负链RNA病毒的反向遗传技术 (1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室，甘肃兰州 730046；2.西藏自治区农牧科学院畜牧兽医研究所，西藏拉萨 850000) 摘 要：反向遗传技术是一种新的分子生物学技术，它在深入研究负链RNA病毒基因组结构和功能，探寻其基因组复制、转录和研发新型基因工程疫苗上发挥着重要的作用。文章介绍了分节与不分节负链RNA病毒的复制机理和特征，论述了反向遗传学在研究这些病毒上的策略、最新研究进展及其主要影响拯救效率的因素，进一步涉及了负链RNA病毒载体及其重组病毒的研究动态。因此，通过反向遗传学，人们将更加了解负链RNA病毒，为科学利用和有效控制该病毒奠定基础。 关键词：反向遗传学；负链RNA病毒；病毒载体 反向遗传(Reverse genetic)技术作为一项新型技术，是从克隆的cDNA产生感染性RNA病毒的过程，实现了在cDNA 水平上对RNA病毒的操作，从而为病毒的功能基因组研究提供了强有力的手段。相对来说，这项技术更易用于正链(Positive-strand)RNA病毒，从cDNA水平对其基因组进行操作，拯救感染性病毒。负链(Negative-strand，NS)RNA病毒，如埃博拉病毒、马尔堡病毒、汉坦病毒、拉沙病毒、克里木-刚果出血热病毒等，这些病原体由于存在独特的生物学特性，给病毒的拯救带来了一些困难，另外，它们引起的疫病具有发病率高和死亡率高的特点，因此，对负链RNA病毒的研究就显得尤为重要。目前已将反向遗传技术应用到该类病毒研究中去，在这些病毒基因组的结构和功能，表达调控机制以及致病机理等方面，产生了深远影响。 1 负链RNA病毒的复制机理 负链RNA病毒有7个病毒科[1]，即弹状病毒科、副黏病毒科、丝状病毒科、博尔纳病毒科、正黏病毒科、布尼病毒科和沙粒病毒科。其中，前4科病毒为不分节段的单股负链RNA病毒，后3科病毒为分节段的负链RNA病毒，分别含有6个～8个、3个、2个负链RNA片段。 无论是分节(segmented negative-strand，SNS)，还是不分节(non-segmented negative-strand，NNS)负链RNA病毒，都有共同的特性，它们都是包膜病毒，复制在胞质中进行，产生的mRNA是不经剪接的。正黏科病毒和博尔纳科病毒除外，它们转录和复制是在核仁中进行，有些mRNAs也需剪接。对传统mRNA正义链来说，负链RNA病毒基因组和“互补”基因组的RNAs是用核蛋白(N或NP)衣壳来包裹，共同转录形成螺旋对称N-RNA模板，与不同量的聚合酶蛋白(副黏病毒、弹状病毒、博尔纳病毒的大L蛋白和磷蛋白P，丝状病毒、爱博拉病毒的L、VP30、VP35，沙粒病毒和布尼病毒的L蛋白，流感病毒的PA、PB1、PB2)结合，构成一个最小的复制启动复合体(也称核糖核蛋白复合体，RNP)，一旦功能性RNP复合体形成，转录、复制、病毒增殖也就开始启动。 负链RNA病毒通过其病毒粒子表面的糖蛋白与宿主细胞的受体结合，随后发生病毒的囊膜与胞浆膜(pH非依赖性途径)或内体膜(pH依赖途径)的融合，然后将病毒的核糖核蛋白(RNP)复合体释放到细胞质中，RNP复合体由病毒RNA、核蛋白(它包裹着病毒RNA)以及病毒聚合酶复合物组成。在转录过程中，首先由病毒携带的RNA-RNA聚合酶从病毒基因组(－RNA)转录出mRNA，再翻译产生所需要的酶和结构蛋白；在复制过程中，转录出与病毒基因组长度一致的＋RNA，它可以作为模板合成病毒的RNA。大多数的负链RNA病毒是在被感染细胞的胞质中复制的，而波那病毒和正黏病毒则是在细胞核中复制的，因此对后者而言，RNP复合体以及新合成的NP和聚合酶蛋白必须运输到细胞核，而新合成的RNP复合体则是又从细胞核中运输到细胞质中，以便新合成的RNP复合体在细胞质膜上或高尔基复合体膜上与病毒的结构蛋白装配在一起，随后释放出新合成的病毒。 SNS-RNA病毒与NNS-RNA病毒明显区别是在它们的复制和mRNA转录机制上，SNS病毒的每节代表一个独立的转录、复制单位，每节3′末端、5′末端的核苷酸都是保守的，显示出部分反向互补性，这就导致了碱基对末端一起形成有功能的核心启动子，复制开始是从基因组(vRNA)和“互补”基因组(cRNA)的3′端到产生全长复制子为止。对NNS病毒来说，它们的转录开始仅仅在vRNA模板上，不履行此规则的是沙粒病毒和部分的布尼病毒科病毒[2]。 2 反向遗传技术在负链RNA病毒上的研究策略 无论是来自cDNA，还是合成的RNA，负链RNA病毒的拯救都不同于正链RNA病毒，具体表现在：(1)负链病毒复制开始需要蛋白质从头合成，此过程是受它们自己依赖于RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase， RdRp)影响；(2)被导入基因组和“互补”基因组RNA在作为功能模板链激发转录/复制之前，需要被病毒核蛋白衣壳包裹。尽管如此，人们采取了一些策略，仍然得到了一些负链RNA病毒的感染性分子克隆，如狂犬病病毒、牛瘟病毒、新城疫病毒等，并根据不同的研究目的，在DNA水平上进行体外操作，方法有基因敲除、基因缺失、基因插入、基因置换以及构建嵌合病毒等。 从cDNA克隆中得到具有感染性的负链RNA病毒，需要建立一个微型复制系统，这样才能使新生的RNA衣壳化以及加工下游序列。在此系统中，常利用T7 RNA聚合酶，以病毒基因组的cDNA为模板合成负链RNA病毒的RNA，然后再将这种人工病毒RNA转染已被辅助病毒感染过的真核细胞，即可得到含有人工RNA的病毒。现使用这个系统已成功拯救了一些小基因组的报告基因，如：仙台病毒(SEV)和呼吸道合胞病毒(RSV)。 拯救全长感染性cDNA是很复杂，技术含量高，在获得感染性病毒介导的cDNA之前，需要构建NNS和SNS病毒的功能性小基因组[3]，小基因组长度小，易于操作。在拯救中有些因素决定着拯救的效果与成败。负链RNA病毒的非编码末端附近，通常带有一个单一报告基因开放阅读框，在构建感染性重组病毒中，它们是非常有用的替代序列，影响着拯救病毒的成败；野型T7启动子控制着拯救的效率，当删除T7启动序列，大多数病毒的拯救效率就会提高，如当丁型肝炎病毒核酶5′端自我切割产生准确3′病毒末端时，就提高了拯救效率；一个更深的观点认为，大多数副黏病毒基因组或基因组类似物要具有功能，需要服从六法则，大多数副黏病毒的有效复制只有在其核苷酸的总数可被6除尽时才能观察到，我们称之为“六法则”[4]，即核酸蛋白与精确的6核苷酸发生相互作用。为了表达T7，一些科学家使用CMV增强子/启动子元件或鸡β-actin启动子控制的表达载体和稳定表达T7聚合酶的细胞系作为替换物，但结果不理想。最近，使用RNA聚合酶Ⅰ(PolⅡ)，克服了T7启动系统的大多数缺点。Yanai H等[5]在反向遗传系统中使用RNA PolⅡ启动子，研究Borna病毒小基因组表达的有效性，发现，在缺少SV40 T抗原的细胞中，SV40核酸序列插入PolⅡ中能有效提高小基因组的复制。 NNS和SNS病毒的拯救仍需以“互补”基因组构建体为基础，1994年，第一次成功拯救到了NS RNA病毒(棒状病毒、狂犬病毒)，该方法成功的关键因素在于能从cDNA克隆中合成正链“互补”基因组RNA。2001年，为了蛋白的表达和vRNA的转录，使用T7和PolⅠ驱动体系拯救了一个6节段的Thogoto病毒[6]。Flick R等[7]以小基因组拯救系统(一些布尼病毒如CCHF、Uukuniemi、Hanaan和Borna病毒)为基础，已广泛地使用PolⅠ系统，此系统对拯救RNA病毒是否有效仍需进一步证实。 3 反向遗传系统的应用 3.1 NS RNA病毒 反向遗传学的研究，扩大了我们对RNA病毒分子生物学和发病机理的认识。在控制病毒生命周期方面，小基因组的研究显得尤为重要，主要有顺式反应元件的位置、启动区的二级结构、反式作用因子的功能区、基因组和“互补”基因组启动子的相对强度等。反向遗传分析已被成功地应用于RNA病毒顺式作用元件的确定和鉴定上，通过对NNS和SNS病毒小基因组的研究表明，控制转录、复制、衣壳化、包装的顺式作用元件位于3′端和5′端非编码核苷酸序列；流感病毒每个节段末端12个～13个核苷酸相互作用构成影响病毒增殖的基本核心启动子，相邻非编码核苷酸具有最佳复制效率。Li Z等[8]用反向遗传技术构建禽流感病毒重组体，一个是插入DKGX/22(无致病性)的一个基因，另外是插入DKGX/35(高度致病)7个基因片段，接种鼠后，结果证实PB2上的第701位点的氨基酸在感染动物上是一个很重要的部位。 由于缺乏对启动子结构知识，同源聚合酶对RNA选择/识别机制的研究就显得特别困难；启动子元件基本核苷酸的替换是否会破坏RNA的必要结构，还是影响模板和聚合酶间优先核苷酸特殊反应，还不清楚。