瑞拉菌素产生菌的诱变选育及发酵条件优化研究 【摘要】： 瑞拉菌素(zuelacmycin)是本实验室从秦岭山区土壤中分离筛选的一株放线菌产生的氨基糖苷类农用抗生素。该菌株属于委内瑞拉链霉菌秦岭变种。前期研究表明瑞拉菌素对多种植物病原真菌均有较强的抑制作用,但由于其发酵活性产物含量太少,限制了对其进一步的研究应用。为了提高其发酵液的生物活性和有效成分含量,本试验从三方面对其进行研究:一是以委内瑞拉链霉菌秦岭变种RL-2(Streptomyces venezuelaevar. qinlingensis RL-2)为出发菌株,分别采用紫外线、氯化锂及紫外线加氯化锂的复合诱变方式对其进行诱变选育;二是对高产菌株的发酵条件优化进行研究;三是对瑞拉菌素抑菌机理进行了初步研究。主要研究结果如下: (1)三种不同诱变法对RL-2菌株处理后,共挑出354株突变菌株。通过对354株突变菌株进行初筛和复筛结果表明:复合诱变是一种相对有效的育种手段,在复合诱变的紫外线照射时间为45s和氯化锂浓度为的情况下,获得一株瑞拉菌素的高产突变菌株UVL-108且连续传接7代其遗传特性较稳定。生测试验结果表明:突变株UVL-108对小麦赤霉病菌、烟草赤星病菌、苹果轮纹病菌、番茄灰霉病菌和稻瘟病菌等5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、白菜软腐病菌等细菌的抗菌活性相比出发菌株均有显著提高。其中,UVL-108发酵液对上述5种植物病原真菌的毒力分别是出发菌株的、、、和倍,其中对瘟病菌的抑菌活性挺高最大。对枯草芽孢杆菌和白菜软腐病菌相对效价分别提高了68%和;采用活体组织法,测定了出发菌株和突变株UVL-108对油菜菌核的防效,结果表明突变株UVL-108的对油菜菌核病的防效明显好于出发菌株,发酵原液在稀释10倍的浓度下,其相对防效较出发菌株提高了。 (2)对高产菌株UVL-108发酵优化的研究结果表明,其最佳液体培养基组成为淀粉1%,黄豆饼粉,葡萄糖,碳酸钙,磷酸氢二钾;最佳发酵条件为:初始pH值,接种量6%,发酵时间为为72h-96h,培养温度为28℃,摇床转速为150r/min。 (3)本论文对UVL-108的活性产物抑菌机理作了初步研究,以稻瘟病菌为指示菌,结果表明其活性产物能强烈抑制病原菌菌丝的生长和孢子的萌发,引起病原菌菌丝生长畸形,菌丝扭曲或膨大、分枝增多等。
端粒酶（Telomerase），是基本的核蛋白逆转录酶，可将端粒DNA加至真核细胞染色体末端。端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用，端粒酶能延长缩短的端粒（缩短的端粒其细胞复制能力受限），从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制，在肿瘤中被重新激活，端粒酶可能参与恶性转化。端粒酶在保持端粒稳定、基因组完整、细胞长期的活性和潜在的继续增殖能力等方面有重要作用。细胞中有种酵素负责端粒的延长，其名为端粒酶。端粒酶的存在，算是把 DNA 克隆机制的缺陷填补起来，藉由把端粒修复延长，可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗，使得细胞分裂克隆的次数增加。 但是，在正常人体细胞中，端粒酶的活性受到相当严密的调控，只有在造血细胞、干细胞和生殖细胞，这些必须不断分裂克隆的细胞之中，才可以侦测到具有活性的端粒酶。当细胞分化成熟后，必须负责身体中各种不同组织的需求，各司其职，于是，端粒酶的活性就会渐渐的消失。对细胞来说，本身是否能持续分裂克隆下去并不重要，而是分化成熟的细胞将背负更重大的使命，就是让组织器官运作，使生命延续，但不是永续，这种世代交替的轮回即是造物者对于生命设计的巧思。其中一个就是端粒酶。但是98年就证明了二倍体叙利亚仓树胚细胞在复制分裂的各阶段始终表达端粒酶，但是仍然衰老。而剔除端粒酶基因的小鼠尚未观测到相应的表型的变化。所以端粒钟学说并不完全正确。 1、氧化性损伤。来自自由基的积累。 2、RDNA。染色体复制时可能出现错配膨起染色体外RDNA环，叫ERC。它的积累导致细胞衰老，并伴随核仁的裂解。 3、沉默信息调节蛋白复合物。它可以阻止它所在位点的DNA转录。 4、SGS1基因和WRN基因。这是两个同源的基因，对于保证细胞正常生命周期是必须的，但是容易突变导致早老症。 5、发育程序。 6、线粒体DNA。随着时间的推移，线粒体DNA的突变是相当显著的。 7、生命是最最神奇的魔法。细胞里的行动是复杂而精确的，往往是外来刺激导致蛋白质磷酸化，一级一级地传递，激活一定基因，开始转录翻译出平时不存在的蛋白质，这蛋白质再引起接下来的一系列级联反应。要推翻自然的规律，解决一个酶的问题，无异于杯水车薪。 可是即使假设人体具有了端粒酶，长生也是个值得打上问号的问题。因为端粒酶仅仅解决了复制长度的问题，并不能解决DNA复制时的变异问题，当然这有专门的机构来负责。可是这也说明，长生并非如想像中那么简单，不单单一个端粒酶就能解决。端粒酶-最新研究 杰克·绍斯塔克 卡萝尔·格雷德 瑞典卡罗林斯卡医学院10月5日宣布，将2009年诺贝尔生理学或医学奖授予美国科学家伊丽莎白·布莱克本、卡萝尔·格雷德和杰克·绍斯塔克，以表彰他们“发现端粒和端粒酶是如何保护染色体的”。最近的比较研究发现很多端粒蛋白结构很相似,功能也很接近.总而言之,随着研究的不断深入,端粒结合蛋白结构与端粒序列结合的特性和功能将逐渐被发现阐明。罗林斯卡医学院发布的新闻公报说，这三位科学家的发现“解决了一个生物学的重要课题，即染色体在细胞分裂的过程中是怎样实现完全复制的，同时还能受到保护不至于发生降解。” 伊丽莎白·布莱克本 但是，在正常人体细胞中，端粒酶的活性受到相当严密的调控，只有在造血细胞、干细胞和生殖细胞，这些必须不断分裂克隆的细胞之中，才可以侦测到具有活性的端粒酶。当细胞分化成熟后，必须负责身体中各种不同组织的需求，各司其职，于是，端粒酶的活性就会渐渐的消失对细胞来说，本身是否能持续分裂克隆下去并不重要，而是分化成熟的细胞将背负更重大的使命，就是让组织器官运作，使生命延续，但不是永续，这种世代交替的轮回即是造物者对于生命设计的巧思。
楼上的都是打酱油的 磊哥果断的找我 哈哈
端粒酶由三部分组成：端粒酶RNA（hTR）、端粒酶协同蛋白（hTP1）和端粒酶逆转录酶（hTRT）。兼有提供RNA模板和催化逆转录的功能。端粒酶通过一种称为爬行模型的机制维持染色体的完整。其作用靠端粒酶RNA辨认及结合母链DNA并移至3'端，开始逆转录复制，延伸足够长度后，端粒酶脱离母链，DNA-pol取代之，此时3'端折回来，同时起引物和模板的作用，在DNA-pol催化下完成末端双链的复制。 培养的人成纤维细胞随着培养传代次数增加，端粒长度逐渐缩短。而且生殖细胞端粒长于体细胞，成年人细胞端粒比胚胎细胞端粒短，都可以说明细胞老化和端粒酶活性下降有关。 基因突变、肿瘤形成时，端粒可表现缺失、融合或序列缩短等现象，临床中也发现某些肿瘤细胞的端粒比正常同类细胞显著缩短，虽然不绝对说明端粒酶决定端粒长度。但一定程度能说明端粒酶和癌变有关系。 这方面的知识比较专业，我建议你去搜几篇专业的论文，网上很多的，看看前面的综述。太多了，我能理解的就上面这点，就只能给你打上这么些了。
无惧死亡的年轻人有很多，当他们年华逝去成为老年人之后，他们才能理解人类对于生存是多么的渴望。
死亡意味着我们的一切需求都将化为泡沫，那是一件让我们非常恐惧的事情，怎样才能增加我们的寿命呢？
端粒效应
关于心理和寿命长短的关系，最著名的研究是2009年荣获诺贝尔生理学奖的伊丽莎白发表的论文，这些论文表明一个人的心理健康程度会影响端粒的长短，端粒的长短控制着人体的寿命和细胞。
除了这些论文，伊丽莎白还在2017年写过一本叫做《端粒效应》的书来具体研究心理水平是怎么影响端粒的长短的。
在该书中，作者写道：
母亲照顾生病的小孩时间越长，母亲的端粒长度就越短；抽烟喝酒的人，端粒长度也越短。
作者深入研究端粒长短的影响因素之后得出的结论是，端粒不仅仅会受到遗传因素的指令影响，还会听从我们的心理的指令。
也就是说我们的生活方式会影响我们的端粒长短，从而让细胞老化的速度加快或者变慢。
我们在生活中看到的那些慈眉善目的人总是看起来比他们的实际年龄更小，而那些压力很大的人，也总是更加显老。
躯体化
躯体化是一个心理学术语，指的是一个人有生理上的疾病，但是生理方面是健康的，找不到生理方面的发病原因，是心理疾病的躯体化反映。
这种症状在医学上被命名为心身疾病，又叫做心理生理疾病。
最能反映心理生理疾病的指标是我们的肠胃。
大家都有心情很好的时候胃口变得很好、心情很差的时候没有胃口吃饭的体验。
这是因为“肠胃器官”是我们最大的情绪器官，肠胃中含有大量的微生物，这些微生物会受到我们的焦虑、烦躁情绪的影响。
除此之外，科学家还研究了益生菌和肠胃微生物之间的关系，得出了益生菌有利于肠胃健康的结论。
老年人的心理压力水平和焦虑水平会直接影响到他们的肠胃健康，不仅仅是肠胃受到心理情绪的影响，还有心悸和呼吸障碍等等躯体症状往往都是情绪影响的结果。
我们常常听到郁郁寡欢这样的词语，老年人的身体本来就很差，有很多生理上的疾病，在不良的心理情绪引导下，很有可能会出现各种复杂的并发症。
积极VS消极
抑郁症主要和心理健康水平有关，在抑郁症中有一类别就是老年人抑郁症。
老年是一个不受社会关注、身体能量和心理能量都很微弱、经济能力变差以及子女关系疏离的阶段，这是一个特别容易想不通的阶段，同时也是对我们最大考验的一个阶段。
当我们走过少年、青年和中年，我们每个人都累积了自己对于世界的看法，有人变得抑郁，有人变得豁达，在这个不同的基础上我们迈入老年。
积极的老年人总是很想得开，而那些消极的老年人总是愁眉苦脸，首先这两种类型的人得抑郁症的概率是不同的，然后因为他们选择的看待世界的眼光的不同，会导致他们对自己的投入的不同。
积极的老年人更愿意和他的同龄人建立社交关系，从中获得社会支持。
而消极的老年人不愿意在健康支出、生活支出中投入相应的精力和财力，也不愿意和年龄相仿的老年人进行社会交往，这二者投入的不同会导致心理健康影响寿命这个结论成立。
此外，老年是一个身体疾病非常严重的阶段，身体疾病会影响我们的心理健康水平。
但是如果我们的心理健康水平是很高的，那么我们就能够最大程度地乐观看待生理疾病，就像身残志坚的霍金一样。
明尼苏达大学的研究者曾经找了568位70岁以上的男性和女性，这些人群都是独居人群，认知能力很差，并且都患有慢性疾病。在征得他们同意之后安排了两组不同的医生和护士。
第一组的医生和护士对老年人管理艺术和科学了解深入，第二组的医生是普通的治疗生理疾病的医生。
18个月内，两组都各有10%的老年人离世，但是第一组的老年人失能的概率降了25%，患抑郁症的概率降了50%。
心理健康给老年人带来的影响不仅仅是寿命的长短，更重要的是生命的质量，老年是一个与死神擦肩的年龄，一个人没有办法在老年拥有健康的心态，那是生不如死的体验。
心理健康除了会影响我们的寿命长短，还会影响我们的生命品质。
瑞拉菌素产生菌的诱变选育及发酵条件优化研究 【摘要】： 瑞拉菌素(zuelacmycin)是本实验室从秦岭山区土壤中分离筛选的一株放线菌产生的氨基糖苷类农用抗生素。该菌株属于委内瑞拉链霉菌秦岭变种。前期研究表明瑞拉菌素对多种植物病原真菌均有较强的抑制作用,但由于其发酵活性产物含量太少,限制了对其进一步的研究应用。为了提高其发酵液的生物活性和有效成分含量,本试验从三方面对其进行研究:一是以委内瑞拉链霉菌秦岭变种RL-2(Streptomyces venezuelaevar. qinlingensis RL-2)为出发菌株,分别采用紫外线、氯化锂及紫外线加氯化锂的复合诱变方式对其进行诱变选育;二是对高产菌株的发酵条件优化进行研究;三是对瑞拉菌素抑菌机理进行了初步研究。主要研究结果如下: (1)三种不同诱变法对RL-2菌株处理后,共挑出354株突变菌株。通过对354株突变菌株进行初筛和复筛结果表明:复合诱变是一种相对有效的育种手段,在复合诱变的紫外线照射时间为45s和氯化锂浓度为的情况下,获得一株瑞拉菌素的高产突变菌株UVL-108且连续传接7代其遗传特性较稳定。生测试验结果表明:突变株UVL-108对小麦赤霉病菌、烟草赤星病菌、苹果轮纹病菌、番茄灰霉病菌和稻瘟病菌等5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、白菜软腐病菌等细菌的抗菌活性相比出发菌株均有显著提高。其中,UVL-108发酵液对上述5种植物病原真菌的毒力分别是出发菌株的、、、和倍,其中对瘟病菌的抑菌活性挺高最大。对枯草芽孢杆菌和白菜软腐病菌相对效价分别提高了68%和;采用活体组织法,测定了出发菌株和突变株UVL-108对油菜菌核的防效,结果表明突变株UVL-108的对油菜菌核病的防效明显好于出发菌株,发酵原液在稀释10倍的浓度下,其相对防效较出发菌株提高了。 (2)对高产菌株UVL-108发酵优化的研究结果表明,其最佳液体培养基组成为淀粉1%,黄豆饼粉,葡萄糖,碳酸钙,磷酸氢二钾;最佳发酵条件为:初始pH值,接种量6%,发酵时间为为72h-96h,培养温度为28℃,摇床转速为150r/min。 (3)本论文对UVL-108的活性产物抑菌机理作了初步研究,以稻瘟病菌为指示菌,结果表明其活性产物能强烈抑制病原菌菌丝的生长和孢子的萌发,引起病原菌菌丝生长畸形,菌丝扭曲或膨大、分枝增多等。
