胃癌组织中Her—2的表达及临床病理的价值体现

　胃癌发病率在目前已知的恶性肿瘤中占第四位， 在世界范围内由癌症引起的相关死亡中占第二位[1]。目前Her-2被广泛认为是人体实体瘤生长发育的一种关键因子， 尤其对于乳腺癌， 在20%～25%的乳腺癌患者中， Her-2基因呈现过量表达， Her-2已被认为是肿瘤治疗的预后和治疗的指标[2]。在我国胃癌为高发肿瘤， 由于胃组织重要的生理功能， 单纯手术治疗效果并不理想， 患者的术后5年生存率仍然不高[3]， 目前的治疗仍依赖于以化学治疗为主的综合治疗方法， 因而为胃癌的治疗寻找有效的生物学标记物成为目前研究的热点。本研究应用免疫组化法检测78例胃癌和39例正常胃组织中Her-2的表达情况以及其与临床病理指标的关系， 为胃癌的靶向治疗提供理论依据。现将研究结果报告如下。
　　1 资料与方法
　　1. 1 一般资料 39例正常胃组织（见图1）和78例胃癌（见图2）（取自慢性胃炎、胃溃疡手术切除胃组织周边正常胃黏膜）均来自商丘市第一人民医院病理科2008年1月～2013年12月手术切除存档的蜡块。78例胃癌患者中， 男52例， 女26例；年龄最大89岁， 最小45岁， 平均年龄62.5岁；根据Lauren分型：弥漫型38例， 肠型36例， 混合型4例；根据组织学分级：高、中分化腺癌33例， 低分化腺癌45例；临床分期：Ⅰ～Ⅱ期36例， Ⅲ～Ⅳ期42例；有淋巴转移者49例， 无淋巴转移者29例；侵及浆膜层者63例， 未侵及浆膜层者15例。所有标本均使用10%中性福尔马林缓冲液切开固定24～48 h， 常规石蜡包埋并切片染色， 在商丘市第一人民医院病理科常规诊断。
　　1. 2 试剂 鼠抗人Her-2单克隆抗体、SP试剂盒及DAB染色剂均购自北京中杉金桥生物制剂有限公司。
　　1. 3 方法 所选蜡块制成4 μm厚切片， 按SP免疫组化染色步骤进行操作， 用已知表达抗体的组织做阳性对照， 用PBS缓冲液代替一抗做阴性对照。Her-2蛋白主要表达在细胞膜， 呈棕黄色， 免疫组化染色结果的判定标准采用hercep test[4]：肿瘤细胞无染色或<10%的肿瘤细胞胞膜染色为“0”（见图3）， ≥10%的肿瘤细胞有不完整胞膜染色为“1+”， ≥10%的细胞有较弱的完整胞膜染色为“2+”， ≥10%的细胞有较强的完整胞膜染色为“3+”（见图4）；0、1+视为无或低表达， 2+、3+视为过表达。
　　1. 4 统计  学方法 采用SPSS17.0统计软件分析数据。Her-2在胃癌、正常胃组织中的表达结果采用χ2检验；运用非参数Kruskal Wallis检验对Her-2在胃癌中的表达与胃癌临床病理参数的关系进行分析。检验水准α=0.05， P<0.05为差异具有统计学意义。
　　2 结果
　　Her-2蛋白在胃癌组织中及正常胃组织中的过表达率分别为23.08%（18/78）、0（0/39）， 前者明显高于后者， 差异具有统计学意义（P<0.05）。Her-2蛋白过表达与胃癌的位置、分型有一定的相关性（P<0.05）， 与胃癌的组织学分化无相关性（P>0.05）。Her-2在胃癌中的过量表达与胃癌的临床病理参数的关系具体见表1。
　　3 讨论
　　Her-2基因又称为HER2/neu和c-erbB-2， 是基因定位于染色体17q21， 编码相对分子质量为185000的具有酪氨酸激酶活性的跨膜蛋白， 是原癌基因的一种， 属于表皮生长因子受体家族， 调节细胞生长、分化和增殖， 参与细胞间的信号传导。该蛋白Sakai等[5]于1986年首次报道了Her-2基因在胃癌中的过表达。宋岩等[6]回顾性的分析了中国医学院肿瘤医院于2006～2008年间收治的83例晚期胃癌患者的Her-2蛋白的表达情况， 研究结果显示存在Her-2基因过表达以及基因扩增的患者分别为25例和29例。此研究还表明， 无Her-2基因扩增的晚期胃癌患者的生存期大约为12.6个月， 而有Her-2基因扩增的患者生存期仅为短短的5.5个月。王仰坤等[7]的研究发现， 胃癌组织中Her-2蛋白的过表达与肿瘤的浸润深度以及淋巴结的转移有关， 与发病年龄、性别以及组织学分型无关。本研究发现， Her-2的过表达与胃癌发生的位置、Lauren分型有关， 与他们不同， 可能与肿瘤异质性有关。Jφrgensen等[8]的研究发现， 采用免疫组织化学染色法检测Her-2蛋白在胃癌中的过表达百分比为23%， 本研究发现， 胃癌中Her-2蛋白的过表达率为23.08%， 而在正常胃组织中的表达为0， 与他们的研究基本一致。
