XRCC1基因在食管癌组织、癌旁组织中的蛋白表达与

摘　要：目的：探讨DNA修复基因XRCC1在人食管癌组织、癌旁组织中的蛋白表达及其临床意义。方法：应用免疫印迹技术对66例食管癌患者的癌、癌旁组织中XRCC1的蛋白表达水平进行检测和比较。结果：66例食管癌患者XRCC1在癌组织的蛋白表达高于癌旁组织（P＜0.05）；淋巴结转移阳性患者组XRCC1在癌组织与癌旁组织的表达差异程度高于淋巴结转移阴性患者组（P＜0.05）；不同临床分期、病理类型、鳞癌中不同分化程度、族别病例组之间XRCC1在食管癌和癌旁表达比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论：XRCC1的蛋白表达在癌组织和癌旁组织表达差异程度与食管癌发生及淋巴结转移有关联。

关键词：基因修复；XRCC1；食管癌；蛋白表达
　　人类X线修复交叉互补基因1（X-ray repair cross complementing 1，XRCC1），是影响细胞对电离辐射敏感性的一个哺乳动物基因[1]。XRCC1基因是对因射线及过氧化物产生的DNA损伤进行特异性修复的基因，在多数正常哺乳动物细胞XRCC1是低水平表达的，突变的或过高表达的XRCC1可干扰正常的修复途径。文章通过对新疆地区高发肿瘤之一食管癌与XRCC1的蛋白表达建立相关关系，目的在于检测XRCC1在食管癌组织和癌旁组织中的蛋白表达水平，进而探究XRCC1在食管癌发生进展过程中的生物学功能，为进一步探讨XRCC1在食管癌发生中的生物学功能并为食管癌在高风险人群中的筛查及提示预后提供参考。
1 资料与方法
1.1  一般资料：收集新疆医科大学附属肿瘤医院2007年7月～2009年3月经病理确认为食管癌的66例患者胃镜下癌组织与癌旁组织标本，其中男48例，女18例，年龄43～83岁，平均60.69岁。参照国际抗癌协会（UICC，2002）制定的TNM第六版分期标准将食管癌分为四期，Ⅰ期3例，Ⅱ期23例，Ⅲ期和Ⅳ期共37例（3例无分期）。其中鳞癌57例，腺癌3例（2例为小细胞癌4例不详），高分化鳞癌9例，中分化38例，低分化4例（6例无分化程度）。淋巴结转移者46例，淋巴结未转移者17例（3例无淋巴结转移资料）。汉族34例，维族23例，哈族7例，回族2例。
1.2  实验方法：①制备蛋白样品并测定蛋白浓度；②样品的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳；③转移印迹；④封闭；⑤一抗孵育；⑥二抗孵育；⑦蛋白检测。
1.3  统计学处理：统计分析结果采用SPSS 13.0软件对数据进行分析，使用配对设计的秩和检验，计量资料的统计描述，采用M（IQR）描述其集中趋势和离散趋势，以P＜0.05为检验标准。
2 结果
2.1  XRCC1蛋白表达在癌与癌旁表达的比较：XRCC1在癌与癌旁组织的表达M（IQR）分别为1.45（0.64，3.07）、1.22（0.46，2.05），其差异有统计学意义（Z=-2.942，P=0.003），XRCC1在癌组织的蛋白表达程度高于癌旁组织。
2.2  淋巴结转移阴性、阳性患者XRCC1在癌与癌旁的蛋白表达差比较：XRCC1在淋巴结转移阳性、阴性患者癌与癌旁组织的表达M（IQR）分别为1.00（0.004，1.398）、0.26（-0.904，1.033），其差异有统计学意义（Z=4.435，P=0.035），淋巴结转移阳性患者组XRCC1的蛋白表达差高于淋巴结转移阴性者组。
