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我认为你要是搞农药研究的就的看看一下书籍：一是化学类，包括有机，无机等；二是农药合成方面的书籍，包括农药的中间体提取，合成工艺；三是农药环境类书籍，包括农药对自然的融合度！可以说农药的研究是很复杂的，涉及的范围也是挺广的！主要是要看你从事哪一个环节，这样分工细才能研究出高效，环保的新型农药！
20世纪80年代的中国，改革开放的浪潮汹涌澎湃，新旧体制、新旧思想发生着强烈地碰撞。一位未谙世故的女孩，曾在怒涛中驾着一叶扁舟，不断冲出思想的低谷，把握着前进的方向，奋力拼搏，在平凡的岗位上作出了不平凡的业绩，为她无限热爱的事业，献出了年轻的生命。她的名字叫徐秀娟，是我国第一位养鹤的姑娘，也是第一位为保护珍禽而献身的烈士.从小爱鹤1981年8月，因边屯中学高中部停办，不满17岁的满族姑娘徐秀娟，跟随父亲徐铁林——我国一位实践经验丰富的养鹤专家，来到扎龙自然保护区当了临时工。徐秀娟通过学习走向工作岗位梦想的破灭，使她内心十分痛苦。刚到保护区，不管是修路、打零工、当炊事员，她都把帽沿压得低低的，不愿多和人交谈。干了几个月工作，心情平静了一些，她主动要求去养鹤。父亲知道，养鹤是保护区最累的活，担水、配食、喂鹤、放鹤、清扫鹤舍、诊治护理病鹤，一天到晚忙不完，他怕女儿吃不消。妈妈、奶奶也不同意。可徐秀娟倔强地说：“咱家里过去养过鹤，我喜欢鹤，我能养好鹤，我要去！”父亲说：“去也好，养鹤是国家需要的活儿，去了就要好好干，要踏踏实实，一个脚步两个踪，不能遇苦败下阵来。”徐秀娟牢记爸爸的话走上了工作岗位，各样事抢在头里，学得用心，干得实在。上工第三天，她就能识别鹤的生年、编号，把不同年月、不同种类、不同脾性的鹤儿围圈起来。这情景不仅使老饲养员们惊奇、高兴，就连对她要求严厉的爸爸也会心地笑了。第二年春天，她配合科研人员进行鹤类人工孵化工作，观察仔细，记录齐整，受到科研人员的称赞。她很快就掌握了丹顶鹤、白枕鹤、蓑羽鹤等珍禽饲养、放牧、繁殖、孵化、育雏的全套技术，她饲养的幼鹤成活率达到100%，还为三部以丹顶鹤为题材的电影当了领飞员，邓小平、李鹏等党和国家领导人，先后看过她的驯鹤表演。自费进修1984年，我校野生动物资源学院（原野生动物系）的几位教授到保护区进行科学考察时，发现了这位年轻的人才，他们建议让徐秀娟来林大进修，使她能在鹤类保护事业中作出更大的贡献。可是，那时保护区的一位领导只图出名，不重视人才，他不仅不同意送徐秀娟去学习，连徐铁林希望借点钱送娟子自费去林大进修也不支持。徐铁林冷了心，也铁了心：“砸锅卖铁也要让娟子去读书。”娟子妈听后，哭了：“上千元，哪儿来这么多钱！一冬天推苇子，三分钱一斤，得推多少啊！”徐铁林不改初衷，对娟子说：“人不可有傲气，但不可无傲骨。一家人再苦再累也要送你上学，爸认了。你去了一定要好好学习，争这一口气！”徐秀娟含着泪把父亲借来的钱揣在怀里上路了。林大的有关领导知道了这一情况，决定把徐秀娟的学费减免一半。就这样徐秀娟于1985年3月走进东北林业大学，当了一名进修生。徐秀娟从小就热爱学习。初中升高中时，全市录取分数线是114分，而徐秀娟考了178分，但即使这样，这时候她也只有高一文化程度，听起大学的课程是十分吃力的。娟子后来回忆起在林大一年级那段学习生活时说：“每次一进教室，我的每个神经细胞都要调动起来，耳朵支得老高，眼睛睁得大大的，静听老师的讲解，思想不敢有半点溜号，生怕漏掉一个字。亏得我过去写日记练了字，记录快，不然真不知该怎样才好。”那时，她早上4点一过就起来，晚上11点钟以后才上床，一天只睡5个小时的觉，其余时间全部用来学习。知识上的差距，咬咬牙可以补上来，娟子不怕，但经济上的困难却使她难以煎熬。那时，林大学生的伙食，女生一天至少得6角钱，娟子拿不起。她知道爸爸六七十元的工资，要供一家六口人生活，还要供弟弟妹妹上学，不能再给家里增加负担了。每天，即使是馒头咸菜，她也常是一天只吃两餐。第二学期，就连这样的生活，娟子也难以维持，迫于无奈，她曾背着老师、同学和家人先后四次买血来换回一些钱维持学业。后来，她又决定把两年的学业压缩在一年半内完成。生活如此煎熬，也曾使徐秀娟消沉过，她甚至想到过退学。但是，学习开阔了她的眼界，她在一年的学习总结里写道：“想起粗茶淡饭，节衣缩食，下一学期生活仍然没有着落，止不住一阵心酸落泪。……但是人活着没有寄托，没有信仰，没有理想，如何能活的下去呢？来林大进修后，我才知道自己懂得太少了，才知道‘活到老，学到老’的含义。”功夫不负有心人。通过一年半的拼搏，徐秀娟的11门功课：1门合格，两门优秀，4门85分以上，4门90分以上。这期间，她还自学了外语（学校规定进修生不用学外语），也正是从她的一段英文日记中，人们才发现了那段催人泪下的用鲜血换知识的情况。南下创业1986年5月，已经积累了一定的实践经验，又用新的科学知识武装起来的徐秀娟，决心创出一番事业。她应江苏盐城自然保护区的邀请，精心护守三枚将要破壳出雏的鹤蛋，长途跋涉5000多里，在丹顶鹤的越冬地——黄海滩涂，使雏鹤顺利破壳出生，度过危险期，健壮成长，以后又半放养成功，并于83日龄这天翱翔蓝天。这一科研成果，令中外专家为之惊异。这一年，她被评为保护区先进工作者，被吸收为江苏省动物协会会员，获得市环保局颁发的科技奖。她理论联系实际，撰写的论文《越冬地丹顶鹤的半散放饲养》，在第三次全国鹤类保护会议上宣读后，受到与会专家的热情赞扬。娟子走了1987年9月15日中午，白天鹅牧仁、黎明在笼子里鸣叫不已，徐秀娟以为它们想出来游玩和戏水，就进去把它们抱出来放进水塘里。不想牧仁、黎明玩兴大发，先后挣脱绳子飞走了。到了晚上，牧仁被找回来了，黎明还是不见踪影。夜深了，领导让大家回去休息，明天再找。可是徐秀娟放心不下，等大家走了，她一个人摸黑钻进密密的芦苇中，不断呼唤着黎明，可是没找到。