法医学杂志案例分享

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法医学简介
（forensic medicine）：法医学是应用医学、生物学、化学和其他自然科学理论和技能解决法律问题的科学，用于侦察犯罪和审理民事或刑事案件提供证据。

法医学作用

法医学是应用医学及其他自然科学的理论与方法，研究并解决立法、侦查、审判实践中涉及的医学问题的一门科学。法医学是一门应用医学，又是法学的一个分支。

法医学为制定法律提供依据，为侦查、审判提供科学证据，因此法医学是联结医学与法学的一门交叉科学。现代法医学分基础法医学和应用法医学两部分：前者研究法医学的原理和基础：后者则运用法医学的理论和方法，解决司法、立法和行政上的有关问题。这包括受理杀人、伤害交通事故、亲子鉴定等案件的鉴定，为侦查、审判提供线索和证据，为制定死亡判定、脏器移植、现代生殖技术以及解决由此带来的社会问题的法律提供依据；另外通过对非正常死亡的尸体检验来发现传染病，进行中毒和灾害事故的防治及行政处理。

由于司法实践给法医学发展提供了广阔的天地，现代医学和其他自然科学的成就为法医学的发展提供了最新技术手段，原来单一的法医学逐渐形成多分支学科的综合性应用科学，这些学科包括：法医伦理学、法医病理学、临床法医学、法医物证学、法医血清学、法医人类学、法医牙科学、法医化学、法医放射学、法医毒物学、法医精神病学、法医昆虫学、医法学等。

法医学的历史

法医学的诞生和发展，与社会经济的发展、法的出现、以及医学和其他自然科学的进步有着密切的关系。法医学的历史大体可以分为三个时期，即萌芽时期、形成时期、发展和成熟时期。

萌芽时期大约在公元前500年到公元10世纪期间。这时不仅法已经出现，而且医学已经得到一定程度的发展，在处理人命案件时，执法人已知征求医生的意见来处理案件。

如中国先秦时期就有了损伤检验，《礼记·月令》中记载“孟秋之月，……命理瞻伤、察创、视折、审断，决狱讼，必端平”。在已发掘的秦墓竹简中，亦有他杀、杀婴、自缢、外伤性流产等检验案例的记载。战国末期还有“令史”专门从事尸体检验和活体检验。

欧洲古代法医学的发展却缓慢得多，仅有个别案例的传闻，如公元前100～44年凯撒大帝被杀：身上有23处创伤，检验确定贯穿胸部第一、二肋间的是致命伤。

形成时期约为公元11～19世纪，这时社会经济得到进一步的发展，法制趋向健全，案件的鉴定有专业医生参与，开始有较系统的法医著作出现。

这时期最有代表性的著作是中国南宋理宗淳祜七年(1247)湖南提点刑狱宋慈编著的《洗冤集录》五卷。内容包括：检验总说、疑难杂说、初检、复检、验尸、四时变动、验骨、自缢，溺死、自刑、杀伤、火死、跌死、服毒及其他各种死共53项。这是世界上最早的一部系统法医学著作，曾被译成多种文字在许多国家出版。

中世纪的欧洲，以法国、德国和意大利的法医学发展较快。1562年法国外科医师帕雷对升汞中毒作了第一例解剖，1575年他在《外科手术学》一书中，阐述了机械性窒息、杀婴、电击死处女鉴定等方法；1598年意大利医师菲德利斯发表《医生关系论》一书，这是欧洲第一部法医学著作。

1642年，德国莱比锡大学首先开设系统的法医学讲座；1782年，柏林创办了第一份法医学杂志，从此法医科学初步形成它自己独立的体系。

发展和成熟时期 工业革命给科学技术的发展，开辟了广阔的前景。18世纪以前的法医学主要靠肉眼观察活体、尸体现象，所得到的是直观的、浅显的结论，19世纪后则由于显微镜技术的出现和化学分析方法的应用，法医学的研究工作得到深入发展。

这个时期法国著名法医学者奥尔菲拉著有《论毒物》，俄国奈丁应用显微镜研究自缢与勒死的颈部索沟，以判断究系生前抑或死后形成。

1899年，西方近代法医学开始传入中国；1915年北京和浙江医学专门学校开设法医课；1930年国立北平大学医学院创立法医教研究。1932年在上海建立法医研究所并出版《法医月刊》。

20世纪以来，经济的发展和自然科学的突飞猛进大大促进了法医学的发展，现代分析仪器的运用和新检验技术的应用，标志着现代法医学体系的形成。

法医学的研究对象

法医学的研究对象包括人(活体、尸体)和物。

活体检验包括检查被害人和被告人的生理状态和病理状态内容、有损伤程度、劳动能力的鉴定；有关性犯罪、性功能、妊娠、堕胎的鉴定；个人识别检查、亲子鉴定；诈病、造作病(自残)的检查和诊断；司法精神病检查和诊断、精神状态和责任能力的鉴定；疾患(含外伤和疾病，职业性和公害引起的疾患)；年龄鉴定(犯罪年龄的确定)；酩酊检查(酒后肇事)；毒品注射痕检查(兴奋剂和麻醉剂注射)等。

死体检验是法医学研究的最重要对象，主要检查目的是判明死亡原因、推断死亡时间、确定损伤部位、形状和程度，鉴别生前伤和死后伤，以及受伤时间、伤后行为能力、推断致伤凶器、分析作案方式确定死亡性质(自杀、他杀、灾害)、有无中毒和疾病体貌特征检查。

