免疫荧光操作步骤及注意事项免疫荧光技术是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。它是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。利用荧光显微镜可以看见荧光所在的细胞或组织，从而确定抗原或抗体的性质和定位，以及利用定量技术(比如流式细胞仪)测定含量。免疫荧光操作步骤及注意事项紫外光激发荧光物质放射荧光示意图免疫荧光实验的主要步骤包括细胞片制备、固定及通透(或称为透化)、封闭、抗体孵育及荧光检测等。细胞片制备(通俗的说法是细胞爬片)是免疫荧光实验的第一步，细胞片的质量对实验的成败至关重要，原因很简单，如果发生细胞掉片，一切都无从谈起。这一步关键的是玻片(Slides or Coverslips)的处理以及细胞的活力，有人根据成功经验总结出许多有益的细节或小窍门，非常值得借鉴。固定和通透步骤最重要的是根据所研究抗原的性质选择适当的固定方法，合适的固定剂和固定程序对于获得好的实验结果是非常重要的。免疫荧光中的封闭和抗体孵育与其它方法(如ELISA或Western Blot)中的相同步骤是类似的，最重要的区别在于免疫荧光实验中要用到荧光抗体，因此必须谨记避光操作，此外抗体浓度的选择可能更加关键。最后需要注意的是，标记好荧光的细胞片应尽早观察，或者用封片剂封片后在4?或-20?避光保存，以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响实验结果。
是的，光谱学与光谱分析期刊杂志现已停刊，具体复刊时间以杂志社消息为准，该杂志未出现在近期新闻出版总署目录内，
没有。《光谱学与光谱分析》是1981年创办的中文学术期刊，月刊，中国光学学会主办，中国科学技术协会主管，投的光谱学与光谱分析期刊会在3个月可以被检索，期刊主要刊登激光光谱测量、红外、拉曼、紫外、可见光谱、发射光谱、吸收光谱、X-射线荧光光谱、激光显微光谱、光谱化学分析、国内外光谱化学分析最新进展、开创性研究论文、学科发展前沿和最新进展、综合评述、研究简报、问题讨论、书刊评述。
郭敬明：1. 每一天都有无数的人涌入这个飞快旋转的城市——带着他们的宏伟蓝图，或者肥皂泡的白日梦想；每一天，也有无数的人离开这个生硬冷漠的城市的摩天大楼组成的森林——留下他们的眼泪。 2. 这是一个以光速往前发展的城市。 旋转的物欲和蓬勃的生机，把城市变成地下迷宫般的错综复杂。 这是一个匕首般锋利的冷漠时代。 在人的心脏上挖出一个又一个洞，然后埋进滴答滴答的炸弹。财富两级的迅速分化，活生生的把人的灵魂撕成了两半。 3. 大一的男生里面，百分之八十的人戴着眼镜，剩下百分之二十里有一半的穿着裤腿短三寸的裤子，露出里面的白色尼龙袜子，而另外一半，扔进人海里，就永远也不可能在寻找到他们。 4. 剩下的唐宛如非常淡定，我可以理解，因为她完全不看书。她宁愿窝在沙发上用一堆爆米花电影打发掉一下午，也不愿意阅读一本足够让人声泪俱下或者灵魂扭曲甚至毛骨悚然的小说。你就算告诉她“郭敬明是唐朝的一位诗人”，她依然是这样淡定地说一声，“哦，是吗”，而且她一直认为王朔跟王蒙是兄弟。 5. 在这个过程里，有一本落下来砸到了南湘的头上，导致她差点休克过去——每本差不多一公斤重、又厚又大的时尚杂志，确实有当作凶器的潜质。 6. 在我们平凡而又微茫的生活里，并不是只有轻松的欢笑和捧腹的乐趣。在时光日复一日的缓慢推进里，有很多痛苦就像是图钉一样，随着滚滚而过的车轮被扎进我们的心中。 7. 我们痛苦来源于爱。但我们的幸福也来源于爱。 8. 窗外浓厚的夜色被寂静衬托得格外沉重，像是一池无风天里的湖水。黄色的路灯下，偶尔会走过一对相互依偎的约会男女。他们的影子被拉的很长很长，像是大写的“幸福”二字。 9. 开学的第一天过去了。 其实我们的生命就是这样一天一天地转动过去。秒针、分针、时针，拖着虚影转动成无数密密麻麻的日子，最终汇聚成时间的长河，变成我们所生活的庞大的时代。 而我，和我们，都是其中，最最渺小微茫的一个部分。 10. 梦里很多摇晃的绿色光晕，后来渐渐看清楚了，那是一整片巨大而安静的树。 树影晃动成海洋，朝大地的尽头倾斜着。滚滚而去的绿色巨浪。 11. 因为我已经快要走火入魔了。很多次，我想要抓着自己的头发，把自己从地面上扯起来——无论牛顿是否会从棺材里破土而出，翻着书上的牛顿定律对着我抓狂地怒吼：“这是不可能的！” 12. 他把第一只混沌咬紧口里，然后一颗滚烫的眼泪就掉进了白色的塑料饭盒中。 13. 昏黄的路灯下，顾里收到了顾源回过来的消息。 “我爱你” 这是顾里新的手机上，第一条来自顾源的消息。 14. 在那些衣着光鲜的时尚分子和派对动物严重，恒隆一定是上海的中心。当穿着10cm的细高跟鞋咔嗒咔嗒地踩过恒隆光洁如新的大理石地面时，她们一定觉得自己踩在整座上海之上，无论刚刚刷卡买下的那件小山羊皮外套是否相当于整整一个月的薪水。 15. 沿海无数的天价楼盘沐浴在上海昏黄色的雨水里，有寂寥的贵妇人在第十二次拨打老公手机听到的电话依然依然是被转语音信箱之后，茫然地抱着蚕丝的抱枕，靠在床边看窗外的江面。翻腾的黄色泡沫像是无穷无尽的欲望的漩涡。 16. 无数前来上海旅游的外地人眼中，上海的中心一定是那条被电视节目报道了无数便的熙熙攘攘的南京路。佐丹奴和班尼路的旗舰店，都闪动着巨大的点子屏幕，满大街的金银楼里，黄金链子一根比一根粗。无数的行人举起相机，闪光灯咔嚓咔嚓闪成一片。 17. 而唯独人民大道上，市政府铸造的那个标注上海市中心零起点的那个手掌大小井盖一样的铜牌，早消失在人们的视线和记忆里。 18. 人真的是一种完全以自我为中心的动物。 19. 已经十二月末了。上海开始下起连绵不断的寒雨。上帝在头顶用铅灰色的乌云把上海一整个包裹起来，然后密密麻麻地开始浇花。光线暗的让人心情抑郁，就算头顶的荧光灯全部打开，我也只能提供一片更加寂寥的苍白色。 20. 在顾里的人生里，短短的几十年生命，就应该遵循生物的趋利避害的原则。迅速离开第自己有害的人和事，然后迅速抓住一切对自己有利的东西。整个人生，都应该是一道严格遵循数学定理的方程式，从开始，到最后，一直解出那个X是多少。 21. 如果现在你是以上帝的角度或者高度在俯瞰我们的大学，那么你就会看到正在上演一场精彩的猫与鼠之间的追逐大战。 22. 如果我们的生活充满了以前另一种未知的可能性的话，那么在大学围墙范围内，这一场追逐大战，谁先遇到谁，都可以导致完全不同的结局。 这就像有人在转盘里撒下一大把钢珠，在转盘没有停下来之前，谁都不知道最后的赢家会是谁。 23. 我相信，如果我们的朋友里，还有人能完成这样一个类似深入虎穴再在老虎脸上踩上两脚的任务话，那么一定只能是南湘。唐宛如也不行，唐宛如会直接把老虎踩死。 24. 她像美国总统一样，无论发生什么样的事情，哪怕是世贸双子被炸平了，她也依然是镇定而冷静的，她不会悲伤春秋，只会思考如果控制损失。 25. 又是这样漫长而灰蒙蒙的冬季—— 我们的爱，恨，感动，伤怀。 我们的过去，我们的现在，我们无限遥远的未来。 我们呼朋引伴的草绿时代，我们促膝长谈的漫漫长夜。 都被灌录在固定长度的那一段胶片里。随着机器的读取，投影在黑暗中的幕布，持续放映。主演们在幕布上悲欢离合，观众们在黑暗中用眼泪和他们共鸣。 我们仅仅只是这个庞大时代的小小碎片，无论有多么起伏的剧情在身上上演。我们彼此聚拢、旋转、切割、重合、然后组成一个光芒四射的巨大玻璃球。 我们是微茫的存在，折射出心里每一丝憧憬和每一缕不甘。 26. 让我们先把时间停顿在这里。 然后让我们抬起手，把手腕上的钟表往回拨————直拨到两个月前。 27. 但彼此的心里都在用力地拔河。 双手紧握着粗糙的绳索，掌心里渗出黏糊糊的血。 没有加油的人群，没有队友，空旷的斗兽场上，安静却激烈的双人拔河。 28. 如果黑暗里可以有夜市的能力，那么现在，你一定会看见满脸愤怒和屈辱的袁艺，在黑暗里咬牙切齿。 29. 但是生活永远不是连续剧。它不会再应该浪漫的时候，响起煽情的音乐；它不会再男主角深情告白的时候，就让女主角浓烈的回应；它不会再这样需要温柔和甜蜜的时刻，就打翻一杯浓浓的蜂蜜。 它永远有它猜不透的剧情。 和那个创造它的，残酷的编剧。 30. 没有物质的爱情只是虚弱的幌子，被风一吹，甚至不用风吹，缓慢走动几步就是一盘散沙。 31. 如果我们的生活是一部电影，或者说是一部高潮迭起的连续剧，那么，在这样的时刻，一定会非常伤感的背景音乐缓缓地从地面外浮现出来。 那些伤感的钢琴曲，或者是悲怆的大提琴琴音，把我们的悲伤和难过，渲染放大直到撑满一整个天地。 32. 胸腔里翻腾的哽咽和刺痛，都被用力地压进身体的内部。像是月球上剧烈的陨石撞击，或者赤红色蘑菇云的爆炸，被真空阻隔之后，万籁俱寂，空洞无声。 33. 他想，这就是我的爱。 她冷静地朝远处走去，渐渐地离开了自己的世界。 他张开嘴大哭。 冷风像是水银一样倒灌进温热的胸腔里，一瞬间攥紧心脏。 34. 这才是悲剧的最强音节—— 弥漫在整个空旷天地间的，低沉提琴的巨大悲鸣。 35. 我们永远都在崇拜着那些闪闪发亮的人。 我们永远觉得他们像是神祗一样的存在。 他们用强大而无可抗拒的魅力和力量征服着世界。 比如现在正在打电话的宫洺，比如刚刚离开的kitty。 但是我们永远不知道，他们用什么样的代价，去换来了闪亮的人生。 36. 当我沉睡在被窝里的时候，当我为爱情心花怒放的时候，当我无聊地躺在沙发上看电视局肥皂剧的时候，他们喝光了新的一杯咖啡，揉揉眼睛，继续新的事情。他们握着手机在沙发上稍微闭眼休息一个小时。 37．旋转着的，五彩缤纷的物质世界。 等价交换的，最残酷的也最公平的寒冷人间。 38．我们活在浩瀚的宇宙里，漫天漂浮的宇宙尘埃和星河光尘，我们是比这些还要渺小的存在。你并不知道生活在什么时候突然改变方向，陷入墨水一般浓稠的黑暗里去。你被失望拖进深渊，你被疾病拉近坟墓，你被挫折践踏的体无完肤，你被嘲笑、被讽刺、被讨厌、被怨恨、被放弃。但是我们却总在内心里保留着希望保留着不甘心放弃跳动的心。我们依然在大大的绝望里小小的努力着。这种不想放弃的心情，它们变成无边黑暗的小小星辰。我们都是小小的星辰。 39. 天空悬着一轮巨大的月亮，冷漠的光辉把人间照的得像一出悲惨的话剧。明明只是过去了短短的一天，却像是漫长的一个世纪。 40. 巨大的月亮像是一个精美的布景，整个上海都被笼罩在这个布景下面。 41. 惆怅的青春，叛逆的岁月，发酵成一碗青绿色的草汁，倒进心脏里。 42. 在过去了这么多岁月之后，依然刺痛她，但是也温暖她。他的背影像是相框里的黑白照片，如同一颗沉默的树。 她咬咬牙告诉自己，在未来漫长的生命里，这是最后一次，看见他了。 43. 白光四下流淌，逐渐炎热起来的空旷街道像是一部黑白的默片。 无限膨胀开来的寂静。 消失了所有声音的，蜷缩抽动着的小小身影。 44. ————我多想和他在一起。 ————我多想和在像从前一样，在一起。 45. 我走出黑暗的展厅，窗外是南京西路逼人的奢华气息。无数高级轿车从面前开过去。那些从橱窗里发射出来的物质光芒，几乎要刺瞎人的眼睛。这是上海最顶级的地段，也是上海最冷漠的区域。这里的人们内心都怀着剧烈的嫉妒和仇恨，这些浓烈而扎实的恨，是上帝仍给这个上海顶级区域里的一枚枚炸弹，没有人能够幸免，所有人都在持续不断的轰隆声里，血肉横飞，魂飞魄散。 46. 躺在床上可以看见雪白的天花板。 再加上雪白的床单。就可以幻想自己在一个雪白的世界。 我们所熟悉的 雪白的世界，有医院或者天堂。 47. 你可以通过各种各样的渠道去了解上海——这个在中国巨大的版图上最最耀眼的城市之一。或者，去掉“之一”。 48. 我感觉肚子里装了太多东西，快要爆炸了，于是在路边的黑铁雕花椅子上坐了下来，手撑着腰，像个孕妇一个晒太阳。 49. 我抬起头，在阳光下眯起眼睛，有那么一瞬间我觉得我周围空无一人，偌大的校园安静极了，甚至可以听见风吹草动茂密的梧桐树叶的沙沙声，像是有一整座沙漠从我头顶卷动过去。只有渺小的我，孤单的坐在强烈的阳光下。 50. 空气里是盛夏时浓郁的树木香味。 多么悲伤的时刻啊。我在心里感伤起来。 51. 唐宛如不太情愿地睁开眼，看见一只不知道是在昏睡还是已经休克或者死亡的褐色大蟑螂，此刻正在她的手里躺着，露出它油亮油亮的层层叠叠的腹部。 她看了看，然后轻轻抬起手，把它丢进了垃圾桶里。（……） 52. 平静地穿梭于世界上空的电波。磁流。讯号。 它们从不同的地方漫延而来，越过无数陌生人的头顶，越过无数块荒凉或者繁华的土地，然后传递进我们的手机里。 这块小小冰冷的机器，像是我们裸露在身体之外的脆弱的心脏。电波还原成各种各样的语气和词汇，将它重重包裹。温暖而甜蜜的糖水，或者苦涩而冰冷的汁液。 它们像温柔的风一样抚摸过去，又如巨大的铁锤重重砸下。 53. 各种各样的人以电波为介质，通过这个我们暴露在身体之外的心脏，寻找到我们链接上我们，轻易地摇撼着我们原本平静的世界。 54. 周围灯光流淌，穿着高贵的人群匆忙地在他们身边行走。其中掺杂着很多来观光的外地游客。他们头顶巨大的屏幕上，是刚刚上映的电影宣传，剧情精彩，高潮迭起。 55. 他们各自的想法和目光，像是深深海底的交错急流，寒暖冲撞。 56. 隐约的一种直觉，让我感觉像是光脚走在一片长满水草的潜水湖泊里，不知道哪一步，就会突然沉进深水谭里去，被冷水灌进喉咙，被水草缠住脚腕，拉向黑暗的水底。 57. 她像是一朵巨大饱满的积雨云一样，沉默而又缓慢地飘到座位上，幽幽的，像一个鬼。 58. 上海像是突然变成了一个我从来没见过的巨大洞穴，无数的黑暗气流唰唰地朝底深渊卷来卷去，我在洞穴边上摇摇欲坠。 瞬间从水泥地面下破土而出的那些疯狂的黑色荆棘，哗啦啦地摇摆着，随风串上天空。 59. 长满尖刺的黑色丛林，一瞬间牢牢地包裹住了整个上海。 然后，开始肆无忌惮的吞噬了。 60. 三天之后，上海开始了一场大规模的降雨。 气象预报里说，这是最近几年夏季里，最大规模的一次降雨。 无数磅礴的大雨击打在摩天大楼的玻璃外墙上，整个城市像是被大水包围的遗迹一样，灰蒙蒙一片。 所有的心跳变的慢慢微弱起来。 61. 大雨结束之后，一场罕见的冰雹，在六月里，席卷了浦东。乒乓球般大小的冰球，从天空上飞速而剧烈地砸了下来。 62.四下泛滥的白光几乎要把所有的水泥地面烤的冒烟，走在路上，耳朵里都是地面裂开来的声音，像一口沸腾作响的油锅。 63.宫洺面无表情地扬了扬手里的医生诊断书，问他：“什么时候的事情？” 崇光无所谓地撇撇嘴，“蛮久了，反正差不多快死了吧，我想。” 宫洺站起来，走出了病房，看也不再看他一眼。“那你怎么不直接死啊”宫洺把门关上，丢下一句冷冰冰的话来。 崇光砖头看了看他留在茶几上剥好的橘子，抿了一下嘴，抬起手擦掉流出来的眼泪，笑了笑，低声说：“滚你妈的。” 64. 头顶巨大的黄色月亮，把流动着的光芒，均匀地涂抹在黑暗的茂密树林里。 刚刚登录不久的台风从头顶卷过，像是掀起一阵海浪，朝遥远的天边轰鸣而去。巨大的声潮，带走心脏跳动的杂音，留给黑夜下的世界一片光滑的寂静。 65. 而当我完全沉浸在这样发泄的分崩离析中时，湖的对岸，那排高级病房里，崇光站在巨大的落地窗前，看着湖对岸哭得伤心欲绝的我们。 他的双眼像是冬天蓄满水的黑色湖泊。湖边一圈放肆燃烧的红色枫林。 他举起手，对着湖边的人们挥了挥手没，但是，我们却没有听见。 后来，崇光告诉我，当时他觉得自己像是被隔绝在某一个孤单的世界里，万籁俱寂，自己的声音消失在宇宙的某一个洞穴里。 大家都没有看见他。 也许明天醒来，他就消失了，爱过他的人，再也找不到他。 夏天里茂盛的树木清香。 晒在阳光下的白色被单，暖烘烘的香味。 66. 现在我觉得自己也像一份被扔掉的报纸。 67. 如果目光可以射出毒针来的话，我半个小时之前就已经是个仙人掌了。 68． 我们三个东倒西歪地躺在他家巨大的落地窗边上的法国沙发上，望着江对面繁华的上海，星星点点的灯光，像一团熄灭的火堆里残余的红星。 有那么一个瞬间，我觉得我们的生活也是像是这样，只剩下一堆灰烬，和几颗挣扎着的火电。 69. 我抬起头，擦掉从眼里滚出来的眼泪。它们在我的脸上留下的泪痕，迅速地被滚烫的提问蒸发掉了。 70. 不知道，万一酒精中毒，送去医院之后，医生能不能从我的血管里流淌的酒精中找到我的血液，以确定我的血型。 71. 血肉横飞只是开始而已。 魂飞魄散才是真正的好戏。 当然，我们都知道，我们热爱生活中这样刺激有跌宕的drama。 72. 连续数十场的暴雨。 每天早上都是电闪雷鸣。 巨大的闪电和雷声，像是长着尖利长指甲的手，硬生生撕扯着每个人的耳膜。每一声爆炸性的雷声，都像是黑暗里突然甩过来的一个重重的耳光。 73. 赵薇演的不是小鸭子是小燕子，我谢谢你了。 74. 顾里想了想，说：“那还是琼瑶剧吧。郭敬明的主角哪个不是死了的，他的心里一定极其阴暗变态，他的童年一定充满了阴影和扭曲。” 75. 我轻轻地闭上眼睛，眼泪流进她的枕头里。 76.在回忆的最后，我终于忍不住“哇”的一声哭出来。我紧紧地抓住枕头，胸口里充满了巨大的，一种叫做“物是人非”的痛苦。 77.我躺在床上，像是被人用巨大的锤子砸扁了。 78.我们的生命存在于这样的小小的、拥挤的、温暖的时代之中。 庞大的背景音乐，悠扬地回荡在整个上海，为这个繁华的时代点缀着金边。还有更多我们并不知道的时间，我们未曾看见的场所，这个时代并未停止转动。它用一种最冷酷和理智的方式，让每一个人的生命平行前进。 79.夕阳的光线像是被风吹散一般迅速消失，正如同再也回不去的美好年华。那感觉，像是一个时代最后的剧中。 80.他第一次在眼睛里流露出的那种期待和柔软，如同自己的小侄子拿着他刚画好的蜡笔画，跑过来拉着自己的衣摆，希望得到表扬一般的表情。 81. 半眯着眼睛的雄狮，懒洋洋地打出了第一个呵欠。 82. 在上海的市中心，找到一套让自己满意的公寓，是一件非常困难的事情，其难度不亚于找到一个可以结婚的好男人。 83. 要在上海市中心的中心静安区找到一套让自己满意的公寓，则是一件更加困难的事情，其难度类似找到一个可以结婚的好男人，并且他结婚后不会出轨，或者出柜。这是上海人公认的定律。 84. 太阳不知道什么时候已经彻底消失了，留下一抹凄凉的红色挣扎在天际线上。 85. 他漆黑的头发遮住了年轻偶像的面容，也遮住了他对这个世界巨大的失望， 86. 路灯跳动了几下，像是快要熄灭的样子，但是几秒后，又恢复了正常。 一整条大街灯火通明，繁华得让人觉得很幸福。 87. 你知道吗，我们的生活，就是这样的，一场又一场，永远无休止的闹剧。 有一天，我们总会在最后的爆炸声里，灰飞烟灭。 88. 很轻很轻的沙哑声音，在吉他的伴奏下飘满了整个房间。我像是看见很多很多戴着厚厚皮帽子的俄罗斯人，走在暮色降临的大学街道上。他们低着头，谁也不认识谁，匆忙地赶路。 周围还有马车，有高大的光秃秃的白桦林。大学充斥着整个城市，一片让人心碎的白色。 88. 上海没有秋天。往往是夏天一过去，下几场大雨，然后整个城市就开始飕飕地冒汗气。冬天迅速地在地上打几个滚，于是一切都变成冷冰冰的样子。 隔着玻璃往外望的时候，我都怀疑凌晨的时候地面会不会结冰。 89. 窗外的雨带来的寒气，从打开的窗户涌进来。我走到窗户边上，把窗户关起来，然后缩窗台太，把脸贴着玻璃往外看。那些黄色的街灯，隔着水淋淋的玻璃，像是弄脏的油彩。 90. 很多时候，我们的人生，就像是电影里配乐的叙事片段。镜头从我们身上一个一个地切过去，然后转了一圈，又切回来。没有对白，没有台词，我们沉默地出现在这些被音乐覆盖着的镜头里。 我们在同一个时间里，在同一段哀伤的配乐之下，各自生活在这个小小的星球上。 这样悲伤的我们。 91. 音乐从我们每一个人的身上流淌过去，就像是雨水覆盖在我们的岁月之上。 92. 大雨均匀地飘洒在整个日渐寒冷的上海。 深夜的街头，很多人穿起长外套。打着伞的人冷漠地行走在路灯的光明下，然后慢慢地走近黑暗里。 93. 密密麻麻的雨飘落在挡风玻璃上，雨刷孤单地来来回回，在安静的夜里，发出单调的声音来。 94． 雨点在湖面上打出一个有一个涟漪。 辽阔的黑色湖面，有几团路灯的光晕倒影在上面，像童话电影里湖底发出亮光的珍珠。 94. 伞外是一整片庞然而有安静的雨水。 95. 一整个小小的宇宙里。 有整个小小的时代。 我想过不了多久，上海就慢慢进入冬天了吧。 我真心地期待着一场大雪，持续不断的大雪，把这个城市，重新变的干净，变得纯白，变的空空荡荡，变得什 么都没有。 96. 就像电影《后天》里一样，整个城市都变成巨大的冰原。 大家一起活活埋葬在水晶般闪耀的冰块里，千年万年，青春常驻，永垂不朽。 97. 那是一种怪异的感觉，一个和我们一起生活了那么多年的人，突然有一天消失在了我们的生命里。好像大家并没有什么感觉一样，继续地朝前生活着，伤心，悲痛，喜悦，激动……我们的生活好像并没有什么不一样。 98. 但是我知道，在看上去一模一样的生活力，有些东西再也回不去了。 99. “你怎么还不死！”他听到后停住了动作，沉默了，过一会儿他小声说：“应该快了。”电视屏幕上的战士随着他的手柄停止而停了下来，过了会儿，就中弹倒地了。崇光咧着嘴，满不在乎地笑着，说：“你看，死了吧”他的笑容在夕阳里，看起来有一种悲怆的味道。阳光把他下巴青涩的一圈胡渣，照得一篇金黄色，看起来就像英俊的英国皇室成员。 100. 时间一点一滴地过去，流逝告别。 我们慢慢地走向一个被上帝作记号的地点。 101. 我坐在客厅里流眼泪，虽然没有哭出声，但是中途差点被渗透到鼻腔里的眼泪给活活呛死。 102. 我知道，这是上海永远都让人腻烦的冬天。阴冷的，潮湿的，上海冬季。 103. 我想，离、我们很远的市中心，现在一定也是一片洋溢着幸福的景象吧。 104. 我们都知道，电影里总会有让我们惊讶的桥段。但是，当我们拿着爆米花可乐坐在电影院里的时候。都知道无论多么惊险，蜘蛛侠都会打赢章鱼博士；无论多么曲折，最后王子也很会和灰姑娘在一起。 