复方嘧啶颗粒剂中磺胺嘧啶与甲氧苄啶含量的H

摘　要：目的：通过高效液相色谱仪对复方嘧啶颗粒中磺胺嘧啶与甲氧苄啶的含量进行测定。方法：选用中国药品生物制品鉴定所提供的磺胺嘧啶及甲氧苄啶作为对照品，市售复方磺胺嘧啶颗粒剂（沧州康平药业，国药准字H13023605，颗粒剂，成人用），乙胫、甲醇为色谱纯，其他药用辅料，试剂为分析纯。配置溶液、对照品溶液、共视频溶液测定后代入线性A=318904.c+78032.3，r=0.09994（磺胺嘧啶）和A=94532.8c+65027.8，r=0.9991（甲氧苄啶）。结果：两种成分均可较好分离且得到满意峰型，保留时间满意；检测中发现波长减小成份中锋面积较接近但会出现基线漂移的情况，最选择在240nm作为最佳测定波长。结论：复方磺胺嘧啶片含量的测定对其药品质量管理及进一步调整具有重要意义。

关键词：复方嘧啶颗粒剂；磺胺嘧啶；甲氧苄啶；HPLC测定；

        复方嘧啶颗粒剂作为磺胺嘧啶和甲氧苄啶的复方剂，具有对细菌叶酸代谢的双重阻断，抗菌效果较好多呈现杀菌作用[1][2]。本次对该颗粒剂进行含量测定，选取HPLC法，与通常方法比较操作简便、测量准确且测定条件要求不高。外标法在相同条件下对样品与对照品进行测定峰面积，从而检验出两种成分的含量；复方磺胺嘧啶片含量的测定对其药品质量管理及进一步调整具有重要意义/
      1.资料和方法
      1.1一般资料
    本次测定选用美国热电TSP公司高效液相色谱仪SPECTRA SYSTEM P1000及该公司紫外检测器UV100，瑞士MT公司AG285电子天枰，东西电子色谱工作站A5000（北京）。选用中国药品生物制品鉴定所提供的磺胺嘧啶及甲氧苄啶作为对照品，市售复方磺胺嘧啶颗粒剂（沧州康平药业，国药准字H13023605，颗粒剂，成人用），乙胫、甲醇为色谱纯，其他药用辅料，试剂为分析纯。
      1.2方法
      1.2.1色谱条件
    色谱柱为ODS柱，流动相依次水（700）-乙腈（200）-三乙腈（1），PH值使用稀醋酸调整为5.8±0.15，加水稀释为1000ml，本次选择240nm作为测试波长，流速控制为0.8ml/min，进样量20μl。
      1.2.2溶液配置
　　对照品贮备液：精密称取磺胺嘧啶100mg和甲氧苄啶12.5mg，置于50ml的量瓶中，加入1ml的NaOH溶液（0.01mo/L）及适量甲醇振摇均匀，充分溶解后继续加入甲醇至规定刻度摇均待用。对照品溶液：精密量取贮备液1ml置于50ml量瓶，使用流动相稀释到浓度为磺胺嘧啶40μg/ml、甲氧苄啶5μg/ml的溶液。取半包市售复方磺胺嘧啶颗粒剂（沧州康平药业，国药准字H13023605，颗粒剂，成人用）精密称取，将颗粒研细成粉，内含磺胺嘧啶成分200mg。称取后颗粒计入100ml烧瓶中，加1ml的NaOH溶液（0.01mo/L）同时加入适量甲醇进行振摇，使其充分溶解。摇均过滤后，精密量取滤液1ml置于50ml量瓶，最后使用流动相稀释至制定刻度摇均，供试品溶液即得。将对照品溶液依法测定，呈现色谱图[3]。
      1.2.3线性关系分析
　　精密量取贮备液0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml和1.4ml共5份，将其分别置于50ml量瓶中，使用流动相分别稀释到制定刻度摇均后待用，每份进样20μl，按色谱条件对样品峰面积进行测定，设峰面积为（A）对其浓度（C）进行回归分析，分别得出磺胺嘧啶A=318904.c+78032.3，r=0.09994和甲氧苄啶A=94532.8c+65027.8，r=0.9991的回归方程。
      1.2.4回收率试验及样品含量测定
    按照处方制备空白组6份，在其中5份加入精密称量的对照组样品不同含量，另一份空白份作为对照保留。将6份分别置于100ml量瓶，加入1ml的NaOH溶液（0.01mo/L）同时加入适量甲醇进行振摇，使其充分溶解。使用流动相分别稀释到制定刻度摇均后待用，每份进样20μl。另取三批样品进行含量测定。
      2.结果
      2.1重现性结果
   对供试品1批进行5次测定后得到结果，磺胺嘧啶RSD（%）为0.57，兼氧苄啶RSD（%）0.82，详见表2.1。

      2.2回收率及样品含量测定结果
   按照规定进行回收率试验和样品含量测定后，得到磺胺嘧啶平均回收率为98.78%，RSD为0.34%。甲氧苄啶平均回收率为98.46%，RSD为0.58%。详见表2-2，表2-3。三批样品含量测定结果详见表2-4。
 
   

      3.讨论
　　本次对复方嘧啶颗粒剂中磺胺嘧啶与甲氧苄啶含量进行HPLC法测定，全部测定过程结束后发现，在试验中使用流动相对两种成分进行分离时效果较好，保留时间适宜且可得到满意峰形。在测试时发现伴随波长的改变峰面积呈一定的变化趋势，并且随波长的减小两种不同成分的峰面积较为接近，但在波长减小的情况下同时会引起基线漂移。在测量中发现磺胺嘧啶在233～237 nm段具有最小吸收尤其在236 nm处，甲氧苄啶在220～245 nm段具有大宽幅吸收，所以综合考虑本次测试选择的240 nm作为测定波长较为适宜。在试验中加入1 ml的NaOH溶液（0.01mo/L）可促进磺胺嘧啶溶解增加试验效率。根据《中国药典》所记载检测方法较为繁琐并且对测定时条件均有特殊的要求，容易造成误差[4]。HPLC法测定简便、省时可准确得出测试结果，对其药品质量管理及进一步调整具有重要意义。

参考文献：
[1] 张英,李嵘立. HPLC法测定小儿复方嘧啶颗粒剂含量[J]. 中国当代医药, 2011, 18(13): 51-52.
[2] 宋金荣, 万芳友. HPLC法同时测定复方磺胺嘧啶片中磺胺嘧啶和甲氧苄啶的含量[J]. 山东医药工业, 2003, 22(2): 17-18.
[3] 孟令如, 刘新彦, 张义从, 等. HPLC法测定联磺甲氧苄啶胶囊中磺胺甲噁唑、磺胺嘧啶、甲氧苄啶的含量[J]. 河北化工, 2003, (5): 57-58.
[4] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典[R]. 北京: 中国医药科技出版社, 2012.