撰文｜程莉
责编｜李晓明
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每千克身价高达几十万，冬虫夏草到底是食品？药品？还是保健品？“身份”扑朔迷离，命运数度“反转”，背后闪现各方利益角逐，但并没有妨碍它成为中草药里炙手可热的“明星”。
近段时间，冬虫夏草包括其产品中的价格之“王”——极草，被国家食品药品监督管理总局(以下简称“国家食药总局”)公开批评，利益相关各方争辩你来我回，舆论一度甚嚣尘上。
自始至终，被捧上天的冬虫夏草是否含有有效成分饱受专业人士诟病。综其一生，不过是一个“中国式”罢了。
1.籍籍无名
中国传统的中医药学和我国绝大多数学者所指的冬虫夏草, 是特指麦角菌科冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科昆虫冬虫夏草蝙蝠蛾幼虫尸体的复合体，主产于四川、青海、西藏、云南等海拔4000～5000米的高山草甸中。其他500多种虫草属真菌寄生并能产生子座的菌物结合体都只能称作虫草。
研究表明，蝙蝠蛾拟青霉和中国被毛孢同时存在于天然冬虫夏草中。2005年10月，中国菌物学会确认冬虫夏草的学名是Cordyceps sinensi (Berk.) sacc.，中国被毛孢（Hirsutella sinensis）为冬虫夏草的唯一无性型菌种，异名有蝙蝠蛾多（被）毛孢、中华束丝孢。
我国关于冬虫夏草的记载最早见于清代吴仪洛1757年著就的《本草从新》：“冬在土中，身活如老蚕，有毛能动，至夏则毛出土上，连身俱化为草，若不取，至冬则复化为虫。”此后，多种中医书籍都记载了冬虫夏草。《中华人民共和国药典》1990年版收录了冬虫夏草。不过，解放军总医院心内科主任医师吴海云对此并不为意，他在接受媒体采访时表示采访时说，在中医古籍中，几乎所有东西都是药，诸如指甲、灶灰、粪便都是药，都能在古籍中找到“功效”。
而在传统的藏医学中，虫草产地玉树州治多县的藏药师青梅然丁此前接受新华网采访时称：“虫草往往只发挥药引的作用。”在青海省藏医院数百种复方药物中，只有一种用于治疗妇科疾病的制剂用到了冬虫夏草。藏医药典《甘露本草明镜》中关于虫草的功效也只有一句话：“强身，补肾，用于治疗肝胆系统疾病。”北京中医药大学中药生药系主任张贵君也表示，传统中药配方中虫草用得很少。
虫草酸被认为是冬虫夏草的功效成分或标志性成分，但其实虫草酸就是甘露醇——一种非常普通而便宜的化工产品，被广泛用于食品、药物当中，一千克几十元而已。
1951年,德国科学家Cuningham等观察到被蛹虫草寄生的昆虫组织不易腐烂,随后从中分离到一种腺苷类活性物质, 确定其结构式为3’-脱氧腺苷，命名为虫草菌素, 又称虫草素，1960年已经实现了全化学合成。不过化学合成不能规模化生产，所以目前市场上的虫草素主要是通过人工培养蛹虫草（Cordyceps militaris）获得。虫草素是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗生素，也是商家所吹捧的冬虫夏草的另一种活性成分。
但实际上，多项研究表明冬虫夏草中并不含虫草素。中科院微生物所真菌学国家重点实验室研究员董彩虹在接受媒体采访时表示，他们实验室采集了青藏高原不同产地的冬虫夏草，对其标本和液体发酵的菌粉进行检测后发现：“冬虫夏草里虫草素的含量超出了我们的检测范围，我们检测不到它，可以说冬虫夏草里基本不含虫草素。” 而据澎湃新闻报道：早在2011年，中科院上海生科院植物生理生态研究所研究员王成树就发表了关于蛹虫草基因组的研究成果。2013年，其课题组又发表了关于冬虫夏草菌基因组的研究论文。这些研究表明：冬虫夏草菌的基因组并没有合成虫草素的基因，所以是不能合成虫草素的，而蛹虫草菌是可以合成虫草素的。
在20世纪70年代乃至之前，冬虫夏草还非常低调，与传统滋补品人参和鹿茸相比，仅被当作“中药三宝”里最寻常的一种药材。60年代，在西藏1千克冬虫夏草可换两包单价3角钱的香烟;70年代，在青海、西藏，冬虫夏草的国家收购价为每千克21元。1974年，在青海省果洛州，不管什么品相的冬虫夏草的价格都是28元/千克左右。
2.身价暴涨
在野外，幼虫被侵染又长成冬虫夏草的几率很低，因此天然冬虫夏草资源很稀缺，人工培植也还没有获得成功，每年全国总产量仅80～150吨。随着需求增长，冬虫夏草的价格出现了一定程度的上升。1983年，上等冬虫夏草的价格涨到了300元/千克，而同一时期长白山区的人参每千克在60～80元左右，这个价钱相当于当时一个工人一个多月的工资。1990年左右，冬虫夏草价格涨至平均1000元/千克。相反，人参价格降至50元/千克。
冬虫夏草在公众眼中第一次公开高调露面伴随着另一个——马家军。1993年4月，马家军在天津集体刷新女子马拉松全国纪录；8月在斯图加特世锦赛包揽女子1500米、3000米、10000米全部3枚金牌；9月在七运会上狂破世界纪录；10月在西班牙夺世界杯马拉松赛女子个人和团体冠军。震惊世界的同时，马家军也一度被国际质疑服用兴奋剂，马家军拿补品、中草药作挡箭牌。除了大家记忆中非常熟悉的“中华鳖精”，还有冬虫夏草。因此，到了上世纪90年代中期，虫草零售价涨到了2000元／千克，上等冬虫夏草价格则更高。最后作家赵瑜的报告文学《马家军调查》证实马家军确实是服用了兴奋剂，队员成绩和“中草药”无关。
2003年非典时期，传言吃冬虫夏草能增强免疫力，甚至能包治百病，虫草一夜之间变成“神草”，引发市场狂炒，其价格一路暴涨，上等冬虫夏草价格从几千元／千克猛涨到万元／千克。从此，虫草正式步入“奢侈保健品”行列，计价单位也从“千克”变为“克”。
之后的2005年和2006年，冬虫夏草价格持续走高，在2007年时价格更是攀上了历史性巅峰，其中每千克2000条规格的冬虫夏草每千克高达20万元。
2008年，由于金融危机影响，虫草的销量严重受挫，当年均价下降了40%左右。到了2010年和2011年，受生态破坏和地震等自然灾害的影响，不少冬虫夏草产区出现减产，有的地区减产幅度甚至高达40%，供应萎缩使冬虫夏草行情再次上涨，价格重新一路飞涨。2011年7月，虫草价格超过2007年的历史最高点，“西藏商城”显示，2200条规格的冬虫夏草批发价万元/千克，而1800条规格的则达到21万元/千克。此后，冬虫夏草价格一直稳中有升。
而据《南方日报》称，业内人士透露除了产量不高，炒家囤货也是虫草涨价的一大原因。从虫草产区到消费城市，多级经销商层层囤货、层层加价。一些买家常年驻扎在青海西宁，在合适的时机出手购入囤货。
经历了多事的2015年和2016年，冬虫夏草的价格持续走低。从中国中药协会中药材信息中心官方网站中药材天地网上可以看到，2000条／千克规格的冬虫夏草，青海产地价格从2015年4月的万元／千克，降至最近价格万元／千克，西藏市场价格则由21万元／千克降至16万元／千克。尽管如此，四十年来，冬虫夏草价格飞涨了近万倍。而冬虫夏草中的“极品” ——极草5X冬虫夏草价格则更为惊人，在其官网上一瓶极草5X冬虫夏草纯粉片—双层片，售价达16900元。极草号称100%冬虫夏草，按照一瓶45片、每片克规格，可折算其价格每千克超过100万元。
3.食品？药品？还是保健品？
尽管冬虫夏草的身价一路飞涨，但它是食品？药品？还是保健品？其身份扑朔迷离。
虽然《中华人民共和国药典》收录了冬虫夏草，但张贵君表示：“收录了只能说它是中药材，但药材和药品还不是一回事。药材，农民可以随便买卖，但药材不能讲功效，只有药品才能讲功效，而药品对应什么疾病，要有实验药理学验证，对人体的作用应该通过临床实验来验证。” 事实上，对于冬虫夏草的功效，一直没有较高级别的论文证据支撑，这是业内共识。
其实早在2001年，当时的卫生部就已明令限制冬虫夏草这类国家二级保护物种作为保健食品原料，保健食品中的冬虫夏草应以冬虫夏草菌丝体蝙蝠蛾拟青霉替换。2005年，接手保健品监管的国家食药总局进一步明确，保健食品的原料使用了冬虫夏草的，应以人工繁殖的菌丝体予以替换。
2008年，极草以食品类产品许可证上市，当时产品外包装上显示为“青卫食证字(2008)第630000-400025号”。但是2009年8月6日，卫生部发文《蜂胶、冬虫夏草等不得挂“食”字号》明确指出：“卫生部未曾批准过冬虫夏草作为普通食品原料使用。国家中医药管理局组织专家讨论后也认为，目前冬虫夏草尚缺少作为食品长期服用的安全性评价研究数据，建议暂不作为食品原料使用。”
2010年12月国家质检总局也发布《关于冬虫夏草不得作为普通食品原料的通知》，严禁使用冬虫夏草作为食品原料生产普通食品。
于是，青海省卫生监督所在2011年4月发布公告，撤销了“极草”的食品批号，同时规定不得在产品包装上标注卫生许可证。
然而，青海省食药监局2010年12月7日出台了《青海省冬虫夏草中药饮片炮制规范》，将“极草”定义为冬虫夏草中药饮片。2012年6月份，国家食药监总局下发《关于冬虫夏草中药饮片炮制规范有关问题的通知》，指出冬虫夏草粉碎及压制成片不属于中药饮片炮制范畴，明确要求青海省对“规范”予以修正，妥善处理，切实加强对中药饮片的监督管理。
直到2012年8月15日，国家食药总局印发了《冬虫夏草用于保健食品试点工作方案》，第一次允许冬虫夏草直接被用为保健食品的原料，试点时限为批准试点企业相关产品之日起5年。同仁堂、康美药业、青海春天、劲牌有限公司、江中药业五家企业进入了保健品试点企业名单，这终于让冬虫夏草保健品拥有了“临时身份”。
2014年7月，冬虫夏草的热点产品“极草”又一次发生了转变。当时青海省食品药品监督管理局下发了《关于冬虫夏草纯粉片相关事宜的通知》和《关于撤销青海省冬虫夏草中药饮片炮制规范的公告》，明确规定：青海春天生产的冬虫夏草纯粉片的新身份为青海省出产的冬虫夏草经加工制成的产品，为青海省综合开发利用优势资源的试点产品。基于青海春天研发的冬虫夏草纯粉片的创新属性，不归属于既有监管体系中的药品，也不归属于既有监管体系中的食品或保健食品，其产品作为滋补类特殊产品进行管理。这样，极草获得了一个仅包括它一家的“滋补类特殊产品”身份。而根据青海省监管部门的规定，其生产依旧可以获得《药品生产许可证》。
4.陷入纷争
2016年2月4日，国家食药总局在其官网发布了《关于冬虫夏草类产品的消费提示》（以下简称《消费提示》），该提示称：近期，食品药品监管总局组织开展了对冬虫夏草、冬虫夏草粉及纯粉片产品的监测检验。检验的冬虫夏草、冬虫夏草粉及纯粉片产品中，砷含量为～毫克/千克。冬虫夏草属中药材，不属于药食两用物质。有关专家分析研判，保健食品国家安全标准中砷限量值为毫克/千克，长期食用冬虫夏草、冬虫夏草粉及纯粉片等产品会造成砷过量摄入，存在较高风险。
2月6日，青海春天发布公告回应称，控股子公司春天药用生产销售的虫草纯粉片为“唯一具备合法生产、销售身份”的此类产品。公司各项试验结果均显示，以净制冬虫夏草为原料的冬虫夏草纯粉片安全无毒。
不久之后的3月4日，国家食药总局在其官网发布了《关于停止冬虫夏草用于保健食品试点工作的通知》，停止冬虫夏草用于保健食品试点工作，此时距离该期限结束还差2年时间。
迫于各方压力，青海春天向国家食药总局申请信息公开，要求公开《消费提示》所依据的检测文件。于是，3月28日，青海春天收到了国家食药总局的回函《政府信息公开告知书》，从该告知书中可知，早在2015年7月11日，国家食药总局便告知青海省人民政府停止冬虫夏草纯粉片作为综合开发利用优势资源的产品试点以及冬虫夏草用于保健食品试点工作。但青海春天否认瞒而不报，表示在2016年3月28日收到告知书才看到该文。