尽管存在这些不足，但通过对A型流感病毒启动子的具体分析，基本了解了链内结构和启动病毒复制必需模板与聚合酶反应机理。根据核苷酸替换机制，Flick和他的同事已经描述了一个独特的病毒RNA启动区“corkscrew”构象，此构象包括远端的一个6碱基对杆构造和2个链内碱基配对茎-环结构，单替换和双互补诱变表现出结构不变的核苷是稀少的，保持此区域结构完整性极为重要，这个不变核苷位于四核苷酸环结构上，可能有助于与聚合酶复合蛋白反应，最近和以前的研究也证实了“corkscrew”构象[9]，它比此病毒以前预想的启动模型要更为复杂，具有锅柄和叉结构。 3.2 重组病毒载体 负链RNA病毒的特殊生物学特性使得它们最有希望用作载体：①它们不能通过DNA介导进行复制，所以RNA病毒的基因组不会整合到宿主基因组中；②这类病毒的大多数成员都能产生很高的病毒滴度；③能容纳外源基因并高水平地表达蛋白或肽段；④负链RNA病毒做载体可以刺激宿主产生较强的细胞免疫和体液免疫。 重组病毒能稳定表达外源基因物质，由此产生了新的治疗观念和树立了疫病防治范例[10]。副黏病毒和弹状病毒特别适合于外源遗传物质的稳定插入。这些病毒能够容纳、表达上至5 kb大小外源遗传物质，这样就有可能制造二价苗，甚至多价苗。另外，经过其他基因终止和起始信号的导入，能相当容易地实现插入其他转录单位，最终插入位点的精确选择控制着此插入基因的表达水平。重组病毒广泛用于载体，如麻疹疫苗病毒用于弱毒疫苗已经有长期的安全纪录，其他病毒如SEV和VSV疫苗病毒，被考虑对人类无致病性，因为这些病毒的生命周期只局限于细胞质，因此，无携带危险，现已作为载体而被广泛使用。 3.3 重组病毒在疫苗上的研究 在重组病毒制造弱毒疫苗中，插入一些突变序列到疫苗或野型毒株中，可产生出一些疫苗[11]，诱变多识别酶切位点成单一特殊酶识别的位点，引起毒性减弱，也可达到开发疫苗的目的。一些弱毒重组病毒毒力与非结构干扰素颉颃基因的改变或删除相关，这样改变的病毒因为减少或没有能力阻止宿主干扰素的影响，使其毒力减弱[12]，基因的重排也能引起毒性减弱。Veits J等[13]通过应用反向遗传学构建能表达H5亚型禽流感病毒血凝素的新城疫病毒，在它的融合基因和血凝素-神经氨酸酶基因之间插入一个开放阅读框，此阅读框能编码高致病禽流感病毒血凝素，结果是此重组体可表达出高水平的血凝素，由此认为，此重组体可用作抗新城疫病毒和禽流感的二价疫苗，也可用作控制禽流感的标记疫苗。Webster R G等[14]应用反向遗传学构建高活力的H5N3株禽流感病毒，当此株病毒灭火油乳疫苗中HA蛋白含量达到0.015 ng～1.2 ng，可使鸭子产生对H5N1禽流感病毒有效保护的作用。 3.4 重组病毒的其他应用 重组病毒也已用于其他领域，如预防、治疗和研究。目前，研究正热的一个领域就是对一些NS RNA病毒抗癌潜能的研究，特别是对VSV的研究，与其他病毒相比，它作为抗癌试剂存在一些优点，如改造后含有调整免疫反应和自杀盒的基因，这样就增大了它们的抗癌能力[15]。另外，也已开始应用假病毒替代高致病性病毒，例如，删除VSV突变体的G基因，可检测此病毒受体结合状况，相似地，一个带有汉坦或Seoul病毒包膜蛋白的假型VSV用作全病毒的有效替换物，为汉坦病毒的研究提出了一个安全可靠的分析方法[16]。重组的副黏病毒可能在基因治疗上也有一定的研究价值，因为与传统的反转录病毒和腺病毒载体相比，存在明显的几个优点，如在未分裂细胞(神经元细胞)中，SeV载体被用于有效表达外源基因[17]，转移有复制能力SeV载体介导基因到鼠肺部上皮细胞后，仍能有效表达。 4 结语 由于反向遗传技术的应用，对RNA病毒的研究已呈指数上升，为以前不可能研究的负链RNA病毒生物学和发病机理提供了新的思路，也打开了研制负链RNA病毒弱毒疫苗的大门。然而，它也呈现出一些问题，并产生了具有争论性的数据，其中一些与病毒或使用的实验系统不同有关，或可能是由于我们仍没有彻底了解机理有关，一些问题以前认为是已经得到了很好的阐述；但最近又出现了新问题、新情况，有报道称，A型流感病毒的包装信号延长到此病毒的编码区，这就表明，虽然NS RNA病毒能有效地促进转录、复制、衣壳化、包装[18]，但不能排除增强/调节这些功能的其他信号存在。原则上，转录和复制是从3′端靠近启动子开始，一项新的VSV研究则反驳了这样的观点，他们表示，没有前导RNA前面的转录，转录开始就在内部N基因起始位点，等等。因此，本领域的研究仍面临着挑战，还有大量的工作要做，有理由相信，伴随着反向遗传技术在负链RNA病毒上的不断深入研究，上述这些问题会得以科学解决，控制负链RNA病毒不会很遥远。
英文论文参考文献示例
无论在学习或是工作中，大家肯定对论文都不陌生吧，通过论文写作可以提高我们综合运用所学知识的能力。你写论文时总是无从下笔？以下是我收集整理的英文论文参考文献示例，供大家参考借鉴，希望可以帮助到有需要的朋友。
英语论文参考文献格式范本
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参考文献条目排列顺序：英文文献、中文文献、网络文献。分别按作者姓氏字母顺序排列。文献前不用序号。
1)英文参考文献
(1)专著与编著
排列顺序为：作者姓、名、专著名、出版地、出版社、出版年。
例如：
Brinkley, Alan. The Unfinished Nation. New York: Knopf, 1993.
专著名中如果还包含其他著作或作品名，后者用斜体。
例如：
Dunn, Richard J ed. Charlotte Bront: Jane Eyre. New York: Norton, 1971.
A.两个至三个作者
第一作者的姓在前，名在后，中间用逗号隔开;其余作者名在前，姓在后，中间无逗号;每个作者之间用逗号隔开，最后一个作者的姓名前用“and”，后用句号。
例如：
Rowe, Richard, and Larry Jeffus. The Essential Welder: Gas Metal Arc Welding Classroom Manual. Albany: Delmar, 2000.
B. 三个以上作者
第一作者姓名(姓在前，名在后，中间加逗号)后接“et al.”，其他作者姓名省略。
例如：
Randall, John et al. Fishes of the Great Barrier Reef and Coral Sea. Honolulu: University of Hawaii Press, 1997.
C. 同一作者同一年出版的不同文献，参照下例：
Widdowson, Henry G. EIL: Squaring the Circles. A Reply. London: Lomgman, 1998a.
Widdowson, Henry G. Communication and Community. Cambridge: Cambridge University Press, 1998b.
(2)论文集
参照下例：
Thompson, Pett. “Modal Verbs in Academic Writing”. In Ben Kettlemann & Marko, Henry ed. Teaching and Learning by Doing Corpus Analysis. New York: Rodopi, 2002: 305-323.
(3)百科全书等参考文献
参照下例：
Fagan, Jeffrey. “Gangs and Drugs”. Encyclopedia of Drugs, Alcohol and Addictive Behavior. New York: Macmillan, 2001.
(4)学术期刊论文
参照下例：
Murphy, Karen. “Meaningful Connections: Using Technology in Primary Classrooms”. Young Children. 2003, (6): 12-18.
(5)网络文献
参照下例：
----“Everything You Ever Wanted to Know About URL” .
2)中文参考文献
(1)专著
参照下例：
皮亚杰.结构主义[M].北京：商务印书馆，1984.
(2)期刊文章
参照下例：
杨忠，张韶杰.认知语音学中的类典型论[J].外语教学与研究，1999，(2)：1-3.
(3)学位论文
参照下例：
梁佳.大学英语四、六级测试试题现状的理论分析与问题研究[D].湖南大学，2002.
(4)论文集
参照下例：
许小纯.含义和话语结构[A].李红儒.外国语言与文学研究[C].哈尔滨：黑龙江人民出版社，1999：5-7.