决定一个人生命长短的，其实是心理健康，一个人心里如果很健康很阳光的话，你会会发现这个人会心情很好，寿命也会很长。
伊丽莎白·布莱克本博士（Elizabeth Blackburn），于2009年获得诺贝尔生理学或医学奖，她在一篇论文开头这样说道： “人保持年轻的秘诀不是哀悼、担忧，或预期麻烦，而是明智认真地活在当下。” 伊丽莎白·布莱克本（Elizabeth Blackburn）博士从小开始就对生命如何运作着迷。生于1948年，她在澳大利亚的塔斯马尼亚岛上一个海边的偏远小镇长大。在那里，她从花园里收集蚂蚁，从海滩上把水母带回家。当开始科学研究生涯时，她转向在分子水平分析生命系统。 ▲2009年诺贝尔生理学或医学奖得主 伊丽莎白·布莱克本博士 在上世界70年代，布莱克本博士在耶鲁大学发现在染色体顶端存在一种重复DNA结构，这种结构像一个保护帽，在细胞进行分裂，DNA复制时保护染色体的顶端。这种结构称为 端粒 （telomere）。 端粒 (telomere) 是保护染色体的“帽子”，简单比喻，我们身体里的端粒就像一具“生命时钟”，它的缩短就是细胞衰老的生物学标记。 在上世纪80年代，布莱克本博士与她的研究生Carol Greider女士在加州大学伯克利分校发现了 端粒酶 ， 这种酶能够保护和重建端粒。 端粒酶可以比喻成“生命时钟”的维修工，它负责维修并增加它的寿命。你看到的没错，衰老这一过程也是可逆、可逆、可逆的（重要的事情说三遍）， 博士后来的研究中发现练习正念就能做到这一点 。布莱克本博士对端粒和端粒酶的研究让她在 2009年 获得了 诺贝尔生理学或医学奖 。 布莱克本博士正是通过端粒 / 端粒酶的途径，将正念冥想与抗衰老结合在一起，并得出延缓衰老结论的。 比如说，布莱克本博士团队，招募志愿者，然后让这些志愿者去北科罗拉州的香巴拉山静修，那些完成了为期3个月静修的志愿者，他们的端粒酶水平远比正在等待静修人群高出了30%。 一次偶然的开启 在2000年，一次意想不到的会面改变了她研究的方向。前来造访她的是Elissa Epel博士，当时是UCSF心理学系的博士后。 心理学家和生物化学家 通常没有很多共同语言，但是Epel博士对长期精神压力对身体的损伤非常感兴趣，而且她有一个非常前卫的提议。 （Elissa Epel博士和布莱克本博士） Epel博士如今是UCSF衰老、代谢和感情中心主任。她一直对意识与机体之间的关系感兴趣。对她影响很深的学者包括整体健康大师Deepak Chopra先生和生物学先驱Hans Selye博士。 他们在上世纪30年代第一次描述 长期精神压力可以在大鼠身上导致慢性病的发生。 “ 任何压力都会留下一个无法磨灭的疤痕，生物体经受压力环境付出的代价是它们会变得老一些 。”Selye博士说。 在2000年的时候，Epel博士想要发现那个“疤痕”。“我对这个想法非常有兴趣：如果我们仔细观察细胞，我们可能可以测量每天经受的压力给细胞带来的磨损。”她说。在阅读了布莱克本博士关于衰老的研究之后，她觉得端粒可能符合这些条件。 怀着面对著名资深科学家的忐忑，当年的博士后向布莱克本寻求帮助进行一项实验。这项实验的对象是照顾患有慢性病儿童的母亲，她们可能经历着人生中压力最大的日子。 Epel博士的设想是检测这些妇女感受到的精神压力的程度，然后看看她们的精神状态和端粒的状态之间有没有相关性。 她在犹他大学的合作者可以测量端粒的长度，而布莱克本的团队将检测端粒酶的水平。 到那时为止，布莱克本博士的研究都是在实验中精密控制的优雅实验。而Epel的研究对象，则是现实中复杂的人，拥有现实而复杂的人生。“对于我来说，这完全是另一个世界。”布莱克本博士说。最初，她很怀疑精神压力和端粒之间会不会有任何有意义的联系。基因本认为是最可能决定端粒长度的因素。测量环境因素，而且还是个心理因素对端粒的影响，在当时是非常有争议的。但是作为一个母亲，布莱克本博士被那些受到精神压力折磨的母亲的困境所吸引，她说：“你无法不心生怜悯。” Epel和布莱克本博士花了 4年 时间，终于做好准备从58名母亲那里获得血样。这是一个小型的试点研究，想要获得有意义的结果，在实验组和对照组的妇女需要尽量相似。她们有类似的年龄、生活习惯和背景。Epel在选择实验对象方面可谓费尽苦心。然而，布莱克本说，她一直觉得这个实验不过是个可行性研究，直到有一天Epel博士打电话来，告诉她“你肯定不敢相信！” 结果非常清晰明了—— 母亲汇报经受的压力越大，她们的端粒越短，而且她们的端粒酶水平越低。 研究结果及延展 数据结果在这项研究中 压力最大的妇女 与 压力最轻的妇女 相比 ， 端粒长度上的表现就 好像她们衰老了10年 ， 而且 端粒酶的水平也减半 。“我激动极了。”布莱克本博士说。她和Epel将现实生活的经历与细胞内的分子机制连接在了一起。 这是第一次证据表明 精神压力不但损害我们的健康，它实实在在地让我们衰老。 意外的发现很自然地引起别人的怀疑。布莱克本和Epel博士最初很难找到一家杂志愿意发布她们的跨界论文。当这篇论文最终在 2004年12月 在《PNAS》发表后，它激起了广泛的媒体关注和称赞。 斯坦福大学压力研究先驱Robert Sapolsky博士将这项合作描述为“飞跃广阔的跨学科峡谷”。 这项研究触发了这一研究领域的大爆发：研究人员们随后发现感受到的精神压力与健康女性中更短的端粒长度相对应。照顾阿兹海默病的亲属，家庭暴力的受害者，以及抑郁症和创伤后应激障碍患者身上的端粒都会变短。“ 10年过去了，现在我可以很肯定地说环境对端粒长度会有一定影响。”在约翰·霍普金斯大学医学院研究端粒疾病的临床医生兼遗传学家Mary Armanios博士说。 关于机制的研究也出现了进展。实验研究表明， 应激激素皮质醇能够降低端粒酶的活性，而氧化应激和炎症这两种心理压力的生理后果，则能够直接侵蚀端粒。 这似乎对我们的健康有着灾难性的后果。与年龄相关的多种疾病，包括骨性关节炎、糖尿病、肥胖症、心血管疾病、阿兹海默病和中风，都被发现与更短的端粒有关。 研究人员现在面对的问题是：端粒只是与年龄相关损伤的一个无害标志物（比如白头发），还是本身对造成这些健康问题产生重要影响。 在编码端粒酶的基因上携带突变的人群中，他们的端粒长度比正常值更低，而这些人会患上衰老加速综合征，他们的器官会逐渐衰竭。但是Armanios博士想要解决的问题是因为经受压力而导致端粒长度的小幅度减少是否和健康相关，尤其是在端粒长度本身非常多样的情况下。 布莱克本博士指出，有些基因突变影响端粒的维持，它们虽然对端粒的影响不如Armanois博士研究的综合征那么严重，但是还是会增加在生命晚期出现慢性疾病的风险。有些研究表明我们的端粒能够预测未来的健康水平。 例如， 一项研究表明，在两年半的时间里端粒长度减短的老年男性，在未来9年里死于心血管疾病的风险，是那些在同样时间里端粒长度没有变化或变长的男性的3倍。 布莱克本博士正在进行更大规模的研究，包括与北加州的Kaiser Permanente医疗系统合作，检测100,000人的端粒。这项研究的目标是将志愿者的端粒长度数据与他们的基因组数据和电子病例结合在一起，从而发现端粒长度与疾病之间的联系，以及影响端粒长度的基因突变。这项研究已经揭示了端粒长度和长寿之间的关系，布莱克本博士说。 通常随着人们年龄的增加，平均端粒长度会变短，但是，当年龄增长到75-80岁时，平均端粒长度反而上升，这是因为端粒长度短的老人们都去世了。 这意味着那些拥有更长端粒的老人确实活得更长。 在布莱克本和Epel发表最初研究后的10年里，精神压力通过端粒让我们加速衰老的理念已经渗透到了大众文化之中。除了获得很多科学奖项以外，布莱克本在2007年被时代周刊评为“世界上100位最具影响力人物”之一。 新问题：如何保护端粒 随着端粒缩短导致机体损伤的证据越来越多，她开始思考一个新的问题：如何保护端粒。 世界上有上百种内观的方法，而来自东方 佛教的一种正念修习方式让人们关注于当下的感受 。端坐在垫子或椅子上，只是简单地觉察到不同思绪的发生和消退，不去评价它们或者对它们做出反应，只是全然的体验当下所发生的内在外在的一切。对练习者来说这是一种精神上的追求，通过让不重要的思绪、感受、情绪消退，他们希望能够更接近现实的真正面目。 布莱克本同样对现实的本质非常感兴趣，不过将整个职业生涯用来关注能够测量和量化的事物之后，正念最初既不能引起她的个人兴趣，也不能激发她的职业兴趣。“ 10年前，如果你这样告诉我，我会说我们之间有一个人脑子有问题。 ”在2007年她接受纽约时报的采访时候这样说。然而，她对端粒的研究将她带到了正念。自从与Epel合作的最初研究问世之后，这两位科学家与世界各地多达50-60个研究团队进行了合作。其中很多团队聚焦于寻找保护端粒不受压力影响的方法。 大量不同的试验表明，身体锻炼，健康饮食和社会支持都有帮助。但是最有效的干预方法之一是正念冥想，它不但能够减缓端粒的磨损，甚至可能增加端粒的长度。 目前大多数研究规模都比较小，但是它们的结果都指向同一个方向。例如，布莱克本博士和她的合作者让志愿者去北科罗拉州的香巴拉山静修。 那些完成了为期3个月的静修课程的志愿者的端粒酶水平比等待静修的人群高30%。 在2013年，UCLA的Irwin博士发表的一项研究中，实践 一种古老的名为Kirtan Kriya的冥想的志愿者，与听放松音乐的志愿者相比，端粒酶水平显著升高。 在最新的研究中，Epel和布莱克本博士在对180名母亲进行随访。她们中间有一半人的孩子有自闭症。这项试验会在两年中检测这些妇女的精神压力程度和端粒长度，然后检测一种短期正念培训的效果。 在一项包含239名健康女性的研究中，那些思绪游走更少的女性（正念冥想的主要目的）的端粒长度显著长于那些思绪乱飞的女性。“虽然我们报道的只是相关性，然而有可能正念的思想状态可以促进健康生化环境的产生，从而促进细胞寿命的延长。”研究人员表示。 关于正念如何提高端粒长度和端粒酶水平的假说有不少种，但是大多将原因归咎于精神压力的减轻。 正念（mindfulness）通过一种以不评判的方式，对当下所发生的内在、外在身心体验保持觉察的方法，如对呼吸的觉察、对身体的扫描练习等，可以帮助我们放松身体，让我们从战斗或逃跑的自动化反应中解脱出来。它可能同时有减轻心理压力的作用。让我们可以后退一步，发现那些负面或者让我们感到有压力的念头并不见得是真实世界的反映，而是短暂并且终将过去的事件。它也可以帮助我们珍惜当下，而不是为过去而懊悔，或者为未来而担忧。 “ 能够专注于当下的活动是非常宝贵的 ，”Epel博士说：“我认为我们的社会普遍存在注意力分散的问题，尤其是当人们精神压力很大，并且没有资源让他们能够专注于当下。” 一位诺奖获得主将正念作为研究课题无疑会带来不少非议。有些布莱克本博士的怀疑者虽然对正念练习的健康效果有怀疑，但同时也不得不承认她的研究方法的科学性。当然也不乏有学者觉得这些早期研究的结果被过分宣扬和解读。 “人们对mindfulness的概念非常不舒服。”布莱克本博士说。她把这归结于对正念的不了解和正念与宗教实践的联系。“我们从来都是尽可能的谨慎，一直说‘ 这是初步结果，这是一个试点试验。 ’但是人们都不去读这些话，他们只是看到了头条标题，然后就慌了。” 不过现在情况正在改变，得益于NIH的资助，研究人员可以开发与宗教无关的基于正念的降压疗法，并且发现它们可以提供一系列健康益处，包括降低血压、提高免疫反应，和预防抑郁症。过去几年中， 多项神经科学研究表明即使是短暂的正念也可以改变大脑的结构。 “现在大脑数据和这些临床数据的发布，让人们更容易接受正念，”哈佛大学的神经科学家Sara Lazar博士说：“但是总会有一些人不会相信它有任何好处。” 布莱克本博士对正念的观点是： 它是一个可以被研究的课题 ，只要研究方法足够强大。所以当她的研究结果指向这个方向时，她并没有因为这些研究可能对她的名声不好而退缩。 而且，她自己尝试了正念练习，加入了在圣巴巴拉的一个为期6天的集训。“我很喜欢。”她说。她仍然会抽空进行短暂的冥想，她说这会帮助她让思维更为清晰，避免忙碌和分散的思维状态。 其实，从另一个角度也说明，无论科学是否走到如今这个阶段，在东方传统智慧文化中，佛教、道教都认为正念冥想可以帮助人员获取健康和长寿，甚至帮助人们进一步的发现生命的真相和奥秘，而布莱克本博士和她的同事们的研究只是再一次验证古老智慧的正确性。 你身边有练习正念的人吗？尝试去问一问，去观察一下，甚至自己也可以尝试一下，看看是否可以带来不一样的体验和感受。 文：源自“药明康德”，一心正念适当删减、调整 图：来自网络参考资料： [1] Can meditation really slow ageing? Retrieved November 19, 2018, from [2] Elizabeth Blackburn on the telomere effect: ‘It’s about keeping healthier for longer’. Retrieved November 19, 2018, from [3] The Telomere effect. Retrieved November 19, 2018, from [4] The science of cells that never get old. Retrieved November 19, 2018, from