2016年4月1日，青海省食药监局向青海春天子公司春天药用发出《关于青海春天药用资源科技利用有限公司换发〈药品生产许可证〉的批复》。但相关人士认为，青海春天获得《药品生产许可证》只能说明它有研发药品的能力和资格了，并不代表“极草”含片现在就有了药品身份，因为青海春天的冬虫夏草纯粉片产品目前还未获得药品批准文号。
目前，青海春天控股子公司春天药用资源科技利用有限公司已被要求停止冬虫夏草纯粉片产品试点以及相关产品生产经营。公司股票停牌中。
4月5日晚间青海春天连发两则公告，一方面搬出关联公司三普药业有限公司进行救场，春天药用将获得其冬虫夏草为原料的药品全国总经销权授权；另一方面，将向国家食药总局沟通再度申请其公开发布《关于冬虫夏草类产品的消费提示》所依据的法律法规等。
在国家食药总局网站数据库中含有冬虫夏草成分的国产保健食品共有19条记录，包括同仁堂的总统牌冬虫夏草灵芝提取物西洋参提取物三七提取物口服液、劲牌生物医药有限公司的两款冬虫夏草胶囊。而且所有产品宣称的保健功能都是调节或增强免疫力，个别产品还包括抑制肿瘤或辅助抑制肿瘤。国家保健食品评审专家金宗濂教授指出，我国现有一万多种保健食品，60%都是增强免疫功能的，“增强免疫功能”是保健食品申请进入市场时最容易通过的。
然而，对于宣称的“调节免疫功能”，吴海云认为这是一种含糊而讨巧的说法：“到底是增强还是降低免疫功能?还是增加某一项功能呢?免疫功能非常复杂，比如艾滋病会引起免疫功能低下，但有些疾病却是免疫过度亢进了。很多保健品都使用调节免疫的说法，这是卫生管理部门遗留的后患。听起来能增加抵抗力，但又没有临床依据，就叫调节免疫功能。”
而在药品数据库中，药品生产企业包括青海珠峰冬虫夏草原料有限公司、青海国草冬虫夏草资源开发有限公司、青海珠峰冬虫夏草药业有限公司、桓仁满族自治县恒宝参药有限公司、华东医药股份有限公司、杭州中美华东制药有限公司6家。国产药品仅有三种：青海珠峰冬虫夏草原料有限公司生产的发酵冬虫夏草菌粉、百令片和杭州中美华东制药有限公司生产的发酵冬虫夏草菌粉。不过，发酵虫草菌粉并非野生冬虫夏草，而是人工分离出冬虫夏草菌种后在人工环境下培养的，1988年获国家卫生部正式生产批件并获名“发酵虫草菌粉”。而且这三种药品都是作为中药审批的，而中药获批门槛较低。
食品生产许可获证企业(QS)包括两家，一家是青海久泰冬虫夏草酒业有限公司，其官网宣称“久泰所产产品均为保健品酒类，有虫草酒和浆果酒两种类型。而利用发酵冬虫夏草菌粉发酵液，继续发酵生成酒精，制成的虫草酒，其保留发酵冬虫夏草菌粉的多种多糖及营养物质，既有酒的香醇，又有冬虫夏草的功效。” 按照国家法规，食品不能声称功效，该企业产品的功效宣称只能是一句空话。
另一家是扬州凯尔生物科技有限公司，不过使用的是北冬虫夏草，也就是蛹虫草，与冬虫夏草不是一个东西。蛹虫草可以人工培育，能作为食品原料，价格很低。
此外，被当作中药材售卖的冬虫夏草不在食品、保健食品、药品管辖范围内，而我国中药材中标准中并没有砷含量的限量指标。
而被视为“极品”的极草则在食品、保健食品、药品数据库中，都没有找到。
冬虫夏草是青海省的重要支柱产业，据估计，青海省的冬虫夏草年交易额超过200亿元，而全国虫草产业的产值超过300亿元。冬虫夏草的去向，牵扯多方利益。但《冬虫夏草化学成分及其药理活性研究》一文中表明目前冬虫夏草的成分已基本清楚：野生冬虫夏草中含水分，粗蛋白～33%, 粗脂肪, 总糖～, 粗纤维, 水分, 灰分。此外还含有氨基酸、脂肪酸、核苷类物质、甾醇、7%～9％的甘露醇、多糖等, 这些成分是冬虫夏草发挥可能的生理活性或药效的主要物质基础。董彩虹表示，这些物质并不是冬虫夏草特有的，目前也并没有发现冬虫夏草中含有特有的活性成分。
参考文献：
1、朱佳石，郭英兰，姚艺桑，等.冬虫夏草成熟过程中中国被毛孢和蝙蝠蛾拟青霉DNA共存及竞争增殖力、化学成分变化[J].菌物研究,2007
2、刘高强, 王晓玲, 杨青, 等.冬虫夏草化学成分及其药理活性研究[J].营养研究, 2007,(1):202-206.
3、杨涛，董彩虹.虫草素的研究进展[J] 菌物学报, 2011, 30(2): 180-190
4、中华人民共和国卫生部新药审批品种(1988年3月)
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植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告
紧张又充实的大学生活即将结束，大学生们马上就要开始最难熬的毕业设计阶段，而我们做毕业设计之前要先写好开题报告，快来参考开题报告是怎么写的吧！以下是我整理的植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告，欢迎大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
毕业论文题目：
菌寄生真菌纤细齿梗孢蛋白酶基因的克隆与表达
姓名： xx 学号： xxxx
年级： xxx 专业： 植物保护
指导教师：姓名 xxx 职称 教授
学科 植物病理
山东农业大学教务处
20XX年x月x日
一、选题依据（拟开展研究项目的研究目的、意义）
菌寄生(Mycoparasitism)是发生在菌寄生真菌与寄主真菌之间的一种寄生方式，是自然界普遍存在的一种真菌与真菌之间的相互作用。一直以来，生物间相互作用及信号传导的分子机制，是当今生命科学研究的热门。利用菌寄生真菌与寄主真菌作为研究的模式系统来揭示生物相互之间的相互作用机制有重要理论和实践意义。李多川(Li,1996)先生发现纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)和串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)的菌寄生关系以来，我们实验室试图通过研究纤细齿梗孢和串珠镰刀菌，来建立菌寄生真菌与寄主真菌相互作用机制研究的模式系统，从而揭示菌寄生真菌与寄主真菌之间相互作用的分子机制。纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是串珠镰刀菌的一种重寄生真菌，该菌是一种接触性活体重寄生菌，离体试验发现其分生孢子只有在串珠镰刀菌细胞壁提取物刺激下才能萌发。这说明两者之间的重寄生关系是建立在二者识别与互作的分子机制上的(Li,2004)。在纤细齿梗孢和串珠镰刀菌相互作用过程中，几丁质酶、蛋白酶等细胞壁裂解酶可能起到重要作用。其中，蛋白酶在木霉属菌寄生真菌中的功能已经得到初步证明，而纤细齿梗孢的蛋白酶的研究还未见报道。因此，克隆纤细齿梗孢蛋白酶编码基因对于从分子水平上研究重寄生真菌和寄主识别和互作机制有着重要的意义。
二、文献综述内容(在充分收集研究主题相关资料的基础上，分析国内外研究现状，提出问题，找到研究主题的切入点，附主要参考文献)
纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是李多川教授分离得到的一种活体营养接触型菌寄生真菌[1~3]，其寄主包括Fusarium moniliformeAlternaria alternata等。近年来，我们实验室一直在努力以其为基础研究菌寄生真菌与寄主真菌之间的相互作用的分子机制。经过多年的研究，人们渐渐认识到真菌细胞壁蛋白在细胞与外界的相互作用过程中扮演着重要的角色。细胞壁蛋白研究已经成为生物间相互识别机制研究的热点。鉴于以上原因，我们实验室成功分离纯化了纤细齿梗孢的寄主之一Alternaria alternata菌丝细胞壁上的一种特异性糖蛋白——凝集素，并初步证明其在和孢子吸附过程中起到识别因子的作用[4]。近年来，菌寄生真菌细胞壁裂解蛋白酶在菌寄生过程中的作用被人们逐渐重视起来。克隆和表达菌寄生真菌的蛋白酶编码基因变得很有意义。本研究试图以菌寄生真菌纤细齿梗孢(Olpitrichumtenellum)作为研究材料克隆了其蛋白酶基因。根据氨基酸的保守序列设计兼并引物，然后采用RT-PCR和RACE是一个较为快速、简单和高效的方法。本实验根据同源保守序列设计兼并引物，通过RT-PCR及RACE-PCR的方法，克隆了蛋白酶的编码基因的全长cDNA序列，并对该基因进行了序列分析，为后续试验打下了基础。
由于Olpitrichum tenellum在离开寄主的人工培养基中很难生长，纯化其蛋白酶变得非常困难。因此，我们需要使用外源蛋白表达系统得到蛋白，进一步研究其性质，从而搞清楚其在重寄生过程中的作用。在过去的几十年间，随着DNA重组技术的不断发展，通过构建遗传工程菌株，人们可以较容易地使各种各样的天然酶的基因在微生物系统中高效表达，从而在很大程度上摆脱对天然酶源的依赖。
基因工程的表达系统有原核表达系统和真核表达系统两大类。在原核表达系统中，大肠杆菌表达系统是目前了解最深入，实际应用最为广泛的表达系统。与其他表达系统相比，大肠杆菌表达系统具有遗传背景清楚、目标基因表达水平高、培养周期短、抗污染能力强等特点。在基因表达技术中占有重要的地位，是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具[5]。
Pichia pastoris基因表达系统经过十几年发展，已基本成为较完善的外源基因表达系统，具有易于高密度发酵，表达基因在宿主基因组中稳定整合，能使产物有效分泌并适当糖基化，培养方便经济等特点。利用强效可调控启动子AOX1，已高效表达了HBsAg、TNF、EGF、破伤风毒素C片段、基因工程抗体等多种外源基因[6]，证实该系统是高效、实用、简便，能提高表达量并保持产物生物学活性的外源基因表达系统。表达系统在生物工程领域将发挥越来越重要的作用，促进更多外源基因在该系统的高效表达，提供更为广泛的基因工程产品[7]。
我们已经分离到蛋白酶的编码基因，本研究中将该基因的去掉信号肽序列的正确阅读框融合于原核表达载体pET-22b(+)和毕赤酵母表达载体pPIC9K上，分别转化 BL21及Pichia pastoris GSxx5，以期在这些菌株中有效表达该基因的编码产物，从而为以后功能研究打下基础。
1 李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.吉林农业大学学报,20：37~65.
2 21.李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.微生物学通报，25：345~347.
3 .李多川，沈崇尧.1997.菌寄生菌物与寄主菌物相互作用的研究进展.西北农业学报，6：94~98.
4 张成省，李多川，孔凡玉. alternata菌丝细胞壁凝集素的纯化与特性研究.植物病理学报，35(2)：141~147.
5 .xx.何诚，朱运松.1998.甲醇营养型酵母表达系统的研究进展.生物工程进展,18：7~xx.
6 彭毅，杨希才，康良仪.2000.影响甲醇酵母外源蛋白表达的因素.生物技术通报，4：33~36.
7 韩雪清，刘湘涛，尹双.2003.毕赤酵母表达系统.微生物学杂志，3：35~40.
