康乃馨原名香石竹(Dianthus caryophyllus L)，又名麝香石竹，属石竹科，下面是我为大家精心推荐的康乃馨栽培技术论文，希望能够对您有所帮助。
康乃馨的培育及切花保鲜技术
摘要 为了让广大花卉爱好者正确认识和掌握康乃馨的培育和保鲜技术，从康乃馨的品种分类、形态特性、生长习性、培养繁殖、病虫害防治、切花采收与保鲜等方面进行详细论述，以供参考。
关键词 康乃馨;切花;分类;特征特性;繁殖;保鲜
中图分类号 文献标识码 B 文章编号 1007-5739(2014)19-0190-01
康乃馨原名香石竹(Dianthus caryophyllus L)，又名麝香石竹，属石竹科，石竹属，原产欧洲南部、地中海沿岸至印度地区，在世界上已有2 000年的栽培历史，为大众型切花，其生产量占全部切花的17%，仅次于菊花，为世界四大切花之一[1]。康乃馨应用广泛，气味芳香，易于保存。其单位面积产量在所有室内切花生产中最高，能够采用机械化、自动化规模生产。
随着康乃馨作为一种鲜切花越来越受人们的青睐，其生产规模不断扩大，生产技术要求也越来越高，高质量、高标准的鲜切花越来越被人们所关注。因此，进一步了解康乃馨的生活习性及品种分类对生产高质量的鲜花将有很大帮助。鲜花的质量好坏关键就在于它的“鲜”，因此康乃馨的保鲜技术显得格外重要，加强保鲜技术的研究将是决定康乃馨切花产业成败的关键。
1 康乃馨的特征特性
品种分类
我国自欧美引入康乃馨进行栽培约有70年的历史，栽培品种很多，大致可分为两大类，即露地栽培种和温室栽培种。露地栽培种耐寒力强，可露地越冬，常作二年生花卉栽培，适于花坛布置及切花用;温室栽培种呈亚灌木状，具四季开花性，适于盆栽，但更多作切花生产。康乃馨品种众多，花色各异，有黄色系、红色系、白色系等类型。
形态特性
康乃馨为常绿亚灌木，作宿根花卉栽培。株高60～90 cm，正常花期5―10月。茎光滑，基部木质化，稍被白粉;叶对生，线状披针形，全缘，基部抱茎，灰绿色，被白粉;花常单生或2～5朵簇生枝端，呈聚伞状排列，其原始种及部分紫色栽培品种具淡丁香芳香。
生长习性
喜空气流通、干燥及日光充足之环境。要求排水良好、腐殖质丰富、保肥性能良好而微呈碱性之粘质土壤，忌连作及低洼地。喜肥，能耐一定低温，为冬季供应切花，现常作为设施栽培的品种。性好凉爽而不耐炎热，理想的栽培地是夏季凉爽、湿度低，冬季温暖的地区。
2 繁殖技术
扦插
采用扦插育苗生产切花的时间要求分批、分期进行，温室栽培以1―3月和9―11月为宜，露地栽培以4―6月和9―10月为宜，成活率高，生长健壮。插条规格及标准：生长点活力强，长10～12 cm，具4～5对叶，重约10 g，最好采用母株茎中部粗壮的3～4节生出的侧芽。以膨胀珍珠岩和草木灰按7∶3拌匀的混合物作基质，基质深度8 cm为宜。株行距 cm× cm。插前用50 mg/kg ABT-2生根粉或吲哚乙酸加奈乙酸或～吲哚丁酸喷插条基部。冬季扦插一般采用玻璃地棚或塑料薄膜地棚供插穗越冬生长之用[2]。
组织培养
康乃馨是较早组织培养成功的花卉之一，在生产上应用广泛。材料为康乃馨侧芽抽生的嫩茎，或在解剖镜下取茎尖(～ mm)。嫩茎切成～ cm长的小段，用MS+6-BA(2 mg/L)+NAA( mg/L)作产生绿芽和继代培养培养基，pH值调节至～。用MS+NAA(1～4 mg/L)作生根培养基。控制室温24 ℃左右，并用日光灯加光8 h进行培养。
3 病虫害防治
枯萎病
枯萎病为真菌性病害，病原菌为香石竹尖镰孢菌。在整个生长期均可发病。发病初期，植株地上部生长缓慢，同时根部变色[3]。该病病菌在土壤和病株中存活，可通过根和茎基部侵入植株，还可借插条传播蔓延。此病在夏季发展最迅速，危害最严重。应选用无病插穗，发现病害应立即拔除病株，与其他花卉实行2～3年轮作。发病初期可喷施50%多菌灵500倍液或代森锰锌500～600倍液，或对土壤消毒。
叶斑病
叶斑病主要侵害叶和茎，是一种世界性病害，有时也侵染花蕾和花[4-6]。该病在4月上旬至初冬均可发生，适宜生长温度为25～30 ℃，温室则全年都可发病，多雨季节发病最重。植株下部老叶发病多且重。生长期发病，可喷75%百菌清可湿性粉剂800倍液，或50%代森锰锌可湿性粉剂500～700倍液，或50%甲基托布津可湿性粉剂500倍液。隔7～10 d喷1次，连喷2～3次。
虫害
主要有种蝇、蝼蛄，可用毒饵诱杀。温室或塑料薄膜地棚内，最好在地床下设3 cm厚的黄沙层，以防蚯蚓入内活动。对蚜虫、红蜘蛛、夜盗蛾等虫害，则可喷药毒杀。
4 切花保鲜技术
采收
对于大花型康乃馨既可在花蕾即将绽开时采收，也可以待外轮花瓣从花萼内露出时采收。而多花型康乃馨应在有2朵花已开放，其余花蕾已透色时采收。采收时可用剪刀，也可用小型收割机。用剪刀时，应小心地将花枝剪下并从支撑网中拉出，避免折断花茎。
康乃馨的贮存寿命和瓶插寿命直接与其碳水化合物含量有关。而花中的碳水化合物含量又与一天中的时间变化有关。在13：00―16：00，康乃馨中的碳水化合物含量最高。因此，应在此时间段内采收切花，以确保最大限度地延长切花寿命。
保鲜
采花后，放入干净或含有保鲜剂的水中[7]。冷藏温度 ～0 ℃，相对湿度90%～94%。康乃馨对乙烯敏感，因此花枝应插在含有乙烯抑制剂的保鲜液(300 mg/kg 8-羟基喹啉+50～100 mg/kg硝酸银+5%～7%蔗糖)中贮藏。
蕾期采收的康乃馨需要进行催花处理。大花型催花液：200 mg/kg 8-羟基喹啉柠檬酸盐+25 mg/kg硝酸+50 mg/kg硫酸铝+10%蔗糖。多花型催花液：300 mg/kg 8-羟基喹啉柠檬酸盐+300 mg/kg噻苯达唑+10%蔗糖。
5 参考文献
[1] 冯天哲.家庭养花病虫害防治[M].北京：中国林业出版社，1989.
[2] 陈静瑶，魏文雄.不同基质对康乃馨不正常组培苗的影响[J].福建农业科技，1996(3)：24.
[3] 丁小维，梁雪妮，桂敏，等.不同激素配比对康乃馨芽增殖及玻璃化的影响[J].中国农学通报，2006(4)：269-271.
[4] 刘春松，叶辉，王良吉，等.香石竹的离体培养[J].安徽农业科学，2005(8)：1425-1485.
[5] 赵志昆，田海霞.康乃馨主要病害的防治[J].西北园艺，2000(4)：37-38.
[6] 李慧.康乃馨切花的保鲜[N].中国花卉报，2003-05-27(8).
[7] 潘尚芬.康乃馨鲜切花生产技术[J].农业科技与信息，2008(19)：40-41.
点击下页还有更多>>>康乃馨栽培技术论文
昆明地区园林花卉植物的应用研究 作者：魏开云 罗雁玲 摘要： 花卉是大自然给人类最美好的恩赐，它们可以美化环境，陶冶性情，净化心灵，增进健康，丰富人们的精神生活，给人以美的享受、美的熏陶和美的启迪；特别是在森林般的硬质建筑物里的都市人们，鲜花绿草的环境能使人们感觉干净、轻松、愉悦和舒畅。本文针对昆明市城市园林花卉植物的应用进行探讨和研究。 关键词： 昆明地区 园林花卉植物 应用研究 1. 城市园林花卉植物的涵义和分类 城市园林花卉植物的涵义 花卉的定义包括狭义和广义两个方面。狭义上讲，花卉仅指观赏其花或叶子的草本植物。从广义上讲，凡是具有一定的观赏价值，并按照一定的技艺进行栽培管理和养护的植物，都称之为花卉。包括观花的（如月季、牡丹等），观叶的（如蕨类、吊兰等），观芽的（如银芽柳的银色绒芽），观茎的（如紫竹、斑竹、红瑞木）等，观果的（如佛手、观赏西葫芦、碧冬茄等），观根的（如水杉的气生根、木棉的板根等）。其中，既有高等植物，也有低等植物；既有水生植物，也有陆生植物，气生植物；既有匍匐矮小的，也有直立高大的；既有草本的，也有木本的，木本中有乔木，灌木和藤本等等，种类繁多。城市园林花卉是花卉中主要用于城市绿化，美化的种类，其范围也在日夜扩大。 城市园林花卉植物的分类 观赏植物种类繁多，习性各异。常见的分类方法有以下几种：气候分类法，形态分类法，实用分类法。 气候分类法 即依据花卉原产地的气候特征进行分类，因为原产地的气候条件基本上决定了花卉的生态习性，从而也影响了花卉的栽培管理方法等，这是最常见的一种分类方法，通常分为4类。 1、热带花卉 包括热带雨林和季雨林花卉、热带高原花卉和热带沙漠花卉。这类花卉因原产地的气候条件是四季高温无寒，因而其耐寒性较弱，耐热性强。 2、副热带花卉 这类花卉包括4个亚类型：（1）地中海气候花卉，如非洲菊、唐菖蒲、香豌豆等，都要求有温和的冬天和凉爽的夏天，在暑热地区入夏即出生长缓慢或停止。（2）副热带季风气候花卉，如翠菊、山茶、杜鹃等较能适应暑热，但不耐严寒。（3）副热带高山花卉，如报春花、龙胆、高山杜鹃等喜凉爽的夏季，忌夏季高温高湿。（4）高原花卉和副热带沙漠花卉，如芦荟、仙人掌等多浆植物，其突出特点是耐热耐旱，但耐寒性较差。 3、暖温带花卉 这类花卉分2个亚类型：（1）欧洲气候型花卉，如三色堇、雏菊、紫罗兰等，喜夏季凉爽、冬季温暖的气候；（2）中国气候型花卉，如牡丹、菊花、一串红等，比较适应冬寒夏热，年温差较大的气候。 4、冷温带花卉 包括我国东北、西北高寒地区和北美气候以及中欧、北欧、东欧等地原产的花卉，如百合、黄刺玫、丁香等，这类花卉耐寒性较强，但忌高温高湿，尤其是百合等在高温高湿的气候条件下生长开花不良，极易染病。 形态分类法 草本花卉：即从外形上看没有主茎或者虽有主茎但是主茎没有木质化或仅有体基部木质化的花卉，这类花卉按其生命周期的长短又分为多年生草本花卉和一、二年生草本花卉两类。 木本花卉：指植株茎木质化程度相当高的一类花卉。根据其茎干形态及其生态习性分为：乔木、灌木、竹类。 实用分类法 依据用途和栽培管理方式进行分类：1、露地花卉；2、温室花卉；3、切花及切叶栽培花卉；4、干花栽培花卉。 2昆明地区常见园林花卉植物 一、二年生花卉 一年生花卉：这类花卉在一个生长季内完成整个生活史。如凤仙花、鸡冠花、波斯菊、万寿菊、矮牵牛等。 二年生花卉：这类花卉需要在两个生长季内完成整个生活史。如石竹、羽衣甘兰、雏菊、三色堇等。 宿根、球根花卉 宿根花卉：它们终年常绿或以地下须根越冬或过夏。如菊花等。 球根花卉：地下部分为适应生存需要变成球形，其顶部有肥大顶芽。如仙客来、唐菖蒲。 木本花卉 指植株枝茎木质化程度相当高的一类花卉， 乔木：植株有高大的主干。如香樟、桂花、云南山茶、海棠、梅花、紫薇等。 灌木：植株没有明显主干，分枝能力较强，而且株体生长较为低矮。如杜娟、含笑、山茶、栀子花等常绿灌木，和月季、牡丹、连翘等落叶灌木。 水生花卉 指终年生长在水中或沼泽地中的多年生草本观赏植物。按其生态习性及与水分的关系，可分为： 挺水植物：根生于泥水中，茎叶挺出水面。如荷花、千屈菜等。 浮水植物：根生于泥水中，叶片浮于水面或略高于水面。如睡莲、王莲。 沉水植物：根生于泥水中，茎叶全部沉于水中，仅在水浅时偶有露出水面。如莼菜、里藻。 漂浮植物：根伸展于水中，叶浮于水面，随水漂浮流动，在水浅处可生根于泥中。如浮萍、凤眼莲。 野生花卉 所谓野生花卉，就是未经人工驯化和栽种的草本花卉。云南是野生花卉的王国，开发和利用野生花卉植物资源的前景非常大，野生花卉株高差异较大，既有匍匐低矮的，也有高达米的。如报春、龙胆等。 3昆明地区园林花卉植物的应用及示例 园林花卉植物的应用类型 随着社会的发展和人类文明程度的日益提高，城市绿地景观已逐渐成为评价一个城市的文明程度、综合素质、以及园林水平的重要标志。在城市建设中，在道路、建筑以及必须的构筑物之外的空旷地、林地、坡地等都需要用树木花草等观赏植物布置起来，创造出花团锦蔟、绿草如茵、荷香拂水、空气清新的景观与意境，以最大限度地利用空间，来达到人们对园林的文化娱乐、体育活动、环境保护和美化风景艺术等多方面的需求。 花卉在园林布置中应用 花卉在城市园林中最常见的应用方式即是利用其丰富的色彩变化的形态等，来布置出不同的景观。主要形式有花坛、花境、花从、花群以及花台等，而一些蔓生性的草本花卉又可用以装饰柱、廊、篱以及棚架等。 （一）花坛一般多设于广场及建筑物的出入口处和道路的中央，两侧及周围等处。花坛要求经常保持鲜艳的色彩和整齐的轮廓，因此多选用植株低矮、生产整齐、花期相对集中、株从紧密而花色艳丽（或观叶）的花卉种类来布置。一、二年生花卉是布置花坛的主要材料。花坛种类繁多,因季节的不同分为春花坛、夏花坛、秋花坛和冬花坛。因使用的花卉材料不同可分为： 灌木花坛：主要用开花或色叶灌木布置而成。 草花花坛：用一、二年生草本花卉以及多年生宿根花卉配置而成。 混合花坛：用开花灌木以及草本花卉混合配置而成。 专类花坛：应用品种、类别繁多的同一种花卉配置的花坛，如牡丹专类花坛，月季专类花坛，菊花花坛等。详见附表六。 （二）花境花境是借鉴自然风景中林缘野生花卉自然散布生长的景观，并加以艺术提炼而应用于园林景观布置的一种形式。即以树丛、树群、绿篱、矮墙或建筑物为背景的带状自然式花卉布置，不同种类的花卉以自然斑块状混交栽植，其边缘可以是自然流畅的曲线，也可以是直线，因所处环境的不同而异。 布置花境应突出其自然和耐粗放管理的特性。