生物研究性课题论文开题报告范文
题目： 高中生物课程三维目标实施路径的研究
一、课题研究的现实背景及意义
在教育目标研究方面比较突出的有布鲁姆教育目标分类系统，即把教育目标分成三个领域：认知领域、情感领域和动作技能领域。我国基础教育新课程改革正处在发展阶段，义务教育及普通高中新课程标准分别于2001年、2003年颁布，就全国范围来讲，在三维目标的实施途经研究方面是一个难点问题，大家都很关注，有老师在实践中开展探索，专家和一线的老师对知识与能力的研究比较多，但在如何认识过程、生物学习方法的具体指导、能力目标的具体化、情感价值观的分类、生物课程中如何有机渗透情感及价值观教育、特别是三者的有机整合、如何实施三维目标等方面缺少比较系统性的研究，有部分课程专家在有关课程改革的论述中谈到过这些问题，如《走进新课程》(教育部基教司组织编写)、《为了中华民族的复兴，为了每一位学生的发展》(华东师范大学出版社)、《新课程理念与创新》(高等教育出版社)、《课程与教学论》(钟启泉、张华主编)等。
目前国内其它学科如数学、历史、政治等学科有三维目标实施途径的研究，关于三维目标方面的理论和论文也较多。但有关生物学科如何实施三维目标方面研究较少，研究成果更少。因此，研究本课题可以填补国内外这方面理论空白，也可以进一步完善学生自主学习方面的理论研究。本课题的研究将进一步丰富建构主义教学理论、元认知理论。同时也有利于改变教师的教学方式，有利于改变学生的学习方式，有利于改变推动高中生物新课程改革朝着正确的方向推进。
二、课题研究的目标和基本内容
(一)研究目标
1、增强生物教师积极参与新课程改革的意识。
2、使生物教师理解“三维目标”的内涵。
3、积极探索新的教学模式和寻找实现生物课堂三维目标的途径，以提高课堂教学效率。
4、变革学生的学习方式，提高学生的学习积极性
5、通过课题研究培养我校生物青年教师教科研的.能力
(二)研究内容
1、生物课程“三维目标”的内涵
2、实现生物课堂教学中“三维目标”的途径
3、探索生物课程的课堂教学模式
4、高中学生生物学习方式
(三)研究重点
1、生物课程“三维目标”的内涵的研究
2、实现生物课堂教学中“三维目标”的途径
三、课题概念的界定
(一)核心概念：高中生物课程、三维目标、实施路径
(二)界定：
1、高中生物课程：“高中生物课程”是根据《基础教育课程改革纲要(试行》和《普通高中课程改革方案》的精神和要求设计的。 高中生物课程分为必修和选修两个部分。必修部分包括“生物1：分子与细胞”、“生物2：遗传与进化”、“生物3：稳态与环境”3个模块;选修部分有“选修 1：生物技术实践”、“选修2：生物科学与社会”和“选修3现代生物科技专题”3个模块。
2、三维目标：“三维目标”是教育理论中的一个新名词。它是指对学生进行教育过程中教师应该达到的三个目标即：知识与能力，过程与方法，情感、态度、价值观。“知识与能力” 强调基础知识和基本技能的获得。“过程与方法”突出的是让学生“学会学习”，使学生获得知识的过程同时成为获得学习方法和能力发展的过程。情感是指学生在学习结束合应该具有的感情体验;态度是指学生在学习结束后应该具有的一种对周围事物、事件的态度的形成;价值观是指学生在学习结束后应该具有的对周围经济利益、金钱的看法。这是课堂教学改革的新成果。
3、实施路径：指按照一定的标准，采取一定的方法实现高中生物课程三维目标的途径。
四、本课题研究的理论依据和参考文献
(一)本课题研究的理论依据
1、巴班斯基的教学过程最优化理论
通过合理的组织教学过程，既得到教学的最大可能效果，又不致造成学生过重的学习负担。
2、建构主义教学理论
在建构主义教学模式下，教师应该是教学环境的设计者，知识的管理者、学习学习的组织者、指导者和促进者，课程的开发者。强调学习过程应以学生为中心，注重互动的学习方式，师生是建构知识过程的合作者，从这些知识出发，开发新的教学方法。
3、弗莱维尔的元认知理论.
美国儿童心理学家弗莱维尔认为：元认知是对思维活动的自我体验、自我观察、自我监控和自我调节。其实质就是对认知活动的自我意识、自我控制。
以上是我整理的生物研究性课题论文开题报告范文，希望对大家有所帮助。
生物制药论文开题报告
下面是我整理的生物制药论文开题报告范文，希望对大家有所帮助。
一、研究背景
20世纪初才在我国大量栽培。洋葱中含有丰富的黄酮类化合物，而黄酮类化合物在医药和食品中有着广泛的应用。
黄酮类化合物具有抗癌、抗心血管老化、抗炎、杀菌及降血压等作用。有报道说，洋葱中主要的类黄酮是黄酮醇懈皮素及其衍生物，其含量达总黄酮含量的80%以上，由于含有酚烃基结构而具有较强的抗氧化作用，许多药理学研究表明，懈皮素具有比其它类类黄酮更强的抗氧化性、清除自由基活性、抑制脂肪氧合酶和环氧化物酶，防止血小板凝集的作用。
由于洋葱具有多种保健功能特性，其精深加工产品蕴涵着巨大的市场。因此，对洋葱的深入研究将会为降血糖、降血脂、抗血栓、抗菌抗癌等天然药物的开发利用提供新的线索。
目前对洋葱的研究主要集中在含硫化合物上，而对其黄酮类化合物提取、应用开发技术方面的研究报道甚少目前，国内也几乎没有真正意义上的洋葱深加工产品，其加工水平和产品处于脱水等较低水平。
例如:洋葱干和洋葱粉，以及洋葱沙拉酱等。而在发达国家开发出洋葱黄酮胶囊、洋葱方便食品等多种既具较强保健功能又方便、营养可口的深加工产品。
因此通过高新技术应用和提取工艺的优化从洋葱中提取黄酮类化合物，能够提高原料的利用率，提高产品的附加值，有利于经济效益的提高。我国加入WTO后，因包括劳动力在内的生产要素低廉，所以洋葱等原料在国际贸易中具有明显的外贸比较优势。多年来中国洋葱产业主要以原料或初级加工产品面向国际市场。
目前，我国洋葱及其制品的生产和销售受到三个方面的制约:第一，原料形式出口和销售受市场因素制约较大，且价格较低，附加值低;第二，应用领域不宽，出口价格波动较大，导致产品积压，同时又反过来影响了种植和加工;第三，加工品种类型单一，销售一市场单一。
以上三方面的影响导致其价格不稳定，收入不稳定，极大地影响了我国洋葱产业的发展。尤其是洋葱产业普遍存在产品结构不合理、品种单一、生产上艺水平低、呈现主要药理功能作用的风味物质提取率及在产品中的含量低的缺点，难以创造高技术含量、高附加的适应市场需求的新产品，严重影响了产业的进一步发展。而洋葱高品质、高价值的贸易品越来越受到食品工业的推崇，在国外发展迅速，己逐渐成为食品工业的主要原料之一，这些在我国则刚刚起步。
我国面临全面与国际接轨后更加激烈的国际竞争，这迫切需要洋葱产业要有较大的发展。我们必须积极增加人力资本和技术投入，不断增加知识产品的生产，依靠洋葱原料外贸比较优势构建我们的产品竞争力。
通过本实验的研究，一、可以为充分有效开发和利用洋葱功能性成分奠定基础、提供必要的依据。洋葱的深加工和功能食品的研究开发要建立在其功能性成分深入细致的研究基础上。
而国内外虽在这方面做了很多工作，但仍有很多需要进一步研究和实验的内容。通过本实验研究期望能在这一方面有所贡献。二、提高洋葱的附加值，为广大种植户带去更多的实惠。
开发洋葱深加工产品，为培植洋葱育种→种植→贮藏→运输→深加工→包装→营销的产业链，带动和发展一方产业。在提高洋葱附加值和经济效益的同时带来社会效益，为广大农民种植户提供发家致富的机会。是解决三农问题，寻求长期切实可行、行之有效的方法和途径。三、有利于产业结构的调整。利用丰富的原料资源，发挥中国生产成本相对较低的优势，开发出适合国际市场所需的深加工产品，完全有可能成为出口创汇的渠道。从而改变我国农产品依赖于原料出口的现状。
二、该选题的研究现状及发展趋势
洋葱品质优良、营养丰富、易于生产管理，作为天然的保健营养食品，一直受到人们的青睐。洋葱由外国引入我国，因此我国对洋葱栽培的时间相对来说并不算长，但是尽管如此，由于洋葱适应性强，又耐贮藏和运输，而我国自然条件十分有利于洋葱的生长，所以，在我国种植历史虽然短，但发展速度很快，现如今它已经成为我国栽培面积大、栽培范围广、产量最高的蔬菜之一。
