移液管毕业论文
移液管毕业论文
酸的相对分子质量的测定
一、实验题目:设计一个实验以准确测定某固体二元酸的相对分子质量(范围在80~100)
二、实验目的:考查酸碱中和滴定等基本操作。
三、提供的试剂:
1、相对分子质量为80~100的纯固体二元酸
2、0.40 mol/L 的NaOH溶液
【学生撰写的实验报告】
一、实验药品
除了题目上已经提供的某未知二元酸和0.40 mol/L 的NaOH外,还需要酚酞作指示剂。
二、实验仪器:
1、碱式滴定管(25毫升) 2、移液管(10毫升)或酸式滴定管
3、锥形瓶 4、容量瓶(100毫升)
三、实验过程
1、预测酸、碱用量
(1)假设酸的相对分子质量是90,滴定时所用NaOH 的体积是20mL则
碱的物质的量为:0.40 mol/L×0.02 L =0.008 mol
因为酸是二元酸,则酸与碱的系数比为1:2 即
X + 2 NaOH
1 2
Y 0.008 Y=0.004 mol
酸的质量为0.004 mol×90 mol/L =0.36 g
(2)称取3.6克酸并将其配置成100毫升溶液(用100毫升容量瓶)
2、滴定过程
(1)用移液管或酸式滴定管移取10毫升酸溶液,并转移到锥形瓶中,滴几滴酚酞指示剂,溶液应为无色。
(2)用0.40mol/L 的 NaOH 滴定酸直至溶液颜色变红。
(3)重复1,2步骤以确保实验的准确性。
四、数据记录及处理
NaOH的体积(ml ±0.05 ml) 1 2 3
滴定后读数 A1 B1 C1
滴定前读数 A2 B2 C2
所用碱的体积 A1-A2 B1-B2 C1-C2
平均所用碱体积:V毫升
计算过程:
X + 2NaOH
1 2
Z (V/1000)×0.400
Z=(V/1000)×0.400/2=(V/1000)×0.200
酸的相对分子质量为0.48/Z=0.48/[(V/1000)×0.200]
谁帮我找个 水硬度的论文啊
中华硕博网核心提示: 我国《生活用水卫生标准》中规定,水的总硬度不得超过25度。我国地域辽阔,各地水质软硬度程度不一,一般饮用水的适宜硬度以10~20度为
我国《生活用水卫生标准》中规定,水的总硬度不得超过25度。我国地域辽阔,各地水质软硬度程度不一,一般饮用水的适宜硬度以10~20度为宜。目前,在实验检测中水的硬度测定采用EDTA配位滴定法[1,2]。EDTA配位滴定法是一种普遍使用的测定水的硬度的方法。它是在一定条件下,以铬黑T为指示剂,NH3·H2O-NH4Cl为缓冲溶液,EDTA与钙、镁离子形成稳定的配合物,从而测定水中钙、镁总量。该方法简便、快速,用于不同水的硬度测定,结果满足。
1材料
1.1仪器移液管,滴定管,容量瓶,AT-261型电子天平以及其他常规玻璃仪器。
1.2试剂EDTA标准溶液,铬黑T,三乙醇胺,氧化锌,稀盐酸,甲基红的乙醇溶液,pH约为10的NH3·H2O-NH4Cl缓冲溶液,无水乙醇,高纯度的蒸馏水。
2方法与结果
2.1原理硬度的分析采用以铬黑T为指示剂的EDTA方法,其计量以1L水含有10mg氧化钙称为1个硬度