2.3  不同分期患者XRCC1在癌与癌旁蛋白表达差异程度比较：Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期患者XRCC1在癌与癌旁组织的表达M（IQR）分别为-0.218（-6.416，26.712）、0.316（-0.870，1.008）、0.529（0.004，1.398），差异无统计学意义（H=1.498，P=0.473）。
2.4  不同病理类型患者XRCC1在癌与癌旁蛋白表达差异程度比较：鳞癌与腺癌患者XRCC1在癌与癌旁组织的表达M（IQR）分别为0.316（-0.229，1.137）、0.529（0.030，1.069），差异无统计学意义（Z=-0.288，P=0.773）。
2.5  鳞癌中不同分化程度患者XRCC1在癌与癌旁的蛋白表达差异程度比较：低、中、高分化鳞癌患者XRCC1在癌与癌旁组织的表达M（IQR）分别为0.524（-0.527，4.870）、0.529（0.000，1.008）、0.206（-0.480，1.074），差异无统计学意义（H=1.232，P=0.540）。
2.6  不同族别患者XRCC1在癌与癌旁表达差异程度比较：汉、维、哈族患者XRCC1在癌与癌旁组织的表达M（IQR）分别为0.529（0.065，1.123）、0.110（-0.473，1.063）、0.021（-0.218，1.627），差异无统计学意义（H=1.112，P=0.573）。
3 讨论
　　人XRCC1位于人19号染色体的长臂区（19q13.2～19q13.3）。XRCC1通过与多聚ADP核糖聚合酶、DNA连接酶Ⅲ和DNA多聚酶β等作用，来修复包括氧化、应激在内的各种损害引起的各种DNA损伤[2]。体外实验发现，XRCC1缺陷的细胞染色体缺失频率增高，对离子辐射、过氧化剂和烷化剂等异常敏感[3]。
　　食管癌的发生是一个多步骤、多因素参与的过程，癌变机理多与肿瘤抑制基因失活和原癌基因激活有关。郑乃刚等应用免疫组化方法对17例食管癌患者的癌组织、癌旁组织及相邻的正常组织中POLB和XRCC1的免疫反应性（IR）进行定位及表达水平的比较，XRCC1积分值分别为（80.0±2.5），（40.0±1.3）和（20.0±0.6），依次减弱（P＜0.01）。本研究中66例食管癌患者中XRCC1在癌与癌旁组织的表达M（IQR）分别为1.45（0.64，3.07）、1.22（0.46，2.05），XRCC1在癌组织的蛋白表达程度高于癌旁（P＜0.05），淋巴结转移阳性患者组XRCC1在癌组织与癌旁组织的蛋白表达差高于淋巴结转移阴性者组（P＜0.05），与上述研究相符，提示XRCC1在食管癌的发生发展过程中可能起着重要的作用[4]。
　　已有大量研究表明XRCC1基因多态对DNA损伤修复能力有影响，XRCC1基因及其表达产物也可能通过影响肿瘤进展、转移相关基因突变的修复能力，而与肿瘤TNM分期、淋巴结转移等存在相关性。
　　本研究中不同分期、病理分型、病理分化程度及族别病例组之间，XRCC1在癌组织与癌旁组织蛋白表达差比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），与研究设计时理论预测结果不一致，这一结果可能系本研究采用实验技术较单一，样本量较少所致。今后将扩大样本量，使用不同检测方法，在不同层面上进行进一步实验，使今后的研究中对XRCC1在癌组织的表达水平与临床分期、病理类型、淋巴结转移、分化程度及族别间的关联更加明确，并对XRCC1基因在临床病理诊断方面的应用起到提示作用。
　　大量研究证明，食管癌发病中XRCC1可能是很重要的修复损伤的参与基因，其在肿瘤发生和进展过程中都被提示有重要的影响作用。食管癌的发生是多环节，多因素的，对该基因表达的研究与临床诊疗相结合，将为食管癌 的早期发现及制定治疗方案提供一些参考。
4 参考文献
.郑州大学学报医学版,2003,38(4):503.