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阳光通宝
首页 > 论文问答 > 编辑小鼠的基因鉴定实验报告

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多多121015

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1、在实验中需要的注意事项?(1)肝匀浆一定要磨得较细,细胞彻底破碎。(2)在细胞内的核酸通常是与蛋白质形成复合物而存在———核糖核蛋白和脱氧核糖核蛋白。核蛋白在水溶液和各种电解质溶液中有一定的溶解度,所以在前面研磨步骤将损失一部分核酸。因此应避免加入大量的水进行研磨,以减少核蛋白的溶解(3)避免液体洒在离心机上面或钻头上。(4)启动离心机后,离心机如有不正常反应或噪音,应立即停止离心。(5)离心管需平衡后才对称放入离心机。 2、DNA和RNA在组成上有什么区别?如何鉴别?DNA和RNA组成上戊糖与嘧啶碱基不同。核糖经与强酸(盐酸与硫酸)共热生成糠醛,后者和3,5-二羟甲苯缩合生成绿色化合物;而脱氧核糖在强酸中加热,可生成-羟基-γ-醛酮戊醛,后者再与二苯胺作用生成蓝色化合物。 3、如何防止核酸酶降解所带来的误差?①选取核酸酶含量较低的材料,如小牛胸腺细胞等。②在制备肝匀浆时,应尽量在冰冷条件下进行,并尽快加入含 0l mol / L 柠檬酸钠的 14mol/L 氯化钠溶液,以抑制脱氧核糖核酸酶,防止 DNA 的分解,以提高核酸的量。
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张小电1301

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wo洒脱小姐

做小鼠胚胎发育的研究人员一般喜欢用LacZ,也就是将LacZ置于一个启动子的调节之下。用LacZ可以进行胚胎全身染色(whole body staining),这样可以了解一个基因在体内的表达谱全貌。如果做细胞跟踪,比如免疫细胞,神经细胞等,一般喜欢用荧光蛋白。 这样一是容易对细胞进行分离(比如FACS)和体外分析,二是容易对分离的细胞进行体内追踪(比如Adoptive transfer)。早些年用的最多的是EGFP和EYFP。有的时候,我们需要将两种不同的reporter小鼠交配在一起,研究两个基因的关系,这时可以将两个基因采用不同的荧光蛋白进行标记,也就是做两种不同的模式小鼠。赛业生物科技有限公司在生物技术方面十分专业。赛业生物已服务全球数万名科学家,产品和技术已直接应用于包括CNS(Cell,Nature, Science)三大期刊在内的学术论文。除了提供基因敲除、基因敲入、条件性基因敲除模型定制服务外,赛业生物还有专业的手术疾病模型团队,可以提供多种复杂精细的小动物手术疾病模型;药物筛选评价小鼠平台可以提供从欧美行业领袖引进的免疫缺陷鼠、用于心血管及阿尔茨海默症等研究的人源化小鼠;国际标准化无菌鼠技术平台可以提供无菌鼠、无菌动物定制服务、微生物菌群移植服务等基于无菌动物模型的各类产品和服务,结合赛业生物成熟稳定的基因编辑小鼠平台,还可帮助您研究菌群与基因的互作机制。

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雪莉小姐的

通常基因敲除小鼠鉴定都是利用鼠尾提取的DNA为模板做PCR鉴定并测序,当然,如果是利用胚胎干细胞的同源重组方法制备的,注射前就已经对重组的胚胎干细胞做过Southern鉴定了,如果是利用Cas9技术制备的,通常在获得F1代杂合子小鼠时还应进行Southern鉴定,毕竟Southern才是基因敲除鉴定的金标准。

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