在手机应用商店下载！宣汉县南坝中学始建于1938年，原名“私立精英中学”，现已发展成为达州市示范性高中、四川省艺术教育特色学校、中央教科所校园文化基地学校。 南坝中学头枕圣山，面临前河，山清水秀，环境宜人，是政府办学和学生读书的好地方。学校占地面积26680㎡(合40亩);在编教职工226人，其中专任教师210人，有研究生学力16人，本科生142人，中学特级教师1人，特级教师后备人选3人，省级骨干教师6人，中学高级教师48人，中学一级教师90人，市、县学科带头人32人，承担国家、省、市、县教改实验项目的有72人次，李立洲、刘五星、陈仁发、颜尚亨老师分别因为教学质量好、普及学校艺术教育和有专业水准先后被评为全国优秀教育工作者
1938年初，向君卿、冉孝瑞、梁列五、娄元亮、王君异等一大批志士仁人汇集宣汉县南坝场。发出了“同进人类光明，同歌民族复兴”的惊天呐喊，并取《阿房宫赋》“齐楚之精英”之意，创立了私立精英中学。1950年3月“精英中学”改名为“宣汉中学南坝分部”，冉雨生任分部主任。1951年春，学校更名为“宣汉县第二中学”，林心如、孙易和、冉常节先后担任校长。1958年学校被确定为地级重点中学，更名为“宣汉县南坝中学”，冉常节先后担任校长。1979年校长何隆平调县文教局任局长，冉崇育任校长，但由曾季于副校长主持工作。1982年，向以福调南坝中学任支部书记、校长。1984年9月县委宣传部孙本恺兼任南坝中学校长。1985年6月15日，著名人才学家，南坝中学校友雷祯孝回到母校，发表演讲“世界不大，南中不小，从南中可以走向世界。走向未来。”1987年11月，胡清善任南坝中学校长。1989年9月，国家人事部、教育部授予李立洲老师“全国优秀教师”称号。1990年10月，原中央顾问委员会委员、南京军区司令员向守志将军来校视察工作。1991年9月经四川省人民政府批准陈仁发为“四川省中学特级教师”。1994年9月，高美岱同志任南坝中学校长。1995年6月，四川达县籍著名军旅诗人梁上泉来南中参观，并题词：“圣灯山上亮圣灯，精英中学育精英，前河开路后河继，波涌浪飞涛有声。”1998年9月，颜尚亨同志任南坝中学支部书记、校长。1998年12月，国家教育部体部体艺卫司司长杨力、省教育厅副厅长颜振一行，来校视察艺术教育工作。1999年9月5日，举行“南坝中学六十庆典”，时任四川省副省长徐世群同志送来贺幛“风雨六十年，桃李遍天下”，原精英中学校长王君异家人送来国画“万紫千红总是春”一幅。2001年10月，学校被省教育厅命名为“四川省艺术教育特色学校”。2001年12月，学校被中央教科所命名为“校园文化基地实验学校”。国家级课题《优化课堂教学，强化课外辅导》获达州市人民政府教学成果二等奖，市级课题《说课的理论与实践》，获宣汉县人民政府教学成果二等奖。2002年始，建设“园丁楼”三幢，122套，建筑面积16000平米。学生宿舍一幢4280平米；教学楼、教学综合楼二幢，有专用教室、功能用房53间，建筑面积约7200平米。2003年11月，中国华融资产管理公司向学校捐资5万元，用于图书室建设。2003年9月经四川省人民政府批准颜尚亨为“四川省中学特级教师”。2004年5月21日，华融资产管理公司总裁杨凯生、达州市市长李向志、县委书记肖雷一行来校参加教学综合楼的奠基仪式，华融公司向学校捐资50万元。2004年12月，学校被达州市教育局评估认定为“达州市示范性普通高中”。2007年，学校被命名“四川省现代教育示范学校”。向晓星同志任南坝中学党总支书记、校长。2008年11月，清华大学教授朱普轩、湖南大学教授雷祯孝在北京接见南中教师，赠送电影课软件。2010年3月，何明茂老师被授予“宣汉县首届名师”称号。
班设给自己死就死九生九死计
宣汉县南坝中学（NAN BA MIDDLE SCHOOL）创建于1938年，原名“私立精英中学”。1958年被确定为地级重点中学，2001年被省教厅命名为“四川省艺术教育特色学校”，同年被中央教科所确定为“校园文化基地实验学校”。在多年的办学实践中，形成了“团结、勤奋、求实、向上”的校风，“严谨、扎实、求精、创新”的教风，“刻苦、有恒、多思、求新”的学风和“德育为首，教学为主，体育为本，艺术为先，全面发展”的办学思路。
