mg/m2，静滴，第1～5天，3周重复；MMC 4～6 mg/m2，静注，1次/周；PYM 6mg/m2，肌注，3次/周。7周为一疗程。治疗41例，完全缓解6例（14.6%）、部分缓解17例（41.5%）、死亡9例（21.9%），有效率56.1%。主要副作用为消化道反应和骨髓抑制，一般病人可耐受。（3）DBV方案（kelsen）DDP 3mg/kg，静脉输注（水化），第1天；VDS 3mg/m2，静注，第1、8、15、22天
紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物，也是目前所了解的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物。同位素示踪表明，紫杉醇只结合到聚合的微管上，不与未聚合的微管蛋白二聚体反应。细胞接触紫杉醇后会在细胞内积累大量的微管，这些微管的积累干扰了细胞的各种功能，特别是使细胞分裂停止于有丝分裂期，阻断了细胞的正常分裂。通过Ⅱ-Ⅲ临床研究，紫杉醇主要适用于卵巢癌和乳腺癌，对肺癌、大肠癌、黑色素瘤、头颈部癌、淋巴瘤、脑瘤也都有一定疗效。
紫杉醇是临床上常用的一种化疗药物
紫杉醇可以抗癌，但并不是对是有癌都有用，实际上只对几种癌细胞有一定杀伤作用，并且紫杉醇需要提取提纯才有用，那些煮红豆杉叶或者树皮的方法，根本提取不到抗癌有效成分的，因为紫杉醇是不溶于水的，并且一万多公斤的红豆杉树叶或者树皮，才能提取一公斤的紫杉醇。
紫杉醇最早是从太平洋红豆杉的树皮中提取的，为20世纪末开发的新型抗癌药物，是人类临床上治疗乳腺肿瘤的特效化疗药，无论是单独使用还是联合使用都有很突出的疗效[7]。目前，犬猫乳腺肿瘤治疗的最好选择仍然是外科手术切除，当乳腺肿瘤体积过大而不能进行手术切除或者已经发生肺部转移时，我们可以选择化疗的方法进行治疗，但目前为止兽医临床还没有专门针对乳腺肿瘤的化疗药，而紫杉醇在兽医的研究尚未完全开展，很多研究还只是局限在实验室的细胞生物学实验[4]，实体实验几乎没有。因此为了使兽医临床对乳腺肿瘤的化疗得到更好的发展，我们将紫杉醇应用到兽医临床上。通过参考国外文献以及进行实体试验，我们简单总结出紫杉醇在兽医临床上的一些使用方法、不良反应以及使用注意事项。1、紫杉醇的简介紫杉醇是二萜类化合物，脂溶性高，水溶性差，因此要使用聚氧乙烯蓖麻油与无水乙醇1：1的混合溶媒作为溶剂[8]，将其配成紫杉醇注射液（大部分临床使用的紫杉醇注射液的浓度规格为6 mg/ml）。紫杉醇的作用机制独特，其作用靶点是构成细胞骨架的微管，与常用的其他纺锤体毒物如阻止微管聚集的长春花碱、长春花新碱等作用相反，紫杉醇在低浓度下就能催化微管蛋白迅速合成微管，并结合到微管上起稳定和防止微管解聚的作用，使肿瘤细胞停留在G2期和M期，从而抑制肿瘤细胞的有丝分裂，最终导致肿瘤细胞死亡；同时还具有抗肿瘤血管形成和诱导肿瘤细胞凋亡的作用。紫杉醇的代谢途径主要是肝脏代谢（经胆汁排泄）；肾脏清除率为5% ～ 7%[9]。2、使用方法由于此药易导致过敏反应，在化疗前30分钟皮下注射地塞米松（0.5 ㎎/㎏）、苯海拉明（4 ㎎/㎏）、西咪替丁（4 ㎎/㎏）。紫杉醇的使用剂量是：犬132 ㎎/㎡[1]，猫80 ㎎/㎡，每3周化疗一次，使用前应用生理盐水将紫杉醇注射液稀释到1 ㎎/ml，稀释药物时需使用玻璃器皿（玻璃注射器和玻璃瓶），使用特制胶管及0.22 μm的微孔膜滤过后静脉滴注[3]，，输液速度的上限为3 ㎎/㎏/h；在输液过程要加强护理，经常测量动物的呼吸次数及心率，一旦出现过敏反应立即静脉注射或皮下注射地塞米松（0.2 ㎎/㎏），并调慢输液速度，防止出现过敏性休克。3、不良反应不少实验室的离体细胞实验已经证明紫杉醇对于犬猫乳腺肿瘤细胞的生长有很好的抑制作用[4]。在关注紫杉醇疗效的同时，尽量减少紫杉醇对犬猫的不良反应的发生也值得我们重视。我们通过实体试验和临床病例分析总结了紫杉醇对犬猫的不良反应和临床应用的注意事项。