RNA的提取最经典的也是最靠谱的还是TRIZOL提取1．1TRIZOL试剂盒提取酵母菌总RNA按BBI公司提供的TRIZOL试剂使用说明书进行操作：取1ml指数中期的酵母培养液，经计数后（酵母菌每1×108个加1mlTRIZOL）离心收集菌体，加入1mlTRIZOL，混匀，激烈振荡，室温放置5min，加入200μl氯仿，剧烈振荡30s，12000×g离心5min，上层水相移入一个新离心管中，加入等体积的异丙醇，室温放置5min，12000×g高速离心5min弃上清，用75％乙醇洗涤RNA沉淀2次，用30μlDEPC－H2O溶解RNA沉淀。产物用于电泳分析或在－20℃保存。1．2TRIZOL试剂盒改进方法提取酵母菌总RNA在收集菌体之前加入1％的蜗牛酶30℃温育20min（对照组温育50min），然后进行菌体离心收集加入1mlTRIZOL，混匀，振荡，冰浴5min，加入200μl氯仿，剧烈振荡30s，12000×g，4℃离心5min，上层水相移入一个新离心管中，加入等体积的异丙醇，冰浴5min，12000×g，4℃离心10min，弃上清，用75％乙醇洗涤RNA沉淀2次，用30μlDEPC－H2O溶解RNA沉淀。产物用于电泳分析或在－20℃保存。1．3总RNA浓度及纯度检测将采用上述三种方法得到的酵母总RNA溶于DEPC－H2O中，取一定量的样品稀释N倍至200μl混匀，加入微量比色杯中，用紫外分光光度计测量样品的A，230A260，A280的值（以DEPC－H2O为空白调整零点）。RNA样品浓度（μg／μl）为：A260×N×40／1000。据此浓度计算酵母菌总RNA产量，以A260／A280，A／260A230比值的大小判定RNA样品的纯度。每样品重复3次取平均值
1．金东洙，俞东郁。下颌骨性别的多元判定。延边医学院学报1985,8(4): 195-2022．金东洙，俞东郁。颅骨的性别判定研究（一）弧，弦和围度。延边医学院学报1986; 9(3): 140-1473．金东洙，俞东郁。颅骨的性别判定研究（二）上颌和腭。延边医学院学报1986; 9(4): 216-2184．金东洙，俞东郁。颅骨的性别判定研究（三）乳突。延边医学院学报1987; 10(2): 24-275．金东洙，俞东郁。颅骨的性别判定研究（四）眶和鼻。延边医学院学报1987; 10(4): 246-2596．金东洙，宋亨根，金昌洙。四象医学与延边朝鲜族成人活体测量性体质特征的关系研究，I. 头面部。延边医学院学报1991; 14(1): 16-247．金东洙，赵寿东，许班玉，全炳烈。四象医学与延边朝鲜族成人活体测量性体质特征的关系研究，II. 体部。延边医学院学报1991; 14(2): 79-888．Zhiyue J. Wang, Christina Bergqvist, Jill V. Hunter, Dongzhu Jin, Dah-Jyuu Wang, Suzanne Wehrli, and Robert A. Zimmerman。In Vivo Measurement of Brain Metabolites Using Two-Dimentional Double-Quantum MR Spectroscopy –Exploration of GABA lLevels in a Ketogenic Diet。Magnetic Resonance in Medicine2003,49:615-6199．金东洙，周宪春，张默函。左侧椎动脉起始变异1例。中华现代医学与临床2005,3(4):129-13010．金东洙，陈正爱，李美子。解酒乐对小鼠抗醉解酒作用的影响。时珍国医国药2006,17(8):1476-147711．Li Liangchang（李良昌），Wang Jerry Zhiyue，Jin Dongzhu（金东洙）。Proton Semi-quantitative Spectroscopy of Cerebellar Tumors in Childhood.。中国临床实用医学杂志，2007,1(7):13-1512．李良昌，金东洙。核转录因子-kb在肺部炎症性疾病中的作用。延边大学医学学报2007,30(2):148-15013．申载贤，金东洙，张默函。下颌管的解剖学结构与牙种植关系的研究。