月季组培毕业论文
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《现代花卉栽培新技术应用》
摘要:随着小康社会建设和社会全面进步,对美的享受日益突出。在人与环境和谐发展过程中,
美化环境,发展小城镇,建设新农村,丰富人民生活,提高生活质量,增加花卉色彩,推进花卉产业化进
程,调整产业结构,促进农牧业增效、农牧民增收,乃是新时期、新阶段我区农牧业发展的必然趋势。本
文通过西藏花卉引种与高效种养新技术研究与示范,总结出西藏花卉引种与高效种养新技术,供参考与
应用。
关键词:现代花卉栽培新技术应用
中图分类号:$68
花卉是色彩的来源,也是季节变化的标志;是一种
有生机的艺术品,也是科技进步与创新的结晶;是园艺
绿化、环境美化的活材料,也是用来点缀居室、居民区、
旅游景点、会场布展等公共场所的素材;是提升西藏产
业结构、带动农牧民增收的新兴产业,也是高原生态环
境保护与建设内容的重要组成部分。
1 现代育苗技术
1.1 智能温室育苗
利用智能温室的现代化设施设备,通过对温、湿、
光及c02的自动调控,创造适宜的小气候环境。用穴
盘播种,营养钵扦插,机械化嫁接等育苗手段,不仅能
满足花卉幼苗对温、湿、光及COz的生理需求,提高育
苗的机械化程度,而且具有省工、省料、繁殖周期短、成
活率高等特点。
智能温室育苗其主要优点:一是能创造适宜的土
壤湿度、空气湿度和良好的温光条件;二是能加快分
株、扦插、嫁接后幼苗的伤口愈合;三是一年四季均可
育苗、不受季节限制、苗床周转快、生产效率高。据西
藏现代农业示范园区近两年试验与生产示范,采用连
栋智能温室育苗,比常规育苗节省工料8=5%左右,成
本降低40~60%,种苗成活率可达90—95%,而且幼
苗株型整齐健壮,叶片肥厚,根系发达,种苗商品率可
达到95以上。
1.2 电热温床育苗
电热温床育苗是冬春季快速育苗的方法之一。其
主要目的是增加苗床培养土温度。利用自动控制仪调
节温度,可为种子萌发或扦插条生根提供最适宜的土
壤温度条件。西藏自治区农牧科学院蔬菜研究所(原
七一农场)1986年应用电热温床扦插繁殖月季,其结
果表现发芽生根快、成活率高。
采用电热温床加小拱棚遮萌育苗,床温比一股室
温高2~3~C以上。不仅发芽快,成活率高,幼苗的根
系生长迅速,地上部分生长缓慢而充实,而且可培育苗
壮。同时,扦插繁殖时能加速插条伤口愈合、促进生
根。
电热温床育苗靠自动控温仪调节苗床温度,操作
简便,设备可连续使用多年。
2 组培快繁技术
2.1组织培养
组织培养就是应用无菌操作技术,培养植物的离
体器官、组织或细胞。使其在人工控制的条件下进行
生长和发育的技术,又叫无菌培养或离体组织培养。
组培快繁技术繁殖快、用材少、遗传性状稳定;而且能
解决花卉在无性繁殖过程中易产生的病毒危害,可大
幅度提高种苗质量和商品率。通过分离茎尖、芽尖、根
尖、胚芽、叶片、鳞片、花粉等,接种在三角瓶等人工配
置的培养基上进行培养,利用植物细胞的再生能力,在
适宜无菌的条件下,长出不定芽或不定根,使之形成一
株新的完整植株。组织培养是进行植物快繁和保存种
质材料遗传性状以及对花卉种苗进行脱毒的一项现代
繁殖技术;也是研究植物细胞、组织的生长、分化和植
物体器官形成规律的重要科学手段。我区组培快繁研
究起步较晚,但近年来发展较快·,已用组培快繁技术先
后培育出兰花、菊花、香石竹、君子兰、大花萱草、非洲
紫罗兰、百合、月季、一品红、唐菖蒲、草红花、风信子、
水仙、仙客来、非洲菊、卓玛花等优良花卉。2004—2005
年,西藏自治区农牧科学院园区办与自治区生物
研究所组培室合作,组培一品红、香石竹、非洲菊、蝴蝶
兰、满天星、长寿菊、八仙花、洋桔梗、草红花等1O多种
花卉试管苗成功,为西藏花卉商品化生产基地建设奠
定了良好的基础。其常用花卉诱导分化培养基选用详
见表1。
表l 几中花卉诱导分化培养基参考表
2.2 组培快繁的优点
2.2.1 能保持原有品种同有的遗传性状和特性。
2.2.2 节约繁殖材料。采集一小部分分离组织就能
繁殖出大量花苗。
2.2.3 繁殖速度快。用“一品红、蝴蝶兰”等分离组织
作培养材料,在适宜条件下经过离体培养,接种后15
— 3O天开始组织分化,一年内可繁殖大量的优质种
苗。
2.2.4 节省土地。组培快繁技术是在室内将分离组
织置三角瓶或试管内进行培养的,可以充分利用空间。
一般30m2的培养室就能摆放上万三角瓶,可繁殖大量
优质花卉种苗。
2.2.5 去病毒。目前许多花卉病毒较为严重,直接影
响观赏价值;组培可进行苗木脱毒,使之成为无毒苗。
2.2.6 复壮品种。对于长期使用无性繁殖,并开始退
化的花卉品种,采用组培快繁,可使个体遗传性状得以
恢复。
3 花卉生长激素应用