Na2[H2Y]+Ca2+→Ca[H2Y]+2Na+
EDTA二钠EDTA钙配合物
(无色)(无色)
EDTA(乙二胺四乙酸)的二钠盐在用氨水—氯化铵缓冲液控制pH值为10的条件下,能与水中钙盐生成稳定的无色可溶性的配合物。铬黑T指示剂与水中钙盐结合形成酒红色的铬黑T钙配合物。
Ca2++H2T→CaT+2H+
铬黑T铬黑T钙
(蓝色)(酒红色)
由于EDTA与钙配合能力较铬黑T为强,故EDTA把溶液中钙配合完毕后,再将铬黑T钙配合物中的钙配合过去,使溶液由酒红色变为纯蓝色即显示终点。
2H++2Na2[H2Y]+CaT+Ca2+→2Ca[H2Y]+H2T+4Na+
(无色)(酒红色)(无色)(蓝色)
2.2试剂配制
2.2.1NH3·H2O-NH4Cl缓冲溶液(pH≈10):称取13.5g氯化铵,溶于水,加88ml氨水,用水定容250ml。
2.2.2铬黑T指标剂将铬黑T0.2g溶于15ml三乙醇胺,溶解后加5ml无水乙醇。
2.2.3近似0.05mol·L-1EDTA标准溶液配制称取乙二胺四乙酸二钠9.5g,加适量水加热溶解,配成500ml水溶液,摇匀。
2.2.4EDTA标准溶液标定精密称取已在800℃灼烧恒重ZnO约0.1g,加稀盐酸溶解,加蒸馏水稀释,加甲基红,用氨试液调溶液呈微黄色,加NH3·H2O-NH4Cl缓冲溶液和铬黑T指标剂适量,用配好的EDTA溶液滴定至溶液从紫红色变为纯蓝色。根据下列公式可计算其浓度。结果见表1。
CEDTA=WZnO×1000VEDTA×MZnO
表1EDTA标准溶液的浓度
2.2.50.0102mol·L-1EDTA标准溶液配制精密吸取以上配制的EDTA标准溶液20ml于100ml容量瓶中,稀释至刻度。
2.3操作精取100ml水样,置于250ml三角瓶中,加入5mlNH3·H2O-NH4Cl缓冲溶液,摇匀,再加入铬黑T指示剂适量,用EDTA标准溶液滴定至溶液由酒红色变为纯蓝色,记录EDTA标准溶液用量。
2.4计算
总硬度=C×V×56.08V水×10×1000
上式中:CEDTA—EDTA标准溶液的浓度近似(0.01mol·L-1);VEDTA—滴定消耗EDTA标准溶液的体积(ml);V水—水样体积(100ml);56.08—CaO的摩尔质量(g·mol);10—水的硬度。×1000—将水样体积换算为1L。结果见表2。
表2不同来源水的硬度
3讨论
滴定时若出现指示剂封闭现象,则可能会有干扰离子。可加入适当隐蔽剂,重新滴定。
水样若呈酸性或碱性应先进行中和滴定,使其呈中性;若含有较多碳酸根,应先煮沸驱除CO2,然后进行滴定。若水样浑浊或加入缓冲溶液后生成氢氧化物沉淀,需过滤除去沉淀,所用滤纸应先用水样充分洗涤,以免滤纸带入钙、镁盐影响测定结果。
配位反应进行较慢,滴定速度不宜太快,临近终点时,更应缓慢滴定并充分摇匀。
参考文献
[1]孙芹.两种铬黑T指示剂在水硬度测定中的比较[J].沈阳医学,2003,23(2):82.[2]陈西伟.酿造工艺水硬度的测定[J].安徽教育学院学报,2003,21(5):48.
怎么写开题报告
怎么写开题报告呢?
