中国法医学杂志损伤机理

中国法医学杂志损伤机理

法医损伤鉴定时存在的问题与对策分析

【摘 要】 科学鉴定是确保司法工作正常有序、公平、公正进行的关键，法医损伤鉴定在司法活动中的作用越来越重要。鉴定结论能否为被鉴定人信服接受是我们基层法医在实际工作中重要的意义。在实际的法医损伤鉴定时却存在很多问题，损伤程度鉴定意见的出具与被鉴定人心里有明显出入，不被认可，造成了他们对鉴定结论的客观性、真实性的否定，不断要求重新鉴定，造成了司法资源的极大浪费，还对办案秩序造成了一定的影响，更对司法鉴定的公信力造成了严重的影响。本文根据笔者在实际工作时碰到的损伤临床治疗、病历记载对法医损伤鉴定影响以及解决问题的对策等作了详细的分析和系统的阐述。

Abstract scientific identification is key to ensuring the normal and orderly administration of justice, fair and impartial manner, the role of the forensic identification injury in judicial activities is increasingly important. Expert conclusions can be identified as convincing grassroots acceptance of our forensic important significance in practical work. Damage in practical forensic identification Shique many problems, the extent of damage and the expert opinion issued identified a significant discrepancy in his heart, not to be recognized, causing them to identify the objectivity, authenticity negative, repeatedly asked to re-identification, resulting in a tremendous waste of judicial resources, but also for handling the order caused some impact, but also for the credibility of Forensic caused serious influence. Based on the clinical treatment of injuries I encountered in the actual work, medical records elaboration of injury forensic identification and problem solving strategies and so made a detailed analysis of the system.

【关键词】 法医鉴定;问题;对策;研究

Key words forensic identification; problem; countermeasure; research

法医损伤鉴定是以应用临床医学和法医学的理论和技术，研究和解决与法律有关的人体损伤等问题，进行检验并作出伤害程度等的意见和判断，法医损伤鉴定属于临床法医学的范畴。临床法医学和临床医学均属于应用医学，但承担的任务却截然不同。面对损伤，临床医生的任务是通过各种检查确定损伤并给予针对性的治疗，而法医损伤鉴定的任务也是为了对伤者损伤进行明确诊断，但紧接着的是对其损伤进行鉴定，明确有无损伤，是否新鲜及损伤程度。法医损伤鉴定因其自身具有的严谨性，必须做到客观、科学、合法，但伤者在前期就诊过程医疗行为的参与与后续法医据实鉴定的出发点不同，会造成伤者认为损伤鉴定不公平、不公正的问题，需要更进一步的解决。下面对此展开综述。

1.基层法医在鉴定时面对的几个常见问题

1.1医生初诊损伤创口的估算记录，造成记录的创口长度基本上较实际测量值长。某男，28岁，头部被他人用刀砍致头皮(发迹内)裂伤，病历记录为伤口长9cm，伤者来法医门诊时，往往开口第一句话是“我头上缝了十二针，医生记录9公分长，肯定够轻伤了”。所以在做鉴定之前，伤者认为自己的损伤已经足够重，瘢痕足够长以致能达轻伤鉴定标准，而在实际测量中，瘢痕长度为6.5cm，相差较大，你需要大量细致的沟通或许能让被鉴定人接受。因此初诊检查记录是否详细很重要，当人体受到外伤后，第一时间就医，当损伤涉及到刑事或者民事诉讼时，医生在初诊、抢救、清创缝合以及以后的诊疗过程中形成的检查记录，化验单，可以证明就医者是否有损伤及程度。医生在诊疗过程中应细致准确的记录，例如有皮肤软组织损伤清创缝合前，如能详细的对损伤的部位、分布、大小、形状、数目、特征及附着物等进行描述记录，这些将会成为治疗终结鉴定损伤性质、程度及推定致伤物的有力证据。

1.2入院接诊检查记录时存在医学用词不够准确。某女，44岁，因与他人摆摊发生争执，被人用手抓伤右脸部。浅表抓伤，医生在病历中记录面部软组织挫裂创。医学上挫裂创为钝性物体直接挫压造成全层皮肤离断，对照定义，其损伤记录不够准确。

