对比MGT与TAT检测新生儿溶血病的效果

摘　要：目的：探讨微柱凝胶技术与传统试管法抗人球蛋白试验技术在新生儿溶血病(HDN)中的检测效果。方法：选取来自本院的新生儿溶血病患者及其母亲血液标本各一份，总共600份，检测新生儿与母亲血型是否相同，将ABO-HDN患者血液标本均分为两份，标记为传统检测组及凝胶技术组，每组各包含新生儿血液标本共295份，，然后对传统检测组新生儿血液标本进行传统试管法抗人球蛋白试验技术(tube anti-person globulin experiment technique,TAT)检测；凝胶技术组则进行微柱凝胶技术法(microcolumn gelexperiment technique,MGT)检测。分析比较两组检测效果。结果：血型检测结果为300例患儿中ABO-HDN295例（98.33%），RH-HDN4例（1.33%），其他新生儿溶血病患者1例（0.33%）；传统检测组295例标本中有197例（66.78%）被诊断为新生儿溶血病，低于凝胶技术组221例（74.92%）；传统检测组中直接Coombs试验阳性44例（14.92%）低于凝胶技术组68例（23.0%）；游离抗体试验阳性50例（16.95%）低于凝胶技术组110例（37.29%），抗体释放试验阳性197例（66.78%）低于凝胶技术组221例（74.92%），两组比较具有统计学意义（P<0.05）。结论：微柱凝胶技术在新生儿溶血病(HDN)中的检测效果较传统试管法显著。

关键词：新生儿溶血；微柱凝胶技术；传统试管法；比较

       新生儿溶血病是指母亲与其子女因血型不合引起的免疫性溶血，其中ABO-HDN最常见，ABO-HDN主要发生在母亲为O型血，胎儿为A型或B型血，约半数的ABO溶血病发生于第一胎，因母亲在首次妊娠前已受到多种因素刺激，体内已经产生了抗A或抗B抗体，均为IgG类抗体[1]。微柱凝胶技术为一种广泛应用于血型鉴定，抗体筛选及鉴定以及直接、简接抗人球蛋白试验中的方法，具有操作简便、特异性强、灵敏度高、标本材耗少等优点，其结果可标准化，便于长期保存。现将微柱凝胶技术与传统试管法检测新生儿溶血效果比较如下：
        1 资料与方法
        1.1 临床资料
   研究对象为本院2010年3月至2012年7月的新生儿溶血病患者，取上述患儿及其母亲血液标本，总共600份，患儿均为出生1d～2月，与母亲血型不合。300例患儿母亲血型O型，患儿A型血168例、B型血132例。患儿在病情严重程度、合并其他疾病、性别等方面无明显差异，具有可比性（P>0.05）。
        1.2 试验试剂
　　 抗人球蛋白试剂、A、B、O试剂红细胞由上海血液生物医药有限责任公司提供，微柱凝胶检测卡以及专用离心机、孵育箱均由长春博迅生物技术有限公司生产。
        1.3 ABO及Rh血型鉴定
   取新生儿及其母亲的少许血液标本，用其抗凝血做ABO及Rh血型鉴定。
        1.4 ABO-HDN检测
        1.4.1 直接Coombs试验
       将传统检测组患儿红细胞用生理盐水充分洗涤3遍，配成5%红细胞悬液，加入足够稀释度的抗人球蛋白血清与之混合；将凝胶技术组红细胞配成0.8%红细胞悬液，取50ul悬浮液加入抗IgG卡的其中一个小孔内，用离心机分离7～8min观察结果。
        1.4.2 游离抗体试验和抗体释放试验
       在一张IgG卡上标记A、B、O和A’、B’、C’六个孔，游离抗体试验在A、B、O三个孔中分别加入患儿血清25ul，A’、B’、O’三个孔中分别加入患儿红细胞经酸放散离心后的上清液25ul，再于每个孔中加入0.8%的A、B、O标准红细胞50ul。完成后将IgG卡进行孵育、离心，观察并记录结果；传统检测组则为加入抗人球蛋白的方法检测血清及血型的抗体。
        1.5 诊断HDN的标准[2]
　　直接Coombs试验阳性及抗体释放试验阳性为HDN的确诊试验，游离抗体试验阳性结果只能作为参考，而不是确诊试验。
        1.6  统计学方法
　　对本次研究数据使用SPSS17.0统计分析软件，计数资料采用检验，以P<0.05,为具有统计学意义。
        2 结果  血型检测结果为300例患儿中ABO-HDN295例（98.33%），RH-HDN4例（1.33%），其他新生儿溶血病患者1例（0.33%）；传统检测组295例标本中有197例（66.78%）被诊断为新生儿溶血病，低于凝胶技术组221例（74.92%）；传统检测组中直接Coombs试验阳性44例（14.92%）低于凝胶技术组68例（23.0%）；游离抗体试验阳性50例（16.95%）低于凝胶技术组110例（37.29%），抗体释放试验阳性197例（66.78%）低于凝胶技术组221例（74.92%），两组比较具有统计学意义（P<0.05）。见表 1
                 

        3讨论
　　新生儿溶血病是由于母体内存在着与胎儿红细胞不配合的血型抗体而引起胎儿红细胞大量溶解破裂，新生儿溶血病常可引起黄疸、贫血、肝脾肿大等，严重时甚至会导致胆红素脑病及心力衰竭，故准确而敏感的HDN试验性对该疾病的临床诊断与治疗起到了非常重要的作用[3]。MGT利用的是微柱凝胶微粒的筛选原理，在离心作用下，将凝集与非凝集的红细胞分开，凝集的红细胞聚集在凝胶的上部或凝胶中（试验阳性），未发生凝集的红细胞则沉积于凝胶管底部（试验阴性）。较TAT的操作程序复杂、对操作者要求较高、结果保存不持久、易产生假阴性等， MGT依据抗原和抗体反应原理，操作简便快捷、结果易于保存，还可以极大地避免抗体蛋白被残留蛋白质中或抗球蛋白被残留盐分稀释所产生的假阴性，降低了漏诊率。
　　此次MGT与TAT检测新生儿溶血病对比结果表明凝胶技术组在直接Coombs试验、游离抗体试验及抗体释放试验中阳性检出率均明显高于传统检测组，说明MGT对于HDN的检出是有帮助的，效果值得肯定。
　　综上所述， MGT极大地提高了HDN患者的检出率，其特异性强、灵敏度高，值得在临床上广泛应用。
参考文献：
[1] 刘晗，李彤彤，李浩泷.传统试管法与微柱凝胶技术检测新生儿溶血病的比较[J].临床输血与检验，2008，10（3）：266-267.
[2] 唐任光，黄庆，李荣颜.微柱凝胶卡式法和传统试管法检测新生儿溶血病3项结果的比较[J].中国输血杂志，2009，22（11）：913-914.
[3] 谢世荣，张兴明．凝聚胺技术在产前血型抗体及新生儿溶血病检查中的应用[J].检验医学与临床，2008，5(4)：218-219．

作者简介：
黄赵锋（1980-），男，广西岑溪人，大学本科，初级技师，研究方向：输血。