法医学尸体检查包括尸表检查和尸体剖验。属下列情况之一者应进行法医解剖：涉及刑事案，必须经过尸体解剖才能判明死因的尸体和无名尸体，需查明死因及性质者；急死或突然死亡，有他杀或自杀嫌疑者；因工、农业中毒或烈性传染病死亡，涉及法律问题的尸体。

剖验要求全面系统，并应留取足够检材作组织切片、毒物分析和细菌学检查。一般应在一定期限内向委托单位发出尸体剖验报告。

物体检验包括人体的一部分(骨片、毛发、组织块、血痕等)；人的分泌物、排泄物(精液、尿、汗液、粪便等及其斑迹)；人体表面复制物(指纹、足迹)；人体附着物(化妆品、垢、尘土)；凶器与衣着；剩余食物饮料、药品、呕吐物、胃内容物等。

涉及人身伤亡的犯罪现场、灾害、事故现场也是法医研究的重要对象。法医鉴定人会同侦查人员及时赶赴命案现场，对现场进行实地调查、检验尸体外表、发现并提取犯罪证据，这称为法医现场勘查。法医研究现场是为了查明死亡原因、判断死亡时间，了解死亡过程和致死手段和方法，推断致伤或致死工具，提取法医物证。

对案件具有证明意义的文字、图表资料均称书证。包括病历、诊疗意见书、死杀诊断书、现场勘查笔录、尸体剖验报告物证检验报告书，访问调查材料、法医学鉴定书等。法医鉴定人对书证进行审查，并按司法机关的要求，作出相应的结论，对于书证材料不足的，可要求补充材料。

法医学的研究方法

法医学的研究方法有医学的、生物学的、化学的和物理学的四类。

医学的研究方法最主要的是尸体剖验。包括肉眼观察研究和取器官组织检材制作组织切片，并染色进行显微镜下检查和组织化学检查。为研究超微结构和测定微量金届含量还可应用电子显微镜观察和微区分析。

此外，还可根据需要提取相应检材作化学和生物学检查。其次是临床医学检查，应用临床知识对活体进行诊察，确定活体的生理、病理状态，解决医疗事故中的医疗责任以及传染病、中毒、公害的防治问题等。

化学的研究方法包括应用化学分析方法对毒物进行定性和定量，对排泄物、呕吐物进行毒物检验，用化学反应方法确定是否有血迹，以及用生物化学方法检查人体酶型和遗传指纹(DNA技术)，以进行个体识别等。

生物学的研究方法，如采用免疫血清学鉴别个体和动物的血、精斑、其他体液斑、分泌物、骨、毛发的种属和血型；采用微生物学理论和技术，对有关检材进行细菌和病毒检查等；采用动物试验方法进行中毒病理学、机械性损伤、其他物理性损伤、机械性窒息的模拟试验；应用人类学知识对无名尸体进行年龄、性别、种族特征的研究。

物理学的研究方法是指采用物理仪器测定皮肤、骨骼的强度，进行损伤模拟试验；采用 X射线技术进行损伤、身体异物和骨骼年龄的推断；采用气相色谱仪，紫外、红光分光光度仪、质谱仪、磁共振技术、中子活化技术等对毒物和药物进行定性和定量分析；用光谱分析、电泳技术、显微镜技术进行法医物证的检验等。

法医学的内容

法医学的内容主要有：

死亡与尸体现象。讨论死亡概念、死亡过程和死亡分类；研究死亡诊断标准；鉴别真死和假死；研究死后尸体在内外因素作用下发生的一系列变化，包括早期尸体现象(肌肉弛缓、尸冷、局部干燥、尸僵、尸斑、组织自溶)、晚期尸体现象(尸体腐败、干尸、尸蜡、泥炭鞣尸、霉尸、白骨化)以及昆虫等动物对尸体的毁坏；推断死亡时间等。

各种机械性窒息的发生机制、征象、后果和检验方法。如对缢死、勒死、扼死、闷死、压迫胸腹部所致的窒息死、异物堵塞呼吸所致的窒息死、溺死进行鉴别；研究各种机械性窒息的作案方式。

机械性损伤的分类、形成机制。讨论钝器、锐器、火器损伤的基本形态、损伤后果、 致死原因；阐述各种徒手伤、器械伤坠落伤、交通工具所致损伤、咬伤、切创、砍创、刺创、剪创以及枪弹创和爆炸伤的特点和鉴定要点；鉴别生前伤与死后伤；推断致伤物；判断打击次数、打击顺序和方向；推断伤后经过时间；确定损伤性质(他杀、自杀意外事故、灾害事故)。

高温、低温、电流或其他物理因素所致的损伤和死亡。讨论烧死、烫死、冻死、电击伤、雷击伤的机制和征象，鉴别生前烧伤(死)与死后焚烧。

各种毒物的性状、毒理作用，毒物进入体内的途径和代谢过程，中毒症状，病理改变。中毒量和致死量，毒物检验方法和预防措施。

各种猝死与自杀、他杀引起的突然死亡。

性功能的生理和病理状态。讨论强奸、猥亵、性变态行为的作案方法和手段，及人身检查和鉴定标准。研究妊娠和分娩，确定受精时间和妊娠期间。研究堕胎、杀婴的方法，后果和法律责任。