延边大学医学学报2007,30(3):170-17214．全贵红，金东洙△。中国延边朝鲜族和延边汉族apoB和D17S30VNTR多态性研究。人类学学报2007,26(4):318-32415．张默函，金东洙△，金映杉。线粒体DNA cyt-b和血管内皮生长因子mRNA在乳腺癌中的表达及意义。解剖学报2008，39（4）：562~56516．杨光，金东洙△，张默函。胆囊三角的应用解剖学在腹腔镜胆囊切除术中的应用。延边大学医学学报2008，31（2）：101~10417．张默函，金东洙△，金映杉。乳腺癌中线粒体DNA拷贝量变化的意义。解剖学报2009，40（1）：41~43△：通讯作者
浅析语块应用于英语写作教学的利弊论文
[论文关键词] 语块 英语写作 教学利弊
[论文摘要] 文章介绍了语块的定义、特征和分类，指出了语块应用于英语写作教学的优势和弊端，并提出了解决建议。
[基金项目]:该文系湖北工业大学工程技术学院2008年度科研项目“多媒体英语教学中的情感缺失及应对策略研究”的研究成果。(项目编号：J2008Y2)
二十世纪中后期语料库语言学兴起，语料库语言学家Pawley和Syder(1983)调查发现英语本族语者掌握几千个语块，能够在交际中随意使用；Sinclair(1991)研究发现流利的语言使用者能够使用大量的语块。国内的学者也有类似的研究。根据上述结论，外语教学研究者提出语块是语言教学的最基本构件，语块在外语写作教学中具有重要作用。
I 语块的基本概念
语块是一种多词词汇现象，它以整体形式储存在大脑中，在使用时直接从记忆中提取，无需语法生成和分析，是固定或半固定、模式化了的块状语言结构(Becker, 1975)。语块具有四个基本特征：(1)由两个或两个以上的单词构成；(2)所构成的单词共同出现频率高；(3)合乎句法；(4)语义完整。根据语块单位的大小，语块可分为五类：(1)复杂词(complex words)，例如：womanhood，transport；(2)聚合词(polywords)，例如：by the way, upside down，形式完全固定；(3)高频搭配组合(collocations)，例如：community service，absolutely convinced，这类词共同出现得频率较高；(4)惯用语(institutionalized utterances)，例如：I’ll get it；We’ll see；That’ll do；If I were you…；Would you like …？属于常用的功能型表达；(5)句子框架和引语(sentence frames and heads)和文本结构(text frames)，前者例如：That is not as…as you think；后者例如：In this paper we explore ….First …；Secondly …；Finally …，构成文本的框架结构。
II 语块应用于英语写作教学的优势
在实证研究中，很多国内外学者肯定了语块应用于英语写作的优势(Biber等，2008；郭晓英等，2010；戚焱，2005)；在教学实践中，英语老师也会帮助学生总结一些语块，例如聚合词、高频搭配组合、惯用语、句子框架和引语。总体来说有三点优势：
2.1 有助于提高书面表达的流利性。语块是整体储存在记忆中的，是合乎语法规则、语义完整的块状结构，学习者在书面表达时可现成从记忆库中整体提取，不需要再加工分析，使得产出的语言比较流利。
2.2 有助于提高书面表达的地道性。语块中的聚合词、高频搭配组合、惯用语是高频语言单位。在写作中使用它们，使得产出的语言比较地道准确。可以避免临时把各个单词按照语法规则拼凑或组合起来，避免出现大量中国式英语。
2.3 有助于提高语言构建力。在写作中使用句子框架和引语，可使语言表达更加灵活、丰富；使用文本结构，可使语篇层次分明，衔接连贯，承上启下。
III 语块应用于英语写作教学的问题
尽管使用语块有如上优点，可是具体实践起来就出现了一些问题：
3.1 语块有5类(如上分类)，常用语块几千个，例如NTC’s Dictionary of Everyday American Expressions列了7000多固定表达，The BBI Dictionary of English Word Combinations列了9000多基本词语搭配。语块单位由词到句再到篇。理论上，它们的实用价值对不同年龄阶段、不同语言水平的学习者来说是不同的。然而很多写作教师和学习者在教学中没有明确哪一类或几类语块是自己的教学重难点，表现出较大的随意性和随机性。
