酒炙地龙毕业论文

酒炙地龙毕业论文

地龙干的制作全过程如下：

1.地龙肉：置温水中煮捞，闷约8小时，辗开剪平，洗净泥土，剪段即成。

2.广地龙：拣净杂质，清洗干净剪段即成。

3.用清水清洗，将蚯蚓用温水冲泡，洗去其体表黏液，去处其体表的杂物

4.拌入草木灰中呛死然后去灰，用剪刀剖开蚯蚓身体，洗去内脏与泥土，贴在竹片或木板上晒干或烘干；或者利用蚯蚓怕光的特点暴晒蚯蚓，直至晾干（事先要清理干净）

5.干炒地龙：取干净地龙段，放置锅内，用文火加热，翻炒，炒至表面色泽变深时，取出放凉

6.酒炙地龙:取干净地龙段，加人黄酒抹匀，放置锅内，用文火加热炒至表面呈棕色时，取出，放凉

7.滑石粉制地龙：取滑石粉置锅内中火加热，投人干净地龙段，拌炒至鼓起，取出，筛去滑石粉，放凉

8.甘草水制地龙：取甘草置于锅中，加水煎成浓汤，然后放入干净地龙段，浸泡2小时捞出，晒干

9.用装有干燥剂的容器保存，加工好的地龙干应贮藏在干燥容器内，置通风干燥处，防霉、防蛀。

通常于春季至秋季捕捉活蚯，及时剖开腹部，除去内脏及泥沙，洗净，晒干或低温干燥即可。

炙地龙是怎么制的？

传统用地龙，制法很多，主要有药制、醋制、熬制、酒制、油制、蛤粉炒制、盐制等法，使其质地松泡酥脆、去毒性、矫正臭味及便于煎制服用。在实践工作中，我们发现炮制方法的合理有助于临床疗效的发挥。为此笔者比较了几种不同的炮制方法。
1 原药材的预处理
取地龙生品，倒入竹筐内淋湿，立即切成3～5mm宽的段，将地龙段在水池内用筐快速淘洗去泥灰，晒或烘干。
2 本实验采用的炮制方法
2.1 滑石粉炒法 将滑石粉置锅内加热炒至灵活状态，投入地龙段，不断翻动，使其鼓起，筛去滑石粉即得。
2.2 酒炙法 取地龙段与黄酒拌匀，稍闷，置锅内用文火炒至微干，取出，放凉(每100kg地龙用黄酒18kg)。
2.3 酒闷砂炒法 取地龙段，与酒拌匀，稍闷，取砂子置热锅中，炒至滑利状态，投入生地龙，不断翻炒至表面棕黄色微鼓起时，取出，筛去砂子，摊凉。
2.4 蜜麸炒制法 取地龙段用酒(100∶15)喷匀，闷润1h,另将蜜制麦麸置锅内炒至略起烟，即投入地龙共炒，不断翻动，拌炒至地龙表面棕黄色时取出，迅速倒入容器内，上盖麻袋焖5～10min，筛去麦麸，摊凉。
同时，我们试用电热恒温箱炮制，取地龙段用陈米醋(1∶0.2)拌匀，闷润1h，待醋被吸尽后平摊于搪瓷盘中，厚度约3cm，放置于电热恒温箱中100℃烘2h,中途翻动一次，烘烤至地龙表面呈棕色时，取出摊凉即可。