三、研究方案(主要研究内容、目标，研究方法、进度)：
1、研究内容：
本课题选择纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)做为研究对象，通过RT-PCR及RACE技术分离克隆了其丝氨酸蛋白酶基因，并进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究，为进一步的研究工作打下基础。
2、研究的目标：
克隆了纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)的丝氨酸蛋白酶基因，进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究。
3、研究方法：
将纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)接种到LB培养基上，培养14个小时后，收集菌丝，然后采用总Trizol法提取RNA。再从GenBank数据库中搜索到大量的蛋白酶氨基酸序列，并根据同源性进行分类，分别设计兼并引物。再通过RT-PCR、3’-RACE、5’-RACE获得全长cDNA、DNA克隆，并将其连接到载体上，然后采用电击法将将重组质粒转入到全长cDNA、DNA克隆中，通过透析纯化蛋白酶，最后研究其特性。
四、研究进度：
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆 。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。
五、技术路线：
收集菌丝
总RNA提取
同源序列 设计引物
特性研究
RT-PCR、
3’-RACE、5’-RACE
纯化表达产物
全长cDNA、DNA克隆 转化大肠杆菌、毕赤酵母
四、进程计划(各研究环节的时间安排、实施进度、完成程度)
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。完成实验的1%。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆。完成实验的50%。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。完成实验的95%。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。完成100%。
五、导师对文献综述的评语
签字：
20xx年xx月xx日
六、专业意见
专业主任签字：
20xx 年 月 日
七、学院意见
学院(章)： 负责人签字：
20xx年xx月xx日
摘要：
针对目前浙江农林大学植物保护研究法实验教学方法、内容及手段等方面存在的一系列问题，提出了相关改革对策：优化实验课程内容，整合实验模块，学生自行设计实验方案等教学方法和手段的改革，以及课程考核方式和时间安排的调整，旨在培养学生的科研兴趣及创新能力。
关键词：
目前，国内外很多农业院校的植物保护专业均开设了昆虫研究法和植病研究法课程。为优化本科培养方案，浙江农林大学通过调整教学大纲，将植病研究法、昆虫研究法和农药研究法合并成一门植物保护研究法课程。植物保护研究法是植物保护专业重要的专业限选课程之一，是植物保护研究的重要组成部分，也是培养和提高学生专业实验技能和学习兴趣的重要课程，是一门专业性、实践性很强的实验学科。通过这门课程的教学，能使学生掌握植物保护研究的基本方法及基本原理，培养植物保护研究常规操作能力，以及查阅资料、设计实验方案和实际操作能力，提高学生的逻辑思维、整理资料、总结归纳和论文撰写的能力。笔者分析了浙江农林大学植物保护研究法实验教学中存在的问题，提出教学改革内容，并总结了改革成效。
1.实验教学存在的问题
传统实验教学的弊端传统实验教学的主要特征是“灌输式”“填鸭式”，学生在2个小时的实验过程中就是简单地按照实验指导书和实验大纲中的实验方法和步骤依葫芦画瓢，实验完成后，又按照统一的模式填写实验报告。在整个实验过程中，学生无需独立思考和分析，更谈不上发挥创新能力了。因此，很难让学生对实验产生兴趣，培养学生的创造性思维就更无从谈起了。虽然这种传统实验模式简明、清晰，有利于学生对相关结论的认可、理解和记忆，也有利于教师对整个教学过程的控制，教师和学生很轻松愉快地就能完成实验教学任务。学生走上工作岗位后，传统实验教学的弊端立即显现。学生缺乏设计实验的能力，在实验过程中缺乏发现问题、分析问题和解决问题的能力，实验后缺乏正确分析实验结果的能力。因此，传统的实验教学模式急需改革。
实验教学内容系统性不强植物保护研究法是植物保护专业本科学生的一门专业课程，其涉及的内容有昆虫研究法、植病研究法和农药研究法。在以往的实验课程中，只是简单地把这3门课的实验合在一起上，并没有把内容紧密联系在一起，如昆虫实验时，指导教师一般是教授昆虫学科的教师;而在进行植病实验时，则由讲授植病学科的教师指导。这样的实验模式难以使植物病虫害系统联系起来，学生学习专业知识不够系统和深入，容易造成理解上的片面性和孤立性，不利于掌握该专业的系统知识和技能。
实验考核不科学以往实验课程成绩评定的主要依据是实验报告，而每次实验课结束后，学生递交的实验报告只是把实验大纲(包括实验口的、原理、仪器与试剂、内容及方法)原文不动地抄一遍，实验结果更是千篇一律，这样实验就变成了预演过程，学生在实验中缺乏思考，不利于培养发现问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力，背离了实验课教学的初衷。同时，还会导致每位学生的实验成绩差异微乎其微，不具有良好的区分度。
2.教学改革内容
重视教学环节在以往的实验课程中，实验教学所需要的实验用具和材料大多数都是实验教辅人员提前准备，导致他们的工作量非常大。让学生参与实验材料的准备和管理，一方面提高了教辅人员的工作效率;另一方面可以让学生对实验过程有全面了解，获得整个科研实践过程的训练，从而养成好的实验习惯，在未来的科研工作中做到计划周密、有条不紊地安排和实施实验计划。同时，在实验教学过程中，必须教育学生认真操作、仔细观察、实事求是地记录实验结果，并对实验进行科学分析。一日_发现弄虚作假的学生，一定要严厉批评，同时帮助他们分析失败的原因，找出解决的方法，有条件的情况下，让其重新做实验，让学生充分意识到科学研究允许失败，但是不能有半l从虚假。提高学生的实践能力实践教学是培养和训练学生实践操作能力，独立分析问题、解决问题能力的重要手段，尤其对于学生创新能力的培养，具有其独特的地位和作用。该项口分别以某种农作物病虫害为主轴展开一系列的实践性实验教学，要求学生自主设计实验和执行各项实验内容，指导教师负责答疑和提供技术帮助。学生通过自己分组、调查、取样、鉴定、查阅资料、讨论制订实验方案和动手实验等一系列步骤，不仅可以很好地将课堂上所学的理论知识与实践相结合，而且还有助于提高自学能力、实践能力和团队协作能力，进一步培养科学思维和创新能力。优化实验教学内容结构将整个实验课程设置成一个综合性的大实验：分别以某个农作物上的病虫害发生规律及防治措施贯穿整个课程。将口前昆虫研究法的昆虫标本的采集与制作、昆虫人工饲养技术、昆虫生态学研究方法、昆虫生理生化研究方法、昆虫分子生物学研究方法和害虫综合治理研究方法5个实验和植病研究法的植物病害调查、植物病原菌分离与鉴定技术、植物病原菌分子生物学鉴定技术、植物病原真菌遗传转化技术和植物病害综合治理技术5个实验合并成1个综合性大实验，将植物病虫害研究以故事的形式紧密地整合在一起，让学生将课堂知识与田间实际应用有机地联系在一起，加深对理论知识的理解，提高学习兴趣。整个实验就是以具体的作物病虫害发生为时间轴，具有很强的连贯性和系统性，学生只有认真完成每一个实验，才能很好地保证后续实验的顺利进行，有助于增强学生的责任感和团队合作精神，同时也改变了学生实验报告千篇一律的`现象。改革成绩评定方式实验课成绩一方面是对学生实验完成好坏的肯定，另一方面也对学生起到了一定的督促作用。为了做到对学生的全面评价，实验成绩除实验报告和考勤成绩外，应将实验过程中学生的学习主动性、动手操作能力、实验结果记录规范性量化纳入成绩考核。在实验过程中，教师应主动观察并记录每个学生的实际动手、操作能力，量化后按一定比例记入总成绩，对那些既有独立操作能力，又有创新意识的学生，适当给予创新学分。实验过程中，学生是否遵守实验室规则、是否具有团队合作精神，实验结束后，学生是否打扫卫生、是否清洗实验器材等，这些看似小问题，但也体现着一个人的品质和素养，做得好的学生也可以适当加分。
3.改革成效
提高学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识学生能在同一时间完成植病研究法、昆虫研究法和农药研究法3门实验课程，体现了实验课程很强的连贯性和系统性。学生在实践过程中将这3门课程的相关内容紧密、有机地联系起来，对植物病虫害防治有了更深入的认识，同时也提高了学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识。在实验的过程中，强调把学生的动手能力放在首位，让学生更多地参与到实验中，切身体会到所学专业的意义。
培养学生发现、提出、分析和解决问题的能力植物保护研究法实验教学模式具有系统化和整体化特点，同时涉及昆虫研究法、植病研究法、农药研究法等相关学科课程。在实验过程中，学生在对病虫害的认知及其防治等问题的处理上始终处于主体地位，在独立思考、查找资料、咨询专业教师、综合分析之后，拟定出具体的处理方案，能够融会贯通地掌握植物保护学科的理论知识和基本实践技能。
提高指导教师的业务水平新的实验教学模式综合运用了3门相关课程的理论知识，加强了课程的综合实践环节，因此指导教师自身的知识面、操作技术、实践应用和协调能力都需要提升。所以，这种实验教学模式促使教师在教学过程中同学生一起不断学习，丰富专业理论知识，完善专业实践体系，提高发现、提出、分析和解决问题的能力，了解和掌握学科及相关学科的发展动态、研究的新进展、出现的新技术，从而提高了指导教师的业务水平。
4.结语
植物保护研究法在植物保护专业2013级和2014级本科生实验课程教学中进行了实践，通过问卷调查，95%的学生认为在实验过程中有较多的动手机会，激发了自己对实验的兴趣，提高了自己分析和解决问题的能力。因此，认为该教学方法可以发挥学生的主观能动性、拓展学生的科研思路、激发学生的创新创造力和提高学生的独立应用实践能力，具有良好的教学效果。
导读： 2011年3月11日日本东北地区级地震发生后，受海啸影响，福岛第一电厂发生核泄漏，引发社会大众对核辐射的恐惧，也让许多人着实慌乱了一阵，抢购含碘盐、碘片，买辐射防护服等，无奇不有。之后，为了消除慌乱与恐惧，新闻媒体大量刊载有关核辐射的常识，以及预防核辐射的方法，其中不乏有关中药和保健食品。由此，我回顾了灵芝抗辐射作用的研究。 最早的灵芝抗辐射研究 20世纪70年代后期，为了观察灵芝子实体提取物增强小鼠抵抗恶劣环境（条件）的影响，我们设计了一系列实验，如抗缺氧、抗寒冷、抗高温、 抗疲劳、抗辐射等。 当时，我们还没有钴-60的辐射设备，所以每次都要用学校的小轿车护送几十只实验用的小鼠，去中国农业科学院的辐照实验室进行照 射，在那个全民骑自行车的年代，也算是很奢侈的了。 实验时，把每只小鼠固定在特制的玻璃圆筒中，等距离环绕在钴-60源周围，接受钴-60γ射线全身照射15分钟，钴-60射线剂量率为（约 ），总照射剂量为906R（约）。 照射后将小鼠运回实验室饲养，观察30天的死亡率。 结果发现，事先给小鼠灌胃灵芝提取液（相当于子实体10g/kg）20天，小鼠照射后30天的死亡率为，而灌胃生理食盐水的对照组小鼠则为。在钴-60γ射线照射后，给小鼠注射同样剂量的灵芝液治疗，两组照射后30天死亡率无明显差异，但可使动物的平均存活时间明显延长。此一发现于1980年以中、英文发表于《科学通报》上，是第一篇灵芝抗辐射的研究论文，受到学术界的关注。 科学是经得起重复的 科学的实验结果是应该能经得起重复的。时隔十余年后，一些实验室的研究也获得相似的结果： （1）灵芝提取物对小鼠X线照射所致损伤具有一定的保护作用，可轻度增加照射30天的存活率，促进照射后小鼠体重和血液指标的恢复。 （2）灵芝提取物预防性给药，对4Gy γ射线照射小鼠所致损伤有明显的保护作用，能明显改善因照射引起的白细胞减少和免疫功能降低。 （3）给小鼠灌胃灵芝孢子粉，能减轻钴-60 γ射线引起的白细胞减少，并 提高小鼠的存活率。 （4）在X射线照射前，给小鼠喂食灵芝菌丝体水提取物（MAK），对小鼠X射线照射损伤具有保护作用，可显著延长小鼠存活时间，并增加小肠腺细胞的存活率。 这些研究都证明灵芝子实体、菌丝体和孢子粉具有抗辐射损伤作用。 临床有效才是最科学的 灵芝的抗辐射作用目前已用到临床，其一是减轻肿瘤放射治疗的损伤， 如白细胞减少、胃肠道反应（如呕吐）、免疫功能降低等，这些内容我在专栏中已多次提及。 其二是治疗白细胞减少症。 白细胞减少症是指外周血液里的白细胞低于* 10 ^9/L，其原因尚未完全清楚，可能与环境中物理化学污染的影响、身体的遗传或免疫机制障碍等有关，前者中就包括各种辐射因素的影响。 从临床白细胞正常值标准的变化，也可以看出人类生存环境的恶化。1960年我在临床实习时，白细胞总数的正常值下限是 10 ^9/L，随时间推移，此值降至 10 ^9/L，再降至今天的 10 ^9/L，可说是每况愈下。 一些初步的临床观察显示，灵芝对各种原因引起的白细胞减少症有效。 例如：使用灵芝胶囊（含灵芝菌丝及其固体培养基的乙醇提取物）治疗白细胞威少症52例，治疗前白细胞总数均少于4000/mm³。每次口服灵芝胶囊4粒，一日3次，共10〜14天。治疗后，52例患者的白细胞总数平均提高1028/mm³，总有效率。 其中白细胞总数较服药前增加2000/mm³以上者（显效）有11例，占 、白细胞总数较服药前增加1000〜2000/mm³者（进步）有12 例，占；白细胞总数较服药前增加500〜1000/mm³者（好转）有 21例，占和；无效者8例，占。治疗后白细胞总数升高至4000〜 6700/mm³者共计30例，其中用药20天的受试者，又比用药10天者的疗效更好。 又如：使用灵芝菌丝片（所用的菌丝包括固体培养基成分）治疗60例白细胞减少症患者，该组病例治疗前白细胞总数均在4500/mm³以下，病因明确者9例（因长期接触汽油、柴油者3例，慢性疾病者6例），不明原因者51例。经服用灵芝菌丝片（每片，每次3片，每日2次）10〜30天后，白细胞总数平均提高1428/mm³，总有效率，恢复正常者占75%；头晕、乏力、失眠等自觉症状亦有不同程度的改善。 上述各项研究结果说明，灵芝对辐射损伤确实有一定的保护作用，也许久用灵芝保健的人群，对核辐射的抵抗力要比一般人更强一些。 当然此一假设还需要进一步的研究来加以证明。来自：林志彬《灵芝纵横谈》
实验步骤: 一、种子的选择及准备：选用黄豆、绿豆、红豆、玉米、豌豆五种植物的种子，进行发芽实验。原因是这五种 种子容易取得、发芽快、现象明显，其中，黄豆、绿豆、红豆、豌豆为双子叶植物，且前三者为出土萌发，豌 豆为留土萌发；玉米为单子叶植物。用这几种种子进行发芽实验可以观察到不同的萌发类型。所有干燥（或新 鲜）种子进行实验前，均置于水（只要不是高温的）中24h进行催芽。 二、探究种子的发芽条件 1.水与空气 (1)用铁丝将豌豆种子（比较大，容易绑）固定（不要弄伤）在筷子上的3个不同位置 (2)将固定有种子的筷子斜插入水杯中，使3粒豌豆处于杯中不同的高度 (3)把冷却的开水（防止水中溶解气体的干扰）注入杯中，深度控制在：完全没过最下面的豌豆（1号）、没过 一半中间的豌豆（二号）、最上面的豌豆（三号）完全暴露在空气中不与水接触 (4)做几个类似的装置，同时放在室温、有光条件进行实验（注意适当补充水以保持水面位置） (5)观察现象得出结论 2.光 (1)将绿豆种子分成两组，每组10颗左右 (2)把棉花摊开、形成一片棉层，加水，使其浸透，分成两片 (3)将种子放在棉花上，进行发芽（这是传统发芽方法）。其中一组在室温有光条件下，另一组在室温的暗盒中 (4)观察现象得出结论 3.土壤 (1)将5种植物种子各取十颗左右 (2)把种子分成一号、二号两大组，两组中都有5种种子，且两组中同种种子数量相同 (3)把一号组的种子在[三]-二-2的无光条件下进行培养，二号组种子埋在花盆土壤中距离土面表层约5毫米处（ 土上面看不到种子就行了，不要埋得太深） (4)观察得出结论 4.种子的活性 (1)将绿豆种子分为两组，每组5颗左右，一组在催芽前煮熟晾干，另一组不做特殊处理 (2)按照[三]-二-2的有光条件方法共同培养 (3)观察现象得出结论 三、种子的萌发类型 种子的萌发类型 (1)在[三]-二-3的土中萌发状态时同时观察发芽状况 (2)记录并分析
[一]实验用具: 5种植物的种子、暗盒、棉花、塑料盒、筷子、铁丝、水杯、花盆等[二]实验目的: 探究种子发芽必需的条件、观察种子发芽的过程。[三]实验步骤:一、种子的选择及准备：选用黄豆、绿豆、红豆、玉米、豌豆五种植物的种子，进行发芽实验。原因是这五种种子容易取得、发芽快、现象明显，其中，黄豆、绿豆、红豆、豌豆为双子叶植物，且前三者为出土萌发，豌豆为留土萌发；玉米为单子叶植物。用这几种种子进行发芽实验可以观察到不同的萌发类型。所有干燥（或新鲜）种子进行实验前，均置于水（只要不是高温的）中24h进行催芽。二、探究种子的发芽条件1.水与空气(1)用铁丝将豌豆种子（比较大，容易绑）固定（不要弄伤）在筷子上的3个不同位置(2)将固定有种子的筷子斜插入水杯中，使3粒豌豆处于杯中不同的高度(3)把冷却的开水（防止水中溶解气体的干扰）注入杯中，深度控制在：完全没过最下面的豌豆（1号）、没过一半中间的豌豆（二号）、最上面的豌豆（三号）完全暴露在空气中不与水接触(4)做几个类似的装置，同时放在室温、有光条件进行实验（注意适当补充水以保持水面位置）(5)观察现象得出结论2.光(1)将绿豆种子分成两组，每组10颗左右(2)把棉花摊开、形成一片棉层，加水，使其浸透，分成两片(3)将种子放在棉花上，进行发芽（这是传统发芽方法）。其中一组在室温有光条件下，另一组在室温的暗盒中(4)观察现象得出结论3.土壤(1)将5种植物种子各取十颗左右(2)把种子分成一号、二号两大组，两组中都有5种种子，且两组中同种种子数量相同(3)把一号组的种子在[三]-二-2的无光条件下进行培养，二号组种子埋在花盆土壤中距离土面表层约5毫米处（土上面看不到种子就行了，不要埋得太深）(4)观察得出结论4.种子的活性(1)将绿豆种子分为两组，每组5颗左右，一组在催芽前煮熟晾干，另一组不做特殊处理(2)按照[三]-二-2的有光条件方法共同培养(3)观察现象得出结论三、种子的萌发类型种子的萌发类型(1)在[三]-二-3的土中萌发状态时同时观察发芽状况(2)记录并分析[四]实验结果:一、[三]-二-1的记录：┏━━━┯━━━┯━━━┓┃一号组│二号组│三号组┃┠———┼———┼———┨┃发芽数│发芽数│发芽数┃┠———┼———┼———┨┃ │ │ ┃┠———┼———┼———┨┃发芽 │发芽 │发芽 ┃┃ 天数 │ 天数 │ 天数 ┃┠———┼———┼———┨┃ │ │ ┃┗━━━┷━━━┷━━━┛二、[三]-二-2的记录光源（人造还是阳光）：光照时间（小时）：┏━━━┯━━━┓┃光照组│黑暗组┃┠———┼———┨┃发芽数│发芽数┃┠———┼———┨┃ │ ┃┠———┼———┨┃发芽 │发芽 ┃┃ 天数 │ 天数 ┃┠———┼———┨┃ │ ┃┗━━━┷━━━┛三、[三]-二-3的记录浇水量（两组相同）：土中培养组：┏━━┯━━┯━━┯━━┯━━┓┃黄豆│绿豆│红豆│玉米│豌豆┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃┃数 │数 │数 │数 │数 ┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃ │ │ │ │ ┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃┃天数│天数│天数│天数│天数┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃ │ │ │ │ ┃┗━━┷━━┷━━┷━━┷━━┛常规培养组：┏━━┯━━┯━━┯━━┯━━┓┃黄豆│绿豆│红豆│玉米│豌豆┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃┃数 │数 │数 │数 │数 ┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃ │ │ │ │ ┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃┃天数│天数│天数│天数│天数┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃ │ │ │ │ ┃┗━━┷━━┷━━┷━━┷━━┛四、[三]-二-4的记录┏━━━┯━━━┓┃第一组│第二组┃┠———┼———┨┃发芽数│发芽数┃┠———┼———┨┃ │ ┃┠———┼———┨┃发芽 │发芽 ┃┃ 天数 │ 天数 ┃┠———┼———┨┃ │ ┃┗━━━┷━━━┛二、[三]-二-2的记录光源（人造还是阳光）：光照时间（小时）：┏━━━┯━━━┓┃光照组│黑暗组┃┠———┼———┨┃发芽数│发芽数┃┠———┼———┨┃ │ ┃┠———┼———┨┃发芽 │发芽 ┃┃ 天数 │ 天数 ┃┠———┼———┨┃ ┃┗━━━┷━━━┛三、[三]-二-3的记录浇水量（两组相同）：土中培养组：┏━━┯━━┯━━┯━━┯━━┓┃黄豆│绿豆│红豆│玉米│豌豆┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃┃数 │数 │数 │数 │数 ┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃ │ │ │ │ ┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃┃天数│天数│天数│天数│天数┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃ │ │ │ │ ┃┗━━┷━━┷━━┷━━┷━━┛常规培养组：┏━━┯━━┯━━┯━━┯━━┓┃黄豆│绿豆│红豆│玉米│豌豆┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃┃数 │数 │数 │数 │数 ┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃ │ │ │ │ ┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃┃天数│天数│天数│天数│天数┃┠——┼——┼——┼——┼——┨┃ │ │ │ │ ┃┗━━┷━━┷━━┷━━┷━━┛四、[三]-二-4的记录┏━━━┯━━━┓┃第一组│第二组┃┠———┼———┨┃发芽数│发芽数┃┠———┼———┨┃ │ ┃┠———┼———┨┃发芽 │发芽 ┃┃ 天数 │ 天数 ┃┗━━━┷━━━┛五、[三]-三的记录[每种种子的发芽（所需）天数、发芽率、每天的变化、出土时间、芽苗形态等][五]实验结果分析，得出结论:一、[三]-二-1：二号组比其他两组的发芽率明显高出很多，说明种子的发芽需要空气。二、[三]-二-2：光照组和黑暗组的实验记录没有明显差别，说明光照不是种子发芽的必要条件。三、[三]-二-3：两组全部发芽……（剩下的根据具体情况接着写吧）四、[三]-二-4：煮熟的一组种子全部没有发芽，正常的一组种子正常发芽，说明植物种子必须具有活性才有可能发芽五、[三]-三：黄豆、绿豆、红豆的子叶在在萌发后伸出土壤表层，属于出土萌发类型；豌豆、玉米的种子本身在萌发后都没有深出土壤表层，属于留土萌发类型。[六]种子各部分发育去向的推测：黄豆、绿豆、红豆的胚根发育为植物体的根，胚轴发育为茎，胚芽发育为最初的叶，子叶随胚轴伸长而变动位置，在发芽后不久萎缩脱落；豌豆的胚根发育为根，胚芽发育为茎和叶，子叶在发芽、生长过程中逐渐萎缩；玉米的胚根发育为根，胚芽发育为茎叶，胚乳逐渐萎缩。种子的萌发过程一、 做实验1.材料工具(1)常见的种子（如：绿豆 黄豆）40粒。(2)有盖的罐头4个，小勺1个，餐巾纸8张，4张分别标有1、2、3、4的标签，胶水，清水。2．方法步骤(1)在第一个罐头里，放入两张餐巾纸，然后用小勺放入10粒绿豆，拧紧瓶盖。置于室温环境。(2)在第二个罐头里，放入两张餐巾纸，然后用小勺放入10粒绿豆，洒上少量水，使餐巾纸湿润，拧紧瓶盖。置于室温环境。(3)在第三个罐头里，放入两张餐巾纸，用小勺放入10粒绿豆，倒入较多的清水，使种子淹没在水中，然后拧紧瓶盖。置于室温环境。(4)在第四个罐头里，放入两张餐巾纸，用小勺放入10粒绿豆，洒入少量清水，使餐巾纸润湿，拧紧瓶盖。置于低温环境里。通过观察，我发现1、3、4号罐中种子未发芽，而2号罐中种子发芽了。二、研究1．为什么同样优质，同样品种的种子有的发芽，有的没有呢？当一粒种子萌发时，首先要吸收水分。子叶或胚乳中的营养物质转运给胚根、胚芽、胚轴。随后，胚根发育，突破种皮，形成根。胚轴伸长，胚芽发育成茎和叶。然而，种子的萌发需要适宜的温度，充足的空气和水分。1号种子未发芽是因为它虽有充足的空气和适宜的温度，但无水分，所以它不可能发芽。2号种子既拥有适宜的温度和充足的水分，还有水分，所以它发芽了。3号种子未发芽是因为它被完全浸泡在水中，而水中没有氧气，所以它也不可能发芽。4号种子也因缺适宜的温度未发芽。三、讨论结果通过此次实验，我发现了种子的萌芽需要充足的空气、水分和适宜的温度。仔细地观察，我还看到发芽后的植物上有一些细细的，白白的根毛，其实他们能提高吸水率。实验给我带来了许多乐趣，也让我从中学到了许多知识。生物学实在是太奇妙了