(5)附录本
翻译学论文参考文献范例
参考文献：
奥马利 第二语言习得的学习策略上海：上海外语出版社，2001
陈保亚 20 世纪中国语言学方法论 济南：山东教育出版社，1999
丁言仁 英语语言学纲要 上海：上海外语出版社，2001
费尔迪南 德 索绪尔 普通语言学教程 长沙：湖南教育出版社，2001
冯翠华 英语修辞大全 北京：商务印书馆，1996
桂诗春，宁春言主编 语言学方法论 北京：外语教学与研究出版社，1998
桂诗春 应用语言学长沙：湖南教育出版社，1998
何兆熊 新编语用学概要 上海：上海外语教育出版社，2000
何自然 语用学与英语学习 上海：上海外语教育出版社，1997
侯维瑞 英语语体 上海：上海外语教育出版社，1988
胡壮麟 语言学教程(修订版)北京：北京大学出版社，2001
黄国文 语篇与语言的功能 北京：外语教学与研究出版社，2002
黄国文 语篇分析概要长沙：湖南教育出版社，1988
李延富主编 英语语言学基本读本 济南：山东大学出版社，1999
李运兴 语篇翻译引论 北京：中国对外翻译出版公司，2000
刘润清 西方语言学流派北京：外语教学与研究出版社，1999
刘润清等 现代语言学名著选读(上下册)北京：测绘出版社，1988
刘润清等 语言学入门 北京：人民教育出版社，1990
陆国强 现代英语词汇学(新版)上海：上海外语教育出版社，1999
拓展内容：
书写格式
1.参考文献标注的位置
2. 参考文献标标注方法和规则
3. 参考文献标标注的格式
2007年8月20日在清华大学召开的“综合性人文社会科学学术期刊编排规范研讨会”决定，2008年起开始部分刊物开始执行新的规范“综合性期刊文献引证技术规范”。该技术规范概括了文献引证的“注释”体例和“著者—出版年”体例。不再使用“参考文献”的说法。这两类文献著录或引证规范在中国影响较大，后者主要在层次较高的人文社会科学学术期刊中得到了应用。
⑴文后参考文献的著录规则为GB/T 7714-2005《文后参考文献著录规则》，适用于“著者和编辑编录的文后参考文献，而不能作为图书馆员、文献目录编制者以及索引编辑者使用的文献著录规则”。
⑵顺序编码制的具体编排方式。参考文献按照其在正文中出现的先后以阿拉伯数字连续编码，序号置于方括号内。一种文献被反复引用者，在正文中用同一序号标示。一般来说，引用一次的文献的页码（或页码范围）在文后参考文献中列出。格式为著作的“出版年”或期刊的“年，卷（期）”等+“：页码（或页码范围）.”。多次引用的文献，每处的页码或页码范围（有的刊物也将能指示引用文献位置的信息视为页码）分别列于每处参考文献的序号标注处，置于方括号后（仅列数字，不加“p”或“页”等前后文字、字符；页码范围中间的连线为半字线）并作上标。作为正文出现的参考文献序号后需加页码或页码范围的，该页码或页码范围也要作上标。作者和编辑需要仔细核对顺序编码制下的参考文献序号，做到序号与其所指示的文献同文后参考文献列表一致。另外，参考文献页码或页码范围也要准确无误。
⑶参考文献类型及文献类型，根据GB3469-83《文献类型与文献载体代码》规定，以单字母方式标识：
专著M ； 报纸N ；期刊J ；专利文献P；汇编G ；古籍O；技术标准S ；
学位论文D ；科技报告R；参考工具K ；检索工具W；档案B ；录音带A ；
图表Q；唱片L；产品样本X；录相带V；会议录C；中译文T；
乐谱I； 电影片Y；手稿H；微缩胶卷U ；幻灯片Z；微缩平片F；其他E。
书写技巧
把光标放在引用参考文献的地方，在菜单栏上选“插入|脚注和尾注”，弹出的对话框中选择“尾注”，点击“选项”按钮修改编号格式为阿拉伯数字，位置为“文档结尾”，确定后Word就在光标的地方插入了参考文献的`编号，并自动跳到文档尾部相应编号处请你键入参考文献的说明，在这里按参考文献著录表的格式添加相应文献。参考文献标注要求用中括号把编号括起来，以word2007为例，可以在插入尾注时先把光标移至需要插入尾注的地方，然后点击 引用-脚注下面的一个小箭头，在出现的对话框中有个自定义，然后输入中括号及数字，然后点插入，然后自动跳转到本节/本文档末端，此时再输入参考文献内容即可。
在文档中需要多次引用同一文献时，在第一次引用此文献时需要制作尾注，再次引用此文献时点“插入|交叉引用”，“引用类型”选“尾注”，引用内容为“尾注编号（带格式）”，然后选择相应的文献，插入即可。
不要以为已经搞定了，我们离成功还差一步。论文格式要求参考文献在正文之后，参考文献后还有发表论文情况说明、附录和致谢，而Word的尾注要么在文档的结尾，要么在“节”的结尾，这两种都不符合我们的要求。解决的方法似乎有点笨拙。首先删除尾注文本中所有的编号（我们不需要它，因为它的格式不对），然后选中所有尾注文本（参考文献说明文本），点“插入|书签”，命名为“参考文献文本”，添加到书签中。这样就把所有的参考文献文本做成了书签。在正文后新建一页，标题为“参考文献”，并设置好格式。光标移到标题下，选“插入|交叉引用”，“引用类型”为“书签”，点“参考文献文本”后插入，这样就把参考文献文本复制了一份。选中刚刚插入的文本，按格式要求修改字体字号等，并用项目编号进行自动编号。
打印文档时，尾注页同样会打印出来，而这几页是我们不需要的。当然，可以通过设置打印页码范围的方法不打印最后几页。这里有另外一种方法，如果你想多学一点东西，请接着往下看。
选中所有的尾注文本，点“格式|字体”，改为“隐藏文字”，切换到普通视图，选择“视图|脚注”，此时所有的尾注出现于窗口的下端，在“尾注”下拉列表框中选择“尾注分割符”，将默认的横线删除。同样的方法删除“尾注延续分割符”和“尾注延续标记”。删除页眉和页脚（包括分隔线），选择“视图|页眉和页脚”，首先删除文字，然后点击页眉页脚工具栏的“页面设置”按钮，在弹出的对话框上点“边框”，在“页面边框”选项卡，边框设置为“无”，应用范围为“本节”；“边框”选项卡的边框设置为“无”，应用范围为“段落”。切换到“页脚”，删除页码。选择“工具|选项”，在“打印”选项卡里确认不打印隐藏文字（Word默认）。
注：以上在word中的处理是比较常用的做法，不过作者需要了解，投稿稿件是word格式或pdf格式或wps格式，但是很多期刊是用方正排版系统排版的，二者不“兼容”。因此，作者的word投稿只是编辑部排版的原稿，排版问题作者无需太过担心；而作者如想要编辑部出刊前最后的电子稿（有些作者着急要清样或已经排版的电子稿）其实也没有太大意义，因为没有方正的软件就无法打开这个电子稿。
兽医文献索引和兽医通报简介 。。《中国兽医杂志》 兽医文献索引 （英国出版的还有...图书馆... 嗯这些够不够啊少年~
畜牧兽医毕业论文
畜牧兽医专业集中实践环节大纲
“一村一名大学生计划”是由教育部组织、由中央广播电视大学实施的面向农业、农村、农民的远程高等教育。所设特种动物养殖专业为农村培养社会主义建设需要的，德、智、体全面发展的，能从事特种动物养殖技术指导、生产操作及管理等工作的高等应用型专门人才。为保证“一村一名大学生计划”教学质量，培养农村第一线“留得住、用得上”的人才，落实教学计划，实现培养目标，保证集中实践环节的顺利进行，特制定本集中实践环节大纲。
畜牧兽医专业集中实践环节包括生产实习和毕业作业两部分。
一、目的要求
生产实习和毕业作业是重要的实践性教学环节，通过生产实习让学生将所学理论知识指导或应用于生产，使他们：(1)进一步明确专业思想，在理论与实际的结合中，联系群众、了解生产、了解技术的发展和应用;(2)提高实践技能，应用、验证、巩固、充实所学理论知识，加强理论与实践的结合;(3)提高学生发现问题、分析问题、解决问题的能力。
生产实习应根据当地生产实际及农时季节安排，将所学理论知识、技能综合应用于解决实际问题。中央电大提供集中实践环节大纲，试点单位按照大纲要求制定实施细则并组织实施，试点教学点按要求实施，并接受检查。
在生产实习结束前，学生应选定毕业作业题目;然后收集、查阅资料;并在5周内完成毕业作业。实习单位与指导教师根据学生实习表现填写生产实习鉴定表，并确定生产实习成绩。毕业作业指导小组(和指导教师)对毕业作业进行评定，确定成绩。生产实习或毕业作业成绩不及格者，不能取得毕业证书。
二、时间安排
本专业安排集中实践环节13周(13学分)，其中生产实习8周(8学分)，毕业作业5周(5学分)。 集中实践环节不得免修、免考。按照教学计划，一般将集中实践环节安排在最后一个学期，也可根据农时季节灵活安排。
三、生产实习的内容
l.根据实习单位的具体条件，可参加实习单位课题研究。学会调查研究、观察记载、收集数据与资料整理。进一步熟悉掌握有关养殖生产中养殖场建设、营养与饲料、繁育技术、畜禽环境卫生、主要疫病防治、畜禽产品初加工以及经营管理等方面的基础知识、基本理论。
2.通过参加实习单位的畜牧兽医生产活动，培养初步的独立分析问题及解决问题的能力，要求掌握以下内容：
(1)养殖场的选址及场地建设主要问题;
(2) 根据当地情况了解饲料配合和畜禽饲养管理技术;
(3) 掌握畜禽环境卫生知识;
