对PCR引物设计问题的研究.张洪福.【摘要】:核酸体外扩增思想是由Khorana及其同事于1971年提出,并由美国PE-Cetus公司的人类遗传研究室Mullis等人于1985年发明了具有划时代意义的聚合酶链反应(PolymeraseChainReaction,PCR)后才得以实现。.PCR技术具有特异、敏感、产率...
在引物设计方面,则尽可能做到1)较长的PCR引物21mers)2)较高的融解温度。这样,引物才可能用较高的退火温度以提高扩增的特异性。经长模板PCR扩增所得到的DN段用限制性内酶酶切分析并与电脑查询结果相比较,初步证明为coliasd基因。
摘要:PCR的第一步就是引物设计。引物设计的好坏,直接影响了PCR的结果,因此这一步很关键。成功的PCR反应既要高效,又要特异性扩增产物。目前可以使用的引物设计软件很多,但仍有许多细节需要注意。
师姐说:师啊,你帮我找几个基因的qPCR引物吧。你问怎么找?师姐说查文献啊!于是你一头雾水的开始查文献:打开Pubmed,输入基因名,ATG7,enter,哇,有几万条记录,点下bestmatch,再选下近5年的文献,筛选一下,哇,还有几万篇相关文章。好...
分析测试百科各位秀友,我要做一种真菌的定量pcr,查阅资料发现已经有报道的特异性引物4对,两对曾用于普通PCR,另外两对曾用于荧光定量PCR,为了确定哪对更适合,我已全部,我如何看哪对更适合,初步想法是先做普通PCR,从中挑选出两对...
PCR反应体系中有2种模板和3种引物,从而在同一个反应体系中产生一个重组DNA分子.这种方法的主要优点是快速、高效且不依赖连接片段的限制酶位点.用这种方法已成功构建了融合蛋白基因——基因.关键词DNA重组TP.PCR豇豆蛋白酶抑制剂.DNA的体外重组...
最近在后台留言“qPCR引物设计”的朋友比较多,所以今天重新推送之前我们发过的一篇推文,希望更多朋友能看到。去年,NucleicAcidsResearch在线发表了西南大学农学与生物科技学院等单位题为“qPrimerDB:Athermodynamics-basedgene-specificqPCRprimerdatabasefor147organisms”研究论文,该研究构建了qPCR引物...
该研究提出了一个易于操作的、系统的、全面优化的qPCR分析方案,并作为案例研究将其应用于观赏和能源植物沙生蔗茅(Tripidiumravennae)和大豆在不同生物或非生物胁迫实验条件下的最优内参基因的鉴定。.该研究中,研究者建立了一套集引物序列设计优化、qPCR...
摘要:本文旨在介绍使用软件设计PCR引物的技巧。在PCR引物设计原则的基础上,详细介绍了两种常用引物设计软件的基本使用方法,并对其各自的优缺点进行了比较。一般性引物自动搜索可采用“PremierP...
PCR其实步骤自动化后很简单了,只要引物设计的好,跟着前辈做也是易如反掌(封面图简单抽象介绍了PCR关键),也就引物设计往往没人有空给你详细讲完,所以我想给大家...
记得当初写本科论文,感到不知道讨论什么问题好。愣是写了一大段的PCR条件摸索的讨论。后来PCR成为实验最基本的一步了,但是发现在PCR中还是有许多需要注意的地方。PCR的第一步就是引...
(论文)任意引物PCR及其应用研究进展下载积分:1500内容提示:320生LE,兀兀1E技术通讯⋯Yol.14.14No.No4·RSINBIOTECHNOLOGYJlll,2⋯003...
11、引物应在核酸保守区内设计并具有特异性。引物与非特异扩增序列的同源性不要超过70%或有连续8个互补碱基同源。二、RealTimePCR引物设计原则RealTimePCR用引物与普通PCR引物...
PCR引物设计原则PCR反应中有两条引物,即5′端引物和3′引物。设计引物时以一条DNA单链为基准(常以信息链为基准),5′端引物与位于待扩增片段5′端上的一小段DNA序列相同;3...
本文首先对PCR引物设计相关的背景和概念进行了简要介绍,分析了PCR技术的原理和特点,说明了对引物设计问题进行研究的必要性。然后对PCR引物设计问题中的引物选择、简并引物设...
近年来,有关PCR引物的考查成为高考生物“基因工程”中的一个亮点,对学生思维的灵活性和临场答题的机敏性提出了更高的要求。下面拟通过介绍PCR引物设计的多个原...