首先要把在准备工作当中搜集的资料整理出来,包括课题名称、课题内容、课题的理论依据、参加人员、组织安排和分工、大概需要的时间、经费的估算等等。
第一是标题的拟定。课题在准备工作中已经确立了,所以开题报告的标题是不成问题的,把你研究的课题直接写上就行了。比如我曾指导过一组同学对伦教的文化诸如“伦教糕”、伦教木工机械、伦教文物等进行研究,拟定的标题就是“伦教文化研究”。
第二就是内容的撰写。开题报告的主要内容包括以下几个部分:
一、课题研究的背景。 所谓课题背景,主要指的是为什么要对这个课题进行研究,所以有的课题干脆把这一部分称为“问题的提出”,意思就是说为什么要提出这个问题,或者说提出这个课题。比如我曾指导的一个课题“伦教文化研究”,背景说明部分里就是说在改革开放的浪潮中,伦教作为珠江三角洲一角,在经济迅速发展的同时,她的文化发展怎么样,有哪些成就,对居民有什么影响,有哪些还要改进的。当然背景所叙述的内容还有很多,既可以是社会背景,也可以是自然背景。关键在于我们所确定的课题是什么。
二、课题研究的内容。课题研究的内容,顾名思义,就是我们的课题要研究的是什么。比如我校黄姝老师的指导的课题“佛山新八景”,课题研究的内容就是:“以佛山新八景为重点,考察佛山历史文化沉淀的昨天、今天、明天,结合佛山经济发展的趋势,拟定开发具有新佛山、新八景、新气象的文化旅游的可行性报告及开发方案。”
三、课题研究的目的和意义。
课题研究的目的,应该叙述自己在这次研究中想要达到的境地或想要得到的结果。比如我校叶少珍老师指导的“重走长征路”研究课题,在其研究目标一栏中就是这样叙述的:
1、通过再现长征历程,追忆红军战士的丰功伟绩,对长征概况、长征途中遇到了哪些艰难险阻、什么是长征精神,有更深刻的了解和感悟。
2、通过小组同学间的分工合作、交流、展示、解说,培养合作参与精神和自我展示能力。
3、通过本次活动,使同学的信息技术得到提高,进一步提高信息素养。
四、课题研究的方法。
在“课题研究的方法”这一部分,应该提出本课题组关于解决本课题问题的门路或者说程序等。一般来说,研究性学习的课题研究方法有:实地调查考察法(通过组织学生到所研究的处所实地调查,从而得出结论的方法)、问卷调查法(根据本课题的情况和自己要了解的内容设置一些问题,以问卷的形式向相关人员调查的方法)、人物采访法(直接向有关人员采访,以掌握第一手材料的方法)、文献法(通过查阅各类资料、图表等,分析、比较得出结论)等等。在课题研究中,应该根据自己课题的实际情况提出相关的课题研究方法,不一定面面俱到,只要实用就行。
五、课题研究的步骤。
课题研究的步骤,当然就是说本课题准备通过哪几步程序来达到研究的目的。所以在这一部分里应该着重思考的问题就是自己的课题大概准备分几步来完成。一般来说课题研究的基本步骤不外乎是以下几个方面:准备阶段、查阅资料阶段、实地考察阶段、问卷调查阶段、采访阶段、资料的分析整理阶段、对本课题的总结与反思阶段等。
六、课题参与人员及组织分工。
这属于对本课题研究的管理范畴,但也不可忽视。因为管理不到位,学生不能明确自己的职责,有时就会偷懒或者互相推诿,有时就会做重复劳动。因此课题参与人员的组织分工是不可少的。最好是把所有的参与研究的学生分成几个小组,每个小组通过民主选举的方式推选出小组长,由小组长负责本小组的任务分派和落实。然后根据本课题的情况,把相关的研究任务分割成几大部分,一个小组负责一个部分。最后由小组长组织人员汇总和整理。
七、课题的经费估算。