　　2009年在ASCO会议上公布了ToGA临床试验结果， 在ToGA试验中， 将Her-2蛋白过表达的胃癌患者随机分为化疗组（5-氟尿嘧啶或卡陪他滨联合顺铂化疗）以及化疗联合曲妥珠单抗治疗组进行治疗， 结果显示， 后者的治疗效果较好， 确立了曲妥珠单抗在胃癌治疗中的地位[9]， 曲妥珠单抗抑制Her-2介导的信号传导途径， 阻断Her-2受体细胞外区域分裂， 激活抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用， 抑制肿瘤的生长。检测Her-2蛋白的表达， 可以为临床治疗提供一定的参考， 为胃癌的个体化治疗提供依据。
　　目前， 唯一被欧盟批准的用于治疗进展期胃癌的分子靶向药物是曲多珠单抗赫赛汀， 价格昂贵， 因此需要准确的检测， 目前临床上常用的方法是免疫组化（IHC）和荧光原位杂交（FISH）， 宋国新等[10]研究证实， IHC与FISH检测结果符合率为95%， 具有高度一致性， 当IHC检测表达为0、1+或3+时IHC和FISH检测结果有较高符合率， 可作为临床是否应用赫赛汀治疗的依据， 而表达为2+的病例必须进一步行Her-2基因扩增检测。
　　总之， 胃癌组织中Her-2蛋白的检测有利于胃癌预后的判断， 对于胃癌患者的治疗有一定的指导意义， 检测Her-2蛋白， 可能使患者从辅助靶向治疗中获益。
　　参考文献
　　[1] 陆再英， 钟南山.内科学.第7版.北京：人民卫生出版社， 2008： 396-401.
　　[2] 乔杉杉， 张静.乳腺癌HER2基因的研究进展及其靶点治疗.首都医科大学学报， 2008， 29（11）：96-99.
　　[3] 陈锦章， 郑航， 陈斌， 等.VEGF、HER-2蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义.南方医科大学学报， 2008， 28（4）：617-619.
　　[4] Hofmann M， Stoss O， Shi D， et al. Assessment of a HER2 scoring system for gastric cancer：results from a validation study. Histopathology， 2008， 52（7）：797-805.
　　[5] Sakai K， Mor i S， Kawamoto T， et al. Expression of epidermal growth factor receptors on normal epithelia and gastric carcinomas. J Natl Cancer Inst， 1986， 77（5）：1047-1052.
　　[6] 宋岩， 黄镜， 王金万. HER2/neu基因扩增和蛋白表达与晚期胃癌患者预后的关系.癌症， 2010， 29（1）：76-81.
   王仰坤， 高春芳， 贠田， 等. HER2和EGFR基因在胃癌组织中的状态及其与临床病理的关系.世界华人消化杂志， 2010， 18（25）：2642-2647.
　　[8] Jorgensen JT. Targeted HER2 treatment in advanced gastric gy， 2010， 78（1）：26-33.
　　[9] Van Cutsem E， Kang Y， Chung H， et al. Efficacy results from the ToGA trial：a phrase Ⅲ study of trastuzumab added to standard chemotherapy（CT）in first-line human epidermal growth factor receptor 2（Her-2）-positive advanced gastric cancer（GC）. J Clin Oncol， 2009， 27（18s）：abstr LBA4509.
　　[10] 宋国新， 李红芬， 李霄， 等.荧光原位杂交与免疫组织化学检测胃癌组织中HER-2基因及蛋白表达一致性.临床与实验病理学杂志， 2012， 28（10）：1094-1097.