105. 但是生活不是这样，它轻轻地把一颗炸弹放到你手心之前，其实早就把一张诅咒的符，贴上了你的后背。 106. 我的头像要裂开来一样，仿佛听见黑洞深处传来鬼魅般尖利的笑声。 火车呼啸这着，冲进了一篇迷蒙的大雪里。 韩寒：1.世界上逻辑分两种，一种是逻辑，一种是中国逻辑。2.真理往往是在少数人手里，而少数人必须服从多数人，到头来真理还是在多数人手里，人云亦云就是这样堆积起来的。3.如果现在这个时代能出全才，那便是应试教育的幸运和这个时代的不幸。如果有，他便是人中之王，可惜没有，所以我们只好把“全”字人下的“王”给拿掉。时代需要的只是人才。4.我们有理由相信，建立在爱情上的爱情是短暂的，因为爱情本身是短暂的；而建立在金钱上的爱情是永远的，因为金钱是永远的。5.名气就仿佛后脑勺的头发，本人是看不见的，旁人却一目了然。笛安：仇恨，是种类似于某些中药材的东西，性寒、 微苦，沉淀在人体中，散发着植物的清香。可是天长日久，却总是能催生一场又一场血肉横飞的爆炸。核武器、手榴弹、炸药包，当然还有被用作武器的暖水瓶，都是由仇恨赠送的礼品盒，打开它们，轰隆一声，火花四溅，浓烟滚滚，生命以一种迅捷的方式分崩离析。别忘了，那是个仪式，仇恨祝愿你们每个带着恨意生存的人，快乐。落落：1.时间没有等我，是你，忘了带我走。 2.生活，无法换台，也不能离场！因为父母，我必须活下去。因为恋人，我能够活下去。因为朋友，证明我活着。因为你们，我得以活下去。 3.淡绿色的春天的蝴蝶，艳金色的夏天的昆虫，明黄色的秋天的归雁，洁白的冬天的独角兽，他们都能记得，我是这样想念你。4.这个世界上一定有不永恒的，不那么永恒的，只在某个阶段熠熠的友情。就像这个世界上有种名叫荧光粉的物质。它将之前吸收的光在随后缓慢释放，并且终有释放完的一天。当最后的一刻，从它体内映出的光束由强至弱，最后稀薄，追随而至的是完整而沉默的黑暗。先前用荧光书写的路标地名全都隐没，那么，这个时候，对于很古老很古老的一句话里说的意思，现在能明白了吗。那句话说，“再也回不去了”。 ——摘自[荧光] 饶雪漫：1.成长就是不断的伤害与被伤害爱似糖衣，我囫囵吞下，享受刹那的错觉那只不计后果的，愚蠢的飞蛾 2.在甜蜜而脆弱的爱情里，我们都这样不断地在“练习”，“练习”失去，“练习”承受，“练习”思念，在重重复复高高低低的预热中，走向我们最终的早已既定的结局。 我们都一样，太渺小，难以操纵命运的心血来潮。 原来离别竟是如此残忍，它早来晚来，迟早要来。 万事猜来猜去都得不到踏实的结局，迎头面对痛苦，或许是最好的方式之一。 不管有多么的舍不得，我们都只有笑过之后，长歌当哭。 在错位的情感里，我们只能各自为各自的那份痛楚买单，痛到极至，也不能埋怨旁人一分。 或许这就是命运，一切的过程都早已有了安排。 留在心里的伤痕是长存的，新伤复旧伤，盖不及，修不好，唯有勇敢是唯一自救的武器。 满天的云，是不能相守的一声叹息。 亲爱的，当我已经渐渐习惯没有你，我曾经愚蠢的认为，我就可以忘记你了。 我与他永远是两个世界的人，隔海想望，今生无缘，唯有放手，方可永恒。 刹那繁华都是假象，如果没有贪恋，也许我们可以活得更好。 你痛苦是因为你不能接受，而你一旦接受，就不会再痛苦。 他是他，我是我，我们就算是面对面，也永远住在两个不同的世界里。 张悦然：幸福是生生不息，却难以触及的远她在我的左边,在我的右边,在我的无处不在梦想是值得每个孩子每时每刻忧伤的念头爱和人的关系也许就像鞭子和被抽起的陀螺,它令它动了,它也令它痛了我多么爱你.可是这爱却是飘在半空中的绳索,半截的梯子.无论我多么努力的仰望,都无法触摸到真实的你.所以我只能选择放弃,原谅我的懦弱..时间不能回还，而做过的这些事，像是已经深深打下去的树桩，如何能视而不见 爱时的潮湿在爱后的晴天里蒸发掉 没有痛痕我用尽全部力气只是为了和你相依为命时间和月台会记得吗？我们曾是一对恋人，我们在这里分别水仙欲上鲤鱼去 一夜芙蓉红泪多最爱还是樱桃之远结尾,我亲爱的傻瓜,一切都是虚风,一切都是捕影
X Japan趣事全纪录[ 2007-4-20 23:30:00 | By: 北海道的秋天 ]YOSHIKI篇： YOSHIKI著名的一句话——你不要管我！一次TOSHI主持节目，中间YOSHIKI总是会冲上来。YOSHIKI又一次冲上台来，而TOSHI只说了一句话就让YO自动下去了。TOSHI:YOSHIKI你为什么每次上台都要换一身衣服？YOSHIKI:你不要管我！（下去了）YOSHIKI再一次冲上台来TOSHI:YOSHIKI白鸟瞳是谁？YOSHIKI:你不要管我！（又下去了) X的著名发言一次，TOSHI高呼“千万不要留下让自己后悔的事情啊！”当时是夏天，一个记者正在一边喝着啤酒一边吃着拉面，听到了TOSHI的这句话。因为曰文中“千万不要留下让自己后悔的事情啊！”和“千万不要吃剩下啊！”的发音相同。所以第二天，“千万不要吃剩下啊！”这样的文字就登上了报纸。奇怪的LIVETOSHI在台上高喊“今天就让我们跟着那个任性的爆走的很孩子气的BOSS一起向前冲吧！！！”说完后，只见YOSHIKI很安静很好的样子走过去，然后突然掐住TOSHI的脖子大叫“你说谁呢你？？？？”由于有条地铁线要建在小YO LA的办公室附近，会影响到小YO的工作，小YO直接把对方状到到法院。 那天对方和律师一同出席，而偶家那YOYO活宝呢？ 画着眼线，涂着唇彩，一套黑色西装，打扮的漂漂亮亮的，没有请律师，一个人十分幽雅的坐在另一边，当念陈述词时，这个活宝竟然用着95年念《LONGING》独白时的语调来念，边说边还不忘招呼他的头发“……大家应该知道，日本人是追求完美的民族，……”一段废话一驼的陈述词后，这个活宝，抬起头来，用着无辜的眼眼神，巴几巴几的看着对方的律师温柔之极的语调问：“您还有什么要补充的吗？” 最后法官判了小YO胜诉，那贱人给法官鞠了一躬，眨眨眼看着那可怜的法官，“晚上有空一同吃顿饭吧，我们来谈谈有关法律的问题。” 他竟然还冲在场的所有人傻笑.... YO追车事件一次，X的成员们离开一个HOTEL，大家都已经下去了，只有YOYO一个人还在上面磨蹭。大家在下面等的不耐烦，于是HIDE便打电话上去威胁YOYO说 “你再不下来我们就开车走了”。YOYO一听干紧拎着大包小包从里面冲了出来。因为当时大家都靠墙站着，YOYO一着急就没有看到大家，更碰巧的是当时正好有一辆和他们的车很像的车从他面前开走。结果，YOYO就跟在那辆车的后面，一边追一边大喊“停一停，让我坐上去啊！” 更没想到那辆车竟然还真的停下来让他坐了上去。X的MEMBERS们一看，全都傻掉了。只得集体在后面追着车大叫“YOSHIKI～你下来啊～” 咖喱饭事件94 还是95年的时候，livetour时，YOSHIKI已经连续工作了好几天，也好几天没吃什么东西了。STAFF实在看不下去了，就问他想吃什么，这只猪想了半天，说想吃蔬菜咖喱饭。STAFF想这个容易，于是让他第二天去。第二天，只见YOSHIKI高高兴兴的一蹦一跳的去吃咖喱了。只见他只吃了一口就哭了起来，STAFF都傻了，这又是怎么了。原来咖喱饭里一片蔬菜叶子也没有，而且辣的要命，这一下不要紧，YOSHIKI又哭又闹的，大叫：你们让我好好吃一顿咖喱饭都不行么？我都这么努力了！说完回去了，当然这天的演出也就泡汤了。YOSHIKI让队员入队的逸事1、YOSHIKI让人入队是在别人现场演出的时候，趴在舞台边上，大喊：“加入X吧！”一次TAIJI在演出的时候，YOSHIKI在底下喊：“TAIJI加入X吧！”TAIJI心里想：终于来了。TAIJI 有过退出X再加入的经历。TAIJI在第一次退出X后的第二年秋天，在街上遇见了YOSHIKI，于是YOSHIKI说：“我们去喝酒吧！”两个人就去喝酒了，回来以后，TAIJI在床上怎么也睡不着。当初他是因为音乐性不同而退出了X，但是现在他觉得，比起音乐性来，他更愿意和这个男人在一起。于是 TAIJI又加入了X。秀秀也是这样，YOSHIKI在看他的LIVESHOW时，就在台下大喊：“HIDE！加入X吧！”HIDE当时就一身冷汗，心想：你也不用这么明显，当着全部队员的面挖角。 2、HEATH的加入经历HIDE 家是开和食店的。有一个小姑娘经常来玩。有一天她碰到HIDE，说她的男朋友也是弹BASS的，HIDE说那好啊，就见见吧。原来就是HEATH。 TAIJI退出后，HIDE想拉HEATH进团，于是YOSHIKI就让HEATH来弹给他听听。HEATH很紧张，HIDE就说那我们去喝酒吧！第二天早上，两个喝醉的人被电话铃吵醒，原来是YOSHIKI。YOSHIKI说：“你们两个人怎么还不过来？！”于是两个人大包小包地赶了过去，HEATH说紧张是不紧张了，脑中一片空白，就在那儿无意识地弹BASS。YOSHIKI说，那么你先回去，我们再商量商量。HEATH刚回到家，电话铃就响了。一接是HIDE。HIDE说：“你愿意和我们在一起做吗？”HEATH说：“当然愿意！”HIDE说：“你等一下，我们的BOSS会打电话给你。”HIDE电话刚落，铃声又响了，是YOSHIKI。YOSHIKI装作若无其事的样子问：“HEATH，愿意加入X吗？”HEATH可以清楚地听见旁边HIDE死命憋着的嗤嗤的笑声。（这只死要面子的猪让HIDE打前阵，如果HEATH不同意的话，他大概会说，对不起，因为音乐性不同，所以我们不能用你。）YOSHIKI与工藤的第一次见面。工作人员："ok，开始。"YOSHIKI："！！！！？？？？哎？啊？我？我们7分钟之前才第一次见啊！！！说什么？等等，不要录----"（慌张得一塌糊涂状，全被拍了下来，汗）整整20分钟的对谈。内容基本没什么意思。YOSHIKI就从来没好意思抬头正眼看一下镜头。轻轻的歪着头，偶尔温柔的捋一下自己的头发。笑得好温柔，当时我就一个感觉"工藤是怎样的粗神经啊，能在他身边错这么久，她不知道YOSHIKI把她趁的好丑，好没有女人味吗？"之后就是可以称之为"搞笑"的镜头了。和工藤的对谈后，只用2秒钟就转到YOSHIKI和TOSHI的对谈了。某猪在TOSHI面前，用手抓住自己所有的头发，猛地全甩到了脑后，伸手够了根烟，叼在嘴里，翘着二郎腿，一副流氓像垮垮的赖在高脚椅上。…………我只能哭喊着"刚刚的娇羞何在？！"答案很快就有了。5分钟后，HIDE上场了。请大家重复我在"和工藤的对谈"中，YOSHIKI的所有动作。我不知道应该说"HIDE真酷或是TOSHI真惨，"想想还是说，"YOSHIKI真不是东西"吧。 一次LIVE，大概是91，92的时候，YOSHIKI鼓的回音器出了问题，效果很不好，于是这只猪在DRUM SOLO后打发脾气，又哭又砸东西，说“我们已经这样努力了，为什么不把装置弄好？”就怎么也不肯再表演了。STAFF都没办法，只好把门关上，刚关，就听见门上一声巨响。吓的大伙都傻了。就听见里面乒里咣阆的砸东西声。