临床遗传学和临床分子遗传学会议论文摘要

　　进传性出血性毛细血管铲张:临床遗传学研究

　　遗传性出血性毛细血管扩张（HHT)是一种常染色体显性疾病，累及血管壁，以鼻衄和毛细血管扩张为特征。据估计，患病率为1:100000。我们介绍一例17岁男孩，患有肺VAM，送来做紧急外科切除术，使症状得到彻底解除。许多医生认为HHT是一种轻微疾病，根据我们的经验，情况并非如此。在我们的患者中，并发症包括肺动静脉_形（17钩）、胃肠出血（16%)、中枢神经系统并发症（13%)和输血依赖性(11钩），我们检查了16个患有HHT的家族中的100名受累及未受累的个体，每个家族都没有外显不全，因此我们可以假定该基因几乎总表达。病例中所有受累的人到40岁时都出现症状，在25岁时，有85%的人表现出征象。

　　X连锁耳聋是一种异质性疾病

　　根据对两个大系谱的研究，X连锁镫骨固定性耳聋以前被定位于Xqi3/Xd21区。也曾经报道：具有临床特征的耳聋男孩，表现出包括这一区域的X染色体缺失。我们对患有X连链锁耳聋的五个大家系进行了连锁研究。用X连锁标记X65H7,累加的优势对数值为11.8,我们证明了先前限定的位点。然而，-1•个采系显示出与[3知位点区无连锁，证明具有遗传异质性。内耳CT断层扫描证明在放射学上，这个系谱的耳聋与其它连锁系谱耳聋不同。我们得出结论：X连锁耳聋在放射李和遗传学上是一种异质性疾病。

　　Noonan综合征中的凝血因子异常

　　由于儿童表型轻微，成人表型随时间而改变。Noonan综合征的临床诊断通常很困难。一种诊断标记将既有助于诊断，也有助于咨询。凝血因子异常，作为一种临床标记，已在31例受验者中（包括三个家庭），作为大范围多学科研究的一部分进行了研究。在31人中，14人有异常出血史，这表现为在创伤或手术后营肿明显增加，未曾报道较大的出血事件发生，其中18例有部分血栓形成时间延长。我们测定了所有病例凝血因子V、翟、vwF、vwFag、IX、a和通的水平。最普遍的异常是在杂合范围内，部分因子3缺乏（21/31)。11例病人仅有53因子缺乏，5例8因子和a因子共同缺乏，3例和艰因子共同缺乏，1例与K因子共同缺乏。1例因子V和观完全缺乏，未发现循环凝血抻制因子。对31人中的23人（74%)进行了异常筛査。研究的三个家庭中有两个家庭，在受累的双亲和儿童中，观察到了同样的特异性异常结合。或许，详细的凝血因子分析有助于Noonan综合征咨询。

　　常染色体显性视网膜色素变性(ADRP)：证明至少两个遗传位点

    最近,Dryja等在一部分ADRP/,!'f；'中，观察到了视紫质第23个密码子突变；用视紫质连锁探针C17(D3S47)已对三个大的艾国ADRP家族进行了连锁分析。在C17和一个ADRP寒族中观察到了明显的正优势对数值（Zmax=+5.58,0=0),然而，序列分析和寡核苷酸分析表明，在这个家族中受累个体无第23密码子点突变存在。在CI7和其它两个ADRP家族中获得了明显的负优势对数值，这证明了遗传异质性。某些类型的ADRP是由于视紫质的不同突变引起，另一些与3q2卜24位点基因紧密连锁，还有一些类型的ADRP是由基因组中其它部位的损伤引起。

　　Turner综合征患者环状染色体分子和细胞迪传学研究

　　我们报道12例Turner综合征患者细胞遗传学和分子学研究的结果，这些人起初报道为45，X/46，X，r(X)嵌合。重新研究表明，在具有两个相当大的环状染色体患者中，该环完全由Y物质组成，不是原先报道的X。由于这个出乎意料的发现，我们正对以前报道具有环状X的所有患者重新进行了研究。患者及其双亲的X连锁RFLP研究表明，在6例患者中环状X染色体为父源，4例为母源。这与报道的主要为父源常染色体结构异常不同。

　　一个家族性Xq微缺失的分子和细胞遗传学分析

　　一男性婴儿，由于神经发育不良被介绍做染色体分析。发现Xq臂有一缺失，核型为46，Y，del(X)(pter~vq21.1：：q21.2~*qter)。家系研究表明，他的母亲和外祖母是同一缺失的杂合午。我们试图在分子水平定位这一缺失，既可对先证者提供精确预后，也可在今后进行确切的产前诊断。用不同的含甲基化DNA探针做RFLP分析和X失活研究，可以区分出这个家系中的携带者和非携带者女性。