如今还健在的微生物界牛人1.田波，男，1931年12月25日生于山东桓台县，中国科学院微生物研究所分子病毒学与生物工程研究室主任，研究员、院士、博士生导师，著名病毒学与生物工程专家1954年8月 北京农业大学植保系毕业 1954年8月至1962年6月 中国科学院微生物所研究实习员, 1958年后任课题组长 1962年7月至1978年12月 中国科学院微生物所, 助研, 课题组长, 1977年后任研究室副主任 1979年1月至1986年4月 中国科学院微生物所, 副研, 研究室副主任, 1983年后任主任 1986年5月至1991年12月 中国科学院微生物所, 研究员, 博士生导师, 研究室主任 1991年12月至今 中国科学院院士, 研究员, 博士生导师, 研究室主任 对中国的植物病毒、类病毒和生物工程有系统的研究, 1983年首次报导了应用卫星RNA防治黄瓜花叶病毒获得成功。通过卫星RNA生防制剂和包括卫星 RNA 在内的多基因抗病遗传工程品种, 在田间大面积应用中获得良好的防病增产效果, 并提出了卫星RNA除抑制病毒复制之外的一种新的抗花叶病机理。他所领导的实验室在生物工程方面开展了核酶工程、随机序列多肽库、抗体基因工程、基因工程医药和植物基因工程等研究, 获得在体内高度抗病毒和类病毒的转基因作物; 构建了胞内和表位多肽库并筛选到用于亲合层析和抗病毒的一些多肽; 构建和表达了几种抗肿瘤的抗体基因; 研制成功数种基因工程药物; 在几种作物上用基因工程方法获得了雄性不育系和恢复系, 为杂种优势利用奠定了基础。 在国内外重要学术刊物上发表论文150多篇, 专著五种。2.张树政，女，1922年10月22日生于河北束鹿县。现任中国科学院院士、微生物所研究员、博士生导师。1942－1945 北京大学理学院化学系毕业，理学士； 1945－1946 北京大学理学院化学系助教； 1946－1948 北京大学医学院生化科助教； 1948－1949 北京大学理学院化学系助教； 1950－1954 重工业部综合工业试验所技师； 1954－1957 中国科学院菌种保藏委员会助理研究员； 1958－现在 历任中科院微生物所副研究员、研究员、博士生导师、酶学研究室副主任等职。 1991－现在 中国科学院院士 1992－现在 中国科学院生物学部常委 60年代初，在国内首先用纸电泳、酶谱和生长谱法分析比较了当时在酒精工业界有争议的不同种曲霉淀粉酶系的组成，确定了黑曲霉的优越性。60年代阐明了白地霉的戊糖代谢途径，发现白地霉中有甘露醇，查明了其合成途径。发现并纯化了NAP－甘露醇脱氢酶。70年代在国内首先建立了等电聚焦和聚丙烯酰胺凝胶电泳等新技术。在红曲霉糖化酶的研究中，首次得到该酶的结晶，并发现该酶的不同分子型存在构象差异，证明是糖基化程度不同引起的（现称为糖型）。80年代从事多种糖苷酶的应用和基础研究。如细菌(－淀粉酶高产菌株活力在国际上当时领先，果胶酶的应用，右旋糖酐酶已证明有防龋效果，产麦芽四糖的淀粉酶有工业化前景。首次发现了有严格底物专一性的(－D－岩藻糖苷酶，由嗜热菌纯化了5种酶。90年代在国内大力倡导糖生物学和糖工程前沿计划，并建立了糖工程实验室 。3.魏江春男，1931年11月11日生。研究员、博士生导师、中国科学院院士自1963年以来一直从事中国地衣区系与分类研究，同时对世界范围石耳科 (Umbilicariaceae)地衣进行了比较系统的研究。先后组织并参加了国家基金委、国家科委和中科院联合资助的重大项目中的三级课题《中国地衣志－石蕊科》，基金委资助的《用地衣进行北京地区大气质量评定的研究》及《世界范围石耳科地衣的综合研究》，中科院重大项目中的三级课题《西藏地衣研究》以及国家85攻关《南极菲尔德斯半岛生态系统的研究》中的《陆地生态系统的研究》。此外，还对中国地衣文献资料进行了整理与分析，对一些地衣类群，如袋衣科，肺衣科，地卷科，茶渍科等进行了初步研究。当前正在主持并参加由基金委、中科院和真菌地衣系统学开放实验室资助的中美合作项目《东亚－北美地衣型与非地衣型真菌的间断分布及其遗传趋异性研究》。自1990年以来，将注意力逐渐集中于地衣表型与基因型相结合的综合研究方面。在石耳科研究中通过PCR技术对地衣型真菌的核rDNA特定片断进行RFLP分析以及对某些疑难种的核rDNA特定片断进行序列测定，并结合形态学，解剖学，化学与地理学等多性状的综合比较进一步阐述了石耳科地衣的科、属、种级的分类学综合概念。4.郑儒永女，1931年 1月10日生。 研究员、中国科学院院士、博士生导师，系统真菌学专业 一贯致力于真菌分类系统的合理化与完善, 研究小煤炱、白粉菌和毛霉等类 真菌多年。对我国白粉菌目的有关属种以及全世界范围内白粉菌目的所有属的全 型进行了详尽的研究, 澄清和订正了许多国际上有争议的问题, 发表了一个较为 合理和接近自然的白粉菌科属级分类系统, 受到国际公认。1987年与其他人合作 并主写了我国的第一本真菌志《中国白粉菌志》。在分类难度很大的毛霉目研究 中, 注意将形态特征结合生理生化及分子生物学特性和将无性型特征结合有性型 特征并取得了一些有意义的突破。在医学毛霉和内生毛霉方面亦注意开展研究。 共著书10本(主作2本), 发表在国内外学术刊物上和全国会议及国际会议论文62 篇(主作48篇)。 5.方荣祥 院士 男，汉族 1946年1月19日出生于上海，籍贯 安徽省绩溪县工作单位及地址 中国科学院微生物研究所 北京中关村 100080研究员、博士生导师电话及传真 62548243 电子邮件 fangrx@.我们学校的院士李季伦（），男，河北乐亭人，教授，1995年当选为中国科学院院士。 1948年毕业于南京中央大学理学院生物系，留校任教。1950年至今，历任中国农业大学助教、讲师、副教授、教授。1980-1982年在美国Wisconsin大学生化系进修。1989年至今任中国农业大学“农业生物技术国家重点实验室”学术委员会主任；1992年至今任中国科学院微生物研究所“微生物资源前期开发国家重点实验室”学术委员会主任。曾兼任国务院学位委员会学科评议组成员（1985-1991年）、农业部科学技术委员会委员（1983-1995年）、清华大学兼职教授（1994-1996年）、中国微生物学会理事长（1991-1995年）和名誉理事（1995年至今）、《微生物学报》主编（1991年至今） 、《农业生物技术学报》主编（中、英文版，2002年 至今）。长期从事农业微生物的教学和研究，培养了大量专业人才，其中包括60多名研究生。出版译著8册，发表文章 一百二十余篇。与俞大绂教授合编的《微生物学》在我国微生物界有较大影响，获国家新闻出版署优秀科技图书一等奖（1998年）。在基础科学研究方面：系统地研究了生物固氮的问题，取得以下成就：（1）在固氮酶催化机制的研究中，证明了固氮酶催化HD形成是固氮酶的普遍特性，而且是绝对依赖N2的；并提出了固氮酶的双位点放H2模式；（2）在固氮螺菌分子遗传学研究中，建立了我国巴西固氮螺菌Yu62菌株的基因文库，克隆和测序了该菌的ntrBC、draTG、nifA、glnB、glnZ和flbD等基因，并分析了它们的功能；构建了能节约玉米氮肥20%的耐铵固氮基因工程菌株；（3）启动了我国豆科植物根瘤菌资源调查和分类的研究，建立了我国根瘤菌资源数据库，为以后的研究奠定基础。在应用研究方面：先后研制和开发了赤霉素GA3和GA4+7(可用于促进植物生长)、玉米赤霉烯酮和玉米赤霉醇（可用于促进牛、羊增重，并首先发现它们也是高等植物的一类天然激素）、莫能菌素和马杜霉素（可用于预防鸡球虫危害）、以及阿维菌素和伊维菌素（可用于防治动植物的寄生虫）等农牧用微生物制剂，取得了重大经济效益和社会效益。曾获北京市优秀教育工作者（1986年）、五一劳动奖章（1986年）、全国农业劳动模范（1990年）等荣誉称号 ，自1991年起享受国务院颁发的政府特殊津贴。7.我们学校的院士 陈文新，女，教授，博士生导师，中科院院士，国际根瘤菌/土壤杆菌分类分委会委员。1952年毕业于武汉大学农学院土壤农化学系。1958年获前苏联季米里亚捷夫农学院副博士学位。1959年1月回国后在北京农业大学(现中国农业大学)生物学院微生物学系工作至今,一直从事土壤微生物学与细菌分类学的教学和科学研究。自二十世纪70年代起，她主持研究我国根瘤菌资源调查与分类。在她卓越的领导下，组织全国20个单位的微生物学工作者，共同完成全国32个省（市）700多个县，不同生态条件下各种豆科植物根瘤菌资源调查，保藏根瘤菌5000多株；对其中2000株进行过100多项性状分析；发现一批抗逆性很强的根瘤菌种质资源；发表根瘤菌新属2个，新种12个，在国际根瘤菌属、种系统中占很大比重；从分类学角度获得豆科植物与根瘤菌共生关系的新认识；在国内外学术刊物上发表论文100多篇，其中近20篇被SCI收录，被引用200多次；培养硕士、博士50多人。她先后获农业部部级科技进步一等奖2项，获国家教委科技进步二等奖2项，获农业部优秀教材一等奖1项，2001年获国家自然科学二等奖1项。她的工作在国际上有较大影响，1996年当选为国际根瘤菌/土壤杆菌分类分委会委员, 1998年被邀与美国学者一道撰写“伯杰系统细菌学手册”第二版根瘤菌部分内容。现在她正热心于将优良豆科植物--根瘤菌共生体系引入我国西部大开发的农林牧业中而努力工作着。
推荐表专 业 微 生 物 与 发 酵姓 名 ***学 历 博 士 研 究 生个人简介姓 名 *** 性别 男 出生年月 1975．10民 族 汉 籍贯 湖北黄冈 政治面貌 中共党员入学时间 1998年9月 毕业年月 2003年7月学 院 农业工程与食品科学 研究方向 微生物与发酵个人简历1988年9月-1991年7月 湖北省麻城市三河口镇中学1991年9月-1994年7月 湖北麻城市三河口镇职业高中1994年9月-1998年7月 湖北农学院食品科学系（农业教育）1998年9月-2003年7月 浙江大学食品科学系(硕士-博士学位)奖励情况1. 荣获2000-2001年度浙江大学研究生二等奖学金、三好研究生。2．参加浙江大学"天堂硅谷"创业大赛"康宝"创业团队，聘为总经理3．荣获1999-2000学年浙江大学优秀研究生4．荣获2001-2002年度浙江大学研究生挂职锻炼优秀个人称号5． 2001年7月-20012年7月浙江大学研究生挂职锻炼中担任桐庐县冠华兔业有限公司董事长助理一职，获合格证书6．荣获1998年度湖北省高等学校优秀毕业生称号7．1994-1998年连续四年荣获湖北农学院三好学生称号综合素质英语 CET-6，CET-4，GRE，德语基本口语计 算 机 对计算机有浓厚的兴趣，能娴熟运用Office办公软件、AutoCAD，并能运用Dps、SAS统计软件等进行数据处理，熟悉网络、局域网的资源利用。参与科研 1、 参与导师主持的浙江自然基金课题：《氧载体促进丝状真菌氧传递机理的研究》；2、 参与课题"固定化酵母连续发酵动力学的研究"的部分研究工作；3、 参与了"弹性蛋白酶的规模化产业化技术研究"课题；6、 博士毕业论文为《产弹性蛋白酶菌株的分离、鉴定和发酵技术的研究，以及弹性蛋白酶的水解机理探讨》；发表论文 现已在国家正式刊物上发表论文五篇；1． 纳豆激酶的研究进展, 食品与发酵工业; 2001,112． 天然食品防腐剂的研究进展, 食品工业科技, 2001, 93． Optimization of culture medium composition of elastase producing strain Bacillus sp. EL31410 with response surface methodology, Enzyme Microbial and Technology, ． 糖化酶及其基因的研究进展, 微生物学杂志, 2000,65． 产弹性蛋白酶菌株的筛选、鉴定及其产酶条件的初步研究，浙江大学学报（农业生物技术版），2002（已接受）6．Elastase improved production by Bacillus -further Optimization and Kinetics Studies of Culture medium for Batch fermentation，Science of Zhejiang University(Engilish), 2003,17. Influence of medium components on elastase production using crude sources by Bacillus sp. EL31410, Biotechnology and Bioengineering, 2002(waiting for response)社会工作 曾担任班长、学习委员、生活委员社会实践 1999年7月 在钱江啤酒集团研究所参加"固定化酵母连续发酵动力学的研究"，熟悉啤酒生产工艺；2000年6月 浙江大学研究生挂职锻炼中,在浙江温州一家私营企业担任总经理助理;2001年7月-2002年7月 浙江大学研究生挂职锻炼中担任桐庐县冠华兔业有限公司董事长助理一职,获挂职锻炼优秀个人称号；2001年10月 参加杭州-浙江大学联合推出的"天堂硅谷"创业大赛，作品《"康宝"健康品的产业化》闯入创业大赛复赛。主要课程 博士主要课程高级生物化学专题（含实验） 分子生物学高级分子生物学专题（博士） 高级食品化学食品微生物专题 发酵专题食品工程进展 SAS实验设计和分析Dps实验数据分析处理 发酵工程与设备本科课程生物化学 微生物学 药理学 药剂学微生物制药学 生物制药学 生物工艺学 生化分离工程微生物工程 生物工程导论 发酵设备 物理化学有机化学 无机及分析化学 工程经济数学建模自我评价本人性格开朗，充满自信，擅长交际，有较强的组织管理协调和综合分析能力；熟练掌握英语，有较强的英文写作和口头表达能力；平时学习注重知识的系统化，专业理论基础知识扎实，有很强的实验操作能力，完全有能力承担科研工作的筹备、策划、设计和运作。欲在贵公司科研或其他部门从事具有挑战性的工作，能胜任一定的管理工作。