(4) 畜禽加工产品加工处理的生产程序;
(5) 调查当地畜禽产品市场和流通情况;
(6) 掌握畜禽常见病的诊断和防治技术。
3.参加所在实习单位的技术推广及科学普及活动，以得到实际工作的锻炼。
4.积极参加所在实习单位的技术生产劳动，做好实习日记，牢固学农爱农的专业思想，培养艰苦奋斗的作风，积极参加社会调查，宣传党的路线、方针、政策，帮助农民科学致富。
四、集中实践环节的组织
1.各教学点应十分重视集中实践环节的组织，成立生产实习领导小组及毕业作业指导小组。根据学生及实习单位情况，将学生组成实习小组，并确定组长和指导教师。指导各组学生制定生产实习计划;
2.所有实习组织情况(包括实习计划、实习单位、指导教师、实习小组成员名单等)均报送上(省)级电大备案;
3.实习鉴定：生产实习完成后，应由实习单位和指导教师共同填写毕业实习鉴定表。表的内容包括
学生实习的起止时间、完成的具体实习工作内容、出勤及实习情况(工作态度、工作能力、工作成效)等，给以评语并评定等级(分优、良、及格、不及格四等);
4.毕业作业评定：毕业作业由指导教师初评，经毕业作业指导小组认定后，送交省电大有关部门审查，中央电大定期抽查;
5.对指导教师的要求：必须是本专业、具有较丰富的教学与实践经验、有中级以上专业技术职务，对学生所选毕业作业题目有一定的研究，并能运用现代教学媒体，能经常到各实习点指导学生。每一指导教师同时指导的学生不超过8人。
6.对实习单位的要求：能够满足学生实习要求，有一定的规模，在当地生产、管理等方面比较规范、技术先进，有能够担任(或协助)指导教师的技术人员，能够与电大共同完成实习任务。
7.本大纲的实施细则由试点单位根据本大纲负责组织制定并实施。
五、毕业作业
1.毕业作业要求：
(1)选题：
要求指导教师与学生共同研究确定毕业的题目。选题要联系实际，与生产实习相结合，与自己的工作相结合，选题要有地区的特色，有针对性和实际应用性、创造性，题目不宜过大。
(2)查阅文献资料和整理分析：
应查阅文献资料，介绍所选题目的背景情况，说明实际情况，分析问题并提出解决问题的思路、方法和对策等。
(3)毕业作业撰写：
应由学生独立完成，禁止抄袭、剽窃。毕业作业的篇幅应不少于3000字，包括：摘要和关键词、正文(介绍所选题目的背景、现状及存在问题，分析问题并提出解决问题的思路、方法和对策等)和参考文献等。
定稿的毕业作业用统一的毕业作业专用稿纸誊写，用统一的封面装订。
(4)教师指导：指导教师应指导学生选定毕业作业题目，并在学生撰写过程中至少进行2次以上面批。
2.毕业作业的评定：
(1)指导教师对毕业作业的评语内容：毕业作业工作量(学时数、字数等)的情况;毕业作业质量(文字、内容、结构、形式等)情况及其实用价值;学员独立完成毕业作业的情况;学员发现(提出)问题、分析问题、解决问题的能力;学员完成毕业作业的表现(科学的态度、刻苦的精神等)。
(2)成绩评定标准：分优、良、及格、不及格四等，具体要求如下：
优：独立完成作业;问题有针对性和实际应用性;原始资料齐全，能运用科学方法进行加工整理;分析问题正确、全面，对生产有一定的指导意义或已经实施、实现;论据充分，数据可靠，层次分明，逻辑清楚，文字结构严谨。
良：原始资料基本齐全，能较好地进行加工整理;分析问题正确、全面，对生产有一定的参考意义;中心突出，论据较充分，数据基本可靠，层次比较分明，文句通顺。
及格：有一定的原始资料，进行一定程度的加工整理;有一定的分析问题和解决问题的能力;有一定的论据，主要数据基本可靠，文字尚通顺。
不及格：原始资料残缺不全，加工整理差;问题分析有严重错误，层次混淆不清;基本内容属抄袭他人作品。
3.毕业作业参考题目
1.对××场规划与布局状况的调查分析
2.当地牛(或猪、羊、禽)饲料资源状况与利用现状调查
3.××地区牛(羊、禽、猪)奶(肉)制品情况的调查分析
4.对××场的生产经营状况的调查报告
5.××病症状及治疗措施
6.××养殖场免疫程序分析
7.规模化奶牛场奶牛乳房炎的防治措施
辽宁医学院继续教育学院畜牧兽医专业
自考生毕业设计论文的撰写要求
一、毕业论文撰写结构要求
1.毕业论文篇幅在6000字以上(不含插图、谢辞、参考文献)为宜。
2.题目：应简洁、明确、有概括性，字数不宜超过20个字。
3.摘要：要有高度的概括力，语言精练、明确。包括研究的、方法和结果等。同时有中、英文对照，中文摘要约300—400汉字;英文摘要约200—300个实词。
4.关键词：从论文标题或正文中挑选3～5个最能表达主要内容的词作为关键词，同时有中、英文对照，分别附于中、英文摘要后。
5.目录：写出目录，标明页码。
6.正文：毕业论文正文：包括前言、本论、结论三个部分。
前言(引言)是论文的开头部分，主要说明论文写作的目的、现实意义、对所研究问题的认识，并提出论文的中心论点等。前言要写得简明扼要，篇幅不要太长。
本论是毕业论文的主体，包括研究内容与方法、实验材料、实验结果与分析(讨论)等。在本部分要运用各方面的研究方法和实验结果，分析问题，论证观点，尽量反映出自己的科研能力和学术水平。
结论是毕业论文的收尾部分，是围绕本论所作的结束语。其基本的要点就是总结全文，加深题意。
7.谢辞：简述自己通过做毕业论文的体会，并应对指导教师和协助完成论文的.有关人员表示谢意。
8.参考文献：在毕业论文末尾要列出在论文中参考过的专著、论文及其他资料，所列参考文献应按文中参考或引证的先后顺序排列。
二、毕业论文撰写格式要求
1、毕业论文一律打印，采取a4纸张，页边距一律采取：上、下2.5cm，左3cm,右
1.5cm，行间距取多倍行距(设置值为1.25);字符间距为默认值(缩放100%，间距：标准)，封面采用统一规定的封面。
2、字体要求
论文所用字体要求为宋体。
3、字号
第一层次题序和标题用小三号黑体字;第二层次题序和标题用四号黑体字;第三层次及以下题序和标题与第二层次同;正文用小四号宋体。
4、页眉及页码
毕业论文各页均加页眉，采用宋体五号宋体居中，打印“辽宁医学院xxxx届本科生毕业论文”。页码从正文开始在页脚按阿拉伯数字(宋体小五号)连续编排，居中书写。
5、摘要及关键词
中文摘要及关键词：“摘要”二字采用三号字黑体、居中书写，“摘”与“要”之间空两格，内容采用小四号宋体。“关键词”三字采用小四号字黑体，顶格书写，一般为3—5个。
英文摘要应与中文摘要相对应，字体为小四号times new roman。
6、目录
“目录”二字采用三号字黑体、居中书写，“目”与“录”之间空两格，第一级层次采用小三号宋体字，其他级层次题目采用四号宋体字。
7、正文
正文的全部标题层次应整齐清晰，相同的层次应采用统一的字体表示。第一级为“一”、“二”、“三”、等，第二级为“1.1”、“1.2”、“1.3”等，第三级为“1.1.1”、“1.1.2”等，具体格式要求详见范文。
8、参考文献
参考文献要另起一页，一律放在正文后，在文中要有引用标注。在毕业论文末尾要列出在论文中参考过的专著、论文及其他资料(5篇以上)，所列参考文献应按论文参考或引证的先后顺序排列。
注明引用文献的方式通常有两种，即文中注：正文中在引用的地方用括号说明文献的出处，如××× [1];脚注：正文中只在引用地方写一个脚注标号，在当页最下方以脚注方
。。。。式按标号顺序说明文献出处，如注：[1]、 [2]。。然后在全文末单设“参考文献”一节，按
标号顺序一一说明文献出处。不同学科可能有不同要求，但都要按国标著录。
三、毕业论文撰写程序要 求
报名答辩的学生，必须参加论文撰写辅导，根据要求进行选题，选题后将论文题目报到函授培训科，经专家审定后开始撰写。撰写的论文经指导教师指导，通过后方可参加论文答辩。
四、毕业论文撰写内容要求
1.学生应该根据学校对毕业论文(毕业设计)的规定，运用大学所学的知识，完成毕业论文(毕业设计)，并在这一过程中，获取新知识，提高独立工作的能力和综合素质。 2.学生必须在指导教师的指导下，独立完成毕业论文(毕业设计)，不得弄虚作假或抄袭他人成果。如发现论文内容与他人论文内容重复率达50%以上者，视为雷同论文。雷同论文答辩成绩为“零”。
3.学生必须参加毕业论文(毕业设计)的各个环节，主动接受指导教师的检查和指
导，定期向指导教师汇报毕业论文(毕业设计)完成的情况，听取指导教师的意见和建议。
4.学生必须参加毕业论文(毕业设计)的答辩工作。
辽宁医学院本科生毕业论文装订格式
用于装订的学生毕业论文是指学生提交的用于论文评阅和答辩的终稿论文，是指几经修改、论文内容、格式、排版等符合要求的论文稿。学生毕业论文一式四份(三份简装，一份塑封皮装订)输出，其中三份用于论文评阅和答辩，一份用于二级学院存档。
按以下顺序装订毕业论文：
1.封面(绿色木纹纸)
2.目录
3.中文摘要(含关键词)
4.英文摘要(含关键词)
5.正文
6.谢辞
7.参考文献
随着时代的不断变化与发展,我国传统的畜牧行业展开了相应的改革,我国的畜牧兽医行业也有了进一步的提升。下文是我为大家整理的关于畜牧兽医本科生毕业论文下载的范文，欢迎大家阅读参考!