地龙的炮制方法

1.滑石粉炒法　将滑石粉置锅内加热炒至灵活状态，投入地龙段，不断翻动，使其鼓起，筛去滑石粉即得。2.酒炙法　取地龙段与黄酒拌匀，稍闷，置锅内用文火炒至微干，取出，放凉(每100kg地龙用黄酒18kg)。　　3.酒闷砂炒法　取地龙段，与酒拌匀，稍闷，取砂子置热锅中，炒至滑利状态，投入生地龙，不断翻炒至表面棕黄色微鼓起时，取出，筛去砂子，摊凉。　　4.蜜麸炒制法　取地龙段用酒(100∶15)喷匀，闷润1h,另将蜜制麦麸置锅内炒至略起烟，即投入地龙共炒，不断翻动，拌炒至地龙表面棕黄色时取出，迅速倒入容器内，上盖麻袋焖5～10min，筛去麦麸，摊凉。　　同时，我们试用电热恒温箱炮制，取地龙段用陈米醋(1∶0.2)拌匀，闷润1h，待醋被吸尽后平摊于搪瓷盘中，厚度约3cm，放置于电热恒温箱中100℃烘2h,中途翻动一次，烘烤至地龙表面呈棕色时，取出摊凉即可。 参环毛蚓体腔液干粗粉直接注入大鼠十二指肠30mg/kg，以动静脉插管串线粘附纤维蛋白方法测纤维蛋白生成，具有明显的溶纤维蛋白活性，煮沸或烘干后活性即丧失。以纤维蛋白平板测定法证明，冻干粗粉5μg与尿激酶1u的溶纤维蛋白活性相当。但纤维蛋白平板经85℃水浴加热30min后，尿激酶的活性丧失而冻干粗粉的活性仍部分保留。说明冻干粗粉溶纤维蛋白机制与尿激酶不完全一样。尿激酶的作用是激活纤维蛋白溶酶原使之成为有活性的纤溶液，催化纤维蛋白溶解，蚯蚓冻干粗粉除了有尿激酶样纤溶作用外，尚有直接催化纤维蛋白水解的作用。赤子爱胜蚓提取液在体外对兔静脉血栓有溶解作用，对已凝固的纤维蛋白胶板也有一定纤溶活性。其纤溶作用有直接纤维蛋白溶解和激活纤溶酶原的间接作用，但以直接纤溶为主。家兔静注蚯蚓水浸液kg或0.2g/kg，对颈总动脉一颈外静脉血流套路法实验性血栓形成有明显抑制作用，灌服1g/kg亦有明显抑制，但软弱，静注0.02g/kg有溶栓作用。家兔静注广地龙（Lumbricus kangtang6nsis）醇提取注射液（每1ml含生药2g）2ml/kg，可明显延长血小板血栓和纤维蛋白血栓形成时间，使血栓长度和干重减少，并降低血液粘度。家兔静注人工养殖的正蚓科双胸蚓属（Lumbricche bimastos）粗提取液，可显著降低血中纤维蛋白原含量，并使代球蛋白溶解时间显著缩短。粗提取液经进一步萃取，制备出含多种纤溶酶和纤溶酶原激活物的制剂，具有良好的溶解血栓作用，可使兔血浆组织型纤溶酶原激活物（t-PA）活力增加，血小板聚集性显著降低，全血粘度和血浆粘度降低，红细胞刚性指数降低，提示其通过促进纤溶、抑制血小板聚集、增强红细胞膜稳定性等发挥作用。蚯蚓干粉水浸液在体外对家兔纤维蛋白和凝血块均有溶解作用。家兔静注水煎醇沉注射液对耳缘静脉血栓有明显溶解作用。正常志愿者口服蚯蚓提取物亦有明显的抗凝和纤溶作用，且与剂量相关。凝血活酶时间明显延长，纤溶酶原激活物活性增强，代球蛋白溶解时间缩短及纤维蛋白降解产物含量增加。从蚯蚓提取的纤溶酶（冻干粉）给家兔灌胃，0.05g/（kg·d）或0.1g/（kg·d），连续3d，从心脏取血，在体外形成的血栓长度、湿重、干重均较对照组明显减少。地龙煎剂在体外对牛凝血酶促进人血纤维蛋白原凝聚有明显抗凝血酶作用。赤子爱胜蚓提取物对凝血酶时间（TT）有明显延长作用，在缺乏抗凝血酶-III（AT-III）的血浆中加入该提取物也可使TT明显延长，但延长程度较小，说明这种作用有依赖AT-III和不依赖AT-III的两个部分。家兔静注地龙提取物（EE）可明显延长TT其半衰期0.32h在体外EE亦可明显延长TT和白陶土活化部分凝血活酶时间（KPTT）。广地龙水浸液加碱水解后再用乙醇分级分离，所获提取物亦可明显延长KPTT和TT，其抗凝血酶活性不能被AT-III抗体及鱼精蛋白中和，表明其活性不依赖于AT-III该活性成分不属多糖或蛋白质，可能是一种耐碱耐热的小肽或含双键化合，与水蛙素、肝素等抗凝物质不同。高血粘度综合征和缺血性中风患者每口口服赤子爱胜蚓提取液，连续14d为三疗程，服1～2疗程，患者的血细胞比、血沉、血浆粘度、血纤维蛋白原等均有降低。家兔静注地龙提取液，可使血小板聚集性显著降低，全血粘度和血浆粘度降低，红细胞刚性指数降低。 （1）抗心律失常作用给动物静注地龙注射液对氯仿一肾上腺素或乌头碱诱发的大鼠心律失常，氯化钡或毒毛花着G诱发的家兔心律失常均有明显的对抗作用；对心脏传导亦有抑制作用。（2）降血压作用麻醉犬静注广地龙热水浸剂或乙醇浸出液0.1g/kg，30～45min出现血压下降，可维持2一3h；正常大鼠三次灌胃大剂量（10g/kg）或肾型高血压大鼠每日准胃小剂量（50mg/kg），连续2星期，均有明显的降压作用。肾型高血压大鼠血压下降出现于给药后3～7d并于停药后第2星期回升到用药前水平。广地龙的降压机制可能是由于它直接作用于脊髓以上的中枢神经系统或通过某些内感受器反射地影响中枢神经系统，引起部分内脏血管的扩张而使血压下降。大鼠静往广地龙煎剂0.25g/kg，立即引起血压下降，其降压过程与血小板活化因子（PAF）相似，如预先静注PAF受体阻滞剂CV6209显著抑制广地龙的降压作用，提示类PAF物质是广地龙的重要降压成分。对易卒中自发性高血压大鼠（SHRSP）喂食含地龙饲料，可在不影响SHPSP体重的情况下降低SHRSP血压，改善血管弹性即增加主动脉负荷湿重比（拉力g/主动脉湿重mg）和断裂时主动脉最大负荷（拉力g/主动脉湿重mg），降低心体重比（心肌mg/体重g×10-3），增加肾体重比，且还具有利钠、利尿和降低三酸甘油作用，提示地龙可能有一定的预防SHRSP卒中发生的作用。 