洋葱同生姜、大蒜一样，都是亚洲国家传统的药食两用植物，含有多种生理活性成分，在保健和预防、治疗慢性病等方面具有多种功效。近年来，随着人们对自身保健意识的增强，日益强调食品原料及添加剂的天然性、功能性，使得人们更加关注洋葱的药食兼用特性，期望提取、富集其生理活性成分，更好的满足人们的.需要。
洋葱中含有丰富的黄酮类化合物，而黄酮类化合物化合物的生理活性作用较为广泛，具有抗癌、镇痛、提高免疫能力等药用保健功能。
在临床上，可以用来预防和治疗脑动脉硬化及脑血管循环不顺畅等疾病。由于注意到洋葱中类黄酮的含量较高，而且类黄酮种类为具有广泛生理活性的榭皮素及其糖甙，美国、日本以及欧洲一些国家对洋葱中类黄酮的研究非常重视。而国内对洋葱的研究主要集中在含硫化合物上，黄酮类化合物、前列腺素类和氨基酸类等的药理研究还有待进一步的研究。
目前国内外主要是从银杏叶、大豆、山植叶、荷叶、芹菜叶、水芹、花生壳等材料中利用有机溶剂、超声波、酶解等方法提取类黄酮化合物，为了进一步提高类黄酮的质量，将类黄酮产品推向广阔的市场，有必要寻求更多的原料及合适的提取方法以及研究最佳的提取工艺条件。
三、主要研究内容及预期目标
主要研究内容
回流法提取洋葱皮总黄酮的工艺流程如下:
洋葱皮洗净→烘干粉碎(过60目筛) →回流提取→提取液→抽滤→离心→总黄酮粗提液→真空干燥→黄酮粗品
1.洋葱中总黄酮提取液的定性检测：通过盐酸一镁粉还原反应、金属盐类试剂的络合反应、提取液与浓硫酸的反应以及与NaOH水溶液的反应等颜色反应确定洋葱提取物中确实含有黄酮，
2.洋葱中总黄酮提取液的定量检测：通过芦丁-分光光度法测定洋葱中总黄酮含量。产品中黄酮得率可由下式计算，黄酮得率E(%)为:
式中: c一洋葱皮总黄酮提取液的浓度(mg/ml)
V一洋葱皮总黄酮提取液的体积(ml)
N一稀释倍数
M一原料质量(g)
3.粉碎粒度对黄酮得率的影响: 准确称取粒度为20目、40目、60目、80目的洋葱粉末各1g，分别加入80%的乙醇溶液20ml，在70℃温度下一次回流提取2h，二次回流提取lh，合并提取液并抽滤，滤得清液在500Or/min条件下离心8min，然后定容于5Oml容量瓶中。分别准确吸取lml样液，按建立标准曲线的方法进行吸光度A的测定，从而得出黄酮类化合物的得率。
本科生物开题报告一般多少字？开题报告一般需要800个字以内或者是不能低于500个字，所以他这种本科生物考试报告开题报告一般需要800个字。
生物医学毕业论文，如果有好题目其实不难的。开始也是学长给的雅文网，很多医学方面的文章，我也是没时间，直接让专家帮忙的现代生物技术的物种特性及演化路径研究喷射技术在生物制造工程中的应用国内外生物技术现状与展望(上)生物技术中小企业创新影响因素研究——基于政府R&D支持与企业合作的视角《生物技术世界》杂志稿约《生物技术世界》杂志稿约微藻生物技术产业前景和研发策略分析《生物技术世界》杂志稿约农业生物技术专利信息管理分析农业生物技术内涵与转基因农业生物技术效应《生物技术世界》杂志征订启事生物技术发展给人类社会带来的机遇和挑战新疆棉花生物技术研究现状与发展前景探讨现代生物技术法律问题研究生物技术在青浦农业上的应用和发展探讨石油污染土壤的生物修复技术生物技术研究和开发的进展与展望生物技术在渔业上的应用风险预防原则下生物技术专利保护的再思考汇聚生物技术产业 推动可持续发展现代生物化工技术进展生物医学美容产品与技术行业标准环境生物技术发展的现状研究生物技术领域的专利保护生物技术在肉类加工行业中的应用21世纪生物技术展望生物技术与医药食用菌与生物技术寰枢关节脱位的置入物治疗技术与生物相容性及生物力学的关系生物池底板大体积混凝土无缝施工技术的应用研究生物技术应用的第三次浪潮——工业生物技术放射性生物微球技术测定脊髓血流量及意义的实验观察我国生物制药技术的研究进展试论生物技术在农业技术中的应用能源：未来生物技术的挑战当代技术发展的重要前沿(之三)——生物技术
生物研究性课题论文开题报告范文
题目： 高中生物课程三维目标实施路径的研究
一、课题研究的现实背景及意义
在教育目标研究方面比较突出的有布鲁姆教育目标分类系统，即把教育目标分成三个领域：认知领域、情感领域和动作技能领域。我国基础教育新课程改革正处在发展阶段，义务教育及普通高中新课程标准分别于2001年、2003年颁布，就全国范围来讲，在三维目标的实施途经研究方面是一个难点问题，大家都很关注，有老师在实践中开展探索，专家和一线的老师对知识与能力的研究比较多，但在如何认识过程、生物学习方法的具体指导、能力目标的具体化、情感价值观的分类、生物课程中如何有机渗透情感及价值观教育、特别是三者的有机整合、如何实施三维目标等方面缺少比较系统性的研究，有部分课程专家在有关课程改革的论述中谈到过这些问题，如《走进新课程》(教育部基教司组织编写)、《为了中华民族的复兴，为了每一位学生的发展》(华东师范大学出版社)、《新课程理念与创新》(高等教育出版社)、《课程与教学论》(钟启泉、张华主编)等。
目前国内其它学科如数学、历史、政治等学科有三维目标实施途径的研究，关于三维目标方面的理论和论文也较多。但有关生物学科如何实施三维目标方面研究较少，研究成果更少。因此，研究本课题可以填补国内外这方面理论空白，也可以进一步完善学生自主学习方面的理论研究。本课题的研究将进一步丰富建构主义教学理论、元认知理论。同时也有利于改变教师的教学方式，有利于改变学生的学习方式，有利于改变推动高中生物新课程改革朝着正确的方向推进。
二、课题研究的目标和基本内容
(一)研究目标
1、增强生物教师积极参与新课程改革的意识。
2、使生物教师理解“三维目标”的内涵。
3、积极探索新的教学模式和寻找实现生物课堂三维目标的途径，以提高课堂教学效率。
4、变革学生的学习方式，提高学生的学习积极性
5、通过课题研究培养我校生物青年教师教科研的.能力
(二)研究内容
1、生物课程“三维目标”的内涵
2、实现生物课堂教学中“三维目标”的途径
3、探索生物课程的课堂教学模式
4、高中学生生物学习方式
(三)研究重点
1、生物课程“三维目标”的内涵的研究
2、实现生物课堂教学中“三维目标”的途径
三、课题概念的界定
(一)核心概念：高中生物课程、三维目标、实施路径
(二)界定：
1、高中生物课程：“高中生物课程”是根据《基础教育课程改革纲要(试行》和《普通高中课程改革方案》的精神和要求设计的。 高中生物课程分为必修和选修两个部分。必修部分包括“生物1：分子与细胞”、“生物2：遗传与进化”、“生物3：稳态与环境”3个模块;选修部分有“选修 1：生物技术实践”、“选修2：生物科学与社会”和“选修3现代生物科技专题”3个模块。
2、三维目标：“三维目标”是教育理论中的一个新名词。它是指对学生进行教育过程中教师应该达到的三个目标即：知识与能力，过程与方法，情感、态度、价值观。“知识与能力” 强调基础知识和基本技能的获得。“过程与方法”突出的是让学生“学会学习”，使学生获得知识的过程同时成为获得学习方法和能力发展的过程。情感是指学生在学习结束合应该具有的感情体验;态度是指学生在学习结束后应该具有的一种对周围事物、事件的态度的形成;价值观是指学生在学习结束后应该具有的对周围经济利益、金钱的看法。这是课堂教学改革的新成果。
3、实施路径：指按照一定的标准，采取一定的方法实现高中生物课程三维目标的途径。
四、本课题研究的理论依据和参考文献
(一)本课题研究的理论依据
1、巴班斯基的教学过程最优化理论
通过合理的组织教学过程，既得到教学的最大可能效果，又不致造成学生过重的学习负担。
2、建构主义教学理论
在建构主义教学模式下，教师应该是教学环境的设计者，知识的管理者、学习学习的组织者、指导者和促进者，课程的开发者。强调学习过程应以学生为中心，注重互动的学习方式，师生是建构知识过程的合作者，从这些知识出发，开发新的教学方法。
3、弗莱维尔的元认知理论.
