法舒地尔对不稳定型心绞痛患者血清IL6水平的

【摘要】 目的 探讨il6在不稳定型心绞痛(uap)患者中的作用及法舒地尔对其的影响。方法 选择冠心病患者80例。稳定型心绞痛(sap)组20例，男12例，女8例; uap组60例，男36例，女24例。将uap组分为低、中、高危险组，其中低危险组20例，男13例，女7例;中危险组20例，男11例，女9例;高危险组20例，男12例，女8例。将uap组配对分成：常规治疗组及法舒地尔治疗组，其中常规治疗组30例，男18例，女12例;法舒地尔治疗组30例，男18例，女12例。同时将20例健康正常人作为正常对照组，男15例，女5例。uap组患者均给予扩冠、抗凝、调脂等常规治疗，法舒地尔治疗组加用法舒地尔注射液，即将该药2 ml加入生理盐水50 ml静脉滴注，每日2次，疗程14天。正常对照组、所有病例入选前及uap患者治疗后于清晨取肘静脉血，采取双抗体夹心abcelisa法测定血清il6水平。结果 治疗前uap组血清il6水平均高于sap组和正常对照组(p<0.01),sap组血清il6水平均略高于正常对照组(p<0.05)。在uap组治疗前，高危险组患者血清il6水平均高于中危险组和低危险组(p<0.01)，中危险组患者血清il6水平均高于低危险组(p<0.05)。法舒地尔治疗组治疗后血清il6 水平均低于治疗前(p<0.01),常规治疗组治疗后血清il6水平均低于治疗前(p<0.05)，法舒地尔治疗组治疗后血清il6水平均低于常规治疗组治疗后(p<0.05)。结论 患者外周血中il6表达水平与病情严重程度相关;法舒地尔具有抑制uap患者血清il6水平升高的作用;并且可通过抗炎途径治疗uap。

【关键词】 法舒地尔;不稳定型心绞痛;il6

　炎症因子在心血管事件发生、发展、判断疾病严重程度及预后中具有重要的预测价值。其中il6可能与不稳定型心绞痛(uap)发生、发展有密切关系〔1〕。法舒地尔能够缓解冠脉血管痉挛，对uap有较好的治疗效果，但其机制不明。有关法舒地尔对uap患者血清il6水平影响及从危险分层的角度探讨il6与uap疾病严重程度的相关报道甚少。本研究旨在探讨法舒地尔在uap中的作用，为通过阻断细胞因子通路抑制炎症反应，从而预防和治疗uap提供实验依据。

　　1 资料与方法

　　1.1 病例选择

　　选择2008年4月至2009年12月在吉林大学第二医院住院患者80例，其中sap组20例，男12例，女8例，年龄41～62岁;uap组60例，男36例，女24例，年龄40～65岁。另将uap组分成：低危险组20例，男13例，女7例，年龄40～61岁;中危险组20例，男11例，女9例，年龄41～61岁;高危险组20例，男12例，女8例，年龄41～65岁。将uap组配对分成：常规治疗组 30例，男18例，女12例，年龄41～63岁;法舒地尔治疗组 30例，男18例，女12例，年龄42～65岁。正常对照组20例，来自健康正常人，男15例，女5例，年龄42～60岁。所有入选者均行询问病史、体格检查、实验室检查、心电图、x线、心脏超声等检查。

　　1.2 入选标准

　　参考中华医学会心血管病学分会、中华心血管病杂志编辑委员会制定的《不稳定型心绞痛和非st段抬高心肌梗死诊断与治疗指南》及《慢性稳定型心绞痛诊断与治疗指南》。

　　1.3 排除标准

　　所有病例均排除糖尿病、家族性高胆固醇血症、甲状腺疾病、肺水肿、肾脏及肝脏疾病、血液病、恶性肿瘤、自身免疫性疾病以及近期血栓、感染性疾病、发热、近期(1个月内)手术史及经皮冠脉介入治疗、外周血管疾病、慢性阻塞性肺疾病、结缔组织性疾病、女性月经期间、资料不全病历、ami及心肌酶学升高者等。

　　1.4 治疗方法

　　uap组患者均给予扩冠(硝酸异山梨酯注射液，商品名：异舒吉，德国许瓦兹制药集团。进口药品注册号bh20040325，国药准字 20040063)、抗凝(拜阿司匹林，拜耳医药保健有限公司，进口药品注册号h20080254，国药准字 j20080078;低分子肝素，商品名：博璞青，天津红日药业股份有限公司，国药准字 h20020470)、调脂(阿托伐他汀，商品名：立普妥，辉瑞制药有限公司，进口药品注册号h20070310)等常规治疗，心绞痛发作时舌下含化硝酸甘油片。法舒地尔治疗组加用法舒地尔注射液(天津红日药业股份有限公司，国药准字 h20040356)，将该药2 ml加入生理盐水500 ml静脉滴注，每日2次，疗程14 d。