浅析猪常见传染性疾病临床症状和预防治疗方法
1 猪副伤寒病
本病主要侵害 1～4 月龄仔猪，一年四季均可发生，但阴雨潮湿季节多发。病猪和带菌猪是主要传染源，可从粪、尿、乳汁、流产的胎儿、胎衣、羊水排菌，主要经消化道感染。在子宫内也可能感染。健康猪带菌相当普遍，当受外界不良因素影响以及抵抗力下降时，常导致内源性感染。主要特征是腹泻、下痢，若不及时准确治疗，很快就脱水死亡，死亡率高，经济损失大。
1.1 猪副伤寒病的症状
急性型：多发生于断乳前后的仔猪，常突然死亡。病程稍长，体温高达 41℃～42℃，腹泻，下痢，呼吸困难，耳根、胸前、腹下皮肤有紫斑，多以死亡告终。
亚急性和慢性型：表现体温升高，眼结膜发炎，有脓性分泌物。初便秘后腹泻，排灰白色或黄绿色恶臭粪便。病猪消瘦，皮肤有痂状湿疹。病程可达数周，最终死亡或僵猪。
1.2 防治措施
预防：加强防疫注射或投喂副伤寒苗。把好猪源关，自繁自养极佳。改善饲管及卫生条件，消除发病诱因，增强仔猪抵抗力。常洗用具、食槽，保持圈舍清洁、干燥，不留粪尿，以减少感染机会。
哺乳及培育仔猪防止舔食脏物，喂优质、易消化饲料，勿突然更换饲料。
治疗：肌注恩诺沙星、盐酸环丙沙星，服土霉素片;肌注氯霉素、庆大霉素，服土霉素片;肌注氯霉素、磺胺嘧啶钠，服土霉素片;肌注恩诺沙星、氯霉素，服土霉素片;盐酸环丙沙星、氯霉素，服土霉素片。
2 猪肺疫病
猪肺疫是多杀性巴氏杆菌感染引起的一种急性、败血性传染病，各龄猪均可感染发病，其特征是急性病例呈败血症死亡。本病对多种动物和人均有致病性，猪最易感，季节性不明显，以冷热交替，气候剧变，高温，潮湿，多雨季节多发。营养不良、长途运输、饲养条件不良等因素促进本病发生, 一般呈散发性或地方性流行。
2.1 猪肺疫的症状
急性病例高热达 41℃~42℃，呼吸困难，犬坐姿势，咳喘，口鼻流泡沫或清液，咽喉部急性肿大、红色、触诊坚硬有热痛感。腹侧、四肢内侧皮肤发红斑，指压褪色，终呼吸困难窒息而死;慢性病例主要呈现慢性肺炎、慢性胃肠炎症状，鼻流脓性分泌物，持续性咳嗽、呼吸困难，食欲不振，伴腹泻消瘦。
2.2 防治措施
预防：定期注射猪肺疫苗;把好猪源关;猪舍定期消毒，保持干燥、卫生、通风;发现病例及时隔离治疗。
治疗：静注磺胺嘧啶钠。肌注长效土霉素、恩诺沙星或卡那霉素，若并发它病要对症治疗。
3 猪传染性胸膜肺炎
病原是胸膜肺炎放线杆菌，各龄猪均易感，多发于 6 周龄至6 月龄猪。长途运输、饲管不当、气候骤变等因素可引发本病。病猪和带菌猪为主要传染源，主要经呼吸道气流感染。
3.1 猪传染性胸膜肺炎的症状
感染猪潜伏期 1～7 天。按病程长短分最急性型、急性型、亚急性型和慢性型。最急性型病猪突然死亡，死前无征兆，死猪腹部、耳、四肢发绀，口鼻流带血红色泡沫，死亡率高达 80%～100%。急性型病猪减食或废绝，体温 41℃左右，常站立或呈犬坐姿势不卧，精神沉郁，耳鼻、四肢皮肤呈蓝紫色，张口伸舌，喘，间歇性咳嗽，呼吸困难，表情极痛苦，常于 24 小时内病重窒息死亡，部分转为亚急性或慢性。亚急性型或慢性型病猪体温正常或稍高，咳喘，食欲减退，消瘦，病程延长或进一步恶化。
3.2 防治方法
预防：加强防疫，定期注射胸膜肺炎多价灭活苗;严把猪源关;强化饲养管理;严格消毒制度，保持圈舍清洁、干燥、通风;实行全进全出的饲养方式，发现病猪及时隔离治疗。
治疗：本病早期治疗效果较好，用药量要大。首选静注磺胺嘧啶钠，肌注长效土霉素、恩诺沙星或(卡那霉素、丁胺卡那霉素)。
可同时使用维 C、地米效果会更好。若并发其他病要对症治疗。
4 猪口蹄疫
口蹄疫属于一种急性、烈性的传染病，猪、牛、羊等偶蹄动物均易感染，本病传染性很强，无明显季节性，一年四季均可发生。以流涎，跛行，口腔、鼻盘、蹄部水疱为主要特征。
4.1 猪口蹄疫的症状
患病猪体温升高，全身症状明显，流涎，跛行，喜卧，鼻盘、口腔、齿龈、舌、乳房(主要是哺乳母猪)，蹄冠、蹄叉、蹄踵均会产生水疱，疱溃后、流脓血而形成烂斑，重者蹄壳脱落，病仔猪可因停食、肠炎腹泻等死亡。
4.2 防治方法
若发现猪患上口蹄疫，一定要上报动物检疫部门，不能隐瞒、出售、私屠乱宰;对病死猪要作焚烧、深埋等无害化处理;对圈舍、用具、槽子等进行严格的清洗消毒，以免口蹄疫经空气、污物、病肉等传播，传染给其他家畜甚至人。该病危害极大，无法根治，只能预防。因此预防十分关键，广大养殖户要十分重视，定期注射口蹄疫苗，切勿心存侥幸，造成重大经济损失。
5 猪丹毒病
该病是由猪丹毒杆菌引起猪的一种传染病。多发生在夏秋和梅雨季节，2 月龄以上猪最易感染。病猪潜伏期短的为 3~5 天，长的达半月之久。主要特征是在耳后、颈部、胸、腹侧等部位，皮肤出现各种形状红斑或疹块，呼吸困难，病死率很高，对养猪业危害很大。
5.1 猪丹毒病的症状
该病分为败血型、疹块型和慢性型。患猪体温升高，精神不振，食欲减退或废绝，口渴，大便干燥。在耳根、胸、背部、腹部、大腿上均出现形状不一、大小不一、界限明显、扁平肿胀的紫红色疹块，指按褪色。
5.2 防治措施
预防：定期预防注射猪丹毒苗。强化消毒制度，搞好圈舍卫生。严把猪源关，新购进的猪应隔离饲养一周，确定正常后再入圈喂养。
治疗：静注磺胺嘧啶钠，用复方氨基比林或安乃近 10~20 毫升稀释青霉素肌注，每天 2 次;中药疗法可用大黄、石膏、玄参、知母、连翘、地龙各 25 克，甘草 15 克，加水煎服 2 剂。
浅谈奶牛乳腺炎治疗新策略研究进展
乳腺炎(mastitis)是奶牛最常见的生产性疾病，给奶牛业造成了巨大的经济损失[1].奶牛乳腺炎分临床型和隐性乳腺炎两种，临床型乳腺炎以乳房红肿热痛、乳腺组织损伤为主要特征[2],而隐性乳腺炎虽无可见临床症状，但在大部分牛场存在，危害更大。奶牛罹患乳腺炎后，引起乳腺上皮细胞合成和分泌功能不同程度障碍，乳脂肪、乳蛋白和乳糖等主要乳成分合成量明显减少[3],造成牛奶品质显着下降。研究证实，综合评估各种因素造成的损失，奶产量及奶品质下降造成的损失占总损失的49%[1].
国内常见的奶牛乳腺炎治疗方法是使用抗生素，但由于乳腺炎病原菌种类多，乳腺感染致病机制复杂，其治疗效果不理想。长时间大剂量使用抗生素极易导致耐药菌株增多、乳中抗生素残留等问题，严重威胁乳品及生命安全。因此，开发能快速修复乳腺组织，恢复产奶量、提高奶品质的治疗方法迫在眉睫。
研究表明，乳酸链球菌素、Aegis溶菌酶、溶葡萄球菌酶、CpG-DNA、血小板浓缩液新型乳腺炎治疗制剂可用于奶牛乳腺炎临床治疗。另外，激素、调控乳腺细胞信号通路及嗜中性粒细胞数量等新型治疗策略也为快速高效防治乳腺炎提供了良好前景。
1治疗乳腺炎的新制剂
1.1乳酸链球菌素
乳酸链球菌素 (Nisin)又称乳球菌肽或乳链菌肽，是从乳酸链球菌发酵物中提取的一种多肽抗菌类物质，已被证明是一种安全天然生物性食品防腐剂和抗菌剂[4].Nisin最先作为牛乳房乳头的一种消毒剂使用，具有良好的杀菌作用且无潜在组织损伤。Nisin作为乳腺炎治疗药物的主要作用机理是其吸附于细胞膜上以后，破坏细胞膜的完整性，引起细胞裂解及细胞内蛋白大量外泄，致病原菌死亡[5].