美国儿童心理学家弗莱维尔认为：元认知是对思维活动的自我体验、自我观察、自我监控和自我调节。其实质就是对认知活动的自我意识、自我控制。
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生物开题报告范文
开题报告是指开题者对科研课题的一种文字说明材料。下面为大家的整理的是生物开题报告范文，仅供参考~
课题名称：微生物驱油数值模拟研究与应用
1、选题意义和背景
根据预测，21世纪原油需求总量为2500-2600亿吨，按照现有油藏开发技术和措施年均仅能提供380亿吨。因此，要满足需求总量，必须将采收率提高到65%-70%,即现有水平的2倍。提高原油和天然气产量的途径主要是增加地质储量和应用高效生产技术，而后者的作用越来越重要。目前，石油天然气工业面对的最重要的挑战之一就是提高采收率。在过去的20年里，采收率提高了10%,但这主要归功于油藏工程，提高采收率方法的贡献很小。由于较低的波及系数和洗油效率，油藏中有2/3的地质储量不能采出。波及系数可以通过油藏工程和化学工程的方法得到提高，洗油效率则只能依靠化学工程。按采收率达到64%-66%的目标，现有技术可将采收率提高20%达到48%,剩余16%要依赖于化学提高采收率方法的应用。近些年来，随着新开发区块的减少以及大量高产油田的减产，提高原油采收率技术（IOR）正在世界范围内不断得到推广和应用。微生物提高采收率技术就是一种主要利用化学原理提高波及系数和洗油效率的提高采收率技术，室内实验和矿场试验表明，这是一种具有潜在经济效益的方法，特别对枯竭的生产井更是如此。在美国，枯竭井（指产油速度少于10 bbl / d的井）的产量占总采油量的将近50% ;我国的一些大油田近些年来相继进入高含水后期，所以需要一种低成本的提高采收率方法（I CFA.微生物提高采收率方法尤其适合应用于今天这种经济环境。有足够的资料证明了利用微生物技术增加原油生产的可行性和灵活性。在世界各地，己经有大量的生产井和油田己经用微生物配方进行了处理。
2、论文综述/研究基础
我国的石油微生物学始于1955年，开始研究细菌勘探；20世纪60年代研究了油田微生物的生态学和生理学，参加的单位有中国科学院、石油部、地质部及一些大专院校，并取得了丰硕的成果。近几年来，国外（主要是美国）在这方面己有成熟的技术，并开始向我国市场渗透，这在一定程度上促进了我国这方面研究的发展。我国吉林油田和中国科学院微生物研究所协作研究了一项微生物吞吐技术，有较好的增油效果，但在注入微生物的`同时需要注入大量的营养液，这相对提高了原油开采的成本。大庆油田在“七五”国家科技攻关成果简介中，介绍了利用微生物地下发酵的研究成果。利用微生物地下发酵提高原油采收率是当前引起石油界广泛重视的一种生物技术。大庆石油管理局和中科院微生物所在国内首先开创了将细菌直接注入地下提高采收率的室内评价方法，大庆石油管理局利用混合菌种进行了创造性的放大发酵工艺、注入工艺及矿场试验研究。据中国石油报1995年5月19日报道，油田专用微生物工厂在徐州建成（投放1吨微生物可增产原油400吨）。它由华东输油管理局和美国迈克尔？白克微生物公司合资兴建，采用美国的技术设备，按美国标准生产油田专用微生物，年产微生物7万加仑。大大促进了国内微生物提高采收率研究的进展。
3、参考文献
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生物研究生开题报告范文
开题主要研讨课题研究的可行性，重在清思、聚焦和分工。接下来由我为大家整理了生物研究生开题报告范文，欢迎大家阅读!
一、开题活动简况：
开题时间、地点、主持人、评议专家（课题组外专家，专家应不少于2人）、参与人员等。
开题时间： xx年10月 开题地点： xx
主 持 人： xx
评议专家：xx
参加人员：xx
二、开题报告要点：题目、内容、方法、组织、分工、进度、经费分配、预期成果等，要求具体明确、可操作，限5000字以内，（可加页）。
《小学数学课堂教学新型评价方式的研究》开题报告
（一）课题研究的目的：
《数学课程标准》中明确指出“评价的目的是为了全面了解学生的学习历程，激励学生的学习热情，促进学生的全面发展，同时，评价也是教师反思和改进教学的有力手段。”为此，我们决定进行“数学课堂教学评价”的研究，以评价改革为突破口，运用评价的导向激励，指导教师创建“有意义的课堂”.
本课题以“四环节循环教学模式”为依托，在校领导的参与和引领下，以本校四、五、六年级数学教师为主要的研究队伍，有很强的实践应用价值；本项研究将促使我们不断思考，逐步树立新的课堂教学观、师生观、活动观、评价观等观念；提高教师队伍的素质，锻炼教师的教育科研能力；将推进本校的课堂教学改革，使我们的课堂成为培养学生自主学习的乐园，并提高课堂教学质量。推动新一轮课程改革，进一步完善我市推行的“四环节循环教学模式”.
随着信息技术和知识经济时代的来临，当今社会人才观产生了根本性的变化，改革“以知识为本”的课堂教学评价标准，形成以“人的发展为本”的课堂教学评价体系。国内外特别是国内近几年来一直在进行着课堂教学评价的研究和探索，通过研究也总结出相应的实施方案，我们将会借鉴他们的研究成果，结合我市的“四环节循环教学模式”,积极开展本课题的研究。
（二）重点研究的内容：
1.探索数学新型课堂评价内容和方法，通过研究，寻找科学、有效、实用的评价方式。
2.致力于学习习惯培养的指导，使每个学生积极主动的参与课堂教学活动，达成师生互尊、互爱、互敬、互帮、互教的教学氛围。
3.通过课堂教学评价方式的转变，改变教师的教学理念，更好的推行“四环节循环教学模式”.