花卉生长调节剂,是指能调控花卉生长,开花、休
眠、萌芽等过程中人工合成植物激素的总称。这类人
工合成激素在植物体内对植物生理功能和形态变化起
着重要作用。
3.1 常用花卉生长调节剂
3.1.1 植物生长素,主要有吲哚乙酸(姒),吲哚丁酸
(IBA),萘乙酸(NAA)等。植物生长素主要具有促进细
胞分裂,促进生根等作用。萘乙酸是一种具有多种用
途的生长调节剂,能促进苗术生长和开花,促进插条发
根,并可防治落花落果。西藏现代农业示范园区2004
年试验示范,温室扦插“一品红”用500t,e,/g浓度萘乙
酸(NAA)快速浸蘸,对促进生根、提高扦插成活率起到
了明显的作用。
3.1.2 生长延缓剂和抑制剂,主要有比久(B9)、多效
唑(PP333)和矮壮素(ccc)等,具有延缓或抑制植株或
枝条生长等作用。比久是一种具有多种用途的生长延
缓剂,可作矮化剂、座果剂、生根剂和保鲜剂使用。应
用在花卉上,可使花卉矮化粗壮;同时具有防止落花,
促进座果,诱发不定根形成,提高抗寒力等作用。西藏
现代农业示范园区花卉生产应用5%多效唑(PP333)
可湿性粉剂喷施,对防止茶用花卉,特别是“金桔”落
花、促进座果,诱发不定根形成,提高冬季抗寒力起到
了显著效果。矮壮素具有抑制植物营养生长,促进生
殖生长的作用。喷施矮壮素,可使花节间缩短,植株矮
化,茎秆变粗,叶片增厚,叶色亮丽。并有增强植物抗
旱、抗寒等作用,因此常用于菊花、大丽花、杜鹃、牡丹
以及盆栽葡萄等花卉的矮化处理。
3.1.3 生根粉(ABT)。ABT是一种高效、广谱性的生
根促进剂,西藏6~7月份园林绿化应用较广。一般海
棠砧木嫁接扦插育苗成活率可达80~90%。“1号生
根粉”主要用于玖瑰、米兰、海棠、佛手、罗汉松、雪松、
银杏等;“2号生根粉”主要用于月季、茶花、桅子、杜
鹃、菊花、蔷薇、倒挂金钟、石榴、小叶黄杨等;“3号生
根粉”用于苗木移栽时根系恢复,提高成活率。
3.1.4 三十烷醇。三十烷醇是一种具有多种用途的
生长调节剂,不仅具有提高种子发芽率和促进插条生
根以及促进花芽分化,多开花,多结果的作用,而且还
可以增加叶绿素含量,使叶色加深并能使叶片增大。
西藏现代农业示范园区引进名贵花卉后,应用0.5/_tg/g
浓度三十烷醇喷施,不仅能促进花卉花芽分化、多开
花、多结果,而且明显增加了叶绿素含量,使叶色加深
和叶片增大。
3.2 植物生长调节剂在花卉上应用的效果
3.2.1 促进插条生根,有利快速繁殖。萘乙酸、吲哚
丁酸等生长素,配成适当的浓度,应用在一些不易发根
的花木上,有较明显的促进根系生长的作用。春季温
室扦插葡萄条,将插条基部放入1000btg/g萘乙酸溶液
中浸泡3~5小时,取出立即扦插。扦插后50天调查,
发根率比对照高出约l倍。又如将桂花嫩枝的插条浸
入浓度为500/_tg/g的吲哚丁酸溶液中,5分钟取出,凉
干后扦插,可提前发根。再如玉兰,再生能力差,扦插
生根困难,剪取嫩枝放入2oot,e,/g萘乙酸溶液中浸泡
24小时再扦插,可促进生根成活。实践证明,茉莉、米
兰、含笑、橡皮树、五色梅、罗汉松、天竺葵、四季秋海
棠、香石竹等多种花木,应用生长素调节后,对促进生
根均有良好效果。
3.2.2 促进植株矮壮,提高观赏价值。应用矮壮素
12
“比久”处理花卉,能有效地使植株矮化,促进分枝及花
芽分化。例如天竺葵定植时土壤中拌入500t-tg/g的矮
壮素,植株高度可降低10cm左右,并能提前1~2周开
花。大丽花、菊花等用“比久”处理,矮化作用十分明
显。据西藏现代农业示范园区试验示范,矮壮素“比
久”对一品红、山茶、八仙花、杜鹃、火棘、五色梅、百合、
仙来客、香石竹、翠菊、彩叶草、鸡冠花、紫罗兰、矮牵
牛、万寿菊、百日草等花木均有明显矮化作用。“多效
唑”对一些花卉植株的矮化作用也十分显著,如盆栽秋
菊,在其生长中期(约于8月中下旬),用浓度20ug/g
的“多效唑”溶液喷洒,每隔l0~l5天喷1次,共喷两
次,可使植株变矮,节间缩短,叶色变绿,茎秆变硬,此
时辅之以摘心和适当施肥,即可使花型增大,花期延
长,花朵艳丽。
3.2.3 延长切花寿命。西藏海拔高,空气干燥,使
鲜切花花期受到一定影响。插花时高原人民都希望让
鲜花能多开几天,应用一些生长延缓剂,即可抑制花
卉的呼吸作用,从而达到延长花期的目的。例如将香
石竹花枝基部用矮化素浸泡一夜,即可延长花期2~
3天。矮化素的使用浓度,夏季为50/_tg/g,冬季为l0
~ 25t-tg/g。
3.2.4 防止落花落果。喷洒“比久”、“萘乙酸”具有防
止落花落果作用。如观叶花卉用50/J.g/g“萘乙酸”溶液
喷洒,即可防止落花。又如盆栽金桔,在座果前用
500/_tg/g浓度的“萘乙酸”(N从)溶液喷洒,即可抑制花
