脑卒中医学论文
脑卒中医学论文
谈补阳还五汤对脑缺血大鼠神经功能及细胞形态的影响论文
脑缺血属中风范畴,是临床常见病,具有高发病率、高死亡率及高致残率的特点,严重危害着人类健康。迄今为止,国内外在治疗脑缺血及其后遗症方面还缺少有效的化学治疗药物。循证医学表明,中医药对缺血性脑卒中的治疗有一定优势。当前大量研究集中在中药对急性脑缺血损伤的保护作用。而脑缺血后的功能恢复是一个较长时间过程,目前对其进行较长时间观察的研究较少。出自清代王清任《医林改错》的补阳还五汤,是治疗缺血性中风及中风后遗症的经典名方,该方在临床上应用广泛且疗效确切,但其促神经功能恢复机制还需进一步阐明。本文采用大脑中动脉线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型,探讨了补阳还五汤较长时间多时间点对其神经功能的.保护作用,以期为治疗缺血性脑中风临床用药提供实验依据。
1 材料
1. 1 动物健康雄性SD 大鼠189 只,SPF 级,体重260 ~ 280 g,购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司,生产许可证号SCXK( 湘) 2009-0004,动物合格证号004535。
1. 2 药物补阳还五汤处方来源于清·王清任《医林改错》,按原方组成: 黄芪120 g,赤芍4. 5 g,川芎3 g,归尾6 g,干地龙3 g,红花3 g,桃仁3 g,药材经湖南中医药研究院鉴定均符合《中国药典》2005 年版标准。补阳还五汤药剂制备: 饮片先用清水浸泡30 min,第一煎加药材及5 倍体积双蒸水,煎煮60min,二煎5 倍体积双蒸水,煎煮60 min,两煎混匀,浓缩至含生药2 g·mL - 1,冷藏待用。
1. 3 试剂10% 水合氯醛( 扬州市奥鑫助剂厂) ,多聚甲醛( 长沙市锦华化工有限公司) ,TTC( 红四氮唑,Sigma 公司) 。
1. 4 仪器Bx51 光学显微镜及IPP5. 1 图像分析系统( 日本Olympus) ,FA 型电子天平( 上海台之衡电子衡器有限公司) ,自动双重纯水蒸馏器( 上海玻璃仪器一厂) ,Finesse 325 型石蜡切片机( 英国Shando) 。
2 方法
2. 1 分组与给药将大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组,每组63 只,每组动物又分3 个时间点,即分别于首次给药后7, 14, 21 d 处死,每个时间点21 只动物。补阳还五汤组动物于术后2 h后开始给药,给药剂量为5 g·kg - 1·d - 1,每日ig 1次。模型组和假手术组动物均给予等体积蒸馏水。
2. 2 模型制备与评价参照文献采用大脑中动脉线栓法复制大鼠局灶性脑缺血模型: 10% 水合氯醛( 3. 5 mL·kg - 1 ) ip 麻醉,取颈正中切口长约3cm,逐层分离,结扎颈外动脉,夹闭颈内动脉、再结扎颈总动脉,于颈总动脉充盈分叉部下方约4 mm处将一长为4 cm 直径为0. 26 mm 的尼龙鱼线插入颈内动脉,直到遇到轻微阻力为止,固定尼龙线,缝合切口。假手术组仅切开皮肤、分离左侧颈总动脉后随即缝合。术后将动物置于放有清洁垫料的饲养盒内,自由饮水、进食。动物清醒2 h 后参照Longa及Bederson的5 分制法进行神经功能评分,分值在1 ~ 3 分者入组。0 分: 无神经损伤症状; 1 分: 不能完全伸展对侧前爪; 2 分: 向对侧转圈; 3 分: 向对侧倾倒; 4 分: 不能自发行走,意识丧失。评分越高,神经功能缺损越严重,反之亦然。不纳入标准: 评分低于1 分; 蛛网膜下腔出血; HE 染色无脑缺血病理改变; 未到时间点死亡。死亡等不足动物时随机替补。