1.3诊断不够科学，一是伤者为达到目的会夸大或者隐匿病情、自伤或者疾病，医生在结合患者主诉后给予认定为外伤所致，比如耳部受到外力作用后听力下降，并检测确有听力障碍的基础上诊断为外伤性耳聋。二是经诊断性治疗及诊疗过程中的复查已经明确诊断，但是病历上未予以修正，给伤者造成错觉，必然存在这样的损伤。某男，39岁，因他人在自己承包鱼塘钓鱼时与他人发生争执，被人用鱼竿敲打头部致头皮裂创，入院CT大脑镰旁见斑点状密度影，境界欠清，印象为少许蛛网膜下腔出血，入院初步诊断为中型颅脑损伤：脑挫伤伴蛛网膜下腔出血、头皮血肿、头部软组织挫裂伤。五天后复查头颅CT示大脑镰旁见斑点状密度影，境界欠清，较前无改变，印象为大脑镰旁高密度影，考虑大脑前动脉影，然出院诊断还是同入院诊断，未予以修正，让伤者一直认为自己被打造成脑挫伤及脑内出血，我室受理该鉴定后，仔细阅其所拍摄的CT片，对其脑挫伤及蛛网膜下腔出血不予认定，根据损伤后造成头皮血肿及头皮裂伤出具轻微伤鉴定意见，伤者依据出院诊断不服鉴定意见，申请重新鉴定，经上级医院专家会诊阅片示颅内未见明显异常。

1.4医疗费用合理性问题存在，包括我室在受理鉴定过程中碰到不少体表软组织挫擦伤、肌 腱 损伤、指骨骨折等相对比较轻微的损伤在就诊过程中花费万元以上，有些是因为医药价格过高，有些则是伤者存在住院便是伤重，住院越久伤情越重的心态。伤者就诊费用增加，会加重其对伤情程度的预期，一旦损伤程度不够轻伤或以上，高额的医疗费用会造成双方扯皮，变成派出所十分棘手的调解难题和伤者对调解的不满，这样也造成了社会上的医疗资源的浪费。

1.5伤者隐匿病情或者之前的外伤史，当事人被打伤后，处于自身经济利益、心理平衡等需要，总存在着把损伤结果夸大，或者把之前的损伤归咎于此次外伤。黄某某，61岁，争执过程中被他人抓伤右眼致角膜表皮剥脱，球结膜下片状出血，经数月治疗恢复后，右眼视力依旧很差，否定之前右眼有疾病及受过外伤为健康视力，最后带至三甲医院眼科专科检查，发现 胬 肉瘢痕，才交代两年前视力下降做过 胬 肉切割手术。

2.解决对策

2.1完善临床医师培养程序和步骤，在培养过程中安排《法医学》课程内容。在国外，如美国、英国、日本、澳大利亚及印度等国家，《法医学》课程被列为高等医学教育必修课，学习医学科的学生没有《法医学》课程的学历与成绩将不允许参加医生资格考试。作为临床外科一线的执业医师，在大学本科培养课程设置中，开设法医学必修课程。或者在进入医院临床轮转实践过程中，增设相应的司法鉴定培训内容。可以增强临床工作责任心，不断提高临床医疗水平，也有利于临床一线外科医生掌握避免易于引发医疗纠纷及事故的常见原因[1]，更精确科学的对受外伤入院病人做出病情诊断，以便就诊人员对自己的损伤有全面正面的认识。根据刑事诉讼法的相关规定，临床医生或从事与医学相关工作的人员作为“专业人员”可以受聘作为鉴定人，就某些专业性较强的医学问题进行鉴定，因此鉴定人具有相应的法医学专业知识，掌握相关的鉴定程序尤为重要。

2.2提高司法鉴定人员的整体素质 因为司法鉴定中会涉及到案件的相关真实信息，因此对法医鉴定人员的要求也较高。随着医学知识的不断更新，法律不断的完善，作为基层法医应及时学习相关医学、法律知识，认真细致审阅被鉴定人就诊材料，对于临床医生就诊记录的内容应认真核实，对于前后检查报告单等材料应对比确定是否存在损伤，是否与外伤有关等。对于挫伤、擦伤、创口、瘢痕认真分别，细致测量，对于临界标准的损伤，应严格依照法律从旧兼从轻原则，鉴定就轻不就重。遇到疑难损伤，应积极寻求医学专家和上级部门的帮助。确定损伤程度时应严格对照新颁布的《人体损伤程度鉴定标准》，做到有伤必有度、有度有依据。