预期成果的表达形式可以是发表的论文、申请的专利、参赛和参评的奖项、公开的数据集合等。
发表的论文：发表的论文包括期刊论文和会议论文。可以是长文，也可以是短文，综述或者demo。可以列出预期发表论文的数量，大致研究点，拟发表在哪类期刊和会议上等。
申请的专利：申请中的专利和申请已得到保护的专利都可以作为预期的成果。可以列出拟申请的专利数量和大致的方向。因为专利审核的时间比较长，项目结束的时候不一定可以得到申请的最终结果，所以已经经过初审的也可以作为预期成果。
参赛和参评的奖项：有些技术类的研究有很多国内国外的公开评测和比赛，可以列出拟利用研究成果参与哪些比赛，期望能够得到什么样的结果等。
公开的数据集合：在研究的过程中，会逐步采集和整理实验数据集合。如果方便的话，可以作为开源数据集合供全球范围内的研究人员使用，这将让整个领域的人们受益。
预期成果撰写注意事项
撰写课题预期研究成果的时候，不要为了课题能立项，而夸大研究成果。这样即使课题被立项，但是由于研究结果并未达到预期研究成果，那么最后有可能会因此而导致课题结题失败。要知道课题结题失败的后果还是比较严重的，因此，大家在撰写课题预期研究成果的时候一定要实事求是，如实撰写即可。
写明预期研究成果的数量，比如：如果是论文，论文数量是几篇，如果是著作，著作是几部。若是论文则说明在什么级别的期刊上发表的;如果是专利，则需要明确专利的类型。不管是哪类学术成果，在撰写的时候，能确定的要详细注明出来；反之，若是有不确定的地方，比如：期刊的数量，那么可能不用写明数量。
偏高的影响因子。
即某期刊前两年发表的论文在该报告年份(JCR year)中被引用总次数除以该期刊在这两年内发表的论文总数。这是一个国际上通行的期刊评价指标。
影响因子现已成为国际上通用的期刊评价指标，它不仅是一种测度期刊有用性和显示度的指标，而且也是测度期刊的学术水平，乃至论文质量的重要指标。影响因子是一个相对统计量。
影响因素：
如论文的出版时滞、论文长度、类型及合作者数等。出版时滞较短的刊物更容易获得较高的影响因子。若刊物的出版周期较长，则相当一部分的引文因为文献老化（超过2年）而没有被统计，即没有参与影响因子的计算，从而降低了影响因子。
大量统计资料表明，刊载论文如果是热门课题，且篇幅较短，发表较快，则被引率将很快达到高峰，进而使期刊的影响因子上升很快，然后又迅速下降；刊载完整研究性论文的期刊，持续被引用时间长，影响因子升高较持久。也有资料表明，论文的平均作者数与论文的总被引频次呈显著的正相关。
目前我们是排在第2位的，我们的一些论文是非常不错的，影响力是比较大的，研究的东西是比较好的。
已经排到了世界第2名。这样的成果也是相当的厉害了，而且现在我们国家和上年度相比，增加了很多的领域，相关的期刊也有了这个提升。
结婚了一名北京理工大学的博士后,名叫李立明,今年30岁,是90后。
吃鸡蛋对心血管病人有很大好处，能起到软化血管作用，能提高人体免疫力，增强人体质，能补充营养，增强记忆力，等等，总的说吃鸡蛋对心血管病人有特大好处心血管疾病又称为循环系统疾病，是一系列涉及循环系统的疾病，主要包括心脏、血管等，主要的发病原因是高血脂、高胆固醇、高血糖等等，鸡蛋富含蛋白质、卵磷脂、矿物质等等全面营养素，鸡蛋可以防治动脉硬化，所以是可以吃的，但是鸡蛋也含有胆固醇，所以不宜多吃。
鸡蛋的营养价值很高，含有钙、磷、铁、维生素a、维生素b，也富含许多人体必须的微量元素。吃鸡蛋对血管是有好处的。鸡蛋可以使血液中的高密度脂蛋白增高，保护血管，防止硬化。但是心脏病人不建议多吃鸡蛋。每日以一个为宜。因为鸡蛋黄中胆固醇含量较高。胆固醇能够损伤血管，引起血管狭窄或者闭塞。引起或者加重心脑血管疾病。另外心脏病人一定要注意低脂低糖饮食，戒烟戒酒，适当运动。注意劳逸结合。