芽分化,防止落果。
4 BGA土壤激活剂的应用
BGA土壤激活剂不同于现有化学肥料、微生物肥
料、有机肥料、复合肥料、保水剂、生根粉等产品。它集
保水、放水、催芽、改良士壤、供给利激活营养等多种功
能于一身,除可用于正常条件下花卉种养获得养分外,
最突出特点在于花卉在难以种养的恶劣条件下(如高
寒、干旱、风沙、瘠薄等),能使花卉正常生长。2OO4
年,西藏现代农业示范园区应用1:20 BGA激活剂与河
砂混合基质盆栽小本花卉,效果十分良好,拉萨家庭盆
栽君子兰应用BGA激活剂培养土后,春季间隔30~40
天浇水,亦可正常开花,而且表现花朵大、花期长等特
点。应用1:15 BGA激活剂与河砂混合基质营养液喷
灌技术,进行无土草坪示范,在水泥地平面,铺5crn厚
度的基质,草坪从播种到形成商品仅6o天。
5 介质应用
5.1 栽培介质
近年来,花卉栽培所用的介质,逐渐移向使用全部
无土或少土的介质。这是因为无土介质大都属于园艺
无毒类型,不需消毒程序,重量轻,质量均衡,价格便
宜,易于操作及标准化,但介质多数不含或少含养分,
栽培上应及时施用营养液。
5.1.1 树皮。西藏藏东南地区松树皮和硬木树皮,具
有良好的物理性质,能够部分代替泥炭作为盆栽介质。
新鲜树皮的主要问题是碳氮比较高,有些树皮如察隅
油桐树皮等含有对植物有害的成分,应该通过高温堆
腐或淋洗降解毒性。树皮首先要粉碎,粒子直径可以
大到10mm,一般的直径为1.5~6mm。对粒子的大小
进行筛选,细小的粒子可作为田问土壤改良剂,粗的粒
子可作为盆栽介质。木树皮作为盆栽介质,能抑制植
物寄生线虫和土壤病原菌的发生。
5.1.2 锯末。西藏藏东南林区木材加上后生产的锯
末和树皮有类似的性质,但较易分解沉积,而过于致密
则不易干燥,影响透水透气。
5.1.3 草炭。又称泥炭,泥炭是古代湖沼地带的植物
被埋藏地下,在渍水和缺氧的条件下不能完全分解的
特殊有机物。西藏羊八井地带天然草炭资源十分丰
富,为花卉产业发展提供充足的介质资源。
5.1.4 珍珠岩。珍珠岩是天然的铝硅化合物,即粉碎
的岩浆岩加热剑1000℃以上而形成的膨胀材料,具封
闭的多孔性结构。珍珠岩较轻,通气良好,无营养成
分,质地均一,不分解,阳离子代换量较低,PH7.0~
7.5。珍珠岩含有钠、铝和少量的可溶性氟,氟能伤害
某些植物,特别是在较低PH时用珍珠岩作繁殖介质
表现明显。在使用前经过2~3次淋洗,能使可溶性氟
淋火。珍珠岩较轻,容易浮在混合介质的表面。
5.1.5 蛭石。蛭石是硅酸盐材料在800~l100℃下加
热形成的云母状物质。在加热中,水分迅速失去。矿
物膨胀后相当于原来体积的20倍,其结果是增加了通
气孔隙和持水能力。蛭石呈中性至微碱性,每立方米
蛭石能吸收500~650升的水,蒸汽消毒后能释放出适
量的钾、钙、镁。蛭石长期栽培植物后,容易致密,使通
气和排水性能变筹,因此最好不做长期盆栽植物的介
质。
5.1.6 河砂。河砂通常作为盆栽混合介质的组成部
分。砂粒以0.2~0.5mm之间为好。河砂的容重较
大,河砂的持水量和阳离子代换量较小。近几年,西藏
现代农业示范园区用l:20的BGA激活剂与河沙混合
基质盆载葡萄等观果花卉、花苗生长健壮,取得了良好
的结果。
5.2 栽培介质的配制
通常盆栽介质是由两种以上的介质按一定比例配
合而成的。配合起米的介质在理化性状上比单一介质
要好。
花卉因种类、介质材料和栽培管理不同,使用介质
配方亦不同,但其总的趋向是要降低介质的容重。增
加总孔隙度和增加空气和水分的含量。介质配制比例
见表2。
表2 介质配方比侧参考表
5.3 培养土和栽培介质消毒
为保证花卉茁壮生长,对培养土和栽培介质消毒
是极重要的措施之一。除了已经消毒的袋装介质之
外,即使是一般属于同艺无毒的介质,也应在配制后进
进消毒,存储使用。多数病原微生物在60℃时经30分
钟蒸汽加热后即可死亡。锰、铅、锌等重金属经高温处
理后可溶性增加,过多的锰会造成植物毒害,使植物生
育迟缓,叶色变褐以至枯死。用氯化苦药消毒,将培养
土一层一层地倒人箱中,每10cm厚为l层,每层均匀
撒布氯化苦25rnl。然后盖好密闭,待氯化苦全部散发
后,即可使用。西藏种养花卉多为温室栽培,定植前,
将温室中午密闭3~4小时闷棚,亦可达到营养土消毒
效果。
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“中国——园林之母”的缘由
内容摘要 100年前,一个年轻的英国园艺学者威尔逊()踏上了中国的土地,开始了他为西方收集、引种花卉植物的长期而影响深远的工作。置身于“花的王国”中,他被深深地感动和陶醉。后来随着他对中国花卉了解的增多,他认识到中国花卉对世界各国的园林产生了举足轻重的影响......