这时HIDE的部屋SOLO完，HIDE回到后台，只见STAFF都用看亲人一样的眼光看着他，就说让我进去。HIDE走到门口，大叫“你这家伙”门就开了，HIDE进去，把门一关。就听见里面碰碰响，STAFF都爬在门边，这时是TOSHI和TAIJI的SOLO，5分钟后， HIDE出来，说没事，他会好好演出的。说完就走了。又5分钟，门开了，只见YOSHIKI拿着他的衣服，很不好意思的挪出来，一副知道自己错了，又放不下脸的样子，挪啊挪啊的，挪到舞台上去了。 92的时候吧，记不得了。也是不知什么事惹了这只猪，表演完，就死活不肯安可了。STAFF 说YOSHIKI安可安可啊，这只猪就把门一关，砸东西去了，脸上的装也哭成了花猫。STAFF都急了，只好请HIDE。HIDE把门一关，5分钟后走了出来，说“他5分钟后会出来的”。5分钟后，果然门一开，STAFF都傻了，只见YOSHIKI一身新娘装，白衣胜雪，装容漂亮的让人晕。STAFF都想这5分钟HIDE做了什么呀。只见YOSHIKI拿着两捧玫瑰花就冲上舞台去了。95年，一次LIVE SHOW前，就见一个人在后台穿着一件拖地的衣服，挪来挪去，一看竟然是YOSHIKI。原来他穿的是HIDE的演出服，是大家都没有看到过的……半透明纱的！上面有许多透明的像荧光棒一样的东西。一开始，YOSHIKI一直盯着那件衣服看，想摸又害怕的样子，最终忍不住摸来摸去，再后来，终于摒不住，穿了起来，得意洋洋的在后台晃来晃去，很好奇的样子。只见HIDE站在后面墙角处，看着他，一付要杀人的表情又很好笑的样子。 95年的一次LIVE秀，YOSHIKI在ORGASM中照例玩他的二氧化碳，然后突然发现HIDE的吉他背带上换了一个新的效果器。在排练时没有看到过。于是某只猪兴趣大发，上去用手戳秀秀的效果器。然后秀秀就不停地向后挪，那只猪就不停地戳，于是变成了两个人在舞台上一个跑一个追，满场转。秀秀一付求求你停止的表情，可是某只猪就盯着人家不放了。然后轮到那只猪打鼓了，才发现大事不妙，因为打鼓是不能够动的，就看见秀秀笑得甜甜的走过来，不停地撞着 YOSHIKI，于是这个鼓就变的一塌糊涂。第二天，排练的时候，某只报复心强的猪决定要整秀秀。因为在RUSTY NAIL前面有火焰的喷射，在排练时不用全放，只要放两只试试效果，于是YOSHIKI就跟STAFF说今天放最左边的两只，然后跟其他成员说：“今天要试焰火，不要和HIDE说。”排练开始，最左边的两个焰火忽地起来，一下子吉他声就没了。小秀秀给吓坏了。下一分钟鼓声也没了。秀秀张大嘴巴回头看，只见某只猪一边用手拍着鼓，一边已经笑得断气.HIDE的证词那天大家原本是在走廊里喝酒的，结果别的客人抱怨说声音太吵，影响到了他们的休息，所以大家就转移到旅馆里的酒吧和ZIGGY BAND的MEMBERS一起喝酒。喝着喝着某Y就开始爆走，其他人都在拼命的阻止。HIDE在一边想：明明刚刚看他的时候他还在很正经的样子和别人谈论着“到底音乐呢是……”这样的问题的怎么下一秒钟就开始爆走起来了呢？为了不打扰到其他的客人，他们就拉着YO上了电梯准备回自己的房间。在电梯里，同样喝得有点儿高的某Z对HIDE说着“HIDE你不错嘛”之类的话。其实当时HIDE也有感觉到自己同样也喝高了，但一直拼命的在忍耐着。结果电梯突然一停，一个失重状态HIDE就晕了。在那以后的事情就什么也记不得了。第二天早上，他们从房间里走出来的时候，看到走廊里的一排大型盆栽全都碎掉了。当人家问“这到底是谁做的？”的时候。可爱的HIDE的回答说——“是某‘我’做的！”后来HOTEL寄来赔偿单，某Y某H和某Z各赔偿了三分之一。 TOSHI的证词是啊！后来整个走廊的壁纸全部都被迫更换了新的。而最可怜的是第二天和他们一起同台演出的一个BAND的MEMBERS，他们企图阻止某Z和某H们的破坏活动，结果被打的浑身是伤。更过分的是第二天早上，当几个破坏王见到那个乐队的MEMBERS还很哥俩儿好的问候他们“大家好！大家好！”关于脱一次说到脱，主持人问秀秀，你为什么总是穿这么多呢？秀秀说露的太多是对客人的不礼貌。旁边一个小小的声音“我脱的也不是太多啊”立刻四道杀人的眼光看着那个白痴。（宝贝啊～）我们的宝贝儿真是可爱！（四大脱星之首诶！晕）一次说到脱，主持人问秀秀，你为什么总是穿这么多呢？秀秀说露的太多是对客人的不礼貌。旁边一个小小的声音“我脱的也不是太多啊”立刻四道杀人的眼光看着那个白痴。什么！！不礼貌，多少人盼他脱啊！ 还有一次也是关于秀秀不脱的问题秀秀的回答：“我不喜欢脱后身上是肉的那种感觉，不过像YOSHIKI那样毫无瑕疵的身体，一点没有是肉的感觉，我非常喜欢。其他的人脱，都很讨厌。”（秀秀，你说话也要经大脑啊~这种话也是可以说的吗？～）天啊…… 还有一次，同样的问题（为什么都爱问秀秀这个呢？）秀秀说脱了后人的皮肤粘粘腻腻的，不舒服。这时TOSHI摸摸YOSHIKI的手臂，说是粘粘的，不过又细又滑，秀秀立刻喊“我也要摸！”PATA，HEATH也叫“我也要摸！”（汗～秀秀，你刚刚说的话就忘了吗？）一次NHK录X的节目，HIDE先录好就去喝酒了YOSHIKI和TOSHI还要继续录。喝了一会，HIDE突然想回去，说 YOSHIKI一定会吓一大跳，于是冲了回去。后来HIDE说从未跑的那么快过。谁知一回去，傻了。STAFF都远远站着，看爬着栏杆的某人。原来某人在玩喷火。就是把威士忌喝下去再喷出来，用打火机烧着玩。STAFF看到HIDE，都象看到救星一样，求HIDE让他停止。HIDE摇摇头说我还不想被烧死。总算某只猪过足了瘾，HIDE长舒一口气“还好还好，没把电视台烧掉，万辛万辛”这是元X的队员jyouji的证言。在演唱会于演唱会的间歇中，jyouji和百太郎已经睡了。突然，房间的门被“咚咚咚”的敲了起来，被惊醒的jyouji他们也不知是发生了什么事，赶快起来开门。只见，喝得烂醉的某y大喊着“你们为什么要睡觉！”冲进了房间，吧屋里的两张床一口气都翻了起来。注意，是整个床竖在地上。而后，大喊着，“都不理我，我要跳楼去死！！！”打开窗户就要往下跳，本来也喝的不少的百太郎他们一下子酒全醒了。大喊着：“千万不要放手啊。”在某Y跳下的一瞬间死死的抱住了某Y的脚。后来，把床翻起来，成了某y的得意的技巧之一。YOSHIKI之巴黎摄影篇为了「ROSE OF PAIN」的拍摄，YOSHIKI只身来到法国古城巴黎。“哪里的人都好摩登（YOYO已经找不到别的词形容了），走在大街上会突然被GAY拉住手腕，问『DO YOU LIKE A MAN？』”“我那天没化妆，穿这普通的衣服，走在大街上。却不断的被打岔（一副愤愤的样子），拜托可不可以放我一个人啊（不理解的人，敬请观看「ROSE OF PAIN」的mtv就什么都明白了，最该反省的是谁）。”那次的MTV拍摄其间，是YOSHIKI自己想观光，一个人到处乱走，然后被人误会。怪不得别人。他都试过好几次这样了。至于喝酒，YOSHIKI已经多次醉酒搬床了，TOSHI也说过，如果一觉醒来，发现床倒立，到处乱遭糟就是某Y先生的所为。 YOSHIKI的恋爱观一次谈到这个话题，YOSHIKI说：“如果自己喜欢的人没有注意到自己该怎么办呢？是送玫瑰还是怎么样呢？重要的是一定要他（她？）记住自己，比如说故意在那个人面前摔一个跟头啦～”紧接着YOYO仿佛意识到什么似的又一个劲儿的强调“比如～我是说比如啊～”（拜托～各位想想看“故意摔跟头”——这明明是女孩子勾引男生常用的伎俩嘛~~哪里会有男生会想通过故意摔跟头引起女生注意的？YOYO果真就是……白痴！）名词解释不可能——对于X来说，这个词是不存在滴～被YOSHIKI用涂改液抹去了。 YOYO的签名有一阵子YOSHIKI实在是忙疯了，每天都要看很多的文件什么的不停的签名。于是到后来，签名签得烦了的YOYO的签名就变成了一个日文的YO字外面画一个圈儿……巧克力事件X 总会收到许多巧克力，HIDE怕胖不吃，TOSHI怕嗓子不好，不吃。PATA说不喜欢甜食只喜欢酒，不吃。TAIJI无所谓，就不停的吃。只见 YOSHIKI左三圈右三圈转来转去，一付很想吃的样子，最后一转头，走了。大家就很奇怪，为什么他不吃。怕胖吧，他又是那种怎么吃都不会胖的人，没理由的啊。于是一个一个问过去，最后TOSHI说出真相。原来YOSHIKI小时侯有一次吃巧克力吃的进了医院，原因是吃的过多。暴走～（送到医院呵，宝贝你到底吃了多少巧克力啊？偶晕～）X MUSIC STATION BEST 10 应该是在94年左右 记得第一位是"红" 果然是老歌迷的钟爱,毕竟是X的第一首风格趋于成熟的代表曲目,对于大家来说都有很深的感情啊 .YO把TEARS交给综艺节目艺人大合唱…………每人一句搞得好像《今宵多珍重》《给世界多一点爱》之类的歌似的。哈哈哈哈 真是个宝贝！而且把歌词改了比如读音一样的"贵方"变成"大地,变得更为主旋律化一点,好象歌颂河山,缅怀历史的诗篇^^ YO有关情人节巧克力的自述：个人的话……我从中学时代开始就有收到巧克力哦（笑）。真是的，说干脆点，啊啊～就是想回到那个时候呢（笑）。因为那个时候只喜欢吃啊。(省略若干)怎么说呢，就是很难为情。去学校的时候，心脏就跳个不停。于是就有变得不想去上学，干脆在家休息好了的想法（笑）。一收到巧克力就觉得难为情，如果没有收到又觉得讨厌，真的很讨厌。X成员的日常生活经常出现一些破绽比如说身上常常不带现钱，只有卡。因此坐车的时候经常没有钱买票，所以只能在一边徘徊。一次YOYO自己去买一包薯条，售价仅为200日元，可结款的时候，YOYO却……递了一张卡给收款小姐……一次YOSHIKI和TOSHI一起参加一个电视节目。主持人问TOSHI：YOSHIKI经常化妆的很漂亮，那你有没有会发生错觉将他当成女孩子的瞬间出现呢？TOSHI回答说："嗯，有时候我会想这样做" 说完将手放在了YOSHIKI的[已过滤词语]。YOSHIKI立即爆走，上去狠命的掐住了TOSHI的脖子！ 一次HIDE和TOSHI主持TOSHI:今天大家又可以期待那个人穿的服装了哟～HIDE:是红色和白色的哟～TAIJI:那么，这两个人所说的那个人到底是谁呢？就是那个下着“不要叫我公主殿下要叫我王子殿下”这样子命令的女王殿下啊！！ 时光倒流......1，小学的时候用了超常的时间研究老虎和狮子谁厉害，最后确定一对一的话是老虎厉害，于是，决定最大的梦想就是养老虎2，被学校里面称为“高中建校以来正数第二坏的学生”3，在毕业典礼上，说要和老师们打声“招呼“，就扛着木刀冲进老师办公室了4，偷骑TAIJI的摩托车，结果花了7万多车费打车回的家。5，中学的时候不知道咋的被剃了樱木花道后期的和尚头，不想被坐在旁边的他挺喜欢的女孩子看到，整天戴着帽子6，在酒店里教育流氓们说“要活得有意义”，之后不小心自己睡着了，醒来的时候，那些人已经走的没影了。。。。7，YOSHIKI和TOSHI只用敲桌子的声音就可以对话。（我私人认为是在作弊的时候）8，YOSHIKI最惨的女性经历是一次在巨蛋，他的前3任女友和工藤一起都去了，YO:“怎么会4个一起来啊。。。”