复方甲硝唑凝胶体外释放度的观察分析

　复方甲硝唑凝胶（Compound Metronidazole Gel）是我院在复方甲硝唑栓基础上根据患者用药需求研发一种制剂[1]。传统栓剂易受体温影响且无法持续恒定释药，栓剂融化后基质呈液状流出，造成对患者皮肤和衣物的污染。复方甲硝唑凝胶是由醋酸氯己定（chlorxidine acetate）、甲硝唑（2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇）、克霉唑（三苯甲咪唑）与卡波姆（丙烯酸键合烯丙基蔗糖或季戊四醇丙醚的高分子聚合物）等基质辅料经凝胶制备工艺制成的白色半透明固体水溶性凝胶，主要用于阴道霉菌感染。临床用药证实该凝胶能使药物在人体部位的持续时间更长，能持续稳定释放药物，生物利用度优于阴道栓[2]。本研究在前期研究基础上，采用高效液相色谱法，对本制剂进行了药物体外释放度的考察，拟进一步研究其释药规律。
　　1 仪器与试药
　　U3000高效液相色谱仪（DAD紫外检测器，自动进样器，戴安公司）；DV215CD 型电子分析天平（OHAUS公司）；ZRS-8G型智能药物溶出仪（天津大学无线电厂）；SK5200H超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；PHS-3C型精密pH计（上海雷磁）；甲硝唑对照品（中国食品药品检定研究院，批号：0191 9804）；复方甲硝唑凝胶（自制，规格：5g/支，标示量10.0mg·g-1）；复方甲硝唑栓（自制，规格：5g/支，标示量10.0mg·g-1）；水为双蒸水；其他试剂均为分析纯。
　　2 方法与结果
　　2.1 色谱条件[3，4]
　　色谱柱：LUNA C18色谱柱（4.6mm×150mm，5?m）；流动相：乙腈-三乙胺-水（70：0.5：30）；流速0.8mL·min-1；柱温：30℃；检测波长261nm；进样量10?L。甲硝唑色谱峰理论塔板数不小于2500，分离度良好。
　　2.2 对照品溶液的制备
　　精密称取经减压干燥至恒重的甲硝唑对照品适量，用流动相稀释并溶解，制成每1mL含甲硝唑1.86mg的溶液。
　　2.3 线性关系考察
　　精密吸取对照品溶液1、2、4、6、8、10mL，分别置10mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀。按2.1色谱条件测定，其色谱图如图1所示。以甲硝唑浓度C为横坐标，甲硝唑色谱峰面积A为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：A=60.383C+2.1779，r=0.9998，表明甲硝唑在0.186～1.860mg·mL-1浓度范围内线性关系良好。
　　2.4 精密度试验
　　取对照品溶液，按相同色谱条件连续测定5次，计算甲硝唑色谱峰面积RSD为1.62%，表明该方法精密度良好。
　　2.5 稳定性试验
　　取2.6项下的供试品溶液，按同一色谱条件，在0、1、2、4、8、12h进样测定甲硝唑色谱峰面积，结果其RSD为1.83%，表明12h内供试品溶液的稳定性良好。
　　2.6 体外释放度测定
　　参考相关文献[5-8]，照《中国药典》2010年版（二部）附录ⅩC溶出度测定法项下操作[9]，以0.1mol·L-1 HCl 250mL作为介质，温度为37±0.5℃，转速为60r·min-1。取复方甲硝唑凝胶6支，复方替硝唑栓6粒，投入不同烧杯，每隔一段时间吸取溶液5mL，并及时补充相同的等温等体积空白介质溶液。微孔滤膜滤过后，作为供试品溶液，进样10?L，测定峰面积。计算复方甲硝唑凝胶和复方甲硝唑栓各时间点甲硝唑累积释放量，并对时间作图，结果见图2。
　根据释放曲线，复方甲硝唑栓在1h内就已全部释放，而复方甲硝唑凝胶1h时药物累积溶出量约为28.7%，并且12h后仍能释药。将复方硝唑水凝胶体外释放曲线按Higuchi方程和对数正态分布函数进行曲线拟合，结果见表1。复方甲硝唑凝胶药物体外释放符合对数正态分布模型，表明其具有良好的缓释效果，可持续释放药物，符合临床用药需求。
　　Q：甲硝唑体外累积释放量；t：甲硝唑体外释放时间。
　　3 讨论
　　3.1 由于临床需要，复方甲硝唑凝胶中有其他药物，在研究质量标准时，已同时测定该两种成分。本实验主要考察制剂的体外释药规律，故只以甲硝唑为指标。选用0.1mol·L-1HCl作为溶出介质，主要是考虑到女性阴道内pH值呈酸性，使模拟体外释药环境更贴近真实体内环境。
　　3.2 卡波姆是新型药用辅料，为聚烷基蔗糖与丙烯交联聚合物的共聚物，易溶于水，可形成酸性胶体。在pH 6-10时卡波姆凝胶粘度最大，对制剂特别是凝胶性能的改良，生物利用度的提高及药物的缓释等都有明显作用。另外，泊洛沙姆（poloxamer，聚氧乙烯聚氧丙烯醚嵌段共聚物，一种新型的高分子非离子表面活性剂）也为本凝胶的重要基质，为温度收缩型水凝胶的优良基质，当泊洛沙姆与卡波姆比例一定时，。卡波姆和泊洛沙姆无致敏性、刺激性，化学性质稳定，广泛用于口服、外用。复方甲硝唑水凝胶栓使用后阴道局部浓度高，临床疗效较好。
　　参 考 文 献
　　[1] 徐黎颖.高效液相色谱法测定甲硝唑片中甲硝唑含量的不确定度评定[J].首都医药，2013，20（12）：60-61.
　　[2] 卢毅，张彤，陶建生.卡波姆在药剂学中的应用[J].中国医药工业杂志，2007，38（6）：457-460.
　　[3] 徐莲琴，王玉华，郑亿，等.RP-HPLC法测定复方甲硝唑涂剂中甲硝唑和醋酸泼尼松的含量[J].中国药房，2013，24（13）：1218-1219.
　　[4] 何心，石春伟，张闯，等.复方甲硝唑缓释栓的制备及体外释放度考察[J].中国药房，2011，22（9）：834-836.
　　[5] 唐素芳.药品溶出度测定中的影响因素分析[J].天津药学，2009，21（1）：72-74.
　　[6] 谢沐风.溶出曲线相似性的评价方法[J].中国医药工业杂志，2009，40（4）：308-311.
　　[7] 柯玲玲，游娟娟，唐直婕，等.阿霉素凝胶体外释放度的测定[J].光谱实验室，2013，30（3）：1519-1522.
　　[8] 顾玲玲，李俊丽，刘小平，等.乌头碱温敏凝胶的制备及其体外评价[J].中国医药导报，2012，9（34）：115-117.
　　[9] 国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部部）[S].北京：化学工业出版社，2010：附录75