[一]实验用具: 5种植物的种子、暗盒、棉花、塑料盒、筷子、铁丝、水杯、花盆等 [二]实验目的: 探究种子发芽必需的条件、观察种子发芽的过程。 [三]实验步骤: 一、种子的选择及准备：选用黄豆、绿豆、红豆、玉米、豌豆五种植物的种子，进行发芽实验。原因是这五种 种子容易取得、发芽快、现象明显，其中，黄豆、绿豆、红豆、豌豆为双子叶植物，且前三者为出土萌发，豌 豆为留土萌发；玉米为单子叶植物。用这几种种子进行发芽实验可以观察到不同的萌发类型。所有干燥（或新 鲜）种子进行实验前，均置于水（只要不是高温的）中24h进行催芽。 二、探究种子的发芽条件 1.水与空气 (1)用铁丝将豌豆种子（比较大，容易绑）固定（不要弄伤）在筷子上的3个不同位置 (2)将固定有种子的筷子斜插入水杯中，使3粒豌豆处于杯中不同的高度 (3)把冷却的开水（防止水中溶解气体的干扰）注入杯中，深度控制在：完全没过最下面的豌豆（1号）、没过 一半中间的豌豆（二号）、最上面的豌豆（三号）完全暴露在空气中不与水接触 (4)做几个类似的装置，同时放在室温、有光条件进行实验（注意适当补充水以保持水面位置） (5)观察现象得出结论 2.光 (1)将绿豆种子分成两组，每组10颗左右 (2)把棉花摊开、形成一片棉层，加水，使其浸透，分成两片 (3)将种子放在棉花上，进行发芽（这是传统发芽方法）。其中一组在室温有光条件下，另一组在室温的暗盒中 (4)观察现象得出结论 3.土壤 (1)将5种植物种子各取十颗左右 (2)把种子分成一号、二号两大组，两组中都有5种种子，且两组中同种种子数量相同 (3)把一号组的种子在[三]-二-2的无光条件下进行培养，二号组种子埋在花盆土壤中距离土面表层约5毫米处（ 土上面看不到种子就行了，不要埋得太深） (4)观察得出结论 4.种子的活性 (1)将绿豆种子分为两组，每组5颗左右，一组在催芽前煮熟晾干，另一组不做特殊处理 (2)按照[三]-二-2的有光条件方法共同培养 (3)观察现象得出结论 三、种子的萌发类型 种子的萌发类型 (1)在[三]-二-3的土中萌发状态时同时观察发芽状况 (2)记录并分析 [四]实验结果: 一、[三]-二-1的记录： ┏━━━┯━━━┯━━━┓ ┃一号组│二号组│三号组┃ ┠———┼———┼———┨ ┃发芽数│发芽数│发芽数┃ ┠———┼———┼———┨ ┃ │ │ ┃ ┠———┼———┼———┨ ┃发芽 │发芽 │发芽 ┃ ┃ 天数 │ 天数 │ 天数 ┃ ┠———┼———┼———┨ ┃ │ │ ┃ ┗━━━┷━━━┷━━━┛ 二、[三]-二-2的记录 光源（人造还是阳光）： 光照时间（小时）： ┏━━━┯━━━┓ ┃光照组│黑暗组┃ ┠———┼———┨ ┃发芽数│发芽数┃ ┠———┼———┨ ┃ │ ┃ ┠———┼———┨ ┃发芽 │发芽 ┃ ┃ 天数 │ 天数 ┃ ┠———┼———┨ ┃ │ ┃ ┗━━━┷━━━┛ 三、[三]-二-3的记录 浇水量（两组相同）： 土中培养组： ┏━━┯━━┯━━┯━━┯━━┓ ┃黄豆│绿豆│红豆│玉米│豌豆┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃ ┃数 │数 │数 │数 │数 ┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃ │ │ │ │ ┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃ ┃天数│天数│天数│天数│天数┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃ │ │ │ │ ┃ ┗━━┷━━┷━━┷━━┷━━┛ 常规培养组： ┏━━┯━━┯━━┯━━┯━━┓ ┃黄豆│绿豆│红豆│玉米│豌豆┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃ ┃数 │数 │数 │数 │数 ┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃ │ │ │ │ ┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃ ┃天数│天数│天数│天数│天数┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃ │ │ │ │ ┃ ┗━━┷━━┷━━┷━━┷━━┛ 四、[三]-二-4的记录 ┏━━━┯━━━┓ ┃第一组│第二组┃ ┠———┼———┨ ┃发芽数│发芽数┃ ┠———┼———┨ ┃ │ ┃ ┠———┼———┨ ┃发芽 │发芽 ┃ ┃ 天数 │ 天数 ┃ ┠———┼———┨ ┃ │ ┃ ┗━━━┷━━━┛ 二、[三]-二-2的记录 光源（人造还是阳光）： 光照时间（小时）： ┏━━━┯━━━┓ ┃光照组│黑暗组┃ ┠———┼———┨ ┃发芽数│发芽数┃ ┠———┼———┨ ┃ │ ┃ ┠———┼———┨ ┃发芽 │发芽 ┃ ┃ 天数 │ 天数 ┃ ┠———┼———┨ ┃ ┃ ┗━━━┷━━━┛ 三、[三]-二-3的记录 浇水量（两组相同）： 土中培养组： ┏━━┯━━┯━━┯━━┯━━┓ ┃黄豆│绿豆│红豆│玉米│豌豆┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃ ┃数 │数 │数 │数 │数 ┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃ │ │ │ │ ┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃ ┃天数│天数│天数│天数│天数┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃ │ │ │ │ ┃ ┗━━┷━━┷━━┷━━┷━━┛ 常规培养组： ┏━━┯━━┯━━┯━━┯━━┓ ┃黄豆│绿豆│红豆│玉米│豌豆┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃ ┃数 │数 │数 │数 │数 ┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃ │ │ │ │ ┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃发芽│发芽│发芽│发芽│发芽┃ ┃天数│天数│天数│天数│天数┃ ┠——┼——┼——┼——┼——┨ ┃ │ │ │ │ ┃ ┗━━┷━━┷━━┷━━┷━━┛ 四、[三]-二-4的记录 ┏━━━┯━━━┓ ┃第一组│第二组┃ ┠———┼———┨ ┃发芽数│发芽数┃ ┠———┼———┨ ┃ │ ┃ ┠———┼———┨ ┃发芽 │发芽 ┃ ┃ 天数 │ 天数 ┃ ┗━━━┷━━━┛ 五、[三]-三的记录 [每种种子的发芽（所需）天数、发芽率、每天的变化、出土时间、芽苗形态等] [五]实验结果分析，得出结论: 一、[三]-二-1： 二号组比其他两组的发芽率明显高出很多，说明种子的发芽需要空气。 二、[三]-二-2： 光照组和黑暗组的实验记录没有明显差别，说明光照不是种子发芽的必要条件。 三、[三]-二-3： 两组全部发芽……（剩下的根据具体情况接着写吧） 四、[三]-二-4： 煮熟的一组种子全部没有发芽，正常的一组种子正常发芽，说明植物种子必须具有活性才有可能发芽 五、[三]-三： 黄豆、绿豆、红豆的子叶在在萌发后伸出土壤表层，属于出土萌发类型； 豌豆、玉米的种子本身在萌发后都没有深出土壤表层，属于留土萌发类型。 [六]种子各部分发育去向的推测： 黄豆、绿豆、红豆的胚根发育为植物体的根，胚轴发育为茎，胚芽发育为最初的叶，子叶随胚轴伸长而变动位置，在发芽后不久萎缩脱落； 豌豆的胚根发育为根，胚芽发育为茎和叶，子叶在发芽、生长过程中逐渐萎缩； 玉米的胚根发育为根，胚芽发育为茎叶，胚乳逐渐萎缩。 种子的萌发过程 一、 做实验 1.材料工具 (1)常见的种子（如：绿豆 黄豆）40粒。 (2)有盖的罐头4个，小勺1个，餐巾纸8张，4张分别标有1、2、3、4的标签，胶水，清水。 2．方法步骤 (1)在第一个罐头里，放入两张餐巾纸，然后用小勺放入10粒绿豆，拧紧瓶盖。置于室温环境。 (2)在第二个罐头里，放入两张餐巾纸，然后用小勺放入10粒绿豆，洒上少量水，使餐巾纸湿润，拧紧瓶盖。置于室温环境。 (3)在第三个罐头里，放入两张餐巾纸，用小勺放入10粒绿豆，倒入较多的清水，使种子淹没在水中，然后拧紧瓶盖。置于室温环境。 (4)在第四个罐头里，放入两张餐巾纸，用小勺放入10粒绿豆，洒入少量清水，使餐巾纸润湿，拧紧瓶盖。置于低温环境里。 通过观察，我发现1、3、4号罐中种子未发芽，而2号罐中种子发芽了。 二、研究 1．为什么同样优质，同样品种的种子有的发芽，有的没有呢？ 当一粒种子萌发时，首先要吸收水分。子叶或胚乳中的营养物质转运给胚根、胚芽、胚轴。随后，胚根发育，突破种皮，形成根。胚轴伸长，胚芽发育成茎和叶。 然而，种子的萌发需要适宜的温度，充足的空气和水分。 1号种子未发芽是因为它虽有充足的空气和适宜的温度，但无水分，所以它不可能发芽。 2号种子既拥有适宜的温度和充足的水分，还有水分，所以它发芽了。 3号种子未发芽是因为它被完全浸泡在水中，而水中没有氧气，所以它也不可能发芽。 4号种子也因缺适宜的温度未发芽。 三、讨论结果
乳铁素B也叫：牛乳铁蛋白活性肽英文名：Lactoferricin B (Lfcin-B) 乳铁素B是牛乳铁蛋白经胃蛋白酶酶解后得到的最重要的抗菌肽，具有较强抗菌活性. 研究表明，乳铁素B对大肠杆菌的最小抑菌质量浓度为 mg/mL，对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为 mg/mL；葡萄糖、 蔗糖、 麦芽糖、牛血清白蛋白(BSA)、 尿素、硫酸铵在0～10 mg/mL，乳糖、可溶性淀粉在0～4 mg/mL的质量浓度范围内，对乳铁素B的抗菌活性影响不大；当NaCl或KCl的浓度为25～100 mmol/L，MgCl2或CaCl2的浓度为～ mmol/L时，乳铁素B的抗菌活性就会大大降低；随着缓冲盐浓度和有机酸浓度（25～100 mmol/L）的增大，乳铁素B的抗菌活性呈下降趋势，且在微碱性环境下乳铁素B表现出较强的抗菌活力.乳铁蛋白(Lactoferrin，简称Lf)是富含在初乳中的一种功能因子， 具有抗菌特性等多种生物学功能。近代研究证明，u 虽然具有抗菌活性， 但酶解u 得到的抗菌肽的抗菌活性远远高于IJf。有若干种抗菌肽已从Lf的酶解液中获得。乳铁素(Lactoferricin)就是胃蛋白酶酶解u 所得到的最重要的抗菌肽，Lf降解生成乳铁素后抗菌活性大大增强I”。Tomita等研究了牛乳铁蛋白(Bovine Lactoferricin， BLf)经蛋白酶降解后的活性多肽的抑菌性能。利用胃蛋白酶降解牛乳或人乳的u ， 分别产生乳铁素B(LactoferricinBovine， 简称Lfcin—B)和乳铁素H(Lactoferricin Hu一man，简称Lfcin—H)两种。Lfcin．B有25个氨基酸残基组成，分子量为3 126 u；Lfcin—H 有47个氨基酸残基组成， 氨基酸顺序也均已测出。Lfcin—B和Lfcin—H 均不易被胃蛋白酶进一步水解， 均具有很强的杀菌、抑菌能力，且抗菌活性超过天然u ，介质环境存在铁质与否并不影响乳铁素的抗菌能力。