各种人体组织、体掖、分泌物、排泄物及其斑迹的种属、红细胞型、白细胞型、血清型、酶型以及遗传基因纹(DNA指纹)、基因频率分布的理论和检验方法；出血部位、出血量和出血时间；亲子鉴定的理论和方法。

法医人类学的个人识别。根据骨骼、牙齿、毛发推断人种、性别年龄、身高、职业特点、面貌特征，确定无名尸及碎尸的身源；研究如何根据颅骨复原生前面貌，以及将颅骨与嫌疑人相片重合以确定是否同一个人等。

他杀、自杀他杀伪装自杀、自杀伪装他杀的特点和规律。研究自伤他伤的规律和损伤程度鉴定；研究诈病(假装或夸大病情)、造作病(或自残)的特点和规律以及检验和鉴定方法。

医疗事故的鉴定、医疗工作中的刑事和民事责任。分清医疗事故和医疗差错及医护人员应负的责任，帮助医疗机构提高质量，促进医学科学的发展。

法医学的尸体检验方法和步骤研究。研究无名尸体检验、碎尸检验、重大灾害事故尸体检验、挖掘尸体检验的特殊方法和技术。

活体检验的各种方法和技术，确定相应的鉴定标准。

涉及法律的其他医学问题。如研究违法或犯罪行为与精神病态的关系，精神病人违法或犯罪后的责任能力鉴定等等。

自宋慈《洗冤集录》的发表，距今已有700多年历史，这以后法医学由原来的单一学科发展到门类齐全的多科性应用科学，其研究方法和检测手段更趋现代化。但是，随着法制的健全、公安、司法实践不断给法医学提出新的课题，法医学本身也存在不少有待解决的问题。

这方面的问题主要有：精确、可靠地确定死亡时间和伤后经过时间的技术；简易、科学、实用的生前与死后伤鉴定方法；死亡标准、脏器移植与法律的关系；法律伦理学方面的问题，如现代生殖技术(人工受精、试管婴儿)带来的法律问题，性转换术、生物医学的人体实验与法律问题；可靠的个人识别方法、完善的遗传基因、指纹的鉴定技术；猝死的机制和有效的诊断方法等。

法医学专业

学科：医学
门类：法医学类
专业名称：法医学

业务培养目标：本专业培养具备医学的基本理论知识和系统的法医学理论知识及基本技能，能在公安、政法机关从事法医学检案鉴定工作的高级科学技术人才。

业务培养要求：本专业学生主要学习基础医学、临床医学、法学及法医学的基本理论及基本知识，受到医学及法医学的基本技能训练，具有法医学检案鉴定的基本能力。

毕业生应获得以下几方面的知识和能力：
1．掌握基础医学、临床医学、法学以及法医学的基本理论、基本知识；

2．掌握法医学的基本技术和案例分析的思维方法；

3．具有法医学检案和鉴定的初步能力；

4．熟悉与法医学有关的我国的各项法律以及法医工作的政策和规程；

5．了解法医学的应用前景及发展动态；

6．掌握文献检索、资料查询的基本方法，具有初步的科学研究和实际工作能力。

主干学科：基础医学、临床医学、法医学。

主要课程：法学理论、人体解剖学、病理学、内科学、外科学、刑事侦察技术、法医病理学、法医毒理学、法医临床学、法医物证、法医精神病学、法医毒物分析。

主要实践性教学环节：临床实习一般安排12周左右；包括法医病理学、法医物证及法医临床等校外基地实习一般安排12周左右。

修业年限：五年

授予学位：医学学士

辽宁男子捅死前妻捅伤亲子，因家庭琐事发生争吵，这是有多大仇多大怨？

辽宁省葫芦岛建昌县一农贸市场内发生特大刑事案件，造成1死1伤，犯罪嫌疑人王某军当场被抓获，警方的调查结果显示，王某军同受害者杨某玉原本是夫妻关系，同受害者王某阳是父子关系，杨某玉当场被捅死，王某阳被送到医院接受了治疗，暂时没有生命危害，事发原因系家庭琐事，目前，案件正在进一步侦查中。

其实类似的案件在葫芦岛不是第一次发生：2019年7月9日，男子郑某找前妻亢某想要复婚，结果遭到了前妻的拒绝，恼羞成怒的郑某拿出一把尖刀，持刀进入亢某的卧室，用刀子刺向亢某的颈部，年仅23岁的亢某当场死亡。

《聊斋志异》中有很多个小故事，但是画皮的知名度显然处于第一梯队：心肠歹毒的女鬼，披上画出来的人皮，伪装成一个令男人醉心的妙龄美女，使用各种手段，达到掏人心的目的，作者想要通过这个故事告诫男人们不要被美色所诱惑，不然可能会被披着人皮的恶魔所杀害，但在现实世界中，死于枕边恶魔的多数为女性，不信可以来看这样一组统计数据：

《中国法医学杂志》曾经发表了一篇名为《上海地区354例女性被杀案例的法医学分析》的论文，根据这篇论文，女性被杀有三大主要原因：家庭矛盾占22%，奸杀占14.4%，恋爱纠纷占12.7%，在因为家庭矛盾被害的78名女性中，被丈夫杀害的为62例，占比高达80%，而UNODC的统计数据则显示，这个世界上每天有137名女性被伴侣或者是亲人杀害，意大利的数字则显示，2018年意大利共有133名女性被害，其中54.9%的案件凶手为被害人的伴侣或者是前任。