如今还健在的微生物界牛人 1.田波，男，1931年12月25日生于山东桓台县，中国科学院微生物研究所分子病毒学与生物工程研究室主任，研究员、院士、博士生导师，著名病毒学与生物工程专家 1954年8月 北京农业大学植保系毕业 1954年8月至1962年6月 中国科学院微生物所研究实习员, 1958年后任课题组长 1962年7月至1978年12月 中国科学院微生物所, 助研, 课题组长, 1977年后任研究室副主任 1979年1月至1986年4月 中国科学院微生物所, 副研, 研究室副主任, 1983年后任主任 1986年5月至1991年12月 中国科学院微生物所, 研究员, 博士生导师, 研究室主任 1991年12月至今 中国科学院院士, 研究员, 博士生导师, 研究室主任 对中国的植物病毒、类病毒和生物工程有系统的研究, 1983年首次报导了应用卫星RNA防治黄瓜花叶病毒获得成功。通过卫星RNA生防制剂和包括卫星 RNA 在内的多基因抗病遗传工程品种, 在田间大面积应用中获得良好的防病增产效果, 并提出了卫星RNA除抑制病毒复制之外的一种新的抗花叶病机理。他所领导的实验室在生物工程方面开展了核酶工程、随机序列多肽库、抗体基因工程、基因工程医药和植物基因工程等研究, 获得在体内高度抗病毒和类病毒的转基因作物; 构建了胞内和表位多肽库并筛选到用于亲合层析和抗病毒的一些多肽; 构建和表达了几种抗肿瘤的抗体基因; 研制成功数种基因工程药物; 在几种作物上用基因工程方法获得了雄性不育系和恢复系, 为杂种优势利用奠定了基础。 在国内外重要学术刊物上发表论文150多篇, 专著五种。 2.张树政，女，1922年10月22日生于河北束鹿县。现任中国科学院院士、微生物所研究员、博士生导师。 1942－1945 北京大学理学院化学系毕业，理学士； 1945－1946 北京大学理学院化学系助教； 1946－1948 北京大学医学院生化科助教； 1948－1949 北京大学理学院化学系助教； 1950－1954 重工业部综合工业试验所技师； 1954－1957 中国科学院菌种保藏委员会助理研究员； 1958－现在 历任中科院微生物所副研究员、研究员、博士生导师、酶学研究室副主任等职。 1991－现在 中国科学院院士 1992－现在 中国科学院生物学部常委 60年代初，在国内首先用纸电泳、酶谱和生长谱法分析比较了当时在酒精工业界有争议的不同种曲霉淀粉酶系的组成，确定了黑曲霉的优越性。60年代阐明了白地霉的戊糖代谢途径，发现白地霉中有甘露醇，查明了其合成途径。发现并纯化了NAP－甘露醇脱氢酶。70年代在国内首先建立了等电聚焦和聚丙烯酰胺凝胶电泳等新技术。在红曲霉糖化酶的研究中，首次得到该酶的结晶，并发现该酶的不同分子型存在构象差异，证明是糖基化程度不同引起的（现称为糖型）。80年代从事多种糖苷酶的应用和基础研究。如细菌(－淀粉酶高产菌株活力在国际上当时领先，果胶酶的应用，右旋糖酐酶已证明有防龋效果，产麦芽四糖的淀粉酶有工业化前景。首次发现了有严格底物专一性的(－D－岩藻糖苷酶，由嗜热菌纯化了5种酶。90年代在国内大力倡导糖生物学和糖工程前沿计划，并建立了糖工程实验室 。 3.魏江春男，1931年11月11日生。研究员、博士生导师、中国科学院院士 自1963年以来一直从事中国地衣区系与分类研究，同时对世界范围石耳科 (Umbilicariaceae)地衣进行了比较系统的研究。先后组织并参加了国家基金委、国家科委和中科院联合资助的重大项目中的三级课题《中国地衣志－石蕊科》，基金委资助的《用地衣进行北京地区大气质量评定的研究》及《世界范围石耳科地衣的综合研究》，中科院重大项目中的三级课题《西藏地衣研究》以及国家85攻关《南极菲尔德斯半岛生态系统的研究》中的《陆地生态系统的研究》。此外，还对中国地衣文献资料进行了整理与分析，对一些地衣类群，如袋衣科，肺衣科，地卷科，茶渍科等进行了初步研究。当前正在主持并参加由基金委、中科院和真菌地衣系统学开放实验室资助的中美合作项目《东亚－北美地衣型与非地衣型真菌的间断分布及其遗传趋异性研究》。自1990年以来，将注意力逐渐集中于地衣表型与基因型相结合的综合研究方面。在石耳科研究中通过PCR技术对地衣型真菌的核rDNA特定片断进行RFLP分析以及对某些疑难种的核rDNA特定片断进行序列测定，并结合形态学，解剖学，化学与地理学等多性状的综合比较进一步阐述了石耳科地衣的科、属、种级的分类学综合概念。 4.郑儒永女，1931年 1月10日生。 研究员、中国科学院院士、博士生导师，系统真菌学专业 一贯致力于真菌分类系统的合理化与完善, 研究小煤炱、白粉菌和毛霉等类 真菌多年。对我国白粉菌目的有关属种以及全世界范围内白粉菌目的所有属的全 型进行了详尽的研究, 澄清和订正了许多国际上有争议的问题, 发表了一个较为 合理和接近自然的白粉菌科属级分类系统, 受到国际公认。1987年与其他人合作 并主写了我国的第一本真菌志《中国白粉菌志》。在分类难度很大的毛霉目研究 中, 注意将形态特征结合生理生化及分子生物学特性和将无性型特征结合有性型 特征并取得了一些有意义的突破。在医学毛霉和内生毛霉方面亦注意开展研究。 共著书10本(主作2本), 发表在国内外学术刊物上和全国会议及国际会议论文62 篇(主作48篇)。 5.方荣祥 院士 男，汉族 1946年1月19日出生于上海，籍贯 安徽省绩溪县 工作单位及地址 中国科学院微生物研究所 北京中关村 100080研究员、博士生导师 电话及传真 62548243 电子邮件 6.我们学校的院士 李季伦（），男，河北乐亭人，教授，1995年当选为中国科学院院士。 1948年毕业于南京中央大学理学院生物系，留校任教。1950年至今，历任中国农业大学助教、讲师、副教授、教授。1980-1982年在美国Wisconsin大学生化系进修。1989年至今任中国农业大学“农业生物技术国家重点实验室”学术委员会主任；1992年至今任中国科学院微生物研究所“微生物资源前期开发国家重点实验室”学术委员会主任。曾兼任国务院学位委员会学科评议组成员（1985-1991年）、农业部科学技术委员会委员（1983-1995年）、清华大学兼职教授（1994-1996年）、中国微生物学会理事长（1991-1995年）和名誉理事（1995年至今）、《微生物学报》主编（1991年至今） 、《农业生物技术学报》主编（中、英文版，2002年 至今）。 长期从事农业微生物的教学和研究，培养了大量专业人才，其中包括60多名研究生。出版译著8册，发表文章 一百二十余篇。与俞大绂教授合编的《微生物学》在我国微生物界有较大影响，获国家新闻出版署优秀科技图书一等奖（1998年）。 在基础科学研究方面：系统地研究了生物固氮的问题，取得以下成就：（1）在固氮酶催化机制的研究中，证明了固氮酶催化HD形成是固氮酶的普遍特性，而且是绝对依赖N2的；并提出了固氮酶的双位点放H2模式；（2）在固氮螺菌分子遗传学研究中，建立了我国巴西固氮螺菌Yu62菌株的基因文库，克隆和测序了该菌的ntrBC、draTG、nifA、glnB、glnZ和flbD等基因，并分析了它们的功能；构建了能节约玉米氮肥20%的耐铵固氮基因工程菌株；（3）启动了我国豆科植物根瘤菌资源调查和分类的研究，建立了我国根瘤菌资源数据库，为以后的研究奠定基础。 在应用研究方面：先后研制和开发了赤霉素GA3和GA4+7(可用于促进植物生长)、玉米赤霉烯酮和玉米赤霉醇（可用于促进牛、羊增重，并首先发现它们也是高等植物的一类天然激素）、莫能菌素和马杜霉素（可用于预防鸡球虫危害）、以及阿维菌素和伊维菌素（可用于防治动植物的寄生虫）等农牧用微生物制剂，取得了重大经济效益和社会效益。 曾获北京市优秀教育工作者（1986年）、五一劳动奖章（1986年）、全国农业劳动模范（1990年）等荣誉称号 ，自1991年起享受国务院颁发的政府特殊津贴。 7.我们学校的院士 陈文新，女，教授，博士生导师，中科院院士，国际根瘤菌/土壤杆菌分类分委会委员。1952年毕业于武汉大学农学院土壤农化学系。1958年获前苏联季米里亚捷夫农学院副博士学位。1959年1月回国后在北京农业大学(现中国农业大学)生物学院微生物学系工作至今,一直从事土壤微生物学与细菌分类学的教学和科学研究。自二十世纪70年代起，她主持研究我国根瘤菌资源调查与分类。在她卓越的领导下，组织全国20个单位的微生物学工作者，共同完成全国32个省（市）700多个县，不同生态条件下各种豆科植物根瘤菌资源调查，保藏根瘤菌5000多株；对其中2000株进行过100多项性状分析；发现一批抗逆性很强的根瘤菌种质资源；发表根瘤菌新属2个，新种12个，在国际根瘤菌属、种系统中占很大比重；从分类学角度获得豆科植物与根瘤菌共生关系的新认识；在国内外学术刊物上发表论文100多篇，其中近20篇被SCI收录，被引用200多次；培养硕士、博士50多人。她先后获农业部部级科技进步一等奖2项，获国家教委科技进步二等奖2项，获农业部优秀教材一等奖1项，2001年获国家自然科学二等奖1项。她的工作在国际上有较大影响，1996年当选为国际根瘤菌/土壤杆菌分类分委会委员, 1998年被邀与美国学者一道撰写“伯杰系统细菌学手册”第二版根瘤菌部分内容。现在她正热心于将优良豆科植物--根瘤菌共生体系引入我国西部大开发的农林牧业中而努力工作着。
2 刘琨 童张法 梁景,利用木薯淀粉渣和黄浆制取单细胞蛋白质饲料的实验研究,四川大学学报（工程科学版）增刊；VOL034NO；。3 刘琨，木薯淀粉渣的干燥特性探讨；广西大学学报（自然科学版）； ； 。4 刘琨，氢氧化铝薄层干燥的节能方法探索，<化工进展>，22，（8），2003。6 刘琨，《化工原理课程设计指导书》，广西大学立项编写教材。7 刘琨，《化工原理实验指导书》，广西大学立项编写教材。8 刘琨，《化工原理认识实习指导书》。9 刘琨，结合认识实习选题提高课程设计量；《广西大学学报》（哲社版）;;增刊。10 刘琨，康洪；木薯酒精临界含水量与干燥曲线，《化学工程》；EI已收录，;;1999。11 刘琨“化工原理实习与教学相互促进” 广西大学学报（增刊）；1997。12 刘琨，木薯淀粉废渣的利用；《中国饲料》；；199605。13 刘琨，康洪，木薯酒精机械脱水及干燥方法的研究；《广西大学学报》（自然版）；；199606。2021-2034，SCI已收录）16 刘琨、童张法，渗透汽化技术在液体分离中的新进展，现代化工，2005（7），18-21，EI已收录。17 唐伟琴、刘琨、潘东，干燥实验数据处理系统的开发，《化工装备技术》18 周小宁、姜霞、金相灿、刘琨，太湖梅梁湾沉积物磷的垂直分布及环保疏浚深度的推算，《中国环境科学》，EI收录19 龚旌、丁以细、刘琨，废动植物油生产生物柴油的工业化研究，《中国油脂》，EI收录20 刘琨、赖翠华、童张法，工业糖化酶固体发酵木薯渣制取单细胞蛋白饲料的研究，《高校化学工程学报》，EI收录21 刘琨、毛成波，中空纤维聚砜膜超滤技术纯化米醋的研究，《广西大学学报》，22 刘琨、杨超、邹昀，聚醚共聚乙酰胺（PEBA）膜的基本渗透汽化行为，《广西大学学报》，23 邹昀、杨超、刘琨、童张法，醋酸丁酯酯化反应体系组分PEBA膜中的吸附性能，《高校化学工程学报》，EI收录24 刘琨、杨超、陈松、邹昀，聚醚共聚乙酰胺（PEBA）膜的溶胀和渗透汽化行为研究，《高校化学工程学报》，EI收录25 刘琨、祖敏辉，PEBA/PVDF复合膜的溶胀及渗透汽化性能研究，《膜科学与技术》，26 刘琨、陈松，碳分子筛填充聚醚共聚乙酰胺膜渗透汽化分离水溶液中的醋酸正丁酯，《膜科学与技术》
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个人简介 姓名 *** 性别 男 出生年月 民族 汉 籍贯 湖北黄冈 政治面貌 中共党员 入学时间 1998年9月 毕业年月 2003年7月 学 院 农业工程与食品科学 研究方向 微生物与发酵
个人简历 1988年9月-1991年7月 湖北省麻城市三河口镇中学 1991年9月-1994年7月 湖北麻城市三河口镇职业高中 1994年9月-1998年7月 湖北农学院食品科学系（农业教育） 1998年9月-2003年7月 浙江大学食品科学系(硕士—博士学位)
奖励情况 1. 荣获2000-2001年度浙江大学研究生二等奖学金、三好研究生。 2．参加浙江大学“天堂硅谷”创业大赛“康宝”创业团队，聘为总经理 3．荣获1999-2000学年浙江大学优秀研究生 4．荣获2001-2002年度浙江大学研究生挂职锻炼优秀个人称号 5． 2001年7月-20012年7月浙江大学研究生挂职锻炼中担任桐庐县冠华兔业有限公司董事长助理一职，获合格证书 6．荣获1998年度湖北省高等学校优秀毕业生称号 7．1994-1998年连续四年荣获湖北农学院三好学生称号
综合素质 英语 CET-6，CET-4，GRE，德语基本口语 计算机 对计算机有浓厚的兴趣，能娴熟运用Office办公软件、AutoCAD，并能运用Dps、SAS统计软件等进行数据处理，熟悉网络、局域网的资源利用。
参与科研 1、 参与导师主持的浙江自然基金课题：《氧载体促进丝状真菌氧传递机理的研究》； 2、 参与课题“固定化酵母连续发酵动力学的研究”的部分研究工作； 3、 参与了“弹性蛋白酶的规模化产业化技术研究”课题； 6、 博士毕业论文为《产弹性蛋白酶菌株的分离、鉴定和发酵技术的研究，以及弹性蛋白酶的水解机理探讨》；
