加酵母RNA对照射小鼠外周血肝脾GSH与SOD活性

　　【关键词】 白细胞介素1

　　关键词: 白细胞介素1;酵母;RNA;电离辐射;谷胱甘肽;超氧化物歧化酶;小鼠

　　摘 要:目的 研究IL-1β(人重组白介素-1)复合酵母RNA对小鼠受γ射线外照射后外周血、肝、脾谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响，探讨药物治疗辐射损伤机制. 方法 雌性小鼠25只，随机分为5组，1150cGy腹部照射后1h，24h分别给予后肢im IL-1β，酵母RNA，IL-1β复合酵母RNA，于照后6d，取外周血、肝脏和脾脏测SOD，GSH活性. 结果 照射后外周血、肝、脾SOD，GSH活性下降.使用IL-1β，酵母RNA，IL-1β复合酵母RNA后照射组外周血、肝、脾SOD，GSH活性升高，且肝、脾的SOD，GSH活性与照射对照组之间有显著差异(P<0.05)，复合组肝脾SOD，GSH活性明显高于照射对照组具有显著差异(P<0.01)，高于照射单独给药组.外周血各照射组之间无显著差异. 结论 IL-1β复合酵母RNA升高γ射线外照射对肝、脾谷胱甘肽(GSH)，超氧化物歧化酶(SOD)活性，复合用药可以对抗射线引起机体产生的损伤作用.结果表明:照后复合应用IL-1β，酵母RNA可通过提高清除自由基，起到更好的抗辐射作用.

　　Abstract:AIM To study mechanism of IL-1βwith yeast

　　RNA to protect against S Twenty-five BALB/c female mice were abdominal irradiated with1150cGy，and divided into five groups at random:Control(-)，control(+)，IL-1β，yeast RNA and combining IL-1βwith yeast -1β，yeast RNA，IL-1βand yeast RNA were injected intramuscularly into mice1or24h after1150cGy abdominalγ- activity of glutathione and superoxide dismutase were measured in different tissues of mice on d6after S Activity of glu-tathione and superoxide dismutase decreased in tissue after superoxide dismutase and glutathione activity increased in liver and spleen if the mice were treated by IL-1β，yeast RNA after irradiation(P<0.05).In addition，the superoxide dismutase and glutathione activity increased if the mice were treated by combining IL-1βwith yeast RNA after irradiation(P<0.01).CONCLUSION Combining IL-1βwith yeast RNA can scavenge free radicals induced by irradia-tion.

　　0 引言

　　射线照射后产生自由基引起机体损伤.在抗辐射损伤研究中，可选用抑制自由基的药物降低辐射损伤[1，2] .IL-1具有退热抗炎，抗辐射[3，4] ，降低肝脏H 2 O 2 浓度[5] ，低剂量IL-1改善心脏局部缺血引起的损伤.一定剂量的IL-1可通过清除自由基降低内外因素引起的损伤.核酸及其衍生物具有提高机体免疫功能，增强巨噬细胞活力，营养学上服用核酸及其衍生物可提高机体脾脏、肝脏、小肠抵抗疾病的能力[6，7] .我们以前的实验表明通过iv，im和小肠局部注射酵母RNA，对小鼠肠道辐射损伤具有修复功能[8] .为进一步探讨IL-1β(人重组白介素-1)，酵母RNA治疗辐射损伤机制，我们以小鼠机体中的还原酶为观察指标进行药物抗放效果比较.

　　1 材料和方法

　　1.1 材料 BALB/c雌性小鼠25只，体质量(20±1)g，10wk龄，本校实验动物中心二级动物.IL-1β(北京邦定生物医学公司经销)，酵母RNA(华美生物工程公司生产)，白蛋白(中国科学院生物物理所生化厂出品).722型分光光度计，电动匀浆器(上海产)，振荡器，水浴锅，离心机.

　　1.2 方法 照射前戊巴比妥钠(40mg・kg-1 ，ip)麻醉动物，将照射组动物放置于离60 Co放射源1.70m，与放射源等高的透气塑料盒，剂量率144.59cGy・min-1 ，剂量为1150cGy，照射总时间的一半后将动物进行翻身，以保证照射剂量的均匀.照射时除腹部外躯体的其余部位用5cm厚的铅砖屏蔽.将动物随机分为照射对照组，照射IL-1β组，照射RNA组，照射复合组和阴性对照组共5组，每组5只.照后1及24h后肢im IL-1β6.6μg・kg

　　-1 ，酵母RNA4mg・kg-1 ，IL-1β(6.6μg・kg-1 )复合酵母RNA(4mg・kg-1 )，对照组im生理盐水.照射后6d，采用眼球取血，置于肝素抗凝管中，6h内测外周血中GSH活性.立即活杀小鼠取肝脾用生理盐水冲净，滤纸吸干多余水分称质量，冰浴制成1∶9的匀浆.外周血GSH活性测定方法见文献[9]，组织匀浆GSH检测采用南京建成生物工程研究所提供的方法，SOD活性测定采用NBT羟胺法.