2. 3 指标检测
2. 3. 1 TTC 染色测脑梗死面积比每组每个时间点5 只大鼠, 10% 水合氯醛麻醉后,断头取大脑,置于- 20 ℃ 冷冻20 min 后,自额极每隔2 mm 切1片。第1 刀在脑前极与视交叉连线中点处; 第2 刀在视交叉部位; 第3 刀在漏斗柄部位; 第4 刀在漏斗柄与后叶尾极之间,共A,B,C,D,E 5 片。用2%的红四氮唑染色,37 ℃下避光30 min,正常组织呈深红色,而梗死组织则为白色。拍照后选最大缺血断面C 片梗死面积,运用Image-Pro Express 图像分析系统扫描计算,取梗死面积占C 片大脑总面积的百分比表示。为消除梗死侧大脑半球因脑水肿造成的误差,按Swanson 方法进行校正后计算C 片梗死面积百分比( IS) 。IS = ( S1 - Sr) /2S1 × 100%S1: C 片健侧总面积; Sr: C 片患侧非梗死区面积。
2. 3. 2 神经功能评分每组每个时间点10 只大鼠,于术后2 h 及动物处死前1 h 进行神经功能评分。
2. 3. 3 HE 染色观察海马、皮质组织病理学变化每组每个时间点6 只。同2. 3. 1 取大脑后4% 多聚甲醛固定24 h,梯度乙醇脱水,常规石蜡包埋,脑冠状连续切片( 片厚5 μm) ,取含海马切片贴于载玻片上,随后HE 染色,光镜下观察比较各组大鼠左侧海马、皮质组织细胞形态病理学改变。
2. 4 统计学分析
所有数据以珋x ± s 表示,应用SPSS 19. 0 统计软件对数据进行统计分析,组间比较用单因素方差分析,P < 0. 05 被认为具有统计学意义。
3 结果
3. 1 各组脑梗死面积比较通过TTC 染色,假手术组着色比较均匀,为深红色; 7, 14, 21 d 模型组与补阳还五汤组染色不均匀,局部梗死区为白色,梗死部位在缺血侧顶叶大脑皮质、海马周围。梗死面积分析显示,模型组和补阳还五汤组随时间点后延脑梗死面积均逐渐缩小( P < 0. 05) ; 且7, 14, 21 d 补阳还五汤组梗死面积明显小于同时相模型组,差异具有统计学意义( P < 0. 05) 。
3. 2 各组神经功能评分情况假手术组各时间点大鼠神经功能评分均为0 分; 补阳还五汤组各时间点神经功能评分均较同时相模型组低,差异具有统计学意义( P < 0. 05) 。
3. 3 各组海马、皮质组织细胞形态学变化
3. 3. 1 海马假手术组海马细胞形态正常,细胞轮廓清晰可见,细胞核染色均匀,细胞排列整齐,间质着色均匀。7,14,21 d 模型组海马神经细胞皱缩,出现细胞核固缩,核边集严重,细胞内有空泡,细胞形态由椭圆形变成梭形、三角形,细胞间间距增大,间质染色稀疏,有空洞。7, 14, 21 d 补阳还五汤组海马细胞空泡样细胞较模型组明显减少,细胞形态明显改善,细胞排列较模型组整齐。7,14 d 补阳还五汤组仍存在少量核深染及空泡样改变细胞,但21 d 补阳还五汤组海马细胞形态接近假手术组。
3. 3. 2 皮质假手术组皮质细胞形态正常,边缘清晰,排列整齐,形态完整,胞核着色均匀,细胞间质染色均匀。7,14,21 d 模型组缺血细胞呈空泡样坏死,细胞形态丧失,细胞间间隙增大,染色变浅,呈网状改变; 残存细胞其体积缩小、细胞核固缩深染、细胞边界不清。补阳还五汤组各时间点皮质细胞空泡样细胞较同时间相模型组明显减少,细胞形态明显改善,细胞排列整齐,神经细胞核较清晰,细胞间隙染色较均匀。