发表论文 现已在国家正式刊物上发表论文五篇； 1． 纳豆激酶的研究进展, 食品与发酵工业; 2001,11 2． 天然食品防腐剂的研究进展, 食品工业科技, 2001, 9 3． Optimization of culture medium composition of elastase producing strain Bacillus sp. EL31410 with response surface methodology, Enzyme Microbial and Technology, . 4． 糖化酶及其基因的研究进展, 微生物学杂志, 2000,6 5． 产弹性蛋白酶菌株的`筛选、鉴定及其产酶条件的初步研究，浙江大学学报（农业生物技术版），2002（已接受） 6．Elastase improved production by Bacillus —further Optimization and Kinetics Studies of Culture medium for Batch fermentation，Science of Zhejiang University(Engilish), 2003,1 7. Influence of medium components on elastase production using crude sources by Bacillus sp. EL31410, Biotechnology and Bioengineering, 2002(waiting for response)
学校工作 曾担任班长、学习委员、生活委员
社会实践 1999年7月 在钱江啤酒集团研究所参加“固定化酵母连续发酵动力学的研究”，熟悉啤酒生产工艺； 2000年6月 浙江大学研究生挂职锻炼中,在浙江温州一家私营企业担任总经理助理; 2001年7月-2002年7月 浙江大学研究生挂职锻炼中担任桐庐县冠华兔业有限公司董事长助理一职,获挂职锻炼优秀个人称号； 2001年10月 参加杭州-浙江大学联合推出的“天堂硅谷”创业大赛，作品《“康宝”健康品的产业化》闯入创业大赛复赛。
主要课程 博士主要课程 高级生物化学专题（含实验） 分子生物学 高级分子生物学专题（博士） 高级食品化学 食品微生物专题 发酵专题 食品工程进展 SAS实验设计和分析 Dps实验数据分析处理 发酵工程与设备 本科课程 生物化学 微生物学 药理学 药剂学 微生物制药学 生物制药学 生物工艺学 生化分离工程 微生物工程 生物工程导论 发酵设备 物理化学 有机化学 无机及分析化学 工程经济 数学建模
自我评价 本人性格开朗，充满自信，擅长交际，有较强的组织管理协调和综合分析能力；熟练掌握英语，有较强的英文写作和口头表达能力；平时学习注重知识的系统化，专业理论基础知识扎实，有很强的实验操作能力，完全有能力承担科研工作的筹备、策划、设计和运作。 欲在贵公司科研或其他部门从事具有挑战性的工作，能胜任一定的管理工作。
如今还健在的微生物界牛人 1.田波，男，1931年12月25日生于山东桓台县，中国科学院微生物研究所分子病毒学与生物工程研究室主任，研究员、院士、博士生导师，著名病毒学与生物工程专家 1954年8月 北京农业大学植保系毕业 1954年8月至1962年6月 中国科学院微生物所研究实习员, 1958年后任课题组长 1962年7月至1978年12月 中国科学院微生物所, 助研, 课题组长, 1977年后任研究室副主任 1979年1月至1986年4月 中国科学院微生物所, 副研, 研究室副主任, 1983年后任主任 1986年5月至1991年12月 中国科学院微生物所, 研究员, 博士生导师, 研究室主任 1991年12月至今 中国科学院院士, 研究员, 博士生导师, 研究室主任 对中国的植物病毒、类病毒和生物工程有系统的研究, 1983年首次报导了应用卫星RNA防治黄瓜花叶病毒获得成功。通过卫星RNA生防制剂和包括卫星 RNA 在内的多基因抗病遗传工程品种, 在田间大面积应用中获得良好的防病增产效果, 并提出了卫星RNA除抑制病毒复制之外的一种新的抗花叶病机理。他所领导的实验室在生物工程方面开展了核酶工程、随机序列多肽库、抗体基因工程、基因工程医药和植物基因工程等研究, 获得在体内高度抗病毒和类病毒的转基因作物; 构建了胞内和表位多肽库并筛选到用于亲合层析和抗病毒的一些多肽; 构建和表达了几种抗肿瘤的抗体基因; 研制成功数种基因工程药物; 在几种作物上用基因工程方法获得了雄性不育系和恢复系, 为杂种优势利用奠定了基础。 在国内外重要学术刊物上发表论文150多篇, 专著五种。 2.张树政，女，1922年10月22日生于河北束鹿县。现任中国科学院院士、微生物所研究员、博士生导师。 1942－1945 北京大学理学院化学系毕业，理学士； 1945－1946 北京大学理学院化学系助教； 1946－1948 北京大学医学院生化科助教； 1948－1949 北京大学理学院化学系助教； 1950－1954 重工业部综合工业试验所技师； 1954－1957 中国科学院菌种保藏委员会助理研究员； 1958－现在 历任中科院微生物所副研究员、研究员、博士生导师、酶学研究室副主任等职。 1991－现在 中国科学院院士 1992－现在 中国科学院生物学部常委 60年代初，在国内首先用纸电泳、酶谱和生长谱法分析比较了当时在酒精工业界有争议的不同种曲霉淀粉酶系的组成，确定了黑曲霉的优越性。60年代阐明了白地霉的戊糖代谢途径，发现白地霉中有甘露醇，查明了其合成途径。发现并纯化了NAP－甘露醇脱氢酶。70年代在国内首先建立了等电聚焦和聚丙烯酰胺凝胶电泳等新技术。在红曲霉糖化酶的研究中，首次得到该酶的结晶，并发现该酶的不同分子型存在构象差异，证明是糖基化程度不同引起的（现称为糖型）。80年代从事多种糖苷酶的应用和基础研究。如细菌(－淀粉酶高产菌株活力在国际上当时领先，果胶酶的应用，右旋糖酐酶已证明有防龋效果，产麦芽四糖的淀粉酶有工业化前景。首次发现了有严格底物专一性的(－D－岩藻糖苷酶，由嗜热菌纯化了5种酶。90年代在国内大力倡导糖生物学和糖工程前沿计划，并建立了糖工程实验室 。 3.魏江春男，1931年11月11日生。研究员、博士生导师、中国科学院院士 自1963年以来一直从事中国地衣区系与分类研究，同时对世界范围石耳科 (Umbilicariaceae)地衣进行了比较系统的研究。先后组织并参加了国家基金委、国家科委和中科院联合资助的重大项目中的三级课题《中国地衣志－石蕊科》，基金委资助的《用地衣进行北京地区大气质量评定的研究》及《世界范围石耳科地衣的综合研究》，中科院重大项目中的三级课题《西藏地衣研究》以及国家85攻关《南极菲尔德斯半岛生态系统的研究》中的《陆地生态系统的研究》。此外，还对中国地衣文献资料进行了整理与分析，对一些地衣类群，如袋衣科，肺衣科，地卷科，茶渍科等进行了初步研究。当前正在主持并参加由基金委、中科院和真菌地衣系统学开放实验室资助的中美合作项目《东亚－北美地衣型与非地衣型真菌的间断分布及其遗传趋异性研究》。自1990年以来，将注意力逐渐集中于地衣表型与基因型相结合的综合研究方面。在石耳科研究中通过PCR技术对地衣型真菌的核rDNA特定片断进行RFLP分析以及对某些疑难种的核rDNA特定片断进行序列测定，并结合形态学，解剖学，化学与地理学等多性状的综合比较进一步阐述了石耳科地衣的科、属、种级的分类学综合概念。 4.郑儒永女，1931年 1月10日生。 研究员、中国科学院院士、博士生导师，系统真菌学专业 一贯致力于真菌分类系统的合理化与完善, 研究小煤炱、白粉菌和毛霉等类 真菌多年。对我国白粉菌目的有关属种以及全世界范围内白粉菌目的所有属的全 型进行了详尽的研究, 澄清和订正了许多国际上有争议的问题, 发表了一个较为 合理和接近自然的白粉菌科属级分类系统, 受到国际公认。1987年与其他人合作 并主写了我国的第一本真菌志《中国白粉菌志》。在分类难度很大的毛霉目研究 中, 注意将形态特征结合生理生化及分子生物学特性和将无性型特征结合有性型 特征并取得了一些有意义的突破。在医学毛霉和内生毛霉方面亦注意开展研究。 共著书10本(主作2本), 发表在国内外学术刊物上和全国会议及国际会议论文62 篇(主作48篇)。 5.方荣祥 院士 男，汉族 1946年1月19日出生于上海，籍贯 安徽省绩溪县 工作单位及地址 中国科学院微生物研究所 北京中关村 100080研究员、博士生导师 电话及传真 62548243 电子邮件 6.我们学校的院士 李季伦（），男，河北乐亭人，教授，1995年当选为中国科学院院士。 1948年毕业于南京中央大学理学院生物系，留校任教。1950年至今，历任中国农业大学助教、讲师、副教授、教授。1980-1982年在美国Wisconsin大学生化系进修。1989年至今任中国农业大学“农业生物技术国家重点实验室”学术委员会主任；1992年至今任中国科学院微生物研究所“微生物资源前期开发国家重点实验室”学术委员会主任。曾兼任国务院学位委员会学科评议组成员（1985-1991年）、农业部科学技术委员会委员（1983-1995年）、清华大学兼职教授（1994-1996年）、中国微生物学会理事长（1991-1995年）和名誉理事（1995年至今）、《微生物学报》主编（1991年至今） 、《农业生物技术学报》主编（中、英文版，2002年 至今）。 长期从事农业微生物的教学和研究，培养了大量专业人才，其中包括60多名研究生。出版译著8册，发表文章 一百二十余篇。与俞大绂教授合编的《微生物学》在我国微生物界有较大影响，获国家新闻出版署优秀科技图书一等奖（1998年）。 在基础科学研究方面：系统地研究了生物固氮的问题，取得以下成就：（1）在固氮酶催化机制的研究中，证明了固氮酶催化HD形成是固氮酶的普遍特性，而且是绝对依赖N2的；并提出了固氮酶的双位点放H2模式；（2）在固氮螺菌分子遗传学研究中，建立了我国巴西固氮螺菌Yu62菌株的基因文库，克隆和测序了该菌的ntrBC、draTG、nifA、glnB、glnZ和flbD等基因，并分析了它们的功能；构建了能节约玉米氮肥20%的耐铵固氮基因工程菌株；（3）启动了我国豆科植物根瘤菌资源调查和分类的研究，建立了我国根瘤菌资源数据库，为以后的研究奠定基础。 在应用研究方面：先后研制和开发了赤霉素GA3和GA4+7(可用于促进植物生长)、玉米赤霉烯酮和玉米赤霉醇（可用于促进牛、羊增重，并首先发现它们也是高等植物的一类天然激素）、莫能菌素和马杜霉素（可用于预防鸡球虫危害）、以及阿维菌素和伊维菌素（可用于防治动植物的寄生虫）等农牧用微生物制剂，取得了重大经济效益和社会效益。 曾获北京市优秀教育工作者（1986年）、五一劳动奖章（1986年）、全国农业劳动模范（1990年）等荣誉称号 ，自1991年起享受国务院颁发的政府特殊津贴。 7.我们学校的院士 陈文新，女，教授，博士生导师，中科院院士，国际根瘤菌/土壤杆菌分类分委会委员。1952年毕业于武汉大学农学院土壤农化学系。1958年获前苏联季米里亚捷夫农学院副博士学位。1959年1月回国后在北京农业大学(现中国农业大学)生物学院微生物学系工作至今,一直从事土壤微生物学与细菌分类学的教学和科学研究。自二十世纪70年代起，她主持研究我国根瘤菌资源调查与分类。在她卓越的领导下，组织全国20个单位的微生物学工作者，共同完成全国32个省（市）700多个县，不同生态条件下各种豆科植物根瘤菌资源调查，保藏根瘤菌5000多株；对其中2000株进行过100多项性状分析；发现一批抗逆性很强的根瘤菌种质资源；发表根瘤菌新属2个，新种12个，在国际根瘤菌属、种系统中占很大比重；从分类学角度获得豆科植物与根瘤菌共生关系的新认识；在国内外学术刊物上发表论文100多篇，其中近20篇被SCI收录，被引用200多次；培养硕士、博士50多人。她先后获农业部部级科技进步一等奖2项，获国家教委科技进步二等奖2项，获农业部优秀教材一等奖1项，2001年获国家自然科学二等奖1项。她的工作在国际上有较大影响，1996年当选为国际根瘤菌/土壤杆菌分类分委会委员, 1998年被邀与美国学者一道撰写“伯杰系统细菌学手册”第二版根瘤菌部分内容。现在她正热心于将优良豆科植物--根瘤菌共生体系引入我国西部大开发的农林牧业中而努力工作着。
