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近日,中国学者熟知的PLOSONE和PLOSBiology在投稿指南里指出,7月1日起,要求所有作者提供WB相关的原始数据,并存放在可用的数据库中,提供可查询的信息。在《JBC》的作者投稿要求中也需要提供原始数据作为评审…
转膜篇1.转一张膜需准备6张7.0~8.3cm的滤纸和1张7.3~8.6cm的硝酸纤维素膜。切滤纸和膜时一定要戴手套,因为手上的蛋白会污染膜。将切好的硝酸纤维素膜置于水上浸2h才可使用。要领:(1)用镊子捏住膜的一边轻轻置于有超纯水的平皿里,要使膜浮于水上,只有下层才与水接触。
这是小生觉得上看到的最值得读的文章,很佩服作者的精神,故转过来以鼓励自己。分子生物学实验,寂寞又辛酸,你们懂的!~1.抗体的选择对于国内的大多数实验室来讲,做westernblot实验选择抗体是个头疼的...
分析测试百科最近要做westernblotting磷酸化蛋白和未磷酸化蛋白,因为样本珍贵,想要跟大家交流一下同一张膜如何重复使用的问题。我也看了一些战友的帖子,多使用膜剥脱液,如下:62.5mMTris-Hcl,PH6.72%SDS7ml巯基乙醇总体积100ml...
这时通过左侧工具栏,点击裁剪图标,然后选择合适大小区域进行裁剪,点击Enter键确认后,点击[文件]-[另存为],将做好的WB图存储为图片格式,一般选择TIFF位图格式进行存储,图像质量更高。.下面就是做好的WB图片,两张膜边缘对齐,图片看起来也更漂亮...
一般来说,体积大一点效果会好一些。因为一抗、二抗一般都是过量的,我们实验室的一抗都是反复使用的。你好我们是在杂交袋里边儿孵育的我的膜有3cm×9cm吧我们实验室其他博士建议我用8ml说1.5ml都太少了想听下您的建议
2化学发光底物化学发光底物最常用的是鲁米诺(Luminol),化学发光法由于仅在酶和底物都存在的时候才会发光,不同于生色反应,所以特别适合在同一张膜上对不同的目标蛋白分别进行多次检测。目前最高检测灵敏度已经达到低飞克(Femto)级别,成为安全且灵敏度最高的WB检测方法。
一般的marker分子量范围在10-130kDa之间,都可以满足正常蛋白的需要。但有些分子量范围较广的marker,比如说6-250kDa,虽然说它范围很广,可中间的蛋白分子量并没有区分的很细,只适用于大分子或小分子蛋白,而对于30-70kDa的蛋白并不是很适用。
方法1:如果你的蛋白很多,多跑几板胶,整张膜只上一个抗体,而且坚持用同一产品Marker同一浓度的分离胶,多做几次就能确定目的蛋白相对与marker的位置。.方法2:如果蛋白样不多时,整张膜先上一个最重要的抗体;发光后用stripbuffer洗,然后再上第二种抗体...
熟悉流程后进一步实验,依旧面临了不少问题:比如最近,我们要在同一张膜上研究多个蛋白的表达,用什么实验方法就把我难住了。.第一时间想的是裁膜,但师兄提醒:现在越来越多的期刊要求提供未剪切的Blot图。.Stripping&Reprobing?.师兄说:这种办法因...
每张膜的样品数与所使用的跑胶系统有关,最常见的是10-15个上样孔的型号,一个孔放marker,剩下可以测n-1个样品。我用过最多的是25个孔。能够在一张膜上测几种不同... .new-pmd.c-abstractbr{display:none;}更多关于wb文一般需要几张膜的问题>>
看你有几个转膜仪,一个一次能转2张膜,每张膜能测的样本数取决于你跑电泳时加样孔有多少个,也就是梳子的规格,但是得留出一条泳道给marker用,其他都可上样,应... .new-pmd.c-abstractbr{display:none;}更多关于wb文一般需要几张膜的问题>>
不过,这样岂不是要求一定要P和TOTAL同一版胶来跑!?否则只能是用各自的内参?要是只拿其中一个内参来用的话,似乎有不严谨之嫌?但是我们在实际操作中,往往都不是...
下面就是做好的WB图片,两张膜边缘对齐,图片看起来也更漂亮,方便进行文章投稿。下面就是整个过程的视频操作,赶紧学习起来吧。https://v.qq/x/page/v0529asgk7u.html“医学方”...
WB本身是个半定量的实验它只能看个大概趋势而不能准确定量灰度的计算本身这个就存在一定问题不...
现在需要发文章的群体真是越来越多元化了,就我而言从60后到00后的作者都遇到过,60后的企业老员工,为了适应“新时代的发展要求”和年轻人一起文。也遇到过几个2000年的高三小...
如果是核心的话,确实比较长。大概是半年到一年,具体看哪个期刊了。你可以这样,既然是你们老师也要发...
不需要marker,你可以参考下最近Sci.Rep.上面的文章,补充材料里面都有WB条带原始图发自小木虫Android...
论文投稿前,需要首先找到合适的投稿期刊,这就需要我们对本领域重要的期刊及其影响因子、审稿周期等有个全面的了解,为了做到这一点,我们可以请教导师、师兄,或者查阅一些网站,比如htt...
所以,对于PLOSONE的投稿要求,大家大可不必担心,有了Elabscience的WB试剂盒助力,文soeasy!温馨提醒:如果您想了解或者购买WB试剂盒的话,请点击我要选购,如果您有任何...