3.1 过敏反应在我们设计的实体实验中，所有实验犬都出现过不同程度的过敏反应，即过敏反应发生率为100%，过敏反应基本都是发生在开始输紫杉醇后45 ～ 60 分钟左右，主要表现为皮肤潮红、发痒、烦躁不安、呼吸加快等，此时不必停药，将输液速度调慢，并注射低剂量地塞米松即可缓解症状。临床病例显示，患犬基本都会出现过敏反应，而猫目前为止还没发现有明显的过敏反应，只有一只接受化疗的患猫出现了流涎现象。3.2 胃肠道反应紫杉醇引起的胃肠道反应主要表现为食欲不振、呕吐、拉稀。由于存在个体差异，胃肠道反应的严重程度表现不一。在实验过程中，有的实验犬出现了拉血现象，但基本在化疗后三天能自行恢复。3.3 骨髓抑制骨髓抑制是受紫杉醇剂量限制的不良反应，其临床表现为轻度贫血、嗜中性粒细胞减少症以及血小板减少症等。3.4 其他不良反应紫杉醇的不良反应还包括肝功能异常、掉毛、口腔溃疡等。其中肝功能异常主要是由于紫杉醇大部分是通过肝脏代谢的，对肝脏有一定的损伤，因此要定时做肝功能检查，及时进行保肝治疗。掉毛和口腔溃疡则是比较少见的，但在我们的实验结果中，还是有实验犬出现了这两种不良反应。严重掉毛的实验犬没有做任何处理，在停止化疗三个月后就自行恢复。而口腔溃疡的实验犬只是简单冲洗清理几天后也能恢复。4、讨论乳腺肿瘤是母犬母猫最常发生的恶性肿瘤之一，犬乳腺肿瘤是仅次于皮肤肿瘤的最常见肿瘤，大约50%的犬乳腺肿瘤是恶性的，而猫可高达80% ～ 90%，未绝育的犬猫发生乳腺肿瘤的几率是绝育犬猫的7倍。紫杉醇在抗肿瘤药物中是一种作用机制非常独特的药物，其溶剂聚氧乙烯蓖麻油是一种表面活性剂，能够溶解聚氯乙烯（PVC）输液器中所含有的邻苯二甲酸二辛脂（DEHP），实验研究表明，DEHP具有广泛的不良反应，明显表现为肝毒性[6]，因此，为了保证临床的用药安全，抽取紫杉醇时建议使用玻璃注射器，稀释时使用玻璃瓶，输液使用专门的紫杉醇输液器。另外，专门的紫杉醇输液器带有过滤器，需要过滤后再静脉滴注的原因可能是由于紫杉醇注射液中不含有抗菌剂。紫杉醇的过敏反应主要是因为聚氧乙烯蓖麻油在体内降解时释放组胺，导致过敏反应。化疗前使用抗组胺药物和激素以及减缓输液速度可使过敏反应降至最低程度，但并不能完全杜绝[3]。胃肠道反应最常见为食欲不振、呕吐、拉稀，主要机制是化疗药引起肠壁和呕吐中枢的化学受体触发区（CT2）内的嗜铬细胞的5-羟色胺（5-HT3）水平明显升高，经传入纤维作用于呕吐中枢，进而引起恶心、呕吐。同时，化疗药会对肠道的细胞具有一定的杀伤作用，从而会引起拉稀现象。针对胃肠道反应可以使用5-HT3受体拮抗剂，如昂丹司琼以及胃复安等作为预防治疗。明显的骨髓抑制的发生几率并不是很高，但个别患犬对紫杉醇比较敏感，在第一次化疗后就会出现骨髓抑制，因此，在每次化疗前都要进行血常规检查。化疗前采取针对性预处理，使用激素如地塞米松，可有效减轻这一毒性反应，在保证犬猫安全的同时，也使其耐受性得到提高。用药前后进行肝功能监测，发现异常及时进行保肝治疗。化疗过程要针对所发生的不良反应，积极采取相应的措施和治疗方法，以免导致严重不良反应的发生而使患病动物的治疗受到干扰或者停止。参考文献[1] V.J. Poirier, A.E. Hershey, K.E. Burgess， et al. Efficacy and Toxicity of Paclitaxel (Taxol) for the Treatment of Canine Malignant Tumors[J]. J Vet Intern Med, 2004, (18): 219-222[2] 刘洁，刘悦. 紫杉醇的不良反应及临床应用的注意事项[J]. 山西医药杂志, 2009, 38(7): 633-634[3] 赵俊生. 紫杉醇注射液的不良反应分析及临床合理应用[J]. 山西医药杂志, 2008, 37(6): 558-559[4] 张荣蓉，任晓丽，向毅，等. 紫杉醇对犬乳腺肿瘤细胞生长的抑制作用[J]. 中国兽医杂志, 2009, 45(10): 27-28[5] 李华涛，张蓉蓉，任晓丽，等. 不同浓度紫杉醇诱导犬乳腺肿瘤细胞凋亡的形态学观察[J]. 中国兽医科学, 2011, 41(4): 413-417[6] 张恩娟、陈琳、曹健. 