小鼠每日灌服地龙提取物l1mg/只，连续58d，对移植的肉瘤S180。有明显的抑制作用，不仅瘤体明显减少，且可延长小鼠的生存期。小鼠每日灌服地龙提取物。1mg/只，连续6d，对移植性实体瘤H22。也有明显抑制作用。班蚓提取物经透析后的透析外液对接种肉瘤S180或实体瘤EMT6。的小鼠均有抑制肿瘤生长的作用，该成分经100℃加热20min，抑癌作用即消失。地龙可透析组分在体外对胃癌细胞MGC803的胸腺嘧啶脱氧核背（H3－TdR）的渗入有明显抑制作用，该组分经56℃加热0.5h抑瘤作用仍然存在，表明该有效组分分子较小而且耐热。应用凝胶过滤技术对地龙提取物进行分离获4个组分。组分I在体外对胃癌细胞MGC803的3H－TdR渗入有非常显著的抑制作用，该组分经56℃加热0.5h抑瘤作用仍存在，但较未加热组明显减弱，提示该组分加热后抑瘤作用部分保留，具有一定耐热性。组分IV在体外对胃癌细胞MGC803的3H－TdR渗入也有非常显著的抑制作用，但该组分经56℃加温0.5h后抑瘤作用即消失，提示该组分不耐热，组分II和组分III则均无抑瘤作用。地龙提取物在体外对培养的喉癌细胞Hep－2有浓度依赖性抑制作用。小鼠灌服地龙提取物与5一氟尿呼惯（5－FU）联合应用对乳腺癌MA的治疗有明显协同作用，肿瘤生长比单用5－FU延迟3d，癌细胞变性坏死较。单用严重，小鼠存活时间也较单用延长阳门。地龙提取物与白介素2（IL－2）联合应用对小鼠肉瘤S180。亦可抑制肿瘤生长，表现协同作用。移植肉瘤S180。的小鼠灌服地龙提取物，与5－FU联合应用时，对肿瘤的抑制有协同作用，如与辐射增效剂AK123联合应用则产生更强的辐射增效作用，三者合用则抑瘤效果最好。在体外，地龙提取物与AK123合用对人喉癌细胞Hep-2也表现协同作用。地龙提取物与热疗联合应用对小鼠实体瘤EMT6的抑制也有明显协同作用。灌服地龙提取物对正常及荷瘤（S180）小鼠均有促进脾淋巴细胞转化作用，对给予直线电子加速器照射和未照射小鼠脾淋巴细胞转化也有促进作用；但体外实验则对小鼠脾淋巴细胞和人血淋巴细胞转化均有抑制作用。提示地龙提取物可能通过提高机体免疫能力而抑制肿瘤细胞生长的。小鼠腹腔注射地龙提取物100mg/kg，连续6d，可使胸腺及脾脏有核细胞数明显增加，脾细胞对刀豆球蛋白A（ConA）、脂多糖（LPS）的反应性均明显高于对照组，脾脏自然杀伤细胞（NK）及抗体依赖细胞介导。细胞毒（ADCC）活性也显著高于对照组。对荷瘤小鼠的免疫功能亦有相似作用，但脾脏NK及AfXIC活性则显著低于对照组。荷瘤小鼠经深部X线治疗机局部照射后，脾重、脾有核细胞数、NK细胞活性、ADCC活性及牌细胞IL－2活性均受到一定抑制，但如加用地龙提取液治疗，则未见任何免疫抑制作用，甚至有所提高，提示对机体免疫功能都有一定的促进作用。小鼠每日灌服地龙提取物，可使尾血中吞噬细胞化学发光增强，提示可增强吞噬功能；荷瘤（S180）小鼠NK细胞活性下降，如灌服地龙提取物8d，则NK活性基本恢复。肿瘤患者服用地龙提取物2个月，采用系列抗入淋巴细胞及其亚群单克隆抗体（McAb），用间接免疫荧光法检测T3，T4，T8，T4/T8，Tb，Tac，B细胞亚群的值，服地龙提取物者可提高T3，T4及T4/T8及，提示其为一种免疫增强剂。接受放射治疗的食管癌患者眼地龙提取物150mg，每日2次，能控制患者白细胞下降，效果优于免疫增强刑多抗甲素（polyactin A）。荷瘤（S180）小鼠每日灌服地龙提。取物100mg/kg，连续7d，能使因荷瘤而增加荧光产物（直接反映体内脂质过氧化速率）含量降低，血中谷优甘肽还原酶（GR）、过氧化氢酶（CAT）、谷优甘肽过氧化物酶（GSH-Px）动和超氧化物歧化酶（SOD）的活性则增加，提示地龙提取物有清除自由基、抗脂质过氧化的作用。但体外试验却证明，地龙提取物与激光、血叶淋衍生物对S180癌细胞具有协同杀伤作用，化学发光强度也明显增高，如将自由基清除剂CAT和SOD加入培养基内，则使增强的发光强度明显减小，提示地龙提取物的协同作用至少部分是通过增加活性氧而实现的。 豚鼠腹腔注射地龙液（每1ml含鲜地龙约0.75g/ml）2ml，对卵蛋白引起的过敏性哮喘潜伏期明显延长，吸入组胺引起的哮喘潜伏期也明显延长，但对吸入乙酸胆碱引起的哮喘则无影响。大鼠腹腔注射地龙液2ml，连续3d对卵蛋白引起的被动皮肤过敏反应有抑制作用。在体外，地龙液8×10-7g/ml浓度对豚鼠离体气管由组胺引起的收缩有明显抑制作用。从蚯蚓提出的含氮成分对大鼠、家兔肺灌注法有显著扩张支气管作用，并能对抗组胺和毛果美香碱引起的支气管收缩。静注于豚鼠，50%动物可耐受致死量组胺。认为地龙的某种组分可阻滞组胺受体，对抗组胺使气管痉挛及增加毛细血管通透性的作用，此为平喘的主要机制。 蚯蚓3%醋酸提取物、2.5%硫酸提取物。84%乙醇及石油醚提取物在体外对人型结核杆菌有较强抑制作用，由3%醋酸提取的两种物质抑制人型结核杆菌的最稀释位数分别为100信及70倍，2.5%硫酸提取物的最高稀释倍数为100倍，此三种提取物均耐热；84%乙醇及五油醚提取物的最高稀释倍数均为3200倍，但不耐热。地龙提取物在体外对小鼠和人的精子均有快速杀灭作用，其中的蜕拍酸、透明质酸能迅速使精子制动、凝集，并使其结构受到破坏。地龙提取液外用对局限性硬皮病有效，经生化分析提取物具有特异性降解胶原纤维的胶原酶，其疗效很可能是局部变性胶原纤维降解所致。