因此最好的花材应是宿根和球根花卉。详见附表七。 （三）花从及花群 花从及花群是将自然风景中野生花卉散生于草坪山坡的景观借用于园林造景之中，通常布置于开阔的草坪周围，使林缘、树丛、树群与草坪之间起联系和过渡作用；也可用于布置自然曲线型道路的转折点，使人产生步移景换的感觉；也可点缀于小型院落及铺装场地（包括小园路、台阶等）之中。较常用一、二年生花卉及球根、宿根花卉。详见附表八。 花台和花池 花台是将花卉栽植于高出地面的台座上，花池则一般平与地面或稍稍高出地面，但其周围多用砖石等围起，形成一种池型的封闭空间，类似花坛但面积较小。通常设置于庭院中央或两侧角隅、建筑物的墙基、窗下、门旁或入口处。 篱垣及棚架 在景观配置中，对于篱垣、门楣、窗格、栏杆以小型棚架等也常用花卉材料加以点缀和掩蔽。 岩石园和墙园 岩石园和墙园主要是借鉴自然界中的山野崖壁、岩缝、石隙间散生的野生花卉所显示的独特风光而布设的一类园林景观。 缀花草坪 在观赏草坪以及游憩草坪中适量混种一些植株低矮、花叶细小而适应性强、有自播繁衍能力的草本花卉来装饰点缀，形成缀花草坪。较常用野生花卉混合种植，且以宿根花卉为主，间以一、二年生草本花卉。 水体景观 在园林中，除了水池、湖面等需要布景点缀外，还常专设一区，创造涧、喷泉、跌水、瀑布等水景，汇于池沼湖泊，栽种多样水生花卉，布置成水景园或沼泽园。常用布景的水生花卉（包括水生植物）有荷花、睡莲、浮萍、芦苇、千屈菜等。 花卉装饰 花卉作为城市园林造景的主体，除用于露地景观布置外，还常用于美化室内及建筑近旁，创造优美舒适的劳动、生活、休息环境；或应用花卉专为各种集会、展览场所等进行美化布置，以突出主题，烘托或调和气氛。 公共场所的花卉装饰 像车站、码头、广场、影剧院、体育馆、博物馆、医院、疗养院、商场等这些与人民广泛接触的公共场所，一般都有花卉（包括观赏植物）的适量布置，或供人欣赏、评品，或为了适当遮掩而美化环境，或烘托氛围，或起标志、分散视线和注意力的作用。 在广场入口及建筑周围，通常已有园林景观布置而花卉装饰只是在节日前后或迎送嘉宾时暂时性的应用。所以首先要保证交通、视线、采光等不受影响，布置时着重整体效果和远观效果。可用整齐高大的盆树或盆花呈对称摆设，也可用色彩艳丽的花草成排成列布置，或用花卉布置临时花坛、花带等。 门厅、过道等处一般都有标识说明，花卉布置应与之相协调，可用观赏性较强的盆花或三五组团、或散散落落、或设立支架悬挂等来布置，既不影响交通，又不要占地太多，且观赏效果良好。 休息室等要求布设精致的盆花、花篮、盆景等，最好具芳香，既可供人们欣赏，又可消除人们的疲劳、轻松人们的心情等。 节日街道广场的花卉装饰一般是用大型盆景配以高大的标语、标牌、画像、花篮、花球等，以渲染节日喜庆气氛，色彩上要多用红、黄、紫等鲜艳亮丽色系。 居住环境的花卉 居住建筑中的花卉装饰主要应用于起居室、餐厅、卧室以及阳台、客厅等处。门窗及阳台护栏最好用蔓性植物花卉加以装饰，向阳的窗户或阳台可用金银花、牵牛花、茑萝等组成花檐或绿棚。枝叶下垂的花卉最适合放在窗台及阳台外沿或悬挂于窗台中央。有落地窗时可陈设小型花瓶、盆花或微型盆景等。一般窗台上可放置盆花、插花或盆景来装饰。室内几角处最适合用盆花或花瓶加以屏蔽或装饰，常用常绿观叶或观花叶俱美的材料，如凤梨、绿巨人、发财树等。桌柜台面等适宜选用花色鲜艳或外形精美的盆花、盆景、插花及花篮、干花、花包等布置，以供近处观赏，最好选用体量较小的。如新几内亚凤仙、仙客来、红掌等。居室内自然光线较弱，最好选择喜阴或耐阴性较强的花卉材料。干花观赏持久、姿态活泼，也是居室美化的常用素材。 展览会场的花卉装饰 花卉展览因其性质的不同可分为庆贺展览、纪念展览、科普展览、品种评比展览等，或兼而有之。 游览观赏用温室的花卉布置 游览观赏温室是在冬季陈列热带、亚热带花卉供游人参观游览欣赏，使人能在寒冷季节里感到春的温暖、夏的热烈，仿佛到了异国他乡。此外，在寒冷地带还建造宽敞的温室，分隔成各种气候分区，布置组成不同气候地带的植物景观或室内花园。 园林花卉植物的配置 花卉造景的概念及其基本原则 在花卉配置造景时应遵循以下基本原则。 地域相宜的原则 也就是说在花卉配置造景时要因地制宜。选择花木种类、品种时应以当地乡土种类为主，引种其他地域或气候带的花卉种类时，应按照“气候、立地相似的原则”进行，并加强相关的科研、实验，待完全适应后再大规模应用于景观配置中。要做到科学、安全可靠、节约、有效。 位置相宜的原则 每一座园林、每一片绿地、每一个景点，都会有地势高低、土壤高燥或低湿、地面空旷而阳光充足或阴蔽而光照不足、四周郁闭而通风不畅或周边开阔而通风良好、肥沃或贫瘠等方面的差异，因而在花卉配置时，要注意因位而宜。高燥的阳坡地就应选择耐旱性强的花卉，低湿处则应选耐水湿的花卉；耐阴的花卉必须栽种在荫蔽的环境下，避免强光照射，喜光的阳性花卉则必须种植在光照充足的向阳处。 我国传统的自然式山水园林中，花木配置是非常重视因位制宜的。一般山丘地的配置，以松、柏常绿针叶类花木为主体，以杏、枫香、黄连木、槭树与竹类等色叶树木类为衬托，并以杜娟、栀子花、绣线菊等花灌木相间其中，以丰富山林景观的层次和色彩。而溪谷水边，通常配置池杉、乌桕、枫杨、垂柳、水竹等植物，以丰富水岸景观。池塘水体，一般适当栽种观赏性水生植物，如荷花、睡莲、浮萍等以点缀水景。住宅区或庭院中可用梅花、海棠、玉兰、紫薇、桂花、腊梅、紫竹、芭蕉等，配置牡丹、芍药、等多年生矮生花卉，并结合栽植一些草坪、地被植物，形成乔、灌、花草及地被相结合的立体生态型景观，保证四时有花、四时有景，花红草绿，美景宜人。大片的草坪周围，通常散植雪松、龙爪槐、枫香、丛竹等色形具美，又能遮阴的花木。墙面、廊、架、柱、桥等则常用紫藤、葡萄、西番莲、叶子花、爬墙虎、常春藤、牵牛花、鸟萝、金银花、鸡血藤等藤本或蔓性花木。山坡台地，一般栽植野蔷薇、迎春、木槿等加以装饰点缀。 总之，要按照不同的方位、地势和立地条件，顺应花木的生物学特性，照顾游赏美景的需要，做到配置有方，各得其所。 色彩相宜的原则 也就是说花木配置时应做到色彩相宜，即花木的色彩（叶色、花色、茎杆和枝条颜色等）应与周围环境、地理位置、当时当地的气候条件、场景氛围（喜庆、哀伤、热闹、幽静）等相协调，要能通过花木的色彩、形态等来衬托气氛、突出主题、创造意境。 在花木配置时，常常用到对比色彩搭配配植，若应用得当，能呈现跳跃新鲜的效果，可以起到突出主题、烘托气氛的作用。 此外，在花木配置时还应同时考虑不同色彩给人的视觉感受。如黄色最为明亮，象征太阳的光源。比如，幽深浓密的片林或风景林往往使人产生神秘莫测的畏惧感，若在其中间植一株或一丛开花或秋色叶鲜艳的乔木或灌木，如银杏、枫香、桦木、迎春、连翘、黄连木等，于林中空地或林缘，可以使整个片林或风景区活泼而明亮起来，同时还有扩大空间感的作用。红色是火与血的颜色，给人感觉热烈、喜庆和奔放，刺激性强，能很好地渲染喜气洋溢和活泼热情的气氛。如街头小游园中栽植一片石榴，花开时节似一片红云；或在地势高显的坡地上栽植一丛或一片红碧桃或榆叶梅，开花后如霞如云的尉为壮观。蓝色是天空和海洋的颜色，具有深远、清凉、宁静、舒缓的感觉，因此布置以夏季观景为主的景观时，多选用蓝色色系的花木，如勿忘我、香雪球、桔梗等。紫色具有庄严、高贵和浪漫温馨的感受。园林造景时常用紫藤、紫丁香、洋绣球、美女樱等以及一些高山花卉，如勿忘我、大叶铁线等，尤其在花坛布置时常用紫色系列的花木与鲜黄或亮黄色系的花木搭配，形成强烈的对比，给人以强烈的吸引和鲜明的印象。白色悠闲淡雅，是纯洁朴素的象征，给人感觉柔和、淳朴、凉爽和洁净，通常用来柔化鲜艳的色彩，也常用于夏季景观的布置。此外，园林造景是通常以白墙为底色，配植枝干修条的竹类、垂柳或花色艳丽的乔木、灌木等，映衬出美丽如画的景致。园林雕塑也常用白色，与周围的色彩与景观搭配，更能突出雕塑的主题与意义。 季相相宜的原则 也就是说花木配植时应考虑树木花草的季相变化，使园林景观因春、夏、秋、冬四季而变换，力争月月有花，季季有景。在景观创作中应将地形与植物这两种与人类最具亲和性的造景因子结合起来，在一年四季中表现出不同的景观题材：春景突出春意盎然—注重植物叶色与春花植物合理搭配；夏景则以夏阴浓郁为主—注重植物自身的形态、郁闭后的遮荫效果，并用夏花植物来点缀其中；秋景应侧重秋果秋实秋色—注重植物的色彩和果实形态等的变化，并点缀叶树，以强化景观效果；冬景则宜突出清爽与风寒的冬意—以常绿的松柏等植物与落叶植物巧妙配置而形成丰富的天际线与疏密错落的空间内容，同时考虑自然风雪冰霜等景观的因素。这样既能给人美的感受或美的联想，又能使人从花木的生长变化中感受到四季的变换、时间的流逝以及生命的兴盛衰亡，增加人对自然的感知和视觉感观上的刺激。四季中最容易忽视的是冬季景观的配置，当然也是园林景观构造中最难的。其实，树木花卉在冬季自有其独特的审美价值，一般多采用枝条优美的落叶树种，配植适量的常绿观赏树，如松、竹等以及耐寒性开花花木，如梅花、蜡梅等，充分注意雪景、冰雪的借用等，也可营造出幽静迷人的冬之景致。 因景制宜的原则 花木配植造景时除考虑气候、地理、物候等自然条件外，还应兼顾景观的人文需要以及造景的目的、功效等人为因子。无论是纯朴还是混交，是孤植、丛植还是片植、对植、行植、篱植，都要因景观主题的需要而选择。一般，孤植应植于重要位置或视线的集中点，并注意与周围景观的强烈对比，以取得“万绿丛中一点红”的效果。而某一特色花木的集中片植，或由少到多的配植，能烘托出浓郁强烈的景观氛围。对植通常适宜于园门、厅堂、桥头等的两侧，一般选择冠型优美且规整对称的花木，如海桐、球柏、黄杨等。行植一般用于园路两侧和建筑物的四周，可选用龙柏、银杏、香樟、棕榈、玉兰等树干高挺，冠型整齐、枝密阴浓的花木。园林境界、树坛、花坛、草坪周围、道路的边缘等通常用黄杨、栀子花、木槿、杜鹃、女贞等密植成篱，以分割空间，并有防护功能。 因质相宜的原则 在花木配植造景时还需要考虑花卉植物的质地和质感差异，所选用的花卉材料质地与质感等都应与所处的环境、造景的目的与意图相吻合。如垂柳依依，给人的感觉是温柔与飘逸；栎、槲等叶质粗糙宽大，给人的感觉是质朴与粗犷；水仙的冰清玉洁、牡丹的华丽富贵、松树的苍逸与遒劲、雪松的高贵与清丽，这些都因为其形、其质的不同，应用配置时要充分考虑花材的质感差异，做到“以人为本”，因需取材、因景取材。景物相宜，人物相宜。 珍惜古树名木的原则 老态龙钟的古树名木，以其独特的审美形态，能给人一种独特的艺术享受。因此，在城市景观配置时，要珍惜并保护好古树名木，可以因此、因形、因势而配置独特的花卉景观，来衬托它和修饰它，使人触景怀古，观感岁月沧桑、造物的神奇和自然的伟大。 花卉造景的意义及国内外动态 随着社会的进步与发展，植物造景不仅走进了富裕、殷实的现代家庭，也逐渐成为宾馆、商场、写字楼等建设的主要内容之一。耐阴的观赏植物、无土栽培的应时花卉以及仿真的墙花、草坪等布置而成的室内景观，使人们身居居室，却仿佛置身于优美的大自然怀抱，能消除人们的疲劳、恢复旺盛的精力和体力。 西方一些发达国家十分崇尚自然，在园林布置中大多借鉴自然界景观特色，使人们置身其中加入大自然的怀抱，他们十分重视造景植物的多样性与群落的稳定性。很多国家在保护、培育繁殖、育种创新的同时，还不断地从国外收集、引种大量的观赏植物。 植物景观既能创造优美的环境，又红又专能改善人类赖以生存的生态环境，对于这一点，国内国外都已达成共识。但是，在国内有一种重园林建筑、假山、雕塑、喷泉、广场等，而轻视植物的现象。更有偏激者认为中国古典园林是写意自然山水园，山水便是园林的骨架，挖湖堆山是理所当然的，而植物只是毛发、是陪衬。而今人口稠密，经济建设日新月异，城市环境恶劣，生活其中的人们所向往和追求的自然与古人相去甚远。因此在构造城市景观时还应以人为本，将城市与自然相融合，以植物材料为景观主体，同时借鉴、吸收古典园林造园艺术的精华。应以自然为师，以提高率视率、改善生态环境为住，同时要满足游人的观赏需求，尽量减少使用杀虫剂、除草剂等等化学药剂所造成的污染。 参考文献 陈俊愉.《园林花卉》第一版.上海：上海科学技术出版社，1980 陈淏子.《花境》第二版.北京：农业出版社，1997 云南省园艺博览局.《世界园艺博览园植物名录》第一版.昆明：云南科技出版社，1999 陈少风.《庭园调色板》第一版.江西：江西科学技术出版社，2001 王香春.《城市景观花卉》第一版.北京：中国林业出版社，2001 吴涤新.《花卉应用与设计》第一版.北京：中国农业出版社，1994