紫杉醇注射液配套输液器中邻苯二甲酸二辛脂的溶出性考察[J]. 中国药房, 2008, 19(9): 698-700[7] 敬承衡, 张素清. 紫杉醇（Taxol）研究的进展[J]. 云南师范大学学报, 2005, 14(2): 49-51[8] 唐富山, 焦海胜, 原凌燕, 等. 紫杉醇制剂研究进展[J]. 兰州大学学报, 2005, 31(2): 97-99[9] 吴海萍. 紫杉醇的临床应用及不良反应[J]. 海峡药学, 2009, 21(6): 234-236[10] 高锦明, 傅建熙, 张鞍灵. 抗癌新药紫杉醇的构效关系[J]. 西北农业大学学报, 1997, 25(5): 96-98
MicroRNA（miRNA；miR）与肿瘤的发生、发展密切相关，在多种肿瘤中异常表达。控制癌症相关miRNAs的表达有望成为新一代药物模式，用于晚期癌症的治疗。 2021年6月，来自日本的科研人员在《 Journal of Human Genetics 》发表综述文章， 总结了与各种癌症病理相关的肿瘤相关miRNA及其在癌症miRNA治疗中的临床应用。 许多研究表明，miRNAs的异常表达是由多种癌症类型的基因畸变（包括遗传和表观遗传的改变）引起的，并通过靶基因表达的失调在癌症的发生和发展中发挥作用。因此，许多miRNAs与肿瘤的发病机制密切相关，包括细胞增殖、细胞存活和细胞侵袭。癌症中OncomiR的异常高表达通过直接与多个肿瘤抑制基因结合而下调这些mRNA的表达，从而导致癌细胞的生长、移动和转移。因此，从功能上抑制OncomiR是一种有效的癌症治疗策略。 将与OncomiR互补的合成anti-miR引入癌细胞，可以阻止OncomiR与目标RNA的结合，从而抑制癌细胞的增殖和转移。 例如Viridian therapeutics公司开发了一种与miR-155互补的anti-miR：MRG-106（Cobomarsen），并对皮肤T细胞淋巴瘤患者进行了MRG-106瘤内给药的I期临床试验（ClinicalTrials.gov Identifier NCT02580552）。与OncomiR相反，TS-miR在肿瘤中的异常低表达通过逃避多种促癌基因表达的下调作为靶点，在肿瘤的发生和恶性进展中发挥作用。通过对人类miRNA库的功能筛选和miRNAs的表达分析，研究团队发现了多个参与了多种癌症病理过程的TS-miRs。由于TS-miR可同时抑制多种促癌基因的表达，因此将合成双链（ds）-TS-miR模拟物引入癌细胞的替代治疗被认为是一种治疗上合理的方法。 研究团队针对miR-634进行了研究。 1) 首先其在体外实验中证实了ds-miR-634模拟物作为抗癌药物的潜力，ds-miR-634模拟物的引入显著地增加了包括食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞在内的几种癌细胞系对顺铂的敏感性，并且证实在ESCC异种移植小鼠模型中，将ds-miR-634模拟物局部注射到肿瘤周围的皮下空间增加了顺铂的抗肿瘤作用。 2) 接下来，研究团队开发了一种脂质纳米粒（LNP）（由Eisai有限公司提供），其中包含合成的ds-miR-634模拟物（miR-634-LNP），并进行了动物实验。在胰腺癌异种移植小鼠模型中，通过尾静脉注射miR-634-LNP，使miR-634有效传递到肿瘤细胞并抑制靶基因的表达，与对照组相比，服用miR-634-LNP的小鼠有明显的抗肿瘤效果。这表明，LNP介导的miR-634递送是一种潜在的有用的癌症治疗策略。 3) 最近研究团队使用离子液体技术（ILTS®，MEDRx，Co.Ltd.）制备了一种含有ds-miR-634模拟物的软膏。在皮肤鳞状细胞癌（cSCC）异种移植小鼠模型和致癌物诱导的乳头状瘤小鼠模型中，局部应用miR-634软膏抑制体内肿瘤生长而没有毒性。miR-634的强制表达通过抑制多种细胞保护过程（包括自噬、抗氧化清除、抗凋亡和谷氨酰胺分解）诱导高能应激，从而协同增强EGFR-TKI诱导的细胞毒性。