我们不妨思考下，为何曾经亲密的恋人，最后会成为对被害者最狠的恶魔呢？主要有两个原因。首先，部分施害者不会控制自己的情绪，当人们在被分手或者是被离婚的时候，心里边的感觉是五味陈杂的，可能会觉得“以前的生活没有意义”、“多年的付出毫不值钱”、“我被抛弃了”。如果没有办法好好处理这些负面情绪，就会通过报复、乞求、威胁等方式请求复合，再被拒绝的话，他们可能就会失控，觉得自己的人生失去了目标和方向，抱着“大不了同归于尽”的心理来伤害对方。郑某的案例中，施害者就是这样的心理。

而在王某军的案件中，虽然我们目前尚不知道他是否打算找前妻复合，但是他不会控制情绪这一点是很显而易见的：生活中因为琐碎的小事发生矛盾甚至是大打出手的夫妻有很多，但大多数人吵完了以后会心平气和地找出解决问题的办法，不会走到这种极端的地步，虎毒尚且不食子，他伤害的不止是自己曾经的妻子，还有自己的儿子。

其次，社会舆论也会造成一些负面影响，在守旧的人看来，一个男人如果被离婚了、被分手了，那就是没有本事，是弱者，不是真男人，甚至可能因此招来其他人的嘲笑。这些人自我无法排解掉负面评价和想象的困扰，就会把怒气撒到“罪魁祸首”身上，这个对象往往就是前妻或者是前女友，从而做出伤害她们的行为。

其实不管男女，在择偶上都要远离那些在感情上目的性很强的人，这类男性在感情上通常没有道德感和底线。情绪管理有明显问题的人也是“危险分子”，对你好的时候特别好，恨不得把天上的月亮星星摘下来给你；但对你差的时候也特别差，恨不得直接带你下地狱。总之，没有道德压力、不在意社会秩序的人是不适合长期一起生活的

DNA指纹的应用及相应的案例

玉米“DNA指纹”鉴定应用前景广阔
农博网2005年1月26日讯 山东某公司从东北某地买了几火车皮玉米种子,经北京市农林科学院玉米研究中心检测,结果令人大吃一惊,原来这是报废的种子,如果播到地里,轻则减产,重则颗粒无收,农民还将白白赔上施肥、浇水等人力、财力。所幸的是,该公司根据玉米“DNA指纹”鉴定结果,及时进行了妥善处理,避免了巨大的经济损失。

玉米“DNA指纹”鉴定作为一项新技术,在应用中正发挥出越来越大的作用。

玉米打假维权新途径

当前出现了两种令种子研发、生产、使用者头疼的现象,一是假种子屡禁不止,主要使广大农民蒙受巨大损失。二是窃取良种,非法进行生产、销售,主要侵害着良种研发、生产者的利益。某一国审玉米品种由于没能及时进行品种权保护,被大面积侵权,已无计可施。

究其原因,首先是玉米品种鉴别难度很大,凭肉眼,不仅农民,连专家也分不清。其次,暴利使得违法者铤而走险。北京市农林科学院玉米研究中心主任赵久然博士介绍,玉米种子生产利润很高 每斤种子按四五元、利润按2元算,每亩利润可达10元,若种植面积上百万亩,利润可达上千万元。而以次充好、以假充真的利润就更高。至于侵权者,不难从田间得到良种,仅逃避的种子转让费就高达几十万、上百万元。

随着玉米“DNA指纹”鉴定技术日益成熟,越来越多的人们通过这一新途径辨识种子真实身份,用以打假维权。该中心承担玉米“DNA指纹”司法鉴定任务已四五年,近两年客户猛增,至今承担此类侵权案鉴定已达40多起。同时,该中心提供大量鉴别假冒伪劣的服务,几年来为全国科研、生产、经营、管理及执法部门提供种子纯度检测、真伪鉴定已达5000多样次。

作为“超级玉米种质创新及DNA指纹库构建”项目主持人,赵久然博士指出,如果“超级玉米”研究成功,每年种植4000万亩,我国每年玉米产量就能增加60亿公斤,相当于新增1500万亩土地。但需要玉米“DNA指纹”鉴定帮助打假、推广良种,这一效益才能真正实现。

“指纹”鉴定市场需求大

玉米“DNA指纹”之所以称为“指纹”,是因其像人类指纹可以准确区分不同的人一样,也具有准确的鉴别能力,可以准确区别不同品种的玉米。

玉米“DNA指纹”长在玉米哪个部位,什么“模样” 赵久然说,DNA存在于各种生物体的每个细胞内,存在于玉米的根、茎、叶、花、果实各处。不同的玉米品种具有不同的DNA,但肉眼是看不到的。在北京市农林科学院玉米研究中心实验室内,记者看到,科研人员取出玉米种子内乳白色的胚,加入试剂,制成玉米DNA溶液,运用一系列生物分子检测技术,通过数量扩增、电泳、染色等一系列环节,放大的呈带状的千姿百态的玉米“DNA指纹”图谱在玻璃板上一一呈现。