这天晚饭她也吃不下，第二天一大早没顾上吃饭就又去找。中午回来喝了半碗稀饭，牵挂着黎明又出了门。到了复堆河，小王、小殷游过了河，徐秀娟快游到江心时，忽然喊了一声“我不行了”，停住了身。对岸的小王、小殷见她脸色苍白，大声喊她退回岸上，见她上岸后，两人才回身继续寻找。徐秀娟回到鹤场心急火燎呆不住，又推了一辆自行车，沿河堤绕道北行，想和小王、小殷会合，把黎明尽快找回。不知是由于顶风人累踏不动，还是骑车跌了跤（后来发现车子铃铛掉下来了），她又推车来到刚才下水的地方，把车子放倒，连鞋子都没来得及脱又下了水……人民的好女儿徐秀娟就这样深深沉入复堆河底，再也回不到她亲爱的鹤儿们身边了……时间过去了4个小时，黎明被找回来了，欢天喜地中的人们到处找徐秀娟，不见；呼唤娟子，不应，焦急的人群又冲向了原野……夜沉沉，路漫漫,遍野是人群，到处唤秀娟。当强烈的汽车灯直照水面，人们把娟子从水底托起时，抢救的人群开始是惊慌忙乱，后来想到时间过去太久，已经没有希望了，一片呼唤娟子的哭声，这才忽地震动苍穹掠过草滩。化鹤归来1987年9月23日,在保护区管理处所在地新洋港镇,举行了徐秀娟的追悼会。那天上午，太阳也为环保战线上失去了这样一位好儿女而收起光辉，苏北上空出现了日全食。新洋港镇居民不到两千人，有近千人从四面八方聚来参加追悼会，为娟子送行。人们用这种最普通的方式对徐秀娟来这里一年零四个月的工作作了肯定，对她年仅23岁的青春年华作了褒奖，对她呕心沥血为之献身的事业表示了崇敬。娟子走了吗？不！她已经化 作一只洁白的仙鹤，飞回来了，即将落在东林美丽的校园里，激励一代又一代的东林人，为祖国和人民奉献青春年华！
." target="_blank">网页是一级期刊的目录5 农学1 土壤学报 12 植物生理学报 23 园艺学报 2 土壤圈（英文） 13 棉花学报 24 蚕业科学3 水土保持学报 14 中国水稻科学 25 茶叶科学4 农业机械学报 15 植物病理学报 26 中国畜牧杂志5 农业工程学报 16 植物保护学报 27 中国兽医学报6 中国粮油学报 17 植物生态学报 28 畜牧兽医学报7 核农学报 18 菌物系统（真菌学报） 29 水产学报8 中国农业科学 19 应用生态学报 30 生物数学学报9 作物学报 20 自然资源学报 31 林业科学10 植物营养与肥料学报 21 昆虫学报（中、英文版）11 农业生物技术学报 22 昆虫分类学报
Guohong,Liu Huai*,2014Effects of thermal stress on lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities of the predatory mite, Neoseiulus cucumeris (Acari: Phytoseiidae). Experimental and Applied Acarology , 64（9）:73-85.(SCI)2. Li Chao, Liu Huai*,2014Effect of Temperature on the Occurrence and Distribution of Colorado Potato Beetle (Coleoptera: Chrysomelidae) in China. Environmental Entomology, 43(2):511-519.(SCI) Yaying,Liu Huai*,2015Effect of Bran Moisture Content and Initial Population Density on Mass Production ofTyrophagus putrescentiae (Schrank) (Acari: Acaridae). Systematic and Applied Acarology，20(5)： Xianghui, Liu Huai*, and Zhao Zhimo. 2010 Population Forecasting Model of Nilaparvata lugens and Sogatella furcifera (Homoptera: Delphacidae) Based on Markov Chain Theory. Environmental Entomology, 39(6): 1737-1743.(SCI)5. Zhang Bin, Liu Huai*, Hull-Sanders Helen M. 2011 Effect of Host Plants on Development, Fecundity and Enzyme Activity of Spodoptera exigua (Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae). Agricultural Sciences in China. 10(8): 1232-1240. (SCI)6. Zhang Bin, Liu Huai*, Hull-Sanders Helen M. 2011 Performance and Enzyme Activity of Beet Armyworm Spodoptera exigua(Hübner) (Lepidoptera: Noctuidae) Under Various Nutritional Conditions. 