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微柱凝胶在临床输血中的应用

发布时间:2015-12-13 11:58

摘 要:目的:观察微柱凝胶技术在检测临床配血标本中的作用,探讨其在临床输血中的价值。方法:对血样标本给予微柱凝胶法和凝聚胺交叉配血法,进行配血试验;用微柱凝胶卡做抗体筛查,微柱凝胶法和试管法同时进行直接抗人球蛋白试验,对比结果。结果:采用微柱凝胶技术进行交叉配血与凝聚胺交叉配血法,对不完全抗体的检出率差异无统计学意义(P>0.05);交叉配血不合标本用两种方法进行DAT试验,阳性率差异无统计学意义(P>0.05);两种方法进行DAT试验,以试管法为金标准,微柱凝胶法敏感性为96.0%、特异性为90.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:微柱凝胶技术用于临床血型血清学检测中,具有灵敏度高、结果保存时间短、标本用量少、操作简便等优点,具有临床推广价值。

关键词:安全输血;交叉配血;微柱凝胶技术;凝聚胺交叉配血法
    临床安全输血中的首要保证是进行准确血型鉴定、交叉配血,同时这也是避免临床发生溶血性输血反应的重要环节[1]。微柱凝胶技术作为新的免疫学检测技术,应用于直接抗人球蛋白试验(DAT)中具有一定优势,逐渐为人们所接受并广泛应用于临床血型血清学检测。吉林省延边大学附属医院对需要输血的患者采用微柱凝胶法进行交叉配血与凝聚胺交叉配血法进行比较,同时将直接抗人球蛋白试验的微柱凝胶法与试管法进行比较,现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1  一般资料:选取本院2010年2月~2011年2月各科室需输血的366例患者,用含有EDTA-K2抗凝剂的真空采血管采集患者血液5 ml,混匀并离心备用,取抗凝血标本进行试验;供血血源来自无偿献血者。

1.2  仪器与试剂:微柱抗人球蛋白交叉配血卡、试管、微柱凝胶卡专用离心机、普通血清学专用离心机、微量加样器、37℃免疫微柱孵育器,均为戴安娜公司产品;凝聚胺试剂为贝索公司提供;抗体筛选细胞为上海血液生物医药有限责任公司提供。

1.3  试验方法:对血样标本给予微柱凝胶法和凝聚胺交叉配血法,进行配血试验;其中交叉不合的标本用两种方法进行扶持,并采用微柱凝胶卡进行抗体筛查,以及进行直接抗人球蛋白试验。

1.3.1 交叉配血:按生产厂家所提供的说明书进行交叉配血,对366份标本采用微柱凝胶配血卡和凝聚胺试剂进行交叉配血。

1.3.2 微柱凝胶卡抗体筛查试验:按生产厂家所提供的说明书进行,上述366分标本中279份有妊娠史、输血史、交叉配血不合者进行本次抗体筛查试验。

1.3.3 DAT试验:交叉配血不合的12份标本进行DAT试验(同时进行试管法和微柱凝胶法)。试管法具体操作按照传统抗人球蛋白试管法操作。具体操作可按厂家所提供的说明书进行。

1.4  统计学方法:采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1  交叉配血结果:366例交叉配血中:微柱凝胶法有4例主侧交叉不合,7例次侧不合;凝聚胺交叉配血法有3例主侧出现凝聚,4例次侧出现凝聚。两种方法检出不完全抗体的差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2  抗体筛查结果:279份标本进行微柱凝胶卡抗体筛查试验,结果有9例出现阳性。

2.3  直接抗人球蛋白试验结果:12例交叉配血不合标本用两种方法进行DAT试验,阳性结果分别有6例(50.0%)、5例(41.7%),差异无统计学意义(P>0.05)。两种方法检测结果,以试管法为金标准,微柱凝胶法敏感性为96.0%、特异性为90.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

    微柱凝胶技术基本原理是微柱凝胶的微孔过滤功能,免疫化学抗体特异性反应可通过离心技术,把已经发生凝集反应的红细胞阻滞于凝胶内,未发生凝集的单个红细胞可穿过微孔而到达柱底,因此,微柱凝胶技术具有区分凝集的功能[2]。这种技术与传统方法相比,具有以下优点:无须洗涤、操作简便、试验所需时间短;试验结果清晰稳定、易于判读结果、易于保存;试验经历的步骤经过标准化,其自动化程度较高,且灵敏度高、特异性强、重复性好,能够减少标记以避免错误,试验所需标本的量少[3]

    我国目前主要使用的交叉配血法有凝聚胺法以及抗球蛋白法,凝聚胺法原理是中和红细胞表面电荷,通过离心使红细胞非特异性凝集,改变液体环境使非特异性凝集解聚,而特异性凝集不能被解聚,可检出不规则抗体。微柱凝胶法利用生物化学凝胶过滤技术、离心技术、免疫化学抗体抗原特异反应,可以灵敏检测出标本中可能存在的血型抗体。微柱凝胶技术相比凝聚胺法,对实验室操作人员技术要求不高,存在对结果产生影响的因素较少,结果判读更为简单,具有临床推广意义。

4 参考文献

[1] Parkin DM,Brary FB,Pisani cancer statistics[J].Cancer J Clin,2005,55(1):74.

[2] 周益强,肖  倩.微柱凝胶技术在交叉配血中的应用研究[J].右江民族医学院学报,2009,6(12):37.

[3] 陈燕萍,王长奇.微柱凝胶技术鉴定血型和筛检不规则抗体的临床应用[J].实验与检验医学,2008,6(3):26.

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