　　—种简便的非放射性方法检查常见的亚洲印度人P地中海贫血突变

　 通过等位基因特异寡核苷酸杂交，聚合酶链反应（PCR)大大便利了特异性P地中海贫血突变检出。然而，这一方法通常用32P标记寡核苷酸，这很浪费时间，并因可能大量发生的突变而存在危险。最近，我们应用Y端核苷酸突变错配的引物（30个核苷酸）和一普通引物，或一对受控的引物一起，探讨特异的适宜条件。扩增25个周期，用65°C退化，随后用琼脂凝胶电泳，能辨认出每种突变。这项技术非常敏感，如果胎儿DNA样品绝对未被母体污染，这项技,术则适用于产前诊断。

　　家族性缺乏载脂蛋白B-100(ApoB-100)的检查和脏床特征

　　最近，美国研究人员报道在ApoB基因中的一个突变导致了家族性缺乏ApoBlOO(FDB)。这种显性遗传性疾病引起血清低密度脂蛋白胆固醇浓度增加，伴随LDL和LDL受体亲和力下降。引起这一变化的突变是ApOB恶因第26个外显子中G喊基变为A碱基，引起成熟蛋白质第3500位残基谷氨酰胺替代了精氨酸。用PCR和寡核苷酸探针很容易检查出这种突变。我们已经筛选了1000多名患有高脂血症和动脉粥样硬化的受试者，检出了10名具冇这种突变的患者。所有病人都有动脉粥样硬化家族史。其中许多患者诊断为家族性高胆固醇血症(FH),在我们的研究中，3钧诊断为FH的病人有这种缺陷。虽然罕见，当有发病风险受试者出生时，用从Guthrie血点提取出的DNA,很容易筛选出这种突变。

　　一例由染色体末端缺失而引起的《地中海贫血》

　　一例来自英国北部的男性，患有血红蛋白H病。他的ct珠蛋白基因型是-a/acc。他母亲具打地中海贫血表型特性，菇««/u«o这提示两个它庭成员都携带一个a珠蛋白等位基因，该基因失活，但不缺失，也没有任何其它临床异常。用多态分析和基因剂量分析进一步研究，表明a珠蛋白上游60kb@点以外全部缺失。令我们奇怪的是，我们A最接近断裂点的探针，没有检出任何断裂片段，然而，进一步分析表明，断裂点远端1〜lOkb有明显杂交斑点，提示这一序列在长度上可变，可达端粒处。我们用Bal31核酸外切酶消化证明了这一点，用引物与经典的人类端粒序列（TTAGGG)n互补的引物，同时用距离断裂点最近的引物，使该区特殊扩增。母亲和儿子的跨越断裂点序列相同，这表明（TTAGGG)^正好在断袅点处。我们的发观对于理解染色体末端缺失过程具冇重要意义，提示未端酶活动能"治愈”断裂末端，重新加入的（TTAGGG)„足能稳定新的末端。另外，这个家庭无精神障碍，排除了有关a珠蛋白末端序列导致缺失型a地中海贫血/智力低下综合征。这一突变引起的a地中海贫血表型，是由于位于a珠蛋白复合物上游起顺式调节作用的顺序缺失引起。

　　鉴定血压的遗传决定生子

　　人类孪生子和动物繁殖研究证明，血压是多基因遗传，据估计，遗传因素起30〜60吻的作用。我们设计出了-Ladywell家族血压研究”,用来鉴定血压的原发遗传决定因素，并包括鉴定某些成人后代，他们的血压，经测量为MRC研究轻度高血压的一部分。他们的后代，根据本人与双亲血压的测量值，分为四组，使具有发展为高血压相应素质的人能相互比较。这200人具有广泛生化特征，他们的DNA在候选基因位点的RFLP分析包括：糖皮质激素受体、心房利钠多肽和肾素。在双亲有高血压的后代中，高虫压伴有显著的血管紧张素原（P<0.01)、皮质醇（P0.02)和18-羟皮质酮水平升高。Bdl/GRL观察到这些后代也心较高比例的较大纯合等位基因，暗示这一位点可能包含有高血压素质，而肾素和ANP的RFLP.在四组中分布相同。这一途径将解决血压的原发决定和中间决定问题，也适用于人类其它多基因特性研究。

　　常染色体显性巨头畸形：良性的常见巨头崎形抑或是一种新的综合征？

　　在对疑为Sotos综合征的79名患者研究中，发现6名不符合这一综合征表型，他们彼此症状非常相似。先证者中注意到的特征为：进行性巨头，导致OFC大于+3.5SD,出生体重和身长正常，但在4例中，出生后体重迅速增长导致肥拌，不同程度的发育迟滞，典型的面部表型，特点为：方脸，中部凹，双顶骨窄，人中长。骨龄（TW2)，在4例中不同，都在第75百分位之下，两例在第10百分位之下，第3例延缓在10〜25百分位之间。先证者家庭调查发现，另13名亲属具有提示同一情况的特征，这种综合征以常染色体显性方式遗传。虽然这些病例代表良性常见巨头畸形（BFM)一部分表现，他们在频率和发育迟滞的严重程度及面部特征上，显示出与这一诊断冇所差异（IQ'\70，4例），这样的面部表现特征，在以往的BFM描述中没有报道过。