乳铁素的抗菌谱也较之天然u 有较大改良， 能够抑制天然u 原本不能抑制的一些微生物的生长I 1。乳铁素具有广谱抗菌特性，对很多食品病原细菌有杀灭效果，有望作为一种天然抗菌组分获得广泛应用。对于每种酶其作用的pH 值与温度基本确定， 因此， 底物质量浓度和酶与底物的质量浓度比是酶解体系中两个最重要的因素。特别是象蛋白酶这样具有位点特异性的催化剂， 不仅存在底物抑制现象，即酶解反应在低底物质量浓度时符合米氏方程， 当底物质量浓度升高时， 反应速度反而下降， 而且对产物的种类也会产生影响。另一方面， 在水解度不同的情况下， 由于蛋白酶对肽链的切割程度的不同， 也会使相应的短肽产品在质量浓度上及性质上有所区别。本文对不同的底物质量浓度、酶与底物的质量浓度比、酶解时问等对产品的抑菌效果的影响做了分析，通过正交实验来确定其最佳的酶解条件。Tomita等[2]研究了牛乳铁蛋白(简称BLf)经蛋白酶酶解后的活性多肽的抗菌性能．利用胃蛋白酶酶解牛乳或人乳Lf，分别产生乳铁素B(facto—ferricin Bovine，简称Lfcin—B)和乳铁素H(Lacto—ferricin Human，简称Lfcin—H)两种．Lfcin—B有25个氨基酸残基组成，相对分子质量为3 126，Lfcin-H有47个氨基酸残基组成，氨基酸顺序也已测出．Lfcin—B和Lfcin—H 均不易被胃蛋白酶进一步酶解，均具有很强的杀菌、抑菌能力，且抗菌活性超过天然Lf[3]．由于乳铁素具有广谱抗菌特性，对很多食品病原细菌有杀灭效果，有望作为一种天然抗菌组分获得广泛应用．为此，作者开展了Lfcin—B的抗菌活性的研究，确立了Lfcin—B对大肠杆菌(E．coli)和金黄色葡萄球菌(S．aureus)的最小抑菌浓度，研究了不同的碳源、氮源、无机盐、有机酸、缓冲液及不同pH值对其抗菌活性的影响，为其在食品及医药行业应用提供依据．乳铁素 B是牛乳铁蛋白经胃蛋白酶酶解后所得到的最重要的抗菌肽,乳铁蛋白酶解生成乳铁素后抗菌活性大大增强.通过正交试验确立了牛乳铁蛋白酶解制备乳铁素 B的最佳条件,指出在底物质量浓度为 50 g/L,酶与底物质量浓度比为 1: 30(质量比),酶解时间为 60 min时所得的乳铁素质量浓度及活性较好. 研究表明,乳铁素B对大肠杆菌的最小抑菌质量浓度为 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为 mg/mL;葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、牛血清白蛋白(BSA)、尿素、硫酸铵在0～10 mg/mL,乳糖、可溶性淀粉在0～4 mg/mL的质量浓度范围内,对乳铁素B的抗菌活性影响不大;当NaCl或KCl的浓度为25～100 mmol/L,MgCl2或CaCl2的浓度为～ mmol/L时,乳铁素B的抗菌活性就会大大降低;随着缓冲盐浓度和有机酸浓度(25～100 mmol/L)的增大,乳铁素B的抗菌活性呈下降趋势,且在微碱性环境下乳铁素B表现出较强的抗菌活力. 2，文献资料：食品与生物技术学报-2005年2期 1－5页中国乳品工业-2004年5期
牛血清是重要的细胞培养添加成分，但目前牛血清的类型有胎牛血清、新生牛血清、补铁新生牛血清等，其性能和价格均不相同。牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。胎牛血清培养效果通常来说是最佳。而补铁新生牛血清对于一些细胞类型，其效果可等价于胎牛血清，或优于常规新生牛血清。三种血清价格从高到低排序为：胎牛血清、补铁新生牛血清、常规新生牛血清。最适血清的选择，与各实验室、生产企业的条件和需求有关，与所培养细胞类型有关。除了根据以往经验和文献报道，必要时也可开展针对特定细胞的血清筛选试验，以筛选出最佳血清。不同类型血清比较的最新报道：2020年8月《生物学杂志》第4期刊登了一篇《不同类型牛血清对MDCK 细胞培养效果研究》，研究了进口胎牛血清、国产胎牛血清、国产新生牛血清对MDCK 细胞的促生长效果。作者在含10%不同类型牛血清的DMEM培养液中连续传代培养MDCK细胞，比较了三种血清培养MDCK细胞的传代稳定性、最大増殖密度、倍增时间、比生长速率、贴壁率等指标。结果显示，在最大增殖密度和倍增时间上，胎牛血清均优于新生牛血清。在贴壁率方面［贴壁率(%) = (所形成集落数/ 接种细胞数)×100%］，进口胎牛血清略高于国产胎牛血清，差异显著；国产新生牛血清低于国产胎牛血清和进口胎牛血清，差异极显著。Ausbian是市面上一款比较低调、却口碑相传、被反复选择的进口血清品牌，它被各大科研院所、高校重点实验室及药厂广泛使用，并多年来持续稳定供应细胞典藏等重大项目。下面对Ausbian®血清做一个简单介绍。一、Ausbian®进口牛血清，包括：Ausbian®特级胎牛血清、Ausbian®精制新生牛血清、Ausbian®补铁新生牛血清、Ausbian®疫苗专用新生牛血清、Ausbian®细胞治疗专用胎牛血清、Ausbian®透析胎牛血清。二、Ausbian®血清质控所有Ausbian®血清出厂前，均经过严格质控，每个批次附有详细完整的《检测报告》，包括：品名、货号、批号、血源地、生产日期、保质期、pH值、渗透压、总蛋白、无菌检查（细菌、真菌、支原体）、病毒检查（如BVD、牛腺病毒、细胞病变效应等）以及促细胞生长能力等。三、Ausbian®血清的优势如下：均精选内毒素更低批次（≤3EU/ml），使细胞更健康。Ausbian®特级胎牛血清尤其可满足干细胞、基因敲除、原代培养、细胞典藏、长期传代等各类细胞的培养要求；是细胞典藏等重大项目十几年的稳定供应品牌。新批次在使用前，提供试用服务，养细胞更放心。胎牛血清每批次产量为1500瓶-2500瓶，新生牛血清每批次产量为2000瓶-3000瓶。试用满意的实验室批号优先锁定，保证大多数项目两年不需换批次，细胞试验数据稳定。每年按厂家生产顺序，会有多批次平行供应，每个实验室专属批号管理，保证供货稳定。为Ausbian®血清用户免费提供申报支持，具有完整的检测报告，为各类项目的申报提供支持。（同时为血清VIP用户在支原体检测、方法学验证等方面，提供更多免费延伸性技术帮助。）针对特殊科研项目，可提供3-5个平行批次，让试验人有更多选择空间。为Ausbian®血清提供免费代储存服务，为储存空间不足的实验室提供可靠的血清仓储保护，按要求随时发货。Ausbian®血清从出厂，到实验室，全程低温冷链保护，确保血清无反复冻融。免费真品保障，每个血清瓶身加贴Viansaga®防伪标签，Ausbian品牌真品保护，逢假必究，为实验室做好售后保障。免费无忧售后，所有实验室签收的Ausbian胎牛血清，从签收日开始计算，一年之内，血清在妥善保管、未开封未融化、且不影响二次销售的情况下，均可享受无条件退货或换货的售后保障。免费专业帮助，汇集近二十年，千万个血清用户细胞培养经验，为各种细胞培养提供问题梳理分析，解决方案参考。对于生产或研究所用的培养细胞，大多数情况下，生产或研究人员可以依据以往经验以及文献报道选择合适的血清。了解更多
乳铁素 B是牛乳铁蛋白经胃蛋白酶酶解后所得到的最重要的抗菌肽,乳铁蛋白酶解生成乳铁素后抗菌活性大大增强.通过正交试验确立了牛乳铁蛋白酶解制备乳铁素 B的最佳条件,指出在底物质量浓度为 50 g/L,酶与底物质量浓度比为 1: 30(质量比),酶解时间为 60 min时所得的乳铁素质量浓度及活性较好.研究表明,乳铁素B对大肠杆菌的最小抑菌质量浓度为 mg/mL,对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为 mg/mL;葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、牛血清白蛋白(BSA)、尿素、硫酸铵在0～10 mg/mL,乳糖、可溶性淀粉在0～4 mg/mL的质量浓度范围内,对乳铁素B的抗菌活性影响不大;当NaCl或KCl的浓度为25～100 mmol/L,MgCl2或CaCl2的浓度为～ mmol/L时,乳铁素B的抗菌活性就会大大降低;随着缓冲盐浓度和有机酸浓度(25～100 mmol/L)的增大,乳铁素B的抗菌活性呈下降趋势,且在微碱性环境下乳铁素B表现出较强的抗菌活力.好像就这么多了……
牛血清白蛋白的提取操作步骤：
1、盐析取离心管一支加入牛血清2mL、加入等量PBS（磷酸盐缓冲生理盐水）稀释血清，摇匀后，逐滴加入饱和硫酸铵溶液2mL，边加边摇，充分混匀，然后静止放臵10分钟，再离心（2000r/min）10min，将上清液倾入试管中。
2、取干净的比色板，在各孔内滴加一滴纳氏试剂
3、取玻璃纸一张，折成袋形，将离心后的上清液倒入袋内，用线扎紧上口（注意要留有空隙），用玻璃棒悬在盛有半杯蒸馏水的100mL烧杯内，使透析袋下半部侵入水中，对蛋白液进行透析，常用玻璃棒搅拌袋外（烧杯中）液体，以缩短透析时间。
4、每隔2分钟检查一次，更换蒸馏水多次，用纳氏试剂检查袋外液体的NH4+，观察颜色变化并记录，直至袋内盐分透析完毕。
5、将袋内液体倾入试管，即得牛血清白蛋白溶液。
牛血清白蛋白的鉴定方法：
1、点样取一张膜条，将薄膜无光泽面向下，放入培养皿中的巴比妥缓冲液中使膜条充分浸透，取出，用干净滤纸吸去多余的缓冲液，以薄膜的无光泽面距一端㎝处做点样线，将牛血清样品与待测的牛血清白蛋白溶液分别用点样器在同一张薄膜的点样线处不同位置点样。标准液点一次，待测液点三次。
2、电泳将点样后的膜条致于电泳槽架上，放置时膜条无光泽面向下，点样端致于阴极，待平衡5min后，打开电源，调节电源，调节电泳仪的电压为160伏，通电60min，关闭电源后用镊子将模条取出。
3、 染色将膜条直接浸于盛有氨基黑10B的染色液中，染2分钟后取出，立即浸于漂洗液中，分别在漂洗液1、2、3中各漂洗5min，直至背景漂洗干净为止，用滤纸吸干薄膜。
4、鉴定比较样品和待测液中白蛋白在薄膜上的电泳结果，看位置是否一致。
扩展资料：
牛血清白蛋白
牛血清中的简单蛋白，是血液的主要成分（38g/1000ml），分子量68kD。等电点。含氮量16%，含糖量。仅含已糖和已糖胺，含脂量只有。白蛋白由581个氨基酸残基组成，其中35个半胱氨酸组成17个二硫键，在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。
血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中，添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白（BSA），又称第五组分，是牛血清中的一种球蛋白，包含583个氨基酸残基，分子量为 Da，等电点为。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用，例如在western blot中作为Blocking agent。
参考资料来源： 百度百科-牛血清白蛋白
天气渐凉，我的身体很快有了反抗，不轻不重的感冒，嗓子疼啊。上课本来就是一件很枯燥的事了，由于吃了感冒药，更加困意浓浓了，哎```大脑胀胀的，还要研究那些要命的粒子，不好好待着，竟瞎跑，挪挪极板，我咋知道他们想跑哪里去啊。 一连感冒好几天了，难受啊。前几天，妈妈买来了菊花茶，我是不喝茶的，但为了尽早赶走可恶的感冒，还是喝了，由于加了冰糖，甜甜的。我以前倒是喝过茶饮料，要茶没茶味，要糖没糖味，所以对茶到没什么兴趣，反倒觉得还是咖啡好，一苦到底。我也喝过“咖啡味”的饮料，像奶茶之类的，相比之下，还是纯咖啡喝的痛快，那些貌似咖啡的东西，深深吸上一大口，也没有多少咖啡的味道，反倒变甜了，真是奇怪，为什么要把明明苦的醇香的东西变甜呢？ 我是不喝茶的，也是因为家里没有喝茶的习惯。即使如此，我对茶还是有一点了解的，毕竟茶的故乡在中国。 现在有很多人喝碳酸饮料有专家指出，碳酸饮料除了比较解渴之外，对人的身体健康有害而无利，而最佳的的饮品就是茶，但却很少人喝。大概在去年吧，全球十强中排第一的，竟是可口可乐公司。一瓶几元的可乐竟然超越了房产、汽车、钢铁、运输等“庞然大物”，盛气凌人，独占螯头，真的有点出人意料了。 远了，还是说茶吧。恕在下愚钝，一直弄不清“茶”与“茶花”的区别，或许这两者全然无关，又或许这两者即为一体。在我小时侯有一段淡香的记忆，对“茶叶花”的记忆，我所谓“茶叶花”是家乡人的一种说法，没有考证过学名。那是一种小而洁白的花，多盆栽，很香很香，隔着好远就能闻到。这是我对“茶”与“花”唯一紧密联系的记忆了。金庸在《天龙八部》中大展了一次茶花show。江南佳处，翠竹参差，满山茶花，谗煞人眼！幽幽的山雾。轻笼着曼陀山庄，茶花争奇斗艳，摇曳风中，江南的种种名茶花皆聚于此。不远处，就是燕子坞，阿朱的“小别墅”名叫“听香水榭”。听的，也许就是这曼陀山庄的茶花香吧。如此说来，金老爷子还是“眷恋”唐山的，竟用了个“听”字来表示“闻”，神奇！但如今把“听”换成“闻”，“闻香水榭”，还真不是一个味。那些被我咬定是花的东西，竟被称作“茶花”，使我颇为无奈，也颇为自己的无知而羞愧，也是从此处开始，一直弄不清“茶”“花”“茶花”的“辨证关系”了。 暂且不谈花，单说茶，就不能不提到壶。茶壶，茶壶，我壶不成茶。而芸芸众壶之中，当数紫砂壶最得青睐。记得有一部电视剧是专门讲紫砂壶的，剧组用的紫砂壶也是高价购得的，听说最贵的一把竟然上百万，不知是否属实。由此也可见壶的作用不小于茶，魅力也不逊于茶。 茶茶半晌，茶已凉，明知清茶非烈酒，我也要一饮而尽。 茶香四溢，绕心头。