10(5): 737-746. (SCI)7. Liu Huai, ZhaoZhimo et. al. 2000. Temperature-dependent development and reproduction of the spider mite, schizotetranychus bambusae Reck (Acari: Tetramychidae). Systematic and Applied Acarology，5：. Liu Huai, Zhao Zhimo, Wang Jinjun, He Lin, Wu Shiyuan. 2004. Effect of different bamboo ages on population parameters of Schizotetranychus bambusae Reck (Acari: Tetranychidae). Systematic & Applied Acarology, 9：. 阎香慧，刘怀*，赵志模等. 2010. 白背飞虱若虫空间格局的地统计学分析. 中国农业科学，43（3）：. 阎香慧，刘怀*，赵志模等. 2009. 应用马尔科夫链理论对褐飞虱和白背飞虱发生程度的预测. 生态学报，29（11）：. 阎香慧，刘怀*，赵志模等. 2008. 水稻褐飞虱灯下发生期及种群数量动态分析. 植物保护学报，35（6）:501-506.
1、国内农药刊物-专业性及相关期刊(注：SCI 影响因子均为2006年数据，下同)农药学学报 农药 现代农药 世界农药 农药科学与管理 中国农药 农药研究与应用 农药市场信息 农药登记公告 农药快讯 植物保护学报 植物保护 昆虫学报 昆虫知识 杂草科学 植物病理学报 植物医生 中国植保导刊 中国化学快报(SCI:) 化学学报(SCI:) 中国化学(SCI:) 有机化学(SCI:) 高等学校化学学报(SCI:) 化学通报 结构化学(SCI:) 化学进展(SCI:) 应用化学 分析化学(SCI:) 质谱学报 环境科学学报 农业环境科学学报 环境保护 中国环境科学 环境科学研究 生态环境 环境科学 环境污染与防治 环境工程学报 环境保护 环境化学 环境科学文摘 中国农业大学学报 南京农业大学学报 华中农业大学学报 西北农林科技大学学报 浙江大学学报 华南农业大学学报 福建农林大学学报 西南大学学报 山东农业大学学报 东北农业大学学报2、国外农药刊物-专业性及相关期刊Pest Management Science or Pesticide Science(SCI:)International Journal of Pest Management (SCI:)Journal of the Science of Food and Agriculture(SCI:)Journal of Environmental Science and Health,Part B(SCI:)Pesticide Biochemistry and Physiology(SCI:) Journal of Pestcide science(SCI:)Journal of Pest Science(SCI:)Outlooks on Pest Management Pesticide Outlook ↑Top↑ Crop Protection(SCI:)Plant Growth Regulation(SCI:)Journal of Plant Growth Regulation(SCI:)Weed Research(SCI:)Weed Science(SCI:)Weed Technology(SCI:)Weed Biology and Management Plant Pathology(SCI:)Phytopathology(SCI:)Insect Molecular Biology(SCI:)Insect Biochemistry and Molecular Biology(SCI:)Advances in Insect Physiology(SCI:)Journal of Insect Physiology (SCI:)Ecological Entomology(SCI:)Phytochemistry(SCI:)International Pest Control Phytochemistry LettersChemistry & BiodiversityChemical reviews(SCI:)Accounts of chemical research(SCI:)Chemical society reviews(SCI:)Journal of the American chemical society(SCI:)Bulletin of the chemical society of japan(SCI:)Journal of heterocyclic chemistry(SCI:)Journal of Chemical Ecology(SCI:)European Journal of Inorganic Chemistry(SCI:)Journal of organic chemistry(SCI:)Chemical research in toxicology(SCI:)The Journal of AOACEnvironmental Science & Technology(SCI:)Critical Reviews in Environmental Science and Technology(SCI:)Environmental toxicology and pharmacology(SCI:)Bulletin of environmental contamination and toxicology()Environmental Toxicology(SCI:)Toxicology(SCI:)Soil Biology and Biochemistry (SCI:)Applied