我们所-中国科学院南京地理与湖泊研究所的导师：1. 孔繁翔..... 男， 1957 年生，教授， 博士生导师 专业及研究方向： 湖泊生态学，环境生物学，生态毒理学 电子信箱：， 简历： 江苏海安县人， 1982 年南京大学生物学系毕业，获学士学位。 1987 年在中国科学院水生生物研究所获硕士学位。 1987 年后历任南京大学环境学院讲师，、副教授和教授。 1996 年起任南京大学环境学院副院长。曾任国家教育部环境科学教学指导委员会环境生物学专业委员会秘书。 2002 年入选中国科学院“百人计划”，到中科院南京地理与湖泊研究所太湖湖泊生态系统研究站工作，现任中科院湖泊沉积与环境重点实验室副主任。现为中国生态学会污染生态学专业委员会副主任。主编专著《环境生物学》、共同主编《生态毒理学》和《环境科学与工程应用辞典》副主编，参加编写《生态学》，发表论文 50 多篇，其 SCI 论文 20 篇。作为主持人， 2000 年获江苏省高等教育成果奖一等奖。 2.高光..... 男，1964年6月生，理学博士，副研究员 专业及研究方向：微生物学、湖沼学、湖泊微生物生态学 电子信箱： 简历： 1987年毕业于厦门大学生物系微生物学专业，获学士学位；1993年在中国科学院南京地理与湖泊研究所，环境生态学方向毕业，获理学硕士学位。1987进入中国科学院南京地理与湖泊研究所工作，1998被聘为副研究员。主要的研究方向：湖泊微生物生态学，尤其是微食物网的结构、功能及其在湖泊物质循环过程中的作用的研究。目前主要围绕着浅水湖泊富营养化机理及生态系统对富营养化的响应、蓝藻水华暴发机制等，研究磷在湖泊环境各介质中的分布、有效利用形式、迁移转化的途径、速率、影响因子、以及微生物、酶等在此过程中的作用等。 3. 吴庆龙.......... 男， 1967 年生，副研究员， 硕士生导师 专业及研究方向： 微生物分子生态学、环境微生物学、湖沼学、恢复生态学等 电子信箱： 简历： 江苏六合县人， 1996 年毕业于南京大学，获理学硕士学位，方向为环境生物学； 2002 年毕业于中国科学院研究生院，获理学博士学位，方向为湖泊生态学； 2005 年毕业于奥地利萨尔斯堡大学，获自然科学博士，方向为微生物（分子）生态学。 1987 年以来在中国科学院南京地理与湖泊研究所先后任职实习研究员、助理研究员和副研究员， 2005 年 3-12 月兼任奥地利科学院湖沼学研究所客座研究人员。研究兴趣主要包括水域微生物分子生态学、环境微生物学、湖泊生态学及恢复生态学。在应用与环境微生物学（美国）等国内外核心期刊上发表论文 50 余篇，其中 SCI 源刊物上的论文 10 余篇，并被引用 40 多次。作为主要研究人员，曾获得农业部科技进步二等奖。与欧洲的相关研究机构保持良好的合作关系， 1999 年以来先后多次赴奥地利、德国、捷克、荷兰等国家进行学术交流和访问，现为美国海洋湖沼学会、美国微生物学会和国际微生物生态学会的会员，并参与应用与环境微生物学（美国）等学术期刊稿件的审阅。
药学毕业论文开题报告篇3 题 目 名 称： 番泻叶对小鼠尿量的影响 研究现状： 一、普鲁兰酶 普鲁兰酶(Pullulanase，. 2. 1. 41)是一种能够专一性切开支链淀粉分支点中的α糖苷键，从而剪下整个侧枝，形成直链淀粉的脱支酶。普鲁兰酶还可以分解普鲁兰多糖，普鲁兰酶来源于微生物，R-酶则来源于植物。普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气气杆菌Aerobacter. aerogenes}(典型菌为肺炎克雷伯氏杆)发酵获得，他们报道了该酶良好的酶学性能。之后，各国的科研人员经过广泛深入研究，从不同的地区、微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。 在淀粉加工工业中，α淀粉酶最为常用，它的功能是水解淀粉的α-1,4糖苷键，单独用它时，产物中含有大量分支结构的糊精，其中就含有大量的α-1,6糖苷键。假如不把淀粉的α-1,6糖苷键彻底分解的话，势必会造成很大的浪费。自然界中，存在有能分解淀粉的α-1,6糖苷键的酶，通称为解支酶。如寡α-1,6葡萄糖苷酶( , Oligo-l,6-glucosidase )，普鲁兰酶( )，异淀粉酶( , Isoamylose )，支链淀粉一6-葡聚糖酶( )，其中普鲁兰酶要求的底物分子结构最小，故而可以将最小单位的支链分解，导致可以最大限度的利用淀粉，所以在淀粉加工工业中有着重要的用途和良好的市场前景。故而许多国家都争相开发，但是到现在为止，只有丹麦的NOVO公司具有普鲁兰酶的生产能力。我国只有向其进口，但是其价格昂贵，限制了普鲁兰酶在我国的应用。其实，我国早在七十年代就开发普鲁兰酶的产生菌，但是该菌的酶学性质不适合生产，至今我国在普鲁兰酶的国产化方面还没有报道。 在淀粉的加工行业上，对普鲁兰酶的酶学性质的要求是耐酸耐热，其原因是因为通常使用外加酶化法，由于所用酶类的限制，普鲁兰酶的添加可以在两步反应的任何一步，但必须满足上述的反应的条件。因此所开发的普鲁兰酶的酶学性质必须满足现有的酶法水解制糖的条件，也就是耐酸耐热。 二、普鲁兰酶的研究现状 1.产普鲁兰酶的微生物 普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气杆菌(Aerobacter aerogenes)发酵获得。他们报道了该酶的良好性能之后，各国的科研人员经过广泛深入的研究，从不同的地区的微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。但是迄今为止，尽管发现许多微生物能够产普鲁兰酶，但是由于当今工业生产条件(酸性，温度)，大多数微生物所产的普鲁兰酶并无商业价值。以下便介绍一下普鲁兰酶的生产菌种。 蜡状芽抱杆菌覃状变种(Bacillus cereus ) 由日本的ToshiyukiTakasaki于1975年发现。该菌同时产生两种淀粉酶:β-淀粉酶和普鲁兰酶。最佳作用条件为pH6～，温度50℃，最大转化率(淀粉水解产生麦芽糖)大约为95%.酶学研究中发现，此酶在pH5，温度60℃依然保持大部分活性，该菌的营养细胞呈棒杆状，聚集成长短不等紊乱链状，无运动性，格兰氏阳性，产芽抱时细胞无明显膨胀。该菌最适生长温度30℃～37℃ ,最高生长温度在41℃～45℃，可以利用葡萄糖，甘露糖，麦芽糖，海藻糖，淀粉和糖原。 嗜酸性分解普鲁兰多糖芽抱杆菌() 上世纪八十年代初，丹麦Novo公司获得此菌，此菌所生产的普鲁兰酶耐热 (60℃)，耐酸()。该公司经过投入巨资开发研究，1983年Nov。公司在日本和欧洲市场同时商业化销售，商品名Prornozyme。如今，它是应用最广，产量最大的普鲁兰酶。呈棒状，深层发酵几小时后，可观察到类原生质体的膨胀细胞，较稳定，饱子呈圆柱体或椭圆体。格兰氏反应阳性，37℃生长良好，45℃以上和pI-1高于以上不长，在以普鲁兰糖为碳源的培养基(( ～)上生长良好。 枯草芽饱杆菌(Bacillus subtilis) 1986年，日本的Yushiyuki Takasaki报道了一株能产生耐热耐酸普鲁兰酶的菌种，被命名为Bacillus subtilis TU。此菌种所产生的酶为普鲁兰酶和淀粉酶的混合物，可水解淀粉为麦芽三糖和麦芽搪.水解普鲁兰糖为麦芽三糖，其中普鲁兰酶最佳作用pH为～，但在时亦有约50%的酶活，此普鲁兰酶最佳作用温度60℃。 耐热产硫梭菌(Clostridum Themosulfurogenes) 1987年.德国的等报道了一株能同时产a淀粉酶、普鲁兰酶和葡萄糖淀粉酶的菌种:耐热产硫梭菌。该菌种所产普鲁兰酶有较广的温度适应范围(40℃～85℃)，在～有较高的活性，在如此广的范围内都有较强活力无疑将扩大该普鲁兰酶的应用领域. Bacillusnaganoensis,Bacillus deramificans, 上世纪九十年代，Deweer发现了普鲁兰酶产生菌Bacillus naganoensis;Tomimura筛选出Bacillus deramifrcans。这两株菌所产的普鲁兰酶的酶学性质与Bacillus. Acidopullulyticus的酶学性质相似。这两株菌都是中度嗜酸菌，在以上就不生长，温度超过45℃以上同样也不生长。这两株普鲁兰酶产生菌的发现，进一步拓宽了普鲁兰酶的应用。 产普鲁兰酶的高温菌菌种 自上世纪八十年代以来，人们逐渐意识到在通常的自然条件下，很难筛选得到极端耐热的普鲁兰酶生产菌种，于是各国的科学家便把目光转移到温泉嗜高温细菌的筛选，而且现在已经取得较多的成果。Bacillus如vorcaldarius所产普鲁兰酶的最适温度和pH分别是75～85℃, , Thermotoga maritime的最适温度和pH分别是90℃, , Thermurs caldopHilus的最适温度和pH分别是75℃,, Fenidobacterion pernnavoran最适温度和pH分别是80～85℃, 2.普鲁兰酶的分子结构 至今为止，许多普鲁兰酶的基因己经被克隆，但是还没有见到任何有关普鲁兰酶结构的报道，但是在根据序列相似性对糖普键水解酶的分类，普鲁兰酶属于第13家族，α淀粉酶家族，这个家族中包含了30多种酶，可以分为水解酶，转移酶。异构酶三大类。这些酶能够水解和合成α～,α～,α～,α～,α～,α～糖苷键。其中很多酶的结构已经被报道，它们都采取了(β/α)8的结构，通过生物信息学的研究，这个家族的蛋白都有一个共同的结构，酶的活性中心都是(β/α)8折叠筒的结构，命名为结构域A。第13家族的大多数酶还具有结构域B，它是位于(β/α)8折叠筒中，第三个β片层与第三个α螺旋之间的一段序列，其特点是结构和长度差异较大，推测其功能是与底物的结合有关。在紧接着(β/α)8折叠筒后，还有C结构域，紧接C结构域，部分家族成员还有结构域D。 3.普鲁兰酶的应用 普鲁兰酶，在食品工业中是一种用途广泛的酶制剂和加工助剂。它能专一性分解淀粉中的支链淀粉和糖原分子及其衍生的低聚糖分支中的α～l, 6糖苷键，使分支结构断裂，形成长短不一的直链淀粉。因此，将该酶与 其它 淀粉酶配合使用时，可使淀粉糖化完全。近年来，普鲁兰酶己作为淀粉酶类中的一个新酶种，应用于淀粉为原料的食品等工业部门，在食品工业中有如下几方面的作用: 单独使用普鲁兰酶，使支链淀粉变为直链淀粉 直链淀粉具有凝结成块，易形成结构稳定的凝胶的特性，因此，可作为强韧的食品包装薄膜。这种薄膜对氧和油脂有良好的隔绝性，又因涂布开展性好，故适合于作为食品的保护层。它还适合于淀粉软糖制造，也可用作果酱增稠剂，用于装油脂含量高的食品，以防止油的渗出以及肉食品加工。近年来在食品工业中提倡使用可被生物降解的薄膜，直链淀粉在这些方面具有较大的发展前途。豆类直链淀粉含量较高，因此绿豆淀粉制成的粉丝韧性比其它淀粉好，如果用普鲁兰酶处理谷物淀粉，再制成直链淀粉后，可以制成高质量的粉丝。一般谷物淀粉中，直链淀粉含量仅占20%，支链淀粉含量约为80%。工业上每生产1吨直链淀粉就有4吨副产品的支链淀粉。美国虽然通过遗传育种的方法.得到含直链淀粉60%玉米新品种，但不大适于大量生产。国外已采用普鲁兰酶改变淀粉结构，可使支链淀粉变为直链淀粉。据报道，采用此法收率可达100%.制造直链淀粉的方法为，先采用普鲁兰酶分解经液化的分支部分，使其转变为直链淀粉，并以丁醇或缓慢冷却法沉淀淀粉。再回收含少量水分的晶型沉淀物，最后通过低温喷雾干燥法制成粉状的直链淀粉。 普鲁兰酶与β～淀粉酶配合使用生产麦芽搪 饴糖是我国传统的淀粉糖产品，其中所含部分麦芽糖，广泛用于糖果、糕点等食品工业。目前生产方法是以α～淀粉酶进行液化，再用β～淀粉酶水解支链淀粉，这样只能水解侧链部分。接近交叉地位的α～糖苷键时，水解反应停止。但如果使用普鲁兰酶共同水解，便能使分支断裂，提高淀粉酶水解程度，降低了β极限糊精的含量，大大提高了麦芽糖的产率，有利于生产麦芽搪浆。目前对加普鲁兰酶进行糖化己作了较大规模的试验。 试验条件为。每批投料量约为900公斤碎米，粉浆浓度为15～16Be°数皮用量(对碎米计)，β～淀粉酶活性2,000单位/克以上，;普鲁兰酶活性45,000～55,0 00单位/克，系由产气气杆菌生产，每批用量为1公斤。试验结果表明，加入普鲁兰酶糖化的试验糖与对照糖品相比，还原糖平均增加，麦芽糖含量平均增加了，糊精含量平均减少了高浓度麦芽糖浆较之高浓度葡萄搪浆，具有不易结晶，吸湿性小的特点，所以高浓度麦芽糖浆在食品工业中有着广泛的用途。采用普鲁兰酶与p一淀粉酶配合使用，成本低廉，麦芽糖收率达到70%左右，其至更高。 用于啤酒外加酶法糖化 啤酒生产中麦芽，既是酿造啤酒的主要原料，也为酿造过程提供了丰富的酶源。在啤酒酿造的糖化过程中，麦芽中分解淀粉的主要酶是α～淀粉酶、β～淀粉酶和分解淀粉α～1. 6糖瞥键的R一酶(植物普鲁兰酶或植物茁霉多糖酶)。β～淀粉酶与另两种淀粉酶协同作用，可使淀粉分解成麦芽糖(也包括少量的麦芽三糖和极少量的葡萄糖)和低分子糊精。使麦芽汁有比较理想的糖类组成。在工业生产中为了节约麦芽用量，采用所谓外加酶法糖化，即在减少麦芽用量的前提下，增加淀粉质辅助原料的比率，并加入适当种类的酶制剂进行搪化。要使大麦及其它辅助原料糖化完全，需要外加a一淀粉酶和分解α～糖苷键的普鲁兰酶制剂等。单独使用a一淀粉酶时产生麦芽糖和麦芽三搪是很不完全的。假如分解淀粉α～糖苷键的酶活性不足，淀粉分解就不完全，其结果是可发酵性糖含量低，制成的啤酒发酵度达不到要求。若采用能分解α～和α～糖苷键的糖化型淀粉酶，则其反应产物为葡萄糖，容易使酒味淡薄。采用普鲁兰酶与α～淀粉酶协同，效果良好，其分解产物主要是麦芽糖和少量的麦芽多糖。采用外加酶法糖化时，加入酶制剂的用量为:淀粉酶6～7单位/克大麦及大米:蛋白酶，60-80单位/克，并配合以菠萝蛋白酶10ppm，普鲁兰酶50单位/克大麦。以上三种酶制剂均添加于糖化或酒化开始。 总之，普鲁兰酶无论作为酶制剂和食品工业的加工助剂均有广阔的发展前途。 研究目的和意义： 酶制剂工业是上世纪七十年代就己经形成的一个重要的产业，目前世界酶制剂总产值达100亿美元，我国的产值约为100亿人民币，并且随着其应用领域的不断扩大以及新酶种的开发，这一市场正在迅猛发展。但是全球酶制剂产业几乎被几家外国公司所垄断，其中丹麦的NOVO公司几乎占全球总销售额的一半。本研究对普鲁兰酶的开发，对酶制剂产业的发展有重要的意义。 其次我国自从七十年代开始便对普鲁兰酶进行研究开发，但是所开发得到的普鲁兰酶，既不耐热也不耐酸，这就使其在工业化应用中受到了局限。为了改变我国对进口产品的依赖，填补我国这一领域的空白，寻找一条国产化的道路，本研究的目的是利用自然微生物资源，普鲁兰酶，提高我国淀粉原料的利用率，从而提高整个淀粉加工行业的生产率，这对我国淀粉加工产业的意义是不言而喻的。 