一个课题要开展,必然需要一些经费来启动,所以最后还应该大概地估算一下本课题所需要 的资金是多少,比如搜集资料需要多少钱,实地调查的外出经费,问卷调查的印刷和分发的费用,课题组所要占用的场地费,有些课题还需要购买一些相关的材料,结题报告等资料的印刷费等等。所谓“大军未动,粮草先行”,没有足够的资金作后盾,课题研究势必举步维艰,捉襟见肘,甚至于半途而废。因此,课题的经费也必须在开题之初就估算好,未雨绸缪,才能真正把本课题的研究做到最好。
浅谈酶联免疫吸附试验实验教学思考的分析论文
浅谈酶联免疫吸附试验实验教学思考的分析论文
【摘要】 酶联免疫吸附试验是广泛应用于临床检验诊断的免疫学检验技术,实验教学中采用该技术检测“乙肝两对半”。为适应中职生教育人才培养模式的教学改革,使学生符合具有“理论知识适度、技术应用能力强”的要求,我们对实验教学内容和方法进行改革,从适用性角度选题,通过实验操作考核,采取以考促学的手段,加强酶联免疫吸附试验的训练力度,提高学生实验操作能力,培养学生独立工作的能力。
【关键词】 酶联免疫吸附试验;免疫学检验;实验;考核
酶联免疫吸附试验(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)是广泛应用于临床检验诊断的免疫学检验技术。该技术集基本理论、基本技能为一体,能使学生能对前期所学的理论知识及技能进一步加强和提高,是一个能为学生进人临床实习打好基础的系统实训。目前该技术的临床检测多采用商品化的ELISA试剂盒,实验步骤较少,操作简单。然而,参与反应的成分很多,如抗原抗体浓度、酶结合物浓度以及试剂的质量控制等等,影响因素众多。传统的实验教学中,实验材料的准备、仪器的准备及调试、标本及试剂的处理等工作基本上是由教师包办。实验的许多环节学生没有亲自做,因而在实验完成后,部分学生对实验还是一知半解,更谈不上能力的锻炼和培养[1]。为适应中职生教育人才培养模式的教学改革,使学生符合具有“理论知识适度、技术应用能力强”的要求,对免疫学检验实验教学内容和方法进行改革势在必行。为此我们通过实验技能操作考核,采取以考促学的手段,加强了酶联免疫吸附试验内容的训练力度,也收到了一定的效果,以下谈谈我们的做法及效果。
1精选考核内容,以适应临床实践的需要
考核内容的选择上以围绕临床实际进行选择,真正使学生做到学以致用。不但要让学生了解、掌握先进的免疫学检验技术和操作方法,还必须着重培养学生的创造性思维和综合分析问题的能力,从而全面提高学生素质[2]。ELISA由于操作简单、灵敏度高、可定性定量,在临床检验诊断中应用最为广泛。常用于如病毒性肝炎、艾滋病、疱疹等传染性疾病的检测诊断,还常用于补体、免疫球蛋白和肿瘤标志物的检测。要想在有限的课时里完成诸多的内容训练,显然是不现实的。因此我们仅选择了最具有代表性的“乙肝两对半”检测作为该技术的训练及考核内容。“乙肝两对半”共有五项检测项目,即HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,实验中所需要的实验器材均能由检验实验室提供,易于准备,给学生提供了选择和发挥的空间。实验过程中所需要的待测血清标本为阳性或阴性标准物,不具传染性,保证了学生实验的安全性。学生只要掌握了“乙肝两对半”的检验程序和检验方法,其他在临床上需要用ELISA技术检测的常见项目则触类旁通,能起到事半功倍的效果,至于少见的、较为复杂的检测项目可以在日后的实习及工作中继续学习。
2调整考核内容,可行性及针对性强