100年前,一个年轻的英国园艺学者威尔逊()踏上了中国的土地,开始了他为西方收集、引种花卉植物的长期而影响深远的工作。置身于“花的王国”中,他被深深地感动和陶醉。后来随着他对中国花卉了解的增多,他认识到中国花卉对世界各国的园林产生了举足轻重的影响。1913年,他写下了《一个博物学家在华西》这一有影响的著作。此书在1929年重版时易名为《中国——园林之母》(China Mother of Gardens)半个多世纪以来,“中国——园林之母”这个提法,已为众多的植物学者和园艺学家所接受。在国内,尽管不少人对这种说法耳熟能详,但对其内涵却了解有限,笔者就此作一简单的阐述。
一、中国东部花园对西方的贡献
中华民族自古爱花,在2500多年前,花就在我国人民美化生活,表达情感方面起着非常重要的作用。《诗经》中有关桃花、芍药和萱草的诗歌就很好地表明了漫长的历史进程中,我们的祖先培育了许多举世闻名的绚丽花卉。不仅如此,中国的花卉很早就曾通过丝绸之路传入西方,如原产我国的桃花以及培萱草(Hemerocallis fulva),约在2000年前就传入欧洲。
进入近代后,西方英、法各国随着社会经济的进步,园林艺术的发展迅速,对海外的奇花异草有更多的需求。当时来华的西方商人等很快对我国众多异乎寻常的漂亮花卉的产生了强烈兴趣,千方百计设法引进我国花卉的种苗。
鸦片战争前,西方人与我国进行贸易的主要地点——广州,是一个花卉园艺非常发达的城市。这里气候温暖湿润,花木种类十分繁多,素有“花城”之誉。当时广州东南郊有一大型园林区——花埭(或称花地),是一处非常著名的花卉种苗和盆景交易的中心。它是早期西方商船主购置我国花卉的重要场所。
另一方面,在北京活动的西方传教士,特别是有一定植物学基础、在中国御花园效力的法国人汤执中(P. D’Incarville)等,也积极通过内陆商路向欧洲的彼得堡、巴黎和伦敦的植物园传送一些见于北京园林的花木种苗。其中汤执中送出的植物包括荷包牡丹(Dicentra spectabilis)、苏铁(Cycas revoluta)、角蒿(Incarvilea sinensis)、翠菊(Calllistephus chinensis)和白菜(Brassica chinensis)以及紫堇属的一些植物。此外,还有北京很常见的绿化树种侧柏(也叫扁柏 Platycladus orientalis)、槐树(Sophora japonica)、臭椿(Ailantus altissima)、栾树(Koelreuteria paniculata )、皂荚(Gleditsia sinensis),以及大枣(Ziziphus jujuba)、枸杞(Lycium chinense)和染料植物蓼蓝(Polygonum tinctorium)等等。有关记载表明,在18世纪下半叶的时候,西方通过各种途径从我国输入的花卉和观赏树木包括已经不少,包括石竹、蔷薇、月季、茶花、菊花、牡丹、芍药、迎春、 苏铁、银杏、荷包牡丹、角蒿、翠菊、侧柏、槐树、臭椿、栾树、皂荚和各种竹子等。其中荷包牡丹、翠菊、角蒿是后来非常普遍栽培的花卉植物,被冠以颇为动听的名称,如荷包牡丹被西方人成为闪耀红心(Showy leedingheart),颇富烂漫色彩。翠菊是我国特产的美丽花卉,在西方很受欢迎,被西方人称为“中国紫菀”。一些树木也体现类似的情况,如臭椿也是欧洲普遍栽培的绿化植物,被称为天堂树(the Tree of Heaven)。栾树在西方被称为金雨树(the Golden Rain Tree)。进入19世纪后,英国丘园派出的科尔,英国东印度公司的验茶员雷维斯等又从我国的广东沿海等地收集了大量的棣棠、栀子、忍冬、蔷薇、杜鹃、紫藤和藏报春等的种苗送回英国。
在西方早期在中国引种的花卉中,菊花和月季无疑是最为引人注目的。菊花在我国有悠久的栽培历史和大量的品种。这种美丽的鲜花很快引起欧洲商人的注意。
大约在1688年,有“海上车道夫”之称的荷兰人,引进了6个漂亮的菊花品种,花的颜色分别为淡红、白色、紫色、淡黄、粉红和紫红。1751年,瑞典著名博物学家林奈的学生奥斯贝克从澳门带回一种野菊花到欧洲。1789年,英国当时的皇家学会主席班克斯又重新引进中国的菊花,据说其后英国栽培的菊花主要由此种培育而来。后来,在1798年到1808年间又有八个新的品种被直接引到英国。
1804年,英国一些精干的园林艺术家成立了“伦敦园艺学会”(1860年改名为“皇家园艺学会”)。这个学会的成立对西方世界尤其是英国在华收集观赏植物起了很大的促进作用。一个英国学者曾经写道:中国花卉“与我们自己的完全不同,不仅仅体现在植物的类别,而且还体现在其被使用的方式和安排它们时显露的美学价值。……甚至在远东被用于园林和植物中的象征手法也提供了思想的源泉。到18世纪末的时候,中国的东西成了一时的流行时尚。”正因为如此,这个学会从成立开始,就想方设法大量引种中国花卉。其中也包括菊花。
菊花受到西方人重视的一个重要原因是,菊花盛开于秋天花很少的时候,而且花期长。作为一种时令花卉,其观赏价值是十分突出。当时园艺学会的秘书萨本就指出了这一点,同时认为园艺学会的植物园里虽已栽有12个菊花品种,但根据有关资料,但中国还拥有大量的菊花品种,非常必要作进一步的收集。
园艺学会先后于1821年和1823年派出鲍兹和帕克斯到我国引进菊花新品种和其它一些花卉。他们送回去30个菊花新品种和大量其它观赏植物。加上在广州的雷维斯等人的不断引进,从1821至1826年,萨本描述了不下68个菊花品种。稍后广东沿海较好的菊花品种几乎全被引进英国。