畜牧兽医本科生毕业论文

随着时代的不断变化与发展,我国传统的畜牧行业展开了相应的改革,我国的畜牧兽医行业也有了进一步的提升。下文是我为大家整理的关于畜牧兽医本科生毕业论文下载的范文，欢迎大家阅读参考!

浅析猪常见传染性疾病临床症状和预防治疗方法

1 猪副伤寒病

本病主要侵害 1～4 月龄仔猪，一年四季均可发生，但阴雨潮湿季节多发。病猪和带菌猪是主要传染源，可从粪、尿、乳汁、流产的胎儿、胎衣、羊水排菌，主要经消化道感染。在子宫内也可能感染。健康猪带菌相当普遍，当受外界不良因素影响以及抵抗力下降时，常导致内源性感染。主要特征是腹泻、下痢，若不及时准确治疗，很快就脱水死亡，死亡率高，经济损失大。

1.1 猪副伤寒病的症状

急性型：多发生于断乳前后的仔猪，常突然死亡。病程稍长，体温高达 41℃～42℃，腹泻，下痢，呼吸困难，耳根、胸前、腹下皮肤有紫斑，多以死亡告终。

亚急性和慢性型：表现体温升高，眼结膜发炎，有脓性分泌物。初便秘后腹泻，排灰白色或黄绿色恶臭粪便。病猪消瘦，皮肤有痂状湿疹。病程可达数周，最终死亡或僵猪。

1.2 防治措施

预防：加强防疫注射或投喂副伤寒苗。把好猪源关，自繁自养极佳。改善饲管及卫生条件，消除发病诱因，增强仔猪抵抗力。常洗用具、食槽，保持圈舍清洁、干燥，不留粪尿，以减少感染机会。

哺乳及培育仔猪防止舔食脏物，喂优质、易消化饲料，勿突然更换饲料。

治疗：肌注恩诺沙星、盐酸环丙沙星，服土霉素片;肌注氯霉素、庆大霉素，服土霉素片;肌注氯霉素、磺胺嘧啶钠，服土霉素片;肌注恩诺沙星、氯霉素，服土霉素片;盐酸环丙沙星、氯霉素，服土霉素片。