酶联免疫吸附试验教学内容在学时安排上有6课时,理论与实验课课时之比为1.1。以往的教学形式为先理论授课,教师讲解实验的原理及检验程序,实验教学中教师讲解后进行示范教学,学生照葫芦画瓢的再做实验;实验操作考核只设HBsAg项目的考核,考核项目单一、形式单一。学生只需完成实验操作,报告结果即可。而现行的考核内容是“乙肝两对半”的共五项检测项目,各个项目的检验过程如标本的稀释、试剂选择、加样顺序有所不一。从限制考核时间的角度考虑,学生在考核时随机抽考其中的一个项目,由考生自主选择所需物品进行实验操作,这样增加了考试的随机性和灵活性。虽然抽考使得考核难度增加,但能强化学生对ELISA检测乙肝两对半操作步骤的理解。当学生抽到题目后,在熟悉操作步骤的基础上,只要懂得该项目检测时需注意的细节,如检测HBcAb需将血清稀释50倍,HBeAb的检测需加入中和试剂,学生在对离心机、水浴箱及微量移液器的使用相当熟悉的基础上,不难将标本中的结果如实地检测出来。
3考核的形式
学生重理论、轻实验的现象普遍存在,有的学生每操作一步就看一下笔记,或者是询问其他同学,有的学生甚至希望教师能一步步的教,因而学生对酶联免疫吸附试验缺乏系统的认知。我们将考核的形式设计有理论测试(占30分)和操作考核(占70分)。通过调整考核内容,将能力培养贯穿于整个训练过程,将单纯理论教学融合于实验教学中,能把理论知识激活,也强化了学生的实验操作能力及解决问题、分析问题能力。理论测试采用本教研室的计算机交互平台进行,根据教学内容特点,理论测试我们进行这样的设计,首先收集乙肝两对半检测相关试题,建立题库,内容涉及实验原理、操作、材料、结果观察及临床意义。如(1)乙肝两对半检测涉及ELISA的哪些原理?分别检测什么项目?(2)通过各反应孔显色,判断疫苗接种者、病毒携带者、“大三阳”、“小三阳”;(3)手工洗涤有何要求;(4)加终止液的目的是什么;(5)ELISA常用的酶是哪种?其底物是什么。共组10套试题,学生抽签后通过计算机交互平台指向性地发布试题、进行考试。考虑到学生对理论考试容易产生畏难情绪,在题型的设计上,设有填充题,标示题、连线题及填空题等,内容直观、清晰,学生“寓考于乐”,在轻松愉快的心理环境下地完成理论测试。
4考试评分严谨,设计合理
理论考核从试题集中抽取出6道题组卷,每题5分,共30分。操作考核的评分项目包括:专业素质(衣着仪表、考试态度、纪律)5分;实验准备(实验用品、试剂的预处理、标本处理、标记记录)5分;实验步骤(加样、微量移液器的使用、孵育、洗涤、显色)35分,结果观察10分;操作后清场(试剂、器材归位、实验台面清理)5分,综合评价(规定时间完成、实验后清场、消毒等)10分,共70分。评分标准于考试前告知学生,给学生能充分地复习和准备,注意操作细节,提高考试质量。考试时每个学生独立完成试验,教师全程监考,及时对出错环节扣分,评出总分。
5效果分析
在酶联免疫吸附试验的实验教学中,采用考核方式,取得了以下成效。
5.1利于调动学生的主观能动性,激发起学习的热情
实验操作考核综合反映出学生的实验预习、实验过程和实验态度等各方面的表现。考核成绩占期末总成绩的30%,将学生实验考核计入课程总成绩后,学生上实验课的目的性增强,课上都抢着做实验,从以往实验缺乏主动性,不预习,不复习,变为积极思考,认真准备。实验报告抄袭现象也明显减少,改变了重理论轻实践的现象[3]。从学生提出的'问题,如溶血标本可以检测“乙肝两对半”吗?如果用溶血标本检测,会有什么影响,会影响什么试剂?从这些问题的提出可以看出,学生懂得对实验进行思考,也懂得遇到问题主动和老师商量,学生不断发现问题、思考问题、解决问题的能力得到提高。
5.2独立工作能力的培养
