酶活力的研究论文

酶活力的研究论文

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时隔六年，韩春雨再发表新论文，文中哪些信息值得关注？

时隔六年，韩春雨再发表新论文，文中哪些信息值得关注？下面就我们来针对这个问题进行一番探讨，希望这些内容能够帮到有需要的朋友们。

2022年1月21日，韩春雨在期刊（IF=16.971）发布了全新研究论文，落款企业为河北科技大学基因编辑研究中心。这间距他那时候造成极大的关注和异议的NgAgo研究论文早已过去快6年时间。

在这篇新论文中，韩春雨团队开发设计了一种新的根据Cas6的RNA荧光追踪服务平台，其具备更多的精确度和非特异。

该研究称NgAgo对真核生物（包含人）具备基因编辑技术工作能力。该研究取得成功迅速在全世界范畴内爆红，韩春雨教师先前籍籍无名，几乎一夜之间变成学界网络红人，被赞扬为“在三流学校获得全球一流原创设计成效，摆脱国际性基因编辑技术垄断性”。

该论文通讯作者为韩春雨，第一作者为高峰期，浙江大学专家教授沈啸为一同通讯作者，但在后面改动版本号中，沈啸从创作者名册中去除开。

2016年8月，河北科技大学创立基因编辑研究中心，方案资金投入资产逾2亿人民币。但NgAgo的研究成效引起普遍怀疑。

2017年8月3日，韩春雨撤销该论文。2018年8月31日，河北科技大学取消了韩春雨所获取的光荣称号，停止了韩春雨团队担负的科研课题并取回了科研费，取回了韩春雨团队所获校科学研究业绩考核奖赏。

2019年4月4日，预印本bioRxiv发表了一篇来源于美国普渡大学研究工作人员的研究论文，表明NgAgo根据Dna内切酶活力受体提高大肠埃希菌的同源重组。该研究表明NgAgo可以编写原核生物，但不可以编写真核生物基因。详细信息点一下：NgAgo可在原核生物上基因编辑技术

RNA在体细胞中的精准定位与其说作用息息相关，因而，开发设计用以追踪RNA在体细胞中遍布的技术性巨大地推动了RNA分子生物学的研究。近期，荧光蛋清标识的Cas9和Cas13在体细胞RNA追踪中的自主创新运用进一步充实了这一行业的研究辅助工具。

殊不知，Cas9和Cas13服务平台及其普遍采用的MS2-MCP技术性无法处理高声音分贝的问题。Cas6是I-E型CRISPR分子伴侣的关键部件，它根据鉴别具备Cas6融合结构域的茎环RNA完成融合并激光切割pre-crRNA。pre-crRNA的Cas6融合结构域与Cas6融合后可诱发Cas6的构像更改，造成其N端和C端并排。运用这一特点，韩春雨等人设计方案了一个根据Cas6的电源开关服务平台，用以在身体内检验和追踪总体目标RNA。

将split-Venus片段与来源于大肠埃希菌的内切圆核酸酶活力缺失的Cas6（dEcCas6）的N端（Venus-N，VN）和C端（Venus-C，VC）融合，结合的嵌合体VN-dEcCas6-VC与目地RNA融合时才会造成荧光。

因为其荧光相辅相成是由Cas6的变构电源开关受体的，因而韩春雨团队将其取名为根据Cas6的荧光相辅相成服务平台（Cas6FC）。

在体细胞中，Cas6FC可以几乎没有声音分贝的检验总体目标RNA。除此之外，只需在有兴趣的RNA中标识一个长为29nt的CBS团本，就能开启Cas6FC荧光，这极大降低了总体目标RNA构想和市场定位的潜在性更改的概率。