2 猪肺疫病

猪肺疫是多杀性巴氏杆菌感染引起的一种急性、败血性传染病，各龄猪均可感染发病，其特征是急性病例呈败血症死亡。本病对多种动物和人均有致病性，猪最易感，季节性不明显，以冷热交替，气候剧变，高温，潮湿，多雨季节多发。营养不良、长途运输、饲养条件不良等因素促进本病发生, 一般呈散发性或地方性流行。

2.1 猪肺疫的症状

急性病例高热达 41℃~42℃，呼吸困难，犬坐姿势，咳喘，口鼻流泡沫或清液，咽喉部急性肿大、红色、触诊坚硬有热痛感。腹侧、四肢内侧皮肤发红斑，指压褪色，终呼吸困难窒息而死;慢性病例主要呈现慢性肺炎、慢性胃肠炎症状，鼻流脓性分泌物，持续性咳嗽、呼吸困难，食欲不振，伴腹泻消瘦。

2.2 防治措施

预防：定期注射猪肺疫苗;把好猪源关;猪舍定期消毒，保持干燥、卫生、通风;发现病例及时隔离治疗。

治疗：静注磺胺嘧啶钠。肌注长效土霉素、恩诺沙星或卡那霉素，若并发它病要对症治疗。

3 猪传染性胸膜肺炎

病原是胸膜肺炎放线杆菌，各龄猪均易感，多发于 6 周龄至6 月龄猪。长途运输、饲管不当、气候骤变等因素可引发本病。病猪和带菌猪为主要传染源，主要经呼吸道气流感染。

3.1 猪传染性胸膜肺炎的症状

感染猪潜伏期 1～7 天。按病程长短分最急性型、急性型、亚急性型和慢性型。最急性型病猪突然死亡，死前无征兆，死猪腹部、耳、四肢发绀，口鼻流带血红色泡沫，死亡率高达 80%～100%。急性型病猪减食或废绝，体温 41℃左右，常站立或呈犬坐姿势不卧，精神沉郁，耳鼻、四肢皮肤呈蓝紫色，张口伸舌，喘，间歇性咳嗽，呼吸困难，表情极痛苦，常于 24 小时内病重窒息死亡，部分转为亚急性或慢性。亚急性型或慢性型病猪体温正常或稍高，咳喘，食欲减退，消瘦，病程延长或进一步恶化。

3.2 防治方法

预防：加强防疫，定期注射胸膜肺炎多价灭活苗;严把猪源关;强化饲养管理;严格消毒制度，保持圈舍清洁、干燥、通风;实行全进全出的饲养方式，发现病猪及时隔离治疗。

治疗：本病早期治疗效果较好，用药量要大。首选静注磺胺嘧啶钠，肌注长效土霉素、恩诺沙星或(卡那霉素、丁胺卡那霉素)。

可同时使用维 C、地米效果会更好。若并发其他病要对症治疗。

4 猪口蹄疫

口蹄疫属于一种急性、烈性的传染病，猪、牛、羊等偶蹄动物均易感染，本病传染性很强，无明显季节性，一年四季均可发生。以流涎，跛行，口腔、鼻盘、蹄部水疱为主要特征。

4.1 猪口蹄疫的症状

患病猪体温升高，全身症状明显，流涎，跛行，喜卧，鼻盘、口腔、齿龈、舌、乳房(主要是哺乳母猪)，蹄冠、蹄叉、蹄踵均会产生水疱，疱溃后、流脓血而形成烂斑，重者蹄壳脱落，病仔猪可因停食、肠炎腹泻等死亡。

4.2 防治方法

若发现猪患上口蹄疫，一定要上报动物检疫部门，不能隐瞒、出售、私屠乱宰;对病死猪要作焚烧、深埋等无害化处理;对圈舍、用具、槽子等进行严格的清洗消毒，以免口蹄疫经空气、污物、病肉等传播，传染给其他家畜甚至人。该病危害极大，无法根治，只能预防。因此预防十分关键，广大养殖户要十分重视，定期注射口蹄疫苗，切勿心存侥幸，造成重大经济损失。

5 猪丹毒病

该病是由猪丹毒杆菌引起猪的一种传染病。多发生在夏秋和梅雨季节，2 月龄以上猪最易感染。病猪潜伏期短的为 3~5 天，长的达半月之久。主要特征是在耳后、颈部、胸、腹侧等部位，皮肤出现各种形状红斑或疹块，呼吸困难，病死率很高，对养猪业危害很大。

5.1 猪丹毒病的症状

该病分为败血型、疹块型和慢性型。患猪体温升高，精神不振，食欲减退或废绝，口渴，大便干燥。在耳根、胸、背部、腹部、大腿上均出现形状不一、大小不一、界限明显、扁平肿胀的紫红色疹块，指按褪色。