玫瑰花的栽培技术论文篇二 玫瑰与粮食蔬菜间作种植研究 摘要玫瑰与蔬菜、粮食间作田间试验研究表明，玫瑰花与粮食蔬菜间作经济效益是单植玫瑰的倍，从地力、空间和时间3个方面分析了间作成功的机理;筛选出的7种优良模式，可在不同的条件下推广应用于生产。 关键词玫瑰;粮食;蔬菜;间作;效益 中图分类号;文献标识码A文章编号 1007-5739(2011)03-0119-01 StudyonIntercropstheGrainandVegetableintheField oftheRose WANG Gui-fang 1GUO Yong-lai 2ZHANG Jing-ju 2 (1 Pingyin Meteorology Bureau in Shandong Province，Pingyin Shandong 250400; 2 Pingyin Rose Research Institute) AbstractThe experiment about intercrop the vegetable and grain in the field of the rose was carried out. The result showed that the economic performance was times as planting the rose only，mechanism of the successful intercrop was analyzed from the land productivity，space and seven kinds of good modes which had been chosen could be applied to production. Key wordsrose;grain;vegetable;intercrop;benif 玫瑰是重要的香料植物，具有广泛的用途，可酿造玫瑰酒、腌制玫瑰酱、提取玫瑰油，玫瑰花蕾入药、作茶饮可预防和治疗心、脑血管疾病，玫瑰又具有抗逆性强、易于管理的特点，因此玫瑰的种植面积愈来愈大。为充分利用土地资源，提高种植效益，笔者在总结群众多年玫瑰间作[1-2]种植经验的基础上，进行了14种种植模式的对比研究，筛选出了7种优良间作模式，为大面积推广提供科学依据。 1材料与方法 试验材料 供试甘蓝品种为中甘1号;西红柿品种为强丰;马铃薯品种为泰山1号;白菜品种为丰抗70;西瓜品种为郑杂5号;水萝卜品种为鲁萝卜4号;油菜品种为胜利;小麦品种为鲁麦13号或陕7859;大豆品种为鲁豆7号;甘薯品种为徐薯18号;玉米品种为鲁玉3号;谷子品种为鲁谷7号;花生品种为海花1号;大葱为章丘大葱;大蒜为苍山大蒜。供试玫瑰为五年生嫁接重瓣红玫瑰(Rosa rugosa cv. Plena)。 试验地概况 试验地位于平阴县玫瑰镇附近，为低山丘陵台地，土层深厚，具水浇条件。土壤为碳酸盐褐土，含有机质、全氮、全磷、碱解氮 mg/kg、速效磷 mg/kg、速效钾74 mg/kg。玫瑰密度 m× m，冠幅 m，株高 m，南北向栽植。 试验设计 试验设14个处理，每处理面积为333 m2，2次重复。在玫瑰行两侧各留60 cm作为营养保护带，中间 m做畦进行间作处理，施肥、浇水、病虫防治等管理按常规进行。 玫瑰与蔬菜的种植模式试验。设4个处理，分别为玫瑰间作甘蓝、西红柿(S1)，1月下旬进行温炕育苗，2月下旬将小苗移入阳畦内进行二级育苗，3月中旬带土移栽入玫瑰行内;每畦栽3行，株距40 cm，栽后搭上塑料小拱棚，4月中旬撤棚;5月下旬甘蓝收获后，按每畦2行栽植西红柿，株距30 cm。玫瑰间作马铃薯、大葱、大白菜(S2)，选用脱毒马铃薯，于2月中旬用10 μg/mL的赤霉素浸种30 min后，放置室内晾干，沙培催芽，3月上旬按每畦2垄点种，株距30 cm;6月中旬收完马铃薯后，在2垄中间挖沟，按5 cm的株距栽植1行大葱;9月上旬，在大葱两侧按50 cm的株距各栽植1行大白菜。玫瑰间作西瓜、水萝卜(S3)，3月中旬按40 cm的株距点种1行西瓜，点种后覆盖塑料薄膜;7月中旬按20 cm的株距点种2行水萝卜。玫瑰间作油菜、芥菜(S4)，10月上旬按40 cm的行距每畦播种2行油菜，翌年7月下旬按20 cm×50 cm的株行距点种2行芥菜。 玫瑰与粮食的种植模式试验。设6个处理，分别为：玫瑰间作小麦、大豆(L1)，于10月上旬按20 cm的行距每畦播种6行小麦;于6月中旬按30 cm的行距播种4行大豆。玫瑰间作小麦、夏甘薯(L2)，小麦种植同前;小麦收获后相距70 cm整2趟甘薯垄，按25 cm的株距进行栽植。玫瑰间作小麦、夏玉米(L3)，小麦种植同前;5月中旬在小麦中间按40 cm×40 cm的株行距串种玉米。玫瑰间作春甘薯(L4)，4月中旬，按30 cm×70 cm的株行距每畦栽植2行甘薯。玫瑰间作小麦、晚谷(L5)，小麦种植同前;小麦收割后灭茬整地，按行距30 cm每畦播种4行谷子。玫瑰间作春花生(L6)，4月下旬按20 cm×30 cm的株行距，每畦点种4行花生。 玫瑰与粮食蔬菜的种植模式试验。设4个处理，分别为：玫瑰间作小麦、大葱(LS1)，小麦品种选陕7859，10月中旬播种，6月下旬按7 cm×60 cm的株行距，每畦沟植2行大葱。玫瑰间作小麦、水萝卜(LS2)，小麦种植同前;7月中旬按20 cm×60 cm的株行距，起垄点种水萝卜。玫瑰间作大豆、菠菜(LS3)，4月中旬按30 cm的行距播种4行大豆，大豆收获后于10月上旬整畦，撒种菠菜。玫瑰间作大豆、大蒜(LS4)，大豆种植同前;寒露前种植大蒜，密度12 cm×30 cm。 玫瑰行间不进行任何间作作对照(CK)，其他管理相同。 2结果与分析 生长情况 各种间作物的生长情况均表现良好。西红柿坐果率高，(下转第125页) (上接第119页) 果形好;大葱生长旺盛，葱白比例高;马铃薯一级薯块率达到70%。小麦和谷子茎秆粗壮，颗粒饱满，无倒伏现象，这是因为玫瑰为其创造了适宜的生长环境。花生和大豆植株长势虽好，但结果情况不如一般大田，靠近玫瑰的边行结果明显减少，饱满果率也显著降低。这是因为花生和大豆系喜光植物，玫瑰遮荫使其光合产物积累减少，玫瑰植株较高，阻碍了空气流通，也有一定影响。玉米长势健壮，结果情况好于大田，但由于其植株较高，对玫瑰遮荫较多，影响玫瑰生长较大。甘薯较一般大田差别不大，但其旺盛生长期易攀附玫瑰，影响玫瑰生长。 经济效益 从表1可以看出，14种处理的经济效益较CK均明显增加，处理间差异也十分显著，效益高者是CK的倍，效益最低者也为CK的倍。从3种种植模式看，以间作蔬菜效益最高，间作粮食作物效益最低。但是，间作蔬菜工作量大、用工多、肥水条件要求高，同时还要求一定的技术条件;相比之下，间作粮食作物省工省力、肥水及技术条件要求均较低;粮食和蔬菜混合间作，其效益等各方面均介于二者之间。 本文为全文原貌 未安装PDF浏览器用户请先下载安装 原版全文 机理分析 玫瑰间作成功的机理有以下3方面：一是合理分配地力。在距玫瑰根颈60 cm处，调查了3株嫁接玫瑰垂直剖面的根系的数量，调查结果见表2。从表2可以看出，嫁接玫瑰根系分布深广而且比较集中，距根颈60 cm处，75%的根系分布在20 cm土层以下，而蔬菜和粮食作物的根系则绝大部分分布在20 cm土层以上，这就避免了玫瑰与间作物互相争水争肥的矛盾。二是合理利用空间。玫瑰属灌木，自然高度在 m左右，冠幅在 m左右，可以通过整形修剪，把玫瑰控制在一定的空间范围内，一方面给间作物让出空间，另一方面也可防止玫瑰开花部位外移，更便于采花。在间作物的选择上，应选矮秆作物，以减小对玫瑰的影响。玫瑰与间作物还可以相互利用，例如大葱在有遮荫的条件下，生长旺盛，葱叶鲜绿，病虫害少。玫瑰遮荫，温度降低，可提前播种水萝卜，提前出售，增加经济效益。玫瑰可作防风墙，使间作物不易倒伏，还可阻挡病虫害的传播。间作物覆盖玫瑰行间，可减少地表水分蒸发并可防止杂草滋生。大豆、花生等豆科植物还可固氮，增加土壤肥力。三是时间分配合理。选择早春的马铃薯、春甘蓝，晚秋的大白菜及冬小麦，其主要生长期正是玫瑰叶面积系数较小的时期，能够充分地利用空间和光能。 3结论与讨论 在玫瑰与蔬菜的间作模式中，以间作甘蓝、西红柿和间作马铃薯、大葱、大白菜效益最高;玫瑰和粮食的间作模式中，以间作小麦大豆、小麦夏甘薯和小麦晚谷效益较高;玫瑰和粮食蔬菜的间作模式中，以小麦、大葱和小麦、水萝卜效益最好。这7种种植模式可作为优选模式进行大面积推广。玫瑰属天然香料植物，种植效益受市场影响较大，进行间作既可以充分利用土地资源[3-4]，又可以降低种植玫瑰的风险。玫瑰效益好时，可少间作或不间作，充分利用空间使玫瑰立体开花;玫瑰效益差时，可重剪玫瑰，留出较多的空间进行间作。也可采用大行距栽植玫瑰，使间作物占用较大的空间，这样有利于实现机械化[5-6]。 4参考文献 [1] 余丽莉，庄文彬，董须光.玫瑰茄在漳浦县的种植表现及高产优质栽培技术[J].福建农业科技，2007(2)：27. [2] ROY A R，王五湖.玫瑰茄间作油料和豆类作物的效果[J].热带作物译丛，1991(4)：43. [3] 郑润芳，平金岭，刘洪�，等.鹤乡玫瑰栽培及扩繁技术[J].现代农村科技，2010(6)：24. [4] 刘恒德，杜琳辉，排孜来提・托合提，等.和田地区食用玫瑰种植现状调查[J].农村科技，2009(6)：119-120. [5] 侯杰.多季玫瑰生产栽培技术[J].中国农村小康科技，2009(3)：40-41. [6] 毕敏.白玫瑰栽培技术要点[J].农村实用技术，2010(6)：51. 看了“玫瑰花的栽培技术论文”的人还看： 1. 玫瑰花的繁殖方法 玫瑰花的栽培方法 2. 水养玫瑰花怎么养 玫瑰花的栽培步骤 3. 小麦的种植方法介绍 4. 关于玫瑰与爱情的短文章 5. 关于园艺技术论文范文
盆栽菊花的栽培技术。同学，多少字呢。在下可以原创、
冬季盆栽菊花的生产原理。 大多数菊花为典型的短日照植物，只有在短日照条件下（小于12小时光照，连续暗期12小时以上）才能开花，如秋菊的自然花期就在11-12月；在长日照条件下（日照17小时，连续暗期7小时）是不会开花的，如4-8月，菊花只进行营养生长，无法进行花芽分化和开花。菊花的营养生长期最好能处于日长夜短的长日照条件下完成，待长至一定高度后（如35CM以上），才进行短日照处理，以诱导花芽分化和开花。在秋冬季为了阻止花芽的形成，必须人工加光来延长日照，促进营养生长，抑制花芽分化。 中国的农历春节一般都在1月下旬至2月中旬之间，这“反季节”栽培的菊花，即使营养生长未达到一定的大小，也会形成花芽开花，并不能达到商品化质量和满足使用要求。生产应节春节菊花的最好的办法是在晚上加光，以中断连续黑暗，使两个暗期都小于7小时，促进营养生长。等到用花前约70-80天，才停止补光，让菊花正常进行生殖生长，孕蕾和开花。
植物学本科优秀毕业论文:花卉水培技术运用分析
自古以来种花赏花一直被视为陶冶情操，放松心情的不二选择。传统花卉在种植过程中，污染较大，且有土栽培卫生清洁难度较大，越来越难以满足现代人对于赏花的追求。因为水培花卉开始出现在人们的视野中，其独特的培育方法，造就其污染小，方便栽培栽培，卫生清洁等诸多优点。水培花卉的生活环境在水中，植株本身可以是半没入水也可以整体入水，其摄取营养的方式很特别正如土培花卉从土中摄取营养成一样，它是从水中获取。培育者水中加入营养液，如硝酸钙、硝酸钾、硝酸镁、硫酸亚铁和钼酸铵等，花卉通过根系吸收溶解在水中的营养成分，供植物体本身的生长繁殖。其培育方式不仅打破了传统花卉培育过程中的种种局限，而且花盆的'原则也较以往呈现出很大的灵活性。培育过程简单，平时在花卉料理，清洁卫生方面都十分省事。与传统的土培花卉相比水培花卉具有的观赏与艺术价值更是无可比拟。具有相当大的培育前景。
1适宜培育花卉的种类
水培花卉技术要求植物的根系能够满足水生的条件，常见适合水培技术的花卉种类有观叶类、天南星科、观花类和仙人掌类等。这些水培花卉都具有如下共同特点。植株容易成活，根部不易腐烂、环境调整合适是枝繁叶茂，是花卉市场的宠儿，培育者短期可产生经济效应[1]。
仙客来
仙客来又叫萝卜海棠、植物学将其归类为报春花科，仙客来属。处于开花期的仙客来十分美丽，翠绿的叶片中间伸出一簇花朵，犹如火炬一般。花瓣由五瓣花瓣组成，花色分为玫红色、粉红色、黄色及白色。叶子大小适中，边缘呈锯齿状，叶面部分泛白。整体看来犹如其名字一般，似天外仙客，站立于绿叶上方，婉约动人。仙客来性喜温暖，怕炎热[2]。
富贵竹
旱伞草
万年青
鹅掌柴
水仙
2 水培花卉的繁育
水培容器的选择
水培材料的获取与处理
建立苗床
营养液的配制
繁育花苗
3水培花卉的栽培技术
换水施肥
控制水位及水温
控制湿度与通风补氧
及时修剪与病虫害防治
4 水培花卉的注意事项
5 水培花卉市场前景
综上水培花卉本身具有观赏性、增氧、增湿效应、干净卫生等诸多优点，使用价值大，再加上花卉普通家庭都能消费的起，市场前景可观。水培花卉属是一个刚刚起步的产业，我国目前还缺乏采用工厂化链条式的生产花卉培育基地，竞争力比较少，正处于一个可获取高额利润的时期[18]。目前，水培花卉在我国处于刚开始的阶段，具有显著的优势。在国内市场占有率有望扩大。水培花卉一出现，立即在花卉市场占有一定的份额，自身具有的干净、简约、美观等诸多土培花卉无可比拟的优点很快走在了花卉市场的前面。在北、上、广等一线城市，以及太原等二线城市，水培花卉深受欢迎，一举成为人们高雅、健康的消费时尚[19]。相信未来某一天，水培花卉将会走进我们每个人的生活...