总体来说，韩春雨团队开发设计了一种新的根据Cas6的RNA荧光追踪服务平台，其具备更多的精确度和非特异。

值得一提的是，这篇论文的具体内容早在2019年7月份，就在预印本bioRxiv上线。如今这也是通过同行评议后宣布发布。

急求药物代谢论文1500字

中药是中华民族的伟大瑰宝，有着丰富的资源和悠久的
传承历史，历经了千百年的临床实践，虽然积累了丰富的临床
经验，为中华民族的健康事业作出巨大的贡献。但是中药的
研发仍然充满了挑战，如药材来源变异大、有效成分不明、质
量控制困难、缺乏清晰准确的安全性评价、药理作用机制不明
等等。因此，至今还没有一种中药通过美国FDA的新药审
批；而且，欧盟已经颁发了(欧盟传统药品法案)，也直接影响
了中药的出口。为了扭转目前这种尴尬的境地，实现真正与
国际接轨。发展祖国中医药事业，必须对中药的安全性、作用
机理及其药理活性成分有明确的认识，并深入剖析。近十多
年来。在西方药物发现和开发阶段利用体外和计算机辅助研
究技术进行化合物的吸收、分布、代谢、排泄和毒性(ADME／
T)特性研究，大大提高了新药研发的成功率【1]。所以借鉴西
方新药研发的成功经验，将ADME／T评价体系引入到中药的
研究中。特别是药物代谢研究，不仅有利于揭示中药的真正有
效成分和作用机理，而且有利于研究中药复方的配伍规律等。
本文将综述药物代谢(Dmg Metabolism)在中药研究中的应用
概况及其进展。
1 药物的代谢
药物在机体内的消除方式主要有两种：一种是药物不经
任何代谢而直接以原型随粪便和尿液排出体外；另一种是部
分药物在体内经代谢后，再以原型和代谢物的形式随粪便和
尿液排出体外。药物的代谢(drug metabolism)也称为药物生
物转化(biotransformation)，是药物从体内消除的主要方式之
一【2J
。药物在体内的代谢主要分为两个步骤【3j，第一步称为
I相代谢反应。药物在I相反应中被氧化、还原或水解，催化
I相代谢反应的酶主要为肝微粒体中的细胞色素P450酶。
第二步称为Ⅱ相结合反应。药物在Ⅱ相结合反应中与一些内
源性的物质(如葡萄糖醛酸、硫酸、甘氨酸、谷胱甘肽等)结合
或经甲基化、乙酰化后排出体外。催化Ⅱ相结合反应的酶主要
有葡萄糖醛酸转移酶、谷胱甘肽一s一转移酶、磺基转移酶和
乙酰基转移酶等【4 】。其中P450酶在众多外来化合物的生
物转化过程中扮演了重要角色，被P450酶催化的底物相当广
泛，90％以上药物的氧化是由P450酶催化的。是人体内最重
要的代谢酶，其催化的I相代谢反应是化合物在体内代谢的
关键步骤。因为这一步反应通常是药物从体内清除的限速步
骤，可影响化合物的半衰期、清除率等动力学特性，且P450酶活性常常随遗传因素、年龄、疾病状态或其他药物相互作用的
影响而发生改变L7J。
一般来说，药物在体内经过代谢转化后其药理活性发生
了较为复杂的变化，大致分为四种情况：第一，代谢物活性或
毒性降低；第二，形成活性代谢物；第三，形成毒性代谢物；第
四，前药的代谢激活。总之，药物代谢转化的最终结果是使药
物极性增加。有利于药物的排出体外【2．3】。
2 药物代谢研究的方法
药物代谢的研究方法分为体内法和体外法，两者各有优
缺点，所以通常两者相结合进行药物的评价研究。体外研究
可以通过高通量筛选对大量化合物进行筛选，对大量候选化
合物的药动学特性作出初步的评价。缩小体内筛选的范围，一
般应用于药物发现和开发的初期。体内代谢研究是体外研究
的良好的衔接点，因为有时候应用体外模型预测体内参数不
理想，必须借助体内筛选。当然在药物开发的后期，也要进行
动物和人体体内药物代谢研究，总之，两者相辅相成【3J。
2．1 体内法药物的体内代谢研究主要是在整体水平上进
行的。给予一定剂量的药物后，于不同的时间段分别收集胆
汁、尿液和粪便，然后用高效液相色谱法(HPLC)或液质联用
技术(LC-MS／MS)等方法在胆汁、尿液和粪便样品中寻找药
物的代谢物(包括I相和Ⅱ相代谢物)。并对代谢产物进行初
步的分析和鉴定，最终确定药物在体内的代谢途径。
2．2 体外法肝脏是药物代谢的主要和重要器官之一，是药
物生物转化的主要场所，因为富含有丰富的肝药酶，所以大部
分的药物在肝脏被代谢。故药物的体外代谢模型多以肝脏为
基础。常见的有：肝微粒体体外温孵法、肝细胞体外温孵法、离
体肝灌流法、肝切片法和重组I)450酶体外温孵法等。药物体
外代谢研究中应用到的方法除了高效液相色谱法(HPLC)或
液质联用技术(LCMS／Ms)，还有分子生物学的方法，如we．
ston bloting等。体外法因有其独特的快速简便和节约成本等
优势和特点。所以在药物代谢研究中得到了广泛的应用。
除了肝脏以外，口服药物还必须经过胃肠道消化吸收后
才能进入血液发挥疗效(如人参皂苷的体内代谢[8 )，因此药
物在胃肠内菌群的代谢越来越受到人们的重视，而且已经有
人把药物在肠内菌代谢的研究引入到药物代谢的研究范畴。
其常见的研究方法也有整体肠内菌代谢实验和离体实验两