另外的研究也证实，Nisin在肺炎链球菌感染小鼠模型的治疗中，也起到良好的杀菌作用。从临床型奶牛乳腺炎分离出金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)和无乳链球菌的药敏试验结果可见，Nisin能够有效抑制这两种细菌的生长和繁殖[4].曹立亭等[6]使用Nisin乳腺灌注治疗临床型乳腺炎，测定治疗前后牛奶中乳脂肪含量、非脂乳固体含量、牛奶蛋白质含量、奶牛泌乳性能等指标，治疗后奶牛所产牛乳的上述指标均显着提高，提示使用Nisin可促进乳腺上皮细胞合成乳成分的能力增强及乳腺组织修复。Szweda P等[7]分离出37株牛乳腺炎源耐药菌株，药敏结果显示其中21株S.aureus对Nisin敏感，进一步证明Nisin具有良好的杀菌作用。
1.2 Aegis溶菌酶
Aegis溶菌酶是一种有效的抗菌剂，能切断肽聚糖中N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-l,4糖苷键，破坏肽聚糖支架，在内部渗透压的作用下致细胞胀裂，引起细菌裂解[8].通过对比溶菌酶和头孢唑啉钠治疗临床型乳腺炎的治疗效果试验，溶菌酶组给药24h后乳清中丙二醛(malondialde-hyde,MDA)含量显着降低，揭示溶菌酶能抑制和清除炎症时产生的氧自由基，从而减少对乳腺细胞的损伤[9].进一步研究证实，鸡蛋清溶菌酶、鸭蛋清溶菌酶、10%溶菌酶制剂、细菌性溶菌酶对引起奶牛乳腺炎的葡萄球菌均有抑制作用[10],细菌性溶菌酶治疗效果最好，最有希望用来治疗细菌性乳房炎。
沈诚等[11]将人溶菌酶重组质粒pcDNAKLYZ乳腺灌注治疗隐性乳腺炎奶牛，比较灌注前后牛乳中的细菌阴性率，灌注前阴性率为0,灌注后阴性率为51.92%,显示重组质粒抑菌效果显着，该重组质粒对奶牛隐性乳腺炎具有较好的治疗效果。
1.3溶葡萄球菌酶
溶葡萄球菌酶(lysostaphin)是一种从模仿葡萄球菌(S.simulans)中分离获得的含Zn2+内切肽酶，因能有效的清除金黄色葡萄球菌生物被膜而达到杀菌作用[12].Aguinaga A等[13]使用溶葡萄球菌酶和不同抗生素单独和联合使用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant S.aureus,MRSA)和甲氧西林敏感菌(methicillin-susceptible S.aureus,MSSA)的研究报告中显示，溶葡球菌酶跟抗生素联合使用比单独使用抗生素，具有较强的杀菌作用并且致MSSA及MRSA菌株的抗生素使用浓度分别降低了2倍~11倍和2倍~14倍。在另一研究中，用MRSA建立小鼠肺炎模型，分别应用不同剂量的溶葡萄球菌酶、万古霉素和PBS进行感染后治疗，结果显示溶葡萄球菌组具有低病死率、肺组织损伤减少、感 染 部 位 细 菌 数 较 少 特 征，并 成 剂 量 依 赖性[14].
Szweda P等[7]研究同时也指出耐药菌对溶葡球菌酶的最小抑菌浓度(minimal inhibitory con-centration,MIC)为0.008μg/mL~0.5μg/mL,远远小于MIC最大值32μg/mL,且所有耐药菌对溶葡萄球菌酶敏感。蒋司嘉等[15]使用低、中、高重组溶葡球菌酶粉治疗85头患乳房炎奶牛的104个乳区，试验结果表明低中高剂量重组溶葡萄球菌酶均能有效清除感染乳区的链球菌、葡萄球菌、化脓隐秘杆菌等革兰阳性菌，大幅降低牛奶中的白细胞数，提高日产奶量。不同剂量的重组溶葡萄球菌酶治疗隐性乳房炎、临床型乳房炎的有效率和治愈率都优于青霉素，治疗效果跟剂量呈正相关。
1.4 CpG-DNA
CpG-DNA是一些具有免疫激活功能的以未甲基化的CpG基序为核心的DNA序列，它包括含CpG基序的人工合成的CpG-ODN和自然界中低等生物的基因组DNA[16].在由大肠埃希菌建立的山羊乳腺炎模型中，试验组乳腺组织中大肠埃希菌数显着低于对照组，CpG-ODN对大肠埃希菌诱导山羊乳腺炎的乳腺有保护作用[17].在分别由金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌诱导的大鼠乳腺炎中，使用CpG-DNA的试验组乳腺组织白细胞介素-6(in-terleukine-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(tumor necro-sis factor-ɑ，TNF-ɑ)和CpG-DNA特 异 性 受 体TLR-9(Toll-like receptor-9)mRNA表达水平较对照组显着提高，同时减轻炎症反应和炎症介质对组织的损伤，提示CpG-DNA具有乳腺保护作用，其作用机理可能为CpG-DNA与宿主体内天然免疫细胞上的模 式 识 别 受 体 相 结 合，引 起 相 应 的 免 疫 应答[18].
1.5血小板浓缩液
血小板最常见的作用是在血管损伤部位聚集，形成凝血酶原和纤维蛋白原组成凝血表面从而达到止血作用[19].Pinto J M等[20]通过使用血小板浓缩液治疗一例人慢性皮肤溃疡，观察到肉芽组织增生，提示治疗有效，可能原因是血小板作为生长因子的载体刺激胶原蛋白产生、活化成纤维细胞和诱导细胞外基质重塑达到修复组织损伤作用。
Lange-Con-siglio A等[21]使用血小板浓缩液灌注感染乳腺，通过感染乳腺乳汁体细胞数和细菌数评估治疗效果，结果显示使用血小板浓缩液能显着降低牛乳中体细胞数和细菌数，血小板浓缩液在促进炎症消散、减少乳腺实质损伤、降低乳腺炎复发率方面有较好作用。进一步研究证实血小板浓缩液不仅对乳腺组织有修复作用，对奶牛乳腺炎病原菌也有抑制作用。
Bi-elecki T M等[22]采用Kirby-Baue纸片扩散法，观察到人富含血小板的血浆的琼脂平板可以显着抑制金黄色 葡 萄 球 菌 及 大 肠 埃 希 菌 的 生 长。
Marian E等[23]从事的另一项研究不仅验证了上述研究结果，而且显示血小板浓缩液对铜绿假单胞菌也有抑制作用。一项乳腺炎流行病学调查的研究显示，金黄色葡萄球菌乳腺炎发病率为16.3%,大肠埃希菌乳腺炎发病率引起的为25.2%[24],因此有望使用血小板浓缩液治疗由条件致病菌引起的乳腺炎。
2乳腺炎治疗新策略研究进展
2.1激素调控乳腺细胞的分泌及修复
激素在生殖生理方面应用广泛，乳腺的生长发育和分泌功能均在大脑皮层和丘脑下部的调节下进行，多种内分泌激素发挥着重要作用[25-26].佟慧丽等[27]建立正常培养的奶山羊乳腺上皮细胞系，用催乳素处理体外培养乳腺上皮细胞，测定催乳素处理组乳腺上皮细胞乳糖和总蛋白水平，显示催乳素诱导乳腺上皮细胞乳糖及乳蛋白分泌水平明显升高。
陈建晖等[28]使用催乳素和孕酮处理奶牛乳腺上皮细胞系，测定处理后细胞中的酪蛋白和乳糖含量，显示催乳素处理组升高趋势显着，提示催乳素可以提高乳腺干细胞的数量。激素已被证实有助于提高乳腺细胞分泌能力，提高牛乳品质，促进乳腺组织恢复，但应用方法及其作用机制有待进一步研究。
2.2调控乳腺细胞凋亡及相关信号通路的研究
研究证实乳腺炎的发生发展与乳腺细胞的凋亡及信号通路关系密切，肖阳[29]使用TUNNEL方法检测奶牛不同发育时期乳腺组织的细胞凋亡，证实泌乳晚期凋亡信号最强。乳腺细胞的分化、更新及凋亡与信号通路的调控联系紧密，与此相关的信号通路包括Wnt信号通路、Notch信号通路、Hedge-hog信号通路[26].Wnt信号通路中，β-catenin可以启动Wnt靶基因的表达;抑制β-catenin信号，乳腺细胞分化和增殖被抑制，Notch信号通路的激活能够促进乳腺细胞的自我更新，而Notch的过量表达会抑制细胞的分化。研究表明不同形式的TP63激活Hedgehog信号通路可促进乳腺细胞的有丝分裂[30].张雯[31]使用脂多糖(LPS)诱导的原代小鼠乳腺上皮细胞炎症模型，检测LPS刺激下细胞因子和炎性介质的分泌以及常见的两条炎症信号转导通路NF-κB和MAPK的变化，结果显示LPS刺激下，乳腺上皮细胞TRL4、NF-κB和下游细胞因子表达升高，显着抑制了p38、JNK和ERK、MAPKs磷酸化。分析各信号通路在乳腺细胞分化更新及凋亡中的机制，精细调控乳腺细胞凋亡也有望成为治疗乳腺炎的新方向。
2.3调控乳腺组织嗜中性粒细胞数量的研究
金黄色葡萄球菌(S.aureus)等致病菌侵入奶牛乳腺后，中性粒细胞向感染乳腺组织集中，发挥吞噬功能清除病原，充当保护机体的第一道防线[32].然而，如果PMN在炎症灶过度激活或延迟清除，大量PMN可以通过释放氧自由基等有害内容物加重炎症反应，使炎症迁延、慢性化或扩散至全身[33].因此适时适度清除PMN对于控制乳腺炎症的发展和转归至关重要。
Wang Y等[34]使用650nm,2.5mW,30mW/cm2低强度激光疗法作用LPS诱导的大鼠乳腺炎模型，经低强度激光疗法后，抑制PMN向乳腺腺泡聚集，降低髓过氧化物酶活性，从而减轻乳腺炎症反应。另一项研究证实，日粮中硒含量与乳腺中PMN数量直接相关，LPS诱导的小鼠乳腺炎的病理学切片显示，缺硒小鼠乳腺出现较多PMN浸润、乳腺中组织中促炎因子表达水平高于正常硒含量组小鼠，因此有望通过调控日粮中硒含量，调节乳腺中PMN数量，进而防治奶牛乳腺炎[32].