相关范文：广东年宵盆栽菊花生产技术初探摘要：对广东春节盆菊生产中的品种、成本、营销和生产管理技术进行了初步总结，主要对补光控花技术进行了详细的说明，本文对应节生产菊花有一定的指导和参考作用。关键词：年宵花；盆栽菊花；生产技术菊花是中国十大名花之一，也是花中四君子之一，她色、香、姿、韵俱全。在广州和广东的迎春花市中，菊花历来是传统花卉中不可缺少的应节花卉，和年桔、圣诞花、大丽花、杜鹃等成为年宵花中的主角，持续花期长达20天以上，在布置花坛、花境、花带中起十分重要的作用。同时广东是时花生产大省和强省，其中菊花的主要生产基地分布在广州芳村、顺德陈村、中山小榄等地，大部分花农在年宵花选择上仍然会以菊花为主要的生产和销售品种之一，但鲜见有系统的学术论文进行总结和研讨，本文意在抛砖引玉，就菊花生产和经营方面进行初步探讨。1、广东地区主要菊花生产品种。因为盆栽菊花售价不高，利润较低，很少有科研机构愿意进行科研生产和技术革新工作，主要以花农的传统栽培方法为主。主要的生产品种约20个（以广州地区的俗称为主，非正式学名分类，文字为音译，部分可能不标准），有黄色类的板腊黄、台黄、黄秀凤、宁波黄、无锡黄，红色类的台红、东莞红、黄心红、牡丹红、满堂红、花猫菊、光头红，白色的大白莲，金色的丽金，绿色的绿绣球，其它色的一点金、一点银、十八小姐等。按花径的大小区分，大花类的有宁波黄、牡丹红、绿绣球、大白莲，小花类的有满堂红、黄心红、花猫菊、光头红、一点金、一点银，其它为中花类。一般市场比较好销和栽培比较多的品种主要有：板腊黄、台红、丽金、绿绣球、黄心红。2、盆栽菊花的成本和收益情况。据测算，每生产一盆五寸花托的盆菊花成本约为元，主要开支包括有菊花苗（每盆3株）元，花盆元，电费元，竹子（每盆平均8支）元，肥料元，农药元，塘泥元，人工费元，水费元，地租元，各地情况不同，开支情况会略有出入。一般每个熟练工人平均可管理盆花约15000盆以上，每月工资约400-800元。花农一般在进入农历十二月十五日后，开始在生产花场内大量出售所栽种的年宵菊花给商贩，在农历廿十至廿八为销售最旺季，只有部分未能售出的才会运到花市中摆摊，故在岭南花卉市场、广州花卉博览园和陈村花卉世界很少能见到盆栽菊花出售。广州芳村这几年的盆花批发价（以七寸盆计）为元（陈村和中山约为4-6元），以元成交的最多，每盆约产生毛利元，其中丽金菊又往往比其它品种售价略高元。如果没有异常的天气，菊花花期适时，产量丰收，价格会偏低；而当气候异常，菊花花期偏迟或偏早时，花价会上升不少，这种“靠天吃饭”的传统种植模式使花农难以预料收益。随着各地工业用地大量挤占农业用地，不少花农不得不移师花都、南海等地租地种植，花价估计会逐年有所上升。以每市亩可生产成品盆花约为4000盆计，每亩则可盈利约为2000-9000元不等。而商贩将盆花运到当地花市上销售时，售价一般为元，每盆毛利约为元，很明显流通环节通常比生产环节更能赚钱。3、冬季盆栽菊花的生产原理。大多数菊花为典型的短日照植物，只有在短日照条件下（小于12小时光照，连续暗期12小时以上）才能开花，如秋菊的自然花期就在11-12月；在长日照条件下（日照17小时，连续暗期7小时）是不会开花的，如4-8月，菊花只进行营养生长，无法进行花芽分化和开花。菊花的营养生长期最好能处于日长夜短的长日照条件下完成，待长至一定高度后（如35CM以上），才进行短日照处理，以诱导花芽分化和开花。在秋冬季为了阻止花芽的形成，必须人工加光来延长日照，促进营养生长，抑制花芽分化。中国的农历春节一般都在1月下旬至2月中旬之间，这“反季节”栽培的菊花，即使营养生长未达到一定的大小，也会形成花芽开花，并不能达到商品化质量和满足使用要求。生产应节春节菊花的最好的办法是在晚上加光，以中断连续黑暗，使两个暗期都小于7小时，促进营养生长。等到用花前约70-80天，才停止补光，让菊花正常进行生殖生长，孕蕾和开花。4、盆栽菊花的主要栽培管理技术。品种选择。选择生长期短，株型较矮，通过人工长日照补光处理后仍能正常营养生长和生殖生长；在比较低的温度下能很好地进行花芽分化，花芽分化诱导日数短，花蕾发育良好，开花齐全一致；菊株较耐寒，低温下生长良好，花器不容易受冻害的品种。扦插育苗。距春节前120-150天，在天晴，有阳光，露水已干时，在菊花母株苗床中，选用经过多次摘心后萌发的健壮侧芽中剪取7-10CM嫩枝，在荫凉下等叶片略萎焉后，摘去下部2-4枚叶片，捏一个约1CM的小土球，包住茎节基部，插入粗砂中，保持湿润、荫蔽，做好杀菌防病措施（可喷好生灵杀菌），一般在半荫环境下，约经10-15天生根（气温高则生根快），发根后应尽早在一周内移植栽培。如用生根素处理，还可以提前生根，而且出根比较齐，比较多。一般在砂床扦插的十多天时间是不需要补光的，因为摘心后10-15天短日照，尚未促进花芽分化，而在苗床是要灯照补光的。上盆定植。春节盆菊的从定植至开花一般需110-140天，即在中秋节前后定植，最迟可推迟到农历九月上旬或中旬。七寸花托盆栽一般2-4株/盆，中秋栽的可以2株/盆，九月上中旬定植的3-4株/盆。栽培基质要求富含有机质的壤土，能很好地保水、保肥、透水和透气，原种过菊花的土壤不能轮用，广东一般用塘泥配以谷壳、木糠、花生壳、煤渣、泥炭土、腐熟的鸡粪等二种或多种基质。装盆时下部排水孔应按人字形法放好疏水瓦片，不能堵塞，装泥至花盆的7-8成满即可，每立方米培养土可上七寸盆约400盆，灯照补光时期摆放时可以密排（有条件的可以在下部垫砖块或花盆疏水），22-25盆/M2（不含路），17-19盆/M2(含45CM的通道)。定植时将盆土淋湿，用竹支在盆面插洞后再栽种菊苗，栽完后淋足定根水，定植后一周内应喷杀菌剂防病一次。栽后要盖遮阳网3-7天，防止秋天的太阳光灼伤菊苗，然后转入正常管理。淋水灌溉。菊花属强阳花卉，性喜湿润忌水渍，浇水过多易使菊株徒长，茎节伸长，叶片稀疏，烂根直至死亡，雨后应及时排除花盆内积水；浇水不足影响其正常生长发育，导致叶片枯黄，脚叶脱落，甚至会使花芽分化提前完成，花期偏早。掌握见干见湿，干透湿透，不干不浇，浇要浇透的原则，一般晴天早晚各浇水一次，天气寒冷时宜在早上天气稍暖后才浇水。小苗耗水量少，要控制浇水，尤其摘心后控制浇水可使腋芽饱满，待出芽后和营养生长旺季、含蕾发育、花蕾显色后都要逐渐加大浇水量。花朵展开后，浇水时应尽量避免浇在花上，以免引起腐烂。肥料施用。施肥方法可以干施，液施或者叶面施，从定植后一周开始，每7-10天施一次，营养生长期追肥时施用氮肥为主，如尿素、发酵豆饼水；转向生殖生长后应增施磷钾肥，如复合肥、骨粉、磷酸二氢钾等。也可在营养生长旺季和孕蕾期进行叶面施肥，每7-10天/次，在早上或傍晚进行，将叶的双面喷洒均匀，浓度一般为尿素液,过磷酸钙液1%-3%，磷酸二氢钾液。施肥时如天气干旱，施肥宜淡次数要多；如天气寒冷潮湿，施肥宜浓肥次数要少。施用时盆土要稍干，肥料切勿溅污叶片，如有污染应及时用水冲洗，以免落叶。发现叶片过大、肥厚，色浓绿，甚至卷边下垂，则肥料过多，应控制肥料；如叶片瘦小而色黄，施肥不足，应追施肥。摘心抹芽。摘心可促进侧枝生长，达到预期开花的朵数，可控制菊株的高度和适当延迟花期。凡早摘心的菊花节间短，分株低，可使株型美观，生长粗壮。年宵菊花定植后至开花一般摘心二次（春节前100天定植的摘心一次，节前120-135天定植的可摘心2次，节前135-150天定植的可摘心3次），第一次在定植后10-15天，苗高15-20CM，有6-7片叶时进行，留基部3-4片叶；第二次在距春节90-100天时进行，腋芽萌发长有侧枝5-6片叶，在侧枝上留2-3片叶后摘除顶端。一般每株苗摘心一次可萌发枝条2-3条，开花2-3朵，摘心二次有枝条4-6条，开花3-5朵，如果每盆3株，摘心二次，则每盆有枝条10条以上，可开花8朵以上。当最后摘心后的侧枝长至15-20CM时，选择生长势相当，高矮一致，位置匀称的枝条保留，除去过于强、弱、高、矮的枝条，叶腋间不断萌发的新芽也要随时抹除。广州地区花农根据实际经验，往往会在停止补光后，对丽金、黄心红等进行摘心，俗称“扫顶”，可以使株型和花期比较整齐、统一。少量品种（如黄心红）或少量盆花因个体差异，对光照强度要求高，补光灯照期间会发生花芽分化，出现花蕾或出现柳叶（不再长高），应及时从基部进行摘除，让其重新萌发新芽。病虫防治。在湿度大、光照弱、通风不良时最易发生病害，如白粉病、叶斑病、锈病、根腐病、枯萎病等，可用粉锈宁、百菌清、甲基托布津、多菌灵、好生灵等防治。菊花的虫害主要有蚜虫、红蜘蛛、蛴螬、线虫等，可用氧化乐果、乐果、敌百虫、马拉松、万灵、杀螨剂等防治。防病虫应以预防为主，即使未发现病虫危害，也要每10-15天进行一次预防。实际经验证明，在盆中施放3%呋喃丹颗粒剂可防治蚜虫、线虫等，基本不会有害虫发生，残效期长达40-50天。插竹绑扎。在停止电灯补光后，当菊株长至35CM以上，有花蕾可见，距春节还有60-30天时就可以进行插竹和绑扎了。绑扎前尽量选择在浇水前或中午前后菊株略萎蔫时进行，以免折断枝叶。一般大花类（如牡丹红、宁波黄）的需插竹约60CM，中花类（如板腊黄、台红、丽金）的需插竹约40-50CM，小花类（如黄心红、一点金、满堂红）的一般不用插竹。广东地区一般流行每盆插竹8支，将截好的小篱竹插入盆土中，将枝条分布均匀，用细铁线绑好，分上下二道进行绑扎，让花梗紧贴支柱竹。进行插竹和疏盆后，加上工作通道可摆放盆菊7-8盆/M2（不含路时9-10盆/M2）。菊花出圃时应剪去过长的竹支，使头状花朵略高于竹子顶端。疏蕾。为达到使用要求，一般大花类的盆菊都需要进行疏蕾，如宁波黄、牡丹红、绿绣球等，使养分集中于主蕾。时间以主蕾有豌豆大小时，按用花要求，自下而上陆续剥除侧蕾（可酌情留1－2个预备蕾，当确认主蕾发育正常，又未受到病虫危害时，再去除预备蕾），一般每枝花留三个花蕾。多本菊可利用留预备蕾的办法，调整花朵大小和花期，使花朵整齐，大小一致。花朵小的品种一般不疏蕾，如黄心红、一点金、满堂红等。花期控制。这是栽种冬菊最为关键的技术。菊花正常花期在秋季，于11月中下旬开放。广东地区地处北回归线附近，一般进入8月下旬（处暑节气）后，日照时间缩短，转入短日照，约经40天完成进行花芽分化，（肉眼看不见），再经约40天花芽长大、孕蕾、显色、开花，故短日照之后约80天菊花便可孕蕾开花。补光延迟开花。延迟至1月下旬和2月上中旬的春节年宵菊花，为了阻止尚未完成营养生长的菊苗在短日照条件下形成花芽，必须用人工补光的方法来延长光照，在人工制造的长日照条件继续营养生长，抑制开花。补光时间：一般在花秧上盆定植后，即要开始进行补光，同时地栽的菊花母株也要进行补光。一般补光4小时，以晚上10-2时补光为最好效果，可用微电脑时控开关自动控制开启和关闭。在晴天、阴天、小雨天均灯照，大雨天可暂停一二天，灯泡若有烧坏或不亮时要及时更换。 因此在菊花栽培区入夜后的7-10时，灯火通明的景观即是人工为菊花进行补光。电灯安装：用竹杆作支柱，接220V照明用电，室外电线用铜芯聚氯乙烯绝缘软电缆（BV）连接，选用螺口防水白炽灯泡（36V，40W或60W），用串联法联接，比较省电，5-6个/组（电压低时可接5个），灯距3M*3M米，灯离盆面高米，平均100-120盆/灯。停灯时间：中秋节后种植的年宵菊花一般补光40-60天不等，至春节倒数前65-80天时停灯（即农历十月中下旬）。各主要品种停灯后至春节开花所需的天数汇总如下：牡丹红、花猫菊、绿绣球、黄秀凤80天；无锡黄78-80天；满堂红75天；台红73-75天；丽金70天；光头红、宁波黄68-70天；板腊黄65-68天；一点金、黄心红63-65天。如气温比较低或地处粤北，可适当提前2-3天停灯。如果想延迟到元宵甚至3-4月才需要用花，可依以上停灯时间依次顺延便可实现，但只有板腊黄、黄心红、台红、东莞红等品种能实现在3-4月仍能开花，其它品种不能形成花芽或不能正常生长，可能与气温和日照不同有关（未作深入研究）。花期调控：因天气、水肥、补光时间等原因，可能会使调控的花期出现或先或后的误差。如发现花期太迟，可喷赤霉素或者植宝素进行催花；如花期太早，可在花蕾显色前喷矮壮素（B9）2-4次（一般喷一次B9可推迟花期约7-8天），一周一次，同时多浇水、适当荫蔽等方法可适当延迟开花。另外，宁波黄和牡丹红因植株比较高，可用B9进行矮化，方法是在苗高20CM时喷一次B9，第二次在有花蕾时进行。综上所述，年宵花中盆菊的栽培技术主要是花期调控，选择合适的品种，中秋节前后种植，晚上进行人工补光，加强肥水和病虫管理，后期进行绑竹、疏蕾，便可产出应节菊花。但新技术和新品种的应用并不多，希望能有更多的科研机构进行技术创新和推广，使菊花生产能跃上一个新的台阶。仅供参考，请自借鉴希望对您有帮助
花生的种植方法与管理技术如下：
1、种植时间
南方地区，春秋两熟的花生通常在每年的2月至3月中旬播种，长江流域春夏花生交作区适宜在3月至4月下旬种植。北方地区，大花生区以及花生主产区多在4月下旬至5月上旬播种。
2、选种
选择形状较整齐、颗粒比较饱满、没有破碎的荚果来作种，剥壳前晒2-3天，选择颜色鲜艳、粒大饱满且大小一致的种子播种。
3、整地施肥
选择排水良好、土层深厚肥沃、干时不板不散，湿时不粘不澥，黏沙土粒比例适中的沙壤土或轻壤土，整地前亩施农家肥，然后耕翻土壤。按2m宽作畦，播种6-7行，整地时开排水沟。
4、播种
播种深度以3-4cm为宜，针对肥力较好的地块，中熟大粒花生亩播9000穴左右，中早熟中籽粒花生亩播约1万穴，播后覆土覆膜。
5、破膜放风
通常播种后10-15天花生会陆续出苗，当子叶出土并张开时，或子叶未出土但可见真叶时，首先用手指或刀片在将幼苗处的地膜开一个十字形的小口，将幼苗引出膜，然后用细土封严开孔处，避免受到冻害。
