HbeAg阴性乙型肝炎病毒感染机理的研究进展

　　乙型肝炎病毒（hbv）感染是严重威胁人类健康的问题，尤其在地方性流行区域如东亚和地中海地区。hbv在与宿主相互作用的过程中，形成了持续感染和逃避清除的精确机制，但至今仍知之甚少。由于1989年carman[1]的开创性工作，使得人们逐渐意识到hbv变异可能是上述精确机制中相当重要的一部分。

　　在hbv感染的自然史中，伴随hbeag的阴转往往是hbv病毒血症的消失或炎症的静息。但在一部分感染者中如重型肝炎患者" ，感染起始即为hbeag阴性；另一部分感染者中如慢性肝炎患者，hbeag阴转并不意味着炎症活动的停止。hbeag阴性而存在hbv病毒血症的情形定义为hbeag阴性的hbv感染。对其形成的原因，很多作者从hbv变异角度在分子水平上进行了深入的探讨。

　　1 转录水平

　　hbeag前体翻译自3.5kb的前c mrna。前cmrna转录受核心基因启动子（cp）控制和调节[2]。cp包括基本启动子（bcp）、上游调节序列（curs）和负调节元件（nre）。bcp以相对独立的作用调控着前cmrna和前基因组mrna的转录[3]。

　　迄今为止，bcp变异与hbeag阴性hbv感染的关系已基本明确。首先，在研究hbeag阴性hbv感染者时发现，bcp变异很常见，变异类型包括nt1752~1776区段内的点突变和不同长短长段的缺失，以t1762/a1764联合点突变最为常见[4]；在以hbv慢性感染者为对象，对hbv进行时间生物学研究时发现，t1762/a1765变异株具有明显的生存优势，表现为快速的优势积累，在炎症活动明显的慢性乙型肝炎患者中尤其如此；与此同时，虽然hbv病毒血症持续存在，hbeag血清学状态已发生由阳到阴的转换。在体外实验中发现，t1762/a1764联合点突变影响前cmrna的转录效率，使得该mrna转录水平下降至1/5～1/3[7～9]；关于是否影响前cmrna的转录起始的精确性，有两个" 相互矛盾的结果：一者认为t1762/a1764变异使得前cmrna的转录起始位点飘移6～10个核苷酸[8]；另一个结果显示前cmrna的5’端是一致的[9]。结果间矛盾的原因尚不明确。检测蛋白表达时发现，t1762/a1764使得hbeag水平下降至20%，这" 与早期的临床研究结果似乎并不吻合；后来的研究认为hbeag检测方法的敏感性造成了体外实验与临床研究的差异[10]。

　　与此同时，t1762/a1764变异株却导致hbv复制效率和核心抗原表达水平提高[7～9]。hbeag表达降低的同时病毒水平增加，其中的原因仍不明确，但最近的一项" 实验结果似乎给出了部分答案。体外包装实验证实，hbeag前体可以干扰hbv的包装过程；由于hbeag前体与 hbv核心蛋白结构上的相似性，在核心蛋白与前基因组mrna进行装配的过程中，hbeag前体也可被误装配，但无法进行下一步的逆转录和复制过程[11]。因此hbeag前体是影响hbv包装、复制的原因之一。所以，t1762/a1764等影响到hbeag前体形成的变异株可使hbv变异株复制水平提高。这也部分解释了t1762/a1764变异株在慢性hbv感染者中的优势积累现象。至于t1762/a1764变异株使得hbv核心蛋白增加的原因，可以推测，t1762/a1764变异时，可能因为hbv核心基因启动子内调节两个3.5kb mrna转录区域的活性比失衡，造成前基因组mrna转录增多，从而在转录水平上影响hbv核心蛋白的表达。

　　hbv bcp 变异对宿主的影响目前" 仍存在不同的看法。由于t1762/a1764变异株在各类hbeag阴性hbv感染者中的普遍存在，因此bcp变异株相对于野株的毒力大小尚不能确定；虽然此类变异株能引起hbv复制效率和核心蛋白表达水平提高，但其对宿主免疫状态的影响仍未有实验结果证实。至于bcp变异株对干扰素治疗的反应，目前的证据还很不足[12]。鉴于t1762/a1764变异株在慢性肝炎患者存在优势积累现象，因此在判断干扰素疗效时，hbeag阴转可能是个假象。所以，需要，更" 精确的疗效判断标准。

　　由于curs和nre对hbv bcp的活性具有较强的调控作用[2]，两个区段是否存在影响前cmrna转录的变异，尚缺乏足够的证据，有待于进一步研究。

　　2 翻译水平

　　在翻译水平上影响hbeag形成的病毒因素主要是hbv前c基因变异，包括a1896即前c终止密码子变异和前c起始密码变异[13]。a1896变异使得前c第28位密码子由ugg突变为uag（终止密码），造成hbeag前体翻译提前终止。前c起始密码突变大约占前c变异的10%。

　　a1896变异与hbeag血清学状态的关系，并不是绝对的直接相关关系。在一部分感染a1896变异株的感染者中，应用酶免疫法可以检测到hbeag；同时也发现个别慢性乙肝病人中，其感染的毒株虽由g1896突变为a1896，hbeag血清学结果依然呈阳性（待发表结果）。其原因可能是，uag作为终止密码，其将翻译过程终止的能力在三个终止密码中是最低的，即经常被读通。虽然前c第28位氨基酸突变为终止密码，翻译hbeag前体的过程仍有限度地进行，因此a1896变异对hbeag形成的影响在某种程度上来讲也是相对的。