4.通过课堂教学评价方式的完善，提升教师专业素质，推动我校教师队伍的成长
5.结合研究的成果，怎么在我校进一步推广是我们面临的难点。相信通过本课题的研究，我们将会积累一套行之有效的方法。
（三）本课题研究的途径与方法：
通过课堂教学的具体实践，综合运用以下方法进行研究：
1.文献研究法 广泛搜集和查阅相关文献资料，为研究提供科学的理论支撑。文献研究法是整个课题研究中辅助性的研究方法。
2.行动研究法 行动研究法是本课题研究的基本方法。并在行动研究的过程中，结合调查研究、对比研究、经验总结等方法。
3.教育实验法 大胆把学习和研究得到的.有关理论成果及时应用于教学实践，通过实践验证理论的科学性、有效性和可行性，及时将理论成果转化为教学“生产力”,为小学数学教学服务；
4.问卷调查法 通过实际了解和问卷调查，掌握学生研究前后的数学自主学习效益状况，为课题研究提供准确的数据；
5.统计分析法： 将调查的数据和资料进行科学的统计和分析，以之作为调控整个课题研究和实验的参照。
（四）课题组人员分工
（五）本课题具体实施步骤：
第一阶段：启动阶段（xx、5-xx、6）
1.召开所有课题组成员会议，收集资料，进行可行性调查论证，申报课题，进行理论学习。
2.成立课题研究小组，确定子课题研究，召开课题组骨干人员会议，明确层级管理，形成具体的研究工作网络。
3.完成开题报告，组织开题论证，制定课题实施方案。
第二阶段：实施阶段（xx、6-2015、1）
1.完善课题研究计划，进行前期调查。
2.围绕实验课题，结合自身教育教学实践，开展研讨活动，交流经验，探索规律。
3.听专题讲座，提升教育理论水平，以理论为支撑，拓展研究思路。
4.收集、整理研究过程中各种案例，有针对性撰写研究文章，汇总阶段性研究成果。
第三阶段：结题阶段（2015、2-2015、5）
1.整理研究资料，形成子课题研究报告
2.形成课题的研究报告（总结报告、课题报告、专题介绍、案例分析等）
3.完成《小学数学课堂教学新型评价方式的研究》研究专题
（六）课题研究的经费分配
课题组活动经费的预算和公示。
1.材料打印费200元。
2.示范课视频及课件制作费500元。
3.外出培训费1000元。
（七）预期成果
将小学阶段课堂教学中新型师生评价方式研究的最终结果制作成《小学数学课堂教学新型评价方式研究》的论文。
三、专家评议要点：侧重于对课题组汇报要点逐项进行可行性评估，并提出意见和建议，限1000字以内。
开题报告专家评议要点
专家组听取了课题研究的开题报告，审阅了课题研究的有关前期准备材料，经过认真评议，形成如下论证意见：
1.从课题的选题来看，是一个很有研究价值的课题。新课程课堂教学倡导多主体、多元化评价，让师生掌握评价手段发挥内部评价的效用，尤其是处于主要地位的教师科学运用评价这项工具，搜集信息，在信息反馈的基础上了解自己教学的得失，进而改进自己的教育教学行为，提高课堂教学效率。课题的主导思想及其研究内容具有一定的前瞻性。
2.课题研究的目标明确。旨在通过本课题的研究，探索小学数学课堂教学新型的评价方式，目标明确、具体、贴近实际，有较强的可行性。
3.课题研究内容具体。课题内容能依照新课标要求及丰富的教学实践经验，较准确地把握了课题研究的方向，面向实际，实用性较强。建议对探究对象及具体评价方式做出清晰地界定，进一步细化和具体化，力争时效性、可操作性更强。
4.课题研究方法得当。如本课题中的教育实验法和问卷调查法，让课题研究落到实处，真正服务于教学改革。
5.课题研究计划全面，按时间序列进行了详细的过程设计，并对实施阶段进行了详细的论述划分，课题成员结构合理，研究任务分工明确。建议为保证课题研究的落实，课题组应重点关注“研究充分”的保障条件，可定期召开课题研讨会，形成例会制度，并把课题研究和学校的教学工作联系起来，列入学校的教学工作计划。
6.课题研究的成果要多样化，本课题可以结合课题内容，以多种形式呈现出研究的成果，不一定是单一的《小学数学课堂教学新型评价方式的研究》论文，也可以具体的以多种方式呈现。
专家组最后建议，课题组应进一步修改完善开题报告，组织开展课题相关理论研究培训，按照分工，展开课题研究，定期交流研究新的成果，对研究过程性资料及佐证材料的进行归档和整理等。
专家组一致同意本课题按开题报告进行研究！
四、重要变更：侧重说明对照课题立项申报书、根据评议专家意见所作的研究计划调整，限1000字左右（可加页）。
课题研究重要变更 根据评议专家意见本课题组对所作的研究计划做如下调整：
课题研究的方法应该是科学的、规范的、灵活多样的，本课题的研究还有一部分研究内容也可以使用多方位探究法，以便更好的进行小学数学课堂教学中新型评价方式的研究。根据不同的活动内容进行不同角度的、形式多样的评价研究。课题研究的成果要明确化、具体化、多样化，本课题可以结合课题研究内容，以多种形式呈现出研究的成果，从笼统的《小学数学教学评价方式研究》，变为具体的《小学数学课堂教学新型评价方式研究》论文。
生物研究性课题论文开题报告范文
题目： 高中生物课程三维目标实施路径的研究
一、课题研究的现实背景及意义
在教育目标研究方面比较突出的有布鲁姆教育目标分类系统，即把教育目标分成三个领域：认知领域、情感领域和动作技能领域。我国基础教育新课程改革正处在发展阶段，义务教育及普通高中新课程标准分别于2001年、2003年颁布，就全国范围来讲，在三维目标的实施途经研究方面是一个难点问题，大家都很关注，有老师在实践中开展探索，专家和一线的老师对知识与能力的研究比较多，但在如何认识过程、生物学习方法的具体指导、能力目标的具体化、情感价值观的分类、生物课程中如何有机渗透情感及价值观教育、特别是三者的有机整合、如何实施三维目标等方面缺少比较系统性的研究，有部分课程专家在有关课程改革的论述中谈到过这些问题，如《走进新课程》(教育部基教司组织编写)、《为了中华民族的复兴，为了每一位学生的发展》(华东师范大学出版社)、《新课程理念与创新》(高等教育出版社)、《课程与教学论》(钟启泉、张华主编)等。
目前国内其它学科如数学、历史、政治等学科有三维目标实施途径的研究，关于三维目标方面的理论和论文也较多。但有关生物学科如何实施三维目标方面研究较少，研究成果更少。因此，研究本课题可以填补国内外这方面理论空白，也可以进一步完善学生自主学习方面的理论研究。本课题的研究将进一步丰富建构主义教学理论、元认知理论。同时也有利于改变教师的教学方式，有利于改变学生的学习方式，有利于改变推动高中生物新课程改革朝着正确的方向推进。
二、课题研究的目标和基本内容
(一)研究目标
1、增强生物教师积极参与新课程改革的意识。
2、使生物教师理解“三维目标”的内涵。
3、积极探索新的教学模式和寻找实现生物课堂三维目标的途径，以提高课堂教学效率。
4、变革学生的学习方式，提高学生的学习积极性
5、通过课题研究培养我校生物青年教师教科研的.能力
(二)研究内容
1、生物课程“三维目标”的内涵
2、实现生物课堂教学中“三维目标”的途径
3、探索生物课程的课堂教学模式
4、高中学生生物学习方式
(三)研究重点
1、生物课程“三维目标”的内涵的研究
2、实现生物课堂教学中“三维目标”的途径
三、课题概念的界定
(一)核心概念：高中生物课程、三维目标、实施路径
(二)界定：
1、高中生物课程：“高中生物课程”是根据《基础教育课程改革纲要(试行》和《普通高中课程改革方案》的精神和要求设计的。 高中生物课程分为必修和选修两个部分。必修部分包括“生物1：分子与细胞”、“生物2：遗传与进化”、“生物3：稳态与环境”3个模块;选修部分有“选修 1：生物技术实践”、“选修2：生物科学与社会”和“选修3现代生物科技专题”3个模块。
2、三维目标：“三维目标”是教育理论中的一个新名词。它是指对学生进行教育过程中教师应该达到的三个目标即：知识与能力，过程与方法，情感、态度、价值观。“知识与能力” 强调基础知识和基本技能的获得。“过程与方法”突出的是让学生“学会学习”，使学生获得知识的过程同时成为获得学习方法和能力发展的过程。情感是指学生在学习结束合应该具有的感情体验;态度是指学生在学习结束后应该具有的一种对周围事物、事件的态度的形成;价值观是指学生在学习结束后应该具有的对周围经济利益、金钱的看法。这是课堂教学改革的新成果。
3、实施路径：指按照一定的标准，采取一定的方法实现高中生物课程三维目标的途径。
四、本课题研究的理论依据和参考文献
(一)本课题研究的理论依据
1、巴班斯基的教学过程最优化理论
通过合理的组织教学过程，既得到教学的最大可能效果，又不致造成学生过重的学习负担。
2、建构主义教学理论
在建构主义教学模式下，教师应该是教学环境的设计者，知识的管理者、学习学习的组织者、指导者和促进者，课程的开发者。强调学习过程应以学生为中心，注重互动的学习方式，师生是建构知识过程的合作者，从这些知识出发，开发新的教学方法。
3、弗莱维尔的元认知理论.