5.2 防治措施

预防：定期预防注射猪丹毒苗。强化消毒制度，搞好圈舍卫生。严把猪源关，新购进的猪应隔离饲养一周，确定正常后再入圈喂养。

治疗：静注磺胺嘧啶钠，用复方氨基比林或安乃近 10~20 毫升稀释青霉素肌注，每天 2 次;中药疗法可用大黄、石膏、玄参、知母、连翘、地龙各 25 克，甘草 15 克，加水煎服 2 剂。

浅谈奶牛乳腺炎治疗新策略研究进展

乳腺炎(mastitis)是奶牛最常见的生产性疾病，给奶牛业造成了巨大的经济损失[1].奶牛乳腺炎分临床型和隐性乳腺炎两种，临床型乳腺炎以乳房红肿热痛、乳腺组织损伤为主要特征[2],而隐性乳腺炎虽无可见临床症状，但在大部分牛场存在，危害更大。奶牛罹患乳腺炎后，引起乳腺上皮细胞合成和分泌功能不同程度障碍，乳脂肪、乳蛋白和乳糖等主要乳成分合成量明显减少[3],造成牛奶品质显着下降。研究证实，综合评估各种因素造成的损失，奶产量及奶品质下降造成的损失占总损失的49%[1].

国内常见的奶牛乳腺炎治疗方法是使用抗生素，但由于乳腺炎病原菌种类多，乳腺感染致病机制复杂，其治疗效果不理想。长时间大剂量使用抗生素极易导致耐药菌株增多、乳中抗生素残留等问题，严重威胁乳品及生命安全。因此，开发能快速修复乳腺组织，恢复产奶量、提高奶品质的治疗方法迫在眉睫。

研究表明，乳酸链球菌素、Aegis溶菌酶、溶葡萄球菌酶、CpG-DNA、血小板浓缩液新型乳腺炎治疗制剂可用于奶牛乳腺炎临床治疗。另外，激素、调控乳腺细胞信号通路及嗜中性粒细胞数量等新型治疗策略也为快速高效防治乳腺炎提供了良好前景。

1治疗乳腺炎的新制剂

1.1乳酸链球菌素

乳酸链球菌素 (Nisin)又称乳球菌肽或乳链菌肽，是从乳酸链球菌发酵物中提取的一种多肽抗菌类物质，已被证明是一种安全天然生物性食品防腐剂和抗菌剂[4].Nisin最先作为牛乳房乳头的一种消毒剂使用，具有良好的杀菌作用且无潜在组织损伤。Nisin作为乳腺炎治疗药物的主要作用机理是其吸附于细胞膜上以后，破坏细胞膜的完整性，引起细胞裂解及细胞内蛋白大量外泄，致病原菌死亡[5].

另外的研究也证实，Nisin在肺炎链球菌感染小鼠模型的治疗中，也起到良好的杀菌作用。从临床型奶牛乳腺炎分离出金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和无乳链球菌的药敏试验结果可见，Nisin能够有效抑制这两种细菌的生长和繁殖[4].曹立亭等[6]使用Nisin乳腺灌注治疗临床型乳腺炎，测定治疗前后牛奶中乳脂肪含量、非脂乳固体含量、牛奶蛋白质含量、奶牛泌乳性能等指标，治疗后奶牛所产牛乳的上述指标均显着提高，提示使用Nisin可促进乳腺上皮细胞合成乳成分的能力增强及乳腺组织修复。Szweda P等[7]分离出37株牛乳腺炎源耐药菌株，药敏结果显示其中21株对Nisin敏感，进一步证明Nisin具有良好的杀菌作用。

1.2 Aegis溶菌酶

Aegis溶菌酶是一种有效的抗菌剂，能切断肽聚糖中N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-l,4糖苷键，破坏肽聚糖支架，在内部渗透压的作用下致细胞胀裂，引起细菌裂解[8].通过对比溶菌酶和头孢唑啉钠治疗临床型乳腺炎的治疗效果试验，溶菌酶组给药24h后乳清中丙二醛(malondialde-hyde,MDA)含量显着降低，揭示溶菌酶能抑制和清除炎症时产生的氧自由基，从而减少对乳腺细胞的损伤[9].进一步研究证实，鸡蛋清溶菌酶、鸭蛋清溶菌酶、10%溶菌酶制剂、细菌性溶菌酶对引起奶牛乳腺炎的葡萄球菌均有抑制作用[10],细菌性溶菌酶治疗效果最好，最有希望用来治疗细菌性乳房炎。