鸡蛋作为最为常见的食品，是餐桌上的常客，鸡蛋中除了含有丰富的蛋白质之外，还有较多的卵磷脂，卵黄素，氨基酸，矿物质等多种对身体有益的营养成分，常吃鸡蛋能够增强记忆力，保护肝脏 健康 ，提高人体免疫功能，同时还能起到延年益寿的功效。
每天两个鸡蛋补充人体一天对蛋白质的需求，提高肠胃蠕动功能，促进粪便排出，增强身体排毒代谢的功能，虽然鸡蛋的营养价值非常全面，但对于部分患者来说，却要控制好鸡蛋的摄入量。
因为鸡蛋的蛋黄中含有较多的胆固醇，有人觉得鸡蛋是疾病的“发物”，长期大量摄入鸡蛋会增加自身患心血管疾病和癌症死亡的风险，这种说法是否正确呢？鸡蛋真的是一种对人体有害的食物吗？
01
研究：多吃半个蛋，心血管与癌症死亡风险会增加？鸡蛋还能吃吗？
2021年2月，浙江大学研究团队曾发表过这样一篇论文，论文中明确展露了针对52万人的调查研究，经过16年的随访调查后，得出以下结论：蛋黄中的胆固醇含量偏高，长期大量摄入，会增加身体患心血管疾病的几率，也会间接诱发癌症患者死亡。
实验中，针对鸡蛋对人体的伤害，做出过以下几组分组实验，研究人员发现，每周摄入三个及以下鸡蛋的受试者，死亡风险没有太大变化，而每周摄入6个以上鸡蛋的受试者，死亡几率上升25%~30%。
北京大学公共卫生学院教授 李立明 认为：以上这项实验仅仅针对美国人，而中美人的饮食习惯、营养 健康 状况以及身体素质存在着极大的差异，单单凭借这项研究并不能直接推断出鸡蛋是致癌的物质。
虽然鸡蛋的蛋黄中确实含有较多的胆固醇，但胆固醇同样是人体必需的营养物质，能够在人体内形成较多的胆酸，构成细胞膜刺激激素的合成，机体在胆固醇偏低的情况下，可以适当的多吃一些含胆固醇多的食物，以免人体激素分泌发生异常，胆固醇升高后，可在医生的指导建议下，服用降血脂药物，预防动脉血管粥样硬化的发生。
李立明教授表示：影响人体 健康 的因素有很多，除了鸡蛋的摄入量之外，与疾病、心理因素、生活环境、肥胖、个人情绪、运动量、服药量等原因息息相关，不能在排除其他因素的情况下，直接认定吃鸡蛋会增加心血管疾病发生和癌症死亡率。
每100克鸡蛋中大约含有200~250毫克的胆固醇，主要存在于蛋黄中，蛋清中的胆固醇含量偏少，正常成年人每天至少摄入两枚鸡蛋，患三高疾病或严重心血管疾病的患者，每天可吃一个鸡蛋，想多吃尽量以蛋白为主，少吃蛋黄。
适当的吃鸡蛋，不会给身体带来影响，反而可以增强人体免疫力补充身体所需的蛋白质和钙离子，降低骨骼和关节的强硬程度，提高人体新陈代谢功能，抵御细菌病毒的入侵，维持 健康 态。
02
为什么有人说吃鸡蛋会致癌？
错误的摄入方式，确实会增加身体患癌的风险，具体情况可从以下3点考虑：
1、生吃鸡蛋
不少老年人喜欢吃开水冲鸡蛋和溏心蛋，无论哪种烹饪鸡蛋的方式，只要保证在全熟的情况下使用都不会对身体产生影响。
食物一旦煮熟，虽然会使内部的营养价值流失，但煮的鸡蛋中也会滋生较多的寄生虫和有害物质，生吃鸡蛋会诱发肠胃不适症状，鸡蛋中的寄生虫和其他有害毒物进入身体后会使机体出现食欲不振，肌肉疼痛，皮肤发炎，全身无力，脱发，脱眉等症状。
为了 健康 烹饪鸡蛋时，至少保证烹饪的温度在70~80度左右，及时杀灭鸡蛋中的沙门氏菌，维持 健康 ，降低身体患癌的风险。
2、空腹吃鸡蛋
很多上班族和学生会将鸡蛋当做早餐的最佳之选，医学专家表示，空腹吃鸡蛋是一种对肠胃损伤较大的行为，鸡蛋中由于含有较多蛋白质的原因，进入身体后，在空腹状态下转化热能的过程不明显。
空腹吃鸡蛋，不但起不到营养滋补的作用，反而会使大量蛋白质积聚在肠胃中产生大量的尿素和胺类，有害物质不利于 健康 。
3、过量吃鸡蛋
老年人每天吃1~2个鸡蛋为宜，中青年人或从事脑力劳动轻体力劳动的人，每天吃两个鸡蛋最好，从事重体力劳动或消耗营养较多者，每天可吃2~3个鸡蛋。
虽然鸡蛋的营养价值高，但过量摄入鸡蛋也会导致机体代谢产物增多，增加肾脏的负担，导致肾脏机能受损，诱发身体癌变。