美国儿童心理学家弗莱维尔认为：元认知是对思维活动的自我体验、自我观察、自我监控和自我调节。其实质就是对认知活动的自我意识、自我控制。
以上是我整理的生物研究性课题论文开题报告范文，希望对大家有所帮助。
生物医学毕业论文，如果有好题目其实不难的。开始也是学长给的雅文网，很多医学方面的文章，我也是没时间，直接让专家帮忙的现代生物技术的物种特性及演化路径研究喷射技术在生物制造工程中的应用国内外生物技术现状与展望(上)生物技术中小企业创新影响因素研究——基于政府R&D支持与企业合作的视角《生物技术世界》杂志稿约《生物技术世界》杂志稿约微藻生物技术产业前景和研发策略分析《生物技术世界》杂志稿约农业生物技术专利信息管理分析农业生物技术内涵与转基因农业生物技术效应《生物技术世界》杂志征订启事生物技术发展给人类社会带来的机遇和挑战新疆棉花生物技术研究现状与发展前景探讨现代生物技术法律问题研究生物技术在青浦农业上的应用和发展探讨石油污染土壤的生物修复技术生物技术研究和开发的进展与展望生物技术在渔业上的应用风险预防原则下生物技术专利保护的再思考汇聚生物技术产业 推动可持续发展现代生物化工技术进展生物医学美容产品与技术行业标准环境生物技术发展的现状研究生物技术领域的专利保护生物技术在肉类加工行业中的应用21世纪生物技术展望生物技术与医药食用菌与生物技术寰枢关节脱位的置入物治疗技术与生物相容性及生物力学的关系生物池底板大体积混凝土无缝施工技术的应用研究生物技术应用的第三次浪潮——工业生物技术放射性生物微球技术测定脊髓血流量及意义的实验观察我国生物制药技术的研究进展试论生物技术在农业技术中的应用能源：未来生物技术的挑战当代技术发展的重要前沿(之三)——生物技术
生物开题报告范文
开题报告是指开题者对科研课题的一种文字说明材料。下面为大家的整理的是生物开题报告范文，仅供参考~
课题名称：微生物驱油数值模拟研究与应用
1、选题意义和背景
根据预测，21世纪原油需求总量为2500-2600亿吨，按照现有油藏开发技术和措施年均仅能提供380亿吨。因此，要满足需求总量，必须将采收率提高到65%-70%,即现有水平的2倍。提高原油和天然气产量的途径主要是增加地质储量和应用高效生产技术，而后者的作用越来越重要。目前，石油天然气工业面对的最重要的挑战之一就是提高采收率。在过去的20年里，采收率提高了10%,但这主要归功于油藏工程，提高采收率方法的贡献很小。由于较低的波及系数和洗油效率，油藏中有2/3的地质储量不能采出。波及系数可以通过油藏工程和化学工程的方法得到提高，洗油效率则只能依靠化学工程。按采收率达到64%-66%的目标，现有技术可将采收率提高20%达到48%,剩余16%要依赖于化学提高采收率方法的应用。近些年来，随着新开发区块的减少以及大量高产油田的减产，提高原油采收率技术（IOR）正在世界范围内不断得到推广和应用。微生物提高采收率技术就是一种主要利用化学原理提高波及系数和洗油效率的提高采收率技术，室内实验和矿场试验表明，这是一种具有潜在经济效益的方法，特别对枯竭的生产井更是如此。在美国，枯竭井（指产油速度少于10 bbl / d的井）的产量占总采油量的将近50% ;我国的一些大油田近些年来相继进入高含水后期，所以需要一种低成本的提高采收率方法（I CFA.微生物提高采收率方法尤其适合应用于今天这种经济环境。有足够的资料证明了利用微生物技术增加原油生产的可行性和灵活性。在世界各地，己经有大量的生产井和油田己经用微生物配方进行了处理。
2、论文综述/研究基础
我国的石油微生物学始于1955年，开始研究细菌勘探；20世纪60年代研究了油田微生物的生态学和生理学，参加的单位有中国科学院、石油部、地质部及一些大专院校，并取得了丰硕的成果。近几年来，国外（主要是美国）在这方面己有成熟的技术，并开始向我国市场渗透，这在一定程度上促进了我国这方面研究的发展。我国吉林油田和中国科学院微生物研究所协作研究了一项微生物吞吐技术，有较好的增油效果，但在注入微生物的`同时需要注入大量的营养液，这相对提高了原油开采的成本。大庆油田在“七五”国家科技攻关成果简介中，介绍了利用微生物地下发酵的研究成果。利用微生物地下发酵提高原油采收率是当前引起石油界广泛重视的一种生物技术。大庆石油管理局和中科院微生物所在国内首先开创了将细菌直接注入地下提高采收率的室内评价方法，大庆石油管理局利用混合菌种进行了创造性的放大发酵工艺、注入工艺及矿场试验研究。据中国石油报1995年5月19日报道，油田专用微生物工厂在徐州建成（投放1吨微生物可增产原油400吨）。它由华东输油管理局和美国迈克尔？白克微生物公司合资兴建，采用美国的技术设备，按美国标准生产油田专用微生物，年产微生物7万加仑。大大促进了国内微生物提高采收率研究的进展。
3、参考文献
[1]Rebecca S. Bryant, Rhonda P. Lindsey. WORLD-WIDE APPLICATIONS OF MICROBIAL
TECHNOLOGY FOR IMPROVING OIL, RECOVERY SPE/DOE35356, 1996: 127-134
[2]汪卫东。我国微生物采油技术现状及发展前景。石油勘探与开发。2002, 29（6）：87-91
[3]张训化微生物采油数值模拟研究。硕士学位论文。中国科学院渗流流体力学研究所， 2003. 9一10
[4]王岚。微生物采油及其作用机理。世界地质。2002, 21（ 2） : 138-140
[5]裴雪林，刘丽，赵金献。微生物采油技术在国内外的研究现状及实例。断块油气田1997 5（4）：61一66
[6] Corapcioglu, and A. Haridas: “Transport and Fate of Microorganisms in Porous Media:A Theoretical Investigation,” J. of Hydrol., Vol. 72, （1984）：149-169.
[7] Bear, J: Dynamics of Fluids in Porous Media, New York, Elsevier, （1972）：605一616.
[8] Bu' Lock, J. and B. Kristiansen: Basic Biotechnology, Academic Press, New York, （1987）75一131.
[9] Bajpai, . and M. Reuss: “Coupling of Mixing and Microbial Kinetics for Evaluating the Performance of Bioreactor,” Can. J. Chem. Eng., 60, （Jun. 1982）：384-392.
[10] Cernansky, A. and R. Siroky: “Deep-Bed Filtration on Filament Layers of Particles Polydispersed in Liquids,” International Chemical Engineering, Vol. 25, No. 2, （1985） 364-375.
[11」Adamson, A. W:Physical Chemistry of Surfaces, 3rd Edition, Joh Wiley&Sons, Inc., New York, （1976）。
[12]Knapp, ., F. Civan, and . McInerney: “Modeling Growth and Transport ofMicroorganisms in Porous Formations,” Presented at IMACS, Paris, France, Jul. 18-22,1988, Proceedings of 12th World Congress on Scientific Computation, Edited by , P. Borne, and J. Vignes, Vol. 3, （1988） 676-679.
[13]Zhang, X., . Knapp, and . McInerney: “A Mathematical Model for Microbially Enhanced Oil Recovery Processes,” Proceedings of the 1992 International Conference onMicrobial Enhanced Oil Recovery, Developments in Petroleum Science, Edited by and A. Woodhead, Vol. 39, （1993）：171一186.
[14] Chang, , and F. Civan: “Modeling of Formation Damage Due to Physical and ChemicalInteractions between Fluids and Reservoir Rocks,” SPE 22656, Presented at the 66th ., Dallas, TX, Oct. 6-9, 1991.
[15]Popplewell, ., . Campanella, and M. Peleg: “Quantitative Characterization of Particle Size Distributions of Instant Coffee Mechanical Attrition,” J. of Food Science, Vol.