4 讨论
局灶性脑缺血又称缺血性脑卒中,是由于脑的血液供应障碍,导致脑组织缺血、缺氧,所致相应区域脑梗死性坏死,大量神经元丧失,而产生相应的神经功能缺损症状与体征,是脑血管疾病中最为常见的临床类型。目前西医治疗脑缺血的主要方法包括溶栓、抗凝、降纤、扩血管、高压氧、介入治疗等,还有尚处于动物实验阶段的基因治疗、神经干细胞移植等。这些治疗方法中除了超早期( 发病3 h 内)溶栓治疗有效率高达21% ~ 93%,其他疗法效果并不确定。而且溶栓治疗因其严格的时间窗,意味着只有不到5% 的病人有机会进行这一治疗。因此,缺血性脑中风的病人约80% 留下不同程度的后遗症——神经功能缺损。
典型的缺血性脑卒中在临床上可按照病程分为3 期。第1 期急性期,脑卒中后1 个月内; 第2 期恢复期,脑卒中后2 ~ 6 个月内; 第3 期后遗症期,脑卒中6 个月后。补阳还五汤主要用于脑缺血恢复期及后遗症期治疗,是治疗脑缺血后遗症的首选方,临床应用疗效显著。因此在动物实验中我们观察的时间点最长达到缺血后21 d,这相当于人脑缺血后遗症期。本实验研究中,神经功能评分结果表明补阳还五汤能促进脑缺血后大鼠神经功能恢复。其作用机制有学者认为与促血管生成、扩血管、抗凝、溶栓等改善脑缺血局部微循环,减轻脑水肿及氧自由基损伤,保护脑组织,从而促进神经功能恢复。本实验室及国内其他实验室研究表明补阳还五汤能促进缺血后脑内神经干细胞增殖、迁移、分化,可能也是其促进缺血后神经功能恢复机制之一。通过比较各组动物脑梗死面积比,结果显示补阳还五汤各时间点分别较同时间相模型组脑梗死面积明显缩小。可能的原因有: 其一,补阳还五汤在脑缺血急性期起脑保护作用,抑制了大量神经元死亡与凋亡导致梗死面积变小; 其二,补阳还五汤促进缺血后脑组织再生、修复、代偿,而导致梗死面积较相应的模型组缩小; 二者也可能兼而有之。另外,通过比较补阳还五汤组与模型组缺血后海马、皮质组织学改变,结果表明补阳还五汤能明显改善细胞形态与排列,促进脑缺血损伤后组织修复。
总之,本研究证实了补阳还五汤具有降低脑缺血神经功能评分、减小脑梗死面积、改善脑组织细胞形态与排列的脑保护作用,为该药临床治疗缺血性脑卒中提供了有力的实验依据。
缺血性脑中风患者高压氧治疗护理分析论文
缺血性脑中风是由于脑动脉闭塞或狭窄,引起脑血流量阻塞会导致脑组织缺氧缺血脑组织坏死,甚至导致大脑血管和神经功能障碍。缺血性中风发生在老年人,有更高的患病和病死率。各种临床治疗,疗效不一,高压氧治疗已被临床接受治疗。48例缺血性中风治疗的高压氧治疗,取得了显著的临床疗效。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2007年12月~2013年12月收治的经临床检查、头颅CT或者MRI确诊,均符合第四届全国脑血管疾病会议制定的相关标准的96例缺血性脑中风患者,随机分为对照组和治疗组,各48例。对照组中男26例,女22例,年龄42~86岁,平均(66.42±10.35)岁:轻度24例,中度18例,重度6例。治疗组中男29例,女19例,年龄38~82岁,平均(63.26±11.03)岁;轻度16例,中度22例,重度10例。两组在年龄,性别,病重程度方面比较无明显差异(P>0.05),具有可比性。
1.2方法
对照组给予常规治疗,包括降低颅内压,扩张血管,预防感染,抗血小板,控制血糖和血压,抗凝治疗,保护脑细胞,患者生命体征稳定后进行常规康复训练。治疗组在对照组的基础上给予康复训练和高压氧治疗,治疗前进行心理咨询,消除焦虑,恐惧,使其能配合治疗。使用单人的纯氧加压舱,治疗后20min将压力逐渐上升到0.2~0.25MPa(2~2.5ATA)稳压。治疗50min后舱内压逐渐减到正常压;每次治疗时间约90min,每日一次,一疗程10天,视患者恢复情况给予3~4疗程治疗。