花生，一般不可以无土栽培。花生无土栽培，只能长出芽苗。故不可水培。
花生，也叫落花生。花生开花授粉后，会从枯萎的花萼管内长出一条果针，果针迅速纵向伸长；它先向上生长，几天后，子房柄下垂于地面。在延伸过程中，子房柄表皮细胞木质化，逐渐形成一顶硬幅，保护幼嫩的果针入土。
当果针入土达2～8厘米时，子房开始横卧，肥大变白，体表生出密密的茸毛，可以直接吸收水分和各种无机盐等，供自己生长发育所需。靠近子房柄的第一颗种子首先形成，相继形成第二、第三颗。表皮逐渐皱缩，荚果逐渐成熟。
兰花养殖方法与技巧：兰花要使用疏松透气的土壤。可以将泥炭苔藓和木炭混合，作为培养土。兰花喜欢温暖，平时最好将温度保持在15~28℃。兰花喜欢半阴的环境，在春天和夏天的时候应该给它进行遮光处理。冬天需要多给它一些光。注意在天气特别热的时候，需要在兰花的周围洒上一些水。雨天注意不要让盆里积水。兰花(学名:Cymbidiumssp。):附生或地生草本，叶数枚至多枚；通常生于假鳞茎基部或下部节上，二列，带状或罕有倒披针形至狭椭圆形，基部一般有宽阔的鞘并围抱假鳞茎，有关节。总状花序具数花或多花，颜色有白、纯白、白绿、黄绿、淡黄、淡黄褐、黄、红、青、紫。
可以上QQ搜索相关的QQ群~然后寻找帮助~~
文章标题：论植物组织培养褐变产生的因素及对策摘要:本文针对植物组织培养中常见的褐变现象,详细地分析了其产生的机理及影响因素,并提出了相应的对策,为科研和生产提供了一定的理论和实践依据。关键词:植物组织培养，褐变，对策目前，在许多植物组织培养过程中，常遇到褐变问题。褐变主要发生在外植体，在植物愈伤组织的继代、悬浮细胞培养以及原生质体的分离与培养中也经常发生。褐变产物不仅使外植体、细胞、培养基等变褐，而且对许多酶有抑制作用，从而影响培养材料的生长与分化，严重时甚至导致死亡。本文探讨植物组织培养中褐变现象的影响因素、机理及防范措施，对我们进行科学研究或工厂生产，包括植物组织的培养,原生质体、悬浮细胞和植物器官的培养都有着十分重要的现实意义。1褐变产生的影响因素影响植物组织培养褐变的因子是复杂的，因植物的种类、基因型、外植体部位及生理状态等不同，褐变的程度也有所不同。植物种类及基因型不同的植物和不同的基因型决定了不同的褐化程度。在组织培养中，品种褐化难易可能是与该品种中多酚类物质含量的多少及多酚氧化酶(PPO)活性的差异有关。外植体部位及生理状态外植体的部位及生理状态不同其褐化程度不同，同时，不同时期和不同年龄的外植体在培养中褐变的程度也不同。培养基成分培养基成分中的无机盐、蔗糖浓度、激素水平等对褐变的程度的影响尤为重要。另外，其pH值也与褐变程度有较大关系。培养条件温度过高或光照过强，均可加速被培养组织的褐变。不利环境条件都能造成细胞的程序化死亡，温度是诱导程序化死亡的主要因素[1]。2褐变产生的机理非酶促褐变非酶促褐变是由于细胞受胁迫或其他不利条件影响所造成的细胞程序化死亡或自然发生的细胞死亡，即坏死形成的褐变现象，并不涉及酚类物质的产生。徐振彪等[1]将生长正常的愈伤组织转移到含NaCl的培养基中，组织周围尤其是接触培养基部分发生褐变，但培养基中没有看到扩散的褐化物质。当温度升高时继代保存时间过长，也会发生此类现象。但这种褐变若采取适当措施或者愈伤组织适应了胁迫环境就不再发生了[3]。酶促褐变目前认为植物组织培养中的褐变主要是由酶促褐变引起的，培养材料变褐主要是由伤口处分泌的酚类化合物引起的[4]。酶促褐变如同一般的酶促反应，其发生必须具备三个条件，即酶、底物和氧。引起褐变的酶有多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶等。从初次培养和继代培养过程中试管苗的褐变程度和PPO的活性来看，表明PPO活性的高低是引起培养材料褐变的关键。引起褐变的酶的底物主要是酚类化合物，按其组成可分成3类:苯基羧酸（包括邻羟基苯酚、儿茶酚、没食子酸、莽草酸等），苯丙烷衍生物（包括绿原酸、肉桂酸、香豆酸、咖啡酸、单宁、木质素等），第三类是黄烷衍生物（包括花青素、黄酮、芸香苷等），但并非所有的酚类物质都是PPO的底物。在正常发育的植物组织中,底物、氧气、PPO同时存在并不发生褐变，是因为在正常的组织细胞内由于多酚类物质分布在细胞的液泡内，而PPO则分布在各种质体或细胞质中，这种区域性分布使底物与PPO不能接触。而当细胞膜的结构发生变化和破坏时，则为酶创造了与PPO接触的条件，在氧存在的情况下使酚类物质氧化成醌，进行一系列的脱水、聚合反应，最后形成黑褐色物质，从而引起褐变。3防止外植体产生褐变的对策从理论上讲,酶促褐变可以通过以下三种方法加以抑制:一是除去引起氧化的物质——氧；二是捕捉或减少聚合反应的中间产物；三是抑制有关的酶。实际操作上，下列措施是被认为行之有效的。适当外植体的选择取材时应注意选择褐变程度较小的品种和部位作外植体。成年植株比幼苗褐变程度厉害，夏季材料比冬季及早春和秋季材料的褐变要严重。冬季的芽不易生长，宜选用早春和秋季的材料作为外植体。王异星[5]用荔枝无菌苗不同组织的诱导试验表明，茎最容易诱导出愈伤组织，培养2周后长出浅黄色的愈伤组织；叶大部分不能产生愈伤组织或诱导出的愈伤组织中度褐变；而根极大部分不产生愈伤组织，诱导出的愈伤组织全部褐变。对外植体的处理通过对较易褐变的外植体材料的预处理能减轻醌类物质的毒害作用。处理方法如下：外植体经流水冲洗后，在2-5℃的低温下处理12-24小时，再用升汞或70酒精消毒，然后接种于只含有蔗糖的琼脂培养基中培养5-7天，使组织中的酚类物质部分渗入培养基中。取出外植体用漂白粉溶液浸泡10分钟，再接种到合适的培养基中。若仍有酚类物质渗出，3-5天后再转移培养基2-3次，当外植体的切口愈合后，酚类物质减少，这样可使外植体褐变减轻或完全被抑制。何琼英等[6]用抗坏血酸预处理香蕉吸芽外植体，能减轻外植体褐变，从而提高芽丛诱导率。适宜的培养基培养基的成分与褐变程度有关，要考虑所选培养基的状态和类型。适当的无机盐浓度张妙霞等[7]在柿树组织培养防止褐变所进行的试验中，4种培养基的无机盐以改良MS(大量元素减半)和1/2MS的效果最好，MS的效果较差，结果证明低浓度的无机盐可促进外植体的生长与分化，减轻外植体褐变的程度。徐振彪[1]在对玉米幼胚耐NaCl愈伤组织的筛选表明，随NaCl浓度升高，褐变现象加重。适当和适量的激素王异星[5]在荔枝的组织培养过程中，培养基中添加1mg/LBA 时，愈伤组织较坚硬，增殖缓慢，易产生褐变。培养基中添加1mg/LBA 1mg/L2,4-D时，愈伤组织浅黄疏松，增殖也快。培养基的硬度在一定范围内，琼脂用量大，培养基硬度大，褐变率低[8]，这可能是培养基的硬度影响了酚类物质的扩散速度的缘故。培养基中水的硬度的影响硬度低的蒸馏水褐变率低,而使用硬度较高的自来水,褐变严重,甚至会出现褐变死亡[8]。这可能是配制培养基的水改变了培养基中无机盐的浓度,间接地影响了植物外植体的褐变。培养基的pH值在水稻体细胞培养中，pH值为时MS液体培养基可保持愈伤组织处于良好的生长状态，其表面呈黄白色，而pH值为时，愈伤组织严重褐变[9]。一般来说，酸性环境(pH值为)不利于褐变过程的发生[10]。培养条件如温度过高或光照过强，光照会提高PPO的活性，促进多酚类物质的氧化，从而加速被培养的组织褐变。高浓度CO2也会促进褐变，其原因是环境中的CO2向细胞内扩散，细胞内CO32-增多，CO32-与细胞膜上的CO32-结合，使有效CO32-减少，导致内膜系统瓦解，酚类物质与PPO相互接触，产生褐变[11]。因此，初期培养要在黑暗或弱光下进行。添加褐变抑制剂和吸附剂褐变抑制剂主要包括抗氧化剂和PPO抑制剂。在培养基中加入偏二亚硫酸钠、L-半胱氨酸、抗坏血酸、柠檬酸、二硫苏糖醇等抗氧化剂都可以与氧化产物醌发生作用，使其重新还原为酚[12]。由于其作用过程均为消耗性的，在实际应用中应注意添加量，其中L-半胱氨酸和抗坏血酸均对外植体无毒副作用，在生产应用中可不受限制。在水稻细胞的培养基中，添加植酸(PA)，可防止褐变，PA分子中众多的羟基产生抗氧化作用，使生色物质的含量下降或PA与PPO分子中的Cu2 结合，从而降低了其活力。陈学森等[13]在对植酸在银杏组织培养中应用的研究中也证实了植酸具有抑制多酚氧化酶活性的作用。常用的吸附剂有活性炭和聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。活性炭是一种吸附性较强的无机吸附剂，能吸附培养基中的有害物质，包括琼脂中的杂质、培养物在培养过程中分泌的酚、醌类物质以及蔗糖在高压消毒时产生的5-羟甲基糠醛等,从而有利于培养物的生长。粉末状的活性炭与颗粒状的活性炭相比吸附性更强，一般在培养基中加入1-4g/L的活性炭。在使用过程中应注意，尽量用最低浓度的活性炭来对抗褐变的产生，因为活性炭的吸附作用是没有选择性的，在吸附物质的同时，也会吸附培养基中的其他成分，对外植体的诱导分化会产生一定的负面影响[14]。而聚乙烯吡咯烷酮(PVP)是酚类物质的专一性吸附剂，在生化制备中常用作酚类物质和细胞器的保护剂，可用于防止褐变[15]。进行细胞筛选和多次转移在组织培养过程中，经常进行细胞筛选，可以剔除易褐变的细胞。在外植体接种1-2天后应立即转移到新鲜培养基中，能减轻酚类物质对培养物的毒害作用，降低抑制作用，使外植体尽快分生，连续转移5-6次，可基本解决外植体的褐变问题。参考文献：[1]徐振彪等.植物组织培养过程中的褐化现象.国外农学——杂粮作物,1997(1):55～56.[2]符近.三种不同类型种子休眠萌发及马占相思种子老化过程的研究.北京农业大学硕士研究生论文,1996.[3]傅作申，玉米耐NaCl幼胚愈伤组织的筛选及特性分析，长春农牧大学硕士论文，1996.[4]颜昌敏编著，植物组织培养手册，上海科学技术出版社,1990.[5]王异星.荔枝细胞培养的初步研究.暨南大学学报,1997,18(5)：84～85.[6]何琼英等.抗坏血酸预处理阻止香蕉吸芽外植体褐变的研究初报.华南农业大学学报,1995,16(3):79～82.[7]张妙霞.柿树组织培养防止外植体褐变的研究.河南农业大学学报,1999,33(1):87～91.[8]金坚敏.水稻幼穗和成熟种子诱导胚状体时的有关因子探讨.植物学通报，1992,9(2):53～54.[9]金坚敏.水稻幼稿和成熟种子诱导胚状体时的有关因子探讨.植物学通报,1992.[10]王东霞等,如何对抗植物组织中的组织褐变，中国花卉盆景,2002,12:29～30.[11]姚洪军,罗晓芳,田砚亭.植物组织培养外植体褐变的研究进展.北京林业大学学报,1999,21(3):78～83.[12]蔡金星等.不同品种梨多酚氧化酶特性及其抑制剂的研究.河北农业技术师范学院学报,1999,13(1):55～57.[13]陈学森,张艳敏等，植酸在银杏组织培养中应用的研究.天然产物研究与开发,1997,9(2):24～27.[14]刘用生.植物组织培养中活性炭的使用.植物生理学通讯,1994,30(3):214.[15]姚洪军等.植物组织培养外植体褐变的研究进展.北京林业大学学报,1999,21(3):78～84.《论植物组织培养褐变产生的因素及对策》来源于文秘114网，欢迎阅读论植物组织培养褐变产生的因素及对策。－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ 植物组织培养 植物组织培养即植物无菌培养技术，是根据植物细胞具有全能性的理论，利用植物体离体的器官、组织或细胞，如根、茎、叶、花、果实、种子、胚、胚珠、子房、花药、花粉以及贮藏器官的薄壁组织、维管束组织等，在无菌和适宜的人工培养基及光照、温度等条件下，能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根，最后形成完整的植株。至今，世界各国在无性系繁殖、花卉育种、植株脱病毒和种质保存等方面，广泛应用组织培养技术。 （一）组织培养技求的应用 1．无性系繁殖无性系繁殖是植物组织培养应用的主流之一，用植物组织培养进行无性繁殖的优点是，用材少，速度快，不受气候、季节、基质等自然条件的影响，比传统的常规繁殖方法要快得多，人们又叫它'快速繁殖'或'微型繁殖'。其常见繁殖方式有短枝扦插、芽增殖、原球茎、器官分化和胚状体发生。其中芽增殖在盆栽花卉繁殖中应用最为普遍，如草本植物四季秋海棠、鸡冠花、万寿菊、长春花，观叶植物蟆叶秋海棠、网纹草、花叶芋、天鹅绒竹芋，木本植物三角花、比利时杜鹃、月季、八仙花等，在生产实践中，均已取得较好的经济效益。原球茎培养在大花蕙兰、蝴蝶兰、美丽兜兰、石斛、春兰等兰科植物和肾蕨、凤尾蕨、鹿角蕨等观赏蕨的规模性生产中得到广泛应用。胚状体培养，据报道目前已在30个科150种植物上观察到它们的愈伤组织可以分化出胚状体，而盆栽花卉中的花叶芋、山茶花都是成功的范例。器官分化主要是从外植体直接产生不定芽或不定根，一般不通过从愈伤组织进行器官分化形成植株，因为其性状有可能发生变化或经过多次继代培养后，会丧失再生植株的能力。 2．花卉育种当今盆栽花卉育种中，也广泛应用组培技术。 胚培养：在花卉种间杂交或远缘杂交中，有时虽然能正常受精，但胚往往发育不完全或胚与胚乳间不亲和，不能得到种子，可采用胚的早期离体培养促使胚正常发育，培养出杂交后代。如山茶花、百合和鸢尾杂交中均采用幼胚培养，成功地收到了杂交种子。同时，在杂交中受精困难，也可把未受精的胚珠分离出来，在试管内用花粉受精来解决，这在草本花卉花菱草中已取得成功。 