第一次鸦片战争后的1843年,园艺学会派出的福琼到我国当时开放的南方口岸城市收集园林植物。他被西方认为是“在中国植物收集史上无可争议的开了新纪元”的人。先后四次来华,给西方引去了包括牡丹、芍药、山茶、银莲花、杜鹃、蔷薇、忍冬、铁线莲等190个种和变种园林植物和经济植物,其中有120种是西方前所未有的。特别值得一提的是他从舟山引进的一个菊种——“舟山雏菊”。这种菊花是1846年由福琼送回英国的,在那以后的20年中,经西方园艺学家之手,这种小花培育出各类普遍栽培的焰火品系。福琼引进“舟山雏菊”被认为在菊花育种史上开了新纪元。
因为重视的缘故,西方在菊花的育种方面进展神速,而且成就很大,到1852年,与我国相比已有青出于蓝而胜于蓝之势。如今不但是栽培最普遍的花卉之一,而且也是深受世界各国人民喜爱的四大切花种类之一。也是商业价值最高的花卉之一,难怪有人认为菊花肯定是西方从远东引进的最重要的园林植物。
西方从我国引进的重要园林花卉很多,早期堪与菊花交相辉映的是月季。月季在西方的园林和家庭装饰中所起的作用与菊花相比毫不逊色。 月季也是我国非常古老的一种观赏花卉,在南方四季都开花,花期很长。因此叫月季,俗称月月红。月季是近代西方从我国引种的重要花卉,在当今西方园艺界的重要性堪称举足轻重,它在西方被誉为“花中皇后”,栽培的品种据说达20000多个。这似乎是西方人对蔷薇属植物情有独钟的结果。根据美国植物学家里德()的说法,西方栽培的月季和蔷薇属植物主要来源于中国的三个种。第一种是月季(Rosa chinensis)。它于17世纪被英国东印度公司的职员引进印度,1781年再经印度被引到荷兰,因此曾被误认为原产印度。1789年,英国的班克斯把月季带回英国栽培;差不多与此同时,它也被引到奥地利的维也纳植物园栽培。另一个种是多花蔷薇(或称野蔷薇R. multiflora)。这个种的标本在1793年的时候曾由英国来华使团的一个随员采得。1804年它的一个变种被引进到英国。还有第三个种便是芳香月季(R. odorata),1808年被引入英国。基于这三个种的定向杂交和培育,西方得到众多千姿百态的月季和玫瑰。
当然,由于我国是蔷薇属植物现代分布的中心,西方人从我国引入的与月季同属的蔷薇属植物远不止这三个种。1792年,英国使团的随员曾在我国采得硕苞蔷薇(R. bracteata)带回英国。1807年,又有木香花(R. Bankisiae)被引到英国。1823年,英国园艺学会派来的采集者又从我国引进过一些玫瑰的新品种。其后由同一机构派来我国采集园艺植物的福琼又在厦门和上海采集得不少蔷薇属植物种苗送回,其中包括他从宁波收集到一种当地人叫“五色蔷薇”的品种。此后,英国和其他欧洲国家继续源源不断地从我国引种蔷薇属观赏植物。
这一时期引入西方的花木还有许多被广泛栽培,科尔从我国南方引入的卷丹便是其中之一。卷丹是我国各地常见的一种球茎花卉,在我国有很长的栽培历史。它那翻卷成球形的橙红色花瓣,上面点缀着紫黑色的斑点,与纤长舒展的花须相匹错落有致,显得特别婀娜多姿。由科尔引回去后,在欧洲园林很快风行。于它形态上的上述特点,这种花被西方人称为“虎百合”(Tiger lily),后来成为世界上栽培最普遍的百合种类之一。由雷维斯、鲍兹出大力引回的大量藏报春(P. sinensis),后来在英国也被普遍栽种。
另外,法国传教士送回的臭椿种子,被培育出大量的树苗,为英法都市广泛用作行道树。19世纪中叶福琼从我国舟山引进的棕榈(Trachycarpus fortunei),现在西方栽培非常普遍;由他引进西方的榆叶梅和锦带花在西方也有不少栽培。此外,原产我国南方的木香花的一些变种则在地中海沿岸园林中非常普遍栽培。因为中国有如此丰富的花卉资源,因此福琼认为“我们不得不承认中国的的确确是‘中央花国’。”
“中国——园林之母”的缘由 来自: 免费论文网 二 威尔逊打开西部花园
19世纪下半叶法国传教士谭微道和英国海关人员韩尔礼在我国西南四川山区和湖北宜昌附近的收集,使西方人认识到湖北西部和四川东部以及西北等地高山峡谷中还蕴藏着大量奇丽的花木资源。当时哈佛大学的植物学家沙坚德教授认为:“很明显,世界上没有哪部分向中国西部那样,能有那么多的适合于温带气候的城市公园和花园的新植物”。于是在1897年的时候,他建议英国著名的维彻公司派人到那些地方收集新植物的种苗, 1899年,英国年轻的园艺学者威尔逊由维彻花木公司派出来到中国。由于他在那一地区的成功收集,因此他被称为“打开西部花园的人”。
如果把威尔逊的工作作为西方在华引种工作整体的一个阶段加以考察的话,我们很容易发现,与前一个阶段的福琼等人主要从我国引进原有的栽培花卉不同,这一阶段西方人以引种我国的野生花卉为主,因而其数量更大。许多花卉甚至更有魅力,象珙桐和香果树不但是我国特有的古老树种,而且也被一些西方学者认为是北半球最漂亮的观赏树木。因此它带有开发和驯化的特征;地点也由我国的东部进入到我国的中西部。
威尔逊头两次来华,都是由维彻公司雇用,时间分别是1899至1902年和1903至1905年,而且各负有引进珙桐和绿绒蒿的明确使命。
比较我国众多的观赏植物而言,珙桐颇有点“养在深闺人未识”的意味。这种花苞片成对象鸽子展翅的漂亮观赏树木标本,首先由法国传教士谭微道在我国的川西宝兴采得。它不但有很高的观赏价值,而且还是我国特有的古老树种。法国植物学家还特地在其编写的有关这种植物的著作中配上了一幅漂亮的彩图。因为花苞片的形状,珙桐被美称为“鸽子树”(dove tree)或“手帕树”。可能是这种树的描述和他那幅漂亮的插图引起了商人的注意,维彻公司才产生了引种的念头。
1899年,威尔逊来华收集这种树苗。在当地向导的帮助下,他轻而易举地在鄂西山区找到这种他认为是北温带“最有趣和最漂亮的木本植物”,收集到大量的种子和插苗。成功地引到英国和其它西方国家栽培。现在,不少珙桐已长成高达五六丈甚至更高的参天大树。这种漂亮的鸽子树现在不但为欧美普遍栽培,而且成为世界著名的观赏树木。