3.2 同一个单词的高频搭配很多，哪些是真正的高频，哪些是这个词的重点高频搭配？每本教材、参考书，每位教师有自己的观点。许多是根据个人直觉、教学经验或已出版的教材教参归纳出来的。然而这样做的后果是缺乏科学依据、数据证明，势必削弱教学内容的科学性。
3.3 为考察学生的写作能力，许多英语水平考试设计了作文题，例如大学英语四、六级的第一部分作文题。然而很多学生不重视平时的写作实践，把希望寄予考前背诵一些作文模板，考试时机械地搬用、套用。这样做导致作文模板之外频出词语搭配、句子语法错误，出现大量的中国式英语，缺乏思想，句子框架套用得不符合上下文语境。
鉴于以上问题，提出三点建议，供广大师生在今后英语写作教学中参考。
IV 四点教学建议
4.1 对于初学者，建议把复杂词、聚合词、惯用语、句子框架和引语作为写作教学的重难点；对中高级学者，建议把高频搭配组合和文本结构作为重难点。因为初学者和中高级学习者的语块分解、重组能力以及记忆力各有优劣势。也有研究指出，词汇搭配(lexical collocations)、固定搭配/半固定搭配(fixed expressions/semi-fixed expressions)、习语(idioms)应按照习语、固定搭配/半固定搭配、词汇搭配的顺序教学(Hsu Jeng-yih，2006: 370)，它符合学习者由机械到灵活的学习特点。复杂词、聚合词、高频搭配组合、惯用语、句子框架引语和文本结构也是一个完全固定表达到半固定表达的连续统一体，由此也建议按照先教学完全固定表达，再教学半固定表达，即由惯用语和句子框架和引语到高频搭配组合、聚合词和复杂词。
4.2 同一个单词涉及到的.常用搭配很多，要求挑选真正高频搭配。主要有两种方法。一是，基于语料库检索出最常用和最实用的语块。写作教师和学习者可以利用大型语料库，例如英语国家语料库(British National Corpus，BNC)，美国当代英语语料库(The Corpus of Contemporary American English，COCA)，因特网在线语料库(Webcorp)检索出某个词的高频搭配组合、惯用语。需要注意的是，语料库里的频率(frequency)和出现范围(range)是重要的选择依据。利用语料库检索非常科学，有数据统计依据。二是，教学者和学习者阅读大量的真实语言。正如Krashen说过，阅读是学习语言的唯一有效方法。通过阅读，在阅读实践中检验词语的实用价值，但是这种方法受限于每个人的英语水平。
4.3 在应用语块于写作实践时，师生都不能夸大语块，特别是句子框架引语和文本结构的作用。因为过度强调它们，会养成学习者懒惰的态度，学习者认为只要把“原料”填进“模具”，文章就可以自动生成了，不需要费心费力地去表达自己的想法和思想。在写作教学中，建议除了教授一些文本结构之外，还需多教授一些高频搭配组合，使学习者的书面表达更加地道，这在前面已经提到过，因为中高级学习者的语言生成能力已较高。
总之，国内外学者已经验证了应用语块于写作实践的优势，但是它仍然存在一些问题。针对这些问题，它的教学设计，包括教学大纲、教学内容、教学活动、师生角色、教材等还需继续探索，使之更加完善科学。另外，如何通过词汇教学发展学习者的全面交际能力也许继续研究。
参考文献
[1]Becker J. The Phrasal Lexicon[A]. In R. Shank & B. L Nash-Webber(eds. Theoretical Issues in Natural Language Processing[C]. Cambridge, MA: Bolt Beranek & Newman, 1975.
[2]Biber D. & Federica Barbieri. Lexical bundles in university spoken and written registers[J]. English for Specific Purposes, 2007, (26): 263-86.