因此，研究团队认为局部应用miR-634软膏是通过同时抑制多种细胞保护过程来提高EGFR-TKI治疗cSCC疗效的合理策略MetastamiR通过直接靶向参与癌细胞迁移、侵袭、定植、肿瘤干细胞和上皮间质转化（EMT）的基因来促进或抑制肿瘤转移。例如由TransCode Therapeutics公司开发的含有anti-miR-10b（TTX-MC138）的纳米粒子制剂对小鼠进行系统性给药，显著抑制了几种癌症的实验性转移，包括乳腺癌、肺癌和胰腺癌。此外， 控制MetastamiRs的表达可能导致开发新的治疗策略来抑制癌细胞的迁移和侵袭以及肿瘤转移。 血管生成在肿瘤微环境中对肿瘤细胞的生长、存活和转移起着重要作用，是一种潜在的治疗靶点。血管内皮细胞中血管生成相关miRNA（AngiomiRs）的表达通过调节细胞因子信号、金属蛋白酶、血管内皮生长因子信号和血小板源性生长因子信号促进肿瘤组织中的血管生成。此外，参与肿瘤免疫系统的miRNAs(Immuno-miRs)，通过调节肿瘤微环境中炎症信号和NF-kB通路中的因子，促进肿瘤细胞逃避免疫监视。因此， 治疗性地控制肿瘤微环境中AngiomiRs或Immuno-miRs的表达可能是抑制肿瘤微环境中血管生成或提高肿瘤免疫治疗效果的一种新的治疗方法。 越来越多的证据表明， 用合成的ds-TS-miR模拟物进行替代治疗是一种有效的癌症治疗策略 ，因为它可以同时抑制参与癌症进展的多种途径。与传统的分子靶向药物和控制一个分子的抗体药物不同，使用TS-miR的替代治疗可以同时控制多种促癌基因的表达。miRNA疗法的另一个优势是可以在短时间内合成制剂所需的TS-miR。未来，通过化学修饰合成核酸和优化药物传递系统（DDS），预计miRNA疗法的发展将快速推进。首发公号：国家基因库大数据平台 参考文献 Inoue, J., Inazawa, J. Cancer-associated miRNAs and their therapeutic potential. J Hum Genet(2021).
在一项新的研究中，来自美国普林斯顿大学的研究人员惊奇地发现，他们以为是对癌症如何在体内扩散---癌症转移---的直接调查却发现了液-液相分离的证据：这个生物学研究的新领域研究生物物质的液体团块如何相互融合，类似于在熔岩灯或液态水银中看到的运动。相关研究结果作为封面文章发表在2021年3月的Nature Cell Biology期刊上，论文标题为“TGF-β-induced DACT1 biomolecular condensates repress Wnt signalling to promote bone metastasis”。
论文通讯作者、普林斯顿大学分子生物学教授Yibin Kang说，“我们相信这是首次发现相分离与癌症转移有关。”
他们的研究不仅将相分离与癌症研究联系在一起，而且融合后的液体团块产生了比它们的部分之和更多的东西，自组装成一种以前未知的细胞器（本质上是细胞的一个器官）。
Kang说，发现一种新的细胞器是革命性的。他将其比作在太阳系内发现一颗新的星球。“有些细胞器我们已经认识了100年或更久，然后突然间，我们发现了一种新的细胞器！”
论文第一作者、Kang实验室博士后研究员Mark Esposito说，这将改变人们对细胞是什么和做什么的一些基本看法，“每个人上学，他们都会学到‘线粒体是细胞的能量工厂’，以及其他一些有关细胞器的知识，但是如今，我们对细胞内部的经典定义，对细胞如何自我组装和控制自己的行为的经典定义开始出现转变。我们的研究标志着在这方面迈出了非常具体的一步。”
这项研究源于普林斯顿大学三位教授实验室的研究人员之间的合作。这三位教授是Kang、Ileana Cristea（分子生物学教授，活体组织质谱学的领先专家）；Cliff Brangwynne（普林斯顿大学生物工程计划主任，生物过程中相分离研究的先驱）。
Kang说，“Ileana是一名生物化学者，Cliff 是一名生物物理学者和工程师，而我是一名癌症生物学家和细胞生物学者。普林斯顿大学刚好是一个让人们联系和合作的美妙地方。我们有一个非常小的校园。所有的科研部门都紧挨着。Ileana实验室实际上与我的实验室在Lewis Thomas的同一层楼! 这些非常紧密的关系存在于非常不同的研究领域之间，让我们能够从很多不同的角度引入技术，让我们能够突破性地理解癌症的代谢机制--它的进展、转移和免疫反应--也能想出新的方法来靶向它。”