综上所述，乳腺炎是一种严重危害奶牛业的疾病，抗生素治疗乳腺炎由于其天然局限性，治疗效果并不理想。乳腺炎防治新制剂乳酸链球菌素、Aegis溶菌酶、溶葡萄球菌酶、CpG-DNA、血小板浓缩液有望替代传统治疗药物;激素疗法、调控信号通路及PMN数量有望作为预防治疗乳腺炎的新策略。积极开展牛乳腺炎治疗新制剂及新策略的研究，为高效防控奶牛乳腺炎提供良好条件。
参考文献：
[1]Sinha M K,Thombare N N,Mondal B.Subclinical mastitis indairy animals:incidence,economics,and predisposing factors[J].Sci World J,2014:523984.doi:10.1155/2014/523984.
[2]宋亚攀，杨利国。中国奶牛乳腺炎防治研究进展[J].中国奶牛，2010(12)：48-54.
[3]张勇，杨永新，赵兴绪。临床型奶牛乳腺炎乳腺组织的比较蛋白质组研究[J].中国农业科学，2009,42(4)：1442-1446.
随着我国经济的持续发展,我国畜牧兽医领域有着长足的进步。下面是我带来的关于畜牧兽医专业论文题目的内容，欢迎阅读参考! 畜牧兽医专业论文题目(一) 1. 外种猪配种技术初探 2. 浅谈猪的发情鉴定(配种或分娩)技术 3. 提高猪的人工授精受胎率的方法研究 4. 浅谈家畜的配种繁殖技术 5. 家畜精液保存技术的应用 6. 四川畜禽品种资源调查 7. XX地区畜禽改良现状的思考 8. 畜禽引种的注意事项 9. 电子计算机在配合饲料生产中的应用 10. 饲料安全及控制措施 11. 反刍动物(牛)饲喂尿素的效果分析 12. 饲料霉变的危害及控制技术 13. 如何控制动物生长中的钙、磷营养 14. 试述单胃动物蛋白质营养调控技术 15. 新型蛋白源饲料研究进展 16. 中草药添加剂在饲料中的应用 17. 城乡统筹和农村建设发展对现代畜牧业发展的影响 18. 传统养殖与现代养殖的比较研究 19. 粮、果(草)间、套、轮作模式探讨 20. 栽培苜蓿对土壤中氮含量的影响 畜牧兽医专业论文题目(二) 1. 有机酸在畜禽生产中的应用 2. 益生菌的营养和免疫特性及应用 3. 饲料酶制剂在饲料工业中的应用 4. 营养保健添加剂在畜禽生产中的应用 5. 浅谈饲料转化率及影响因素 6. 我省饲料业的生产现状与发展趋势调查报告 7. 高致病性禽流感疫情的控制及防制对策 8. 禽流感的现状及预防 9. 鸡马立克病的流行现状及对策 10. 鸡球虫病的防治 11. 鸡传染性法氏囊病的防治 12. 我国养兔业面临的主要问题与对策 13. 如何加快养兔业产业化进程 14. 我国兔病流行状况及防制对策 15. 浅析农村散养肉兔的利弊 16. 肉兔发情鉴定及配种技术分析 17. 夏季预防家兔中暑的技术措施探讨 18. 兔产品开发与利用现状 19. 提高獭兔养殖效益的综合措施 20. 冬季影响家兔生产的因素及对策 21. 兔常见脱毛症的预防与治疗 畜牧兽医专业论文题目(三) 1. 菌糠饲料深加工利用研究 2. 宰前使用不同饲料添加剂对猪肉质性能参数的影响) 3. 能量和赖氨酸水平对妊娠母猪性能的影响 4. 粗纤维的营养作用及在生产中的应用研究进展 5. 导致动物贫血的营养因素及其防治措施 6. 佝偻病和软骨病的诱因和防治措施 7. 高铜在养猪生产中的应用现状分析 8. 断奶仔猪的日粮配制技术 9. 农村种植优质牧草与养畜情况调查 10. 青贮饲料的制作及应用 11. 酒糟在饲料配合中的应用 12. 动物饲料与禽产品安全关系 13. 饲料加工对畜禽产品营养价值的影响 14. 浅谈中国饲料行业的状况 15. 浅谈当前饲料市场营销创新 16. 农村饲料配合技术的应用及效果。 17. 配合饲料(浓缩饲料、预混料或添加剂)在农村畜禽生产中的应用。 猜你喜欢： 1. 畜牧兽医毕业论文优秀范文 2. 有关畜牧兽医专业毕业论文 3. 畜牧兽医毕业论文题目 4. 专科畜牧兽医毕业论文 5. 关于畜牧兽医论文范文
兽医专业是指从事防治动物疾病的行业或人。其主要研究内容是家畜家禽疾病的诊疗、防治、检疫及畜产品卫生检验等。 下面小编整理了一些兽医毕业论文题目，供广大学子参考！1、鸡传染性喉气管炎病毒PCR检测方式的建立和应用2、草分枝杆菌及其在兽医领域的应用研究进展3、H9亚型禽流感病毒变异的研究进展4、东北农业大学动物医学专业实践教学设计效果分析5、大连地区麻鸡呼吸道病多病原检测分析6、高职畜禽环境卫生课程教学改革与探索7、鸡霉菌毒素中毒与新城疫混合感染的诊治8、羊小反刍兽疫及其综合防治9、水貂源乳杆菌及双歧杆菌的分离鉴定10、关于当前新疆肉羊养殖业发展中兽医工作的几点建议11、鸡毒霉形体检测方法的研究概况12、巴里坤县羊肝片吸虫病感染情况调查13、农区肉羊集约化养殖防疫体系的建立14、小反刍兽疫疫苗免疫注意事项15、且末县肉羊饲养场疫病防疫要求16、兔瘟的诊断与防控措施17、浅谈兽药职业技能鉴定现状及对策18、奶牛围产期常见疾病的临床诊断与防治19、兽医实验室如何进行仪器设备的管理20、浅谈奶牛乳滞及其防治21、家禽养殖中疾病预防的综合措施22、云南家兔皮肤真菌病的流行原因及控制结果调查23、孔雀奇异变形杆菌的分离鉴定及遗传进化分析24、不同禽源里氏杆菌分离鉴定及同源性比较25、盘县羊布氏杆菌病血清学调查及防控措施26、瓮安县畜牧兽医技术服务专业合作社运行情况调查27、黔东南州狂犬病防控知识调查28、种养间循环模式中病死畜禽无害化处理29、加强动物卫生监督执法 为畜牧业健康发展保驾护航30、新疆乌鲁木齐周边地区牛结核病的监测结果与分析31、动物治疗合理用药注意事项分析32、浅析动物卫生监督工作中存在的问题与对策33、动物检疫常见问题及改进对策分析34、平武县重大动物疫病集中免疫工作存在的问题和对策35、当前动物防疫工作的现状及对策36、加强基层动物防疫体系建设的思考37、新形势下动物检疫存在的问题及对策38、规模养殖场动物防疫存在的问题和措施39、动物疫病防治现状及解决措施分析40、基层畜牧兽医技术推广体系建设41、兽用抗生素的应用及监管对策42、乡镇动物及其产品检疫工作之弊端43、在基层工作中提高兽药标准品对照品管理办法的建议44、兽医临床对抗生素的规范使用45、畜禽疾病诊治中的常见误区及控制建议46、基层兽医在畜禽疾病防治中存在的误区及对策47、畜牧养殖动物疾病控防技术措施研究48、中兽医对母猪产后疾病的治疗分析49、中西兽医结合对牛瘤胃臌气的治疗效果分析50、畜牧养殖中动物常见疾病的发生与防治51、新疆南疆牛乳头状瘤病毒鉴定与基因分型52、牛结核分枝杆菌株快速培养方法的对比53、浅谈动物疫病监测及我区动物疫病监测工作中存在的问题和建议54、农村养猪场综合防疫体系的建设及完善建议略述55、关于开展动物疾病防控工作的研究56、动物疾病防治工作反思57、兽医微生物学实验教学改革58、麻疹病毒属病毒反向遗传研究概况59、云木香根提取物在控制鸡粪臭味的应用研究
你的论文准备往什么方向写，选题老师审核通过了没，有没有列个大纲让老师看一下写作方向？ 老师有没有和你说论文往哪个方向写比较好？写论文之前，一定要写个大纲，这样老师，好确定了框架，避免以后论文修改过程中出现大改的情况！！学校的格式要求、写作规范要注意，否则很可能发回来重新改，你要还有什么不明白或不懂可以问我，希望你能够顺利毕业，迈向新的人生。 （一）选题毕业论文（设计）题目应符合本专业的培养目标和教学要求，具有综合性和创新性。本科生要根据自己的实际情况和专业特长，选择适当的论文题目，但所写论文要与本专业所学课程有关。（二）查阅资料、列出论文提纲题目选定后，要在指导教师指导下开展调研和进行实验，搜集、查阅有关资料，进行加工、提炼，然后列出详细的写作提纲。（三）完成初稿根据所列提纲，按指导教师的意见认真完成初稿。（四）定稿初稿须经指导教师审阅，并按其意见和要求进行修改，然后定稿。一般毕业论文题目的选择最好不要太泛，越具体越好，而且老师希望学生能结合自己学过的知识对问题进行分析和解决。不知道你是否确定了选题，确定选题了接下来你需要根据选题去查阅前辈们的相关论文，看看人家是怎么规划论文整体框架的；其次就是需要自己动手收集资料了，进而整理和分析资料得出自己的论文框架；最后就是按照框架去组织论文了。你如果需要什么参考资料和范文我可以提供给你。还有什么不了解的可以直接问我，希望可以帮到你，祝写作过程顺利毕业论文选题的方法: 一、尽快确定毕业论文的选题方向 在毕业论文工作布置后,每个人都应遵循选题的基本原则,在较短的时间内把选题的方向确定下来。