摘要：.目的探讨HCV感染外周血TCRβV基因重组的多样性以及发现可识别丙型肝炎病毒的T细胞受体.方法分离HCV感染的外周血淋巴细胞提取RNA,反转录为cDNA一链,进行多重PCR扩增,构建测序文库,进行高通量测序,分析其TCR多样性以及表达的差异.结果6例HCV感染...
优化后的条形码DNA经过PCR扩增后,将扩增产物连接到pMD-18T载体上,转入E.coliDH5α感受态细胞。经Amp+抗性筛选和菌落PCR鉴定出阳性菌落,然后用Amp+液体培养基增殖阳性菌落,提取重组质粒,进行酶切…
实时荧光定量PCR对丙肝RNA检测的影响因素.doc,精品论文参考文献实时荧光定量PCR对丙肝RNA检测的影响因素刘永胜隆元英（江油市人民医院检验科四川江油621700）【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）23...
然而，通过RT-PCR捕捉负链RNA的技术此时并不成熟，特异性很差——即使只加入一种引物（正链或负链），HCV的正负两链都会出现扩增。针对这一困境，NCCRI于1993年提出假说，指出问题的核心在于目标RNA模板中混入了宿主细胞的RN段。
选择NS5b区PCR扩增后行进化树结构分析是目前公认的基因分型“黄金标准”【2】。所有这些方法都能正确辨别主要的基因型组别，但只有核苷酸的直接测序在区分亚型中是有效的"】。而且，这些基于PCR方法的分型方法都具有其缺点和优点。
3.3文件审批：实验室主任。3.4执行：PCR实验室所有工作人员。4.参考文献：4.1中山大学达安基因股份有限公司丙型肝炎病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）说明书。4.2中山大学达安基因股份有限公司核酸扩增荧光检测系统DA7600型使用说明书。
为验证引物设计策略的正确性,我们另外设计了3对引物,扩增依次延长的目的片段,并将这3对引物与本方法中根据设计原则设计的引物进行统计学比较。结果显示,第一,新的提取方法(MiRcute提取柱)比QIAGEN的RNA提取方法更有优势,具有统计学差异(p0.037)。
慢性丙肝高通量测序TCR-CDR3免疫组库研究.张园海葛国洪陶艳邵江波吴迪.【摘要】：目的探讨HCV感染外周血TCRβV基因重组的多样性以及发现可识别丙型肝炎病毒的T细胞受体。.方法分离HCV感染的外周血淋巴细胞提取RNA,反转录为cDNA一链,进行多重...
第二部分GSTpulldown联合质谱筛选丙肝病毒蛋白NS5A结构域I的相互作用蛋白目的通过对1b型丙肝病毒Con1株的NS5A结构域I宿主相互作用蛋白的鉴定分析,为研究NS5A功能及其参与病毒复制机制提供理论基础。.方法采用GSTpulldown实验技术联合液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)对...
即实时荧光定量核酸扩增检测系统，也叫实时定量基因扩增荧光检测系统，简称QPCR。问：QPCR、DNA检测、PCR之间的关系？答：聚合酶链式反应（PolymeraseChainReactio简称PCR）原理凭借敏感、特异、快速的特点荣获93年诺贝尔化学奖。
丙型肝炎病毒临床PCR检查研究摘要】目的:探讨应用实时荧光定量PCR技术检测丙型肝炎血清抗-HCV及血清HCV-DNA。方法:选取我院2009年1月至...
方法:选取我院20092010年10月检查丙型肝炎92例,ELISA法测定血清抗-HCV平,实时荧光定量监测血清HCV-DNA水平。结果收治92肝炎检查,ELISA法检...
本法扩增终产物为特定极性的ssRNA,其特异性经凝胶电泳和斑点杂交确定;RNA定量分析结果显示本法核酸扩增效率高于巢式PCR近20倍。关键词:丙型肝炎病毒:逆转录P...
你好,HCV-RNAPCR检查有扩增信号,HCV-RNA<1.0E+03,是丙肝吗?(男,39岁)进群免费问,享更多健康福利>>李明远医生你好,我是李医生,很高兴为你提供健康询服务。...
兰州大学硕士学位论文RBP4水平与慢性丙型肝炎的相关性研究姓名:吴萍申请学位级别:硕士专业:内科学(传染病)指导...酶标仪(美国Bio.Tekcere公司)(2).7500型...
《第6次全国微生物学与免疫学大会论文摘要汇编》2004年收藏|手机打开手机客户端打开本文荧光定量PCR在丙型肝炎病毒感染诊断中的应用岳乔红苏哲苏明权杨柳郝晓柯【...
通过已知量的参照模板可较准确地推算出血清标本中的原始浓度.因此,此野生型模板可作为HCVRNA的逆转录及PCR定性诊断中的金标准;而突变型模板则作为内参照用于HCVRNA的竞争性逆...
根据Flunel等人的调查(见附表).在丙型肝炎研究中.作为最基本的研究手段的RT-PCR方法的可重复性并不稳定,如何提高试验的灵敏度往往成为研究工作成败的关键。本文回顾了有关专...
肝炎肝硬变、肝细胞癌(HCC)的主要病因之一,而这些病变形成与其病原丙型肝炎病毒(HCV)某些重要的生物学特性有关〔...此法是在完成靶DNA的PCR扩增之后进行单链DNA多态性分析的...
新疆医科大学硕士学位论文PCR-BHEL技术的建立及对血清中丙型肝炎病毒的检测姓名:于晓芳申请学位级别:硕士专业:免疫学指导教师:许晏20080301英文缩略语表英...