近年来到该中心鉴定玉米“DNA指纹”的客户,几乎遍及全国所有玉米主产区,还有国际大种子公司。赵久然认为,随着该项技术的普及推广,其应用前景将很可观。

不仅限于维权、打假两方面,玉米“DNA指纹”鉴定的应用领域还很多,这体现在该中心承担完成的多项国家、地方项目上。比如,受农业部种子质量监督检测中心委托,确定了我国200多个主要杂交种的纯度鉴定专用“DNA指纹”;受农业部有关主管部门委托,负责每年200多个参加国家区试玉米品种的监测;受国家植物新品种保护办公室委托,负责玉米品种特异性DNA标准制定和检测;受科技部知识产权事务中心委托,承担品种真实性鉴定等。

“指纹”库不可或缺

面对迅速扩大的市场需求,提供玉米“DNA指纹”鉴定的科研人员也有苦恼。在这项研究中达到国际领先水平的北京市农林科学院介绍,目前全国推广使用的国审 适用生态区较广 品种有100多种,省审 在省内推广使用 品种上千种。而他们目前只掌握500多种样本。苦于没有“指纹”库,遇到没接触过的品种,只能增加检测位点,多时高达四五十个,既重复浪费,也影响效率。有了“指纹”库,就能掌握“指纹”概率,只检测一二十个位点即可。构建玉米“DNA指纹”库成为当务之急。

适应这一需要,作为由北京市科委倡议发起的“北京农业育种基础研究创新平台”首批启动项目,全国第一个玉米“DNA指纹”库日前在北京市农林科学院开始构建。该平台由北京多家部门与国家有关部委共建,协作攻关,力度很大。

专家认为,该“指纹”库在玉米种子和品种的纯度及真实性鉴定、新品种测试、品种权登记保护、品种质量监控、新品种侵权司法鉴定等方面具有广阔的应用前景;对理清我国玉米种质的血缘关系、解决品种多、乱、杂问题、种质创新等有重要意义;将在玉米“DNA指纹”鉴定应用中发挥重大的推动作用。



DNA指纹技术分析畜禽亲缘关系的原理及应用


DNA指纹技术是分子生物学各种新兴技术中的一种，目前已被广泛应用于法医学、疾病诊断、肿瘤研究等领域。本文就DNA指纹技术的建立、发展及其应用作一综述。

1 DNA指纹图的建立及发展

近百年来的研究认为，任何遗传分析都是以遗传标志为基础的，而任何一个遗传标志的价值又在于其变异 性(即多态性)的大小。有关遗传多态性的研究对促进人类学、遗传学、免疫学以及法医学的发展， 以及对阐明某些疾病的发病机理乃至协助诊断等方面都起了十分重要的作用。但以往的研究都是利用各种外部表现型、生理缺陷型、同工酶、多态蛋白等作为遗传标志，用间接分析来推论相应的遗传基因。

70年代末，限制性内切酶和重组体DNA技术的出现以及分子生物学的飞速发展，使人们对遗传标志的研究转向DNA分子本身。由于各种遗传信息都蕴藏在DNA分子上，生物个体间的差异在本质上是DNA分子的差异，因此DNA被认为是最可靠的遗传标志。某些DNA序列的差异可通过限制性酶切片段长度的改变来反映，此即限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphisms,RFLP),其产生是由于点突变、DNA重排、插入或缺失引起的〔1〕。随着对RFLP研究的深入，人们发现了基因组中最有变异性的一类序列——高变异DNA序列，使DNA遗传标志的发展和应用得到了一次飞跃。
1980年，Wyman和White描述了第一个多等位性的具有高度多态性的人类DNA标志。不久，在胰岛素基因(Insulingene)的5′端区域、致癌基因(C-Haras I Oncogene)的3′端分别发现了相同的高度可变的标志(hypervariable marker)。在α-球蛋白(α-globin)基因群周围还发现了其它三个标志〔2〕。1982年，Bell等〔3〕证实：这些高度多态性区域串联着重复的短序列单位，重复单位数目的差异导致了这种高度的可变性，由于这些结构特征，人们称这些区域为小卫星(minisatellite)或高度可变区域(hypervariable)或可变数目的串联重复(variable number of tandem repeats)。
1985年，Jeffreys 等〔4〕用肌红蛋白基因第一内含子中的串联重复序列(重复单位含33bp)作探针，从人的基因文库中筛选出8个含有串联重复序列(小卫星)的重组克隆。序列分析表明，这8个小卫星重复单位的长度和序列不完全相同，但都有相同的核心序列(core sequence)即GGCCAGGA/GGG。他们先后用两个多核心小卫星(poly coreminisate
-llite)33.6和33.15探针进行southern杂交，在低严谨条件下杂交得到了包含10多条带的杂交图谱，不同个体杂交图谱上带的位置就象人的指纹一样千差万别，Jeffrey称之为DNA指纹(DNA fingerprint)〔5〕，又名遗传指纹(genetic fingerprint)。
RFLP DNA指纹分析技术由于方法繁杂、周期长、实验条件高等缺陷而无法大范围推广。1990年，Williams等〔6〕首次报道了AP-PCR技术，Welsh和McCelland〔7〕亦独立地进行了这方面的工作，从而使DNA指纹技术应用更加广泛。AP-PCR技术是采用随意设计的1个或2个引物，对模板DNA进行PCR扩增，一般先是在低严格条件，即在高Mg2+浓度(大于传统PCR Mg2+浓度1.5mmol/L)、较低退火温度(36℃～50℃)下进行1～6个循环的PCR扩增，随后在严格条件下进行PCR扩增，产物经2%琼脂糖凝胶电泳或6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，可得到DNA指纹图谱。其基本原理是：在低严格复性条件下，引物与模板DNA非完全互补序列形成错配，错配引物在DNA聚合酶作用下沿模板链延伸，合成新链，当在一定距离内模板DNA另一单链也发生引物错配时，即可对两错配引物间的DNA进行扩增。但是此种错配并非随机发生，引物和模板间，特别是在引物3′端必须存在一定的互补序列，即可产生不同的扩增片段或组合，通过DNA指纹图谱，可得到配对DNA样品中的差异片段，用于克隆、测序、染色体定位和基因片段的生物学功能研究。
我国杨建厂等〔8〕利用PCR的原理成功地建立了一种全新的DNA指纹检测技术，称之为随机引物PCR人DNA指纹检测技术(arbitrarily primed PCR human DNA fingerprinting,APHDP)，此外还开发出处理DNA指纹数据应用软件，应用于个人识别、遗传素质与疾病的相关特征研究等。