看完本文后，相信大家对鸡蛋是否会增加癌症死亡率以及心血管疾病发生率有了更深的了解，你是如何看待的？你觉得鸡蛋是“营养佳品”还是“致癌之物”呢？
#夏方 养生 指南#
一、审计人员职业道德问题分析 1.审计人员的道德失范 多年来，中国人一直生活在计划经济体制下，平均主义主导着人们的生活，在工作中寻求个人利益被视为可耻的个人主义而加以批评，人们实际上不存在贫富差异，商业道德也并未成为一个严重的问题，然而，改革开放以来，在市场经济效率机制推动下，个人利益得到承认，勤劳致富受到鼓励，经济社会迫切需要一种与之相适应的道德规范。审计人员对道德与非道德行为的界限认识不清，执业过程中在利益机制的驱动下出现了严重的道德偏差。此外，竞争加剧和市场无序容易使注册会计师忽视职业道德。 2.政府部门的干预和保护使审计独立性遭到严重破坏 在20世纪80年代初。中国注册会计师制度恢复时，大部分会计师事务所都是由政府部门出资合办，并接受政府部门的管理。应该讲，在中国注册会计师职业发展的初期，由政府部门帮助发起会计师事务所是可以理解的，因为当时注册会计师的个人才产十分有限，很难完全承担起法律责任。在这种情况下，“单薄”的会计师事务所挂靠于政府部门，让“挂靠”单位起到“保障”作用，可以在一定程度上促进会计师职业的较快发展。但由于挂靠单位一方面是政府部门，另一方面又是会计师事务所的投资者，会影响事务所的决策，分亨事务所的财务成果，因此，这种运作的结果，势必会损及注册会计师职业的独立性。在实践中，各挂靠单位如财务部门、税务部门、行业主管部门等通常会利用手中的权力指定企业到所属的会计师事务所接受审计，与此同时，注册会计师在做出审计判断、出具审计报告时，会受到主管部门意愿的左右，审计的独立性便受到严重破坏。影e向中国注册会计师独立性的另外一个重要方面是中国注册会计师协会的地位问题。中国注册会计师协会作为全国注册会计师的自律性组织，它的地位、权威和独立性会直接影响会计师执业的独立性。 3.以“公正”作为安身立命之本的审计机构正在遭受前所未有挑战 随着管理层对银广夏事件进一步调查，业界对银广夏反思深入，以注册会计师行业为首的中介机构已成为证券市场“黑幕”的新的关注点。投资者已明显对审计机构的公正性产生了怀疑，以“独立、客观、公正”为自己行业基本原则的审计师行业遭到了前所未有的挑战，而这种挑战性将不再是局部问题。 深圳中天勤会计师事务所因为给银广夏提供了中介服务而成为本次打假焦点，但可以肯定地说，它并不是第一家造假也不是对市场影响最大的会计师事务所。曾经为证券市场红级一时的绩优股湖北兴化、康赛集团、活力28、兴发集团和幸福实业编制‘绩优神话’的湖北立华会计师事务所，对证券市场的欺性和危害性应比中天勤大多了，深圳中天勤会师事务所之所以敢于造假，在于湖北立华会计师事务所在连续给五家上市公司出具虚假业绩报表并未得到市场监管部门的处罚，仍然照样领取证券持业许可证。有此先例，会计师事务所敢于知法犯法的事情才会屡禁不止。人们此次将深圳中天勤会计师事务所当作向该行业展开讨伐的主攻对象，是因为它在长达两年的时间里与银广夏一起制造了这个“神话”，公众对会计师事务所的违背职业道德，公然造假的行为已到了不能容忍的地步。 注册会计师、注册资产评估师的专业服务，目前已进入到经济的各个领域，“独立、客观、公正”地出具审计报告，保证会计资料的真实、可靠性应是审计师行业的基本道德规范，离开了诚信、公正，谁还敢相信上市司公司的业绩报告，谁还敢真正地在证券市场中投资，这种混乱继续下去，证券市场的投机行为必将难以制止。 会计师事务所之所以敢于同上市公司沆瀣一气，为其出示虚假会计报表，一方面是作为会计师事务所的监管者会计师协会本来监管的重心就是查假、打假，但协会没有必要的手段确保其监管职能的落实；另一方面在行业规范上，我们过多的强调了行业自律和道德约束，而没有将其引入司法监控。 一位业内人士说，会计师行业竞争非常混乱，是该行业市场化运作的结果，许多会计师事务所为了抢夺客户已到了不惜一切代价的地步。