2.3现行医疗就诊已经开展实名就医制度。只是在就诊时往往会存在只询问患者的姓名，而不对其身份信息进行确认的情况，这会造成部分冒名顶替现象的.出现，对正常的办案造成了很大的影响。通过实行实名就医制度，医生在诊疗中尽可能的核实完善患者信息，减少冒名顶替现象的出现，杜绝隐匿伤病情可能[2]。作为基层法医，在工作中遇到被鉴定人可能存在此次损伤前已经受到过外伤或者交通事故的情况应积极了解事情经过，通过平台查证当时的交通事故出警记录，或者通过问询被鉴定人邻居等生活关系较近的人去核实。当然，医院众多，不可能跑遍所有医院翻查被鉴定人就诊档案，但是对于已经反映的就诊记录应至医院认真核实，避免被鉴定人隐匿伤情对鉴定结论造成人为影响。

2.4派出所出警民警在处理涉及到人民群众的人身伤害警情时，一是应及时用照相机记录或警务通摄像仪进行录像，保存纠纷双方受伤时或者伤后人身状况的第一手资料，既为后期法医鉴定提供了全面的资料，也杜绝了被鉴定人夸大伤情和自伤等诈伤可能。二是及时处理安抚伤者情绪，说明纠纷处理流程，适时的调解纠纷和办理案件，避免医疗费用不合理。

2.4规范鉴定的程序，作为基层法医，在一些人身损伤程度鉴定受理前应及时介入，了解受伤经过，对体表损伤予以印证，在一些体表的挫伤、擦伤、划伤、创口消失前予以照相记录，保存损伤后的原始资料，指导完善各项医学检查，以便能及时明确诊断，对受理鉴定及时准确的完成鉴定打下基础。

3.小结

在实践中，临床治疗和治疗终结后的伤情司法鉴定是一脉相承的，只有处于其中每一步骤的实践者都严格按照自己的程序，实事求是。临床医生为我们有效的保全医学证据，进行科学的疾病诊断，患者才能对自己的损伤有全面正确的认识，然后我们司法鉴定人员依据客观的损伤记录检查，出具科学的司法鉴定意见，为纠纷当事人双方所认可和接受。因此，必须建立更加完善的临床医师培训制度，有效的保全医学证据，进行科学的疾病诊断，提升鉴定工作者的综合素质、规范鉴定程序，落实鉴定错鉴追究，使法医鉴定工作能够朝着规范化的方向发展，促进法医鉴定结论的公正性、客观性，突出其在各类案件中的重要作用，更好的为和谐法制社会构建贡献力量。

参考文献：

[1]王保捷，丁梅.高等医学教育《法医学》课程设置的意义.中国法医学杂志.2013，28(2)：175.

[2]李书芳.法医鉴定“多”、“重”、“错”的原因与对策――以伤害犯罪案件为例.广西警官高等专科学校学报.2011，3(3)：21.

有人说溺水而亡的人，男人面朝下，女人面朝上，有什么科学依据？

男俯女仰

一直以来，都有一个传言：溺水而亡的人，男性会面朝下，而女性则是面朝上。这种说法实际上并不是空口无凭的，而是有人做过细致的分析的。而且从古到今，各种解释的版本非常多。

比如：在中国古代著名法医宋慈有，他也被认为是法医的鼻祖，他有一本著名的《洗冤集录》，在这本书中的《卷之三·二十一章·溺死》记载着许多关于溺亡的鉴别方式，其中就记载这这样的一段话：

若生前溺水尸首，男仆卧、女仰卧。

这句话讲的就是溺水而亡的人的姿势，男性是面朝下，女性是面朝上。

宋慈的这个论述大概是他在多年的法医生涯中总结下来的经验，还是具有参考意义的。

除了宋慈，现代医学也有相关的阐述，主要是集中在人体结构上。尤其是男性与女性的盆骨形状、大小是不同的，导致重心会随着骨盆的形状略有不同。人在直立的时候，骨盆口平面与水平面是呈现一定的角度，这也被称为骨盆倾斜度。