9，怨恨宾馆的房间太小，和TAIJI合力把屋子里的家具都从窗户扔出去。这样，又上了一家宾馆的黑名单 hide篇： HIDE 最让人吃惊的经历一次LIVE前作头发，那时HIDE的发型是必须要每根头发都立起来的。但当时恰巧专用的立头发用的喷发剂用完了，便只能另找了一种喷雾剂代替。因为不是专用的那种，所以费的时间也就比较的长。HIDE觉得无聊于是便开始抽烟。正当化妆师冲着HIDE喷出一片GAS的时候，HIDE吸了一口烟，结果“轰”的一下子就点着了。隔壁的TOSHI听到响动，扒过来一看，只见一片黑烟，根本就见不到HIDE的影子。等到黑烟散去，只见HIDE仍然安然的坐在椅子上，嘴里叼着烟，面无表情的说“唉，不是专用的东西就是不行啊～” HIDE说TAIJI打架时一般HIDE拉，HIDE打架时一般TAIJI拉。YOSHIKI打架时这两个人都拉不动。YOSHIKI发脾气时，你只要把门一关，让他砸，然后在外面计算今天又要赔多少钱就可以了。95年37(音乐杂志）HIDE的访谈HIDE说他SOLO的第一个鼓手很像YOSHIKI。Q：HIDE对其他团员有什么想要他们注意的地方吗？H：（HEATH）太瘦了，要注意。（PATA，TOSHI的忘了）YOSHIKI啊，要他注意的地方太多了，如果都说出来的话，整本书也不够呢。比如说以前 TOUR的时候，总是我和YOSHIKI一间房，每天早上就是我喊YOSHIKI起床。而YOSHIKI只要我一喊就起来了。所以以为YOSHIKI一直是这样一醒就起的人，直到和别人交谈时才知道根本不是这回事。其他人叫YOSHIKI总是负伤而归。（被某暴力男打的结果）所以每次叫YOSHIKI起床，大家都会让我去叫。不然，就会迟到哦。（笑）还有说TOSHI 是个普通人。 无言激中的访谈Q：相信命运这回事吗？H：命运，不知道。我现在的命运就掌握在YOSHIKI手中，不知道是不是命运让我遇见他。如果没有遇见他，我现在不会是这样吧。那时乐队解散，我真的想去做美容师了，如果没有遇见他，我现在大概是一个美容师吧。Q：HIDE的特技是什么？H：特技？哈哈，和YOSHIKI玩。Q：会搭讪女孩子吗？H：不大会呢。很羡慕那些会和女孩子搭讪的人啊。可我觉得没必要和女孩子搭讪。和女孩子搭讪，还不如和YOSHIKI玩。（偶昏～）Q：YOSHIKI是什么样的呢？H：以前无论到那里的LIVE HOUSE都会听人说起他们，只觉得是个表演很暴乱的BAND，所有人都让我不要和他们拉上关系。有一次，我去看他们的演出，就想见见YOSHIKI，于是就跑到后台，踢开门就大叫一声“YOSHIKI”。就看见一个好象外国小孩子的人向我灿烂的微笑着走过来说“是HIDE君吗？”。那是他第一次看到素颜的我，却一下叫出我的名字。YOSHIKI是个很好的人啊。看起来很斯文的样子。我一下子就松了口气，很好的人嘛。和从前听说的一点都不象。我当时就在想 '好可爱啊'。"YOSHIKI："可爱？你说可爱？！不能这么说嘛----"（超不好意思状）TOSHI："谢谢夸奖（我家小孩）。"YOSHIKI一脚踢了过去。 STAFF也都说他很好。YOSHIKI是个很好很好很好很好很好的人。～恩～再乘以3。（笑） 问HIDE喜欢什么样的类型呢H：脸小小的，轮廓深深的，瘦瘦的，个子高高的[他，他就直说YO好了]所以说他厉害，汗 假发篇有一段时间，PATA做的发型剪掉了中间的头发。HIDE觉得就这样把剪掉的头发丢掉了很可惜，所以就把丢了的头发又捡了回来。以后当需要的时候，他就把那些头发接到自己的头发上，还声称这是——“X内部的自给自足”。 挂衣服的模特开始的时候X的每个成员都有自己的工作。HIDE的工作就是搬运他们用来挂衣服的模特模型。因为模特和真人一般大小，不好搬动，所以搬运的时候HIDE只好将手放在模特两腿间的部位。每次HIDE这个样子的搬着模特走在大街上的时候都会觉得很不好意思，只能低着头，很快的走。在一次涉谷的LIVE前，HIDE突然一下子用双手将TAIJI抱了起来，然后大叫“COME，涉谷公会堂”更加奇怪的是，被HIDE抱了起来的TAIJI竟然还跟着一起大叫“O～ YA～ 涉谷公会堂！”看《HIDE横滨纪念演唱会》和 朋克 朋克(Punk),又译为庞克。是最原始的摇滚乐—-由一个简单悦耳的主旋律和三个和弦组成。诞生于七十年代中期，一种源于六十年代车库摇滚和前朋克摇滚的简单摇滚乐。朋克乐队朋克音乐不太讲究音乐技巧，更加倾向于思想解放和反主流的尖锐立场，这种初衷在当时特定的历史背景下在英美两国都得到了积极效仿，最终形成了朋克运动。尽管朋克乐队大多惊人地相似，作品也过于单调，但许多著名的朋克乐队都有自己的显著个性特点，比如the Ramones的泡泡糖流行乐、the Sex Pistols的Face(面容)式的强力和弦、Buzz cocks(嗡嗡鸡)流行感觉、the Crash(冲撞)的雷鬼元素、Wire(电线)的艺术试验特色等。此后朋克逐渐过渡成后朋克、新浪潮、hardcore等风格，在八十年代中期，朋克运动整体陷入低潮。hardcore朋克、前朋克、NewWave(新浪潮)、PostPunk(后朋克)、Synth-Pop(合成器流行乐)、Synth-Pop、PowerPop(强力流行乐)、NoWave(无浪潮)、PunkRevival(朋克复兴)等等。英国评论家Jon Savage写道，历史是由那些说“不”的人的创造的，而在1976年再没比朋克摇滚音乐的“不”更大的声音了。从开始，朋克就愤怒地站在了这种现象的的对立面。而且，象所有的摇滚种类 及其子类一样，朋克也很难说是一个完全新生的运动。Punk这个词的定义似乎不清晰，但它无所不在的重金属似的威力，无拒无束的自我表现、快乐完全的、清晰的并且总是不用经过审查的。打翻甚至包括打翻自己---朋克的精髓。朋克用简陋的音乐把他们露骨的叛逆行为提升到了哲学层次，在主观能动性和否定之否定的理论下创造了一种扭曲的责任感和边缘文化现象。嬉皮士们带着"乌托邦"式温和美好的理想主义走到了尽头，而随后的新一代则走向了截然相反的极端与其祈祷上帝，不如让上帝屈服。今天人们提到更多的是朋克摇滚的内在思想，于是他们说，"焦点访谈是朋克、尼采是朋克、鲁迅是朋克、频频死机的电脑是朋克......"扯远了，但是无论如何，朋克一直生活我们的世界里，就像我们的影子，永远如影随形。摇滚乐是在自我利用的错误意识压迫下的腐化情感，而朋克是美学上可以被认可但政治上注定失败的自相矛盾。 它独特的尝试革命性地影响了美式音乐和英式音乐的风格。朋克音乐在美国一直低调地存在，最终在80年代孕育了硬核摇滚和独立摇滚概念。而在英国，朋克摇滚则成为大众的宠儿。英国不是朋克摇滚的诞生地，它依旧是朋克音乐盛行和产生文化碰撞的地方，紧紧把持住其与美国在表达愤怒和叛逆上的不同思想。 朋克被誉为“英国朋克革命急先锋”的“性手枪”乐队。紧随其后的还有：碰撞、诅咒、洛克西、亵渎神灵等等。他们的音乐风格可能不大一样，但音乐的特点却同出一辙，那就是：反叛、反叛、再反叛！反叛传统、反叛制度、反叛日渐枯燥毫无激情和意义的生活。他们的每一个人身上都带有一种强烈的革命意识，事实上，他们的目的就是要在七、八十年代平庸的欧洲大陆掀起一场深入生活的各个角落的大革命，以便在人类通向未来的旅途上添上些色彩。 朋克音乐家们的创作往往直指人类的苟且，以挑战一切既成的规则。他们用简单的和弦，表达简单的情感，用粗俗明了的语言，诉说人性的美丑。他们歌颂大麻，也歌颂上帝；他们崇尚乱交，也呼喊着要社会关注那些单亲的孩子；他们诅咒战争，却在生活中滥用暴力；他们生活靡乱，但对未来充满向往，他们在颠覆旧有的糜费文化同时也创造新的糜费。总之，同文学上的“垮掉的一代”、美术上的“ 达达主义”一样，他们代表着人类发展方向的一种可能性和多种可选择性，是人类多重矛盾集于一身的直接反映。 继而，朋克文化从舞台走向生活，他们开始在表演以外的各个层面表现他们彻底革命的决心：穿上磨出窟窿、画满骷髅和美女的牛仔装；男人们梳起酷毙了的鸡冠头，女人则把头发统统剃光，露出青色的头皮；鼻子上穿洞挂环；身上涂满靛蓝的荧光粉，似乎非得让你对他们侧目而视才满意，其实他们什么也不为，只是要以此表现他们的与众不同，表现他们的叛逆，表现他们对这个现实社会的不满罢了。如果你以为他们是为了表现自己是朋克而如此装扮，那就错了，用朋克的话来说：“我朋克所以我朋克，如果是为了让人认识到我是朋克，而把自己装扮得像朋克的话，那就一定不是真的朋克。”如今这个社会似乎什么都有假的，假冒名牌商品的；假冒警察罚款的；假冒瞎子要饭的，当然也有假冒朋克的。这些假的朋克们不断的自我标榜为朋克、自诩为斗士，“我只会三个和弦！”天知道是不是第四个和弦苦练未遂才这么说的，其实，他们骨子里不过是比俗人更加虚伪的俗人。 有假装朋克的俗人就有假装俗人的朋克，前者为满足欲望和虚荣而后者却为了满足内心和精神需要。 朋克是指一种源于六十年代车库摇滚和前朋克摇滚的简单摇滚乐。 它是最原始的摇滚乐，由一个简单悦耳的主旋律和三个和弦组成，经过演变逐渐脱离摇滚，成为一种独立的音乐。朋克音乐不太讲究音乐技巧，更倾向于思想解放和反主流的尖锐立场，这种初衷在二十世纪七十年代特定的历史背景下在英美两国都得到了积极效仿，最终形成朋克运动。 朋克被誉为英国朋克革命急先锋的性手枪乐队。紧随其后的还有：碰撞、诅咒、洛克西、亵渎神灵等等。他们的音乐风格可能不大一样，但音乐的特点却同出一辙，那就是：反叛、反叛、再反叛！反叛传统、反叛制度、反叛日渐枯燥毫无激情和意义的生活。 扩展资料 朋克文化始源于20世纪70年代，它是一种对当时传统音乐的反叛，其中包括前卫摇滚和重金属。70年代朋克音乐的发源地就是纽约东村。这种地下的、极简主义的摇滚乐是“反乌托邦”的，充满呐喊和绝望，既叛逆又简陋。 东村的CBGB俱乐部曾经是朋克音乐的圣地，艺术家们在这家俱乐部里四出活动，朋克乐团的成员多削着短发，身着细瘦的黑色牛仔裤、涂鸦的T恤和破旧的运动鞋。 其中，著名的朋克女诗人Patti Smith 是其中重要的代表人物，她敏感颓废和暴躁的艺术性格在当时十分引人注目。她的表演完全无视音乐演奏的合理性，神经质刺耳的嗓音在毫无感情色彩的钢琴映衬下，从她软性的嗓子里不可思议地爆发出来，直至支离破碎。 参考资料来源：百度百科-朋克 参考资料来源：人民网-朋克是什么？恐怕不是一档综艺节目能阐释清楚的 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文，希望你能从中得到感悟! 技术的研究进展 摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点，已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述，并对其发展做出了展望。 