原立华会计师事务所主任说：“当你只剩下一个客户时，你是要保客户还是要原则？”也正是这种利益的驱使，许多会计师事务所才铤而走险，按上市公司的要求粉饰财务报表，成为虚假年报的帮凶。但我们同意这种说法，我们认为当前的混乱表面上看是市场化带来的，但实质上是典型的“不充分市场”的结果。成熟的市场里，政府和监管部门应该保证提供公正的竞争环境，保证“优胜劣汰”的有序竞争。一个有竞争力的会计师事务所应该依赖“独立、客观、公正”的原则赢得市场不是以牺牲职业道德，诚信原则和广大投资者的利益来攫取利润，而那些帮上市公司作虚假账的会计师事务所，下场只有一个：关门。二、提高审计人员的职业道德水平分析 1.构筑审计职业道德体系，加强审计职业道德教育 中国注册会计师协会作为全国注册会计师行业的管理部门，在维护注册会计师的职业声誉，提高其职业道德方面无疑有着十分重要的作用。为此，中国注册会计师协会在近期颁布了三个重要的准则，它们是《注册会计师职业道德基本准则》、《注册会计师继续教育基本准则》和《质量控制基本准则》，这三个准则的颁布，为注册会计师的职业道德不口执业质量提供了基本的规范要求，无疑是一个长足的进步，当然，现在所需要的主要是注册会计师人员思想上的认同与身体力行。 目前，在中国审计人员的高等教育中，还未单独开立“职业道德”课，其他课程中涉及职业道德的内容也是一笔带过，很少有案例研究和相关讨论。在注册会计师资格考试，审计人员的后继教育中也难见审计人员职业道德方面的内容，因此，在我国高校教育和有关后继教育中设立职业道德课程已是当务之急，它将对提高我国注册会计师的职业道德水平起到积极而有效的作用。 2.道德义务的履行，诚心规则的建立，必须依赖严格的法制化监管 不管是国内，还是在国外，只要是市场经济国家，都要重视法制化监管。人都会追求自我利益，在追求自我利益过程中必然会出现违法乱纪的行为。所以要让审计人员具有崇高的道德品质，除了刀口强教育外，还必须有严格的法制化监管措施和方法。要让他为自己的违法行为付出较高的成本和代价。拿香港来说，一个助理人员本来没有注册会计师执照，去拉客户时，印了个名片，说自己是注册会计师，后来客户到香港会计师公会举报，这个人被判了一年刑。出一个假报告，给当事人造成损失，更要赔偿损失。在这种严格的法制环境下，做业务要步步小心，如履簿冰，没有一个严格的法制化监管办法，光靠自律是不行的。 3.将机会成本概念引人提高注册会计师职业道德问题中 最近，财政部召集一个《注册会计师法》修订研讨会，在会上，许多专业人士都认为要强化注册会计师的民事赔偿责任，淡化行政责任，有限度地引入刑事处罚措施，事实上要加大注册会计师行业的机会成本问题。如果注册会计师遵守职业道德正正规规做业务，从社会上得到的激励要多，如果违规做业务，不遵守职业道德规范，所付的赔偿就多，在市场上付出的成本和代价就高，就会失去好的客户，这种监管机制较容易发生作用。 4.注重道德基础、道德关系建设 中国有句话“衣食足而知廉耻”，一定的经济基础是道德的基础，1992年在英国的一个全球诺贝尔奖获得者研讨会上，一个诺贝尔奖获得者说他接受了一辈子的教育，真正有价值的东西是在幼儿园学到的，在幼儿园学到不乱扔垃圾，要诚实、团结友爱，可见教育也是道德的基础，每个人在不同的阶段会有不同的积累，在30岁前更多的是积累知识，将来会有更多的机会。道德基础是非常重要的，但审计行业有其特殊性，所以也不可以过于强调经济基础为道德的基础。整个社会还是崇尚道德的，注册会计师行业要成为道德的倡导者。政府赋予注册会计师独立审计的职责，通过出具审计报告来维系社会的经济道德，注册会计师有责任维系道德。注册会计师行业终将走向道德。道德是一个复杂的社会现象，从原始社会到未来社会都存在，道德基础、道德关系一直都是道德的主题，是建设道德应该剖析的。对不起，实在太多了。你找一些来吧！
你可以参考一下我发到你信息里的资料。
PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文，希望你能从中得到感悟!