而女性的骨盆倾斜度比男性的骨盆倾斜角度会更大一些，这使得女性的重心相比男性更偏向后方。不过，如果尸体上挂上了重物，那么情况就会发生变化，但关键还是看重心在哪里。

传统的看法基本上都聚焦在人体的身体结构对重心的影响，尤其是探讨男性和女性身体结构不同，导致重心发生了些微的变化。那么这个看法到底对不对呢？

理论 vs 现实

其实传统的看法一点毛病没有，理论看起来很完美。但我们知道实践才是检验真理的唯一标准。

曾经就有人对浮尸的情况进行统计，我找到了两篇相关的论文都有相关数据的呈现。首先，第一篇是《751具浮尸俯仰姿势观察分析》。

在这篇论文中，作者统计了751具浮尸，其中有男性，也女性，并统计了这些尸体有多少是面朝上，有多少是面朝下的。

通过数据，我们可以得出：

男性浮尸面朝下的有411，占比79.8%；面朝上的有104，占比20.2%。

女性浮尸面朝下的有182，占比79.1%；面朝上的有48，占比20.8%。

也就是说，无论是男性还是女性，都是面朝下的多，而且比例接近于80%，面朝下的比例是20%左右，并没有因为性别不同，而呈现出不同。也就是说，和性别压根没有关系。

除了这篇论文，还有一篇名为《236例水浮尸俯仰机理分析》。

这篇论文章，作者对236具浮尸进行的统计分析，也对男性和女性分别进行了统计。

我们可以把三年的数据进行合并来看，通过数据，我们可以知道，

男性浮尸面朝下的有119，占比81.0%；面朝上的有28，占比19.0%。

女性浮尸面朝下的有71，占比79.8%；面朝上的有18，占比20.2%。

从这组数据我们可以看出，男性和女性的差别并不大，“面朝下”和“面朝上”都是接近于8:2，并没有呈现出性别区别。

因此，目前统计到的数据来看，浮尸的“俯仰姿势”和性别关系不大。两组数据能得到的共性是：“面朝下”的情况与“面朝上”的情况大概是八二开，也就是“面朝下”的情况更为普遍一些。那这背后有什么原理吗？

就有研究人员发现，传统的看法是有问题的。这个问题来自于“太理想化”，有点类似于直接把实验室里解剖的那种尸体扔水里的情况，也就是假设了“不挣扎”。但是如果我们考虑到现实情况，就会发现人在溺水时，由于求生欲以及对死的恐惧，就会不断地剧烈挣扎。

人一旦挣扎，由于人体是有有机的整体，就会带动着整个身体都在动。由于连接整个人体各部位的是颈部、肩关节、髋关节、上下肢的肘关节、腕关节、膝关节、踝关节。当这些关键部位弯曲时，大多都是像腹部这一侧的，所以人体一旦剧烈的挣扎，肢体都是向着腹部侧弯曲的。因此，人体的重心实际上是要靠向腹部侧的，这就使得人都是俯卧的，也就是面朝下的。

除非是溺水死后，尸体悬浮在水中发生了尸体痉挛，此时的尸体就会呈现角弓反张状，重心就会靠背部这一侧，那尸体最终就会是仰卧，也就是面朝上，只不过尸体痉挛的概率相对较小，所以这种情况就出现的相对较少一些。

因此，这才会出现无论是男性还是女性，浮尸大多都是面朝下的。传统的说法其实是少考虑了“人会挣扎”这个要素。

参考文献：

[1]祝家镇，法医病理学，第二版，北京：人民卫生 出版社，2000.4(259)．

[2]林彬，许操，李旭，236例水浮尸俯仰机理分析[J]，广东省公安科技，2012(2)：22-23.

[3]李学军，郭向东等，232 例水中尸体检验分析[J]，中国法医学杂志，2002，17(5)：298-307.

[4]李旭，龚茂华，林彬，751具浮尸俯仰姿势观察分析[J]，中国法医学杂志， 2017(32)：82-84

DNA指纹的应用及相应的案例

玉米“DNA指纹”鉴定应用前景广阔
农博网2005年1月26日讯 山东某公司从东北某地买了几火车皮玉米种子,经北京市农林科学院玉米研究中心检测,结果令人大吃一惊,原来这是报废的种子,如果播到地里,轻则减产,重则颗粒无收,农民还将白白赔上施肥、浇水等人力、财力。所幸的是,该公司根据玉米“DNA指纹”鉴定结果,及时进行了妥善处理,避免了巨大的经济损失。

玉米“DNA指纹”鉴定作为一项新技术,在应用中正发挥出越来越大的作用。

玉米打假维权新途径

当前出现了两种令种子研发、生产、使用者头疼的现象,一是假种子屡禁不止,主要使广大农民蒙受巨大损失。二是窃取良种,非法进行生产、销售,主要侵害着良种研发、生产者的利益。某一国审玉米品种由于没能及时进行品种权保护,被大面积侵权,已无计可施。