独立工作能力是一个医学检验工作者最基本素质,中职生毕业后就业单位多是基层医院,基层医院的检验科可能只有1至2名检验员,每天的检验工作任务都要独立完成。因而学生在就学期间即应注重独立工作能力培养。在实验考核过程中,实验物品的选择、摆放,实验结束后操作台的清理等,是学生自己准备和独立完成。学生在考核时需考虑到考核时间的限制,因此只有熟悉基本的理论知识、熟练基本操作,才能在规定时间内完成实验,得出正确的结果,考试前不做好准备实验将无法顺利完成。
5.3实验基本技能的训练
由于酶联免疫吸附试验涉及环节多,通过考试能综合考核学生的基本实验技术,如移液管的准确吸样,血清等倍稀释的方法;能考察学生对常用仪器设备如离心机、恒温孵育箱、酶标仪、洗板机的操作;在对血清标本进行检测时,使用过的物品如棉签、试管、注射器的正确处置,能增强学生的无菌操作技术和观念。
5.4学生的评价及反馈
此考核方案在两届学生进行了实施,通过操作考核,学生们得到较为系统的训练,对ELISA检测乙肝两对半的整个流程有了较为深刻的认识。有必要开展,通过考核能更好地将理论与实践相结合,学生能自如地、成功地检测出标准物血清标本的正确结果,同时也很有成就感,增强了对实习及将来的工作的信心。在对2013级的学生进行实习情况跟踪、访谈中得知,学生普遍认为,ELISA技术在临床免疫检验诊断中应用广泛,用此技术检测的项目多,工作量较大。由于在操作考核强化了技能,在实习老师的指导下,能很快地进入角色,增强了工作自信心。对学生进行实验考核的同时,也对教师提出了更高要求。教师准备的理论测试问题在内容上需与临床免疫检验接轨,使考核更科学合理化。规范实验教学,严谨、规范示作好示教。学生操作过程中,巡视督查,及时纠正学生的错误。以考促学法强化酶联免疫吸附试验的实验教学,补充和完善了免疫学检验实验教学的内容和方法,也希望能以此提高学生对其他课程学习的主动性及激发起学习的热情。
求一篇实习总结范文 本人药物分析专业在药厂实习了3个月了从事质检工作
篇一:
经验之谈:首先我在这次任务中担任检验员,虽然任务算是最轻的,但重要是熟悉各个部门操作流程.主要方面有①各岗位车间的标准程序规章②设备仪器工具的使用③原料 辅料检验入库发放记录④关键工序 主要瓶颈⑤不同环境下生产产品的检验⑥检验记录其次这次实习,帮助我树立药品生产反应是中心、工艺是主体、设备是环境、检验是条件的思想,使我认识到药品生产是按工艺和检测两大主线来实施的通过这种普遍联系的整体-部分-整体的思维方法和认识过程,使我学到一套科学的训练方法提高动手、观察、分析、综合等四种能力,促使生产能力的提高落到实处:动手能力是收集毕业设计资料与素材的首要能力观察能力是生产能力强弱的直接体现分析能力是前两种能力的发展综合能力是前三种能力的总括和提高. 通过认识实习--生产实习--毕业实习在时间和空间上形成一个实践链,这个链的高端环节毕业实习-毕业设计(论文)将使学生的四年学习的庞杂而繁多的知识和理论得到一次新的全面的"装配"与升华 我这次毕业实习的题目是《青霉素的工业生产及相关影响检测》.青霉素由真菌产黄青霉产生的青霉素的生产目前主要用微生物发酵法进行生物合成很少数亦可用化学合成法生产通过实习期间对不同PH值 温度最适时间生产的青霉素进行管碟法检测.而系统的认识到了青霉素质量检验.通过不同环境生产青霉素为调控生产青霉素提供最佳的发酵条件,和缩短生产周期,提高产量提供科学依据.最后查阅青霉素的主要用途(研究和医药方面)了解到临床上主要用于革兰阳性球菌例如链球菌、肺炎球菌、敏感的葡萄球菌等的感染和用于分子生物学研究 这次实习对我来说收获非常大,真是学有所用,我可以把以前书本上学到的知识和实际工作结合起来,使我对我所学的专业技术有了更大的兴趣,也学到了一个科研工作者应该有的态度,就应该是脚踏实地,吃苦耐劳在以后的学习生活中我一定要积极主动学习老师同学的优点和长处本次实习相信对我以后的工作会有很大帮助,是我走向社会的最后一堂很有意义的实践课 以上也算是我的实习工作总结,最后,我感谢学校给我这次实习的机会以及精心指导和鼓励我实习的老师致以诚挚的谢意和崇高的敬意 。