2 DNA指纹技术所用的探针

自DNA指纹技术建立以来，这一技术迅速在动植物的进化关系、亲缘关系分析以及法医学方面得到广泛应用。也正是由于DNA指纹技术在核酸分析中显示出了强大的生命力，因而许多学者围绕此技术所用的探针作了大量的工作，除Jeffrey等〔5〕的探针外，用人工化学合成或从生物组织中提取后再扩增的办法生产出了一批高水平的探针。迄今，在DNA指纹技术中所用的探针大概有probe33.15、33.6〔5〕、bacteriophage MB〔9〕、pig repetitire clone p83、PGB 725、poly(GT) containing 18.1、(GTG)5/(CAC)5〔10，11〕、(CAC/TA)4及(GT)12等。同时，在探针的标志上也有了很大的发展，根据它们的结构可大致分为小卫星探针和简单重复序列探针，简单重复序列包括微卫星探针(microsatellite probe)和寡聚核苷酸探针。小卫星探针的核心序列为33bp，常定位在人常染色体前的末端(proterminal)区域，微卫星探针则在10～20bp之间，而寡聚核苷酸探针在10bp以下，普遍散布在人类整条染色体上，或者在基因间区域或者位于内含子内。
1988年，我国伍新尧等〔12〕根据DNA指纹是人基因组中重复序列的RFLP的原理和人与鼠的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA同源序列性高于90%的事实，选用鼠MBP cDNA3′端的一段序列(非表达区高度重序列，与人基因组中该类重复序列几乎完全同源)，长度为0.81kb的片段作探针，检测用HaeⅢ酶解的人DNA限制性片段(RF)，在人群中可分出22条谱带，受检 的30例无血缘关系的个体之间没有两个人的谱带是完全相同的，显示这一方法的高度个体特异性，这是国内首次用自已的力量找到DNA指纹的探针。