本科毕业论文(设计)开题报告学 院 药学院 专 业 药学姓 名 学 号 指导老师 职 称 合作老师 职 称题 目题目性质 √实验研究 技术开发 工程设计 应用型 调查型 其他一、选题依据和目标（该研究的目的、意义、国内外研究现状及发展趋势）二、课题关键问题及难点三、完成该课题研究已具备的条件（有关的研究工作基础，仪器设备条件，经费情况）四、研究方案1. 拟采取的研究方法或试验方法及主要技术路线2. 研究进度安排五、参考文献签名：年 月 日七、学院意见学院负责人签名：年 月 日附：开题报告会情况记录参加开题报告会的主要人员姓 名 职 称 姓 名 职 称开题报告提出的主要问题及回答情况：问题：本科在校期间对本课题研究的内容没怎么了解，在这方面的实验以前没有注重，实验做起来有点苦难等回答：多看标书，了解大概，上网了解相关内容，在实验步骤上可查阅相关文献…查阅本科的相关教材，同组同学多讨论，有问题多想想，不懂问老师记录人：2010 年 3 月 1 日
生物开题报告范文
开题报告是指开题者对科研课题的一种文字说明材料。下面为大家的整理的是生物开题报告范文，仅供参考~
课题名称：微生物驱油数值模拟研究与应用
1、选题意义和背景
根据预测，21世纪原油需求总量为2500-2600亿吨，按照现有油藏开发技术和措施年均仅能提供380亿吨。因此，要满足需求总量，必须将采收率提高到65%-70%,即现有水平的2倍。提高原油和天然气产量的途径主要是增加地质储量和应用高效生产技术，而后者的作用越来越重要。目前，石油天然气工业面对的最重要的挑战之一就是提高采收率。在过去的20年里，采收率提高了10%,但这主要归功于油藏工程，提高采收率方法的贡献很小。由于较低的波及系数和洗油效率，油藏中有2/3的地质储量不能采出。波及系数可以通过油藏工程和化学工程的方法得到提高，洗油效率则只能依靠化学工程。按采收率达到64%-66%的目标，现有技术可将采收率提高20%达到48%,剩余16%要依赖于化学提高采收率方法的应用。近些年来，随着新开发区块的减少以及大量高产油田的减产，提高原油采收率技术（IOR）正在世界范围内不断得到推广和应用。微生物提高采收率技术就是一种主要利用化学原理提高波及系数和洗油效率的提高采收率技术，室内实验和矿场试验表明，这是一种具有潜在经济效益的方法，特别对枯竭的生产井更是如此。在美国，枯竭井（指产油速度少于10 bbl / d的井）的产量占总采油量的将近50% ;我国的一些大油田近些年来相继进入高含水后期，所以需要一种低成本的提高采收率方法（I CFA.微生物提高采收率方法尤其适合应用于今天这种经济环境。有足够的资料证明了利用微生物技术增加原油生产的可行性和灵活性。在世界各地，己经有大量的生产井和油田己经用微生物配方进行了处理。
2、论文综述/研究基础
我国的石油微生物学始于1955年，开始研究细菌勘探；20世纪60年代研究了油田微生物的生态学和生理学，参加的单位有中国科学院、石油部、地质部及一些大专院校，并取得了丰硕的成果。近几年来，国外（主要是美国）在这方面己有成熟的技术，并开始向我国市场渗透，这在一定程度上促进了我国这方面研究的发展。我国吉林油田和中国科学院微生物研究所协作研究了一项微生物吞吐技术，有较好的增油效果，但在注入微生物的`同时需要注入大量的营养液，这相对提高了原油开采的成本。大庆油田在“七五”国家科技攻关成果简介中，介绍了利用微生物地下发酵的研究成果。利用微生物地下发酵提高原油采收率是当前引起石油界广泛重视的一种生物技术。大庆石油管理局和中科院微生物所在国内首先开创了将细菌直接注入地下提高采收率的室内评价方法，大庆石油管理局利用混合菌种进行了创造性的放大发酵工艺、注入工艺及矿场试验研究。据中国石油报1995年5月19日报道，油田专用微生物工厂在徐州建成（投放1吨微生物可增产原油400吨）。它由华东输油管理局和美国迈克尔？白克微生物公司合资兴建，采用美国的技术设备，按美国标准生产油田专用微生物，年产微生物7万加仑。大大促进了国内微生物提高采收率研究的进展。
3、参考文献
[1]Rebecca S. Bryant, Rhonda P. Lindsey. WORLD-WIDE APPLICATIONS OF MICROBIAL
TECHNOLOGY FOR IMPROVING OIL, RECOVERY SPE/DOE35356, 1996: 127-134
[2]汪卫东。我国微生物采油技术现状及发展前景。石油勘探与开发。2002, 29（6）：87-91
[3]张训化微生物采油数值模拟研究。硕士学位论文。中国科学院渗流流体力学研究所， 2003. 9一10
[4]王岚。微生物采油及其作用机理。世界地质。2002, 21（ 2） : 138-140
[5]裴雪林，刘丽，赵金献。微生物采油技术在国内外的研究现状及实例。断块油气田1997 5（4）：61一66
[6] Corapcioglu, and A. Haridas: “Transport and Fate of Microorganisms in Porous Media:A Theoretical Investigation,” J. of Hydrol., Vol. 72, （1984）：149-169.
[7] Bear, J: Dynamics of Fluids in Porous Media, New York, Elsevier, （1972）：605一616.
[8] Bu' Lock, J. and B. Kristiansen: Basic Biotechnology, Academic Press, New York, （1987）75一131.
[9] Bajpai, . and M. Reuss: “Coupling of Mixing and Microbial Kinetics for Evaluating the Performance of Bioreactor,” Can. J. Chem. Eng., 60, （Jun. 1982）：384-392.
[10] Cernansky, A. and R. Siroky: “Deep-Bed Filtration on Filament Layers of Particles Polydispersed in Liquids,” International Chemical Engineering, Vol. 25, No. 2, （1985） 364-375.
[11」Adamson, A. W:Physical Chemistry of Surfaces, 3rd Edition, Joh Wiley&Sons, Inc., New York, （1976）。
[12]Knapp, ., F. Civan, and . McInerney: “Modeling Growth and Transport ofMicroorganisms in Porous Formations,” Presented at IMACS, Paris, France, Jul. 18-22,1988, Proceedings of 12th World Congress on Scientific Computation, Edited by , P. Borne, and J. Vignes, Vol. 3, （1988） 676-679.
[13]Zhang, X., . Knapp, and . McInerney: “A Mathematical Model for Microbially Enhanced Oil Recovery Processes,” Proceedings of the 1992 International Conference onMicrobial Enhanced Oil Recovery, Developments in Petroleum Science, Edited by and A. Woodhead, Vol. 39, （1993）：171一186.
[14] Chang, , and F. Civan: “Modeling of Formation Damage Due to Physical and ChemicalInteractions between Fluids and Reservoir Rocks,” SPE 22656, Presented at the 66th ., Dallas, TX, Oct. 6-9, 1991.
[15]Popplewell, ., . Campanella, and M. Peleg: “Quantitative Characterization of Particle Size Distributions of Instant Coffee Mechanical Attrition,” J. of Food Science, Vol.