　　1.5 标本采集

　　正常对照组及所有病例入选前及uap患者治疗后于清晨取肘静脉血3 ml，于常温下以3 000 r/min，离心15 min，分离血清，于-80℃冰箱保存待测。

　　1.6 检测方法

　　采取双抗体夹心abcelisa方法。采取抗人il6单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的人il6与单抗结合，加入生物素化的抗人il6抗体，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的streptavidin与生物素结合，加入酶底物opd，出现黄色，加终止液，颜色变深，在492 nm处测od值， il6浓度与od值成正比，通过绘制标准曲线求出标本中il6浓度。试剂来自美国biosource公司，北京邦定泰克生物技术有限公司分装。

　　1.7 统计学分析

　　采用spss11.0软件，计量资料以x±s表示，组间比较采用t检验。

　　2 结 果

　　2.1 uap患者以及不同危险程度uap患者血清il6水平变化

　　uap组血清il6水平均高于sap组和正常对照组(p<0.01);sap组血清il6水平略高于正常对照组(p<0.05)。在uap组中，高危险组患者血清il6水平均高于中危险组和低危险组(p<0.01);与低危险组比较，中危险组患者血清il6水平均升高(p<0.05)。见表1。表1 uap患者以及不同危险程度uap患者血清il6水平变化

　　2.2 法舒地尔治疗前后uap患者血清il6水平变化

　　常规治疗组和法舒地尔治疗组治疗前血清il6水平均无明显差异(p>0.05)。法舒地尔治疗组及常规治疗组治疗后血清il6水平均低于治疗前(p<0.01，p<0.05)。法舒地尔治疗组治疗后血清il6水平低于常规治疗组治疗后血清il6水平(p<0.05)。表2 法舒地尔治疗前后uap患者血清il6水平变化

　　3 讨 论

　　il6是具有多种效能的细胞因子，主要来源于激活的单核巨噬细胞、t淋巴细胞及内皮细胞等。fuster等〔2〕发现il6 mrna和蛋白水平在as斑块中明显升高，表明il6在as斑块稳定性中起着重要作用。刘娟等〔3〕研究结果显示：正常血管壁中的il6无表达，而在不稳定斑块组的il6表达水平明显高于稳定斑块组,尤其是在纤维帽的肩部和脂质核心;il6与il18及tnfα的表达呈正相关。有学者〔4〕通过对382例有chd事件和1980例无chd事件的中年人进行了前瞻性队列研究，平均随访11年，结果发现，il6水平增高是chd事件的独立预测因素。一项3 090例chd病人的研究表明，il6水平在发生冠脉事件组明显高于没有发生冠脉事件组，且随il6水平的升高，ami和猝死的发生率也相应增加〔5〕。还有学者认为，血清il6水平反映了冠脉病变的严重程度，是比crp和细胞间黏附分子1更好的心血管事件的预测因子。

　　本研究表明，uap组血清il6水平显著高于sap组和正常对照组。在uap组中，随着危险级别的升高，血清il6水平明显升高，这与大多数学者的观点相一致。说明il6参与uap的病理过程，与uap患者疾病的严重程度密切相关，血清il6水平是判断uap患者疾病严重程度及预后的指标。

　　il6可能通过以下途径参与uap的病理过程：(1)诱导肝脏产生crp，参与并增强内皮细胞的炎性反应;(2)上调mmps的表达，以引起血管重构及通过损伤血管基底膜引起斑块破裂;(3)促进淋巴细胞增殖、分化、生成和释放细胞因子，参与炎症过程，导致斑块破裂;(4)激活巨噬细胞分泌炎症因子，使其进入血管内皮下参与as的进程;(5)诱导肝细胞产生血浆纤溶酶原激活抑制物，促进血栓形成;(6)与tnfα协同刺激淋巴细胞，形成免疫复合物损伤血管内皮，促进血栓形成;(7)调节黏附因子及其他细胞因子如il1等的表达，促进炎症反应;(8)促进氧自由基的释放，加重心肌细胞损伤及损伤血管内皮细胞，引起炎症反应;(9)促进巨噬细胞表面ldl受体合成，摄取ldl，加速脂质沉积形成as。