　　母女中的6号环状染色体

　　这里描述一个6号环状染色体病人，严重的生长迟滞，无其它较大的异常，3岁时因脑膜炎球菌敢血症突然死亡。这个环状染色体从患者母亲遗传而来，她母亲有相应的短身材。常规细胞学检查和流动细胞计数在大小上无法检出环状染色体和正常同源染色体之间有任何差异。这与设想的一致，即生长迟缓和微小畴形“环状染色体综合征”是由于环的出现本身引起的，而不是由于任何染色体物质的丢失引起。

　　插入易位

　　据认为插入易位发生频率为1:5000。我们查看了自1%5年以来本实验室的资料，发现4个家族有插入易位，都是通过有缺陷的儿童查明的。与同期查明的其它易位相比，提示该易位频率很低，近似1:25:000。出生缺陷儿童的风险接近理论风险昀50势，在4个家族中，总共有8名受检者有不平衡核型，这8人都有缺陷，一个胎儿因缺陷死于象他姑姑一样的异常。在一个家族中，两个堂兄弟是三体，另一个是单体，都是染色体iq的同一部分，有相反的临床特征。回顾发表的报道，证明这些异常罕见（56篇)，也证明了缺陷儿童的高发风险，以及他们在表现相应染色体片段的单纯三体和单体特征上的作用。

　　21Q-"综合征”的两个新病例

　　本文报道两例21号染色体长臂末端缺失病人。第一例是异常嵌合体，因他的40钩血细胞具有正常男性核型。然f而，他生长严重迟缓、畸形，智力低下、失明。第二例为非嵌合型缺失，但仅有轻微畸形特征和轻至中度智力低下，他们的缺失经常规细胞学分析证明相同。以前报道过几例同样缺失，但无嵌合形式。

　　可变的单一序列成分在肌强直性营养不良产前诊断中的应用

　　用聚合酶链反应（PCR)检测称为小卫星的DNA短臂重复DNA家族(dC-dA)D、(dG-dT)„丰富类型，在人类整个染色体组中发现了这些单位，它们以包栝19ql2-ql3.2染色休上APOC2在内的几个位点为特征，APOC2位点紧密连锁肌强直性营养不良基因，应用这一提供丰富信息的小卫里区（11等位基因，PlC0.79)(HGM10>预测肌强直性营养不良遗传基因风险是可行的。一位母亲在15孕周时来到产前诊所。她初次妊娠，已38岁。抽取了胎儿父亲的血液，在15.5孕周时，在B超指导下取绒毛。从CVS物质和双亲血样中提取DNA，用聚合酶链反应进行小卫星分析。在一变性丙烯酰胺序列胶上分析PCR产物，表明胎儿未受累，这一结果被Southern分析证实，这一分析应用了探针APOC2。PCR结果三天内出来，相比之下，Southern技术需要8天才出结果。

　　成骨不全的产前诊断

　　显性遗传的成骨不全（OI)与编码.1型胶原和a“COLlA2)亚单位的两个位点连锁。I型胶原是主要的骨胶原。这种疾病是由每个单独的家族中不同突变引起的，没有可靠的表型标记预测在一个家族中这种疾病是否与COL1A1或COL1-A2连锁。我们依据在绒毛样本中相应位点上鉴定分离的等位基因，做了几例产前诊断，既包括能独立显示出连锁的家族，也包括不能显示出连锁的家族，后者风险计算考虑了协作研究的38个家族中OI人群遗传异质性的估计。这建议包括5%前风险，即一个新家族中没有和胶原1位点中的任何一个连锁时的风险。

　　卵巢癌中发现等位基因缺失

　　我们分析了21例卵巢肿瘤DNA,其中9例为恶性，5例为临界性。用染色体17P探针PYNZ22和PBHP53,比较肿瘤和正常DNA,从7例恶性肿瘤患者中获得的有信息意义的结果表明，5例（71%)丢失了一个PYNZ22等位基因，其它所有恶性患者用这探针检杏未见异常，良性或临界性肿瘤在这些位点未见丢失17P等位基因。这使我们推测17p抗癌基因功能丢失，如P53,可能在卵巢肿痛良性阶段到较恶性阶段转变中起作用。在发现的5例丢失pYNZ22恶性肿瘤病人中，有一例是家族性疾病，用比较‘DNA指纹’研究发现丢失一个6kb片段。

　　孕中期Down's综合征胎儿血清甲胎蛋白

　　当胎儿患有Down's综合征（DS)时，母亲血淸甲胎球蛋白（MSAFP)水平，在孕中期早期倾向低于正常。据推测，原因为DS胎儿产生AFP比正常胎儿少。本文检查和对比了第17〜28孕周患有和末忠DS胎儿血清AFP水平。在正常胎儿中，这一期间血清AFP水平直线下降。20周前，DS血清AFP与正常胎儿相同，怛20周后AFP下降得比正常快。到孕中期，其水平比正常低。这提示，用作筛选DS的低MSAFP水平不能通过DS胎儿本身的低AFP水平解释。