溶血对生化检验结果准确性的影响及校正方法
摘 要：目的探讨溶血对生化检验结果准确性的影响及校正方法。方法将同一标本分成实验组和对照组两组，实验组制成溶血血清标本，对照组制成未溶血血清标本 。对实验组和对照组的天冬氨酸氨基转移酶( AST)、总蛋白( TP) 、肌酸激酶( CK) 、肌酸激酶同工酶( CK － MB) 、乳酸脱氢酶( LDH) 、α － 羟丁酸脱氢酶( HBDH) 、K +、Na +、白蛋白( Alb) 、三酰甘油( TG) 和高密度脂蛋白( HDL) 等指标进行配对检验; 再对血清血红蛋白( Hb) 浓度与配对资料差异有意义的项目溶血变化值进行多元回归分析。结果( 1) 实验组TP、AST、CK、CK － MB、HBDH、LDH 和K + 测定值明显高于对照组的测定值，差异有统计学意义( P ＜ 0. 05) ; 实验组的Na + 测定值低于对照组的测定值，差异有统计学意义( P ＜ 0. 05) ; 两组中Alb、TG 和HDL 的测定值差异不明显，差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) 。( 2) 实验组中溶血引起的TP、AST、CK、CK － MB、HBDH、LDH、K + 和Na + 的溶血变化值( Y) 与血清Hb浓度变化值( X) 的相关系数分别为0. 960、0. 989、0. 985、0. 977、0. 992、0. 991、0. 988 和－ 0. 990.结论 溶血可导致多项生化指标测定结果明显改变，并与血清Hb 浓度有相关性，利用血清Hb 浓度对校正TP、AST、CK、CK － MB、HBDH、LDH、K + 和Na + 等有一定临床使用价值。
关键词：溶血; 影响; 生化检验项目; 校正方法
溶血是生化检验标本常出现的一种现象，也是难以避免的问题，对临床化学检验结果准确性的影响在国内外已有报道［1 － 2］，但对于该问题的校正方法目前却少有报道。本研究对常规生化检验项目进行了溶血前和溶血后的检测，并对结果进行对照分析，并与血清中血红蛋白( Hb) 浓度进行比较，探讨不同程度溶血标本对常规化学检验项目的影响及校正方法，现报告如下。
1 资料与方法
1． 1 对象 选取12 例健康体检正常的血液标本，其血清无肉眼可见的黄疸、脂血和溶血，平均分成实验组和对照组两组。并分别将每一份标本分装两真空采血管，其中一管为未溶血血清标本（对照组），另一管用竹签捣碎后以3 000 r /min 离心5min 制成溶血血清标本（实验组），并使12 份溶血血清标本为不同程度溶血。
1． 2 仪器及试剂 深圳迈瑞BC － 1800 半自动血细胞分析仪及其配套试剂。Olympus AU400全自动生化分析仪，生化试剂及质控品购自上海科华生物技术有限公司。IMS － 972 电解质分析仪及其配套试剂。
1． 3 方法( 1) 按常规方法上机测定并记录对照组标本及不同溶血程度血清标本的总蛋白( TP) 、天冬氨酸氨基转移酶( AST) 、肌酸激酶( CK) 、肌酸激酶同工酶( CK － MB) 、α － 羟丁酸脱氢酶( HBDH) 、乳酸脱氢酶( LDH) 、K +、Na +、白蛋白( Alb) 、三酰甘油( TG) 和高密度脂蛋白( HDL) 的结果。( 2) 深圳迈瑞BC － 1800半自动血细胞分析仪测定溶血血清标本的Hb 浓度，对于浓度相近的，用竹签再次捣碎离心后重新测定。( 3) 项目结果溶血变化值( △X) 计算: △X = 溶血血清标本生化项目测定值－ 未溶血血清标本相应的生化项目测定值。血清Hb 浓度变化值( △Hb) 计算: △Hb =溶血血清标本Hb 测定值－ 相应的未溶血血清标本Hb测定值。
1． 4 统计学方法 用SPSS 10. 0 统计软件，实验组与对照组的生化数据组间比较采用显著性t 检验; 血清Hb 浓度变化值( X) 与配对资料差异有意义的项目溶血变化值( Y) 采用多元回归分析。
2 结果