种，前者是对人或动物服药后的消化道各部分及其内容物进
行分析，后者有粪便温孵法和消化道内容物温孵法，随着微生
物技术的发展，也可用肠内菌纯菌株、混合菌或粗酶进行代谢
研究。3 药物代谢在中药研究中的应用
3．1 中药代谢产物谱的定性研究
要了解中药在体内的代谢转化规律，首先应该明白其在
体内转化成什么产物，而且这些产物有可能是活性增强的产
物或活性减弱的产物。也有可能是毒性成分。因此对代谢产物
谱的研究显得特别重要，它不仅可以阐明其在体内的代谢途
径和机制，也可以进行代谢产物的有效性和安全性评价。国
内对这一方面的研究报道较多，一般是将中药代谢后的各种
生物样品采用各种手段分离后进行分析鉴定。如阿基业等人
给予大鼠一定剂量的盐酸关附甲素后，在不同时间间隔收集
大鼠尿液，应用液质联用法进行分析鉴定。结果表明关附甲素
在大鼠体内可以转化成为关附壬索、关附醇胺、关附甲素葡萄
糖醛酸和硫酸结合物、关附壬索葡萄糖醛酸和硫酸结合物，经
过生物转化，代谢产物的极性增加，药效下降【9j。李晓海等人
采用大鼠肝微粒体体外温孵法和大鼠体内法对左旋一叶蔌碱
的代谢转化进行了研究，代谢产物分别鉴定为6一位羟基、6．位
羰基及5一位a及B羟基取代的左旋一叶蔌碱，还证实了体内
6一位羟基代谢物进一步形成了Ⅱ相结合物。最终基本阐明左
旋一叶蔌碱在大鼠体内外代谢转化的途径Cio】。徐文等人将
待测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ与新鲜配制的大鼠肠内溶物悬
液在37℃孵化，采用高效液相色谱同时测定孵化前后溶液中
淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ的浓度，结果表明淫羊藿苷被肠道
菌群迅速代谢成淫羊藿次苷Ⅱ，而淫羊藿次苷Ⅱ不被代
谢[11]。
3．2 中药代谢酶谱的研究
鉴定参与中药代谢的代谢酶种类及其贡献，对中药现代
化的研究同样重要。因为遗传因索和环境因素造成人体对药
物代谢的存在差异，这种差异表现为代谢酶的表达差异，其根
本原因是代谢酶的基因多态性决定的，依此可将人群分为强、
中和弱代谢型等表型C12J。强代谢者和弱代谢者之间药代动
力学性质存在显著差异[13J，因此给予不同代谢表型人群相同
的剂量，药物产生的疗效会完全不一样。甚至会中毒现象的发
生【l 。所以鉴定参与中药代谢的代谢酶种类及其贡献有利
于指导临床合理用药，保证用药安全有效。此外中药代谢酶
谱的研究还有利于研究中药的配伍规律、中药毒性研究等。
高凯等人采用大鼠肝微粒体体外温孵法和高效液相色谱技
术，通过运用不同的CYP同工酶选择性抑制剂和底物进行抑
制实验，初步选出介导甘草次酸单羟化所涉及的CYP同工酶
为CYP 3A1／2和CYP 2C9／10 cis}，研究结果提示当甘草次酸
在CYP 3A1／2和CYP 2C9／lO弱表达的代谢者人群中使用
时，应该注意剂量的控制，否则可能会出现中药的安全性问
题。
3．3 中药对代谢酶的诱导或抑制以及药物间相互作用研究
中药的化学成分非常复杂。许多中药有效成分对
CYP450酶表现出明显的诱导或抑制。如中药白芷中富含呋
哺香豆素化合物，研究发现白芷提取物可以抑制大鼠肝微粒
体CYP 3A、CYP 2C和CYP 2D1的活性，所以会抑制甲苯磺
丁脲、地西泮、硝苯地平等在体内的代谢[16]。中药黄芩的主
要有效成分黄芩苷。对 1Al、CYP 2B1和CYP 2Cll这3种同工酶有明显的诱导作用【l 。
中药在lJ笛床上常复方用药或与化合物合并用药。这就有
可能发生药物间的相互作用，引起药效、药动学、毒性等的变
化。药物间的相互作用主要表现为药物代谢酶的诱导或抑
制。如人参的有效成分人参皂苷Rd，它对CYP3A4有抑制作
用；而人参再造丸、通心络等中成药组方中又含有人参，因此
如果患者在服用通心络、人参再造丸等中成药时，同时服用经
CYP3A4代谢的化学药硝苯地平、胺碘酮等，就可能会导致低
血压等不良反应[18]。高月等人考察中药丹参、苦参、人参及
其与藜芦合用对大鼠肝P450酶活力及mRNA表达的影响，
结果显示这3种中药与藜芦配伍合用后均不同程度的抑制了
P450酶含量和主要的药物代谢酶CYP3A及CYP2E1的酶活
力。提示可能正是由于3种中药与藜芦配伍后对药物代谢酶
的抑制作用减缓了剧毒中药藜芦中相关物质的代谢．致毒性
增加，产生了不期望的中药毒性【l 。
4 展望
随着科学技术的发展，中药代谢的研究除了深入研究单
一成分的代谢外。首先应加强有效部位、单味药材和中药复方
的代谢研究，这样才能更准确更全面的阐明中药的药效作用
机制；其次，应该深入开展中药基于代谢酶的配伍规律的研
究，阐明中药复方中各单味药材之间的相互关系以及中药复
方的解毒机制。总之，随着中药代谢的深入研究，以及其他学
科和技术的合作。必将揭示中药的代谢规律、中药的配伍规律
和解毒机制等，为中药新药的研制、创新药物的发现以及指导
临床用药作出贡献。