沈诚等[11]将人溶菌酶重组质粒pcDNAKLYZ乳腺灌注治疗隐性乳腺炎奶牛，比较灌注前后牛乳中的细菌阴性率，灌注前阴性率为0,灌注后阴性率为51.92%,显示重组质粒抑菌效果显着，该重组质粒对奶牛隐性乳腺炎具有较好的治疗效果。

1.3溶葡萄球菌酶

溶葡萄球菌酶(lysostaphin)是一种从模仿葡萄球菌(ns)中分离获得的含Zn2+内切肽酶，因能有效的清除金黄色葡萄球菌生物被膜而达到杀菌作用[12].Aguinaga A等[13]使用溶葡萄球菌酶和不同抗生素单独和联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant ,MRSA)和甲氧西林敏感菌(methicillin-susceptible ,MSSA)的研究报告中显示，溶葡球菌酶跟抗生素联合使用比单独使用抗生素，具有较强的杀菌作用并且致MSSA及MRSA菌株的抗生素使用浓度分别降低了2倍~11倍和2倍~14倍。在另一研究中，用MRSA建立小鼠肺炎模型，分别应用不同剂量的溶葡萄球菌酶、万古霉素和PBS进行感染后治疗，结果显示溶葡萄球菌组具有低病死率、肺组织损伤减少、感 染 部 位 细 菌 数 较 少 特 征，并 成 剂 量 依 赖性[14].

Szweda P等[7]研究同时也指出耐药菌对溶葡球菌酶的最小抑菌浓度(minimal inhibitory con-centration,MIC)为0.008μg/mL~0.5μg/mL,远远小于MIC最大值32μg/mL,且所有耐药菌对溶葡萄球菌酶敏感。蒋司嘉等[15]使用低、中、高重组溶葡球菌酶粉治疗85头患乳房炎奶牛的104个乳区，试验结果表明低中高剂量重组溶葡萄球菌酶均能有效清除感染乳区的链球菌、葡萄球菌、化脓隐秘杆菌等革兰阳性菌，大幅降低牛奶中的白细胞数，提高日产奶量。不同剂量的重组溶葡萄球菌酶治疗隐性乳房炎、临床型乳房炎的有效率和治愈率都优于青霉素，治疗效果跟剂量呈正相关。

1.4 CpG-DNA

CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以未甲基化的CpG基序为核心的DNA序列，它包括含CpG基序的人工合成的CpG-ODN和自然界中低等生物的基因组DNA[16].在由大肠埃希菌建立的山羊乳腺炎模型中，试验组乳腺组织中大肠埃希菌数显着低于对照组，CpG-ODN对大肠埃希菌诱导山羊乳腺炎的乳腺有保护作用[17].在分别由金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌诱导的大鼠乳腺炎中，使用CpG-DNA的试验组乳腺组织白细胞介素-6(in-terleukine-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(tumor necro-sis factor-ɑ，TNF-ɑ)和CpG-DNA特 异 性 受 体TLR-9(Toll-like receptor-9)mRNA表达水平较对照组显着提高，同时减轻炎症反应和炎症介质对组织的损伤，提示CpG-DNA具有乳腺保护作用，其作用机理可能为CpG-DNA与宿主体内天然免疫细胞上的模 式 识 别 受 体 相 结 合，引 起 相 应 的 免 疫 应答[18].

1.5血小板浓缩液

血小板最常见的作用是在血管损伤部位聚集，形成凝血酶原和纤维蛋白原组成凝血表面从而达到止血作用[19].Pinto J M等[20]通过使用血小板浓缩液治疗一例人慢性皮肤溃疡，观察到肉芽组织增生，提示治疗有效，可能原因是血小板作为生长因子的载体刺激胶原蛋白产生、活化成纤维细胞和诱导细胞外基质重塑达到修复组织损伤作用。

Lange-Con-siglio A等[21]使用血小板浓缩液灌注感染乳腺，通过感染乳腺乳汁体细胞数和细菌数评估治疗效果，结果显示使用血小板浓缩液能显着降低牛乳中体细胞数和细菌数，血小板浓缩液在促进炎症消散、减少乳腺实质损伤、降低乳腺炎复发率方面有较好作用。进一步研究证实血小板浓缩液不仅对乳腺组织有修复作用，对奶牛乳腺炎病原菌也有抑制作用。

Bi-elecki T M等[22]采用Kirby-Baue纸片扩散法，观察到人富含血小板的血浆的琼脂平板可以显着抑制金黄色 葡 萄 球 菌 及 大 肠 埃 希 菌 的 生 长。

Marian E等[23]从事的另一项研究不仅验证了上述研究结果，而且显示血小板浓缩液对铜绿假单胞菌也有抑制作用。一项乳腺炎流行病学调查的研究显示，金黄色葡萄球菌乳腺炎发病率为16.3%,大肠埃希菌乳腺炎发病率引起的为25.2%[24],因此有望使用血小板浓缩液治疗由条件致病菌引起的乳腺炎。