Soil Ecology (SCI:)Toxicological and environmental chemistry Toxicological sciences(SCI:)Toxicology Letters(SCI:)Ecotoxicology(SCI:)Reviews of Modern Physics(SCI:)Nature Reviews Cancer(SCI:)Nature Reviews Cancer(SCI:)Nature Reviews Cancer(SCI:)Nature Reviews Cancer(SCI:)Science(SCI:)Cell(SCI:)Nature Reviews Immunology(SCI:)Nature Medicine(SCI:)Nature Immunology(SCI:)Nature(SCI:)
中国农业大学《农药学学报》其实我觉得多看相关学校的学报就可以。如果你是本科的话。。。 还有《农药》这本杂志
SCI: plant disease, phytopathology, MPMI, Plant journal, plant cell国内期刊： 各农业大学学报，植物病理学报之类
要看哪个对你用处大！
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有些时候审理人不确定就可能拿到上方去审理，可能会多花点时间。或者是投的人太多了，但肯定是要回的。但你确实急了，可以到那里去询问一下
植物保护学报更好。植物保护的文章相对质量低一点。
1. Fan Liu, Ulrich Ryschka, Franke Marthe, Evelyn Klocke, Günter Schumann and Hong and culture of pollen protoplasts of Brassica oleracea with haploid mesophyll protoplasts of . Protoplasm, 2007, 231:. Liu Fan, U. Ryschka, F. Marthe, G. Schumann and Zhao Hong. Haploid Cell Hybridization between Pollen Protoplasts with Mesophyll protoplasts of Brassica ssp. Journal of Agricultural Biotechnology, 2007,15:. 陈斌，赵泓，耿三省，张宝玺，张月云，刘凡. 辣椒花药培养再生株群体染色体倍性构成的多样性。华北农学报，2007，22（1）：123-128。4. 张军杰，刘凡，赵泓，罗晨。蛋白酶抑制剂基因真空渗入法转化不结球白菜获得抗虫性材料。植物保护学报，2006, 33 (1): 17-21。5. 刘凡，赵泓，秦帆。结球白菜下胚轴原生质体培养及其体细胞胚植株再生。植物学通报，2006，23 (3): 275-280。6. Fan Liu, Hong Zhao. Embryogenesis of microspore derived multicells in Capsicum annuum L. Cell Research, Dec 2006,16 (supplement 1s).7. 张军杰，刘凡，赵泓，罗晨。蛋白酶抑制剂基因真空渗入法转化不结球白菜获得抗虫性材料。植物保护学报，2006, 33 (1): 17-21。8. 姚星伟，刘凡， 赵泓，云兴福, Ryschka U. Schumann G。非对称体细胞融合获得花椰菜与 的种间杂种。园艺学报，2005，32(6):1039-1044。9. 惠志明，刘 凡，简元才，申书兴，赵泓。原生质体非对称融合法获得花椰菜与Ogu CMS甘蓝型油菜种间杂种。中国农业科学，2005，38（11）：2372。10. 徐恒戬, 刘凡, 王秀峰, 赵泓。 真空渗入转化法中农杆菌在植株体内的分布和活力变化。微生物学报，2005，45（4）：621-624。11. 罗晨,王素琴,张帆,刘凡, 张芝利。转基因抗虫白菜对菜青虫、小菜蛾抗性的研究。华北农学报，2005，20（4）：84-8812. 刘凡，赵泓，姚磊，曹鸣庆。转基因白菜中外源bar基因的遗传漂移研究。转基因生物风险与管理――转基因生物与环境国际研讨会论文集。薛达元主编，中国环境科学出版社，2005，. 刘凡, 曹鸣庆, 王国英。以白菜为例的转基因植物环境安全性评价研究。中国蔬菜增刊，2005，138：16-22。14. 张军杰, 刘凡, 罗晨, 姚 磊,赵泓, 黄玉碧. 大白菜的马铃薯蛋白酶抑制剂基因转化及抗菜青虫性的鉴定。 园艺学报, 2004，31（2）：193－198。15. 刘凡, 王国英，赵泓, 姚磊, 曹鸣庆. 转基因不结球白菜实验地中外源基因流动及在不同作物中的自然渗入. 应用与环境生物学报，2004，10（6）：686－690。16. 刘凡, 赵泓, 赵岫云, 孟淑春, 姚磊, 曹鸣庆 . 转bar及NIa基因白菜的田间生物学及经济性状调查。应用与环境生物学报，2004，10（5）：563－568。17. 徐恒戬，刘凡，王秀峰，赵泓，曹传曾, 罗晨. 真空渗入法转pinII基因菜薹外源基因的遗传及表达。园艺学报，2004，31（4）：511－513。18. 刘凡, 徐恒戬，赵泓， 罗晨. 转pinII基因白菜的遗传分析及小菜蛾抗性鉴定。园艺学进展，第六辑. 陕西科学技术出版社.2004，P564-570。