关键词 PCR技术;研究进展;应用 中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02 PCR(polymerase chain reaction，PCR)即聚合酶链式反应，它是一种体外酶促合成，扩增特定DNA片段的方法。1985年，美国Karray等学者首创了PCR技术，并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破，PCR技术已在多个领域得到广泛地应用，如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性，又能快速进行检测，因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术，如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。 1 PCR技术原理 PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物，在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成，一个循环包括连续的3个步骤：第1步是高温条件下的DNA模板变性，即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火，即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸，即在4种dNTP底物同时存在的情况下，借助TaqDNA聚合酶的作用，引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后，合成了新链，可将其作为DNA模板继续反应，由此循环进行。循环进程中，扩增产物的量以指数级方式增加，一般单一拷贝的基因循环25~30次，DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单，但是具体的操作是复杂的，如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此，不同的反应体系应该确定适当的反应条件，以避免假阴性或假阳性等情况的产生。 2 PCR技术的分类 在传统PCR技术的基础上，根据人们的需要以及各个领域的应用要求，又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进，为进一步的研究提供了基础。 实时荧光定量PCR技术 1996年，学者经过研究，在传统PCR技术的基础上，首创了实时荧光定量PCR技术，新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势，还具有实时性、准确性、无污染，实现了自动化操作和多重反应，是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。 荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中，借助于荧光信号，累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的，因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行，无法对起始模板进行准确的定量，而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后，定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号，荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况，这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段，PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系，然后进行定量分析[13]。 多重PCR技术 多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种，为同一管中加入多对特异性引物，与PCR管内的多个模板反应，在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段，也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。 在同一反应体系中，多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时，引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面，如果能选择适宜的反应体系和反应条件，可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面，DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率，如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。 单分子PCR技术(SM-PCR) 单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的，基本循环过程相同，但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。 单分子PCR技术反应中，DNA 模板浓度极低，这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时，应该严格控制GC的含量和Tm值，同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下，若引物之间存在少量配对序列，扩增时极易形成二聚体，使反应无法进行，得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高，因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格，需要有较好的热稳定性，以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。 3 PCR技术的应用 PCR技术在水产上的应用 基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化，或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21]，研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响，表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料，采用实时荧光定量PCR技术，检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量，表明在各组织中均有2种基因的表达，但表达量显著不同，呈现组织特异性。 PCR技术在微生物检测上的应用 1990年，Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌，其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物，表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势，较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价，结果显示，样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。 4 展望 传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来，已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善，荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面，其次是整合应用多重PCR与其他技术，必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。 5 参考文献 [1] 常世敏.PCR在食品微生物检测中的应用[J].邯郸农业高等专科学校学报，2004，21(4)：23-25. 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[27] METZGER-BODDIEN C，BOSTEL A，KEHLE for analysis of food samples[J].J Food Prot，2004，67(8)：1585-1590. 点击下页还有更多>>>关于pcr技术论文 荧光，又作“萤光”，是指一种光致发光的冷发光现象。当某种常温物质经某种波长的入射光(通常是紫外线或X射线)照射，吸收光能后进入激发态，并且立即退激发并发出比入射光的的波长长的出射光(通常波长在可见光波段);而且一旦停止入射光，发光现象也随之立即消失。具有这种性质的出射光就被称之为荧光。在日常生活中，人们通常广义地把各种微弱的光亮都称为荧光，而不去仔细追究和区分其发光原理。以下是我为大家精心准备的：纳米标记材料荧光碳点的制备探析相关论文。内容仅供参考，欢迎阅读! 纳米标记材料荧光碳点的制备探析全文如下： 近年来，半导体荧光量子点因其优良的光电性能在生物、医学及光电器件等领域得到了广泛应用. 但是用于生物和医学领域最成熟的量子点，大多是含重金属镉的CdTe，CdSe 和CdS 等量子点，限制了其在生物医学领域的应用. 因此，降低和消除荧光量子点的毒性，一直是研究者密切关注的课题. 直到2006 年，Sun 等用激光消融碳靶物，经过一系列酸化及表面钝化处理，得到了发光性能较好的荧光碳纳米粒子—碳量子点( CQDs) . 作为新型荧光碳纳米材料，碳量子点不仅具有优良的光学性能与小尺寸特性，还具有很好的生物相容性、水溶性好、廉价及很低的细胞毒性，是替代传统重金属量子点的良好选择. 水溶性碳量子点因其表面具有大量的羧基、羟基等水溶性基团，并且可以和多种有机、无机、生物分子相容而引起广泛关注，这些性质决定了碳量子点在生物成像与生物探针领域有更大的应用前景. Zhu H和王珊珊等将PEG - 200 和糖类物质的水溶液进行微波加热处理，得到了具有不同荧光性能的碳量子点，虽然利用微波合成碳量子点可以合成修饰一步实现，但是与水热法相比荧光量子的产率并没有显著地提高. 