1.3疗效评定标准
使用1995年第四届全国脑血管病会议通过的脑卒中患者临床神经功能缺损评分标准。结合临床疗效评价标准评分。分数92%~100%,患病程度级别0为基本复苏;分数在46%~90%的病人在不同层次1~3水平显著提高;得分在18%~45%好转;得分低于17%为无效。死亡,其中包括基本恢复,显著改善、改进方案是有效的`。
2结果
两组临床疗效比较,对照组基本痊愈率18.75%,总有效率为77.08%;治疗组基本痊愈率为27.08%,总有效率91.66%;治疗组基本治总率与总有效率均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
3讨论
中风临床治疗是基于大脑可塑理论和大脑功能重建理论为基础。中风的病理损害大脑血液供应区域减少或消失,导致脑组织氧障碍,造成缺氧脑组织和神经功能不可逆转损害。在正常压力下给氧治疗方法不能完全正确的纠正大脑缺氧症状,高压氧可迅速改善脑组织氧供应和存储。2ATA氧疗法能增强氧气扩散的能力,增加氧气弥散在组织内有效的扩散。高压氧疗法通过增加氧气有效分散和满足所需的氧气,大脑细胞的重组和再生神经细胞功能提供了必要的基础。高压氧治疗的机制主要是:高压氧气增加血液中的氧含量,并增加血液氧气分压,加强氧气扩散和地区,使中枢神经系统、呼吸系统和循环系统的一系列生理变化,高压氧气可以提高氧气传输和传输速度,进入氧细胞在脑缺血区域,有效地减少梗死面积,降低神经功能缺损的程度;高氧含量会导致脑血管收缩,减少大脑的血流量,因此,高压氧可以有效降低颅内压,减轻脑水肿的症状,因此,高压氧治疗效果早期缺血性中风二级水肿;高压氧可有效抑制血小板聚集,从而降低血液粘度会增加血红细胞变性和变形能力,有利于脑组织氧合过程,加速血栓的溶解和吸收,促进局部血液供应,微循环改善,高压氧对大脑病变区域毛细血管再生刺激,有助于建立侧肢循环。研究结果显示,治疗组与对照组比较,发现治疗前采用心理护理,足够疗程的高压氧治疗后,治疗组临床基本治愈率与总有效率均明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),这充分说明了高压氧治疗缺血性脑中风有确切疗效。
医学论文正文应该怎么写
医学论文正文部分通常包括引言、材料与方法、结果和讨论等部分。
引言:引言部分主要介绍研究背景、目的和意义,同时对相关文献进行综述,为后续研究内容做铺垫。在撰写引言时,应该明确提出研究问题,并简明扼要地阐述研究背景和目的,以及相关领域的研究现状和研究空白。
材料与方法:材料与方法部分主要描述实验设计、数据采集和分析方法等,是研究过程的具体阐述。在这一部分中,应该详细描述实验对象、实验设计、实验操作过程、数据采集和分析方法等,以便读者能够了解研究的可靠性。
结果:结果部分是论文的核心,主要展示研究结果和数据分析。在这一部分中,应该客观地呈现研究结果,避免夸大或缩小研究结论。同时,应该注意数据的准确性和可信度,以及图表和文字的规范表达。
讨论:讨论部分主要对研究结果进行解释和讨论,阐述研究结果的意义和价值。在这一部分中,应该对研究结果进行深入分析,并与相关文献进行比较和讨论,进一步阐述研究的创新性和实用性。
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