这项最新的突破性研究，以这种尚未命名的细胞器为特色，为Wnt信号通路的作用增加了新的理解。Wnt通路的发现导致普林斯顿大学分子生物学教授Eric Wieschaus于1995年获得诺贝尔奖。Wnt通路对无数有机体的胚胎发育至关重要，从微小的无脊椎动物昆虫到人类。Wieschaus已发现，癌症可以利用这个通路，从本质上破坏了它的能力，使其以胚胎必须的速度生长，从而使肿瘤生长。
随后的研究揭示，Wnt信号通路在 健康 的骨骼生长以及癌症转移到骨骼的过程中发挥着多重作用。Kang和他的同事们在研究Wnt、一种名为TGF-b的信号分子和一个名为DACT1的相对未知的基因之间的复杂相互作用时，他们发现了这种新的细胞器。
Esposito说，把它想象成风暴前的恐慌购物。事实证明，在暴风雪前购买面包和牛奶，或者在大流行病即将到来时囤积洗手液和卫生纸，这不仅仅是人类的特征。它们也发生在细胞水平上。
下面是它的作用机制：惊慌失措的购物者是DACT1，暴风雪（或大流行病）是TGF-ß，面包和洗手液是酪蛋白激酶2（CK2），在暴风雪面前，DACT1尽可能多地抓取它们，而这种新发现的细胞器则把它们囤积起来。通过囤积CK2，购物者阻止了其他人制作三明治和消毒双手，即阻止了Wnt通路的 健康 运行。
通过一系列详细而复杂的实验，这些研究人员拼凑出了整个故事：骨肿瘤最初会诱导Wnt信号，在骨骼中传播（扩散）。然后，骨骼中含量丰富的TGF-b激发了恐慌性购物，抑制了Wnt信号传导。肿瘤随后刺激破骨细胞的生长，擦去旧的骨组织。( 健康 的骨骼是在一个两部分的过程中不断补充的：破骨细胞擦去一层骨，然后破骨细胞用新的材料重建骨骼)。这进一步增加了TGF-b的浓度，促使更多的DACT1囤积和随后的Wnt抑制，这已被证明在进一步转移中很重要。
通过发现DACT1和这种细胞器的作用，Kang和他的团队找到了新的可能的癌症药物靶点。Kang说，“比如，如果我们有办法破坏DACT1复合物，也许肿瘤会扩散，但它永远无法‘长大’成为危及生命的转移瘤。这就是我们的希望。”
Kang和Esposito最近共同创立了KayoThera公司，以他们在Kang实验室的合作为基础，寻求开发治疗晚期或转移性癌症患者的药物。Kang说，“Mark所做的那类基础研究既呈现了突破性的科学发现，也能带来医学上的突破。”
这些研究人员发现，DACT1还发挥着许多他们才开始 探索 的其他作用。Cristea团队的质谱分析揭示了这种神秘细胞器中600多种不同的蛋白。质谱分析可以让科学家们找出在显微镜玻片上成像的几乎任何物质的确切成分。
Esposito说，“这是一个比控制Wnt和TGF-b更动态的信号转导节点。这只是生物学新领域的冰山一角。”
Brangwynne说，相分离和癌症研究之间的桥梁仍处于起步阶段，但它已经显示出巨大的潜力。
他说，“生物分子凝聚物在癌症---它的生物发生，特别是它通过转移进行扩散---中发挥的作用仍然不甚了解。这项研究为癌症信号转导通路和凝聚物生物物理学之间的相互作用提供了新的见解，它将开辟新的治疗途径。”（生物谷 Bioon.com）
参考资料： 1.Mark Esposito et al. TGF-β-induced DACT1 biomolecular condensates repress Wnt signalling to promote bone metastasis. Nature Cell Biology, 2021, doi:10.1038/s41556-021-00641-w. 2.Kiran D. Patel et al. Condensing and constraining WNT by TGF-β. Nature Cell Biology, 2021, doi:10.1038/s41556-021-00649-2.
