绞股蓝总皂苷对免疫低下小鼠模型的非特异性免

　【摘要】 目的 用绞股蓝总皂苷作为免疫增强剂治疗免疫低下小鼠模型，通过碳粒廓清实验观察非特异性免疫功能的变化，探讨绞股蓝总皂苷免疫增强的药理作用，观察剂量效果关系。 方法 小鼠随机分为6组，模型组皮下注射环磷酰胺40mg/kg，制造免疫低下模型，与各对照组和药物高、中、低剂量组分别做碳粒廓清实验，观察各组非特异性免疫功能变化。 结果 模型小鼠廓清指数明显下降，阳性对照组、绞股蓝高、中剂量组非特异性免疫功能指标明显增强。作用强度相似。绞股蓝总皂苷的作用呈剂量依赖性。 结论 以较低剂量环磷酰胺成功造成小鼠免疫低下模型。绞股蓝总皂苷能非常明显地增强非特异性免疫功能，作用呈剂量依赖性。最高剂量推荐200～400mg/kg。

　关键词 绞股蓝总皂苷 免疫学 nih小鼠

　effects of gypenosides on the immune deficit mouse's non-specific immunological function
　zhou li，ye kaihe，ren xianda

　department of respiratory，guangzhou tcm hospital，guangzhou510130.

　【abstract】 objective the gypenosides is used as an immune enhancer to cure the immune deficit mouse and observe non-specific immunological function by carbon clear pharmacological funtion of immune enhancer of gypenosides is evaluated and the dose-effect relationship is s all of the mice were administered with ctx and then were divided into six groups:control group、model group、negative control group、high dose group、middle dose group、lower dose tively，the carbon clear testwas performed in each group and the variation of non-specific immune function was s the carbon clear test showed that the index of carbon clear test in control group was markedly decreased while the index of carbon clear testing high and middle group was effect of gypenosides was dose-dependent on the non-specific sion the immune deficit model was established successfully by the administration of sides was showed markedly to increase the non-spe-cific immune function and the effect was dose highest recommendation dose was between200～400mg/kg.

　key words gypenosides immunity nih mouse

　绞股蓝总皂苷（gypenosides，gps）是从葫芦科植物绞股蓝中提取的具有四环三萜达玛烷型结构的皂苷，到目前为止，已分离出80多种皂苷成分，其中4种成分与人参皂苷rb1、rb3、rd和f2在化学结构上完全相同 ［1］ 。另外，尚有多种神经酸或酶水解后可能转化为人参皂苷rg3、rd和f2 ［2］ 。据报道gps有降血脂 ［3］、抗衰老 ［4］ 、调节机体免疫功能 ［5］ 以及抗肿瘤 ［6，7］ 等多种药理作用。本研究观察绞股蓝总皂苷片对免疫低下小鼠模型的非特异性免疫功能的影响，现报告如下。

　1 材料与方法

　1.1 材料

　1.1.1 药物 绞股蓝总皂苷，陕西安康制药厂生产，皂苷含量97%，用生理盐水稀释成50mg/l浓度药液，给药剂量为:高剂量400mg/kg，中剂量200mg/kg和低剂量50mg/kg。甘露多聚糖肽片5mg/片（市购），环磷酰胺粉针剂（本院药房领取）。