究其原因,首先是玉米品种鉴别难度很大,凭肉眼,不仅农民,连专家也分不清。其次,暴利使得违法者铤而走险。北京市农林科学院玉米研究中心主任赵久然博士介绍,玉米种子生产利润很高 每斤种子按四五元、利润按2元算,每亩利润可达10元,若种植面积上百万亩,利润可达上千万元。而以次充好、以假充真的利润就更高。至于侵权者,不难从田间得到良种,仅逃避的种子转让费就高达几十万、上百万元。

随着玉米“DNA指纹”鉴定技术日益成熟,越来越多的人们通过这一新途径辨识种子真实身份,用以打假维权。该中心承担玉米“DNA指纹”司法鉴定任务已四五年,近两年客户猛增,至今承担此类侵权案鉴定已达40多起。同时,该中心提供大量鉴别假冒伪劣的服务,几年来为全国科研、生产、经营、管理及执法部门提供种子纯度检测、真伪鉴定已达5000多样次。

作为“超级玉米种质创新及DNA指纹库构建”项目主持人,赵久然博士指出,如果“超级玉米”研究成功,每年种植4000万亩,我国每年玉米产量就能增加60亿公斤,相当于新增1500万亩土地。但需要玉米“DNA指纹”鉴定帮助打假、推广良种,这一效益才能真正实现。

“指纹”鉴定市场需求大

玉米“DNA指纹”之所以称为“指纹”,是因其像人类指纹可以准确区分不同的人一样,也具有准确的鉴别能力,可以准确区别不同品种的玉米。

玉米“DNA指纹”长在玉米哪个部位,什么“模样” 赵久然说,DNA存在于各种生物体的每个细胞内,存在于玉米的根、茎、叶、花、果实各处。不同的玉米品种具有不同的DNA,但肉眼是看不到的。在北京市农林科学院玉米研究中心实验室内,记者看到,科研人员取出玉米种子内乳白色的胚,加入试剂,制成玉米DNA溶液,运用一系列生物分子检测技术,通过数量扩增、电泳、染色等一系列环节,放大的呈带状的千姿百态的玉米“DNA指纹”图谱在玻璃板上一一呈现。

近年来到该中心鉴定玉米“DNA指纹”的客户,几乎遍及全国所有玉米主产区,还有国际大种子公司。赵久然认为,随着该项技术的普及推广,其应用前景将很可观。

不仅限于维权、打假两方面,玉米“DNA指纹”鉴定的应用领域还很多,这体现在该中心承担完成的多项国家、地方项目上。比如,受农业部种子质量监督检测中心委托,确定了我国200多个主要杂交种的纯度鉴定专用“DNA指纹”;受农业部有关主管部门委托,负责每年200多个参加国家区试玉米品种的监测;受国家植物新品种保护办公室委托,负责玉米品种特异性DNA标准制定和检测;受科技部知识产权事务中心委托,承担品种真实性鉴定等。

“指纹”库不可或缺

面对迅速扩大的市场需求,提供玉米“DNA指纹”鉴定的科研人员也有苦恼。在这项研究中达到国际领先水平的北京市农林科学院介绍,目前全国推广使用的国审 适用生态区较广 品种有100多种,省审 在省内推广使用 品种上千种。而他们目前只掌握500多种样本。苦于没有“指纹”库,遇到没接触过的品种,只能增加检测位点,多时高达四五十个,既重复浪费,也影响效率。有了“指纹”库,就能掌握“指纹”概率,只检测一二十个位点即可。构建玉米“DNA指纹”库成为当务之急。

适应这一需要,作为由北京市科委倡议发起的“北京农业育种基础研究创新平台”首批启动项目,全国第一个玉米“DNA指纹”库日前在北京市农林科学院开始构建。该平台由北京多家部门与国家有关部委共建,协作攻关,力度很大。

专家认为,该“指纹”库在玉米种子和品种的纯度及真实性鉴定、新品种测试、品种权登记保护、品种质量监控、新品种侵权司法鉴定等方面具有广阔的应用前景;对理清我国玉米种质的血缘关系、解决品种多、乱、杂问题、种质创新等有重要意义;将在玉米“DNA指纹”鉴定应用中发挥重大的推动作用。