研究内容(内容、结构框架以及重点、难点)： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集; (2)菌种初筛; (3)菌种复筛; (4)菌种保藏方法; (5)酶活力测定方法的建立。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响; (2)初始PH对发酵产酶的影响; (3)接种量对发酵产酶的影响; (4)发酵温度对产酶的影响; (5)金属离子对产酶的影响。 重点或关键技术： (1)纯菌株的分离; (2)菌株的鉴定方法的选择。 研究方法、手段： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集：选择适合产生的地点(面粉厂.菜地.果园等)采集土样 (2)菌种初筛：在采集的土样用无菌水稀释后，在含有淀粉类的培养基中做平板涂步， 37℃培养48h后，用碘液进行显色反应，将有淀粉酶产生的菌落接于斜面中保存。 (3)菌种复筛：将前期分离的能产生淀粉酶的菌株涂步于普鲁兰糖平板上，37℃培养48h后用95%乙醇进行透明圈实验。有透明圈产生说明菌株产生普鲁兰酶，将产生透明圈的菌落挑于斜面培养基培养。 (4)菌种保藏方法： 采用4℃低温保藏。 (5)酶活力测定方法的建立：采用发酵培养液经过离心后利用DNS显色法 520nm测定吸光值，测定标准葡萄糖标准曲线，利用标准曲线计算普鲁兰酶酶活大小。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响：采用不同碳源，氮源培养基培养一段时间，测定酶活力。(其他条件相同：接种量，装瓶量，初始PH值，转速，培养时间。) (2)初始PH对发酵产酶的影响：采用相同发酵培养基，在不同初始PH下接种等量种子液。在相同条件下培养，测定发酵液的酶活。(其他条件相同：接种量，装瓶量，转速，最佳培养温度，最佳培养时间。) (3)接种量对发酵产酶的影响：在发酵培养基中分别接入2%，4%，6%，8%， 10%，14%，18%的种子培养液于最佳碳源，氮源，最佳初始PH的培养基中，在相同条件下培养，分别检测酶活。(采用以上确定的最佳碳源，氮源，最佳初始PH。) (4)发酵温度对产酶的影响：采用相同培养基，在不同温度下(25℃，30℃，35℃，40℃，45℃)培养一定时间，测定酶活力。 (5)金属离子对产酶的影响：在基础培养基中加入少量不同金属离子，发酵后测酶活。(金属离子有： 锰离子，钙离子，锌离子，镁离子，铁离子，铜离子。) 研究进度 ：完成项目总体进度30%，样品土样的采集及前期的准备工作,菌株的初筛，包括(样品土样原液的涂步培养及摇床培养，产支链淀粉酶菌株的挑选及斜面培养)。 ：完成项目总体进度50%,菌株的复筛，包括(产普鲁兰酶菌株的筛选及斜面培养),葡萄糖标准曲线的测定,酶活测定方法的建立,并以酶活大小对菌株进行再次筛选。 ：完成项目总体进度80%,产酶条件的研究。包括：碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。并通过各中单因素试验确定发酵培养基的最佳碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。 2009、4—2009、5 ：完成项目总体进度100%,课题总结，撰写论文。 文献综述(包括：国内外研究理论、研究方法、进展情况、存在问题、参考依据等) 自从1961年Bender H.等人在研究一株产气气杆菌Aerobacter aerogenes(典型菌为肺炎克雷伯氏杆菌)时首次发现普鲁兰酶后，国际上对产生这种酶的微生物进行了广泛研究，发现许多微生物可以产生此酶，并筛选出一些适用于工业化生产的优良菌株。随着该酶的应用发展，对耐热性普鲁兰酶的研究也逐渐增多，已成功克隆并表达了该酶的基因。国内1976年开始对一株产气气杆菌(Aerobacteraerogenes 10016)的普鲁兰酶进行研究，对该菌株的产酶条件、酶的分离提取及酶学性质作了报道，并研究了该酶的食品级提取技术。此外，陈朝银、刘涛等人从云南温泉水样中筛选到一株产普鲁兰酶高温栖热菌菌株，通过诱导等实验将该酶的酶活从提高到170u/mL，酶产量提高了近2500倍左右，酶的最适作用温度及pH分别是75℃和，具有一定的耐热和耐酸特性。 陈金全等从温泉水样中筛选到一株产耐热耐酸普鲁兰酶的野生菌株，并根据形态、生理生化特征、细胞化学组分分析及16SrDNA序列比对、基因组DNA的G+C摩尔百分含量、同源性比对等实验，鉴定其为脂环酸芽抱杆菌属(Alicyclobacillus)的一个新种，所产酶最适作用温度为60℃，最适pH值，具有较好的耐热耐酸特性。杨云娟等利用毕赤酵母成功构建了普鲁兰酶表达量较高的基因工程菌，摇瓶发酵酶活可达，最佳发酵条件下产量可达 .酶的最适作用温度为600C，最适pH值，具有较好的耐热耐酸性。目前我国仍没有具备独立生产普鲁兰酶能力的厂商，要实现低成本、国产化的生产，还有很长的路要走。 技术应用于耐热脱支酶的研究，使耐热异淀粉酶的研究有了很大发展。Coleman等人将嗜热厌氧菌T. brockii普鲁兰酶基因克隆到中得到的克隆子分泌的普鲁兰酶数量高于出发菌株，Okada等人将Bacillus Steanther, onhiu:中编码热稳定异淀粉酶的基因克隆到:中，得到的转化菌株其异淀粉酶能在60 ℃稳定15分钟。Burchadf将。ostridium thermosulf urogenes DSM38%的嗜热异淀粉酶基因克隆并在中表达，所得酶的最适pH和最适温度与出发菌相同，而且在高温下仍能保持活性.Antranikiam等人将Pyrococcus舟riousous的异淀粉酶基因克隆到中并分离得到了酶蛋白。尽管如此，目前尚未有已将转基因的耐热性异淀粉酶工程菌应用到工业生产中的报道。众所周知，利用物理和化学诱变剂单独或复合处理微生物细胞是选育高产变种菌株行之有效的经典方法，它在为培育多种抗生素、氨基酸、核苷酸激酶(尤其是蛋白酶和淀粉酶)的高产变种菌株方面曾经起过极为重要的作用，至今仍然是方便易行和行之有效的方法之一。 主要参考文献： [1][美]惠斯特勒等编王雏文等译.淀粉的化学与工艺学[M].北京：中国食品出版社，1988 [2]张树政.酶制剂工业[M]. 北京: 科学出版社，1998 [3]邬显章.酶的工业生产技术[M]. 吉林: 吉林科学技术出版社，1988 [4]Taniguchi H, Sakano Y, Ohnishi M, Okada G(1985) Pullulanase[J].TanpakushitsuKakusan Koso. Ju1;30(8):989-992. Japanese [5] Jensen, B. F., and B. E. Norman. 1984. Bacillus acidopullulyticus pullulanase[J].:application and regulatory aspects for use in the food industry. Process [6]Tomimura E, Zeman NW, Frankiewicz JR, Teague WM. [J]. Description of Bacillus naganoensis sp. J Syst Bacteriol. I 990 Apr; 40(2):123-125 [7]吴燕萍，等. 微生物法生产普鲁兰酶的研究[J]. 生物学技术, 2003，8(6)：14-17 [8]金其荣，等. 普鲁兰酶初步研究[J]. 微生物学通报, 2001，28(1):39-43 [9]程池. 普鲁兰酶Promozyme 200L. 及其生产菌种[J].食品与发酵工业，1992 ，(6) [10]唐宝英等.耐酸耐热普鲁兰酶菌株的筛选及发酵条件的研究[J].微生物学通报，2001 28(1):39-43 猜你喜欢： 1. 关于医学开题报告范文 2. 药学论文开题报告 3. 生物制药毕业论文开题报告范文 4. 药理学开题报告范文 5. 药品市场营销毕业论文开题报告 6. 药学论文题目大全
yí dàn bái méi
parenzyme [朗道汉英字典]
TPS,trypase,trypsase,trypsin,trypsinase,tryptar,trypure [湘雅医学专业词典]
胰蛋白酶是胰腺分泌的一种水解酶。能水解由肽链相连的氨基酸类化合物，具有酯酶活性。正常血清中含量甚微。测定血清胰蛋白酶对诊断急性胰腺炎有一定意义。
胰蛋白酶
血液生化检查 > 酶类测定
同酶速率法测定。
同酶速率法测定。
同酶速率法测定。
（1）RIA法：阴性。
（2）酶速率法（37℃）：十二指肠液：150～600μg/ml
（1）升高：急性胰腺炎、慢性胰腺炎（复发期）、胰腺癌、肾功能不全等。
（2）降低：胰腺外分泌功能不全（慢性胰腺炎后期）。
急性胰腺炎时血清胰蛋白酶可上升至正常人的2～400倍，一般在10～15天恢复正常。
急性胰腺炎、慢性胰腺炎、胰腺癌
胰蛋白酶
Yidanbaimei
Trypsin
本品系自猪、羊或牛胰中提取的蛋白分解酶。按干燥品计算，每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500单位。
本品应从检疫合格的牛、羊或猪胰中提取，生产过程应符合现行版《药品生产质量管理规范》的要求。
本品为白色或类白色结晶性粉末。
取本品约2mg，置白色点滴板上，加对甲苯磺酰L精氨酸甲酯盐酸盐试液,搅匀，即显紫色。
取本品，加水溶解并制成每1ml中含2mg的溶液，依法测定（2010年版药典二部附录Ⅵ H），pH值应为～。
取本品，加氯化钠溶液溶解并制成每1ml中含10mg的溶液，依法检查（2010年版药典二部附录Ⅸ B），溶液应澄清。
取N乙酰L酪氨酸乙酯，置100ml量瓶中，加磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾溶液与磷酸氢二钠溶液，混合，pH值为）50ml，温热使溶解，冷却后再稀释至刻度，摇匀。冰冻保存，但不得反复冻融。
取本品适量，精密称定，加盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含的溶液。
取底物溶液、盐酸溶液与上述磷酸盐缓冲液（pH ）1ml，混匀，作为空白。取供试品溶液与底物溶液（预热至25℃±℃），立即计时并摇匀，使比色池内的温度保持在25℃±℃，照紫外－可见分光光度法（2010年版药典二部附录Ⅳ A），在237nm的波长处，每隔30秒读取吸光度，共5分钟，每30秒钟吸光度的变化率应恒定，且恒定时间不得少于3分钟。以吸光度为纵坐标，时间为横坐标，作图，取在3分钟内成直线部分的吸光度，按下式计算。
式中 P为每2500胰蛋白酶单位中含糜蛋白酶的量，单位；
A2为直线上开始的吸光度；
A1为直线上终止的吸光度；
T为A2至A1读数的时间，分；
W为测定液中含供试品的量，mg;
为在上述条件下，吸光度每分钟改变，即相当于1个糜蛋白酶单位。
每2500单位胰蛋白酶中不得多于50单位的糜蛋白酶。
取本品适量，以五氧化二磷为干燥剂，在60℃减压干燥4小时，减失重量不得过（2010年版药典二部附录Ⅷ L）。
取N苯甲酰L精氨酸乙酯盐酸盐，加水溶解使成100ml，作为底物原液；取10ml，用磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾溶液13ml与磷酸氢二钠溶液87ml混合，pH值为）稀释成100ml，照紫外－可见分光光度法（2010年版药典二部附录Ⅳ A），恒温于℃±℃，以水作空白，在253nm的波长处测定吸光度，必要时可用上述底物原液或磷酸盐缓冲液调节，使吸光度在～之间，作为底物溶液。制成后应在2小时内使用。
精密称取本品适量，加盐酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中含50～60胰蛋白酶单位的溶液。
取底物溶液，加盐酸溶液200μl，混匀，作为空白。另取供试品溶液200μl，加底物溶液（恒温于℃±℃），立即计时，混匀，使比色池内的温度保持在25℃±℃，照紫外－可见分光光度法（2010年版药典二部附录Ⅳ A），在253nm的波长处，每隔30秒钟读取吸光度，共5分钟。以吸光度为纵坐标，时间为横坐标，作图；每30秒钟吸光度的改变应恒定在～之间，呈线性关系的时间不得少于3分钟。若不符合上述要求，应调整供试品溶液的浓度，再作测定。在上述吸光度对时间的关系图中，取成直线部分的吸光度，按下式计算：
式中P为每1mg供试品中含胰蛋白酶的量，单位；
A1为直线上终止的吸光度；
A2为直线上开始的吸光度；
T为A1至A2读数的时间，分；
W为测定液中含供试品的量，mg；
为在上述条件下，吸光度每分钟改变，即相当于1个胰蛋白酶单位。
蛋白分解酶。
遮光，密封，在阴凉干燥处保存。
注射用胰蛋白酶
《中华人民共和国药典》2010年版
胰蛋白酶
Trypsin
结晶胰蛋白酶；Crystalline Trypsin；Parenzyme；Tryptar；Novo；Tryptest
呼吸系统药物 > 祛痰药物 > 促进痰液溶解的药物
25mg，50mg；
2.注射剂（粉）：5mg，10mg。
3.注射用结晶胰蛋白酶：每支1000单位、2000单位、5000单位、10000单位.
