高盐饮食下SHR大鼠胸主动脉TGFβ1的变化

摘　要：目的：观察慢性盐负荷对自发性高血压大鼠（SHR）胸主动脉TGFβ1表达的影响，探索盐在心血管疾病发生发展中的作用机制。方法：85周龄SHR雄性大鼠16只，高盐组（4%NaCl）、正常盐组（0.4%NaCl）各8只，运用鼠尾动脉测定大鼠血压，于饲养4周处死，取胸主动脉行HE染色进行大体病理形态学观察，采用免疫组织化学方法观察主动脉管壁TGFβ1的蛋白表达。结果：4周后高盐组的收缩压（158±13.6）mm Hg（1 mm Hg=0.1333 kPa）高于正常盐组（145±10.9）mm Hg，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）；高盐组胸主动脉TGFβ1蛋白表达水平均高于正常盐组，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：慢性盐负荷可使SHR胸主动脉管壁增厚，TGFβ1蛋白表达水平升高。

关键词：高血压；盐负荷；转化生长因子β1；自发性高血压大鼠
　　大动脉结构改变导致的大动脉功能损害是心血管事件发生的重要因素之一。最近有试验显示，动脉僵硬度与24 h尿钠排泄量明显相关，而且这种作用与盐所致的血压升高无关[1]。转化生长因子1（TGFβ1）是一种能够使血管平滑肌细胞增殖、成纤维细胞增生、细胞外基质沉积的细胞因子，它在心脏动脉重构过程中起着重要作用。实验通过观察高盐饮食下SHR大鼠主动脉管壁结构以及TGFβ1表达含量的变化，探索盐导致动脉结构改变的机制。现报告如下。
1 资料与方法
1.1  实验动物及分组：5周龄SHR大鼠16只，分为高盐组（饲以4%高盐饮食，n=8）和正常盐组（饲以0.4%正常盐饮食，n=8），其他饲养条件保持一致。各组分别饲养4周后采用BP-6动物无创血压心率测定仪测量血压、心率；处死，取血、取主动脉备用。
1.2  主动脉TGFβ1免疫组化测定：石蜡切片；30%H2O2室温孵育20 min，PBS冲洗；热修复；山羊血清室温孵育10 min；加入适量一抗，4℃过夜；加二抗37℃孵育20 min，PBS洗；加辣根酶标记的链酶卵白素孵育37℃ 30 min，PBS洗；DAB显色，封片。主动脉细胞浆内有棕黄色颗粒为阳性，测定其阳性染色的积分光密度值（IOD），IOD值越高组织抗原含量越高，取5个视野的平均值作为该切片的值。
1.3  统计学分析：实验数据以均数±标准差（）表示，使用SPSS 13.0统计软件进行数据处理，组间比较采用单因素方差分析，双侧P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1  盐负荷对SHR大鼠收缩压的影响：在4周末高盐饮食组SHR大鼠的SBP在4周显著高于正常摄盐组（158±13.6）mm Hg vs（145±10.9）mm Hg（1 mm Hg=0.1333 kPa），两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
2.2  主动脉组织形态学观察：在4周末高盐组主动脉管壁明显较正常盐组增厚。
2.3  盐对SHR胸主动脉TGFβ1表达的影响：在4周末高盐组大鼠主动脉TGFβ1的表达均较LS组增高，比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
3 讨论
　　盐是高血压重要的环境因素之一。然而近年来的研究表明，高盐摄入不仅导致血压升高，而且有独立于血压之外的多重作用，直接导致组织器官损伤，如左室肥厚、肾功能损害、脑卒中等[1]。早在20世纪90年代，Avolio等人就采用脉搏波速度的方法发现长期的低盐饮食可改善正常人群的大动脉弹性[2]。
　　实验免疫组化结果显示，HS组的大鼠4周高盐饮食后TGFβ1的表达均较LS组增高，提示盐促进大动脉重构可能部分是通过增加TGFβ1的表达而实现的。最近Ying等研究表明高盐导致TGFβ1增加可能是通过激活Pyk2与c-Src组成的复合体实现的[3]。
　　综上所述，实验显示高盐可导致大动脉TGFβ表达增多，管壁增厚重构，这可能是高盐饮食导致心血管事件发生率升高的重要机制之一。
4参考文献
[1] Polónia J,Maldonado tion of salt in take by urinary sodium excretionina Portugue seadult population and its relationship to arterial stiffness[J].Rev Port Cardiol,2006,25(9):801.
[2] Guilhemdu C,Mimran -Pressure-related Effects of Dietary Sodium[J].Current Hypertension Reports,2007,9(1):154.
[3] ism of dietary salt-mediated increase in intrava scular production of TGF-β1[J].AmJ Physiol RenalPhysiol,2008,295(2):406.