[3]Hsu, Jeng-yih. An analysis of the Multiword Lexical Units in Contemporary ELT Textbooks[C]. The Proceedings of the 23rd International Conference on English Teaching and Learning in the Republic of China. 2006: 363-381.
[4]Pawley, A. & F. Syder. Two puzzles for linguistic theory: nativelike selection and nativelike fluency[A]. In J. Richards & R. Schmidt. (Eds.) Language and Communication[C]. London: Longman, 1983.
[5]Sinclair, J. Corpus, concordance, collocation: Describing English language[M]. Oxford: Oxford University Press, 1991.
[6]郭晓英, 毛红梅. 语块教学对英语写作能力影响的实验研究[J]. 山东外语教学, 2010, 31(3): 52-9.
[7]戚焱. 预制语块与大学英语写作[J]. 山东外语教学, 2005, 108(5): 64-6.
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以下是发表论文或期刊的方法：
一、写作
首先要写好一篇论文，选题要与专业、研究方向密切相关，论文的格式要规范，应包括题目、作者（姓名、单位、邮编及简介）内容摘要、关键词、正文等；论文篇幅不宜过长，因为期刊版面的字符数是固定的，字符数越多，版面增加，相应的费用就会越高；最后还要注意控制重复率，一般期刊要5%-20%以下才合格录用。
二、选刊
选择一本合适的期刊进行投稿，是成功发表论文极其关键的一步，要遵循几个原则，即
1、 国家新闻出版署能查到的正规期刊；
2、知网、万方、维普、龙源四大数据库之一正常收录的期刊；
3、符合学校、单位要求的期刊；
最后还要考虑论文是否符合期刊的收稿范围，避免因为文章方向不合适出现拒稿的情况。
三、投稿
投稿的途径有两种，一种是通过杂志社邮箱，官网或者在线系统投稿。（注意：数据库和期刊的目录页上面的联系方式才是准确的），虽然这种方式完全不用担心，但缺点是审稿时间较长，沟通不及时，无法了解期刊最新出刊时间，费用，收稿要求等等。
第二种就是找代理投稿 。这个方法也是现在大多数人用的要给方法，为什么会这样的，我只能说谁用谁知道。这个是最简单最省事儿的。以前我就是找的一个文化公司安排文章，服务没得说，只需要提供文章，剩余的事情全由他们搞定。
中介投稿也是有很多优势的
1、刊物比较丰富和全面，各类的刊物都有，可以根据作者的要求快速推荐推荐合适的刊物。
2、 期刊信息非常的全名，从刊物的收稿栏目，出刊时间，版面字符数要求，期刊级别、出刊周期、审核标准、是否可以开社内发票、刊号邮发代号、电子刊号、是否可以查稿、封面以及影响因子区间
3、他们基本上是和杂志社或是承包商直接对接的，沟通速度比较的迅速。
4、查稿后付款。这点已经算是标配了，绝大多数的刊物都是可以查稿后付款的，而且查稿电话是数据库可以查询到的哦 。
5、 最要是不收定金和知道一个刊物的审稿要求和难度。
发表论文到期刊有以下几点：第一部分：写作论文之前的必要基础知识以及准备工作。第二部分：快速写作论文的方法。第三部分：论文发表的两种渠道（自投和代投）。
论文的含义：