　　统计学处理:采用本校统计学教研室SPLM软件，t检验.

　　2 结果

　　2.1 SOD活性 照射后外周血、肝、脾SOD活性下降.使用IL-1β，酵母RNA，IL-1β复合酵母RNA后照射组外周血、肝、脾中SOD活性升高，肝、脾的SOD活性与照射对照组之间有显著差异(P<0.05);复合组的肝、脾SOD活性明显高于照射对照组具有显著差异(P<0.01)，明显高于单独照射给药组，且肝脏SOD活性与单独给药组有显著差异(P<0.05).外周血各照射组之间无显著差异(Tab1).

　　表1 IL-1β，酵母RNA对γ射线照射后小鼠SOD活性的影响　略

　　2.2 GSH活性 照射后外周血、肝、脾活性GSH活性下降.使用IL-1β，酵母RNA，IL-1β复合酵母RNA后照射组外周血、肝、脾中GSH活性升高，肝、脾的GSH活性与照射对照组之间有显著差异(P<0.05)，复合组的肝、脾GSH活性明显高于照射对照组具有显著差异(P<0.01)，高于单独照射给药组且脾脏的GSH活性与IL-1β组有显著差异(P<0.05).外周血各照射组之间无显著差异(Tab2).

　　表2 IL-1β，酵母RNA对γ射线照射后小鼠GSH活性的影响　略

　　3 讨论

　　一定剂量的IL-1，可提高体内谷胱甘肽(GSH)，谷胱甘肽转移酶(GST)，超氧化物歧化酶(SOD)[10，11] ，维生素E，过氧化氢酶(CAT)及抗坏血酸的含量，达到降低体内生成脂质过氧化物(MDA)含量，清除自由基引起的机体内生物损伤;核酸及其衍生物具有提高机体内脾脏、肝脏、小肠抵抗疾病的能力[5，6] .我们以前的实验表明:通过静脉、肌肉、小肠局部注射酵母RNA，对小鼠肠道辐射损伤具有修复功能[7] .本实验在原实验基础上，通过对IL-1β复合酵母RNA，研究其对小鼠受γ射线外照射后外周血、肝、脾谷胱甘肽，超氧化物歧化酶活性的影响，探讨IL-1β复合酵母RNA治疗辐射损伤机制，研制更有效的辐射防护剂.

　　本结果表明对动物进行照射后其外周血、肝、脾中的SOD，GSH活性均下降.肝细胞在辐射损伤中属于稳定细胞对射线不敏感，但照射后机体在几微秒内已经产生损伤，肝细胞中各种酶已经变化.脾脏中含有大量淋巴细胞，淋巴细胞具有很强的辐射敏感性，实验表明SOD，GSH活性较阴性对照组低，说明辐射引发免疫器官损伤.辐射引起组织损伤的同时组织中酶的活性已经发生改变，通过观察酶的活性变化可比较损伤的程度.

　　照后1，24h后肢im IL-1β6.6μg・kg-1 ，酵母RNA4mg・kg-1 和IL-1β(6.6μg・kg-1 )复合酵母RNA(4mg・kg-1 )，所选用药物剂量为我们先前实验，肠道辐射损伤修复最适剂量[7] .各给药组外周血、肝、脾的SOD和GSH活性高于照射组，肝、脾的SOD及GSH活性与照射对照组之间有显著差异(P<0.05)，复合组与照射对照组之间差异更显著(P<0.01).外周血各照射组之间无显著差异.据报道IL-1对造血系统辐射损伤的修复剂量(0.25～1.62mg・kg-1 )远远大于IL-1β(6.6μg・kg-1 )[12] ，外周血损伤后修复的能力与肝、脾不同，可能与它们对IL-1β反应的能力不同有关.至于各组织器官表现效果不一，与药物在此蓄积浓度和靶部位不同有关.复合组肝、脾的SOD及GSH活性高于单独照射给药组，若增加样本量将有显著差异.

　　射线照射机体诱导自由基产生，自由基可与超氧化物歧化酶、谷胱甘肽结合，使其消耗而下降.实验表明IL-1β，酵母RNA可升高SOD，GSH活性，这些酶的变化又与自由基密切相关，间接反映清除自由基作用.照射后合理使用药物可防止射线引起机体产生超氧化物、H 2 O 2 、脂质过氧化物，降低辐射损伤.复合用药更有效的提高肝、脾对抗射线引起的自由基消耗机体内的谷胱甘肽(GSH)，超氧化物歧化酶(SOD).复合应用药物起到更好的抗辐射作用.药物的协同，给我们下一步寻求抗放药物提供线索，使研制有效辐射防护剂成为可能.

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