3 DNA指纹的应用3.1 法医学方面 同以往的血型测定法相比，DNA指纹技术在法医学领域上具有无可比拟的优越性。已成为鉴定犯罪、亲子鉴定和确定个体间亲缘关系的工具〔5，13〕。随后，国内学者李伯龄〔14〕、姜先华〔15〕、伍新尧等〔12〕也先后对此项技术进行了研究，并应用于实际案件的鉴定中，解决了过去无法解决的疑难案例，如微量血痕、部分腐败的碎尸块的个人认定等。
3.2 在动植物科学中的应用
3.2.1 生物种群学研究 利用DNA指纹图可以估算连锁不平衡，比较等位基因的频率，还能估计不同个体之间的重组率，在种群学研究上有助于建立某一个体在种群中的地位和关系，特别是对真菌的种群研究，有很多真菌可以通过有性和无性的方式繁殖，但是何时以何种方式繁殖，程度如何，并不清楚，而利用DNA指纹图就能区分以有性和无性方式产生的后代，并能确定某一区域真菌的自然分布〔1，16〕。
3.2.2 测定物种之间的遗传距离、物种分类鉴定 Jeffreys等〔5〕认为在一个群体的不同成员间拷贝数的串联重复序列(VNTR)由于多态性程度高，在遗传分析中尤其适合作为多态性标志，简单重复的不稳定性可导致VNTR长度的迅速变化，根据家族中或育种群体中VNTR的分离重组频率，可以测定出遗传距离，可用统计学公式确定个体间的亲缘关系：D=2Nab/(Na+Nb),，D值越大，亲缘关系越近，遗传距离就越小；D值越小，亲缘关系越远，遗传距离就越大。为此，运用DNA指纹技术可检测不同物种、同种及同种不同个体的亲缘关系，用于物种分类鉴定，也可用于杂交后代亲本决定，杂交后代群体分开，检测近等基因系(或同类系)种的多态性，并对检测基因进行定位。Welsh等〔7〕对布氏疏螺旋体菌株的DNA指纹进行分析，发现这种lyme病的病原菌实际上是由三个不同的种群组成。罗超权等〔12〕运用AP-PCR鉴定弓形虫虫株，在国内开创了运用DNA指纹技术作生物分类的先例。
3.3 在流行病学方面的运用 由于DNA指纹具有以下几个特点：①能反映基因组的变异性；②具有高度的变异性；③具有简单的稳定的遗传性；④DNA指纹谱具有体细胞稳定性。所以，它同一般的流行病学方法相比较而言，具有无比的优越性，使其成为流行病调查的一种有效工具。Jan DA等〔17〕，Denise Chevrel-Dellagi等〔18〕运用IS6110序列作探针对结核病分支杆菌株进行DNA指纹分析，调查国际间结核病的种型、分析流行情况，改进了控制结核病的方法。而ZhenHua Yang等〔19〕从67个病人中分离出结核病分支杆菌株进行DNA指纹分析，发现分离到PTBN12型时易查明流行环节，从而为快速进行疾病控制提供了一个有力证据。在我国，童笑梅等〔20〕采用随机扩增多态DNA指纹图技术对医院内感染的14例新生儿进行病原流行病学分析，发现患儿体内携带的与医务人员鼻中携带的华纳葡萄球菌菌株的DNA指纹图完全一致，从而证明此次感染的病原菌为华纳葡萄球菌，传染源是携带病菌的医务人员。郭永建等〔21〕在6个月内对121名产科新生儿中的30名检出的31株铜绿假单胞菌进行RAPD指纹图谱分析和血清学分型，结果表明，铜绿假单胞菌在产科新生儿中暴发流行，0∶6/R∶1型为暴发流行性菌株，对医院感染病原菌分型、精确确定传染源、阻断传播途径、控制和预防医院感染具有重要的指导意义。
3.4 疾病诊断及治疗 鉴于DNA指纹所具有的上述特点，故DNA指纹广泛应用于一些疾病的诊断及治疗。Morral〔22〕等发现CF基因9号外显子侧翼含有一小卫星区，且此等位基因2.6带常与△F508连锁，相伴率为50.6%、41.6%，△F508是最主要的致病突变，可疑患者电泳图只要发现2.6等位基因，就可对此病进行初步诊断。现已在Wilson病、外周神经纤维瘤、成人多束肾、多巴性肌紧张、Frecbreich共济失调、Kallmunm综合征性连锁、视网膜病等基因内或旁侧发现有高度的小卫星区域，从而可进行基因诊断。Okamoto R〔23〕用DNA指纹法预测慢性粒cell性白血病骨髓移植术后复发，取得了成功。
3.5 肿瘤的研究 肿瘤是多因素、多阶段的变化过程，病因复杂、变化多样，但归根到底还是在DNA的变化上。一般说来，癌组织、转移灶与正常组织或外周血细胞DNA指纹有差别，常见的是某条带或几条带的缺失，某一条或某几条带密度降低，或者癌组织中出现新的带。Thein等〔24〕用33.6和33.15为探针研究患者DNA指纹谱变化，发现胃肠肿瘤患者癌组织DNA指纹谱全有改变，并认为体细胞突 变还有种属特异性。刘霜等〔25〕应用RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术对6例肝癌患者的癌组织与非癌组织进行分析，发现所有肝癌组织基因组DNA的RAPD指纹图谱均存在差异，其中3例配对肝癌基因组中均存在一相同的0.9Kb的随机扩增片段。杨建厂等〔8〕用APHDFF技术对28例确诊为鼻咽癌病人血DNA指纹图的检测，发现有3条DNA片段出现的频率明显低于健康人群。王黛等〔26〕用LE11.8、MYO和Mb探针，经Southern杂交法检测12例儿童急性粒cell白血病患者的外周血或骨髓细胞的基因重排，结果发现初始或复发与完全缓解时的DNA指纹图相比，谱带有增加或减少，从而认为急性粒细胞白血病患儿的白血病细胞存在基因重排。

林文珍(广西医科大学生化教研室 南宁市 530021)
舒雨雁(广西医科大学生化教研室 南宁市 530021)