单倍体育种：利用花药培养诱导花粉形成单倍体，在试管培养中通过秋水仙素处理，使染色体加倍，而成为纯合二倍体植物，从而缩短新品种育种的时间，还有利于突变中隐性突变的分离。这在花卉的株型、花色、花型的大小或重瓣，叶型、叶色等产生变异，往往有直接利用价值。这在矮牵牛的育种中已应用。 体细胞杂交和植物基因工程：利用原生质体遗传操作技术，可以从原来不大可能进行杂交的不同属植物间获得体细胞杂种或核质杂种。可以通过摄取外源目的基因，定向改造植物的某些重要性状。 3．植株脱病毒用无性繁殖方法来繁衍的花卉种类如菊花、香石竹、郁金香、百合、白鹤芋等，不能通过种子途径去除病毒，用化学方法防治和高温处理往往成效不稳定。作为组织培养的无性繁殖材料，最好是去病毒组织，否则易导致病毒积累，危害加重。而植物的茎尖部分无维管束，病毒难以侵入。所以，茎尖培养是获得无病毒植株的最好途径。至今，茎尖培养脱毒法已在菊花、百合、香石竹、郁金香等盆栽花卉上推广使用。 4．种质保存用无性繁殖的植物，因没有种子，只能在植物园内长期栽培保存，耗费大量的土地和劳力。种质材料还易受自然环境的变化和病虫危害而流失。若用组织培养方法，保存愈伤组织、胚状体、茎尖等组织，可节省大量人力和物力。 （二）组织培养的几个步骤 1．材料的选用一般用于组织培养的材料称为外植体。常分为两类。一类是带芽的外植体，如茎尖、侧芽、鳞芽、原球茎等，组织培养过程中可直接诱导丛生芽的产生。其获得再生植株的成功率较高，变异性也较小，易保持材料的优良性状。另一类主要是根、茎、叶等营养器官和花药、花瓣、花轴、花萼、胚珠、果实等生殖器官。这一类外植体需要一个脱分化过程，经过愈伤组织阶段，再分化出芽或产生胚状体，然后形成再生植株。 外植体的取用与组织部位、植株年龄、取材季节以及植株的生理状态、质量，都对培养时器官的分化有一定影响。一般阶段发育年幼的实生苗比发育年龄老的栽培品种容易分化，顶芽比腋芽容易分化，萌动的芽比休眠芽容易分化。在组织培养中，最常用的外植体是茎尖，通常切块在0．5厘米左右，太小产生愈伤组织的能力差，太大则在培养瓶中占据空间太多。培养脱毒种苗，常用茎尖分生组织部，长度为0．1毫米以下。 2．外植体的消毒植物组培能否取得成功的重要因素之一，就是保证培养物在无菌条件下安全生长。为此，必须抓好外植体的消毒和实行无菌操作。 由于培养的植物材料大都采集于田间栽培植株，材料上常附有各种微生物，一旦被带入培养基，即会迅速繁殖滋长，造成污染，培养失败。所以培养前必须对外植体进行严格的消毒处理，消毒的尺度为既能全都杀灭外植体上附带的微生物，但又不伤害材料的生活力。因此，必须正确选择消毒剂和使用的浓度、处理时间及程序。目前，常用的消毒剂有次氯酸钙、氯化汞、次氯酸钠、双氧水、酒精（70％）等。具体消毒方法如下： （1）茎尖、茎、叶片的消毒消毒前先用清水漂洗干净或用软毛刷将尘埃刷除，茸毛较多的用皂液洗涤，然后再用清水洗去皂液，洗后用吸水纸吸干表面水分，用70％酒精浸数秒钟，取出后及时用10％次氯酸钙饱和上清液浸泡10～20分钟。或用2％～10％次氯酸钠溶液浸泡6～15分钟。消毒后用无菌水冲洗3次，用无菌纱布或无菌纸吸干接种。 （2）根、块茎、鳞茎的消毒这类材料大都生长在土中，常带有泥土，挖取时易遭损伤。消毒前必须先用净水清洗干净，在凹凸不平处以及鳞片缝隙处，均用毛笔或软刷将污物清除干净，用吸水纸吸干后，在70％酒精中浸一下，然后用6％～10％次氯酸钠溶液浸5～15分钟，或用0．1％～0．2％氯化汞消毒5～10分钟，最后用无菌水清洗3～4次，用无菌纱布或无菌纸吸干后接种。 （3）果实、种子的消毒这类材料有的表皮上具有茸毛或蜡质，消毒前先用70％酒精浸泡几秒钟或2～10分钟，然后用饱和漂白粉上清液消毒10～30分钟或2％次氯酸钠溶液浸10～20分钟，消毒后去除果皮，取出内部组织或种子接种。直接用种子或果实消毒，经消毒后的材料均须用无菌水多次冲洗后接种。 （4）花药、花粉的消毒植物的花药外面常被花瓣、花萼包裹着，一般处于无菌状态，只需采用表面消毒即可接种。通常先用70％酒精棉球擦拭花蕾或叶鞘，然后将花蕾剥出，在饱和漂白粉上清液中浸泡10～15分钟，用无菌水冲洗2～3次，吸干后即可接种。 3．组织培养的条件接种后的培养容器置放培养室，室温应控制在23～26℃，每天12～16小时光照，光照度为1000～3000勒克斯。 4．外植体的增殖接种后的外植体要分化出丛状芽、愈伤组织或胚状体，必须对培养基及激素的种类和浓度进行严格的设计和筛选。常用的基本培养基为MS培养基，激素的种类和浓度对外植体的分化和增殖起到重要的作用。也就是说不同的花卉种类对激素的种类和浓度是有差别的（表4－－3）。 5．诱导生根继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根，要促使试管苗生根，必须转移到生根培养基上，生根培养基一般应用1／2MS培养基，因为降低无机盐浓度有利于根的分化。同时，不同盆栽花卉诱导生根时所需要的生长素的种类和浓度是不同的（表4－4）。一般常用吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）和吲哚丁酸（IBA）三种。一般在生根培养基中培养1个月左右即可获得健壮根系。 6．组培苗的移栽生根或形成根原基的试管苗从无菌，温、光、湿度稳定环境中进入到自然环境中，从异养过渡到自养过程，必须经过一个炼苗过程。首先打开试管瓶塞放阳光充足处让其锻炼1～2天，然后取出幼苗用温水将琼脂冲洗掉，移栽到泥炭、珍珠岩、蛭石、砻糠灰等组成的基质中，基质使用前需高温消毒，移栽后要适当遮荫，可用塑料薄膜覆盖，保持较高空气湿度，温度维持在25℃左右，勿使阳光直晒，7～10天后要注意通风和补充浇水，约20～40天，新梢开始生长后，小苗可转入正常管理。
植物组织培养及其应用研究概况在世界各国科学家的不断努力下，近几十年来，植物组织培养技术迅速发展。利用组织培养，不仅可以大量生产优良无性系，获得人类需要的多种代谢物质，还可获得单倍体、三倍体、多倍体及非整倍体。通过细胞融合可以打破种属间的界限，克服远缘杂交不亲合性，在植物新品种的培育和种性的改良中发挥了巨大作用。组织培养的植物细胞是在细胞水平上分析研究的理想材料，从植物快繁、花药培养发展到细胞器培养、原生质融合以及DNA重组技术等，植物组织培养技术广泛应用于植物科学的各个领域及农业、林业、工业、医药等多种行业，已经成为当代生物科学中最有生命力的一门学科。1 植物组织培养的基本概念、原理和试验步骤1．1概念植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物器官(根尖、茎尖等)、组织(形成层、花药组织等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎(成熟或未成熟的胚)、原生质体等在人工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱发其产生愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。1．2原理 植物组织培养的依据是植物细胞的“全能性”及植物的“再生作用”。1902年，德国著名植物学家 G．Haberlandt根据细胞学理论提出了一个观点，“高等植物的器官和组织可以不断分割，直至单个细胞，即植物体细胞，体细胞在适当的条件下具有不断分裂、繁殖并发育成完整植株的潜力”。1943年，美国人White在烟草愈伤组织中偶然发现形成一个芽，证实了G．Haberlandt的论点。 不同植物所需要的生长条件不同，所用的培养基也有所不同。较常用的基础培养基有MT、MS、 SH、N6、White等。在组织培养中，愈伤组织和胚状体能否形成是培育出新植株的关键。通过在基础培养基里添加一定浓度的外源激素，可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官，最终获得再生植株或次生物质。 用于植物组织培养的材料称为外植体，其主要形式有器官、胚胎、单细胞、原生质体等。根据外植体的不同，所需要的培养基种类、培养条件、外源激素的种类及比例等均不同。植物组织培养中，影响培养力的因素是多方面的，诱导愈伤组织成败的关键在于培养条件，植物激素是诱导愈伤组织和绿苗分化的关键因素。最常用的诱导愈伤组织的生长素是IAA、NAA和2，4一D，所需浓度为O．01～10 mg／L。最常用的细胞分裂素是KT和ABA，使用浓度为O．1～10 mg／L。KT的主要作用是促进细胞分裂和愈伤组织分化。ABA对植物体细胞胚的发生与发育具有重要作用。各类植物激素的生理作用虽有相对专一性，但是植物的各种生理效应是不同种类激素之间相互作用的综合表现。1．3试验步骤1．3．1选择和配制培养基 培养基是植物组织培养中的“血液”，血液的成分及其供应状况直接关系到培养物的生长与分化，因此了解培养基的成分、特点及其配制至关重要。1．3．2灭茵灭菌是组织培养中的重要工作之一，通常采用物理的或化学的灭菌方法。培养基用常压或高压蒸煮等湿热灭菌、器械采用灼烧灭菌、玻璃器皿及耐热用具采用干热灭菌、不耐热的物质采用过滤灭菌、植物材料表面用消毒剂灭菌、物体表面用药剂喷雾灭菌、接种室等空间采用紫外线或熏蒸灭菌。1．3．3接种将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块放入培养基，整个接种过程要在无菌条件下进行。 ．4培养把培养材料放在有一定光照和温度等条件的培养室里，使之生长、分裂和分化，形成愈伤组织或进一步分化成再生植株。1．3．5试管苗驯化移栽 试管苗是在特殊环境条件下生长的幼苗，与自然生长的幼苗有很大差异，只有通过驯化，使之适应自然环境后才能移栽。2 植物组织培养的应用2．1植物快速繁殖和无病毒种苗生产植物快速繁殖技术始于20世纪60年代，法国的Morel用茎尖培养的方法大量繁殖兰花获得成功，从此揭开了植物快速繁殖技术研究和应用的序幕。目前，通过离体培养获得小植株并且具有快速繁殖潜力的植物已有100多科1 000种以上，有的已经发展成为工业化生产的商品。世界上80％～85％的兰花是通过组织培养进行脱毒和快速繁殖的。培养的植物种类也由观赏植物逐渐发展到园艺植物、大田作物、经济植物和药用植物等。在我国，同类的研究始于20世纪70年代。马铃薯无毒种薯和甘蔗种苗已在生产上大面积种植，30余种植物已进行规模化生产或中间试验。利用组织培养进行植物快速繁殖及无病毒种苗生产，不仅能够挽救珍惜濒危物种，而且能够解决植物野生资源缺乏的问题。2．2植物花药培养和单倍体育种 将植物花药培养成单倍体植株，再经过染色体加倍，能很快得到纯合的二倍体，这样将大大缩短育种年限。到目前为止，世界上通过花粉和花药培养已获得了几百种植物的单倍体植株。印度科学家应用这种方法培育的水稻品系，比对照产量提高15％～49％。韩国先后育成了5个优质、抗病、抗倒伏的水稻品种。我国自20世纪70年代开始该领域的研究，已经培育了40余种由花粉或花药发育成的单倍体植株，其中有10余种为我国首创。玉米获得了100多个纯合的自交系；橡胶获得了二倍体和三倍体植株。仅“九五”期间就育成高产、优质、抗逆、抗病的农作物新品种44个，种植面积超过660万 hm2。2．3植物胚胎培养杂交育种中，杂种胚常常败育，因此将早期生长的胚取出，应用组织培养方法，就有可能培育出杂交植物。已经有100篇以上幼胚培养成为植株的报道。国内外科学家应用植物胚胎培养技术获得了多种远缘杂交的重组体、栽培种和杂交品种。2．4植物愈伤组织或细胞悬浮培养利用植物愈伤组织或细胞悬浮培养可以生产用于预防和治疗疾病的植物次生代谢产物。近年来，这一领域的发展极为迅速，已经研究了400多种植物，从培养细胞中分离到600多种次级代谢产物，其中60多种在含量上超过或等于原植物，20种以上干重超过原植物的1 9，6。例如，从薯芋愈伤组织和悬浮细胞生产的diosgenin用于合成甾体药物。最近抗癌药物紫杉醇一红豆杉细胞培养物，可用75t发酵罐培养，已达到商业化生产水平。另外，达到商品化水平的还有紫草、人参、黄连、老鹳草等；长春花、毛地黄、烟草等已实现工业化生产；牙签草、红花等20多种植物正在向商品化过渡。2．5细胞融合与原生质体培养自1960年英国学者Cocking首次利用纤维素酶从番茄幼苗的根分离原生质体获得成功以来，到1990年已有100种以上植物的原生质体能再生植株。我国获得了30余个品种的原生质体再生植株，其中包括难度较大的重要粮食作物和经济作物，如大豆、水稻、玉米、小麦、谷子、高梁、棉花等。在木本植物、药用植物、蔬菜和真菌原生质体培养方面的进展也十分迅速。国外已先后获得了种内及种间的体细胞杂种植株。植物原生质体培养还可应用于外源基因转移、无性系变异及突变体筛选等研究，因而越来越受到人们的重视。2．6植物细胞突变体筛选植物细胞突变体的筛选最早始于1959年，G． Melchers在金鱼草悬浮细胞培养中获得了温度突变体。1970年，P．S．Carlson，H．Binding和Y．M． Heimer等分别分离出烟草营养缺陷型细胞、矮牵牛抗链霉素细胞系及烟草抗苏氨酸细胞系。迄今为止，已经在不少于15个科45个种的植物细胞培养中筛选出100个以上的植物细胞突变体或变异体。其中包括抗病细胞突变体，如玉米抗小斑病突变体和小麦抗赤霉病、根腐病突变体；抗氨基酸及其类似物细胞突变体，如甘蓝型油菜抗HYP突变体[263；抗逆境胁迫细胞突变体，如水稻耐盐突变体和小麦抗盐突变体；抗除草剂细胞突变体及营养缺陷型细胞突变体，如玉米抗除草剂变异体；株高突变体的筛选，如水稻矮秆变异体。