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免疫学的发展 摘 要:免疫学发展历史可分为: 经典免疫学时期:从18世纪末至20世纪中叶,人们对免疫功能的认识从人体现象的观察进入了科学实验时期。 近代免疫学时期:20世纪中叶—60年代,否定了长期以来机体免疫反应是对外源抗原的特有反应,认为免疫反应是机体识别“自己”和“非己”的普遍生物学现象。现代免疫学时期:阐明了免疫球蛋白的分子结构与功能,从器官,细胞和分子水平揭示了机体另一重要生理系统,即免疫系统的存在。自此,免疫学已发展成为一门独立的生物学科。 1.免疫学开创阶段 早在我国南宋时期,公元11世纪时,我国创造性地发明了人痘苗,即用人工轻度感染的方法,达到预防天花的目的。这实际上是免疫学的开端。至17世纪时,不但在我国已普遍实行以人痘苗接种预防天花,而且也引起邻近国家的注意,人痘法已传入朝鲜、日本及俄国,并由俄国传入士耳其,后经中东再传入欧洲。1721年英国驻土耳其公使夫人Montagu将人痘法传入英国,在英国曾进行了人体实验;把接种人痘者移居至天花流行区,结果发现接种者均获得免疫力。 2.免疫学的兴建阶段 继人痘苗以后,免疫学上的一个重要的发展是Jenner首创的牛痘苗。他观察到挤牛奶女工得过牛痘以后,就不再得天花的事实,通过长期的研究,证实牛痘苗可以预防天花。牛痘给人接种后,只引起局部反应,对人的毒力并不增加。因牛痘苗对于人体无害,以后它就完全代替了人痘苗。 自Jenner发明牛痘苗后,免疫学的发展停滞了将近一个世纪。到19世纪末,由于微生物学的发展,相继地发现了许多病原微生物,免疫学也随之迅速发展。其中Pasteur受到人痘和牛痘苗的影响,通过系统研究,找到用理化和生物学方法,使微生物的毒力减低,以减毒株制备菌苗或疫苗,如炭疽菌苗、狂犬病疫苗等。Pasteur减毒苗的发明,不但为实验免疫学建立了基础,也为疫苗的发展开辟了前景。 随着研究的进展,免疫现象所涉及的本质问题就必然要被提出来。19世纪末对于抗体免疫机理的认识,存在着两种不同的学术观点。 Ehrlich提出免疫反应必须具有其化学反应基础,血清中的抗体是抗感染免疫的重要因素,即体液免疫学说。1904年Arrheniius在研究抗原一抗体反应时提出免疫化学概念。免疫化 学研究首先从Landsteiner用偶氮蛋白人工抗原研究抗原-抗体反应的特异性问题开始。Haurowitz、Breinl及Marrack等在此领域内丰富了研究的成果。Mitchnikoff所提出的细胞免疫学说认为免疫由体内的吞噬细胞所决定。体液免疫和细胞免疫学说两种理论在当时曾有着不同程度的争论,然而它们只是说明了复杂免疫机理的一面,本身都存在着一定的片面性。 3.现代免疫学 20世纪的60年代,免疫学有了迅速进展,最大的突破是对体内淋巴细胞的种类和功能有了进一步的认识。Glick发现早期摘除鸡的腔上囊可影响抗体的产生。Miller在新生期小鼠中进行胸腺摘除实验,发现此种动物不能排除同种异体植皮,证明了胸腺在多数淋巴样组织的发生以及维持免疫应答的完整性上是必需的。Claman,Miller,Mitchel1,Davies等提出了T淋巴细胞和B淋巴细胞的概念。Good等对临床上免疫缺陷症病人进行观察,从先天性无胸腺Di-George综合征和先天性无丙种球蛋白血症病人中也证实了胸腺的免疫功能和存在两类淋巴细胞。由于这些研究成果,使视机体免疫应答过程为单纯化学反应的片面看法得到了纠正,并转向以生物学观点来看待免疫学。使人们逐渐考虑到免疫应答是机体对“自身” 和”异己”的识别与反应的生物学现象。 免疫学发展现状 在组织学、细胞学研究的基础上,在医学和临床医学的推动下,免疫学研究采用生物化学、分子生物学的理论、方法和技术,呈现出五彩缤纷,迅速发展的景象。 在生物膜研究方面,由于利用荧光抗体技术,改变了在膜研究中所谓“单位膜”结构的错误观念,提出了“流动嵌镶”学说。观念的改变,大大地推动了膜的研究,现在了解到生物分子与膜上相应受体结合而发出信号,进而传递到细胞质和细胞核内,使一些酶被激活,进而使一些基因启动。