从毕业论文题目的性质来看,基本上可以分为两大类:一类是社会主义现代化建设实践中提出的理论和实际问题;另一类是专业学科本身发展中存在的基本范畴和基本理论问题。大学生应根据自己的志趣和爱好,尽快从上述两大类中确定一个方向。二、在初步调查研究的基础上选定毕业论文的具体题目在选题的方向确定以后,还要经过一定的调查和研究,来进一步确定选题的范围,以至最后选定具体题目。下面介绍两种常见的选题方法。 浏览捕捉法 :这种方法就是通过对占有的文献资料快速地、大量地阅读,在比较中来确定论文题目地方法。浏览,一般是在资料占有达到一定数量时集中一段时间进行,这样便于对资料作集中的比较和鉴别。浏览的目的是在咀嚼消化已有资料的过程中,提出问题,寻找自己的研究课题。这就需要对收集到的材料作一全面的阅读研究,主要的、次要的、不同角度的、不同观点的都应了解,不能看了一些资料,有了一点看法,就到此为止,急于动笔。也不能“先入为主”,以自己头脑中原有的观点或看了第一篇资料后得到的看法去决定取舍。而应冷静地、客观地对所有资料作认真的分析思考。在浩如烟海,内容丰富的资料中吸取营养,反复思考琢磨许多时候之后,必然会有所发现,这是搞科学研究的人时常会碰到的情形。 浏览捕捉法一般可按以下步骤进行: 第一步,广泛地浏览资料。在浏览中要注意勤作笔录,随时记下资料的纲目,记下资料中对自己影响最深刻的观点、论据、论证方法等,记下脑海中涌现的点滴体会。当然,手抄笔录并不等于有言必录,有文必录,而是要做细心的选择,有目的、有重点地摘录,当详则详,当略则略,一些相同的或类似的观点和材料则不必重复摘录,只需记下资料来源及页码就行,以避免浪费时间和精力。 第二步,是将阅读所得到的方方面面的内容,进行分类、排列、组合,从中寻找问题、发现问题,材料可按纲目分类,如分成: 系统介绍有关问题研究发展概况的资料; 对某一个问题研究情况的资料; 对同一问题几种不同观点的资料; 对某一问题研究最新的资料和成果等等。 第三步,将自己在研究中的体会与资料分别加以比较,找出哪些体会在资料中没有或部分没有;哪些体会虽然资料已有,但自己对此有不同看法;哪些体会和资料是基本一致的;哪些体会是在资料基础上的深化和发挥等等。经过几番深思熟虑的思考过程,就容易萌生自己的想法。把这种想法及时捕捉住,再作进一步的思考,选题的目标也就会渐渐明确起来。
随着我国经济的持续发展,我国畜牧兽医领域有着长足的进步。下面是我带来的关于畜牧兽医专业论文题目的内容，欢迎阅读参考! 畜牧兽医专业论文题目(一) 1. 外种猪配种技术初探 2. 浅谈猪的发情鉴定(配种或分娩)技术 3. 提高猪的人工授精受胎率的方法研究 4. 浅谈家畜的配种繁殖技术 5. 家畜精液保存技术的应用 6. 四川畜禽品种资源调查 7. XX地区畜禽改良现状的思考 8. 畜禽引种的注意事项 9. 电子计算机在配合饲料生产中的应用 10. 饲料安全及控制措施 11. 反刍动物(牛)饲喂尿素的效果分析 12. 饲料霉变的危害及控制技术 13. 如何控制动物生长中的钙、磷营养 14. 试述单胃动物蛋白质营养调控技术 15. 新型蛋白源饲料研究进展 16. 中草药添加剂在饲料中的应用 17. 城乡统筹和农村建设发展对现代畜牧业发展的影响 18. 传统养殖与现代养殖的比较研究 19. 粮、果(草)间、套、轮作模式探讨 20. 栽培苜蓿对土壤中氮含量的影响 畜牧兽医专业论文题目(二) 1. 有机酸在畜禽生产中的应用 2. 益生菌的营养和免疫特性及应用 3. 饲料酶制剂在饲料工业中的应用 4. 营养保健添加剂在畜禽生产中的应用 5. 浅谈饲料转化率及影响因素 6. 我省饲料业的生产现状与发展趋势调查报告 7. 高致病性禽流感疫情的控制及防制对策 8. 禽流感的现状及预防 9. 鸡马立克病的流行现状及对策 10. 鸡球虫病的防治 11. 鸡传染性法氏囊病的防治 12. 我国养兔业面临的主要问题与对策 13. 如何加快养兔业产业化进程 14. 我国兔病流行状况及防制对策 15. 浅析农村散养肉兔的利弊 16. 肉兔发情鉴定及配种技术分析 17. 夏季预防家兔中暑的技术措施探讨 18. 兔产品开发与利用现状 19. 提高獭兔养殖效益的综合措施 20. 冬季影响家兔生产的因素及对策 21. 兔常见脱毛症的预防与治疗 畜牧兽医专业论文题目(三) 1. 菌糠饲料深加工利用研究 2. 宰前使用不同饲料添加剂对猪肉质性能参数的影响) 3. 能量和赖氨酸水平对妊娠母猪性能的影响 4. 粗纤维的营养作用及在生产中的应用研究进展 5. 导致动物贫血的营养因素及其防治措施 6. 佝偻病和软骨病的诱因和防治措施 7. 高铜在养猪生产中的应用现状分析 8. 断奶仔猪的日粮配制技术 9. 农村种植优质牧草与养畜情况调查 10. 青贮饲料的制作及应用 11. 酒糟在饲料配合中的应用 12. 动物饲料与禽产品安全关系 13. 饲料加工对畜禽产品营养价值的影响 14. 浅谈中国饲料行业的状况 15. 浅谈当前饲料市场营销创新 16. 农村饲料配合技术的应用及效果。 17. 配合饲料(浓缩饲料、预混料或添加剂)在农村畜禽生产中的应用。 猜你喜欢： 1. 畜牧兽医毕业论文优秀范文 2. 有关畜牧兽医专业毕业论文 3. 畜牧兽医毕业论文题目 4. 专科畜牧兽医毕业论文 5. 关于畜牧兽医论文范文
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畜牧兽医专业论文写作的基本要求与格式2017
畜牧兽医专业论文写作的基本要求与格式是怎样的呢?畜牧兽医专业论文写作的基本要求与格式阐述怎样的论文选题呢?下面是我分享的畜牧兽医专业论文写作的.基本要求与格式，欢迎阅读!
畜牧兽医专业论文写作的基本要求与格式：
一、论文选题
选题原则一是理论联系实际，二是刻意求新。立足于岗位，写自己感触较深的事或对社会现象剖析较深刻的事。论文选题范围如下：1.对××场规划与布局状况的调查分析;2.宜章县(或××乡镇)猪(或牛、羊、禽)品种、饲料资源状况与利用现状调查;3.宜章县(或××乡镇)牛(羊、禽、猪)奶(肉)制品情况的调查分析;4.对××场的生产经营状况的调查报告;5.××病症状及治疗措施;6.××养殖场免疫程序分析;7.规模化奶牛场奶牛乳房炎的防治措施;8.宜章县(或××乡镇)猪(或牛、羊、禽)等常见疫病发生情况的调查与分析。
二、几点要求
1、字数：3000-4000。
2、论文行间距为26磅。
3、凡是原文照抄、网上下载、与自己的生活或工作不着边际、没有本地方或本单位的具体事例的论文，均不能通过。
4、论文交稿时间为2014年4月10日止，写作应适当提前，班主任还有大量的工作要在网上操作。论文完成后，文档用你的“姓名”命名保存，然后发至邮箱：切切勿误。
5、交论文指导费100元。
三、论文格式
论文标题(小3号黑体字)
(空一行)
【内容摘要】(小4号黑体字)，内容(小4号宋体字，300字左右)。
【关键词】(小4号黑体字)，内容(小4号宋体字，3-5个关键词,一般不超过7个，词与词之间空1个字)。
(空一行)
正文内容(小4号宋体字)
一级标题一、二、三(小4号黑体字)
二级标题(一)、(二)、(三)(小4号黑体字)
三级标题1、2、3(小4号黑体字)
(空一行)
【参考文献】(小4号黑体字)，内容1、2、3、4、5(小4号宋体字，专科3-5个,本科不少于5个，每个参考文献包括书名、作者、出版社等)。
畜牧兽医毕业论文设计要求应遵循的原则：
一、 毕业论文应遵循的原则
1、真实性原则
毕业论文内容应是自己在实习过程中亲自做的，如：养猪与猪病防治、养禽与禽病防治、养牛与牛病防治、饲料兽药生产与营销。
2、符合性原则
毕业论文的文本结构必须符合《学院毕业论文基本规范要求》的格式，共由4个主要部分组成：(1)封面;(2)论文摘要(不少于200字)论文服务.QQ:81995535;(3)毕业论文正文(不少于2000字);(4)参考文献。
3、专题性原则
毕业论文应一事一论、一题一论，专门写某一方面的问题。
4、规范性原则
毕业论文内容格式应规范，符合科技论文基本格式要求，其逻辑关系是：提出问题(观点，即选题)→解决问题的方法(如试验材料与方法)→解决问题的结果，并对结果进行分析(结果与分析)→结论(结论与讨论、小结与讨论)。
5、创新性原则
毕业论文选题能够体现生产和研究的要求，在理论上或实践上有一定的研究价值，有新意。
6、科学性原则
毕业论文应观点明确，条理清晰，数据准确，论证严密合理，逻辑推理正确，总结出具有一定规律性的经验，有独到见解。
7、应用性原则毕业论文对解决实际的问题有很强的针对性，可通过实践检验和便于推广。