19. Liu F, Zhao H, Yao L, Zhang J J, Cao M Q et al. Gene flow from transgenic Chinese cabbage to related Cruciferae species through outcrossing. Acta Botanica Sinica, 2003, 45 (6): . 刘凡 王国英 曹鸣庆。 农杆菌介导的植物原位转基因方法研究进展。 分子植物育种, 2003, 1(1):108-116。21. 刘凡, 莫东发, 姚磊，张月云，张凤兰，曹鸣庆。遗传背景及活性炭对白菜小孢子胚胎发生能力的影响。 农业生物技术学报，2001，9（3）：297-300。22. Liu Fan, Mo Dongfa, Yao Lei, Zhang Fenglan, and Cao Mingqing. Effects of Genetic background of donor plants and activated charcoal on microspore culture of Chinese cabbage. International symposium on biotechnology application in horticultural crops. China Agricultural Scientech Press, 2001. p . Mo Dongfa, Liu Fan, Yao Lei, Cao Mingqing et al. Effection of Alternaria brassicae toxin crude extracts on isolated microspore culture of Chinese cabbage. International symposium on biotechnology application in horticultural crops. China Agricultural Scientech Press, 2001. p . 曹鸣庆，刘凡，姚磊。通过农杆菌原位真空渗入法获得转基因小白菜。走向21世纪的植物分子生物学，林忠平等编著，科学出版社，2000， p409-416。25. Cao MQ, Liu Fan, Yao Lei, David Bouchez, Colette Tourneur, Li Yan & Christophe Robaglia. Transformation of Pakchoi (Brassica rapa ) by Agrobacterium infiltration. Molecular Breeding, 2000, vol 6: . Liu F, Cao M Q, Yao L et al. In planta transformation of Pakchoi by infiltration of adult plants with Agrobacterium. Acta Horticulturea, 1998, 467: . Liu F, Yao L, Cao MQ, Qiu JY, Zhou GZ. Enhancement of TuMV Resistance of the NIa Transgenic Chinese cabbage. 11th International Crucifer Genetics Workshop. 1998, Montreal, Canada. . 刘凡、李岩 曹鸣庆。 培养基水分状况对大白菜小孢子胚成苗的影响。农业生物技术学报, 1997,Vol 5(2):131-136。29. 曹鸣庆、刘凡、李岩, 芸薹属蔬菜游离小孢子培养研究进展。园艺学年评, 1996, Vol 2:63-89。30. 姜立荣, 刘凡, 曹鸣庆. 大白菜小孢子胚状体发生早期的超微结构研究。显微学报, 1996,531. Cao ., Liu F., Li Y., Application of anther culture and isolated microspore culture to vegetable crop improvement. Acta Horticulturae, 1995, 392:. 刘公社、李岩、刘凡等。高温对大白菜小孢子培养的影响。植物学报，1995, 37(2):140-146。33. Cao ., Li Y ., Liu F., Embryogenesis and plant regeneration of Pakchoi (B. rape ) via in vitro isolated microspore culture. Plant Cell Reports, 1994, 13:. 刘凡，曹鸣庆，李修庆。胡萝卜人工种子在无菌条件下的贮藏及贮藏中种子活力的变化。实验生物学报，1991，24（2）：99－108。35. 李修庆，朱瀓，黄美娟，邓茉莲，牛小牧，刘凡等。高营养胡萝卜人工种子的制作、贮存、发芽及胚状体的机械筛选。人工种子。陈正华，Kieth Redenbaugh 主编，高等教育出版社，1990，p129-137。
植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告
紧张又充实的大学生活即将结束，大学生们马上就要开始最难熬的毕业设计阶段，而我们做毕业设计之前要先写好开题报告，快来参考开题报告是怎么写的吧！以下是我整理的植物保护专业本科毕业论文（设计）开题报告，欢迎大家借鉴与参考，希望对大家有所帮助。
毕业论文题目：
菌寄生真菌纤细齿梗孢蛋白酶基因的克隆与表达
姓名： xx 学号： xxxx
年级： xxx 专业： 植物保护
指导教师：姓名 xxx 职称 教授
学科 植物病理
山东农业大学教务处
20XX年x月x日
一、选题依据（拟开展研究项目的研究目的、意义）