　　法舒地尔是一种新型异喹啉磺胺衍生物，国外研究表明〔6〕，用加有法舒地尔的自来水(100 mg·kg-1·d-1)喂养心肌梗死模型小鼠，可抑制非梗死心肌中炎性细胞因子的表达,降低非梗死心肌中的rock活性,抑制心肌梗死后的左心室重构。动物实验显示，法舒地尔可通过rho/rock途径抑制单核细胞趋化蛋白1的表达，从而抑制炎症因子如il1、il6及黏附因子的表达，进一步发挥其抗as的作用〔7〕。shimokawa等〔8〕通过用法舒地尔(5 mg·kg-1·d-1) 干预治疗小型猪as，8 w后发现，法舒地尔组as斑块明显消退。动物实验显示〔9〕，法舒地尔对慢性心肌缺血和心绞痛有预防作用，且能抑制冠脉血流下降和t波改变，减轻心肌坏死和炎细胞浸润。胡佳等〔10〕还观察到法舒地尔对uap有较好疗效。

　　本试验观察到，法舒地尔治疗组治疗后血清il6 水平明显低于治疗前，且明显低于治疗后常规治疗组。说明法舒地尔可改善uap炎症反应，对uap患者有保护作用。

　　法舒地尔对炎性因子的影响可能与其作用于rock有关。rock是具有信息传导和分子开关功能的信号多肽。在人类和动物血管as形成部位，rock mrna表达都增强。最新研究表明〔11〕，rock参与了冠状动脉痉挛发作，是冠状动脉痉挛持续状态中最重要的活性因子。rock不仅能正向调节促炎症反应因子和促血栓形成因子，如il1、il6、巨噬细胞游走抑制因子等的活性;还能通过多种途径介导细胞信号转导系统，参与血管损伤后内膜增殖和再狭窄的调控〔12〕。结合上述资料，我们推测法舒地尔可能主要是通过抑制uap患者的rock来抑制il6水平。其具体机制有待于进一步研究。

【参考文献】
　1 petovay f，heltai k，kis z，et c infections and histamine，crp and il6 levels after percutaneous transluminal coronary angioplasty〔j〕. inflamm res，2007;56(9)：3627.

　　2 fuster v，moreno pr，fayad za，et thrombosis and high risk plaque part1：evolving concepts〔j〕.coll cardiol，2005;46(6)：93754.

　　3 刘 娟，陈丽琴，苏秀兰，等.人冠状动脉粥样硬化斑块内白细胞介素6和18及肿瘤坏死因子α表达与斑块稳定性有关〔j〕.中国动脉硬化杂志，2008;16(7)：53740.

　　4 koanig w，khuseyinova n，baumert j，et sed concentrations of creactive protein and il6 but not il18 are independently associated with incident coronary events in middle aged men and women：results from the monica/kora augsburg casecohort study，19842002〔j〕. arterioscler thromb vase biol，2006;26(12)：274551.

　　5 fisman ez，benderly m，esper rj，et eukin6 and the risk of future cardiovascular events in patients with angina pectoris and/or healed myocardial infarction〔j〕.am j cardiol，2006;98 (1)：148.

　　6 hattori t，shimokawa h，higashi m，et term inhibition of rhokinase suppresses left ventricular remodeling after myocardial infarction in mice〔j〕.circulation,2004;109(18)：22349.

　　7 吕 琳,鹿克风,罗 静,等.氟伐他汀对兔动脉粥样硬化血管壁nfκb和pdgf表达的影响〔j〕.临床心血管病杂志，2005;21(8)：47881.

　　8 shimokawa h，morishige k，miyata k，et term inhibition of rhokinase induces a regression of arteriosclerotic coronary lesions in a porcine model in vivo〔j〕.cardiovas res，2001;51(1):16977.

　　9 sato s，ikegaki i，toshima y,et s of rhokinase inhibitor on vasopressininduced chronic myocardial damage in rats〔j〕.life sci，2002;72(1)：10312.

　　10 胡 佳，丁晓娟. rki对冠心病不稳定型心绞痛的疗效〔j〕.实用医学杂志，2008;24(21)：37534.

　　11 shimokawa kinase as a novel therapeutic target in treatment of cardiovascular diseases〔j〕.j cardiovasc pharmacol,2002;39(3)：31927.

　　12 shimokawa h，takeshita kinase is an important therapeutic target in cardiovascular medicine〔j〕.arterioscler thromb vasc biol,2005;25(9):176775.