这些研究成果应用于免疫学的研究方法,并得到了进一步的发展。例如抗原传递细胞所传递的抗原与T细胞受体结合,导致T细胞的激活。激活的T细胞释放细胞因子与B细胞和巨噬细胞膜上受体结合,使B细胞分化增殖,形成抗体分泌细胞并释放大量抗体分子,使巨噬细胞吞噬和消化能力大大加强。 于是通过以膜介导的细胞之间的识别、信息传递、细胞激活以及出现的继发效应:酶的激活、基因开关的启动、抗体和细胞因子的释放等等,成为目前免疫学研究的热点。 在生物化学、分子遗传学和分子生物学方面,抗体的分子结构是用生物化学分离分析技术,对多发性骨髓瘤蛋白进行研究的基础上搞清楚的。它是免疫球蛋白分子的结构与功能关系的一个突破口。 这对免疫学研究中抗原抗体结合(包括沉淀、凝集、中和毒素、中和病毒等)、提供抗体多样性的基因重排、抗原-抗体复合物激活补体系统、IgE抗体诱发的变 态反应等等分子基础的研究,提供了有力的依据,并推向一个新的高度。 4. 21世纪的免疫学及其展望 1990年启动人类基因组计划,于2003年4月人类基因组序列图绘制成功,人类基因组计划全部完成。生命科学的研究开始转入后基因组学时代,即蛋白组研究时代,其研究结果将会极大地推动免疫学的发展。 21世纪免疫学的研究未来可能会注重以下几个方面的研究: 1.基因表达调控、顺序及其表达产物功能的研究 2.更重视整体水平免疫机理的研究 3.防治及诊断疾病方面的研究 4.免疫系统及功能的生物进化方面的研究 免疫学已成为生命科学的的领头学科之一,免疫学在今天的地位是极高的,对人类的健康上贡献也极为重要,随着技术理论的日益成熟,相信会带来更为好的成果。 参考文献: [1]孙泉, 佘锐萍, 王德成等. 肥大细胞在机体防御反应中的作用. 动物医学进展. 2007,28(8):83-86. [2] Martin Metz, Marcus Maurer. Mast cells-key effector cells inimmune responses. TRENDS in Immunology. 2008,5(11). [3] 杨 莉, 刘 莉, 黄 亮, 等. 疾病或被改变中的生命史诺贝尔生理学或医学奖获得者100年图说[M]. 重庆: 重庆出版社, 2006: 1-505. [4] 王秀芬. 战胜瘟疫: 从诺贝尔医学奖看20世纪免疫学进展[J]. 自然辩证法研究, 2003, 19(10): 67-71.
洁博利郑少波
免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。下面我给大家分享一些免疫荧光技术论文,大家快来跟我一起欣赏吧。
免疫荧光技术在临床检验中的应用
【中图分类号】R46【文献标识码】A【文章编号】1672-3783(2012)11-0347-01
【摘要】:目的是了解免疫荧光技术在临床检验中的应用及其发展方向。免疫荧光技术又被叫做荧光素技术,顾名思义,是用荧光素标记技术对抗体或抗原进行标记,然后用于免疫学测定,免疫荧光技术是利用物质吸收光能会发光的特性来研究的。我国的荧光抗体技术, 多用于病原微生物的诊断,60年代随着荧光抗体极大的进步,显著地提高了荧光抗体的敏感性和特异性,这一技术在自身免疫病和抗原免疫组化定位等方面都得到了广泛的应用。在本文,以免疫荧光技术的临床表现为案例,分析其特点,方法主要有荧光抗体技术、荧光抗体染色法、荧光间接染色法。结果是:通过对免疫荧光抗体技术的研究,分析出其各种优缺点,在以后的医学运用中能够着重利用。
【关键词】:免疫荧光技术荧光抗体基本运用基本类型
一目的
目的是通过研究免疫荧光技术的方法了解其在临床中的应用及其发展的方向,通过荧光抗体技术、间接荧光抗体染色方法、免疫荧光法等几种方法的介绍,了解荧光技术的发展,并且了解其优缺点,并且对免疫荧光技术的具体在临床中的应用也作出了列举,使能够在以后的临床运用中避免和其缺点的碰撞而利用其优点的地方。
二资料
本分析共有20例患者,年龄分布在25-37岁,平均年龄为32岁,其中9例为甲型链球菌患者,5位是寄生虫感染的患者,6位肿瘤病毒患者,在近期的一个月内没有使用过激素的病人,在此类人中,无精神病患者和心脏功能衰弱患者,选择病例严格控制,我们确保被研究者都符合条件,确保本次对免疫荧光技术的实验结果的准确无误。