菌寄生(Mycoparasitism)是发生在菌寄生真菌与寄主真菌之间的一种寄生方式，是自然界普遍存在的一种真菌与真菌之间的相互作用。一直以来，生物间相互作用及信号传导的分子机制，是当今生命科学研究的热门。利用菌寄生真菌与寄主真菌作为研究的模式系统来揭示生物相互之间的相互作用机制有重要理论和实践意义。李多川(Li,1996)先生发现纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)和串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)的菌寄生关系以来，我们实验室试图通过研究纤细齿梗孢和串珠镰刀菌，来建立菌寄生真菌与寄主真菌相互作用机制研究的模式系统，从而揭示菌寄生真菌与寄主真菌之间相互作用的分子机制。纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是串珠镰刀菌的一种重寄生真菌，该菌是一种接触性活体重寄生菌，离体试验发现其分生孢子只有在串珠镰刀菌细胞壁提取物刺激下才能萌发。这说明两者之间的重寄生关系是建立在二者识别与互作的分子机制上的(Li,2004)。在纤细齿梗孢和串珠镰刀菌相互作用过程中，几丁质酶、蛋白酶等细胞壁裂解酶可能起到重要作用。其中，蛋白酶在木霉属菌寄生真菌中的功能已经得到初步证明，而纤细齿梗孢的蛋白酶的研究还未见报道。因此，克隆纤细齿梗孢蛋白酶编码基因对于从分子水平上研究重寄生真菌和寄主识别和互作机制有着重要的意义。
二、文献综述内容(在充分收集研究主题相关资料的基础上，分析国内外研究现状，提出问题，找到研究主题的切入点，附主要参考文献)
纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)是李多川教授分离得到的一种活体营养接触型菌寄生真菌[1~3]，其寄主包括Fusarium moniliformeAlternaria alternata等。近年来，我们实验室一直在努力以其为基础研究菌寄生真菌与寄主真菌之间的相互作用的分子机制。经过多年的研究，人们渐渐认识到真菌细胞壁蛋白在细胞与外界的相互作用过程中扮演着重要的角色。细胞壁蛋白研究已经成为生物间相互识别机制研究的热点。鉴于以上原因，我们实验室成功分离纯化了纤细齿梗孢的寄主之一Alternaria alternata菌丝细胞壁上的一种特异性糖蛋白——凝集素，并初步证明其在和孢子吸附过程中起到识别因子的作用[4]。近年来，菌寄生真菌细胞壁裂解蛋白酶在菌寄生过程中的作用被人们逐渐重视起来。克隆和表达菌寄生真菌的蛋白酶编码基因变得很有意义。本研究试图以菌寄生真菌纤细齿梗孢(Olpitrichumtenellum)作为研究材料克隆了其蛋白酶基因。根据氨基酸的保守序列设计兼并引物，然后采用RT-PCR和RACE是一个较为快速、简单和高效的方法。本实验根据同源保守序列设计兼并引物，通过RT-PCR及RACE-PCR的方法，克隆了蛋白酶的编码基因的全长cDNA序列，并对该基因进行了序列分析，为后续试验打下了基础。
由于Olpitrichum tenellum在离开寄主的人工培养基中很难生长，纯化其蛋白酶变得非常困难。因此，我们需要使用外源蛋白表达系统得到蛋白，进一步研究其性质，从而搞清楚其在重寄生过程中的作用。在过去的几十年间，随着DNA重组技术的不断发展，通过构建遗传工程菌株，人们可以较容易地使各种各样的天然酶的基因在微生物系统中高效表达，从而在很大程度上摆脱对天然酶源的依赖。
基因工程的表达系统有原核表达系统和真核表达系统两大类。在原核表达系统中，大肠杆菌表达系统是目前了解最深入，实际应用最为广泛的表达系统。与其他表达系统相比，大肠杆菌表达系统具有遗传背景清楚、目标基因表达水平高、培养周期短、抗污染能力强等特点。在基因表达技术中占有重要的地位，是分子生物学研究和生物技术产业化发展进程中的重要工具[5]。
Pichia pastoris基因表达系统经过十几年发展，已基本成为较完善的外源基因表达系统，具有易于高密度发酵，表达基因在宿主基因组中稳定整合，能使产物有效分泌并适当糖基化，培养方便经济等特点。利用强效可调控启动子AOX1，已高效表达了HBsAg、TNF、EGF、破伤风毒素C片段、基因工程抗体等多种外源基因[6]，证实该系统是高效、实用、简便，能提高表达量并保持产物生物学活性的外源基因表达系统。表达系统在生物工程领域将发挥越来越重要的作用，促进更多外源基因在该系统的高效表达，提供更为广泛的基因工程产品[7]。
我们已经分离到蛋白酶的编码基因，本研究中将该基因的去掉信号肽序列的正确阅读框融合于原核表达载体pET-22b(+)和毕赤酵母表达载体pPIC9K上，分别转化 BL21及Pichia pastoris GSxx5，以期在这些菌株中有效表达该基因的编码产物，从而为以后功能研究打下基础。
1 李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.吉林农业大学学报,20：37~65.
2 21.李多川.1998.菌寄生真菌分子生物学研究进展.微生物学通报，25：345~347.
3 .李多川，沈崇尧.1997.菌寄生菌物与寄主菌物相互作用的研究进展.西北农业学报，6：94~98.
4 张成省，李多川，孔凡玉. alternata菌丝细胞壁凝集素的纯化与特性研究.植物病理学报，35(2)：141~147.
5 .xx.何诚，朱运松.1998.甲醇营养型酵母表达系统的研究进展.生物工程进展,18：7~xx.
6 彭毅，杨希才，康良仪.2000.影响甲醇酵母外源蛋白表达的因素.生物技术通报，4：33~36.
7 韩雪清，刘湘涛，尹双.2003.毕赤酵母表达系统.微生物学杂志，3：35~40.