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radiology; body height; cervical vertebrae; linear model　　2.7正文　　2.7.1 医学名词和缩写　　以科学出版社出版的《医学名词》和相关学科的名词为准，暂未公布者仍以人民卫生出版社编的《英汉医学词汇》为准。中文药物名称应使用《中华人民共和国药典》或卫生部药典委员会编辑的《药名词汇》 (非法定药物)中的名称，英文药物名称则采用国际非专利药名，不用商品名。非公知公用的缩写第一次在摘要和正文中出现时应以以下方式描述：中文全称（英文全称，缩写）。　　2.7.2 标题　　研究类文章一般分为“引言”、“材料和方法”、“结果”、“讨论”4个部分；个案报道一般分为“案例”和“讨论”两部分。各部分以下层次的标题应简短明确。标题要有标题名。采用四级标题，顶格排序，引言不排序。一级标题用1，2，…，排序；二级标题用1.1，1.2，…，排序；三级标题用1.1.1，1.1.2，…，排序；四级标题用1.1.1.1， 1.1.1.2 …，排序。其后用（1），（2）…，可无标题名，连续表述。　　2.7.3 图　　文中插图应具有自明性，要有图序和图题。显微照片应注明染色方法和放大倍数。线图和点图作图要规范，实验点要简明、准确、大小适宜、线条均匀、图中文字、符号、坐标的标值及标值线必须清晰。标目采用国家规范的物理量，物理量要列出名称、符号和单位符号。图的内容切忌与表格和文字内容重复。　　2.7.4 表　　采用“三线表”，必要时可加辅助线。表题和表中文字尽量使用中文，可按本刊规定使用符号和缩写。三线表具备要素表序、表题、表身、表注(必要时)。全文有1个表，表序写作“表1”。表内栏目为物理量时，应列出物理量的名称、符号和单位，例：时间 t/min；浓度 cB/（mol·L-1）。表中的单位等内容一致时，可将其用圆括号标注在表题下方表的右上端，例：（n=8，x±s）。表中数据小数点对齐或加减号对齐。表注置表下方，采用1），2）…形式，不用*、#、△、★等符号。　　2.7.5 数学、物理、化学式　　应编排序号，序号标注于该式所在行的最右边。圆括号形式。较长的式子在运算符号（+，-，×，÷， >，<，=）处转行，关系符号留在行末。不能在∑，∏，∫，dx/dt等这类符号后转行。　　2.8 执行专项标准中注意的问题　　2.8.1 标点符号　　执行 GB/T 15834-1995《标点符号用法》。　　注意不可出现冒号套冒号的情况，如：“病理诊断：脑：淤血、水肿；肺…”。不可将冒号（：）与比号（∶）混用。正确使用连接号，例：CAJ-CD；1 000～1 500 kg，1998—2006年。　　2.8.2数字用法　　执行GB/T 15835-1995《出版物上数字用法的规定》和GB 8170-87 《数值修约规则》。　　凡是可以使用阿拉伯数字且得体的地方，均应使用阿拉伯数字。公历世纪、年代、年、月、日和时间，必须用阿拉伯数字。定型的词、词组、惯用语、缩略语、修辞语句、概数的临近数字、中国干支纪年和夏历月日、含月日表示时间和节日的词组、无统计意义的用汉字。数字的小数点前后，每3位一组，组间空1/4汉字空。参数和偏差范围的正确表示举例如下：（1）数值范围 5～10，3×103～8×103；（2）百分数范围 20%～30%,（30±5）%；（3）具有相同单位的量值范围 1.5～3.6mA；（4）偏差范围 （25±1）℃；（5）带尺寸单位的数值相乘 3 cm×4 cm×5 cm。　　2.8.3 统计学符号　　执行GB/T 3358.1～3358.3-93 《统计学术语》。　　常用相应术语及符号示例：样本量 n； 样本观测值 x，y； 样本均值 x；样本相关系数 r； 样本复相关系数R；样本标准差 s；样本方差 S2； t检验 t； F检验 F； χ2分布 χ2； 自由度 v； 概率 P。　　2.8.4 量和单位　　执行国家标准GB3100-1993，GB3101-1993，GB3102（1～13）-1993《量和单位》的规定，正确使用量和单位的名称与符号。量符号以斜体字母表示（pH用正体除外），单位符号一律以正体字母表示。　　例：血压计量单位为 kPa；时间单位为 s、min、h、d；质量单位为 kg；重量单位为 N； 分子质量单位 为 u；旋转速度正确的表示为：“离心半径10 cm,1 000 r/min,离心5 min”或“1 000×g离心10 min”； B的浓度 cB单位为mol/L、mmol/L等。质量浓度ρ单位为kg/L，g/L、mg/L等。　　2.9参考文献　　按照GB/T《文后参考文献著录规则》的规定,采用顺序编码制。著者为1～3位时全部写出,人名中间加逗号，3位以上时只列出前3位,后加“等”或“et al.”。中文期刊用全名,西文按《医学文献索引》(Index Medicus)格式缩写。　　2.9.1参考文献标注法　　（1）本刊正文中引用文献的标注方法采用顺序编码制, 即按文章正文部分引用的文献出现的先后顺序连续编码, 用阿拉伯数字加方括号标出。根据情况可按下述3 种格式之一标注。　　薛社普,等[1]指出棉酚从体内排泄缓慢。　　棉酚对人类的抗生育效果达99%[1-2,4]。　　cAMP 含量测定方法见文献[1]。　　（2）图中引用参考文献,按其在全文中出现的次序编号,标注写在图的说明和注释中,图中不应出现引文标注。　　（3）表中引用参考文献,按其在全文中出现的次序编号,在表注中依次标注; 若必须在表中标注,可采用另列一栏并将引文　　序码置于方括号中,以避免与表中其他数字相混淆。　　2.9.2 文后参考文献类型　　根据GB 3469规定，以单字母方式标识以下各种参考文献类型：普通图书-M,会议论文-C,报纸文章-N,期刊文章-J,学位论文-D,报告-R,标准-S,专利-P,汇编-G,参考工具-K,其他-Z。　　对于数据库、计算机程序及电子公告等电子文献类型的参考文献，以双字母作为标志：数据库-DB，计算机程序-CP，电子公告-EB。　　对于非纸张型载体的电子文献，采用双字母表示电子文献载体类型：磁带-MT，磁盘-DK，光盘-CD，联机网络-OL，并以[文献类型标志/载体类型标志]表示包括了文献载体类型的参考文献类型标志。例： [M/CD]—光盘图书；[DB/MT]—磁带数据库；[CP/DK]—磁盘软件；[J/OL]—网上期刊；[DB/OL]—网上数据库；[EB/OL]—网上电子公告。以纸张为载体的传统文献在引做参考文献时不必注明其载体类型。