　1.1.2 动物 nih小鼠，体重18～25g，雄雌各半，广东省医学动物实验中心提供。豚鼠，雄雌不限，暨南大学实验动物中心提供。

　1.1.3 试剂与器材 印度墨汁（德国chroma产品）0.1%碳酸钠溶液，50mg/l浓度绞股蓝总皂苷原液，721分光光度计（上海第三分析仪器厂）。

　1.2 实验步骤 小鼠随机分成6组:正常对照组、模型组、阳性药物对照组、绞股蓝总皂苷高剂量组（400mg/kg）、中剂量组（200mg/kg）、低剂量组（50mg/kg），每组10只。除前两组外，每组每日分别灌胃给药喂服绞股蓝总皂苷溶液1次，连续7天。后5组动物均于第4天皮下注射环磷酰胺40mg/kg，制造免疫低下模型;按文献 ［8］ 第8天经尾静脉注射印度墨汁0.05ml/10g，于1min和5min后分别经眼眶静脉取血20ml，加入0.1%na 2 co 3 中摇匀，于680nm下比色读取吸光度。按下式计算廓清指数k和吞噬指数а:k=（lgod 1 -lgod 2 ）/（t 2 -t 1 ），а=k 1/3 ×体重/肝脾重

　1.3 统计学方法 数据以均数±标准差（ˉx±s）表示。组间比较采用组间t检验。以p<0.05为差异有显著性，p<0.01为差异有非常显著性。

　2 结果

　见表1。

　表1 各组及不同剂量下廓清指数（k）与吞噬指数（a）比较 （略）

　注:与模型组相比， * p<0.05， ** p<0.01;与阳性对照组相比， # p<0.05， ## p<0.01

　结果提示模型小鼠的廓清指数k有明显下降，而阳性药和高、中剂量绞股蓝可非常明显地增强非特异性免疫功能，其作用强度相似，作用呈剂量依赖性。但各组间的吞噬指数а无明显异常。

　3 讨论

　吸烟复制小鼠慢性支气管炎模型能使动物的免疫功能全面降低，但该作用不具统计学显著性意义。而小剂量环磷酰胺就能成功造成小鼠免疫低下模型。本实验绞股蓝总皂苷可非常明显增强非特异性免疫功能，作用强度明显呈剂量依赖关系。而王斌等所做的gps体外对免疫细胞功能影响的研究 ［9］ ，阐述了gps在不同浓度（2～50mg/l）对主要免疫细胞功能均具有免疫增强作用，并呈正相关关系。而当浓度再升高时，gps的上述作用则减弱，此种作用减弱不是其毒性所致，而是由其他介质释放所引起 ［10］ 。本实验在gps浓度不变（50mg/l）的条件下绞股蓝总皂苷的非特异性免疫功能呈正相剂量依赖关系。一致认为使用一个最适剂量才能达到理想效果，进一步研究正在进行当中。

　参考文献

　1 竹本常松，在原重信，中岛正，等.绞股蓝成分的研究（第一报），penoside i xiv的化学构造.药学杂志（日），1983，103（2）:1732.

　2 吴基良.绞股蓝的药理研究概况.现代中医，1989:2（1）:393.

　3 戴汉云，孟庆云，朱捍国，等.绞股蓝总皂甙对各种脂蛋白的影响.中草药，1989，20（4）:284.

　4 陈钰，许衡均.绞股蓝对果蝇寿命的影响.中国药理学通报，1987，3（6）:3405.

　5 张崇泉，杨晓慧，徐琳本，等.绞股蓝总皂甙免疫调节作用的研究.中西医结合杂志，1990，10（2）:966.

　6 王玉琴，张秋菊.绞股蓝总皂甙的抗肿瘤作用.中西医结合杂志，1988，8（5）:2867.

　7 王志洁，李新志，程井辰.绞股蓝对艾氏腹水癌的抑制作用及机理.肿瘤，1990，10（6）:246.

　8 姚文斌.大黄的生化学研究.波叶大黄多糖对免疫功能作用.中国药科大学学报，1990，21（2）:99.

　9 王斌，葛志东.绞股蓝总皂甙体外对免疫细胞功能的影响.中药新药与临床药理，1999，10（1）:36-37.

　10 王斌，陈敏珠.白芍总甙对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞功能和脾细胞增殖反应的影响.中国药理学与毒理学杂志，1994，8（2）:128.

　（编辑一 凡）

　作者单位:510130广东省广州市中医医院呼吸科

　　　　　　510632广州暨南大学药学院药理教研室