三、研究方案(主要研究内容、目标，研究方法、进度)：
1、研究内容：
本课题选择纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)做为研究对象，通过RT-PCR及RACE技术分离克隆了其丝氨酸蛋白酶基因，并进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究，为进一步的研究工作打下基础。
2、研究的目标：
克隆了纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)的丝氨酸蛋白酶基因，进行原核及真核表达，并对其的性质进行了研究。
3、研究方法：
将纤细齿梗孢(Olpitrichum tenellum)接种到LB培养基上，培养14个小时后，收集菌丝，然后采用总Trizol法提取RNA。再从GenBank数据库中搜索到大量的蛋白酶氨基酸序列，并根据同源性进行分类，分别设计兼并引物。再通过RT-PCR、3’-RACE、5’-RACE获得全长cDNA、DNA克隆，并将其连接到载体上，然后采用电击法将将重组质粒转入到全长cDNA、DNA克隆中，通过透析纯化蛋白酶，最后研究其特性。
四、研究进度：
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆 。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。
五、技术路线：
收集菌丝
总RNA提取
同源序列 设计引物
特性研究
RT-PCR、
3’-RACE、5’-RACE
纯化表达产物
全长cDNA、DNA克隆 转化大肠杆菌、毕赤酵母
四、进程计划(各研究环节的时间安排、实施进度、完成程度)
20xx年5月23日~20xx年5月29日 整理收集资料，并跟着研究生学习基本实验技术。完成实验的1%。
20xx年5月30日~20xx年6月18日 提取RNA，设计引物、全长cDNA、DNA克隆。完成实验的50%。
20xx年6月19日~20xx年7月15日 转化大肠杆菌、毕赤酵母表达，获得纯纯产物，并研究其特性。完成实验的95%。
20xx年3月~20xx年6月 对实验结果不理想的实验重做，整理实验数据，完成毕业论文，并准备毕业答辩。完成100%。
五、导师对文献综述的评语
签字：
20xx年xx月xx日
六、专业意见
专业主任签字：
20xx 年 月 日
七、学院意见
学院(章)： 负责人签字：
20xx年xx月xx日
摘要：
针对目前浙江农林大学植物保护研究法实验教学方法、内容及手段等方面存在的一系列问题，提出了相关改革对策：优化实验课程内容，整合实验模块，学生自行设计实验方案等教学方法和手段的改革，以及课程考核方式和时间安排的调整，旨在培养学生的科研兴趣及创新能力。
关键词：
目前，国内外很多农业院校的植物保护专业均开设了昆虫研究法和植病研究法课程。为优化本科培养方案，浙江农林大学通过调整教学大纲，将植病研究法、昆虫研究法和农药研究法合并成一门植物保护研究法课程。植物保护研究法是植物保护专业重要的专业限选课程之一，是植物保护研究的重要组成部分，也是培养和提高学生专业实验技能和学习兴趣的重要课程，是一门专业性、实践性很强的实验学科。通过这门课程的教学，能使学生掌握植物保护研究的基本方法及基本原理，培养植物保护研究常规操作能力，以及查阅资料、设计实验方案和实际操作能力，提高学生的逻辑思维、整理资料、总结归纳和论文撰写的能力。笔者分析了浙江农林大学植物保护研究法实验教学中存在的问题，提出教学改革内容，并总结了改革成效。
1.实验教学存在的问题
传统实验教学的弊端传统实验教学的主要特征是“灌输式”“填鸭式”，学生在2个小时的实验过程中就是简单地按照实验指导书和实验大纲中的实验方法和步骤依葫芦画瓢，实验完成后，又按照统一的模式填写实验报告。在整个实验过程中，学生无需独立思考和分析，更谈不上发挥创新能力了。因此，很难让学生对实验产生兴趣，培养学生的创造性思维就更无从谈起了。虽然这种传统实验模式简明、清晰，有利于学生对相关结论的认可、理解和记忆，也有利于教师对整个教学过程的控制，教师和学生很轻松愉快地就能完成实验教学任务。学生走上工作岗位后，传统实验教学的弊端立即显现。学生缺乏设计实验的能力，在实验过程中缺乏发现问题、分析问题和解决问题的能力，实验后缺乏正确分析实验结果的能力。因此，传统的实验教学模式急需改革。
实验教学内容系统性不强植物保护研究法是植物保护专业本科学生的一门专业课程，其涉及的内容有昆虫研究法、植病研究法和农药研究法。在以往的实验课程中，只是简单地把这3门课的实验合在一起上，并没有把内容紧密联系在一起，如昆虫实验时，指导教师一般是教授昆虫学科的教师;而在进行植病实验时，则由讲授植病学科的教师指导。这样的实验模式难以使植物病虫害系统联系起来，学生学习专业知识不够系统和深入，容易造成理解上的片面性和孤立性，不利于掌握该专业的系统知识和技能。
实验考核不科学以往实验课程成绩评定的主要依据是实验报告，而每次实验课结束后，学生递交的实验报告只是把实验大纲(包括实验口的、原理、仪器与试剂、内容及方法)原文不动地抄一遍，实验结果更是千篇一律，这样实验就变成了预演过程，学生在实验中缺乏思考，不利于培养发现问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力，背离了实验课教学的初衷。同时，还会导致每位学生的实验成绩差异微乎其微，不具有良好的区分度。