2乳腺炎治疗新策略研究进展

2.1激素调控乳腺细胞的分泌及修复

激素在生殖生理方面应用广泛，乳腺的生长发育和分泌功能均在大脑皮层和丘脑下部的调节下进行，多种内分泌激素发挥着重要作用[25-26].佟慧丽等[27]建立正常培养的奶山羊乳腺上皮细胞系，用催乳素处理体外培养乳腺上皮细胞，测定催乳素处理组乳腺上皮细胞乳糖和总蛋白水平，显示催乳素诱导乳腺上皮细胞乳糖及乳蛋白分泌水平明显升高。

陈建晖等[28]使用催乳素和孕酮处理奶牛乳腺上皮细胞系，测定处理后细胞中的酪蛋白和乳糖含量，显示催乳素处理组升高趋势显着，提示催乳素可以提高乳腺干细胞的数量。激素已被证实有助于提高乳腺细胞分泌能力，提高牛乳品质，促进乳腺组织恢复，但应用方法及其作用机制有待进一步研究。

2.2调控乳腺细胞凋亡及相关信号通路的研究

研究证实乳腺炎的发生发展与乳腺细胞的凋亡及信号通路关系密切，肖阳[29]使用TUNNEL方法检测奶牛不同发育时期乳腺组织的细胞凋亡，证实泌乳晚期凋亡信号最强。乳腺细胞的分化、更新及凋亡与信号通路的调控联系紧密，与此相关的信号通路包括Wnt信号通路、Notch信号通路、Hedge-hog信号通路[26].Wnt信号通路中，β-catenin可以启动Wnt靶基因的表达;抑制β-catenin信号，乳腺细胞分化和增殖被抑制，Notch信号通路的激活能够促进乳腺细胞的自我更新，而Notch的过量表达会抑制细胞的分化。研究表明不同形式的TP63激活Hedgehog信号通路可促进乳腺细胞的有丝分裂[30].张雯[31]使用脂多糖(LPS)诱导的原代小鼠乳腺上皮细胞炎症模型，检测LPS刺激下细胞因子和炎性介质的分泌以及常见的两条炎症信号转导通路NF-κB和MAPK的变化，结果显示LPS刺激下，乳腺上皮细胞TRL4、NF-κB和下游细胞因子表达升高，显着抑制了p38、JNK和ERK、MAPKs磷酸化。分析各信号通路在乳腺细胞分化更新及凋亡中的机制，精细调控乳腺细胞凋亡也有望成为治疗乳腺炎的新方向。

2.3调控乳腺组织嗜中性粒细胞数量的研究

金黄色葡萄球菌()等致病菌侵入奶牛乳腺后，中性粒细胞向感染乳腺组织集中，发挥吞噬功能清除病原，充当保护机体的第一道防线[32].然而，如果PMN在炎症灶过度激活或延迟清除，大量PMN可以通过释放氧自由基等有害内容物加重炎症反应，使炎症迁延、慢性化或扩散至全身[33].因此适时适度清除PMN对于控制乳腺炎症的发展和转归至关重要。

Wang Y等[34]使用650nm,2.5mW,30mW/cm2低强度激光疗法作用LPS诱导的大鼠乳腺炎模型，经低强度激光疗法后，抑制PMN向乳腺腺泡聚集，降低髓过氧化物酶活性，从而减轻乳腺炎症反应。另一项研究证实，日粮中硒含量与乳腺中PMN数量直接相关，LPS诱导的小鼠乳腺炎的病理学切片显示，缺硒小鼠乳腺出现较多PMN浸润、乳腺中组织中促炎因子表达水平高于正常硒含量组小鼠，因此有望通过调控日粮中硒含量，调节乳腺中PMN数量，进而防治奶牛乳腺炎[32].

综上所述，乳腺炎是一种严重危害奶牛业的疾病，抗生素治疗乳腺炎由于其天然局限性，治疗效果并不理想。乳腺炎防治新制剂乳酸链球菌素、Aegis溶菌酶、溶葡萄球菌酶、CpG-DNA、血小板浓缩液有望替代传统治疗药物;激素疗法、调控信号通路及PMN数量有望作为预防治疗乳腺炎的新策略。积极开展牛乳腺炎治疗新制剂及新策略的研究，为高效防控奶牛乳腺炎提供良好条件。

参考文献：

[1]Sinha M K,Thombare N N,Mondal nical mastitis indairy animals:incidence,economics,and predisposing factors[J].Sci World J,2014::10.1155/2014/523984.

[2]宋亚攀，杨利国。中国奶牛乳腺炎防治研究进展[J].中国奶牛，2010(12)：48-54.

[3]张勇，杨永新，赵兴绪。临床型奶牛乳腺炎乳腺组织的比较蛋白质组研究[J].中国农业科学，2009,42(4)：1442-1446.