哎。我是爱莫能助啊……
有人喜欢牡丹、有人喜欢月季、有人喜欢荷花、也有人喜欢水仙，而我却喜欢那朴素的菊花。它牡丹的雍容华贵，月季的婀娜多姿，也荷花“出淤泥而不染”的高洁，更水仙“凌波仙子”的美誉，它却独特的风韵———不屈不挠。了春天的孕育，夏天的酝酿，菊花百花凋谢的秋天怒放了，是填补的空缺，让这萧瑟的秋天不凄凉！看，菊花的花有大有小，大的像绣球，小的似碧玉，美极了。再看那花瓣，像少女的卷发，似老的拐杖，若蛟龙的爪子，还如喷泉洒下，各不相同。菊花的颜色也有，红得像火，黄得似金，白得若雪，绿得如玉，粉的好似云霞，那白中带绿的，更是清幽淡雅。五颜六色，美不胜收 ，让人喜爱。你吗？在马来西亚有菊花，叫除虫菊，把菊花磨成粉，制成药，可以消灭害虫。菊花还可以泡茶喝，用菊花泡成的茶水清热解毒的功效，在炎热的夏季，喝上一杯浓浓的菊花茶，既可以防暑，又可以降火，味道好极了。菊花既有保健功能，也有高尚的品格，它虽美，却开在深秋，不与百花争艳，它奉献出的，却炫耀，这菊花的品格。我欣赏菊花的品格，它虽美却与世无争。别的花多都在春天争奇斗艳，而你却在萧瑟的秋天羞羞哒哒地低着头，显示出你特文静庄重，如火如荼的菊花，你不畏寒意，坚强不屈，让秋天鲜艳多彩，给大无限的生机和美感。我喜欢牡丹的，我喜欢水仙的洁白高雅，我喜欢月季的雍容华贵，但我更喜欢菊花的坚贞不屈、傲霜斗雪！了春天的孕育，夏天的酝酿，菊花百花凋谢的秋天怒放了，是填补的空缺，让这萧条的秋不凄凉！看，菊花的花有大有小，大的像绣球，小的似碧玉，美极了。再看那花瓣，像少女的卷发，似老的拐杖，若蛟龙的爪子，还如喷泉洒下，各不相同。菊花的颜色也有，红得像火，黄得似金，白得若雪，绿得如玉，粉的好似云霞，那白中带绿的，更是清幽淡雅。五颜六色，美不胜收看那菊花，远看宛如碧绿的地毯上绣着五彩的大花，近看又一番情趣，朵很美，那也很美；闻闻朵很香，闻闻那也很香。让人眼花缭乱。朵似害羞的小姑娘，半张着脸，那却全盛开了，张着笑脸迎接这金色的秋天，花骨朵儿的，饱满的要裂开，迫待的想让人一睹她那绝世的芳华。看那菊花，远离那菊花群，不愿与为伍，确实它是鹤立鸡群，虽一枝独秀，但让人感个体所独风姿，墨绿色的叶子层层叠叠，如众星捧月般衬托着洁白的花，更宁静高远，神圣脱俗。菊，不禁思起了久违的忘年交，他酷爱养花侍草，犹爱养菊。是潜移默化，他也具备了菊花的优点，菊花着它的美丽供人观赏，而他则奉献着剩余的光和热，菊花不畏寒冷，傲霜斗雪，而他不被打倒，在逆境里求生存。令我钦佩！美丽的菊花，更爱菊花精神！
中药复方化学成分的研究进展摘要:综述了中药复方化学成分的研究成果与进展，包括有效化学成分的定性与定量、全方化学成分的提取分离与鉴定、复方活性部位与有效成分的药理追踪等。 中药复方是中医治病的主要临床应用形式，复方中的化学成分是中药发挥药效作用的物质基础。进行复方化学成分的研究，在阐明中医的方药理论，揭示中药的配伍规律和作用机制，优化制剂工艺，制定质控标准，实现中医药现代化并走向国际市场等方面均具重要意义。笔者就中药复方化学成分的研究进行综述，以供参考。 1研究方法与途径 迄今，中药复方化学成分的研究，无论在思路还是在技术与方法等诸方面仍处探索阶段，不少作者提出了一些有意义的观点和构思，如余亚纲的中药复方化学成分系统分离与鉴定的三元设计方案〔1〕，薛燕等提出的中药复方多成分经多途径协同作用的霰弹理论〔2〕以及周俊的中药复方天然组合化学库与多靶作用机制〔3〕等，这些对于如何开展中药复方化学成分的研究工作具有一定的启发和参考价值。关于中药复方化学成分的研究方法与途径，目前可归纳成如下3个方面：1)以单味药有效成分为指标，对全方制剂进行定性与定量。2)采用植化方法对全方化学成分进行系统提取、分离和鉴定。 3)以药效为标准追踪复方活性部位与有效成分。 2以单味药有效成分为指标定性与定量 确定单味药主要有效化学成分作为指标性物质(marker substances)，采用各种分离与分析技术，对复方全方、各药配伍及各单味药制剂中指标性物质(成分)进行定性与定量，并探讨制备条件(药材粒度、煎煮器具、加水量、浸泡时间、煎煮时间、煎煮次数、加热温度、包煎与另煎以及先煎与后下等)、制备方式(单煎、分煎和合煎)、配伍和剂型等对指标性物质(成分)质和量的影响。此类研究工作开展较多，也取得了一些有意义的结果。 四物汤由当归、地黄、芍药和川芎组成，袁久荣等〔4〕采用多种分析方法测定了四物汤各药单煎、分煎和合煎液中的阿魏酸、8种微量元素、17种氨基酸及水溶性煎出物的含量，结果表明在加热条件下合煎时，各成分间具有增溶效应。钟立贤等〔5〕测定并比较了小青龙汤(由麻黄、桂枝、芍药和甘草等组成)各药单煎、分煎及合煎液中麻黄碱的含量，结果显示合煎液中麻黄碱含量最低，此系甘草酸与麻黄碱作用产生沉淀所致，但合煎液与分煎液的药效并无显著差异，说明虽然甘草酸与麻黄碱形成沉淀，但口服后在体内仍具药效，因此对中药复方煎煮过程中产生的沉淀应慎重考虑其取舍。四逆汤由附子、甘草和干姜组成，张宇等〔6〕对附子与甘草、附子与干姜及三味药配伍前后主要有效成分进行了定性与定量，结果表明附子与干姜配伍时，具毒性的乌头碱类含量升高；而附子与甘草配伍时，乌头碱类含量降低，说明中医“附子无干姜不热、得甘草则缓”理论具有一定科学依据。 六味地黄汤为补阴名方，严永清等〔7～9〕对其化学成分进行了初步分析，结果表明同一方剂因制备工艺不同，其化学成分的质与量也不尽一致；复方化学成分不等于各单味药化学成分的简单加和；合煎液中化学成分种类多于分煎液。朱永新等〔10〕发现生脉散水煎剂中人参皂苷Rg3和Rh1等含量明显高于单味人参水煎 剂，由此推测在加热煎煮过程中发生了人参皂苷的水解转化，结果使原来在单味药中属微量成分的Rg3和Rh1在复方中成为主要成分。严永清等〔7〕则在比较生脉散中人参、麦冬和五味子合煎与分煎液化学成分差异时发现，合煎液中人参总皂苷的含量低于分煎液，而在血流动力学以及对心肌作用和临床疗效观察上，合煎液效果优于 分煎液，据此推测人参皂苷Rg3和Rh1等可能是该方某些药理作用和临床疗效的活性成分。魏慧芬等〔11〕对小半夏加茯苓汤及方中各单味药的化学成分进行了比较，结果发现复方中生物碱含量低于半夏单味药，而氨基酸含量均高于各单味药，认为高含量的氨基酸对发挥该方的和胃止呕作用有益。 五仁液系山楂核等多种中药提取制成的一种杀菌剂，涂家生等〔12〕用GC/MS法对其化学成分进行了分析，发现其富含酚类、苯甲酸类和脂肪酸等具抗微生物作用的有效成分，并以面积归一化法计算了各类有效成分的相对含量。枳术丸由枳实和白术组成，罗尚凤等〔13〕采用GC/MS法测定了其制备过程中苍术酮、苍术内酯、羟基苍术内酯和脱水羟基苍术内酯等4种有效成分的含量动态变化，结果发现在炮制时白术中的苍术酮可氧化生成苍术内酯和羟基苍 术内酯，而在与枳实组方时苍术内酯和羟基苍术内酯又可还原成苍术酮，并讨论了这一化学变化的原因。 3用植化法对化学成分提取、分离与鉴定 将中药复方视为一个整体，采用植化方法对全方化学成分进行系统提取、分离、纯化和结构鉴定，可全面分析复方化学成分是什么，与单味药成分比较有何区别以及有无新化合物生成等。目前，有关这方面的研究工作报道不多。 全文地址： 共三页
zhǐ shí
fructus aurantii immaturus [朗道汉英字典]
aurantii fructus immaturus [湘雅医学专业词典]
aurantii immaturus,fructus [湘雅医学专业词典]
immature orange fruit [湘雅医学专业词典]
orange pease [湘雅医学专业词典]
AURANTII FRUCTUS IMMATURUS [中华人民共和国药典（2010年版）]
Fructus Aurantii Immaturus(拉) [中医药学名词审定委员会.中医药学名词（2004）]
immature orange fruit [中医药学名词审定委员会.中医药学名词（2004）]
枳实为中药名，出《神农本草经》。为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L. 及其栽培变种或甜橙Citrus sinensis O *** eck 的干燥幼果[1]。呈半球形，少数为球形，直径～。外果皮黑绿色或暗棕绿色，具颗粒状突起和皱纹，有明显的花柱残迹或果梗痕。切面中果皮略隆起，厚～，黄白色或黄褐色，边缘有1～2列油室，瓤囊棕褐色。质坚硬。气清香，味苦、微酸。麸炒枳实切面黄色，略有焦斑，质脆易折断，气焦香，味较弱[2]。
枳实味苦、辛、酸，性微寒[3]。归脾、胃经[2][3]。具有破气消积、化痰散痞的功能[2]。用于积滞内停，痞满胀痛，泻痢后重，大便不通，痰滞气阻，胸痹，结胸，脏器下垂[3]。枳实生品性较峻烈，以破气化痰为主，但破气作用强烈，有损伤正气之虑，适宜气壮邪实者[2]。用于胸痹、痰饮；近年亦用于胃下垂[2]。麸炒枳实可缓和其峻烈之性，以免损伤正气，以散结消痞力胜[2]。用于食积胃脘痞满，积滞便秘，湿热泻痢[2]。
《中华人民共和国药典》（2010年版）记载有此中药的药典标准。
Fructus Aurantii Immaturus（拉）（《中医药学名词（2004）》）
immature orange fruit（《中医药学名词（2004）》）
枳实、炒枳实[2]。
枳实为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L. 及其栽培变种或甜橙Citrus sinensis O *** eck 的干燥幼果[1]。
枳实为芸香科植物酸橙Citrus aurantium L．及其栽培变种或甜橙Citrus sinensis O *** eck的干燥幼果[2]。
枳实为芸香科植物枸酸橙Citrus aurantium L.等的幼果[4]。
枳实产福建、陜西、广西、广东、贵州、四川、江西[4]。
5～6月收集自落的果实，除去杂质，自中部横切为两半，晒干或低温干燥，较小者直接晒干或低温干燥[2]。
枳实呈半球形，少数为球形，直径～。外果皮黑绿色或暗棕绿色，具颗粒状突起和皱纹，有明显的花柱残迹或果梗痕。切面中果皮略隆起，厚～，黄白色或黄褐色，边缘有1～2列油室，瓤囊棕褐色。质坚硬。气清香，味苦、微酸。（《中华人民共和国药典》（2010年版））
汉代有去穰炒（《金匮玉函经》）、制炭（《金贵要略方论》）、炙（《注解伤寒论》）等炮制方法[2]。
唐代有熬制（《备急千金药方》）、炒黄（《外台秘要》），并提出“炒令黑，拗破看内外相似”（《颅囟经》）[2]。
宋代有麸炒（《太平圣惠方》）、面炒（《史载之方》）、醋炒（《校注妇人良方》）等方法[2]。
元代有“苦寒炙用，破水积以泄里除气（《汤液本草》）”[2]。
明代增加了米泔浸后麸炒（《普济方》）；“以蜜炙用，则破水积以泄气，除内热”（《本草纲目》）；“面炒，若恶心加姜汁炒”（《证治准绳》）；饭上蒸（《景岳全书》）等炮制方法[2]。
清代有酒炒（《幼幼集成》）、麸炒（《得配本草》）、土炒（《医方丛话》）等方法[2]。
现在主要的炮制方法有麸炒等[2]。
取原药材，除去杂质，用清水洗净，润透，切薄片，干燥，筛去碎屑[2]。
先将锅烧热，均匀撒入定量的麦麸，用中火加热，待冒烟时投入枳实片，急速翻炒至淡黄色时取出，筛去麦麸，晾凉[2]。
每100kg枳实片，用麦麸10kg[2]。
枳实为不规则弧状条形或圆形薄片，条片长达，宽达，圆片直径～[2]。切面外果皮黑绿色至暗棕色，中果皮部分黄白色至黄棕色，近外缘有1～2列点状油室，条片内侧或圆片中央具棕褐色瓤[2]。质脆[2]。气清香，味苦微酸[2]。
麸炒枳实切面黄色，略有焦斑，质脆易折断，气焦香，味较弱[2]。