晚期性食道癌，七十岁的老男女人，去各医院。我处理晚期性食道癌用四大药治疗法，按照时间规定，药费高价。
单细胞测序分析CD45+的细胞（免疫细胞）→利用经典标记对免疫细胞注释，研究免疫细胞的成分差异→阐明免疫细胞改变的分子机制→研究免疫细胞TCR序列的变化，克隆性，说明起源问题→研究髓系细胞，TAMs（肿瘤相关巨噬细胞），WCGNA研究细胞分子特征→细胞间相互作用（scTHI）
我们获得了一个详细的单细胞分辨率的食管鳞状细胞癌（ESCC）免疫细胞图谱。阐述了哪些免疫细胞处于休眠状态，哪些免疫细胞处于增值状态，以及这些细胞与免疫抑制之间的关系。
①食管癌在组织学上可分为两个亚型：腺癌（EAC）和鳞状细胞癌（ESCC）。食管鳞癌是食管癌的主要亚型，约占全世界食管癌的90% ②最近，PD-1抗体用于晚期食管癌一线化疗失败的患者显示，与化疗相比，总体生存率只有中度的改善。 ③我们用高维（high-dimensional）scRNA序列分析了从七个切除的食管鳞癌肿瘤及其邻近组织中分离的总免疫细胞。同时进行T细胞受体（TCR）测序，以获得T细胞克隆性的信息 ④相较于癌旁正常组织，肿瘤组织T细胞明显扩增。 ⑤我们在这些肿瘤中发现了耗尽的T细胞、耗尽的NK细胞、调节性T（Treg）细胞、交替激活的巨噬细胞（M2）和耐受性树突状细胞（tDCs），表明ESCC中 存在炎症但免疫抑制的TME 。 ⑥我们鉴定出了一个与预后相关的基因集
①我们分析了从7对新鲜、手术切除的肿瘤和ESCC邻近组织中分离出CD45+细胞进行单细胞测序。过滤后，共80787个细胞（每个样品3248-9078），中位基因数1170个。 ②我们将所有样本的单细胞数据进行标准化和汇总，并进行无监督聚类以识别可区分的群体，用的是Seuratv3.0 ③我们利用典型标记对这些细胞进行了注释；这些细胞类型的经典标记物的表达与注释一致
④我们发现肿瘤中的t细胞和单核/巨噬细胞增多。与此相反，B细胞和NK细胞的百分率降低
（S133、S134和S150）--在这些肿瘤中，T细胞所占的比例不到总细胞的2%。 （S135、S149、S158、S159）--这些肿瘤中，免疫谱在PCA中呈现显著变化，其中6–12%的细胞是T细胞。
①T细胞和NK细胞是TME中主要的细胞毒性免疫细胞，我们对来自所有样本的T细胞和NK细胞进行无监督聚类，我们鉴定了6个CD4 T细胞簇，7个CD8 T细胞簇，1个CD4和CD8双阴性T细胞簇和3个NK细胞簇
②在T细胞中，我们使用已知的功能性标记来提示CD4 T细胞群，包括天真、记忆、效应、耗尽的T细胞和Tregs。这些标记物还鉴定了CD8T细胞群，包括记忆、效应、细胞毒性和耗尽的T细胞。
④我们进一步分析了与GFBP2、LAG3和FOXP37表达高度相关的基因。前50个基因用于细胞毒性、衰竭和Treg的分配。然后我们使用这些特征分析T细胞簇，发现富集分数与公布的特征一致。 ⑤CD4群体中存在着谱系联系，exhaustion和Treg评分的可视化证实了这两个簇之间的重叠 ⑥细胞毒性和耗尽的CD8 T细胞都表达许多效应分子，如GnY和GZMH，而耗尽的DCD8 T细胞表达的IFNG水平高于细胞毒性细胞（图2f），这表明耗尽的T细胞仍表达高水平的某些效应分子并试图对肿瘤细胞作出反应； 这些结果提示CD8-C5-CCL5处于衰竭早期，CD8-C7-TIGIT处于衰竭期，CD8-C6-STMN1可能是CD8-C5-CCL5与CD8-C7-TIGIT的过渡期。
①我们比较了肿瘤和邻近组织中的T细胞簇。CD45+细胞中的 （Treg cluster CD4-C6-FOXP3） and （exhausted CD4 T cells CD4-C5-STMN1 ）的百分比与匹配的邻近组织相比显著增加； 流式细胞术也证实了在ESCC肿瘤中Tregs的富集。 同样，耗尽的cd8t细胞在肿瘤中富集。
②在ESCC中，PD1在CD8 T细胞中的表达一直较高（图3f）。肿瘤组织中Tregs和耗尽的DCD4和CD8 T细胞显著增加表明存在免疫抑制环境 ③我们还观察到，与匹配的邻近组织相比，肿瘤组织中的NK细胞显著减少； NK-C1-NCR3表达高水平的NCR3、CD266、NKG7和LAMP1（图3h）。 相反，NK-C3-KLRC1和NK-C2-STMN1簇高水平表达KLRC1和ITGA1抑制性受体（图3h）。 流式细胞术分析证实，与邻近组织相比，ESCC中NKG2A（KLRC1）在NK细胞中的表达增加（图3i）。事实上，NK-C3-KLRC1和NK-C2-STMN1的细胞毒性分数极低；相反，衰竭分数升高（图3j），这表明在ESCC中NK细胞不足，功能受损