篇二:
【摘要】 目的研究紫苏属不同(变)种不同部位无机元素及维生素的组成及含量。方法利用原子吸收分光光度计及原子荧光分光光度计对无机元素进行测定;分别提取紫苏属植物中水溶性及脂溶性维生素,并采用高效液相色谱法进行分析。结果紫苏属不同(变)种不同部位所含无机元素及维生素种类基本相同,但含量存在显著差异。结论紫苏属不同(变)种中Ca,Fe,Mg等含量较高,但其As,Hg含量也应得到人们的重视;同时,在所测材料中检测到丰富的VC,VD2,VD3。从不同材料来看,野生紫苏无机元素及维生素含量丰富;从不同部位来看,中上部叶的营养价值相对较高。
【关键词】 维生素 无机元素 高效液相色谱法 原子吸收 原子荧光
紫苏属Perilla L.系唇形科Labiatae草本植物。据《中国植物志》记载,紫苏属植物全世界有1个种3个变种:即紫苏(原变种,包括紫苏和白苏)Perilla fruteseens cens (L.)Britton,野生紫苏P.frutescens (L.) Britton var.acuta (Thunb.) Kudo.
回回苏P.frutescens (L.)Britton var.crispa (Thunb.)Hand.-Mazz., 耳齿紫苏P. frutescens(L.)Britton var. auriculato-dentata Husanex H.W.L.。该属植物分类一直很混乱,20世纪90年代国内学者结合本草考证、植物分类学、蛋白谱带及挥发油组成等对本属植物进行研究,认为紫苏与白苏应为两种不同的植物,白苏应为正P.frutescens(L.)Britt,紫苏应为其变种P.frutescens(L.)Britt.;同时发现耳齿苏实属野生紫苏〔1~4〕。关于紫苏属植物的准确分类还有待于进一步研究。 紫苏属植物主要产于亚洲东部,我国均有。其中,紫苏为《中国药典》收载入药,属于第1批次被我国卫生部颁布的既是食品又是药品的60种中药之一。但紫苏属中的各(变)种在民间皆供药用。紫苏茎叶具有治疗风寒感冒、头痛咳嗽、胸腹胀满、抑菌、止血、镇静和镇痛等疗效〔5〕。前人对紫苏属植物药用价值的研究主要集中在挥发油上,而对其无机元素及维生素的相关报道甚少。本实验对紫苏属植物不同部位中Fe,Mn,Mg,Zn,Cr,Cu,Cd,Pd, Hg,Ca,As等11种无机元素及维生素C,维生素PP,维生素B6,维生素B2,维生素B1,δ-维生素E,维生素D2,维生素D3, 维生素K,α-维生素E等10种维生素进行了比较分析,以期为紫苏属植物资源的合理开发利用提供重要依据。
1 器材
1.1 仪器
日本岛津公司高效液相色谱仪(SPD-10A VP紫外-可见检测器、LC-6A高压泵、CTO-10AS VP柱温箱〈含7725i型手动进样器〉),HITACHI公司Z-2000型原子吸收分光光度计,北京科创海光仪器有限公司AFS-3000型双道原子荧光光度计,高性能空心阴极灯(由北京有色金属研究总院提供),Thermo BR4i型冷冻离心机,Sartorius CP225D型电子天平,Sartorius BP-20型pH计,HS 6150D型超声清洗器,Millipore Mill-Q型超纯水系统,九阳牌JYL-350型料理机,江苏金坛中大仪器厂SHZ-82A型气浴恒温振荡器,Micromax型离心机(ICE公司),上海恒科技有限公司HWS28型电热恒温水浴锅,国华公司DB-3电热板,沈阳市节能电炉厂马沸炉。