胰蛋白酶为肽链内切酶，对精氨酸和赖氨酸肽链具有选择性水解作用，可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸。由于血清中含有非特异性抑肽酶，故胰蛋白酶不会消化正常组织，而能分解黏痰、脓性痰等黏性分泌物，能促进抗生素、化疗药物向病灶渗透。
（尚不明确）
1.用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤、娄管等所产生的局部水肿、血肿、脓肿。
2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和脓性痰。
3.用于治疗毒蛇咬伤，曾试用于竹叶青、银环蛇、眼镜蛇、蝮蛇等毒蛇咬伤的各型病人800余例，均获治愈。
1.肝肾出血、出血倾向及结核性脓肿患者禁用。
2.不可用于急性炎症及出血空腔中。
1.不可作静注。用前需作划痕试验，应注意可能产生过敏反应。
2.吸取注射液后应另换针头，以免注射时疼痛。
3.外用时，可采用注射用制剂以缓冲液溶解，但必须在3小时内用毕。
有寒战、发热、头痛、头晕及皮疹等过敏反应。但并不影响继续用药，一般给予抗组胺药和解热药，即可控制或预防。
1.每次～5mg，用蒸馏水5～10ml溶解。
2.一般应用：1次5000单位，每日1次肌注，用量酌情而定。为防止疼痛，可加适量普鲁卡因。局部用药视情而定，可配成溶液制剂（～，微堿性时活性最强）、喷雾剂、粉剂、油膏等，用作体腔内注射、患部注射、喷雾、湿敷、涂搽等。
3.治蛇毒：取注射用结晶胰蛋白酶2000单位1～3支，加～盐酸普鲁卡因（或注射用水）4～20ml稀释，以牙痕为中心，在伤口周围作浸润注射，或在肿胀部位上方作环状封闭1～2次。如病情需要可重复使用。若伤肢肿胀明显，可于注射本品30分钟后，切开伤口排毒减压（严重出血者例外），也可在肿胀部位针刺排毒。如伤口已坏死、溃烂，可用其溶液湿敷患处
（尚不明确）
来源当然是胰腺的细胞分秘的拉，人工制取的话应该是基因工程，将基因导入诸如大肠杆菌这样的细胞里面繁殖来的快吧！它的作用是可以水解掉动物细胞间的粘连物质，使动物细胞离散开来，主要应用在动物体细胞融合
笨蛋，自己写嘛！！！！！！
【关键词】 蛋白质组 【关键词】 线粒体；蛋白质组 0引言 线粒体拥有自己的DNA（mtDNA），可以进行转录、翻译和蛋白质合成. 根据人类的基因图谱，估计大约有1000~2000种线粒体蛋白，大约有600多种已经被鉴定出来. 线粒体蛋白质只有2%是线粒体自己合成的，98%的线粒体蛋白质是由细胞核编码、细胞质核糖体合成后运往线粒体的，线粒体是真核细胞非常重要的细胞器，在细胞的整个生命活动中起着非常关键的作用. 线粒体的蛋白质参与机体许多生理、病理过程，如ATP的合成、脂肪酸代谢、三羧酸循环、电子传递和氧化磷酸化过程. 线粒体蛋白质结构与功能的改变与人类许多疾病相关，如退行性疾病、心脏病、衰老和癌症. 尤其是在神经退行性疾病方面，线粒体蛋白质的研究日益受到关注. 蛋白质组研究技术的产生与发展为线粒体蛋白质组的研究提供了有力的支持，使得从整体上研究线粒体蛋白质组在生理、病理过程中的变化成为可能. 1线粒体的结构、功能与人类疾病 线粒体一般呈粒状或杆状，也可呈环形、哑铃形或其他形状，其主要化学成分是蛋白质和脂类. 线粒体由内外两层膜封闭，包括外膜、内膜、膜间隙和基质四个部分. 线粒体在细胞内的分布一般是不均匀的，根据细胞代谢的需要，线粒体可在细胞质中运动、变形和分裂增殖. 线粒体是细胞进行呼吸的主要场所，在细胞代谢旺盛的需能部位比较集中，其主要功能是进行氧化磷酸化，合成ATP，为细胞生命活动提供直接能量. 催化三羧酸循环、氨基酸代谢、脂肪酸分解、电子传递、能量转换、DNA复制和RNA合成等过程所需要的一百多种酶和辅酶都分布在线粒体中. 这些酶和辅酶的主要功能是参加三羧酸循环中的氧化反应、电子传递和能量转换. 线粒体具有独立的遗传体系，能够进行DNA复制、转录和蛋白质翻译. 线粒体不仅为细胞提供能量，而且还与细胞中氧自由基的生成、细胞凋亡、细胞的信号转导、细胞内离子的跨膜转运及电解质稳态平衡的调控等有关. 许多实验证实，线粒体功能改变与细胞凋亡〔1〕、衰老〔2〕、肿瘤〔3，4〕的发生密切相关；另外，有许多人类疾病的发生与线粒体功能缺陷相关，如线粒体肌病和脑肌病、线粒体眼病，老年性痴呆、帕金森病、2型糖尿病、心肌病及衰老等，有人统称为线粒体疾病〔5〕. 2线粒体蛋白质组学研究现状 线粒体蛋白质组的蛋白质鉴定Rabilloud等〔6〕在1998年，以健康人的胎盘作为组织来源，分离提取线粒体进行蛋白质组研究，试图建立线粒体蛋白质组的数据库，为研究遗传性或获得性线粒体功能障碍时线粒体蛋白质的变化提供依据. 他们使用IPG（pH ）双相电泳技术, 共获得1500个蛋白点. 通过MALDITOFMS和PMF等技术鉴定其中的一些蛋白点，鉴于当时基因组信息的局限性，只有46种蛋白被鉴定出来. 随着人类基因组图谱的完成，应该有更多的蛋白点被鉴定出来. Fountoulakis等〔7〕从大鼠的肝脏中分离线粒体，并分别利用宽范围和窄范围pH梯度IPG对线粒体蛋白质进行双相电泳，通过MALDIMS鉴定出192个基因产物，大约70%的基因产物是具有广谱催化能力的酶，其中8个基因产物首次被检测到并且由一个点构成，而大多数蛋白质都是由多个点构成，平均10~15个点对应于一个基因产物. Mootha等〔8〕从小鼠大脑、心脏、肾脏、肝脏中分离提取线粒体蛋白质，进行线粒体蛋白质组研究，他们参照已有的基因信息共鉴定出591个线粒体蛋白质，其中新发现了163个蛋白质与线粒体有关. 这些蛋白质的表达与RNA丰度的检测在很大程度上是一致的. 不同组织的RNA表达图谱揭示出线粒体基因在功能、调节机制方面形成的网络. 对这些蛋白与基因的整合分析使人们对哺乳动物生物起源的认识更加深入，对理解人类疾病也具有参考价值. 线粒体亚组分的研究线粒体对维持细胞的体内平衡起着关键作用，因此加速了人们对线粒体亚组分的研究. 线粒体内膜不仅包含有呼吸链复合物，它还包含多种离子通道和转运蛋白. 对线粒体发挥正常的功能起着重要作用. Cruz等〔9〕专注于线粒体内膜蛋白质的研究，他们通过二维液相色谱串联质谱技术鉴定出182个蛋白质，pI（），MW（Mr 6000~527 000），这些蛋白与许多生化过程相关，比如电子传递、蛋白质运输、蛋白质合成、脂类代谢和离子运输. 线粒体蛋白质复合物的研究线粒体内膜上嵌有很多蛋白质复合物，对于线粒体的功能具有重要作用，应用常规的双相电泳很难将这些蛋白质复合物完整地分离出来. Devreese等〔10〕采用Bluenative polyacrylamide gel electrophoresis（BNPAGE）分离线粒体内膜上的五个氧化磷酸化复合物，结合肽质量指纹图谱，成功地鉴定出氧化磷酸化复合物中60%的已知蛋白质. BNPAGE在分离蛋白质复合物时可以保持它们的完整性，因此这项技术可以用于研究在不同的生理病理状态下蛋白质复合物的变化及临床诊断等. 线粒体蛋白质组数据库目前人们查询最多的线粒体蛋白质组数据库有MITOP, MitoP2和SWISSPROT三种. MITOP〔11〕是有关线粒体、核编码的基因和相应的线粒体蛋白质的综合性数据库，收录了1150种线粒体相关的基因和对应的蛋白质，人们可依据基因、蛋白质、同源性、通道与代谢、人类疾病分类查询相关的信息.MitoP2〔12〕数据库中主要为核编码的线粒体蛋白质组的数据，MitoP2数据库将不同来源的线粒体蛋白质的信息整合在一起，人们可以根据不同的参数进行查询. MitoP2数据库既包括最新的数据也包括最初的MITOP〔11〕数据库中的数据. 目前数据库中主要为酵母和人的线粒体蛋白质组的数据，以后还将收录小鼠、线虫等的数据. 数据库旨在为人们提供线粒体蛋白质的综合性数据. SWISSPROT数据库包含269种人类线粒体蛋白质，其中与人类疾病相关的蛋白质有225种. 数据库中有相当一部分蛋白质没有明确的定位和功能信息的描述. 随着线粒体研究热潮到来和蛋白质组学技术的发展，将有更多的数据被填充到数据库中. 3线粒体蛋白质组研究中存在的问题 线粒体碱性蛋白质与低分子量蛋白质线粒体蛋白质中，具有碱性等电点的蛋白质占有很大比例，在等电聚焦时难以溶解，一些碱性程度很大的蛋白质如细胞色素C（pH ）在pH 3~10的IPG胶上不能被分离出. 线粒体蛋白质中相当一部分蛋白是低分子量蛋白，因此在SDSPAGE电泳时要分别应用高浓度和低浓度分离胶，以更好地分离低分子量蛋白质和高分子量蛋白质. 线粒体膜蛋白质线粒体是一个具有双层膜结构的细胞器，内膜和外膜上整和有很多膜蛋白质，这些膜蛋白质对于线粒体功能的发挥具有重要作用，但是膜蛋白质具有很强的疏水性，在等电聚焦时，用常规的水化液难以溶解，因此用常规的IPG胶检测不出来. 换用不同的裂解液对膜蛋白的溶解具有帮助. 有研究人员在等电聚焦缓冲液中加入SB310以增加膜蛋白的溶解性. 在等电聚焦前对样品进行有机酸处理也可以增加膜蛋白的溶解性. 在研究中人们发现,不同的样品应该选用不同的裂解液，没有一种裂解液能够适合于所有的膜蛋白质.百事通针对膜蛋白质的难溶和等电聚焦时的沉淀，一些研究人员另辟径，避开双相电泳而进行一维SDSPAGE电泳，如Taylor等〔13〕先通过蔗糖梯度离心将线粒体蛋白质分成不同的组分，而后将每一个组分进行一维电泳，一维电泳中SDS可以很好地溶解疏水性蛋白质和膜整合蛋白质，他们鉴定出600多种线粒体蛋白质，其中有很多蛋白质以前应用双相电泳没有被鉴定出来. 他们鉴定的蛋白质中有很多具有跨膜结构域，如adenine nucleotide translocator（ANT1）和VDACs蛋白质，这些蛋白质对于调节线粒体的功能具有关键作用而且应用常规双相电泳很难被鉴定出来. 提高质谱鉴定的灵敏性对于一维SDSPAGE电泳后蛋白质分析鉴定具有很大的帮助，Pflieger等〔14〕应用液相色谱串联质谱（LCMS/MS）成功地鉴定出179种线粒体蛋白质，其中43%是膜蛋白质而且23%具有跨膜结构域. 液相色谱串联质谱（LCMS/MS）检测灵敏度较高，SDS可以很好地溶解膜蛋白，因此这种方法比传统的双相电泳具有更高的灵敏性而且不受蛋白质等电点、分子量、疏水性的限制. 线粒体样品的纯度线粒体样品的纯度对于蛋白质组分析非常重要，在样品制备的过程中，具有与线粒体相同沉降系数的成分会同线粒体一起沉降下来，如内质网、微粒体、胞浆蛋白的一些成分. 这些蛋白斑点出现在双相电泳胶上，会影响整体蛋白质组分析的结果. 因此提高样品的纯度至关重要. Scheffler等〔15〕采用多步percoll/metrizamide密度梯度离心纯化线粒体样品，双相电泳后鉴定出61个蛋白质，几乎全部是线粒体蛋白质. 4未来展望 随着人类基因组工作草图的完成，生命科学的研究进入后基因组时代，蛋白质组学的研究遂成为重点. 蛋白质组学旨在采用全方位、高通量的技术路线，确认生物体全部蛋白质的表达和功能模式，从一个机体、一个器官组织或一个细胞的蛋白质整体活动来揭示生命规律，并研究疾病的发生机制、建立疾病的早期诊断和防治方法. 抗体技术在线粒体蛋白质组学领域中具有重要的应用价值. 单克隆抗体还具有高度的特异性，应用于亲和层析技术中不仅可以去除组织细胞样品中高表达的蛋白质成分，同样也可以富集表达量极低的组分. 结合蛋白免疫转印、流式细胞术和免疫组织细胞化学，实现对相应蛋白质的定性、定量和细胞（内）定位分析. 与微阵列技术（芯片）结合，可以研制出含有成百上千种抗体的蛋白(抗体)芯片，这种新技术使得研究人员可以在一次实验中比较生物样品中成百上千的蛋白质的相对丰度，能够检测到样品中浓度很低的抗原，以实现蛋白质组学对复杂组分高通量、高效率的检测. 某些抗体可以特异性识别蛋白质翻译后修饰的糖基化或磷酸化位点、降解产物、功能状态和构象变化，成为基因芯片检测不可替代的补充. 抗体捕获组分的分析有助于蛋白质复合物及其相互作用的研究，也在新的蛋白质发现和确认方面提供重要信息和证据. 随着抗体技术的不断提高，抗体数目的不断增多，蛋白质组学的研究也将更加深入. 线粒体不仅参与细胞重要的生命活动，而且对于生物进化的研究也有重要意义. 随着线粒体研究热潮的到来，将有更多的蛋白质被发现，对于蛋白质功能的研究也将更加深入，相信线粒体蛋白质组的研究对于人类疾病的发病机制和早期诊断将做出重要贡献. 【参考文献】 〔1〕 Jiang X, Wang X. Cytochrome Cmediated apoptosis 〔J〕. Annu Rev Biochem, 2004,73: 87-106. 〔2〕 Chen XJ, Wang X, Kaufman BA, et al. Aconitase couples metabolic regulation to mitochondrial DNA maintenance 〔J〕. Science, 2005,307(5710): 714-717. 〔3〕 Petros JA, Baumann AK, RuizPesini E, et al. mtDNA mutations increase tumorigenicity in prostate cancer 〔J〕. PNAS, 2005,102(3):719-724. 〔4〕 Wonsey DR, Zeller KI, Dang CV. The cMyc target gene PRDX3 is required for mitochondrial homeostasis and neoplastic transformation 〔J〕. PNAS, 2002, 99(10): 6649-6654. 〔5〕 Taylor RW, Turnbull DM. Mitochondrial DNA mutations in human disease〔J〕. Nat Rev Genet, 2005,6:389-402. 〔6〕 Rabilloud T, Kieffer S, Procaccio V, et al. Twodimensional electrophoresis of human placental mitochondria and protein identification by mass spectrometry: toward a human mitochondrial proteome 〔J〕. Electrophoresis, 1998,19:1006-1014. 〔7〕 Fountoulakis M, Berndt P, Langen H, et al. The rat liver mitochondrial proteins〔J〕. Electrophoresis, 2002,23:311-328. 〔8〕 Mootha VK, Bunkenborg J, Olsen JV, et al. Integrated analysis of protein composition, tissue diversity, and gene regulation in mouse mitochondria 〔J〕. 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