技术的研究进展
摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点，已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述，并对其发展做出了展望。
关键词 PCR技术;研究进展;应用
中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02
PCR(polymerase chain reaction，PCR)即聚合酶链式反应，它是一种体外酶促合成，扩增特定DNA片段的方法。1985年，美国Karray等学者首创了PCR技术，并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破，PCR技术已在多个领域得到广泛地应用，如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性，又能快速进行检测，因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术，如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。
1 PCR技术原理
PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物，在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成，一个循环包括连续的3个步骤：第1步是高温条件下的DNA模板变性，即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火，即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸，即在4种dNTP底物同时存在的情况下，借助TaqDNA聚合酶的作用，引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后，合成了新链，可将其作为DNA模板继续反应，由此循环进行。循环进程中，扩增产物的量以指数级方式增加，一般单一拷贝的基因循环25~30次，DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单，但是具体的操作是复杂的，如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此，不同的反应体系应该确定适当的反应条件，以避免假阴性或假阳性等情况的产生。
2 PCR技术的分类
在传统PCR技术的基础上，根据人们的需要以及各个领域的应用要求，又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进，为进一步的研究提供了基础。
2.1 实时荧光定量PCR技术
1996年，学者经过研究，在传统PCR技术的基础上，首创了实时荧光定量PCR技术，新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势，还具有实时性、准确性、无污染，实现了自动化操作和多重反应，是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。
荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中，借助于荧光信号，累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的，因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行，无法对起始模板进行准确的定量，而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后，定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号，荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况，这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段，PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系，然后进行定量分析[13]。
2.2 多重PCR技术
多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种，为同一管中加入多对特异性引物，与PCR管内的多个模板反应，在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段，也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。
在同一反应体系中，多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时，引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面，如果能选择适宜的反应体系和反应条件，可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面，DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率，如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。
2.3 单分子PCR技术(SM-PCR)