2．7植物体细胞胚胎和人工种子1958年，Reinert在胡萝卜的组织培养中最先发现了体细胞胚胎(胚状体)。据不完全统计，能大量产生胚状体的植物有43科92属100多种。一些重要作物如水稻、小麦、玉米、珍珠谷等，也能通过离体培养产生胚状体。这些胚状体用褐藻酸钠等包埋，再加上人工种皮，就形成了人工种子。人工种子的优点是：繁殖快速，成苗率极高；不受气候影响，四季皆可工厂化生产。上世纪80年代初，美、日、法等国家相继开展了人工种子的研究，我国也于“七五”期间开展了此项研究，并于1987年列入了国家“863”高技术研究发展计划。2．8 植物组织细胞培养物的超低温保存与种质库建立植物细胞全能性的发现和证实，为植物种质资源的长期保存开辟了一条新途径。采用液氮超低温保存技术，能保持很高的存活率，并且能再生出新植株和保持原来的遗传特性。如建立茎尖分生组织培养物的超低温保存种质库，不仅可以防止种质的遗传变异和退化，而且可以长期保存无病毒的原种。2．9 植物组织培养与转基因技术的应用 我国第一个T—DNA插入突变体库的构建和研究为我国水稻功能基因组学研究奠定了良好的技术和材料基础，为确保我国拥有一批有自主知识产权的基因资源做出了积极贡献。由中国水稻研究所农业部水稻生物学重点开放实验室和中科院上海植物生理研究所合作，通过建立大规模、高效的农杆菌介导的转基因技术体系，将玉米转座子Ac—Ds等外源基因导入水稻未成熟胚和种子诱导的愈伤组织，获得了1．2万个独立的T—DNA插入株系，并构建了水稻突变体的数据库。 3 展望植物组织培养研究与应用是20世纪科技进步的重大成果之一，为研究植物生长发育、抗性生理、激素及器官发生与胚胎发生等提供了许多良好的实验材料和有效途径。植物组织培养方法不断提高的同时，也相应拓宽了其应用范围。由于组织培养在人工控制的条件下进行，容易掌握花芽分化和开花成因；通过胚胎培养，能够得到杂种或自交种；通过分离单倍体细胞，能培育纯合的二倍体优良品系；提高育种多样性的同时缩短了育种时间；通过突变体筛选，提高植物的品质，增强抗逆境胁迫能力，扩大植物的生长范围；将体细胞冷藏在低温下，建立基因库，达到保存物种的目的；获得药用价值高和工业生产所需要的次生产物，加快药物生产的时间并且减少了单纯依靠天然植物的被动性。植物组织培养技术已经渗透到科研、生产和生活各个领域，必将日臻完善。黑龙江农业科学2006，(3)
细胞工程论文
细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说，它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。下面是我为大家整理的细胞工程论文，欢迎阅读。
【摘要】 目的制作去细胞肌肉组织工程支架，并检测其与人羊膜上皮细胞的生物相容性。方法 采用TNT和十二烷基磺酸钠结合的化学萃取方法制作去细胞肌肉组织工程支架，冰冻切片观察其结构。将人羊膜上皮细胞种入支架培养7 d后，用免疫组化检测羊膜上皮细胞的增殖活性、NT3及BDNF的表达,扫描电子显微镜观察其超微结构。结果 支架中细胞去除完全，其主要结构为平行排列的管状结构。细胞外基质的主要成分弹性纤维和胶原纤维保持完好。羊膜上皮细胞在支架里有增殖活性，并呈现NT3、BDNF免疫反应阳性。扫描电镜显示，羊膜上皮细胞在支架中分布均匀，生长良好。结论 成功的制作了去细胞肌肉组织工程支架，其与人羊膜上皮细胞有良好的相容性。
【关键词】 去细胞肌肉;人羊膜上皮细胞;生物相容性
近年来组织工程研究的重要进展之一就是采用自体或异体移植物制作天然生物降解材料的组织工程支架。其中去细胞移植物与机体有良好的生物相容性。去细胞肌肉支架可作为生物工程支架支持神经细胞轴突再生。Mligiliche等〔1〕把去细胞肌肉移植入大鼠坐骨神经缺损处,4 w后发现有大量神经轴突长入去细胞肌肉支架中。由于单独应用去细胞肌肉支架治疗神经系统疾病的效果有限，去细胞肌肉支架要发挥更大的作用往往需要向支架中植入种子细胞〔2，3〕。研究表明羊膜上皮细胞可分泌多种神经因子〔4，5〕，促进神经元轴突的生长，是一种良好的治疗神经系统疾病的种子细胞。本研究利用化学去细胞的方法制成去细胞肌肉支架，并把羊膜上皮细胞种入去细胞肌肉支架内，探究两者的相容性，为开展组织工程治疗神经系统方面的疾病提供新的途径。
1 材料与方法
材料
实验动物 Wistar 大鼠由吉林大学白求恩医学院实验动物中心提供。
试剂 IMDM培养基及小牛血清由Hyclone 公司提供。5′溴尿嘧啶核苷(BrdU) 及BrdU 单克隆抗体购自Neomarker公司;神经营养素(NT)3,脑源性神经营养因子(BDNF)兔抗人多克隆抗体购自武汉博士德公司，SABC免疫组化试剂盒购自福州迈新生物公司。人羊膜上皮细胞株为本实验室保存。
方法
去细胞肌肉支架的制备 参考 Brown等〔6〕去细胞膀胱的制作方法制备去细胞肌肉支架，简述如下：取Wistar大鼠腹锯肌，放入蒸馏水中，在摇床中以37℃、50 r/min摇48 h后,转入3%的TritonX100溶液,摇床中37℃、50 r/min摇48 h。然后放入蒸馏水中，摇床37℃、50 r/min摇48 h。换成1% SDS溶液，摇床37℃，50 r/min摇48 h。PBS洗24 h。PBS中4℃保存备用。
支架形态结构的观察及成分鉴定 肉眼观察去细胞肌肉的形态。去细胞肌肉用4%多聚甲醛PBS固定1 h，5%蔗糖90 min，15%蔗糖90 min，30%蔗糖过夜以梯度脱水，OCT包埋，冷丙酮速冻，之后放入-70℃冰箱保存。恒冷箱切片机切片，HE 染色，观察其内部结构。此外对切片进行Van Gienson(VG)染色和 Weigert染色(VG+ET染色)检测支架的细胞外基质成分。
人羊膜上皮细胞的培养 人羊膜上皮细胞在DMEM培养液中(含10%胎牛血清，100 U/ml青霉素，100 mg/ml链霉素，200 μg/ml的谷氨酰胺)，37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养，隔天换液，待单层培养细胞生长至80%汇合后，传代培养。
人羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架相容性的鉴定
取生长良好的人羊膜上皮细胞，80%细胞接近融合，弃去培养液，胰蛋白酶消化，当胞体回缩，细胞间隙变宽时，用血清终止消化，反复轻吹瓶壁细胞，制成单细胞悬液于离心管中，1 000 r/min，离心3 min。用DMEM重悬细胞。用1 ml注射器吸入细胞悬液，以2×106/ml 密度注入去细胞肌肉支架中分装至24孔板中，在37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养，隔天换液，培养1 w。掺入Brdu(终浓度为10 mg/L)，继续培养1 d后，恒冷箱切片机切片(方法同前)。切片经PBS 洗后，3% H2O2灭活内源性过氧化物酶10 min，血清封闭20 min;一抗用BrdU(1∶1 000稀释)单克隆抗体，BDNF和NT3多克隆抗体(1∶100稀释)4℃孵育过夜，PBS 洗后，二抗37℃孵育30 min，PBS 洗后，SABC37℃孵育30 min，DAB显色。光镜下观察。
扫描电子显微镜鉴定羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架上的生长情况 取生长良好的人羊膜上皮细胞，80%细胞接近融合时，用上述方法消化下来后，把羊膜上皮细胞种植到去细胞肌肉支架中，放在24孔板中，在37℃、5 % CO2及饱和湿度条件下的细胞培养箱中培养7 d后，用2%戊二醛固定后，梯度乙醇脱水，CO2临界点干燥，镀膜，采用扫描电子显微镜观察并拍照。
2 结 果
支架的组织结构与成分 去细胞肌肉外观呈乳白色,半透明,质地柔软。从大体上看，肌肉去细胞前后整体大小与形状无显著变化。支架纵切面的HE染色观察可见骨骼肌细胞成分消失,而纤维网架结构保持完整，支架内主要为平行管道。VG+ET染色证明支架成分主要为胶原纤维和弹力纤维等细胞外基质成分，胶原纤维为红色波浪状结构，弹性纤维为蓝色丝状结构，见图1。
羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架的兼容性 见图2，HE染色显示人羊膜上皮细胞在支架中生长良好，分布均匀(图
图1 去细胞肌肉支架大体与组织切片染色
图2 去细胞肌肉支架的病理图片2A)。免疫组化染色显示，BrdU阳性细胞数目多，提示支架中的人羊膜上皮细胞有增殖能力(图2B)。抗NT3和BDNF染色显示，支架中的人羊膜上皮细胞含有NT3、BDNF阳性颗粒，呈棕褐色分布在细胞质中(图2C，2D)。JSM5600LV扫描电子显微镜显示，在支架内部分布有大量细胞，细胞在支架中分布比较均匀，生长状态良好(图2E)。
3 讨 论
理想的支架材料应与细胞外基质类似，与活体细胞有良好的生物相容性〔7，8〕。去细胞肌肉作为治疗神经损伤的生物工程支架材料有如下优势：(1)去细胞肌肉的细胞外基质成分对组织细胞的'迁移、黏附、生长代谢都有重要作用，研究表明再生的轴突可以很好的黏附在去细胞肌肉支架上〔9〕。(2)去细胞肌肉的排列结构与神经膜管类似,仅在直径上略大于神经膜管〔10〕，它们提供了轴突可生长穿过的足够空间〔9〕，该结构对于诱导神经轴突再生是十分重要的。 Fansa等比较了接种施万细胞的不同去细胞生物材料(肌肉，静脉，神经外膜)桥接缺损的外周神经的结果，发现缺乏神经膜管样结构的去细胞肌肉支架(静脉和神经外膜支架)中的再生轴突是无序和排列混乱的，而有神经膜管样结构的去细胞肌肉支架中的再生轴突是有序排列的〔11〕。这种轴突再生的有序性对神经损伤的轴突再生同样也是十分重要的。(3)去细胞肌肉引起的免疫排斥反应较小〔9，12〕。这些优势都说明去细胞肌肉可作为治疗神经损伤的理想的材料。本研究采用的制作去细胞肌肉的方法主要用来减少异种移植材料的免疫排斥反应。该方法能有效的去除脂膜和膜相关抗原以及可溶性蛋白，并能有效的保留细胞外基质成分的原始空间结构。肌细胞正常呈平行分布，其细胞外基质成分也是平行分布的，从支架纵切面的结果看支架的纤维成分也是平行排布的，VG+ET染色结果显示细胞外基质的主要成分胶原纤维和弹性纤维保持完好。这些结果进一步证实此方法可成功制备去细胞肌肉支架。
由于单独应用去细胞肌肉支架治疗神经系统疾病的效果有限〔13〕，去细胞肌肉的生物相容性也有待验证。本研究用人羊膜上皮细胞作为种子细胞种入去细胞肌肉支架以探讨其相容性。研究表明，羊膜上皮细胞中含有多种生物活性因子，包括黏蛋白、转移生长因子、前列腺素E、表皮生长因子样物质,IL1，IL8 等因子，另外，还可分泌BDNF和NT3等重要的神经营养因子〔4〕。其中层黏蛋白、BDNF和NT3等生物活性因子对神经损伤的治疗具有十分重要的作用。羊膜上皮细胞可作为一种较理想的种子细胞，与去细胞肌肉支架结合可能成为治疗神经系统疾病的一个理想的组织工程材料。本实验观察到人羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中分布均匀，抗BrdU、BDNF及NT3免疫组化显示去细胞肌肉支架中羊膜上皮细胞有良好的增殖能力，并能表达BDNF和NT3，说明羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中保持了良好的生物学活性。以上结果一方面证明了本研究制作的去细胞肌肉支架有良好的生物相容性，另一方面为应用羊膜上皮细胞和去细胞肌肉支架结合治疗神经系统疾病提供了理论和实验基础。
总之 ，本研究成功制备了去细胞肌肉支架，并证实人羊膜上皮细胞在去细胞肌肉支架中能分泌重要的神经营养因子，人羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架桥接体为神经缺损再生提供了基底膜、神经营养因子等种种有利因素，构成了良好的神经再生微环境，有利于使神经缺损得到较好地修复，为进一步研究羊膜上皮细胞与去细胞肌肉支架桥接体治疗神经损伤奠定了一定的实验基础。
【参考文献】
1 Mligiliche N，Kitada M，Ide of detergentdenatured skeletal muscles provides effective conduits for extension of regenerating axons in the rat sciatic nerve〔J〕.Arch Histol Cytol，2001;64 (1):2936.
2 Fansa H，Keilhoff G，Forster G,et muscle with Schwanncell implantation：an alternative biologic nerve conduit〔J〕.J Reconstr Microsurg,1999;15(7):5317.
3 Gulati AK，Rai DR，Ali influence of cultured Schwann cells on regeneration through acellular basal lamina grafts〔J〕.Brain Res，1995;705(12):11824.
4 朱 梅，陈 东，盂晓婷，等.羊膜上皮细胞移植治疗帕金森病大鼠的实验研究〔J〕.中国老年学杂志,2006;26(2)：2279.