论文是一个汉语词语，拼音是【lùn，wén】，古典文学常见论文一词，谓交谈辞章或交流思想。当代，论文常用来指进行各个学术领域的研究和描述学术研究成果的文章，简称之为论文。它既是探讨问题进行学术研究的一种手段，又是描述学术研究成果进行学术交流的一种工具。它包括学年论文、毕业论文、学位论文、科技论文、成果论文等。
2020年12月24日，《本科毕业论文(设计)抽检办法(试行)》提出，本科毕业论文抽检每年进行一次，抽检比例原则上应不低于2% 。
期刊简介：
定期出版的刊物。如周刊、旬刊、半月刊、月刊、季刊、半年刊、年刊等。由依法设立的期刊出版单位出版刊物。期刊出版单位出版期刊，必须经新闻出版总署批准，持有国内统一连续出版物号，领取《期刊出版许可证》。
从广义上来讲，期刊的分类，可以分为非正式期刊和正式期刊两种。非正式期刊是指通过行政部门审核领取"内部报刊准印证"作为行业内部交流的期刊(一般只限行业内交流不公开发行)，但也是合法期刊的一种，一般正式期刊都经历过非正式期刊过程。
正式期刊是由国家新闻出版署与国家科委在商定的数额内审批，并编入"国内统一刊号"，办刊申请比较严格，要有一定的办刊实力，正式期刊有独立的办刊方针。
以下是发表论文或期刊的方法：
一、写作
首先要写好一篇论文，选题要与专业、研究方向密切相关，论文的格式要规范，应包括题目、作者（姓名、单位、邮编及简介）内容摘要、关键词、正文等；论文篇幅不宜过长，因为期刊版面的字符数是固定的，字符数越多，版面增加，相应的费用就会越高；最后还要注意控制重复率，一般期刊要5%-20%以下才合格录用。
二、选刊
选择一本合适的期刊进行投稿，是成功发表论文极其关键的一步，要遵循几个原则，即
1、 国家新闻出版署能查到的正规期刊；
2、知网、万方、维普、龙源四大数据库之一正常收录的期刊；
3、符合学校、单位要求的期刊；
最后还要考虑论文是否符合期刊的收稿范围，避免因为文章方向不合适出现拒稿的情况。
三、投稿
投稿的途径有两种，一种是通过杂志社邮箱，官网或者在线系统投稿。（注意：数据库和期刊的目录页上面的联系方式才是准确的），虽然这种方式完全不用担心，但缺点是审稿时间较长，沟通不及时，无法了解期刊最新出刊时间，费用，收稿要求等等。
第二种就是找代理投稿 。这个方法也是现在大多数人用的要给方法，为什么会这样的，我只能说谁用谁知道。这个是最简单最省事儿的。以前我就是找的一个文化公司安排文章，服务没得说，只需要提供文章，剩余的事情全由他们搞定。
中介投稿也是有很多优势的
1、刊物比较丰富和全面，各类的刊物都有，可以根据作者的要求快速推荐推荐合适的刊物。
2、 期刊信息非常的全名，从刊物的收稿栏目，出刊时间，版面字符数要求，期刊级别、出刊周期、审核标准、是否可以开社内发票、刊号邮发代号、电子刊号、是否可以查稿、封面以及影响因子区间
3、他们基本上是和杂志社或是承包商直接对接的，沟通速度比较的迅速。
4、查稿后付款。这点已经算是标配了，绝大多数的刊物都是可以查稿后付款的，而且查稿电话是数据库可以查询到的哦 。
5、 最要是不收定金和知道一个刊物的审稿要求和难度。
第一级－T类：特种刊物论文，指在《SCIENCE》和《NATURE》两本期刊上发表的论文。
第二级－A类：权威的核心期刊，指的是国际通用的SCIE、EI、ISTP、SSCI、A&HCI收录检索系统的论文（中国科学技术信息研究所检索为准），或同一主题发表在国内中文核心期刊的权威，论文中不包含其他报告总结。
第三级－B类：重要核心刊物论文，指在国外核心期刊上刊登的论文（见《国外科技核心期刊手册》）或在国内同一学科的中文核心期刊中具有重要影响的刊物上发表的论文。
第四级－C类：一般核心刊物论文，指《全国中文核心期刊要目总览》刊物上发表的论文。
第五级－D类：一般公开刊物论文，指在国内公开发行的刊物上（有期刊号“CN”“ISSN”，有邮发代号）发表的论文。