2． 1 实验组与对照组生化检验结果的测定值 实验组中的TP、AST、CK、CK － MB、HBDH、LDH 和K + 测定值明显高于对照组的测定值，差异有统计学意义( P ＜ 0. 05) ;实验组中的Na + 测定值低于对照组的测定值，差异有统计学意义( P ＜0. 05) ; 两组标本中Alb、TG 和HDL 的测定值差异不明显，差异无统计学意义( P ＞ 0. 05) 。见表1。
2． 2 血清Hb 浓度变化值与相应项目溶血变化值的关系血清Hb 浓度变化值与相应项目溶血变化值存在一定的相关性，见表2。
3 讨论
溶血是临床生化检验中较为常见的干扰因素之一。溶血对生化检验结果的干扰主要有血红素的颜色对比色分析的干扰、Hb 对蛋白质分析的干扰，红细胞内的生化成分对血清中相对应的生化检验结果也存在较大的干扰［1］。红细胞内生化成分的浓度高于血浆，溶血后将导致血浆中该物质浓度增高。其中红细胞内浓度比血浆中浓度明显高的物质有AST( 10 倍) 、ALT( 7 倍) 、K + ( 23 倍) 和CK( 69 倍) 等［2］，大量Hb 释放到血浆中导致TP 结果升高。由此可见溶血可不同程度影响血浆中这些生化指标的测定，使其测定值高于真实值。在实验中也发现实验组的TP、AST、CK、CK －MB、HBDH、LDH 和K + 等生化指标均高于对照组，差异有统计学意义， 红细胞内同时也存在一部分生化成分浓度极低或某些成分在细胞内根本不存在，当细胞内液随着溶血进入血浆内，导致血浆体积增加，对血浆有稀释作用，造成血浆中原有成分的浓度相对降低。实验组中Na +浓度出现不同程度的下降，其差异有统计学意义。当然，也有部分生化检验结果受标本溶血的影响不大，如溶血后血清Alb、TG 和HDL，这与SONNTAG［4］的研究一致。
对血清Hb 浓度变化值与溶血后部分项目溶血变化值的相关性进行分析可以发现，溶血引起的TP、AST、CK、CK － MB、HBDH、LDH、K + 和Na + 的变化值与血清Hb 浓度变化值的相关系数分别为0. 960、0. 989、0. 985、0. 977、0. 992、0. 991、0. 988 和－ 0. 990， 这一实验结果也与FRANK 等［5］报道Hb 208 g /L 的溶血标本中△LDH 为268 IU/L 基本相符。综上所述，这一回归方程对溶血标本的检测项目结果有一定的校正作用，应用各项目回归方程对轻、中度溶血标本的校正效果较好，对于严重溶血的标本，首选重新采集标本，对于不能重采标本者，利用血清Hb浓度变化值校正容易受溶血影响的生化项目( 如TP、AST、CK、CK － MB、HBDH、LDH、K + 和Na + 等) 有一定临床使用价值。
参考文献
［1］ 董振南，高静． 不同程度溶血对常规生化检验结果影响的探讨［J］． 军医进修学院学报，2005，26( 5) : 329 － 331．
［2］ GUDER W G． Thrombocytes as an interfering factor in clinicalchemistry［J］． Clin Chem Clin Biochem，2002，28 ( 6) : 445 －447．
［3］ 阴斌霞，王香玲，赵丽华，等． 溶血对生化检验准确性的影响及纠正［J］． 现代检验医学杂志，2007，22( 6) : 25 － 29．
［4］ SONNTAG O． Haemolysis as an interference factor in clinical chemistry［J］． J Clin Chem Clin Biochem，1986，24( 2) : 127 －139．
［5］ FRANK J J，BERMES E W，BICKEL M J，et al． Effect of in vitrohemolysis on chemical values for serum［J］． Clin Chem，1978，24( 11) : 1966 － 1970．