①根据TCR结果我们共观察到15654个独特的tcr序列。观察到克隆扩展，克隆大小从2到2600（图4a）。 如预期的那样，患者之间没有发现共享克隆。与其他癌症类型的研究一致，大多数TCR是独特的。然而，TCR基因型的组成在患者中是高度可变的
②S149和S150肿瘤中有65%和68%的T细胞具有两个以上细胞共用的TCR，这表明这些肿瘤中T细胞的高度克隆性扩增（图4b）。与匹配的邻近组织相比，7名患者的肿瘤中有4人的扩增克隆数增加。
④CD8 T细胞的克隆性细胞明显多于CD4 T细胞，并且幼稚的CD4-C1-CCR7簇显示出非常有限的克隆性扩增（图4d）。 ⑤CD8-C1-NKG7是CD8 T细胞中的细胞毒性簇，在邻近组织中具有较高的频率，在邻近组织中也显示出比肿瘤组织中更高的克隆扩增（图4e）。
⑥然而，与邻近组织相比，肿瘤中的Tregs克隆数增加（图4f），这表明特异性克隆细胞的扩张可能是肿瘤中Tregs高百分比的原因。 ⑦我们在CD4细胞的所有簇（包括Tregs）和CD8细胞的所有簇（C2除外）中发现了TCR序列的共享（图4g，h） ⑧CD8-C7-TIGIT与CD8-C5-CCL5和CD8-C6-STMN1共有的克隆数分别为166（9.0%）和156（8.4%）（图4i）。 ⑨Treg簇CD4-C6-FOXP3在肿瘤中也有相同的趋势，与CD4-C1-CCR7共有的克隆型占14.4%，在邻近组织中占40.7%（图4j和补充图8c）
①接下来，我们对髓系细胞进行无监督聚类。十四个簇被鉴定，包括9簇单细胞/巨噬细胞和5簇树突状细胞（图5a）。 ②利用已发表的信号特征：单核细胞（Mono）、经典活化巨噬细胞（M1）、交替活化巨噬细胞（M2）和髓源性抑制细胞（MDSCs）； ③我们使用Monocle，一种无监督的推断方法，来构建细胞转化的潜在发展轨迹。另一种算法Slingshot的结果（s9b）； 巨噬细胞中M1和M2信号之间的显著相关性（补充图。9c），表明ESCC中存在一个复杂的巨噬细胞极化过程，这与其他研究一致 Mono-C1-VCAN显示出强大的单核细胞信号（图5b）。
④我们用wgcna对单核/巨噬细胞进行加权相关网络分析 我们发现绿松石模块与单核细胞簇、单核细胞C1-VCAN和单核细胞C2-IL1B正相关，与M2簇宏C3-CSF1和MDSC簇MDSC-C1-C1QC、MDSC-C2-APOE负相关（图5d，e）;我们进一步分析了这个模块中的基因以及它们与Mono-C1-VCAN的关联（图5f），以选择最相关的前50个基因，形成一个特征集； 有趣的是，这一特征与ESCC（图5g）以及宫颈鳞状细胞癌和肺鳞状细胞癌（补充图9g）的高无进展生存率密切相关，这表明这一特征可作为ESCC和其他组织鳞状细胞癌的预后生物标志物。
①五个DC簇表达热图（图6a）;DC-C3-LAMP3癌旁组织中富集（图6b）。
②发现LAMP3+DC与其他树突状细胞亚群相比具有更高的活性和迁移能力，同时其还富集到了耐受性特征（图6c）
④流式显示：LAMP3+DC表达的CD83、CCR7和PDL1明显高于LAMP3 DC（图6e，f）、提示LAMP3+DCs的成熟、迁移和调控能力。 ⑤多色ihc染色也证实了肿瘤组织中CD11C+LAMP3+PDL1+IDO+DCs的存在（图6g）。 ⑥我们进一步用IFNγ和LPS治疗dc。有趣的是，我们发现IFNγ和lps刺激诱导dc表达PDL1和IDO（图6h）； 当DCs与CD4+CD45RA+幼稚T细胞共培养时，诱导FOXP3表达的能力增强（图6i）。 提示IFNγ和LPS可能在体外诱导耐受性DCs
①我们基于已知配体-受体对在任何两种肿瘤浸润性免疫细胞中的共同表达，对潜在的细胞-细胞相互作用进行了系统分析 scTHI--另一种广泛使用的方法--分析巨噬细胞和Tregs的相互作用 ②我们发现巨噬细胞和Tregs之间TNF-TNFSF1B、CCL4-CCR8和IL-1β-IL1R2的相互作用具有较高的相互作用得分，并且Tregs在肿瘤中表达高水平的TNFSF1B、CCR8和IL1R2（图7a–c）