方法:荧光抗体技术、间接荧光抗体染色方法、免疫荧光法来分别比较其优缺点和其检测效果的运用。
三结果
荧光抗体技术在临床试验中已经用于对细菌和病毒等的诊断上,针对通过的方法鉴定主要通过这几方面说一下其结果。对于细菌的检验,其材料可以是培养物或者感染组织,这种方法叫其他来说能够看到普通光学显微镜看不到的病毒。在对寄生虫诊断上,间接荧光体技术运用广泛。对于自身免疫疾病的实验诊断中,对免疫荧光技术的运用较为广泛。对于荧光抗体技术的运用主要是分析流式细胞分析,能够检测出所测细胞的大小、拆散率等。
四讨论
免疫荧光技术现在已经被广泛应用到了医学和生物的许多方面,那么在本文中,研究免疫荧光技术在临床中的具体运用表现有哪些呢?大致从以下几种角度考虑:
1在细菌诊断中 免疫荧光技术在这里主要是用于对细菌和抗原结构的研究,例如甲型链球菌,能够利用这项技术做出快速的分析和判断。
2在寄生虫学中利用免疫荧光技术,在这方面的主要表现是对于疟原虫、钩虫、蠕虫等的研究,主要是针对这些寄生虫感染的免疫学的机理方面的研究。
3在病毒学中免疫荧光技术在临床中应用最广的领域主要是对病毒学诊断,这主要研究与器官细胞的定位,此外还有对感染、肿瘤病毒的研究,一般研究表现是通过对血清中抗病毒的抗体研究来检测对脊髓灰白质炎或者狂犬病等。
4在免疫病理中 在临床中对免疫病理的运用主要是通过跟踪法检查对于球蛋白在沉淀中的开展情况,比如说对于天胞疮,一般会隐藏在真皮的基底膜中,对于一些隐性的病症也会要通过补体荧光的鉴定来测定其位置。
免疫荧光技术的运用还表现在对血液中B和T细胞的鉴定,在具体运用中对于器官移植的鉴定也有所涉及,此外还有对于组织中免疫球蛋白及补体组分的检测等等。
在研究免疫荧光技术的临床表现的同时,进一步需要的研究就是对于免疫荧光技术的基本类型,针对这点的研究,可分为以下几种类型:
1直接法这主要是利用荧光标记的特点,并且将其和与之相应的抗体结合,从而来鉴定相对未知的抗原,这种操作方法简易灵活,但缺点是针对范围比较局限。
2间接法 这是利用免疫荧光抗体能够标记抗免疫球蛋白的作用来鉴定的,在具体操作中首先,用已知的抗体和抗原反应,然后增加免疫球蛋白抗体,可以看出形成的复合体能够就其发光部位来判断,这种方法的优点是敏感性高,但缺点也存在抗体纯度不高,容易受非特异性荧光的干扰影响效果。
3、补体法 这是针对荧光标记抗不抗体,能够来对照抗原或抗体的原理反应,在具体操作中,首先已知抗体或未知抗原的反应,然后将其补充正常人体中新鲜血清,准备就绪后加入荧光标记抗体,可以看到在这里利用荧光抗体和其溶解的结合。这种方法只需将荧光抗体就能够得知系统中的其他抗原,但其缺点存在不稳定性,需要固定的抗体才能与之结合,不然会导致实验的失败。
4、双标记染色法 这种方法主要是针对免疫荧光技术能够将两种不同抗原在同一标本内分别染色的特点对其研究,在具体运用中,一般是将呈黄绿色荧光和成色荧光标记在不同的两种抗体中,在抗体中的不同颜色能够清晰的判断出两种抗体的含量和分布。
5、反差染色法 为了减少非特异性染色的运用,加强特异性免疫荧光的对比强度,对于某些组织的标本常见的方法是反差染色法,一般会以牛蛋白的白作为陈染,故名思议,反衬标记物的静电荷强,能够有效抑制非特异性染色,当伊文思蓝进入到染色体中时,会发出橙色的光,也就衬托出特异抗体的黄绿色荧光。
结论
总之,免疫荧光技术是标记免疫技术中最早的一种技术,把荧光免疫法按照不同的体系和测量方法如果进行进一步划分,还可以继续细分到若干种,在具体的临床试验中,由于一般的荧光技术在测定中的成本比较高,所以对其的判定也有一定的难度,但其与其他免疫方面相比,譬如和放射免疫技术相比,其在应用中有更大的发展空间,本文主要通过几种研究方法对免疫荧光技术进行了分析探索,并且透视出免疫荧光技术的具体应用和前景,并且也希望免疫荧光技术这种古老又先进的技术能够得到更好的发展。老而年轻的技术将会具有荧光技术这种
参考文献
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