单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的，基本循环过程相同，但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。
单分子PCR技术反应中，DNA 模板浓度极低，这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时，应该严格控制GC的含量和Tm值，同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下，若引物之间存在少量配对序列，扩增时极易形成二聚体，使反应无法进行，得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高，因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格，需要有较好的热稳定性，以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。
3 PCR技术的应用
3.1 PCR技术在水产上的应用
基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化，或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21]，研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响，表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料，采用实时荧光定量PCR技术，检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量，表明在各组织中均有2种基因的表达，但表达量显著不同，呈现组织特异性。
3.2 PCR技术在微生物检测上的应用
1990年，Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌，其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物，表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势，较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价，结果显示，样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。
4 展望
传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来，已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善，荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面，其次是整合应用多重PCR与其他技术，必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。
5 参考文献
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教育背景是地理学、自然地理学、地貌学与第四纪地质学、全球变化科学，从事研究专业包括应用地貌学、地生态学、区域生态环境科学，近年的研究工作集中在山地旅游与山区可持续发展，研究兴趣在人类活动的区域环境效应与战略调控学习经历1995.09-2001.05：兰州大学资源与环境学院自然地理学专业在职博士学习，博士论文题目：长江上游全新世古洪水的初步研究——古洪水的气候标示能力及其揭示的气候变化1985.09-1988.05：华中师范大学地理系地貌学与第四纪地质学专业硕士学习，硕士论文题目：太行山（中段）东坡坡面演化的初步研究1981.09-1985.07：华中师范大学地理系学士学习
在现代，我们的饮食理念深受科学的影响，例如多吃脂肪不好，白肉比红肉健康，辣椒要少吃，等等。这些理念似乎已经成了科学的定论。但事实真是如此吗？
由美国卫生与公众服务部和农业部联合发布的《美国膳食指南》是健康饮食的标杆，通常体现了科学界的共识。指南自1980年以来，每5年更新一次，2015年版即将于今年晚些时候公布，而前期公开的技术报告已让公众震惊。指南第一次取消了脂肪的摄入限制。而在此前的指南版本中，脂肪占每日热量的阈值仅为35%。2015年6月，美国塔夫茨大学的Dariush Mozaffarian和波士顿儿童医院的David Ludwig在JAMA刊文说明道：对脂肪摄入的控制没有科学基础，并且导致了业界和消费者的错误决策。现在的证据表明，多吃富含有益脂肪的食物，如坚果、植物油、鱼等对心脑血管健康有利；其他富含脂肪的食物，如全脂牛奶和奶酪，对健康是中性的。根据此前的研究，没有证据表明饱和脂肪酸会提高心脏病风险。反而是取代脂肪作为热量来源的糖和精制谷物，更容易导致代谢紊乱和肥胖。饭店和业界应该重新设计含有更多有益脂肪、更少糖和精制谷物的食品。
白肉比红肉好，最常见的理由是说红肉的饱和脂肪酸比例比白肉高，现在既然给饱和脂肪酸平了反，那红肉的恶名是不是也可以摘帽了？很遗憾，2015年7月，荷兰的Noortje Ijssennagger团队在PNAS上发表了论文，认为红肉将提高直肠癌和结肠癌的风险，原因不是脂肪酸，而是红肉中大量存在的血红素。肠道菌群可能降低肠道黏液的屏蔽功能，血红素从而能够直接作用于肠道细胞，使得上皮细胞过度增殖，诱发癌症。并且也有其他报道称红肉中富含的左旋肉碱，可能会在肠道细菌作用下生成氧化三甲胺（TMAO），除了提高直肠癌和结肠癌的风险外，还与心脑血管疾病相关。