5 Meng XT，Chen D，Dong ZY,et neural differentiation of neural stem cells and neurite growth by amniotic epithelial cells coculture〔J〕.Cell Biol Intern，2007;31：6918.
6 Brown AL，BrookAllred TT，Waddell JE,et acellular matrix as a substrate for studying in vitro bladder smooth muscleurothelial cell interactions〔J〕.Biomaterials，2005;26：52943.
7 Suh JK，Matthew of chitosanbased polysaccharide biomaterials in cartilage tissue engineering：A review〔J〕.Biomaterials，2000;21(24)：258998.
8 Grande DA，Halberstadt C，Naughton G,et of matrix scaffolds for tissue engineering of articular cartilage grafts〔J〕.J Biomed Mater Res，1997;34(2):21120.
9 Fansa H，Schneider W，Wolf G,et responses after acellular muscle basal lamina allografting used as a matrix for tissue engineered nerve grafts〔J〕.Transplantation,2002;74(3):3817.
10 李培建,胥少汀.去细胞肌肉支架移植及神经生长因子对脊髓横断性损伤的修复作用〔J〕.中国脊柱脊髓杂志，2000;10(4)：2203.
11 Fansa H，Keilhoff of different biogenic matrices seeded with cultured Schwann cells for bridging peripheral nerve defects〔J〕. Neurol Res,2004;26(2):16773.
12 Brown AL，Farhat W，Merguerian PA,et week assessment of bladder acellular matrix as a bladder augmentation material in a porcine model〔J〕.Biomaterials,2002;23：217990.
13 李培建，李兵仓，胥少汀.肌基膜管移植修复脊髓缺损的实验研究〔J〕.中华创伤杂志,2001;17(9)：5258.
细胞生物是指所有具有细胞结构的生物。这是我为大家整理的关于细胞生物学术论文，仅供参考!
细胞因子的生物学活性
关键字： 细胞因子
细胞因子具有非常广泛的生物学活性，包括促进靶细胞的增殖和分化，增强抗感染和细胞杀伤效应，促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达，促进炎症过程，影响细胞代谢等。
一、免疫细胞的调节剂
免疫细胞之间存在错综复杂的调节关系，细胞因子是传递这种调节信号必不可少的信息分子。例如在T-B细胞之间，T细胞产生IL-2、4、5、6、10、13，干扰素γ等细胞因子刺激B细胞的分化、增殖和抗体产生;而B细胞又可产生IL-12调节TH1细胞活性和TC细胞活性。在单核巨噬细胞与淋巴细胞之间，前者产生IL-1、6、8、10，干扰素α，TNF-α等细胞因子促进或抑制T、B、NK细胞功能;而淋巴细胞又产生IL-2、6、10，干扰素γ，GM-CSF，巨噬细胞移动抑制因子(MIF)等细胞因子调节单核巨噬细胞的功能。许多免疫细胞还可通过分泌细胞因子产生自身调节单核巨噬细胞的功能。许多免疫细胞还可通过分泌细胞因子产生自身调节作用。例如T细胞产生的IL-2可刺激T细胞的IL-2受体表达和进一步的IL-2分泌，TH1细胞通过产生干扰素γ抑TH2细胞的细胞因子产生。而TH2细胞又通过IL-10、IL-4和IL-13抑制TH1细胞的细胞因子产生。通过研究细胞因子的免疫 网络调节，可以更好地理解完整的免疫系统调节机制，并且有助于指导细胞因子做为生物应答调节剂(biologicalresponsemodifier’BRM)应用于临床 治疗免疫性疾病。图4-1 细胞因子与TH1、TH2的相互关系(略)
二、免疫效应分子
在免疫细胞针对抗原(特别是细胞性抗原)行使免疫效应功能时，细胞因子是其中重要效应分子之一。例如TNFα和TNFβ可直接造成肿瘤细胞的凋零(apoptosis)’使瘤细胞DNA断裂’细胞萎缩死亡;干扰素α、β、γ可干扰各种病毒在细胞内的复制，从而防止病毒扩散;LIF可直接作用于某些髓性白血病细胞，使其分化为单核细胞，丧失恶性增殖特性。另有一些细胞因子通过激活效应细胞而发挥其功能，如IL-2和IL-12刺激NK细胞与TC细胞的杀肿瘤细胞活性。与抗体和补体等其它免疫效应分子相比，细胞因子的免疫效应功能，因而在抗肿瘤、抗细胞内寄生感染、移植排斥等功能中起重要作用。
三、造血细胞刺激剂
从多能造血干细胞到成熟免疫细胞的分化发育漫长道路中，几乎每一阶段都需要有细胞因子的参与。最初研究造血干细胞是从软琼脂的半固体培养基开始的，在这种培养基中，造血干细胞分化增殖产生的大量子代细胞由于不能扩散而形成细胞簇，称之为集落，而一些刺激造血干细胞的细胞因子可明显刺激这些集落的数量和大小因而命名为集落刺激因子(CSF)。根据它们刺激的造血细胞种类不同有不同的命名，如GM-CSF、G-CSF、M-CSF、multi-CSF(IL-3)等。目前的研究表明，CSF和IL-3是作用于粒细胞系造血细胞，M-CSF作用于单核系造血细胞，此外Epo作用于红系造血细胞，IL-7作用于淋巴系造血细胞，IL-6、IL-11作用于巨核造血细胞等等。由此构成了细胞因子对造血系统的庞大控制 网络。某种细胞因子缺陷就可能导致相应细胞的缺陷，如肾性贫血病人的发病就是肾产生Epo的缺陷所致，正因如此，应用Epo 治疗这一疾病收到非常好的效果。目前多种刺激造血的细胞因子已成功地用于临床血液病，有非常好的 发展前景。
四、炎症反应的促进剂
炎症是机体对外来刺激产生的一种病理反应过程，症状表现为局部的红肿热痛，病理检查可发现有大量炎症细胞如粒细胞、巨噬细胞的局部浸润和组织坏死，在这一过程中，一些细胞因子起到重要的促进作用，如IL-1、IL-6、IL-8、TNFα等可促进炎症细胞的聚集、活化和炎症介质的释放’可直接刺激发热中枢引起全身发烧’IL-8同时还可趋化中性粒细胞到炎症部位’加重炎症症状.在许多炎症性疾病中都可检测到上述细胞因子的水平升高.用某些细胞因子给动物注射’可直接诱导某些炎症现象’这些实验充分证明细胞因子在炎症过程中的重要作用.基于上述理论研究结果’目前已开始利用细胞因子抑制剂治疗炎症性疾病’例如利用IL-1的受体拮抗剂(IL-1receptor antagonist’IL-lra)和抗TNFα抗体治疗败血性休克、类风湿关节炎等，已收到初步疗效。
五、其它
许多细胞因子除参与免疫系统的调节效应功能外，还参与非免疫系统的一些功能。例如IL-8具有促进新生血管形成的作用;M-CSF可降低血胆固醇IL-1刺激破骨细胞、软骨细胞的生长;IL-6促进肝细胞产生急性期蛋白等。这些作用为免疫系统与其它系统之间的相互调节提供了新的证据。
细胞衰老的分子生物学机制
摘要：细胞衰老(cellular aging)是细胞在其生命过程中发育到成熟后，随着时间的增加所发生的在形态结果和功能方面出现的一系列慢性进行性、退化性的变化。细胞衰老是基因与环境共同作用的结果，是细胞生命活动过程的客观规律。为研究细胞衰老分子生物学机制，本文就此展开研究。
关键词：细胞衰老;分子生物学;机制研究
细胞的衰老和死亡与个体的衰老和死亡是两个不同的概念，个体的衰老并不等于所有细胞的衰老，但是细胞的衰老又是同个体的衰老紧密相关的。细胞衰老是个体衰老的基础，个体衰老是细胞普遍衰老的过程和结果。
细胞衰老是正常环境条件下发生的功能减退，逐渐趋向死亡的现象。衰老是生界的普遍规律，细胞作为生物有机体的基本单位，也在不断地新生和衰老死亡。生物体内的绝大多数细胞，都要经过增殖、分化、衰老、死亡等几个阶段。可见细胞的衰老和死亡也是一种正常的生命现象。我们知道，生物体内每时每刻都有细胞在衰老、死亡，同时又有新增殖的细胞来代替它们。
衰老是一个过程，这一过程的长短即细胞的寿命，它随组织种类而不同，同时也受环境条件的影响。高等动物体细胞都有最大增殖能力(分裂)次数，细胞分裂一旦达到这一次数就要死亡。各种动物的细胞最大裂次数各不相同，人体细胞为50～60次。一般说来，细胞最大分裂次数与动物的平均寿命成正比。通过细胞衰老的研究可了解衰老的某些规律，对认识衰老和最终找到延缓或推迟衰老的方法都有重要意义。细胞衰老问题不仅是一个重大的生物学问题，而且是一个重大的社会问题。随着科学发展而不断阐明衰老过程，人类的平均寿命也将不断延长。但也会出现相应的社会老龄化问题以及呼吸系统疾病、心血管系统疾病、脑血管病、癌症、关节炎等老年性疾病发病率上升的问题。因此衰老问题的研究是今后生命科学研究中的一个重要课题。
1 细胞衰老的特征
科学研究表明，衰老细胞的细胞核、细胞质和细胞膜等均有明显的变化：①细胞内水分减少，体积变小，新陈代谢速度减慢;②细胞内酶的活性降低;③细胞内的色素会积累;④细胞内呼吸速度减慢，细胞核体积增大，核膜内折，染色质收缩，颜色加深。线粒体数量减少，体积增大;⑤细胞膜通透性功能改变，使物质运输功能降低。形态变化总体来说老化细胞的各种结构呈退行性变化。
衰老细胞的形态变化表现有：①核：增大、染色深、核内有包含物;②染色质：凝聚、固缩、碎裂、溶解;③质膜：粘度增加、流动性降低;④细胞质：色素积聚、空泡形成;⑤线粒体：数目减少、体积增大;⑥高尔基体：碎裂;⑦尼氏体：消失;⑧包含物：糖原减少、脂肪积聚;⑨核膜：内陷。
2 分子水平的变化
①从总体上DNA复制与转录在细胞衰老时均受抑制，但也有个别基因会异常激活，端粒DNA丢失，线粒体DNA特异性缺失，DNA氧化、断裂、缺失和交联，甲基化程度降低;②mRNA和tRNA含量降低;③蛋白质含成下降，细胞内蛋白质发生糖基化、氨甲酰化、脱氨基等修饰反应，导致蛋白质稳定性、抗原性，可消化性下降，自由基使蛋白质肽断裂，交联而变性。氨基酸由左旋变为右旋;④酶分子活性中心被氧化，金属离子Ca2+、Zn2+、Mg2+、Fe2+等丢失，酶分子的二级结构，溶解度，等电点发生改变，总的效应是酶失活;⑤不饱和脂肪酸被氧化，引起膜脂之间或与脂蛋白之间交联，膜的流动性降低。
3 细胞衰老原因
迄今为止，细胞衰老的本质尚未完全阐明，难以给明确的定义，只能根据现有的认识，从不同的角度概括细胞衰老的内涵。细胞衰老是各种细胞成分在受到内外环境的损伤作用后，因缺乏完善的修复，使“差错”积累，导致细胞衰老。根据对导致“差错”的主要因子和主导因子的认识不同，可分为不同的学说，这些学说各有其理论基础和实验证据[1]。
差错学派 有以下七种学说，有代谢废物积累学说、大分子交联学说、自由基学说、体细胞突变学说、DNA损伤修复学说、端粒学说、生物分子自然交联说等。其中最主要的自由基学说和端粒学说。
自由基学说 自由基是一类瞬时形成的含不成对电子的原子或功能基团，普遍存在于生物系统。其种类多、数量大，是活性极高的过渡态中间产物。正常细胞内存在清除自由基的防御系统，包括酶系统和非酶系统。前者如：超氧化物歧化酶(SOD)，过氧化氢酶(CAT)，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)，非酶系统有维生素E，醌类物质等电子受体。机体通过生物氧化反应为组织细胞生命活动提供能量，同时在此过程中也会产生大量活性自由基。自由基的化学性质活泼，可攻击生物体内的DNA、蛋白质和脂类等大分子物质，造成损伤，如DNA的断裂、交联、碱基羟基化。实验表明DNA中OH8dG(8-羟基-2‘-脱氧鸟苷)随着年龄的增加而增加。OH8dG完全失去碱基配对特异性，不仅OH8dG被错读，与之相邻的胞嘧啶也被错误复制。大量实验证明实，超氧化物岐化酶与抗氧化酶的活性升高能延缓机体的衰老。Sohal等(1994、1995)，将超氧化物岐化酶与过氧化氢酶基因导入果蝇，使转基因株比野生型这两种酶基因多一个拷贝，结果转基因株中酶活性显著升高，平均年龄和最高寿限有所延长。
英国学者提出的自由基理论认为自由基攻击生命大分子造成组织细胞损伤，是引起机体衰老的根本原因，也是诱发肿瘤等恶性疾病的重要起因。自由基就是一些具有不配对电子的氧分子，它们在机体内漫游，损伤任何于其接触的细胞和组织，直到遇到如维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、OPC(原花青素)之类的生物黄酮等抗氧化剂将其中和掉或被机体产生的一些酶(如SOD)将其捕获。自由基可破坏胶原蛋白及其它结缔组织，干扰重要的生理过程，引起细胞的DNA突变。此外还可引起器官组织细胞的破坏与减少[2]。例如神经元细胞数量的明显减少，是引起老年人感觉与记忆力下降、动作迟钝及智力障碍的又一重要原因。器官组织细胞破坏或减少主要是由于自由基因突变改变了遗传信息的传递，导致蛋白质与酶的合成错误以及酶活性的降低。这些的积累，造成了器官组织细胞的老化与死亡。
生物膜上的不饱和脂肪酸易受自由基的侵袭发生过氧化反应，氧化作用对衰老有重要的影响，自由基通过对脂质的侵袭加速了细胞的衰老进程[3]。 自由基作用于免疫系统，或作用于淋巴细胞使其受损，引起老年人细胞免疫与体液免疫功能减弱，并使免疫识别力下降出现自身免疫性疾病。
端粒学说 染色体两端有端粒，细胞分裂次数多，端粒向内延伸，正常DNA受损。
遗传学派 认为衰老是遗传决定的自然演进过程，一切细胞均有内在的预定程序决定其寿命，而细胞寿命又决定种属寿命的差异，而外部因素只能使细胞寿命在限定范围内变动。
参考文献：
[1]郭齐，李玉森，陈强，等.脱氧核苷酸钠抗人肾脏细胞衰老的分子机制[J].中国老年学杂志，2013，33(15)：3688-3690.
[2]胡玉萍，吴建平.细胞衰老与相关基因的关系[J].中外健康文摘，2012，09(14)：35-37.
[3]孔德松，魏东华，张峰，等.肝纤维化进程中细胞衰老的作用及相关机制的研究进展[J].中国药理学与毒理学杂志，2012，26(05)：688-691.