威尔逊第一次来华除成功地引进珙桐外,还引去了大量的其它观赏植物。他当时去的鄂北和川东等地是我国的槭树属等木本植物的中心,所以他的引种包括不少很有观赏价值的木本植物,如娇艳动人的山玉兰(Magnolia delavayi),既有花叶可观,又有美果可餐的猕猴桃(Actinidia chinensis),还有红果树(Stranvaesia davidiana)、血皮槭(Acer griseum)、青榨槭(A. davidii)、枇杷叶荚蒾(Viburnum rhytidophyllum)及巴山泠杉(Abies fargesii)和绣球藤(Clematis montana),以及偏翅唐松草等等;另外还有一些由谭微道、法盖斯和韩尔礼早年发现的著名观赏杜鹃种类,包括花淡红而大、芬芳宜人的喇叭杜鹃(Rhododedren disclor)和粉红杜鹃(Rh. Fargesii)等等。
威尔逊第二次来华引进的绿绒蒿,是一类生长在高山地带的罂粟科漂亮花卉,除了云南、西藏和青海的部分地区人民较熟悉它之外,生活在我国内地的人知道它的也不多。19世纪末大约是英国动物采集者普拉特曾到过川西的康定一带见到过。回去后,他对这种植物之美所作的描绘引起了人们的重视。可能是这个原因,激起西方人想要引种这种漂亮的花卉的愿望。1903年,威尔逊再次受雇同一公司来华引种这个美丽的花卉。此次威尔逊所去的地点主要在四川西部等地。成功地从川西北,将开艳丽黄花的全缘绿绒蒿(Meconopsis integrifolia)和丰采迥异的红花绿绒蒿(M. punicea)引进了西方,但后来这两种花并未像珙桐那样扬名四海。
组培的实验研究方案
快速繁殖的研究方法——
怎样选取最佳培养方案
植物组织培养所阐述的理论内容,在应用到具体植物和每个人所面临的试验条件时,都会遇到一些问题,如怎样协调各个环节,怎样选取一些最佳条件,工作中出现的情况怎样判断是否正常,怎样克服不利影响,怎样诱导培养物朝我们所希望的方向发展等等。下面将介绍一些解决上述问题的方法,即提出问题、设计实验,通过对实验结果的分析,找到答案。许多实验方法在多数情况下要结合自己的工作经验加以灵活运用。
在介绍各单项因素选取之前,先对常用的试验方法加以简要说明。
(一)、 植物组织培养中常用的试验方法
1、 预备性试验
在对某种植物发生兴趣,或对某项因素产生疑惑,或阅读某篇论文后联想到自己的试验中有类似的问题,要初试一下,就可以简单拟定一个方案,比较粗略地判断一下○1该因素是否有影响?○2如果有影响,它大体的程度和数量如何?能用一次较粗略的试验判断出上面两个问题,就基本达到预期目的了。然后便可循着预备试验的路子,设计较为完整的实验方案,已取得准确可靠的试验数据和加深对问题的认识。
预备性试验要求比较低,不必深思熟虑,不必很严格,往往灵机一动就做了。植物组织培养条件一旦具备之后,可以做许多工作,做了就摆在那里,观察培养物的反应,有反应的再接着做。通常愈有实验经验的人,愈能判断准确,是预备性试验有较高的命中率,能尽快发现科学研究上的突破口,并由此扩大战果。
预备性试验规模较小,条件要求不必面面俱到。在精力允许的情况下多做一点预备性试验,它能加快前进的步伐。预备性试验得出否定的结果也是极有用的信息,它可能预示问题不在这方面,或问题并不简单,这样也会使研究的思考深化。总之预备性试验耗费时间与精力较少,问题直截了当,能使下一阶段的工作更有把握。许多正规的研究往往都要做一些预备性试验,以找准因素及因素水平。
2、 单因子试验
单因子试验中,各项条件和因素都维持在一般水平上,只变动一个因子,以找出这一因子对试验的影响和影响的程度。例如MS培养基,其它成分和用量都不变,只变动NAA的用量在0 , 0.1, 0.5, 1.0mg/1之间,以找出NAA用量对某一培养生根的影响。这就是单因子试验。单因子试验,除了要研究的那一个变量以外,其余各方面都应尽量相同或者尽可能相近,实验应安排得很简单。一次变化一个因素,并把全部情况详细记录。通常在进行了预备性试验后,接着再安排一次较全面的单因子试验,就能确定该因子与试验结果之间的相互数量关系。
生物学试验不同于物理学或化学实验的地方很多,最重要与最显著的差别是在生物学试验中必要设置对照组与实验组,试验组可以有一组或几组,随试验的复杂性增加,对照组也可能有一组以上。要求对照组与试验组中的试验个体,即植物组织块或其它培养物,必须在遗传性、生理状态、前培养条件等等方面,尽可能完全一致(这在组织培养的工作中比较容易做到)。这是因为生物学研究对象的可变因素太多,许多事项难以直观地记录,也不便于将其转换为数字。试验材料来源不纯、不整齐,以后发生了变化,就会说不清是由于试验因子产生的效果,还是因材料之间不同所产生的结果。对照组通常不施加试验因子处理,或维持原先的培养条件。
在各组处理项目上,通常要用一定数量的试验材料,因此必须有一定数量重复。随试验规模和要求不同,大多每个项目要有4—10瓶,每瓶至少3块培养物或3丛小幼苗。这些材料接入的数量和质量都应细心地尽可能保持一致。设置的重复数量越大,试验进行的越仔细,所取得的结果也就越可靠。所得到的试验结果都应经过适当的数学处理,以便能够比较客观地评判试验结果的准确度与可信度。
3、多因子试验及正交设计