对于吃辣而言，过去有多种研究表明吃辣可能提高癌症的发病率，但也有研究表明辣椒可能让癌细胞凋亡、抑制肿瘤发展。而在2015年8月，一篇发表在British Medical Journal（BMJ）的论文让嗜辣者欣喜若狂，北京大学李立明领导的中英美三国团队，对487375名30～79岁的中国人进行了前瞻性研究。除了个人基本健康信息外，研究者特意跟踪了他们的吃辣习惯。研究发现，平均约7.2年的考察期中，有20224人死亡。其中相比于每周吃辣少于一次的人，一周吃1～2天辣的人，死亡风险降低了10%。每周吃3～5天和6～7天辣的人，死亡风险降低了14%。在不饮酒的人群中，这一差别更是明显，而新鲜辣椒对死亡风险的降低更为显著，尤其是在癌症、缺血性心脏病和糖尿病方面。
那么，就这几篇论文的结果，健康的饮食方式是否就该改成随意吃脂肪、不吃红肉、尽情吃辣呢？恐怕没有那么简单。李立明在论文的结论部分强调了吃辣和死亡风险的降低虽然相关，但他们的研究并不能证实因果关系。也有人指出膳食指南的基础—对膳食评估的方法存在较大缺陷。某种事物既能致癌又能抑癌的报道更是屡见不鲜。相比于吃哪种食物，节制的饮食和长期的锻炼才是健康的主要决定因素。而这，往往是最容易被我们忽略的。
吃鸡蛋对心血管病人有很大好处，能起到软化血管作用，能提高人体免疫力，增强人体质，能补充营养，增强记忆力，等等，总的说吃鸡蛋对心血管病人有特大好处心血管疾病又称为循环系统疾病，是一系列涉及循环系统的疾病，主要包括心脏、血管等，主要的发病原因是高血脂、高胆固醇、高血糖等等，鸡蛋富含蛋白质、卵磷脂、矿物质等等全面营养素，鸡蛋可以防治动脉硬化，所以是可以吃的，但是鸡蛋也含有胆固醇，所以不宜多吃。
鸡蛋作为最为常见的食品，是餐桌上的常客，鸡蛋中除了含有丰富的蛋白质之外，还有较多的卵磷脂，卵黄素，氨基酸，矿物质等多种对身体有益的营养成分，常吃鸡蛋能够增强记忆力，保护肝脏 健康 ，提高人体免疫功能，同时还能起到延年益寿的功效。
每天两个鸡蛋补充人体一天对蛋白质的需求，提高肠胃蠕动功能，促进粪便排出，增强身体排毒代谢的功能，虽然鸡蛋的营养价值非常全面，但对于部分患者来说，却要控制好鸡蛋的摄入量。
因为鸡蛋的蛋黄中含有较多的胆固醇，有人觉得鸡蛋是疾病的“发物”，长期大量摄入鸡蛋会增加自身患心血管疾病和癌症死亡的风险，这种说法是否正确呢？鸡蛋真的是一种对人体有害的食物吗？
01
研究：多吃半个蛋，心血管与癌症死亡风险会增加？鸡蛋还能吃吗？
2021年2月，浙江大学研究团队曾发表过这样一篇论文，论文中明确展露了针对52万人的调查研究，经过16年的随访调查后，得出以下结论：蛋黄中的胆固醇含量偏高，长期大量摄入，会增加身体患心血管疾病的几率，也会间接诱发癌症患者死亡。
实验中，针对鸡蛋对人体的伤害，做出过以下几组分组实验，研究人员发现，每周摄入三个及以下鸡蛋的受试者，死亡风险没有太大变化，而每周摄入6个以上鸡蛋的受试者，死亡几率上升25%~30%。
北京大学公共卫生学院教授 李立明 认为：以上这项实验仅仅针对美国人，而中美人的饮食习惯、营养 健康 状况以及身体素质存在着极大的差异，单单凭借这项研究并不能直接推断出鸡蛋是致癌的物质。
虽然鸡蛋的蛋黄中确实含有较多的胆固醇，但胆固醇同样是人体必需的营养物质，能够在人体内形成较多的胆酸，构成细胞膜刺激激素的合成，机体在胆固醇偏低的情况下，可以适当的多吃一些含胆固醇多的食物，以免人体激素分泌发生异常，胆固醇升高后，可在医生的指导建议下，服用降血脂药物，预防动脉血管粥样硬化的发生。
李立明教授表示：影响人体 健康 的因素有很多，除了鸡蛋的摄入量之外，与疾病、心理因素、生活环境、肥胖、个人情绪、运动量、服药量等原因息息相关，不能在排除其他因素的情况下，直接认定吃鸡蛋会增加心血管疾病发生和癌症死亡率。
每100克鸡蛋中大约含有200~250毫克的胆固醇，主要存在于蛋黄中，蛋清中的胆固醇含量偏少，正常成年人每天至少摄入两枚鸡蛋，患三高疾病或严重心血管疾病的患者，每天可吃一个鸡蛋，想多吃尽量以蛋白为主，少吃蛋黄。
适当的吃鸡蛋，不会给身体带来影响，反而可以增强人体免疫力补充身体所需的蛋白质和钙离子，降低骨骼和关节的强硬程度，提高人体新陈代谢功能，抵御细菌病毒的入侵，维持 健康 态。
02
为什么有人说吃鸡蛋会致癌？
错误的摄入方式，确实会增加身体患癌的风险，具体情况可从以下3点考虑：
1、生吃鸡蛋
不少老年人喜欢吃开水冲鸡蛋和溏心蛋，无论哪种烹饪鸡蛋的方式，只要保证在全熟的情况下使用都不会对身体产生影响。
食物一旦煮熟，虽然会使内部的营养价值流失，但煮的鸡蛋中也会滋生较多的寄生虫和有害物质，生吃鸡蛋会诱发肠胃不适症状，鸡蛋中的寄生虫和其他有害毒物进入身体后会使机体出现食欲不振，肌肉疼痛，皮肤发炎，全身无力，脱发，脱眉等症状。
为了 健康 烹饪鸡蛋时，至少保证烹饪的温度在70~80度左右，及时杀灭鸡蛋中的沙门氏菌，维持 健康 ，降低身体患癌的风险。
2、空腹吃鸡蛋
很多上班族和学生会将鸡蛋当做早餐的最佳之选，医学专家表示，空腹吃鸡蛋是一种对肠胃损伤较大的行为，鸡蛋中由于含有较多蛋白质的原因，进入身体后，在空腹状态下转化热能的过程不明显。
空腹吃鸡蛋，不但起不到营养滋补的作用，反而会使大量蛋白质积聚在肠胃中产生大量的尿素和胺类，有害物质不利于 健康 。
3、过量吃鸡蛋
老年人每天吃1~2个鸡蛋为宜，中青年人或从事脑力劳动轻体力劳动的人，每天吃两个鸡蛋最好，从事重体力劳动或消耗营养较多者，每天可吃2~3个鸡蛋。
虽然鸡蛋的营养价值高，但过量摄入鸡蛋也会导致机体代谢产物增多，增加肾脏的负担，导致肾脏机能受损，诱发身体癌变。
看完本文后，相信大家对鸡蛋是否会增加癌症死亡率以及心血管疾病发生率有了更深的了解，你是如何看待的？你觉得鸡蛋是“营养佳品”还是“致癌之物”呢？
#夏方 养生 指南#
鸡蛋还有大量的蛋白质，可以补充人体所需的蛋白质。对体弱者一起手术后的病人是有帮助的。对心血的病人当然有好处了，就是补充蛋白质，提高抵抗力。