DNA指纹技术分析畜禽亲缘关系的原理及应用


DNA指纹技术是分子生物学各种新兴技术中的一种，目前已被广泛应用于法医学、疾病诊断、肿瘤研究等领域。本文就DNA指纹技术的建立、发展及其应用作一综述。

1 DNA指纹图的建立及发展

近百年来的研究认为，任何遗传分析都是以遗传标志为基础的，而任何一个遗传标志的价值又在于其变异 性(即多态性)的大小。有关遗传多态性的研究对促进人类学、遗传学、免疫学以及法医学的发展， 以及对阐明某些疾病的发病机理乃至协助诊断等方面都起了十分重要的作用。但以往的研究都是利用各种外部表现型、生理缺陷型、同工酶、多态蛋白等作为遗传标志，用间接分析来推论相应的遗传基因。

70年代末，限制性内切酶和重组体DNA技术的出现以及分子生物学的飞速发展，使人们对遗传标志的研究转向DNA分子本身。由于各种遗传信息都蕴藏在DNA分子上，生物个体间的差异在本质上是DNA分子的差异，因此DNA被认为是最可靠的遗传标志。某些DNA序列的差异可通过限制性酶切片段长度的改变来反映，此即限制性片段长度多态性(restriction fragment length polymorphisms,RFLP),其产生是由于点突变、DNA重排、插入或缺失引起的〔1〕。随着对RFLP研究的深入，人们发现了基因组中最有变异性的一类序列——高变异DNA序列，使DNA遗传标志的发展和应用得到了一次飞跃。
1980年，Wyman和White描述了第一个多等位性的具有高度多态性的人类DNA标志。不久，在胰岛素基因(Insulingene)的5′端区域、致癌基因(C-Haras I Oncogene)的3′端分别发现了相同的高度可变的标志(hypervariable marker)。在α-球蛋白(α-globin)基因群周围还发现了其它三个标志〔2〕。1982年，Bell等〔3〕证实：这些高度多态性区域串联着重复的短序列单位，重复单位数目的差异导致了这种高度的可变性，由于这些结构特征，人们称这些区域为小卫星(minisatellite)或高度可变区域(hypervariable)或可变数目的串联重复(variable number of tandem repeats)。
1985年，Jeffreys 等〔4〕用肌红蛋白基因第一内含子中的串联重复序列(重复单位含33bp)作探针，从人的基因文库中筛选出8个含有串联重复序列(小卫星)的重组克隆。序列分析表明，这8个小卫星重复单位的长度和序列不完全相同，但都有相同的核心序列(core sequence)即GGCCAGGA/GGG。他们先后用两个多核心小卫星(poly coreminisate
-llite)33.6和33.15探针进行southern杂交，在低严谨条件下杂交得到了包含10多条带的杂交图谱，不同个体杂交图谱上带的位置就象人的指纹一样千差万别，Jeffrey称之为DNA指纹(DNA fingerprint)〔5〕，又名遗传指纹(genetic fingerprint)。
RFLP DNA指纹分析技术由于方法繁杂、周期长、实验条件高等缺陷而无法大范围推广。1990年，Williams等〔6〕首次报道了AP-PCR技术，Welsh和McCelland〔7〕亦独立地进行了这方面的工作，从而使DNA指纹技术应用更加广泛。AP-PCR技术是采用随意设计的1个或2个引物，对模板DNA进行PCR扩增，一般先是在低严格条件，即在高Mg2+浓度(大于传统PCR Mg2+浓度1.5mmol/L)、较低退火温度(36℃～50℃)下进行1～6个循环的PCR扩增，随后在严格条件下进行PCR扩增，产物经2%琼脂糖凝胶电泳或6%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，可得到DNA指纹图谱。其基本原理是：在低严格复性条件下，引物与模板DNA非完全互补序列形成错配，错配引物在DNA聚合酶作用下沿模板链延伸，合成新链，当在一定距离内模板DNA另一单链也发生引物错配时，即可对两错配引物间的DNA进行扩增。但是此种错配并非随机发生，引物和模板间，特别是在引物3′端必须存在一定的互补序列，即可产生不同的扩增片段或组合，通过DNA指纹图谱，可得到配对DNA样品中的差异片段，用于克隆、测序、染色体定位和基因片段的生物学功能研究。
我国杨建厂等〔8〕利用PCR的原理成功地建立了一种全新的DNA指纹检测技术，称之为随机引物PCR人DNA指纹检测技术(arbitrarily primed PCR human DNA fingerprinting,APHDP)，此外还开发出处理DNA指纹数据应用软件，应用于个人识别、遗传素质与疾病的相关特征研究等。

