关于原核表达目的蛋白分子量变大的问题求助

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吃货kumiko
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qieerdingdon

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各位大神，我最近投了一篇杂志，审稿人提了一个问题，我的蛋白预测是35kDa,但是实际跑出来的大小时52kDa,预测显示这个蛋白具有糖基化以及磷酸化位点，所以我的解释就是可能发生了糖基化或磷酸化修饰。审稿人觉得在大肠杆菌系统中变化这么大这种解释不足以让他信服，让我提出更加充分的解释，所以想请教一下各位大神，还有啥可能导致实际蛋白分子量变大，拜托拜托@
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张小电1301
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康康是逗逼

你采用什么方法预测的，确定预测的是准确的？再用质谱测测。
125 评论

为何不信2013

你加上了载体的大小了？
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千羽YUmi


就是网上的在线预测的网站，用的是特异性的单抗进行WB检测的目的条带
350 评论

怡安宝贝


我用的是单抗进行WB检测的，应该没法加上载体吧
217 评论

超越经典65


WB只是建立在DNA序列正确基础上检测蛋白表达的一种手段，其结果不能单方面作为鉴定结果的判断。
236 评论

几丁不二


测过序，序列是对的
275 评论

1024个西瓜

打质谱
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夜月叶耶也

您好，请问您解决了这个问题吗，最近我也有原核表达诱导的 蛋白大小是实际的2倍，是形成多聚体了吗？跑胶时加了β-巯基乙醇
114 评论

卓越精品装饰

原核表达不容易加上这些修饰吧，您用的什么载体
249 评论

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