③肿瘤中分离的树突状细胞中IL1R2的表达高于癌旁组织，多色IHC也证实了IL1R2在Tregs中的表达。（图7d）
通过scrna-seq分析巨噬细胞中LILRB1的表达，并通过FACS进一步验证。我们发现，与邻近组织相比，ESCC中巨噬细胞中LILRB1的表达增加（图7h，i和补充图7）。
①在这里，我们结合了深链RNA序列和TCR序列，并阐明了整个免疫景观，包括ESCC和邻近组织中固有的和适应性的免疫细胞图谱；描述了ESCC免疫细胞的分类、比例、功能变化及机制、细胞间相互作用 ②ESCC富含免疫抑制细胞：Tregs, exhausted CD8 T,CD4 T and NK cells, M2 macrophages, and tDCs；促进免疫逃避和肿瘤进展 ③我们证明耗尽的CD4、CD8 T细胞和NK细胞是主要的肿瘤内增殖免疫细胞室，尽管这些细胞富含耗尽基因。 与耗尽簇（CD8-C7-TIGIT）相比，预耗尽簇CD8-C5-CCL5和CD8-C6-STMN1可能是更好的免疫治疗靶点，因为耗尽簇处于永久性和不易逆转的耗尽阶段，由于其表观遗传变化，使其更耐检查点抑制。 ④发现肿瘤浸润的NK细胞不仅在ESCC中普遍减少，而且还表达高水平的检查点分子，包括NKG2A和CD49d，提示处于耗尽状态；据报道，抗NKG2A和抗CD49d是促进抗肿瘤活性的检查点抑制剂 ⑤T细胞的TCR序列共享，提示T细胞启动后有着广泛的分化。 ⑥衰竭的CD8 T细胞（CD8-C7-TIGIT）与其他CD8簇具有更高比例的共享克隆，尤其是衰竭前簇CD8-C5-CCL5和CD8-C6-STMN1，这与这些簇的相关状态和多步衰竭假说相一致。 相反，CD8-C1-NKG7是细胞毒性最强的CD8 T细胞簇，在肿瘤中克隆性T细胞明显减少 最近在膀胱癌中也有类似的发现，细胞毒性cd8t细胞（FGFBP2+clusterin）在正常组织中的克隆性比在膀胱癌中的克隆性强。 另一方面，食管细胞毒性细胞的克隆扩增可能是由于食管中的非肿瘤抗原的偶然暴露，并且相邻组织中的大多数CD8-C1-NKG7细胞表达低水平的CD39，这表明它们是旁观者CD8 T细胞。 幼稚的CD8 T细胞可能不常渗入食管或被局部环境激活，因此不太可能被检测为独立的群体。 ⑦单核细胞/巨噬细胞在肿瘤中的关键作用已经在肝癌、乳腺癌和肺癌中用scRNA-seq进行了描述； 通常，巨噬细胞的活化分为炎症前M1状态或与炎症溶解相关的M2状态； 我们的分析显示单核细胞/巨噬细胞存在于单核细胞、M1和M2状态的光谱中；M1相关基因和M2相关基因经常在同一细胞中共同表达；M1和M2信号的共存表明TAMs比经典的M1/M2模型更复杂，这种现象在乳腺癌和肝癌中也有发现 当使用WGCNA分析单核/巨噬细胞的基因相关性时，我们发现一组基因与单核细胞呈正相关，在ESCC和其它类似的病理类型肿瘤有着较好的预测预后能力 ⑧cDC2特别参与MHCⅡ类介导的抗原提呈和cd4t的活化和扩增细胞.cDC1也是抗肿瘤免疫所必需的。最近，一些文献报道了TME中的DCs，发现大多数与我们的数据一致。 比较了不同癌肿之间的这种差异，对分析出来的细胞做了些功能分析。 ⑨我们的工作进一步证实了树突状细胞与巨噬细胞之间的相互作用； 在Treg上表达的IL1R2可能通过阻断IL1β依赖性效应T细胞的活化而增强Treg的功能; IL1R2在活化的肿瘤树突状细胞上表达，并与肺腺癌的预后不良相关。 我们的研究还表明，Tregs可能通过hhla-A、B、C和LILRB1相互作用调节巨噬细胞的功能。 研究TAMs中这种免疫抑制MHC类I-LILRB1信号轴的机制将有助于开发恢复巨噬细胞功能的疗法。 总之，我们的ESCC和邻近组织免疫细胞的转录图谱提供了一个了解免疫状态的框架，并揭示了ESCC环境中免疫细胞的动态特性。此外，我们还从多个方面阐述了食管鳞癌的免疫抑制状态，这些都是食管鳞癌及其他癌症免疫治疗的潜在新靶点
TCR测序方法简介 TCR测序干货 WGCNA
癌症无治，只能靠药物维持生命，如果有钱的话找个好医院度过余生吧
我从不相信有任何药可治食道癌.不吃以下食物,油榨,腌制,可乐,牛奶,糖,汉堡,坚果,豆类,荤菜.多喝水日3000毫升,多吃青菜.自会慢慢好转,乃至康复.