2 DNA指纹技术所用的探针

自DNA指纹技术建立以来，这一技术迅速在动植物的进化关系、亲缘关系分析以及法医学方面得到广泛应用。也正是由于DNA指纹技术在核酸分析中显示出了强大的生命力，因而许多学者围绕此技术所用的探针作了大量的工作，除Jeffrey等〔5〕的探针外，用人工化学合成或从生物组织中提取后再扩增的办法生产出了一批高水平的探针。迄今，在DNA指纹技术中所用的探针大概有probe33.15、33.6〔5〕、bacteriophage MB〔9〕、pig repetitire clone p83、PGB 725、poly(GT) containing 18.1、(GTG)5/(CAC)5〔10，11〕、(CAC/TA)4及(GT)12等。同时，在探针的标志上也有了很大的发展，根据它们的结构可大致分为小卫星探针和简单重复序列探针，简单重复序列包括微卫星探针(microsatellite probe)和寡聚核苷酸探针。小卫星探针的核心序列为33bp，常定位在人常染色体前的末端(proterminal)区域，微卫星探针则在10～20bp之间，而寡聚核苷酸探针在10bp以下，普遍散布在人类整条染色体上，或者在基因间区域或者位于内含子内。
1988年，我国伍新尧等〔12〕根据DNA指纹是人基因组中重复序列的RFLP的原理和人与鼠的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因cDNA同源序列性高于90%的事实，选用鼠MBP cDNA3′端的一段序列(非表达区高度重序列，与人基因组中该类重复序列几乎完全同源)，长度为0.81kb的片段作探针，检测用HaeⅢ酶解的人DNA限制性片段(RF)，在人群中可分出22条谱带，受检 的30例无血缘关系的个体之间没有两个人的谱带是完全相同的，显示这一方法的高度个体特异性，这是国内首次用自已的力量找到DNA指纹的探针。