近几年来,由于有了现代统计学等数学方法的帮助,已有可能设计同时试验几个因子的若干个水平的复杂试验了。这样做已表现出了极其显著的优点,即节省时间和精力,同时提供了几个可变因子在交互作用时的效果。例如,采用正交设计,在使用L9表时就可以安排4个因子,3种水平的试验,一共做9种不同搭配的试验,其结果相当于做了27次种种搭配的试验。正交试验虽然是多个因素搭配在一起的试验,但是在试验结果的分析中,每一种因素所起的作用却又能够明白无误地表现出来。因此一次系统的试验结果,就可以把问题分析的清清楚楚,用有限的时间取得成倍的收获。在植物快速繁殖研究中,可用于同时探究培养基中适宜的几种成分的用量,如细胞分裂素、生长素、糖和其它成分的用量。当培养物有切实可靠的指标便于观察计算,即比较容易进行定量化处理的情况下,采用多因子试验都能起到推进试验进程的作用,收到事半功倍的效果。比如出苗数量、苗的高度、生根数量、根长度、移栽成活率等等。
在没有上述明确的可计数的指标时,如愈伤组织的生长状况,生长量、分化潜力等,可以根据经验目测,采用评定记分的方法,将状况与质量指标转黄为数字,再进行统计学处理。严格地说,上述指标经过仔细的测定分析,也可以定量化。比如愈伤组织的生长量,可以通过先称取空瓶(带培养基)重,接种后再称取重量,两次重量之差,便是初始接种物的初重量。经过一段时间的培养,先取出培养物(因不便无菌称量,如培养物不保留,则可直接称培养物)转移到已称量好瓶重的新鲜培养基上,再称量瓶重,求出培养物的末重量。初始重量之差,便是培养物的生长量。也可设置对照,称取干重量。可见手续很麻烦。在涉及到分化状况及潜力时,通过制备切片经显微镜观察,也能定出切合实际的数量指标,但上述过程只能用于确有价值的理论研究中。在大多数应用项目中,则嫌其过于繁琐而没有实用价值。凭经验判断打分的办法,误差因素太大,因此,在这种没有具体数字指标试验中,还是以单因子试验比较能说明问题。否则各因子之间的作用交织在一起,常使结果无法解释。
4、 逐步添加和逐步排除的试验方法
在植物组织分化与再生的研究中,在没有取得可靠的分化与再生之前,往往添加各种有机营养成分,而在取得了稳定的再生之后,就可以逐步减少这些成分。在逐步添加时是使试验成功,在逐步减少时是缩小范围,以便找到最有影响力的因子,或是为了实用上的需要竭力使培养基简化,以降低成本和利于推广。在寻求最佳激素配比时,也经常用到这种加加减减的简单方法。
(二) 主要培养条件及影响因子的选取
1、 基本培养基的选择
在已成功的试管繁殖的植物种类中,以采用MS为基本培养基的为最多。因此,在一般的培养中可先试用,如发现有不利的影响,或不够理想,要想对基本培养基加以改进的话,最好首先降低MS培养基的浓度,其次,可以选择在配料成分上与MS培养基有显著不同的其它培养基加以试用对比,如B5、White、Nitsch培养基等。通常微量元素和铁盐不必配成许多种,只按MS微量元素的配方配成,可用于其它培养基成分中。混合的微量元素一般配成的浓度是每升培养基中加入1ml或5ml。在取得稳定的分化增殖时,微量元素可以减少甚至省略。配方中微量元素用量也有很大差异,如ER培养基中的用量,就只有MS配方中的1/10。培养基中的有机成分变化最大,不必拘泥于某一配方的要求。在遇到难以分化的材料时,常常是增加培养基的复杂性,不断加添可能有希望的营养成分或者生理学上的活性物质,在培养成功后再逐步减去。因此可能发现,一些成分在推进试验结果方面,其实是些无关的因素。但是其中有些是起了推进作用的。在试验没有成功时,加入总比不加入好,多数有机成分的用量都不宜过高,如生物素常用0.01—0.1mg/1。某些有机物是植物组织生长分化的必需物质,是代谢环节中的电子传递体,在整体植物中它们可以自行合成,离体组织则合成减少或不能合成,或因伤口面积剧增、代谢消耗加强而供应不足,因此,即使加入很少,有和没有是不一样的。
基本培养基选取的实例:把月季丛生苗分别接种到MS、B5和White三种培养基上,这三种培养基除基本的无机盐配方以外,其它成分都完全相同。培养1个月以后,可以看到一点变化,第二个月,转接一次继续培养,第三个月再转接一次。这样,大约在第三个月末或第四个月初,即可看到这三种培养基对月季幼苗生长与增值的影响。其中以MS培养基最好,苗生长快,增值倍数高;B5培养基较差;而White培养基最差,幼苗生长慢,增值倍数低。试验结果如以MS为100%,B5约为86%,White约为73%。这样就可以选择MS培养基为基本条件,用于月季的试管繁殖。在这个例子中,三种培养基互为对照组,或认定MS处理的为对照组。
2、 植物激素配比的选择
从植物组织培养文献中所累积的资料看,要使植物组织分化出苗和使苗能快速增值,选择植物激素的种类和调节细胞分裂素与生长素的用量是最重要的一环。形象化地说:这是最灵敏的一个旋钮。
在选定或者暂时认定某一基本培养基后,或者同时,通常首先要考虑的都是植物激素的配比。例如,采用MS培养基,细胞分裂素用BA,生长素用NAA,用量:BA暂定为2mg/1,NAA暂定为0.1或者0.2mg/1,这样的培养基现在通用的写法为:MS+BA2+NAA0.1—0.2。培养温度为24—26℃,每天光照10小时。这种培养基和条件已使比较容易再生的上百种植物顺利分化和增值,初试不妨先试一试。
培养一段时间以后,可以根据大多数培养物及其中少数组织块的表现,来修订下次培养基中植物激素的用量。这一过程,也就是收集培养物对培养基及培养条件的“意见”。培养物的各种表现说明什么问题,以及应当如何调整,后面要做详细介绍。
预备试验也可以一种以上,如除上面一种以外,可扩展为:MS+BA1+NAA0.1,MS+BA3+NAA0.1等,如培养物反应不理想,可以查阅、参考近似科、属和属内其它种的培养条件。
选取不同激素用量也可以用两组单因子试验来进行:第一组找出适宜的BA用量,第二组找出适宜的NAA用量。
第一组 1—1 MS+BA1+NAA0.1
1—2 MS+BA2+NAA0.1
1—3 MS+BA4+NAA0.1
在这组试验中NAA的用量不变,注意观察BA对培养物的影响。
第二组 2-1 MS+BA2+NAA0.05
2-2 MS+BA2+NAA0.1