目前，该领域的科研工作主要集中在3 个方面: 碳量子点形成与其性能的机理特别是光致发光机理、如何简单快速的制备出性能优异的碳量子点以及碳量子点如何成功高效地应用于实际之中. 本文采用单因素法分析影响荧光碳量子点合成的几种因素，寻求高性能荧光碳量子点的最佳合成条件，并比较微波法和水热法合成荧光碳量子点的优劣，为制备出高性能荧光纳米标记材料性能提供一定的实验依据和科学方法. 1 实验部分 1. 1 试剂与仪器 葡萄糖( AR，中国医药集团上海化学试剂公司) 、聚乙二醇( PEG - 200，AR，中国医药集团上海化学试剂公司) 、硫代乙醇酸( TGA，AR，国药集团化学试剂有限公司) 、CS( 大连鑫蝶) 、牛血清蛋白( BSA > 99%，德国默克公司) 购自武汉凌飞生物科技公司) ; 盐酸( HCl，AR，信阳市化学试剂厂) ; 十二水合磷酸氢二钠( Na2HPO4·12H2O，AR，国药集团化学试剂有限公司) ; 二水合磷酸二氢钠( NaH2PO4·2H2O，AR，国药集团化学试剂有限公司) ; 氢氧化钠( NaOH，AR，国药集团化学试剂有限公司) . 荧光分光光度计( LS55 型，PerkinElmer，American) ; 紫外- 可见吸收光谱仪( U - 3010 型，Hitachi，Japan) ; 纯水仪( UP 型，上海优普实业有限公司) ; 台式电热恒温干燥箱( 202 - 00A 型，天津市泰斯特仪器有限公司) ; 傅立叶红外变换光谱仪( VERTEX70 型，德国BRUKER 公司) ; 透射电子显微镜( JEM -2100UHR STEM/EDS 型，日本) ; 微波反应器( Milestone， Italy) ; 电子天平( METTER - TOLEDO，梅特勒- 托利多仪器( 上海) 有限公司) ; 电动搅拌器( DJIC - 40，金坛市大地自动化仪器厂) ; 智能恒温电热套( ZNHW型，武汉科尔仪器设备有限公司) ; 数显恒温水浴锅( HH - S2s，金坛市大地自动化仪器厂) ; 紫外灯. 所有光谱分析均在室温下进行. 实验中所用水为电阻率大于18 MΩ·cm 的高纯水. 紫外- 可见吸光光度计设置为: 夹缝2 nm，扫描速度600 nm/min，扫描范围200 ～ 600 nm; 荧光分光光度计设置为: 激发波长为350 nm，扫描范围为350 ～ 650 nm，扫描速度600 nm/min. 激发夹缝: 10 nm，发射夹缝: 15 nm. 1. 2 碳量子点的制备 影响碳量子点荧光性能的因素较多，其主要因素有反应物摩尔比、反应温度和反应时间. 为更好的控制实验条件，提高碳量子点的性能，采用了三因素三水平的正交实验方法. 该方法以较少的实验次数完成多条件下最优选择. 选择碳源为葡萄糖，表面修饰剂为PEG，温度分别选择为150 ℃，160 ℃和180 ℃，时间分别选择为1. 5 min，2. 5 min 和3. 5 min，PEG 与葡萄糖的摩尔比分别选择为4，5和6. 此外在确定最佳条件时，除了考虑碳量子点的荧光强度之外，还要综合考虑实验条件、产物的毒性和生物相容性等因素.称取葡萄糖2 g，将其溶解到3 mL 水中，与不同体积的聚乙二醇( PEG - 200) 混合，得到澄清溶液，然后放在微波反应器或电热恒温水浴锅中，设定一定温度和反应时间，微波辐射或水浴加热，得到不同棕红色的溶液，即碳量子点原液; 再将碳量子点原液于不同转速下离心分离纯化，测定比较其光学性能，最后选定在6000 r /min 转速下离心分离纯化，取上层清液，稀释不同倍数用于表征. 1. 3 碳量子点的表征分析 将上述得到的碳量子点稀释不同倍数后，分别用U - 3010 型紫外- 可见吸收光谱仪和LS55 型荧光分光光度计测试制得的碳量子点的光致发光性能. 紫外可见吸收光谱测定: 将制备好的碳量子点稀释若干倍( 激发波长处吸收值为0. 1) ，先进行紫外扫描确定其吸收峰位置. 以碳量子点的紫外吸收峰波长为激发波长，激发和发射狭缝均为5. 0 nm，PMT 电压设置为700 V，激发波长是290 ～ 350 nm 进行多次荧光发射光谱扫描，确定激发波长为350 nm 时，其荧光发射峰位置为435 nm 左右，碳量子点的荧光谱峰更好. 荧光光谱测定: 取2. 5 mL 左右的待测碳量子点溶液于荧光比色皿中，在室温下用LS55 型荧光光谱仪检测其荧光，激发波长为350 nm，激发和发射狭缝宽度均为5 nm，扫描波长范围300 ～ 650 nm，扫描速度1 200 nm/min. 透射电子显微镜( 加速电压200 kV) 观察碳量子点样品的微观形态和尺寸; 将得到碳量子点原液等体积与无水乙醇混匀后滴在KBr 压片上后放到台式电热恒温干燥箱中干燥直到变干，然后放于傅立叶红外变换光谱仪中得到红外谱图. 2 结果与讨论 2. 1 微波合成碳量子点的因素分析 本实验选择反应物摩尔比( n) 、反应温度( T) 和反应时间( t) 3 种影响因素，每种因素选择3 种不同的水平，即三因素三水平正交实验方法安排试验，探讨微波法制备碳量子点时对其荧光强度的影响因素，找到最优的合成条件. 根据三因素三水平的条件，选择正交表34 型. 碳量子点合成中，不同影响因素在不同水平下的趋势变化,在同一因素下，随着水平的变化，实验指标也发生变化，根据图中趋势，可以得到微波合成碳量子点的最优条件是: PEG 与葡萄糖摩尔比为6，反应温度为180 ℃，反应时间为2. 5 min，在此条件下合成的碳量子的荧光强度最好.从趋势图还可看出，微波辅助反应时间并不是越长越好，但反应时间小于3. 5 min 时，碳量子点的的荧光强度有随反应时间减少而提高的趋势. 由以上正交实验的直观分析得到了优化条件，然后在该条件下微波合成了荧光碳量子点,优化条件下制备的碳量子点与实验组中最好的第9 号实验条件下制备的碳量子点的荧光发射光谱.在其他条件相同的情况下，优化合成的碳量子点的荧光强度为234，远远大于第9 号实验组的碳量子点的荧光强度153. 17. 改变前驱溶液pH 值( 分别为3，7和9) ，对实验结果进行分析处理，随着溶液pH 值的增加，碳量子点的荧光强度先减小再增加. 在前驱体为碱性条件即pH = 9 时，所得碳量子点荧光强度最大，在酸性条件pH = 3 时次之，在中性条件pH = 7 时最小. 其原因可能是在葡萄糖-PEG 体系中，制备出来的碳量子点表面含有丰富的羟基和羧基官能团( 在图8 中得到了证明) ，在酸性条件下，由于碳量子点表面大量羟基与H + 形成大量氢键，导致体系较为稳定，碳量子点能较好的分散，所以发出较好的荧光; 而在碱性条件下，碳量子点表面的羧基与OH - 的相互作用致使体系较为稳定，碳量子点也能很好的分散; 但是在中性条件下，生成的碳量子点由于高的表面能而发生团聚，致使粒子粒径增加，粒径分布变宽. 2. 2 微波法与水热法的比较 在上述相同的优化条件下，分别采用微波法和水热法2 种方法合成碳量子点，并对其光学性能进行初步比较. 2. 2. 1 碳量子点的紫外可见吸收光谱 2 种方式得到的碳量子点的紫外可见吸收光谱图,两者的吸收峰位置都是在280 nm 左右，吸收峰位置并没有随着加热方式的变化而变化，这说明2 种加热方式形成碳量子点的机制可能是一致的. 此外，在同等合成条件下，微波法制备的碳量子点的紫外可见吸收光谱强度小于水热法的吸收峰强度. 2. 2. 2 碳量子点的荧光发射光谱 将微波优化合成得到的一组碳量子点稀释后，依次增大激发波长，观察其荧光发射波长变化. 微波合成碳量子点在不同激发波长( 340 ～ 450 nm) 下的荧光发射光谱,随着激发波长的增大，荧光发射峰位置发生红移，荧光强度也先增大后减小，其中，激发波长为350 nm 时，碳量子点的荧光发射强度最大. 因此，选择350 nm 作为本实验中碳量子点的激发波长. 2. 2. 3 碳量子点的荧光机理探讨 碳量子点的荧光性能主要来源于2 种不同类型的发射，一种是其表面能的陷阱发射，另一种是其内在的状态发射，即电子和空穴的重新结合产生的发射，也就是通常所说的量子点的量子尺寸效应所导致的碳量子点的TEM 图射. 在本文中，一方面葡萄糖的高温热解生成的碳量子点，其表面能陷阱发射产生荧光; 另一方面，PEG 可以作为碳量子点的表面钝化剂. 而在本研究中，前驱体是葡萄糖和PEG的混合物，因此，PEG 在此合成体系中，一方面发挥了稳定剂的作用，另一方面也发挥了表面修饰剂的作用，PEG 含有大量的羟基等基团，在碱性条件下，羟基等官能团引入碳量子点表面，抑制了碳量子点的缺陷状态发射，使得能够产生荧光的电子和空穴的辐射结合更加便利，即内在的本征态发射更加容易，进而提高了碳量子点的荧光强度. 2. 2. 4 碳量子点的TEM 从中可以看出，碳量子点与半导体量子点类似，外貌呈圆球形，分散性较好，尺寸分布较均匀，平均粒径在5 ～ 8 nm 左右，表明在葡萄糖热解制备碳量子点的过程中，聚乙二醇作为分散剂和表面修饰剂起到了比较好的作用，能有效防止碳量子点团聚. 2. 2. 5 碳量子点的红外光谱 不同方法制备的碳量子点的红外光谱( a. 微波法; b. 水热法)在相同的优化条件下，微波法和水热法。 2种方法得到的碳量子点的红外谱图峰位和峰形基本一致，只是吸收峰强度略有不同，这可能与碳量子点的浓度有关. 羟基伸缩振动谱带出现在3 700 ～ 3 100cm - 1区域，在大多数含羟基的化合物中，由于分子间氢键很强，在3 500 ～ 3 100 cm - 1区域出现一条很强、很宽的谱带. 在3 370cm - 1附近2 种方法制备的碳量子点都有宽化的吸收峰，是O - H 键的伸缩振动特征峰，同时在指纹区1 101 cm - 1处和1 247cm - 1同出现较强的吸收峰，分别属于C - O - C的对称收缩和不对称伸缩振荡，证明了羟基的存在; 同时在1 643 cm - 1处观察到两者的吸收峰，这是C = O的伸缩振动，证明了羧基的存在. 由此判断，碳量子点表面带有羟基和羧基官能团，这不仅增强了量子点的水溶性和生物相容性，更为后续的修饰该类碳量子点提供了有益的指导. 3 结论 通过正交实验方法初步确定了微波法制备纳米荧光碳量子点的合适实验条件为: 反应时间为2. 5 min，反应温度为180 ℃，PEG 与葡萄糖摩尔比为6，pH = 9. 合成中影响因素从主到次顺序为: 反应时间> 摩尔比> 反应温度.同时发现极差R空白> R温度，表明实验过程中，还有其他重要的因素需要探讨，其中，最可能忽略的因素是搅拌. 在相同优化条件下，水热法合成的碳量子点的光学性能要略优于微波合成的，究其原因可能除了本文提到的是否使用搅拌装置有关外，可能还与合成时碳量子点的生长速度、表面修饰程度和状态等因素有关.