3 DNA指纹的应用3.1 法医学方面 同以往的血型测定法相比，DNA指纹技术在法医学领域上具有无可比拟的优越性。已成为鉴定犯罪、亲子鉴定和确定个体间亲缘关系的工具〔5，13〕。随后，国内学者李伯龄〔14〕、姜先华〔15〕、伍新尧等〔12〕也先后对此项技术进行了研究，并应用于实际案件的鉴定中，解决了过去无法解决的疑难案例，如微量血痕、部分腐败的碎尸块的个人认定等。
3.2 在动植物科学中的应用
3.2.1 生物种群学研究 利用DNA指纹图可以估算连锁不平衡，比较等位基因的频率，还能估计不同个体之间的重组率，在种群学研究上有助于建立某一个体在种群中的地位和关系，特别是对真菌的种群研究，有很多真菌可以通过有性和无性的方式繁殖，但是何时以何种方式繁殖，程度如何，并不清楚，而利用DNA指纹图就能区分以有性和无性方式产生的后代，并能确定某一区域真菌的自然分布〔1，16〕。
3.2.2 测定物种之间的遗传距离、物种分类鉴定 Jeffreys等〔5〕认为在一个群体的不同成员间拷贝数的串联重复序列(VNTR)由于多态性程度高，在遗传分析中尤其适合作为多态性标志，简单重复的不稳定性可导致VNTR长度的迅速变化，根据家族中或育种群体中VNTR的分离重组频率，可以测定出遗传距离，可用统计学公式确定个体间的亲缘关系：D=2Nab/(Na+Nb),，D值越大，亲缘关系越近，遗传距离就越小；D值越小，亲缘关系越远，遗传距离就越大。为此，运用DNA指纹技术可检测不同物种、同种及同种不同个体的亲缘关系，用于物种分类鉴定，也可用于杂交后代亲本决定，杂交后代群体分开，检测近等基因系(或同类系)种的多态性，并对检测基因进行定位。Welsh等〔7〕对布氏疏螺旋体菌株的DNA指纹进行分析，发现这种lyme病的病原菌实际上是由三个不同的种群组成。罗超权等〔12〕运用AP-PCR鉴定弓形虫虫株，在国内开创了运用DNA指纹技术作生物分类的先例。
3.3 在流行病学方面的运用 由于DNA指纹具有以下几个特点：①能反映基因组的变异性；②具有高度的变异性；③具有简单的稳定的遗传性；④DNA指纹谱具有体细胞稳定性。所以，它同一般的流行病学方法相比较而言，具有无比的优越性，使其成为流行病调查的一种有效工具。Jan DA等〔17〕，Denise Chevrel-Dellagi等〔18〕运用IS6110序列作探针对结核病分支杆菌株进行DNA指纹分析，调查国际间结核病的种型、分析流行情况，改进了控制结核病的方法。而ZhenHua Yang等〔19〕从67个病人中分离出结核病分支杆菌株进行DNA指纹分析，发现分离到PTBN12型时易查明流行环节，从而为快速进行疾病控制提供了一个有力证据。在我国，童笑梅等〔20〕采用随机扩增多态DNA指纹图技术对医院内感染的14例新生儿进行病原流行病学分析，发现患儿体内携带的与医务人员鼻中携带的华纳葡萄球菌菌株的DNA指纹图完全一致，从而证明此次感染的病原菌为华纳葡萄球菌，传染源是携带病菌的医务人员。郭永建等〔21〕在6个月内对121名产科新生儿中的30名检出的31株铜绿假单胞菌进行RAPD指纹图谱分析和血清学分型，结果表明，铜绿假单胞菌在产科新生儿中暴发流行，0∶6/R∶1型为暴发流行性菌株，对医院感染病原菌分型、精确确定传染源、阻断传播途径、控制和预防医院感染具有重要的指导意义。
3.4 疾病诊断及治疗 鉴于DNA指纹所具有的上述特点，故DNA指纹广泛应用于一些疾病的诊断及治疗。Morral〔22〕等发现CF基因9号外显子侧翼含有一小卫星区，且此等位基因2.6带常与△F508连锁，相伴率为50.6%、41.6%，△F508是最主要的致病突变，可疑患者电泳图只要发现2.6等位基因，就可对此病进行初步诊断。现已在Wilson病、外周神经纤维瘤、成人多束肾、多巴性肌紧张、Frecbreich共济失调、Kallmunm综合征性连锁、视网膜病等基因内或旁侧发现有高度的小卫星区域，从而可进行基因诊断。Okamoto R〔23〕用DNA指纹法预测慢性粒cell性白血病骨髓移植术后复发，取得了成功。
3.5 肿瘤的研究 肿瘤是多因素、多阶段的变化过程，病因复杂、变化多样，但归根到底还是在DNA的变化上。一般说来，癌组织、转移灶与正常组织或外周血细胞DNA指纹有差别，常见的是某条带或几条带的缺失，某一条或某几条带密度降低，或者癌组织中出现新的带。Thein等〔24〕用33.6和33.15为探针研究患者DNA指纹谱变化，发现胃肠肿瘤患者癌组织DNA指纹谱全有改变，并认为体细胞突 变还有种属特异性。刘霜等〔25〕应用RAPD(随机扩增多态性DNA)分析技术对6例肝癌患者的癌组织与非癌组织进行分析，发现所有肝癌组织基因组DNA的RAPD指纹图谱均存在差异，其中3例配对肝癌基因组中均存在一相同的0.9Kb的随机扩增片段。杨建厂等〔8〕用APHDFF技术对28例确诊为鼻咽癌病人血DNA指纹图的检测，发现有3条DNA片段出现的频率明显低于健康人群。王黛等〔26〕用LE11.8、MYO和Mb探针，经Southern杂交法检测12例儿童急性粒cell白血病患者的外周血或骨髓细胞的基因重排，结果发现初始或复发与完全缓解时的DNA指纹图相比，谱带有增加或减少，从而认为急性粒细胞白血病患儿的白血病细胞存在基因重排。

林文珍(广西医科大学生化教研室 南宁市 530021)
舒雨雁(广西医科大学生化教研室 南宁市 530021)

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北京法大法庭科学技术鉴定研究所地 址： 北京市海淀区后屯南路26号。

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该研究所一直秉承“科学鉴定、公正服务”的宗旨开展司法鉴定业务，目标是把法大法庭科学技术鉴定研究所建成具有权威性、综合性、规模化的全国性大型司法鉴定机构，为首都和全国提供高质量的司法鉴定服务。

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