枳实性较峻烈，以破气化痰为主，但破气作用强烈，有损伤正气之虑，适宜气壮邪实者[2]。用于胸痹、痰饮；近年亦用于胃下垂[2]。如治痰浊内阻，胸阳不振，胸痹疼痛的枳实薤白桂枝汤（《金贵要略方论》）；治痰厥吐逆，头目眩晕的导痰汤（《严氏济生方》）[2]。
麸炒枳实可缓和其峻烈之性，以免损伤正气，以散结消痞力胜[2]。用于食积胃脘痞满，积滞便秘，湿热泻痢[2]。如治食积不化而致脘腹胀满的枳术丸和治下痢泄泻的枳实导滞丸（《内外伤辨惑论》）；治大肠热结，便秘腹满的大承气汤（《注解伤寒论》）[2]。
枳实主含挥发油、黄酮类化合物和辛弗林、N甲基酪胺等[2]。
枳实经麸炒后，挥发油含量降低[2]。通过枳实中挥发油对离体肠管作用的研究结果看，它可使肠蠕动频率增加，振幅降低，肠蠕动收缩张力加强，舒张不完全，平滑肌处于痉挛状态[2]。所以麸炒后挥发油的减少必然导致减弱枳实对肠道平滑肌的 *** [2]。另外对不同贮存期麸炒枳实进行定性定量分析研究[2]。结果表明，不同贮存期的麸炒枳实定性结果一致，但定量结果相差较大[2]。4年贮存期与0年贮存期样品比较：辛弗林、挥发油含量明显降低，水溶性浸出物、醇溶性浸出物也均有降低[2]。相同贮存期的麸炒枳实，辛弗林含量亦有差异，RSD>5%[2]。说明贮存期和炮制过程对麸炒枳实质量有影响，因此有必要对麸炒枳实制定炮制标准，以控制其内在质量[2]。
贮干燥容器内，密闭，置阴凉干燥处[2]。防蛀[2]。
枳实味苦、辛、酸，性微寒[3]。
枳实味苦、辛、酸，性微温[2]。
归脾、胃经[2][3]。
枳实味苦，性微寒；入脾、胃经[4]。
枳实具有破气消积、化痰散痞的功能[2]。用于积滞内停，痞满胀痛，泻痢后重，大便不通，痰滞气阻，胸痹，结胸，脏器下垂[3]。
枳实生品性较峻烈，以破气化痰为主，但破气作用强烈，有损伤正气之虑，适宜气壮邪实者[2]。用于胸痹、痰饮；近年亦用于胃下垂[2]。如治痰浊内阻，胸阳不振，胸痹疼痛的枳实薤白桂枝汤（《金贵要略方论》）；治痰厥吐逆，头目眩晕的导痰汤（《严氏济生方》）[2]。
麸炒枳实可缓和其峻烈之性，以免损伤正气，以散结消痞力胜[2]。用于食积胃脘痞满，积滞便秘，湿热泻痢[2]。如治食积不化而致脘腹胀满的枳术丸和治下痢泄泻的枳实导滞丸（《内外伤辨惑论》）；治大肠热结，便秘腹满的大承气汤（《注解伤寒论》）[2]。
枳实具有破气，化痰，消积，散痞的功效，治气滞，食积，痰癖，结胸，胸痹，便秘，胸腹痞满胀痛，下痢后重，胃下垂，子宫脱垂，脱肛[4]。
煎服：3～9g[4]。
枳实主含挥发油、黄酮类化合物和辛弗林、N甲基酪胺等[2]。
酸橙干燥幼果含辛弗林（Synephrine）、N甲基酪胺；幼果皮含新橙皮苷、柚皮苷、野漆树苷及忍冬苷等黄酮苷，还含维生素C ～[4]。
枳实种子含宜昌橙苦素、闲米林等[4]。
通过枳实中挥发油对离体肠管作用的研究结果看，它可使肠蠕动频率增加，振幅降低，肠蠕动收缩张力加强，舒张不完全，平滑肌处于痉挛状态[2]。麸炒后挥发油减少导致枳实对肠道平滑肌的 *** 减弱[2]。
枳壳和枳实的水煎剂能兴奋家兔子宫，能使动物胃肠蠕动加强而有节律[4]。
枳实能升高血压，短时间利尿，减小肾容积[4]。
低浓度枳实使离体蟾蜍心肌收缩加强，高浓度时抑制，对血管呈轻度的收缩[4]。
枳实所含的N甲基酪胺和辛弗林具有和枳实同样的抗休克作用[4]。
柚皮苷等可抗炎，抗变态反应、抗氧化等[4]。
柚皮苷还能抑制肿瘤组织DNA合成[4]。
枳实
Zhishi
AURANTII FRUCTUS IMMATURUS
本品为芸香科植物酸橙酸橙Citrus aurantium L．及其栽培变种或甜橙Citrus sinensis O *** eck的干燥幼果。5～6月收集自落的果实，除去杂质，自中部横切为两半，晒干或低温干燥，较小者直接晒干或低温干燥。
本品呈半球形，少数为球形，直径～。外果皮黑绿色或暗棕绿色，具颗粒状突起和皱纹，有明显的花柱残迹或果梗痕。切面中果皮略隆起，厚～，黄白色或黄褐色，边缘有1～2列油室，瓤囊棕褐色。质坚硬。气清香，味苦、微酸。
（1）本品粉末淡黄色或棕黄色。中果皮细胞类圆形或形状不规则，壁大多呈不均匀增厚。果皮表皮细胞表面观多角形、类方形或长方形，气孔环式，直径18～26μm，副卫细胞5～9个；侧面观外被角质层。草酸钙方晶存在于果皮和汁囊细胞中，呈斜方形、多面体形或双锥形，直径2～24μm。橙皮苷结晶存在于薄壁细胞中，黄色或无色，呈圆形或无定形团块，有的显放射状纹理。油室碎片多见，分泌细胞狭长而弯曲。螺纹导管、网纹导管及管胞细小。
（2）取本品粉末，加甲醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇使溶解，作为供试品溶液。另取辛弗林对照品，加甲醇制成每1ml含的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录VI B）试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇冰醋酸水（4：1：5）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
不得过％（附录ⅨH 第二法）。
不得过％（附录ⅨK）。
照醇溶性浸出物测定法（附录XA）项下的热浸法测定，用70％乙醇作溶剂，不得少于％。
照高效液相色谱法（附录VID）测定。
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇磷酸二氢钾溶液（取磷酸二氢钾，十二烷基磺酸钠，冰醋酸1ml，加水溶解并稀释至1000m1）（50：50）为流动相；检测波长为275nm。理论板数按辛弗林峰计算应不低于2000。
取辛弗林对照品适量，精密称定。加水制成每1ml含30ug的溶液，即得。
取本品中粉约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，称定重量，加热回流小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，蒸干，残渣加水10ml使溶解，通过聚酰胺柱（60～90目，，内径为，干法装柱），用水25ml洗脱，收集洗脱液，转移至25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得。
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
本品按干燥品计算，含辛弗林（C9H13NO2）不得少于％。
除去杂质，洗净，润透，切薄片，干燥。
本品呈不规则弧状条形或圆形薄片。切面外果皮黑绿色至暗棕绿色，中果皮部分黄白色至黄棕色，近外缘有1～2列点状油室，条片内侧或圆片中央具棕褐色瓤囊。气清香，味苦、微酸。
同药材。
取枳实片，照麸炒法（附录ⅡD）炒至色变深。
本品形如枳实片，色较深，有的有焦斑。气焦香，味微苦，微酸。
同药材。
苦、辛、酸，微寒。归脾、胃经。
破气消积，化痰散痞。用于积滞内停，痞满胀痛，泻痢后重，大便不通，痰滞气阻，胸痹，结胸，脏器下垂。
3～10g。
孕妇慎用。
置阴凉干燥处，防蛀。
注：栽培变种同枳壳。
《中华人民共和国药典》2010年版
……
治两胁疼痛：枳实50克 白芍药（炒）、川芎、人参各25克．为末 空心姜、枣汤调二钱服 酒亦可．（《卫生易简方》）
治奔豚气痛：枳实炙为末．饮下方寸匕 日三夜一．（《外台》）
枳实的副作用
【 现代研究 】
化学成分：酸橙果皮含挥发油、黄酮苷(主要为橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷、野漆树苷及忍冬苷等)、N-甲基酪胺、对羟福林、去甲肾上腺素、色胺诺林等。另外，尚含脂肪、蛋白质、碳水化合物、胡萝卜素、核黄素、钙、磷、铁等。
药理作用：枳实能缓解乙酰胆碱或氯化钡所致的小肠痉挛，可使胃肠收缩节律增加；枳实能使胆囊收缩、奥狄氏括约肌张力增加；枳实、枳壳有抑制血栓形成的作用；枳实与枳壳具有抗溃疡作用；枳实或枳壳煎剂对已孕、未孕小白鼠离体子宫有抑制作用，对已孕、未孕家兔离体、在位子宫均呈兴奋作用；枳实、枳壳煎剂或酊剂静脉注射对动物离体心脏有强心作用，枳实注射液静脉注射能增加冠脉、脑、肾血流量，降低脑、肾血管阻力，枳实煎剂及枳壳的乙醇提取液给麻醉犬、兔静脉注射有明显的升高血压作用。
临床研究：以枳实通降汤(枳实、代赭石、蒲公英、白术、党参等)加减，每日1剂，治疗胆汁返流性胃炎，总有效率(中西医结合杂志，1991，10：637)；枳实理中汤加味(枳实、白术、党参、干姜、甘草等)水煎服，治疗胃下垂40例，总有效率为90%(吉林中医药2000，4：25)；以乌梅枳实散(两药各100g)研为细末，每天服2次，每次5—8g，治疗子宫脱垂有良效(河南中医，1987，5：45)；以枳实30g，葶苈子30—50g，大枣15枚，水煎每日1剂，治疗心力衰竭50例次，总有效率为96%(中医杂志，1989，2：50)。另有用枳实为主治疗功能性消化不良、冠心病心绞痛，以枳实注射液治疗多种原因引起的休克等。
【 副作用 】
(一)传统文献
《本草纲目》：枳实、枳壳无毒。
《得配本草》：枳实“大损真元，非邪实者，不可误用”。
(二)毒理试验
LD50：其注射液小鼠静注的LD50为 g／kg±／kg。
毒性反应： 枳实注射液给麻醉犬静注半小时内累积达2g／kg时，未发现有副作用。少数动物服药量过大有胃肠膨胀和大量流涎现象。
说明毒性很小。
(三)临床观察
无毒。在常规剂量内水煎服没有不适反应。长期服用也没有明显副作用。 脾虚泄泻病人腹胀用了枳实有时会感到胀气加重。枳实是破气药，所以一般用于实证气滞腹胀，而不用于气虚腹胀。枳壳一般也以用于实证气滞腹胀为宜，虚证腹胀也可使用。
【用法用量】内服：煎汤，1—2钱；或入丸、散。外用：研末调涂或炒热熨。
【注意 】脾胃虚弱及孕妇慎服，
①《医学入门》:"虚而久病，不可惧服。"
②《本草备要》:"孕妇及气虚人忌用。"
③《得配本草》:"大损真元，非邪实者，不可误用。"
枳实的食用方法
（一）养生药膳
牛肚枳实砂仁汤
原料：牛肚250克，枳实12克，砂仁2克，盐适量。
做法；牛肚洗净，切条备用。 锅中加入适量水，放入砂仁、枳实和牛肚后大火煮沸，然后转小火继续煮约2小时。 食用时加入适量盐调味即可。
药膳功效：本汤有健脾补气之功效，尤其适用于脾胃不调、脘腹胀满、胃下垂等患者服用。
油焖枳实萝卜
原料：枳实10克，白萝卜、虾米、植物油、葱、姜、盐各适量。
做法：枳实以水煎汁，滤渣后备用；白萝卜洗净，切块；葱、姜洗净切丝。 锅中加入适量油烧热，下入虾米、萝卜翻炒片刻，浇入药汁，煨至极烂。加入葱、姜、盐调味即可。
药膳功效：本菜有润肠通便之功效，尤其适用于食欲不振、便秘者服用。
（二）方剂制剂
枳实汤
【处方】枳实（去瓤，麸炒）15克，厚朴（姜制，炒）30克，大黄（酒蒸）甘草（炙）各9克，桂心（不见火）克。
【制法】上药哎咀。
【功能主治】治腹胀发热，大便秘结，脉洪数。
【用法用量】每服12克，用水220毫升，加生姜5片，大枣2枚，煎至160毫升，去滓温服，不拘时候。
呕者，加半夏30克。
【摘录】《重订严氏济生方》
枳实丸
【处方】枳实45克，菊花、蛇床子、防风、白薇、浮萍、蒺藜子各30克，天雄、麻黄、漏芦各15克。
【制法】上药十味，研末，蜜和为丸，如大豆大。
【功能主治】 治小儿风热侵袭肌肤，痒痛如疥，搔之汁出，遍身痞癗如麻豆粒，年年喜发，面目虚肥，手足干枯，毛发细黄，肌肤不光泽，鼻气不利。
【用法用量】五岁小儿饮服10丸，加至20丸，一日二次，五岁以上者，随意加之。儿大者，可为散服。
【摘录】《备急千金要方》卷五
枳实酒
【处方】枳实不拘多少（面炒黄，切片，去粗皮）。
【功能主治】治遍身白疹，瘙痒不止。
【用法用量】每服6克，用酒浸少时，去枳实，但饮酒最妙。用水煎枳实，洗患处尤佳。
【摘录】《普济方》卷一○八引《简易方》
瓜蒌枳实汤
【处方】瓜蒌（去壳）、枳实（麸炒）、桔梗（去芦）、茯苓（去皮）、贝母（去心）、陈皮、片芩（去朽）、山栀各3克 ，当归克，砂仁、木香各克，甘草克。
【制法】上锉一剂。
【功能主治】清热化痰，理气止痛。治痰结咯吐不出，胸膈作痛，不能转侧，或痰结胸隔满闷，寒热气急，并痰迷心窍，不能言语者。
【用法用量】加生姜煎，人竹沥，姜汁少许，同服。
痰迷心窍，不能言语，加石菖蒲，去木香；气喘，加桑白皮、苏子。外用姜滓揉擦痛处。
【摘录】《万病回春》卷二
枳实薤白桂枝汤
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