这些因素的联合作用，导致荧光碳量子点晶格缺陷没有得到很好的控制，而表面缺陷、边缘效应等又会导致陷阱电子或空穴对的产生，它们反过来又会影响量子点的发光性质，有待今后进一步实验验证. 总之，2 种加热方式所制备的荧光碳量子点均具有较好的光学性能，可望用于荧光标记领域. 本人不太了解日本歌坛就说一下我知道的韩国的吧！（个人想法和根据的大歌谣榜，表打我）：：：：现在韩国最红的少女时代，因为她们正在专辑的宣传期，她们此次2辑的主打歌GEE更是拿下各大音乐奖的冠军。连续6周冠军打破了去年WONDER GIRLS的NOBODY的五周的记录。现在韩国是属于全民GEE。至于BIGBANG呢！现在处于休息期，只有大成和胜利在以个人活动着。但是他们是唯一至今未知威胁东方神起的偶像组合第一位置的偶像。火啊！WONDER GIRLS 现在因为要准备在美国出道 ，所以已经停止了在韩国的活动。现在韩国WONDER GIRLS的热潮也是有点下降了。不过也是相当的火的说。东方神起：他们似乎一直来回于日本和韩国之间，奖赏4辑的宣传期已经结束了，出镜率也少了。不过他们的仙后真是相当庞大的说。SJ ：他们的2辑马上就出来了，到时又会爆发一场sj热的。超级期待呀！KATA：之前出了3张专辑，一直都不红，最近以歌曲(pretty girl)翻身了，现在以HONEY的后续去继续活动着。个人的话：孙丹菲08年以一曲（疯了）红遍韩国歌坛。个人很喜欢的说。李孝利：她的新专辑U-GO GIRL真的很好听徐仁英：参演了（我结婚了）的综艺，人气很高的说。在以（灰姑娘）活动的时候，是跟李孝利竞争的。现在花耀飞的歌曲也很红的说，一直是三大电视台歌谣榜的前三。现在神话的申彗星也comeback了，所以人气就。。。补充：ss501因为演唱了花样男子的OST 也很红的说。我能想到的就这些了。。以后想到了在补充。 《ELLE》已经超出时尚杂志的范畴,成为一个国际性的时尚品牌。全球超过150 个版权商和250产品种类。它代表女性——自信的、有活力的、有魄力的、活泼的、好奇的、有魅力的、自由的形象。 楼主很厉害,说得基本正确吧.但是稍微说一下我的想法.AYU和幸田确实有些过时了,但是步姐还是很有地位的,她的穿着还是能引领时尚.毕竟步姐的造型团队足够强大.不过与相貌比起来,日本观众还是更理智更重实力.男星的话KATTUN还是很强的,毕竟有赤西仁和龟梨在.韩国的话我也同意是WG和Bigbang。WG的地位应该没有多大争议吧，一帮小妮子从tell me nobody so hot一直在创造流行，甚至很多明星都是她们的饭，比如说希澈。还有不少明星跳过她们的舞，包括神起，SJ，FTISLAND等等等等。先说明一下，我也是死忠的仙后，但是比较公正的说，BB确实是让五只也比较害怕的后辈。现在他们在韩国的人气确实无人可挡，看看他们的应援就知道。而且他们08年在韩国的活动真的很积极，发售DVD，成员SOLO的活动也很多，但我觉得，最主要的是他们年纪小，舞台很有活力，曲风也很有年轻人的动感和霸气，还有些街头坏男孩的感觉。bigbang之所以那么红，我想主要因为是他们终于摆脱了让人觉得有些厌烦了的SMP和SM惯用的宣传方式，给年轻人带来一种新鲜感和潮流感吧。不过他们和东方神起比起来，还是过于稚嫩了。神起毕竟是身经百战，什么阵场没见过呢？东方神起在韩国还是有很厚的底子，这个短时期内还是比较难动摇，但是不得不说，神起在韩国的霸主地位应该很快要过去了，06年全揽所有大奖的辉煌也许真的很难再见了。但是，神起在亚洲尤其是中国的人气在短时间内还是无人能及的。 韩国男子组合：东方神起，BIGBANG,SJ，SS501。。。女子组合今年一定是少女时代的天下，从一出MINI专辑的这种火爆程度来说是这样的，除此之外，WG,KARA，李孝利，都很红通过FANCLUB可以看出人气男子是东方神起，女子是少女时代日本最红的歌手肯定是J家的，他们都包揽了~~~~~~女的嘛幸田来未，滨崎步。。。。。。 马尔代夫有灿若星河的荧光沙滩，到现在也仍然有。只不过由于旅游的开发导致一些岛已经逐渐的消失了，以前是有很多个景点都出现过这种现象的，所以说这个荧光沙滩也吸引了很多的人到来。 马尔代夫的一些群岛曾经出现这些荧光沙滩，然后引起人们的好奇。人们曾经对此进行过专业的研究，发现并不是海水中被人为投放某些物质，而是说海水中的单细胞海藻生物所自然发光造成的一种现象，也就是说这种是由生物能转化为光能的，就类似我们在物理中所见到的萤火虫一样，是这种发光原理，只不过由于单细胞生物的数量比较多，在晚上的时候，在海边就经常能够看到这种规模比较大的蓝色海潮。 这些荧光沙滩有一个非常美丽的名字叫做蓝眼泪。因为发光都是蓝色的，只有单纯的蓝色，一种蓝色和海水和夜里的星光相互辉映，形成一幅又一幅绝美的画面，很多摄影师很多旅游者也慕名而来，选择晚上，老师的一个时间来观察所谓的蓝眼泪到底是什么样的结构，到底有多美，去过的人都赞不绝口，这里很美丽，但是说并不适合进行长期的旅行，因为仅仅一个沙滩能看的并不多，如果说想和周边的景点一块游玩的话，是一个不错的选择。 马尔代夫是作为很早之前开发的旅游产业的国家之一，旅游的基础设施还是比较完善的。在这里面无论是阳光弥漫的沙滩，还是说星光璀璨的蓝眼泪，你都可以找到自己喜欢的东西，所以说马尔代夫是一个非常好的适合度假的地方，不过建议提前做好相应的攻略，因为马尔代夫的面积也很大，你要确定自己到底去哪一个地方才能让自己得到更好的旅行体验。 一道道泛着蓝色荧光的海浪，从海面上不断涌来……惠州惠东双月湾再次惊现“蓝眼泪”奇观，仿佛一群活泼的蓝精灵在海边玩耍嬉戏。邂逅“蓝眼泪”，像一场测试缘分的游戏，它们需要水温、天气、风向等因素都符合的情况下才会出现。到双月湾旅游，也许还能遇到这样的浪漫奇观。2月21日，双月湾海岸就像是被蓝色的火焰点燃了一般，如梦似幻的场景让目睹的游客称奇赞叹。那么，海面上这些泛着蓝色荧光的物质是什么呢？ 2016年4月，惠东县双月湾曾出现“荧光海滩”。2017年1月，华南师范大学地理科学学院教授王为来到这里展开科学考察。据调查，给惠东县带来“荧光海滩”美景的是一种被称为“蓝眼泪”的浮游生物。“蓝眼泪”是一种体长不超过两毫米的颗粒状浮游生物，它们可以发出微弱的蓝光，处在繁殖期的微小生物大量聚集，如果被海浪冲上沙滩，就会形成“荧光海滩”的美景。 2016年4月，受厄尔尼诺现象的影响，惠东海域受到了来自外海暖洋流的影响，这种能够大量繁殖的发光生物“蓝眼泪”，被暖洋流带到了双月湾。而出现“蓝眼泪”奇观的双月湾，由大亚湾畔和红海湾畔相邻的两个半月形海湾组成，这里风浪最平缓，适合泥沙物质的沉积，也容易聚集海水的漂浮物，为形成“蓝眼泪”奇观提供了有利的条件。 值得一提的是，2016年，就在当时“荧光海滩”事件发生后不久，惠东县的渔民们就发现，附近海域内的渔业资源在不断减少。专家表示，“蓝眼泪”这种浮游生物的大量聚集，不仅不会对海洋环境产生污染，还会为近海生存的各种鱼类提供丰富的饵料。经过调查研究认为，正是因为厄尔尼诺现象使海域水温升高，海水中的珊瑚礁死亡，作为鱼类饵料的微生物也因缺乏适合的生存环境而死亡，进而导致渔业减产。出现“荧光海滩”和渔业减产的原因水落石出。当海水温度回落之后，海底会有新的珊瑚礁长出。随着新的珊瑚礁生长起来，惠东县的近海渔业资源将再次丰富起来。 荧光海滩是由海水中的发光微生物被冲在沙滩上引起的现象。产生这种荧光的多为多边舌甲藻或者鞭毛藻，当它们收到海浪拍打和人为的压力时，就会像萤火虫一样发出绿色或者蓝色的荧光。 最近住在大连的居民们发现，甘井子区大黑石浴场附近出现了大片的蓝色发光海水，夜间的大黑石海边确实荧光闪闪，犹如“星河”，吸引不少附近市民和大学生前来观景。那么，这种“荧光海滩”是如何形成的呢？它的出现意味着什么？大连的荧光海滩，实际上是一种生物发光（Bioluminescence）现象。所谓生物发光现象，是指生物通过体内的一定化学反应，将化学能转化为光能而释放的过程。萤火虫的发光就是最为人所知的一种生物发光现象。海水中能够发光的生物种类相当多样，从单细胞的甲藻类，到腔肠动物诸如发光水母、环节动物如海生多毛类、软体动物如各种发光头足类、以至于节肢动物的磷虾和海萤等。从大连这次“荧光海滩”现象来看，可以排除体型较大水母和头足类，而海萤等节肢动物无法产生如此强烈的荧光，因此最有可能的是甲藻类单细胞生物繁殖所致。甲藻是一类非常原始的单细胞藻类，它的很多特征介于属于原核生物的细菌和属于真核生物的原生生物之间，目前普遍将其归为双鞭毛藻类。甲藻是躯体通常被纤维素质的甲板覆盖，在甲板间形成的沟里具有2-3条鞭毛，藻体依靠这些鞭毛得以在水中游动和摄食。甲藻中的许多种类可以发光，我国沿海最为常见的是夜光虫（Noctiluca scintillans），也包括其他如膝沟藻（Gonyaulax spp.）等种类。夜光虫是甲藻中形态较为特殊的一类，其藻体没有甲板包被，藻体较大，通常缺乏叶绿体，多依靠其鞭毛摄食原核生物或其他藻类为食。夜光虫得名于其受刺激后能够发光的特性。夜光虫发光源于其细胞内的荧光素-荧光素酶反应。荧光素是一类小分子物质，它能作为底物和荧光素酶结合，结合后荧光素酶则使用ATP使得荧光素释放荧光，完成化学能向光能的转化。近年来的研究显示，夜光虫的发光机理，在于受到外界刺激后，藻体内液泡膜上可产生类似动物神经细胞膜动作电位的电化学变化，这种变化使得液泡膜上对电压敏感的质子通道开放，使液泡内的质子可以进入液泡膜上称为闪光体（scintillons）的小囊内，激活其中含有的荧光素酶，从而产生荧光。其他类型的甲藻也可能具有类似的发光机制。对于甲藻来说，这种生物发光现象可能是一种防御措施。当被以它为食的浮游动物等捕食者扰动时，发出的荧光能够吸引感官更敏锐的鱼类等更高营养级捕食者，从而驱离其直接捕食者。而对于人类来说，甲藻类形成的“荧光海滩”景色虽具有观赏价值，但它背后所隐藏的信息值得人们提高警惕。这是由于以夜光虫为代表的甲藻类大量繁殖，以至于出现很强的荧光现象，表明这一地区海水内诸如磷、钾、铁等营养因子含量上升，使得甲藻作为食物的细菌、蓝细菌和单细胞藻类数量增加。这是海水富营养化的先兆之一。如果进一步发展，有可能造成甲藻的爆发性增长，从而形成赤潮。甲藻类是我国近海赤潮最主要的藻类组成。其大量的繁殖、死亡和分解，会大量消耗水体中的氧气，造成其他海洋生物窒息死亡，严重威胁海水养殖产业。同时，甲藻等在生长过程中会合成多种毒素如短裸甲藻毒素(BTX)等，这些毒素可通过富集作用累积在贝类等海产体内，造成食品安全风险增加。因此，对于“荧光海滩”的出现，相关部门应加强水质监测，查明发生原因，并对可能出现的环境风险做好相应准备。荧光检测论文
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