2-3 MS+BA2+NAA0.5
在这组试验中BA的用量不变,注意观察NAA对培养物的影响。
象这样比较简单的试验,就用不着BA和NAA两个因子都同时变。从试验结果中可以选出较优的一两种处理,或可预示在上两组试验中未曾出现的组合,需要调整后再继续试验。比如上述试验中1-2较好,2-3较好,重新试验时,就可以选MS+BA2+NAA0.5的激素配比。
也可以计量级变化更大的试验,作预选,形象地说进行筛选的“筛眼”更粗大些,探测范围更宽些。如BA选定1、3、5mg/1;NAA选定为0.05、0.5、5mg/1;或者0.01、0.1、1.0、5.0mg/1等等。在这组试验结果明朗以后,比较优组合为出发呆呢再设计新的组合,并将量级划小,两三轮试验后,定可找到最佳的激素组合。
对于许多植物来说,这样的试验已足够了。特殊情况下,如解决不了问题,就可进一步选用KT、ZT、2-ip等其它细胞分裂素,以及IAA、IBA、2,4-D等其它生长素,并试用正交试验法、优选法等安排多因子的试验。以细致耐心的多次试验,逐步缩小包围圈,最后找到适宜的细胞分裂素、生长素的种类与用量,使该种植物能顺利地高速繁殖。
应当记住,所有试验应在相同的培养基上重复继代2-3次,以确证其效果。如果把少量试验材料在颇大差异的培养基上转来转去,弄得试验结果无法分析,是不能提供真实数据的。最妥善的办法是加大工作量,重新开始,消毒和接种更多的试材,并仔细试验与观察。
3、 糖浓度的选取
采用单因子试验,或结合植物激素的选取,采用正交试验来确定最佳糖浓度。通常选择的幅度很小。对大多数植物来说,适宜的浓度为20或30g/1,个别情况用到40g/1.在花药培养时变化幅度较大,有时用到70—150g/1。
4、 PH值的选取
一般植物对PH值的要求不很严格,如山茶、杜鹃和叶子花等,可以适当降低PH值到5.4或5.0。试用于新培养的种类时,可参考过去已发表的类似植物。采用只变动PH值的单因子试验,可以迅速了解到适宜的PH值。第一次可试用PH5.0、5.4、5.8及6.2,等第一次结果出来后,再细调一次,即可确定出最佳PH值。
在培养过程中,培养基的PH值会随养分消耗而变动,因此量级差别太小时,试验结果的差异也不明显,只要培养物的生长增值能满足快速繁殖的要求,就不必过于精心。
5、 温度和光照
在没有专门的设备条件下,温度和光照要求的选取也不必过细。利用培养架的顶部、中部、下部,分别放置培养瓶和温度计,经过一段时间的培养,即可比较出该植物需要的温度范围。对光强的需要,可通过植物距离光源的远近不同来比较得出。没有特殊的需要,一般不做光周期的研究,打多数专家认为10-14小时光照时必需的。
有条件的单位可以购置光照培养箱。这种设备可以准确地控制每天光照的时间,即可任意控制光照和黑暗的周期性变化,光强度可通过灯盏的数目给予调节。设有升温和降温装置,能调到任意,变化范围在+1℃左右。光照培养箱对于研究培养物的春化处理和光周期对植物发育的影响是较理想的。箱内的湿度只能作大体上的调节,但这一点关系并不很重要,因为培养瓶中的湿度一般都是打到100%的。如果妥为利用,在这样的试验条件下,能够影响植物生长发育的几个最重要的因素,都已在人为地控制下了。这是目前在微型整体水平、组织或器官水平、细胞水平上能比较精密控制的较理想的设备。用这种光照培养箱当然可以方便迅速地找出某种植物快速繁殖所要求的最佳温度和最佳光照条件。
6、 综合因子的最终确定
在各个单项因子的最佳条件找到以后,将这些最佳条件综合到一起,进行全面实验,并根据实验结果,再做适当调整,试验工作就可结束,将研究成果扩大,应用到大规模的快速繁殖中去。
什么叫植物组织陪养,以月季花为例说明植物组织陪养的步骤
植物的组织培养广义又叫离体培养,指从植物体分离出符合需要的组织、器官或细胞,原生质体等,通过无菌操作,在无菌条件下接种在含有各种营养物质及植物激素的培养基上进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。狭义是指组培指用植物各部分组织,如形成层、薄壁组织、叶肉组织、胚乳等进行培养获得再生植株,也指在培养过程中从各器官上产生愈伤组织的培养,愈伤组织再经过再分化形成再生植物。
月季组织培养,取芽时要在无病虫害的优良品种单株上进行,选取生长健壮的当年生枝条,取其饱满的未萌芽作为外植体,因枝条顶部和基部的侧芽萌发能力较差,取中部的芽效果最好,也可以选用顶芽作为外植体,但培养效果不如侧芽。将取回的材料用手术刀片切去叶片及叶柄,切成1-2cm的带节茎段,将清理好的材料在自来水下冲洗干净,然后在无菌条件下加入0.1%的升汞溶液灭菌12min,再转入1%-1.5%的次氯酸钠溶液中浸泡10min,取出在无菌水中清洗2-4次;在整个灭菌和清洗过程总,应不停地摇动瓶子,使其充分与消毒液接触,否则会影响消毒和灭菌效果,灭菌后的外植体取出后用无菌滤纸吸干水分待用。
萌生芽会不断长大,并可从茎段上分化出3-4个不定芽,这时可通过侧芽增殖和不定芽再生的方式进行继代增殖,切割出不定芽或将幼芽分切成每段含1-2个节的茎段,转入增殖培养中,每隔4周继代一次。无论进行诱导、增殖、生根培养,培养室的温度都在以21℃左右时效果最好,诱导萌芽的光照为800-1200Ix,光照时间为10-12h/d,增殖及壮苗生根的光照强度较诱导培养时稍强,需2000-3000Ix。月季组培苗的出瓶标准为苗木健壮,苗高2-3cm,具有良好的根系或根原基,有2-3对叶,无叶片黄化或落叶现象,过滤成活率高,过渡后的小苗根系健壮,植株的长势旺盛,叶色正常,无病虫害和浸染症状,下地定植后能够迅速恢复生长。
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