贵阳市生活污水中隐孢子虫及贾第虫检测
【关键词】 生活污水 隐孢子虫 贾第虫
目前，污染饮用水的致病性原虫主要是肠贾第鞭毛虫和隐孢子虫。2种虫类污染饮用水源及供水系统导致的流行性疾病暴发事例在国外时有报道〔1，2〕。贵州省贵阳市市区居民生活饮用水获得的方式仍以市政自来水为主，但集中式饮用水水源地的水质月报中仍未将2种原虫的检测归为常规监测项目。为了解贵州省贵阳市饮用水源是否受到致病性原生动物的污染，于2006年对贵阳市主要饮用水源地周边的12个生活污水排污处的水样进行了监测。现将结果报告如下。
对象与方法 (1)对象：对贵阳市主要饮用水水源地(花溪水库、南明河、阿哈水库及小关湖)周边的12处生活污水进行监测，每排污口共监测3次，于2006年4，8，12月共取水样36份，每份水样量为20 l。(2)主要仪器与试剂：恒流泵(流量范围为10 000～15 000 ml/h)、过滤器（φ142 mm）、滤膜（1.2，3.0 μm，颇尔过滤器(北京)有限公司）；磁力搅拌加热器。月桂酸盐-12溶液(laurety-12)；1 mol/l的氨丁三醇(tris)溶液；0.5 mol/l乙二胺四乙酸二钠盐(edta)溶液、淘洗缓冲液、姬姆萨(giemsa)染色液。(2)检测方法：①水样的采集与浓缩：参照文献〔3-5〕的方法进行。②梯度分离：将上述浓缩后的样本混悬液用1 000 g/min离心沉淀10 min，弃去上清液后，取沉淀物混于8 ml 10%福尔马林盐水和3ml醋酸乙酯中，用500 g/min离心沉淀5 min，液体分4层，弃去上面2层，将沉渣涂片，晾干。③giemsa染色及镜检：将涂片用甲醇固定，再用1∶10 giemsa染色液染色20～30 min后用显微镜检查。
结 果 (1)贵阳市饮用水源地周边生活污水水样检测结果：2006年对12处污水口的36份水样检测发现，隐孢子虫和贾第虫总的检出率分别为13.89%和25.00%。其中，4月份检出率为8.33%和25.00%；8月份为25.00%和33.33%；12月份为8.33%和16.67%。(2)回收率测定〔6〕：隐孢子虫的卵囊的回收率为21.7%，贾第鞭毛虫包囊的回收率为23.6%，符合epa-1623规定的回收率范围要求：隐孢子虫卵囊回收率21%～100%，贾第鞭毛虫包囊回收率17%～100%。
讨 论 隐孢子虫和贾第鞭毛虫介水传播可造成肠道腹泻病的暴发流行〔7〕。以往在预防生物性感染方面，注意力多集中在细菌和病毒上，而对原虫类造成水源的污染尚未引起人们的足够重视。花溪水库、阿哈水库、红枫湖、百花湖及小关水库等是贵阳市主要饮用水源，其周边仍有许多村寨及餐饮服务旅游业经营户仍未经任何处理将生活污水和养殖废水直接排入上述饮用水源。调查结果表明，在排入上述4个水源地饮用水源的污水中于不同季节均可查到2种虫类，其中以夏季更易检获，虽然卵囊和包囊的检出数不高(可能与方法的回收率有关)，但也表明我市饮用水源部分已受到致病性原虫的污染。目前，我市主要饮用水源地的水质监控项目执行的是《地表水环境质量标准》(gb3838-2002)的ⅲ类标准。为保护市民的身体健康，建议我市的集中式饮用水源的水质报告中将这2种虫类的检查列为常规性的检查项目。
本次调查所采用的方法是参照文献〔4〕介绍的膜过滤-梯度分离-giemsa染色法，该法能适应于生活污水中隐孢子虫和贾第虫的检测，操作简单、经济，不足之处是回收率相对较低，易造成假阴性的的发生。
【参考文献】
1〕 蔡炯.介水蓝氏贾第鞭毛虫和隐孢子虫感染的流行现状及控制［j］.中国卫生检验杂志，2005，15(11)：1401-1402.
〔2〕 craun g f,hubbs s a,frost f,et orne outbreaks of crptosporidiums［j］.awwa,1998,90(9):81-91.
〔3〕 余贵英，蔡承铿，刘汝青，等.水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫检测方法的探讨［j］.中国卫生检验杂志，2004，14(5)：549-550.
〔4〕 范晓军，陈佩堂，陈成章，等.澳门地区原水及海水中的病原虫调查［j］.中国给水排水，2001，17(11)：32-34.
〔5〕 白晓慧，曾莉，朱斌，等.上海某污水厂出水及其排放水体中隐孢子虫和贾第鞭毛虫的分析检测［j］.中国卫生检验杂志，2006，16(1)：4-5.