1.2 试剂
1 000 mg/L各无机元素标准储备液均由国家标准物质研究中心提供; 维生素B1,维生素B2,维生素B6,烟酸和维生素C均由Supelco公司提供;维生素D2、维生素D3、α-维生素E、δ-维生素E、维生素K1标准样品均由Sigma公司提供;己烷磺酸钠(山东省禹城市中美色谱产品厂)、甲醇(上海陆都化学试剂厂)为色谱纯;磷酸、偏磷酸、盐酸、醋酸乙酯、无水乙醇均为分析纯。
1.3 材料
实验材料来自于美国Germplasm resources information network(GRIN)、四川中江及四川雅安等地共计4份,均由四川农业大学农学院吴卫博士鉴定,为Perilla L.植物。其编号、学名及来源见表1。所有材料均同时播种于四川农业大学农场,花期分上、中、下叶分别采收(上-茎尖3~5叶,下-茎基部倒数3~5叶,其余为中部叶),鲜样待测维生素。同时,在70℃下分别干燥上、中、下叶及同期采收的茎,研磨,过60目筛,干燥器中保存,粉末待测无机元素。 表1 4种紫苏属材料的学名及来源(略)
2 方法与结果
2.1 样品前处理方法
2.1.1 无机元素样品的前处理
Fe,Mn,Mg,Zn,Cr,Cu,Cd,Pd,As及Hg的样品制备分别参见GB12396-90,GB/T5009.14-1996,GB/T5009.15-1996,GB/T5009.13-1996,GB/T5009.15-1996,GB/T5009.12-1996,GB/T5009.11-1996及GB/T5009.17-1996〔6〕。
Ca的样品制备:精密称取待测样品0.5 g左右,至于瓷坩埚内,电热板炭化至无烟,(500±25)℃马沸炉6~8 h,冷却。10 ml HCl(6∶6)消煮近干,5 ml 5%HCl清洗并转移至50 ml容量瓶,加入硝酸镧溶液,确保1%含量,纯水定溶,待测〔7〕。
2.1.2 水溶性维生素的提取
将每份采收的上、中、下新鲜材料清洗干净,沥干表面水分后,分别精确称取10 g左右,加入30 ml 5%HPO3打成匀浆,多次加入2%HPO3 清洗并转移匀浆入棕色试剂瓶,共计30 ml,在冰水混合条件下超声浸提30 min。将提取液在4℃,8 000 r/min条件下离心15 min,取上清液移入100 ml棕色容量瓶;用2%的HPO3清洗匀浆试剂瓶,洗液连同离心残渣再次离心15 min,取上清液;重复清洗两次;用2%的HPO3定容。取上述定容后的溶液于1.5ml离心管中,在4℃,10 000 r/min条件下离心10 min,清液待测。以上操作均要求避光、迅速,样品处理后在4℃保存,防止维生素分解。
2.1.3 脂溶性维生素的提取
同样将新鲜材料清洗沥,称取样品10 g于匀浆机中,加入无水乙醇25 ml,匀浆2 min后,准确称取匀浆20 g于150ml具塞三角瓶中,移液管精确加入20 ml无水乙醇,于50℃气浴恒温震荡器上震荡50 min,取下,待冷却后,转移至50 ml离心管中,8 000 r/min离心15 min,上清液转移至分液漏斗中,残渣用无水乙醇洗3遍,10 ml/次,分别离心15 min,合并上清液,加入10%NaCl溶液5 ml,正己烷20 ml,快速混匀2 min,静置分层,取正己烷相,下液再加入正己烷10 ml,再次萃取,合并正己烷相于蒸发皿中,蒸至干,流动相转移并定容至10,取1 ml上清液10 000 r/min离心10 min,清液待测。以上操作应尽量迅速,避光。
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