2.教学改革内容
重视教学环节在以往的实验课程中，实验教学所需要的实验用具和材料大多数都是实验教辅人员提前准备，导致他们的工作量非常大。让学生参与实验材料的准备和管理，一方面提高了教辅人员的工作效率;另一方面可以让学生对实验过程有全面了解，获得整个科研实践过程的训练，从而养成好的实验习惯，在未来的科研工作中做到计划周密、有条不紊地安排和实施实验计划。同时，在实验教学过程中，必须教育学生认真操作、仔细观察、实事求是地记录实验结果，并对实验进行科学分析。一日_发现弄虚作假的学生，一定要严厉批评，同时帮助他们分析失败的原因，找出解决的方法，有条件的情况下，让其重新做实验，让学生充分意识到科学研究允许失败，但是不能有半l从虚假。提高学生的实践能力实践教学是培养和训练学生实践操作能力，独立分析问题、解决问题能力的重要手段，尤其对于学生创新能力的培养，具有其独特的地位和作用。该项口分别以某种农作物病虫害为主轴展开一系列的实践性实验教学，要求学生自主设计实验和执行各项实验内容，指导教师负责答疑和提供技术帮助。学生通过自己分组、调查、取样、鉴定、查阅资料、讨论制订实验方案和动手实验等一系列步骤，不仅可以很好地将课堂上所学的理论知识与实践相结合，而且还有助于提高自学能力、实践能力和团队协作能力，进一步培养科学思维和创新能力。优化实验教学内容结构将整个实验课程设置成一个综合性的大实验：分别以某个农作物上的病虫害发生规律及防治措施贯穿整个课程。将口前昆虫研究法的昆虫标本的采集与制作、昆虫人工饲养技术、昆虫生态学研究方法、昆虫生理生化研究方法、昆虫分子生物学研究方法和害虫综合治理研究方法5个实验和植病研究法的植物病害调查、植物病原菌分离与鉴定技术、植物病原菌分子生物学鉴定技术、植物病原真菌遗传转化技术和植物病害综合治理技术5个实验合并成1个综合性大实验，将植物病虫害研究以故事的形式紧密地整合在一起，让学生将课堂知识与田间实际应用有机地联系在一起，加深对理论知识的理解，提高学习兴趣。整个实验就是以具体的作物病虫害发生为时间轴，具有很强的连贯性和系统性，学生只有认真完成每一个实验，才能很好地保证后续实验的顺利进行，有助于增强学生的责任感和团队合作精神，同时也改变了学生实验报告千篇一律的`现象。改革成绩评定方式实验课成绩一方面是对学生实验完成好坏的肯定，另一方面也对学生起到了一定的督促作用。为了做到对学生的全面评价，实验成绩除实验报告和考勤成绩外，应将实验过程中学生的学习主动性、动手操作能力、实验结果记录规范性量化纳入成绩考核。在实验过程中，教师应主动观察并记录每个学生的实际动手、操作能力，量化后按一定比例记入总成绩，对那些既有独立操作能力，又有创新意识的学生，适当给予创新学分。实验过程中，学生是否遵守实验室规则、是否具有团队合作精神，实验结束后，学生是否打扫卫生、是否清洗实验器材等，这些看似小问题，但也体现着一个人的品质和素养，做得好的学生也可以适当加分。
3.改革成效
提高学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识学生能在同一时间完成植病研究法、昆虫研究法和农药研究法3门实验课程，体现了实验课程很强的连贯性和系统性。学生在实践过程中将这3门课程的相关内容紧密、有机地联系起来，对植物病虫害防治有了更深入的认识，同时也提高了学生的专业技能及其对专业知识重要性的认识。在实验的过程中，强调把学生的动手能力放在首位，让学生更多地参与到实验中，切身体会到所学专业的意义。
培养学生发现、提出、分析和解决问题的能力植物保护研究法实验教学模式具有系统化和整体化特点，同时涉及昆虫研究法、植病研究法、农药研究法等相关学科课程。在实验过程中，学生在对病虫害的认知及其防治等问题的处理上始终处于主体地位，在独立思考、查找资料、咨询专业教师、综合分析之后，拟定出具体的处理方案，能够融会贯通地掌握植物保护学科的理论知识和基本实践技能。
提高指导教师的业务水平新的实验教学模式综合运用了3门相关课程的理论知识，加强了课程的综合实践环节，因此指导教师自身的知识面、操作技术、实践应用和协调能力都需要提升。所以，这种实验教学模式促使教师在教学过程中同学生一起不断学习，丰富专业理论知识，完善专业实践体系，提高发现、提出、分析和解决问题的能力，了解和掌握学科及相关学科的发展动态、研究的新进展、出现的新技术，从而提高了指导教师的业务水平。
4.结语
植物保护研究法在植物保护专业2013级和2014级本科生实验课程教学中进行了实践，通过问卷调查，95%的学生认为在实验过程中有较多的动手机会，激发了自己对实验的兴趣，提高了自己分析和解决问题的能力。因此，认为该教学方法可以发挥学生的主观能动性、拓展学生的科研思路、激发学生的创新创造力和提高学生的独立应用实践能力，具有良好的教学效果。
中文名：植物保护学报全名：Acta Phytophylacica Sinica缩写：Acta Phytophy Sin
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一级学报一般是由国内一级学会出版发行的刊物。如昆虫学报、昆虫分类学报、植物保护学报、植物病理学报、菌物学报、病毒学报等，应用昆虫学报不属于该类范围