药学毕业论文开题报告篇3 题 目 名 称： 番泻叶对小鼠尿量的影响 研究现状： 一、普鲁兰酶 普鲁兰酶(Pullulanase，. 2. 1. 41)是一种能够专一性切开支链淀粉分支点中的α糖苷键，从而剪下整个侧枝，形成直链淀粉的脱支酶。普鲁兰酶还可以分解普鲁兰多糖，普鲁兰酶来源于微生物，R-酶则来源于植物。普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气气杆菌Aerobacter. aerogenes}(典型菌为肺炎克雷伯氏杆)发酵获得，他们报道了该酶良好的酶学性能。之后，各国的科研人员经过广泛深入研究，从不同的地区、微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。 在淀粉加工工业中，α淀粉酶最为常用，它的功能是水解淀粉的α-1,4糖苷键，单独用它时，产物中含有大量分支结构的糊精，其中就含有大量的α-1,6糖苷键。假如不把淀粉的α-1,6糖苷键彻底分解的话，势必会造成很大的浪费。自然界中，存在有能分解淀粉的α-1,6糖苷键的酶，通称为解支酶。如寡α-1,6葡萄糖苷酶( , Oligo-l,6-glucosidase )，普鲁兰酶( )，异淀粉酶( , Isoamylose )，支链淀粉一6-葡聚糖酶( )，其中普鲁兰酶要求的底物分子结构最小，故而可以将最小单位的支链分解，导致可以最大限度的利用淀粉，所以在淀粉加工工业中有着重要的用途和良好的市场前景。故而许多国家都争相开发，但是到现在为止，只有丹麦的NOVO公司具有普鲁兰酶的生产能力。我国只有向其进口，但是其价格昂贵，限制了普鲁兰酶在我国的应用。其实，我国早在七十年代就开发普鲁兰酶的产生菌，但是该菌的酶学性质不适合生产，至今我国在普鲁兰酶的国产化方面还没有报道。 在淀粉的加工行业上，对普鲁兰酶的酶学性质的要求是耐酸耐热，其原因是因为通常使用外加酶化法，由于所用酶类的限制，普鲁兰酶的添加可以在两步反应的任何一步，但必须满足上述的反应的条件。因此所开发的普鲁兰酶的酶学性质必须满足现有的酶法水解制糖的条件，也就是耐酸耐热。 二、普鲁兰酶的研究现状 1.产普鲁兰酶的微生物 普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气杆菌(Aerobacter aerogenes)发酵获得。他们报道了该酶的良好性能之后，各国的科研人员经过广泛深入的研究，从不同的地区的微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。但是迄今为止，尽管发现许多微生物能够产普鲁兰酶，但是由于当今工业生产条件(酸性，温度)，大多数微生物所产的普鲁兰酶并无商业价值。以下便介绍一下普鲁兰酶的生产菌种。 蜡状芽抱杆菌覃状变种(Bacillus cereus ) 由日本的ToshiyukiTakasaki于1975年发现。该菌同时产生两种淀粉酶:β-淀粉酶和普鲁兰酶。最佳作用条件为pH6～，温度50℃，最大转化率(淀粉水解产生麦芽糖)大约为95%.酶学研究中发现，此酶在pH5，温度60℃依然保持大部分活性，该菌的营养细胞呈棒杆状，聚集成长短不等紊乱链状，无运动性，格兰氏阳性，产芽抱时细胞无明显膨胀。该菌最适生长温度30℃～37℃ ,最高生长温度在41℃～45℃，可以利用葡萄糖，甘露糖，麦芽糖，海藻糖，淀粉和糖原。 嗜酸性分解普鲁兰多糖芽抱杆菌() 上世纪八十年代初，丹麦Novo公司获得此菌，此菌所生产的普鲁兰酶耐热 (60℃)，耐酸()。该公司经过投入巨资开发研究，1983年Nov。公司在日本和欧洲市场同时商业化销售，商品名Prornozyme。如今，它是应用最广，产量最大的普鲁兰酶。呈棒状，深层发酵几小时后，可观察到类原生质体的膨胀细胞，较稳定，饱子呈圆柱体或椭圆体。格兰氏反应阳性，37℃生长良好，45℃以上和pI-1高于以上不长，在以普鲁兰糖为碳源的培养基(( ～)上生长良好。 枯草芽饱杆菌(Bacillus subtilis) 1986年，日本的Yushiyuki Takasaki报道了一株能产生耐热耐酸普鲁兰酶的菌种，被命名为Bacillus subtilis TU。此菌种所产生的酶为普鲁兰酶和淀粉酶的混合物，可水解淀粉为麦芽三糖和麦芽搪.水解普鲁兰糖为麦芽三糖，其中普鲁兰酶最佳作用pH为～，但在时亦有约50%的酶活，此普鲁兰酶最佳作用温度60℃。 耐热产硫梭菌(Clostridum Themosulfurogenes) 1987年.德国的等报道了一株能同时产a淀粉酶、普鲁兰酶和葡萄糖淀粉酶的菌种:耐热产硫梭菌。该菌种所产普鲁兰酶有较广的温度适应范围(40℃～85℃)，在～有较高的活性，在如此广的范围内都有较强活力无疑将扩大该普鲁兰酶的应用领域. Bacillusnaganoensis,Bacillus deramificans, 上世纪九十年代，Deweer发现了普鲁兰酶产生菌Bacillus naganoensis;Tomimura筛选出Bacillus deramifrcans。这两株菌所产的普鲁兰酶的酶学性质与Bacillus. Acidopullulyticus的酶学性质相似。这两株菌都是中度嗜酸菌，在以上就不生长，温度超过45℃以上同样也不生长。这两株普鲁兰酶产生菌的发现，进一步拓宽了普鲁兰酶的应用。 产普鲁兰酶的高温菌菌种 自上世纪八十年代以来，人们逐渐意识到在通常的自然条件下，很难筛选得到极端耐热的普鲁兰酶生产菌种，于是各国的科学家便把目光转移到温泉嗜高温细菌的筛选，而且现在已经取得较多的成果。Bacillus如vorcaldarius所产普鲁兰酶的最适温度和pH分别是75～85℃, , Thermotoga maritime的最适温度和pH分别是90℃, , Thermurs caldopHilus的最适温度和pH分别是75℃,, Fenidobacterion pernnavoran最适温度和pH分别是80～85℃, 2.普鲁兰酶的分子结构 至今为止，许多普鲁兰酶的基因己经被克隆，但是还没有见到任何有关普鲁兰酶结构的报道，但是在根据序列相似性对糖普键水解酶的分类，普鲁兰酶属于第13家族，α淀粉酶家族，这个家族中包含了30多种酶，可以分为水解酶，转移酶。异构酶三大类。这些酶能够水解和合成α～,α～,α～,α～,α～,α～糖苷键。其中很多酶的结构已经被报道，它们都采取了(β/α)8的结构，通过生物信息学的研究，这个家族的蛋白都有一个共同的结构，酶的活性中心都是(β/α)8折叠筒的结构，命名为结构域A。第13家族的大多数酶还具有结构域B，它是位于(β/α)8折叠筒中，第三个β片层与第三个α螺旋之间的一段序列，其特点是结构和长度差异较大，推测其功能是与底物的结合有关。在紧接着(β/α)8折叠筒后，还有C结构域，紧接C结构域，部分家族成员还有结构域D。 3.普鲁兰酶的应用 普鲁兰酶，在食品工业中是一种用途广泛的酶制剂和加工助剂。它能专一性分解淀粉中的支链淀粉和糖原分子及其衍生的低聚糖分支中的α～l, 6糖苷键，使分支结构断裂，形成长短不一的直链淀粉。因此，将该酶与 其它 淀粉酶配合使用时，可使淀粉糖化完全。近年来，普鲁兰酶己作为淀粉酶类中的一个新酶种，应用于淀粉为原料的食品等工业部门，在食品工业中有如下几方面的作用: 单独使用普鲁兰酶，使支链淀粉变为直链淀粉 直链淀粉具有凝结成块，易形成结构稳定的凝胶的特性，因此，可作为强韧的食品包装薄膜。这种薄膜对氧和油脂有良好的隔绝性，又因涂布开展性好，故适合于作为食品的保护层。它还适合于淀粉软糖制造，也可用作果酱增稠剂，用于装油脂含量高的食品，以防止油的渗出以及肉食品加工。近年来在食品工业中提倡使用可被生物降解的薄膜，直链淀粉在这些方面具有较大的发展前途。豆类直链淀粉含量较高，因此绿豆淀粉制成的粉丝韧性比其它淀粉好，如果用普鲁兰酶处理谷物淀粉，再制成直链淀粉后，可以制成高质量的粉丝。一般谷物淀粉中，直链淀粉含量仅占20%，支链淀粉含量约为80%。工业上每生产1吨直链淀粉就有4吨副产品的支链淀粉。美国虽然通过遗传育种的方法.得到含直链淀粉60%玉米新品种，但不大适于大量生产。国外已采用普鲁兰酶改变淀粉结构，可使支链淀粉变为直链淀粉。据报道，采用此法收率可达100%.制造直链淀粉的方法为，先采用普鲁兰酶分解经液化的分支部分，使其转变为直链淀粉，并以丁醇或缓慢冷却法沉淀淀粉。再回收含少量水分的晶型沉淀物，最后通过低温喷雾干燥法制成粉状的直链淀粉。 普鲁兰酶与β～淀粉酶配合使用生产麦芽搪 饴糖是我国传统的淀粉糖产品，其中所含部分麦芽糖，广泛用于糖果、糕点等食品工业。目前生产方法是以α～淀粉酶进行液化，再用β～淀粉酶水解支链淀粉，这样只能水解侧链部分。接近交叉地位的α～糖苷键时，水解反应停止。但如果使用普鲁兰酶共同水解，便能使分支断裂，提高淀粉酶水解程度，降低了β极限糊精的含量，大大提高了麦芽糖的产率，有利于生产麦芽搪浆。目前对加普鲁兰酶进行糖化己作了较大规模的试验。 试验条件为。每批投料量约为900公斤碎米，粉浆浓度为15～16Be°数皮用量(对碎米计)，β～淀粉酶活性2,000单位/克以上，;普鲁兰酶活性45,000～55,0 00单位/克，系由产气气杆菌生产，每批用量为1公斤。试验结果表明，加入普鲁兰酶糖化的试验糖与对照糖品相比，还原糖平均增加，麦芽糖含量平均增加了，糊精含量平均减少了高浓度麦芽糖浆较之高浓度葡萄搪浆，具有不易结晶，吸湿性小的特点，所以高浓度麦芽糖浆在食品工业中有着广泛的用途。