第六级－E类：受限公开刊物论文，指在国内公开发行的但受发行限制的刊物上（仅有期刊号、无邮发代号）发表的论文。
内部刊物发表的论文分为三个级别（类）：
内部刊物必须为教育部门主办，以主办单位级别分为：国家级内刊（中国教育学会及其专委会、教育部等自办刊物），省级内刊，区级内刊。
从以上论文级别划分来看，被大家一直追捧的北大核心的级别不如EI、ISTP检索的文章含金量。而EI、ISTP会议论文同样能够被EI、ISTP检索，相对而言容易发表，因此从性价比上看EI、ISTP会议论文强于北大核心。
而内部刊物级别是低于公开发表的刊物的。但在学士论文上，有的单位比较看好内部刊物，那就优先发表内刊比较妥当。
以上内容参考：百度百科-学术论文期刊
一、一种方式自投。自己在检索网上查询版权页上的电话，了解发表流程，或者是通过邮箱，直接投稿，这种费用低，但是需要漫长的等待期，适合时间充裕的作者。但是这种效果不大，往往会被拒稿，达不到自己想要的结果。
二、另一种方式代投。就是找靠谱的找对论文中介公司机构，一般都会固定的和一些杂志社有长期合作，所以，审稿方面找代理确实要比杂志社容易的多，发表流程比较快，费用相比自己投稿有一丢丢高，费用可以提前好好沟通，千万不要贪便宜，太便宜很容易遇到假刊，很容易，所以选择中介公司机构一定要选靠谱的，一定要审稿！你会发现在学术期刊发表论文不再是难事。十年老平台，资深编辑为你保驾护航，百家期刊杂志等你来投，二流思玖玖留思七五八，下面是投稿流程：
1.针对自己的研究内容，选择期刊范围2.联系杂志社，询问接收和发表的时间（有的期刊发文较慢）3.确定投稿的期刊，多看几期上面的文章，按照文章格式进行撰写或修改自己的文章4.投稿，问清回复时间，等待消息5.接收或拒收，进行文章修改6.汇款，等待发表（发表后也会有稿费）
评职称很多人会选择发表职称论文，这就涉及到了期刊的选择，作者们在学术领域可能非常权威，但是对于发表论文来说，很多人可能还是个小白，有些作者文章是发表了，评职称时却不能用，白白浪费了时间，具体我们说一说以下几种情况~1、单位对期刊发表的要求先了解清楚自己所在单位的评定细则，根据职称文件的加分细则，再去找相关的期刊投稿。比如有些单位评中级职称要求至少发表2篇省级期刊论文。那我们就只满足“省级2篇”这个要求就好。不同的要求，期刊属性都是不同的，如果你不清楚如何自己适合发哪种期刊，可以找小刊详细咨询！评职要想顺利，首选肯定是知网、万方或者维普收录的期刊，如果要求没那么高，像龙源、期刊网的期刊也可以。（具体还是要看当地的评审文件要求）2、过于追求核心期刊，错过评职核心期刊大家也都了解，确实是学术质量更权威，所以有很多作者也是奔着发表核心期刊准备的，但是小刊在这里跟大家说清楚，不一定你发表的论文就一定要选择核心期刊，如果你的文章水平没够到，你投稿也是会被拒的，完全就是浪费时间，所以发表文章符合单位评审要求，有适合自己才是最好的，普刊也有很多优秀的期刊，不一定非追求核心期刊。（如果有要求必须发核心，大家一定要提前至少一年去准备，核心的评审周期长，审核也较为严格。）3、综合期刊和专业期刊的区别？综合刊是对论文专业没有太多限制的刊物，许多专业的论文都能安排发表，而专业期刊只能发表相应专业领域的论文，所以相比较来说，发表在专业期刊的论文是要比发表在综合期刊上的论文更有价值的，能够更好的起到指导学术的作用。（如果没有写明必须要本专业的期刊，可选择综合期刊，出刊较快，价格也更合适。）4、假刊、套刊一定要清楚大家一定要提起注意，避免发到假刊、套刊上，建议大家可以在新闻出版总署查询，能查出的肯定就是正规期刊，没有信息的那就是假刊，大家要警惕，文章发表在这样的期刊上，毫无价值，浪费精力和时间。大概流程就是写作、投稿、审核、发表、出刊、上网。
正规期刊发表论文的六个步骤详解，很多细节需要注意投稿才不能成功