采用普鲁兰酶与p一淀粉酶配合使用，成本低廉，麦芽糖收率达到70%左右，其至更高。 用于啤酒外加酶法糖化 啤酒生产中麦芽，既是酿造啤酒的主要原料，也为酿造过程提供了丰富的酶源。在啤酒酿造的糖化过程中，麦芽中分解淀粉的主要酶是α～淀粉酶、β～淀粉酶和分解淀粉α～1. 6糖瞥键的R一酶(植物普鲁兰酶或植物茁霉多糖酶)。β～淀粉酶与另两种淀粉酶协同作用，可使淀粉分解成麦芽糖(也包括少量的麦芽三糖和极少量的葡萄糖)和低分子糊精。使麦芽汁有比较理想的糖类组成。在工业生产中为了节约麦芽用量，采用所谓外加酶法糖化，即在减少麦芽用量的前提下，增加淀粉质辅助原料的比率，并加入适当种类的酶制剂进行搪化。要使大麦及其它辅助原料糖化完全，需要外加a一淀粉酶和分解α～糖苷键的普鲁兰酶制剂等。单独使用a一淀粉酶时产生麦芽糖和麦芽三搪是很不完全的。假如分解淀粉α～糖苷键的酶活性不足，淀粉分解就不完全，其结果是可发酵性糖含量低，制成的啤酒发酵度达不到要求。若采用能分解α～和α～糖苷键的糖化型淀粉酶，则其反应产物为葡萄糖，容易使酒味淡薄。采用普鲁兰酶与α～淀粉酶协同，效果良好，其分解产物主要是麦芽糖和少量的麦芽多糖。采用外加酶法糖化时，加入酶制剂的用量为:淀粉酶6～7单位/克大麦及大米:蛋白酶，60-80单位/克，并配合以菠萝蛋白酶10ppm，普鲁兰酶50单位/克大麦。以上三种酶制剂均添加于糖化或酒化开始。 总之，普鲁兰酶无论作为酶制剂和食品工业的加工助剂均有广阔的发展前途。 研究目的和意义： 酶制剂工业是上世纪七十年代就己经形成的一个重要的产业，目前世界酶制剂总产值达100亿美元，我国的产值约为100亿人民币，并且随着其应用领域的不断扩大以及新酶种的开发，这一市场正在迅猛发展。但是全球酶制剂产业几乎被几家外国公司所垄断，其中丹麦的NOVO公司几乎占全球总销售额的一半。本研究对普鲁兰酶的开发，对酶制剂产业的发展有重要的意义。 其次我国自从七十年代开始便对普鲁兰酶进行研究开发，但是所开发得到的普鲁兰酶，既不耐热也不耐酸，这就使其在工业化应用中受到了局限。为了改变我国对进口产品的依赖，填补我国这一领域的空白，寻找一条国产化的道路，本研究的目的是利用自然微生物资源，普鲁兰酶，提高我国淀粉原料的利用率，从而提高整个淀粉加工行业的生产率，这对我国淀粉加工产业的意义是不言而喻的。 研究内容(内容、结构框架以及重点、难点)： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集; (2)菌种初筛; (3)菌种复筛; (4)菌种保藏方法; (5)酶活力测定方法的建立。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响; (2)初始PH对发酵产酶的影响; (3)接种量对发酵产酶的影响; (4)发酵温度对产酶的影响; (5)金属离子对产酶的影响。 重点或关键技术： (1)纯菌株的分离; (2)菌株的鉴定方法的选择。 研究方法、手段： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集：选择适合产生的地点(面粉厂.菜地.果园等)采集土样 (2)菌种初筛：在采集的土样用无菌水稀释后，在含有淀粉类的培养基中做平板涂步， 37℃培养48h后，用碘液进行显色反应，将有淀粉酶产生的菌落接于斜面中保存。 (3)菌种复筛：将前期分离的能产生淀粉酶的菌株涂步于普鲁兰糖平板上，37℃培养48h后用95%乙醇进行透明圈实验。有透明圈产生说明菌株产生普鲁兰酶，将产生透明圈的菌落挑于斜面培养基培养。 (4)菌种保藏方法： 采用4℃低温保藏。 (5)酶活力测定方法的建立：采用发酵培养液经过离心后利用DNS显色法 520nm测定吸光值，测定标准葡萄糖标准曲线，利用标准曲线计算普鲁兰酶酶活大小。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响：采用不同碳源，氮源培养基培养一段时间，测定酶活力。(其他条件相同：接种量，装瓶量，初始PH值，转速，培养时间。) (2)初始PH对发酵产酶的影响：采用相同发酵培养基，在不同初始PH下接种等量种子液。在相同条件下培养，测定发酵液的酶活。(其他条件相同：接种量，装瓶量，转速，最佳培养温度，最佳培养时间。) (3)接种量对发酵产酶的影响：在发酵培养基中分别接入2%，4%，6%，8%， 10%，14%，18%的种子培养液于最佳碳源，氮源，最佳初始PH的培养基中，在相同条件下培养，分别检测酶活。(采用以上确定的最佳碳源，氮源，最佳初始PH。) (4)发酵温度对产酶的影响：采用相同培养基，在不同温度下(25℃，30℃，35℃，40℃，45℃)培养一定时间，测定酶活力。 (5)金属离子对产酶的影响：在基础培养基中加入少量不同金属离子，发酵后测酶活。(金属离子有： 锰离子，钙离子，锌离子，镁离子，铁离子，铜离子。) 研究进度 ：完成项目总体进度30%，样品土样的采集及前期的准备工作,菌株的初筛，包括(样品土样原液的涂步培养及摇床培养，产支链淀粉酶菌株的挑选及斜面培养)。 ：完成项目总体进度50%,菌株的复筛，包括(产普鲁兰酶菌株的筛选及斜面培养),葡萄糖标准曲线的测定,酶活测定方法的建立,并以酶活大小对菌株进行再次筛选。 ：完成项目总体进度80%,产酶条件的研究。包括：碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。并通过各中单因素试验确定发酵培养基的最佳碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。 2009、4—2009、5 ：完成项目总体进度100%,课题总结，撰写论文。 文献综述(包括：国内外研究理论、研究方法、进展情况、存在问题、参考依据等) 自从1961年Bender H.等人在研究一株产气气杆菌Aerobacter aerogenes(典型菌为肺炎克雷伯氏杆菌)时首次发现普鲁兰酶后，国际上对产生这种酶的微生物进行了广泛研究，发现许多微生物可以产生此酶，并筛选出一些适用于工业化生产的优良菌株。随着该酶的应用发展，对耐热性普鲁兰酶的研究也逐渐增多，已成功克隆并表达了该酶的基因。国内1976年开始对一株产气气杆菌(Aerobacteraerogenes 10016)的普鲁兰酶进行研究，对该菌株的产酶条件、酶的分离提取及酶学性质作了报道，并研究了该酶的食品级提取技术。此外，陈朝银、刘涛等人从云南温泉水样中筛选到一株产普鲁兰酶高温栖热菌菌株，通过诱导等实验将该酶的酶活从提高到170u/mL，酶产量提高了近2500倍左右，酶的最适作用温度及pH分别是75℃和，具有一定的耐热和耐酸特性。 陈金全等从温泉水样中筛选到一株产耐热耐酸普鲁兰酶的野生菌株，并根据形态、生理生化特征、细胞化学组分分析及16SrDNA序列比对、基因组DNA的G+C摩尔百分含量、同源性比对等实验，鉴定其为脂环酸芽抱杆菌属(Alicyclobacillus)的一个新种，所产酶最适作用温度为60℃，最适pH值，具有较好的耐热耐酸特性。杨云娟等利用毕赤酵母成功构建了普鲁兰酶表达量较高的基因工程菌，摇瓶发酵酶活可达，最佳发酵条件下产量可达 .酶的最适作用温度为600C，最适pH值，具有较好的耐热耐酸性。目前我国仍没有具备独立生产普鲁兰酶能力的厂商，要实现低成本、国产化的生产，还有很长的路要走。 技术应用于耐热脱支酶的研究，使耐热异淀粉酶的研究有了很大发展。Coleman等人将嗜热厌氧菌T. brockii普鲁兰酶基因克隆到中得到的克隆子分泌的普鲁兰酶数量高于出发菌株，Okada等人将Bacillus Steanther, onhiu:中编码热稳定异淀粉酶的基因克隆到:中，得到的转化菌株其异淀粉酶能在60 ℃稳定15分钟。Burchadf将。ostridium thermosulf urogenes DSM38%的嗜热异淀粉酶基因克隆并在中表达，所得酶的最适pH和最适温度与出发菌相同，而且在高温下仍能保持活性.Antranikiam等人将Pyrococcus舟riousous的异淀粉酶基因克隆到中并分离得到了酶蛋白。尽管如此，目前尚未有已将转基因的耐热性异淀粉酶工程菌应用到工业生产中的报道。众所周知，利用物理和化学诱变剂单独或复合处理微生物细胞是选育高产变种菌株行之有效的经典方法，它在为培育多种抗生素、氨基酸、核苷酸激酶(尤其是蛋白酶和淀粉酶)的高产变种菌株方面曾经起过极为重要的作用，至今仍然是方便易行和行之有效的方法之一。 主要参考文献： [1][美]惠斯特勒等编王雏文等译.淀粉的化学与工艺学[M].北京：中国食品出版社，1988 [2]张树政.酶制剂工业[M]. 北京: 科学出版社，1998 [3]邬显章.酶的工业生产技术[M]. 吉林: 吉林科学技术出版社，1988 [4]Taniguchi H, Sakano Y, Ohnishi M, Okada G(1985) Pullulanase[J].TanpakushitsuKakusan Koso. 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