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免疫印迹试验,俗称WB,可谓是体外试验的一条“拦路虎”。实验过程中,问题层出不穷,让小伙伴们很是痛苦。今天,我们聊一聊WB条带趋势跑不出的问题。对于饱受WB摧残的小伙伴来说,好不容易跑出条带了,兴冲冲…
审稿人的问题是这样说的:“gapdhlookslikechopedfromsomeothergelwhichisbrokenintohalf”.GAPDH.jpg.我这么回答可以吗?.WepromisethattheGAPDHwasnotchopedfromsomeothergel,buttheblottingdoeslookslikeverygood.Unfortunately,theoriginalscanofGAPDHwaslostbecauseofcomputerproblems...
条带的形状可以像煎饼,哑铃,鱼,等等等等。这取决于研究人员如何将样品加载到凝胶上,蛋白质的量以及凝胶设备的特性。然后,凝胶带和背景上还有斑点、污渍、划痕、气泡和其他不规则现象。所有这些变化让每个WB的条带都应该是独一无二的。
WB,又叫蛋白质免疫印迹,是很常见单很重要的一个分子生物学实验。然而,大家常常会遇到各种问题,特别是新手,有时候不知道如何下手,学霸君汇总了一下。欢迎大家来一起交流共同进步。问题chengxue727:每次提蛋白后会将样品在短时间内重复2-3次WB,但是每次跑出的条带趋势不一致,上…
带有变化的重复这类型主要包括将条带进行改变(旋转、移动)的图片或将细胞群略微修改的流式图片(FACs图片)。图3-A中,左右两个流式图片中展示的是不同细胞亚群的细胞比例,但是图片中方框中相对应区域完全一致,说明以上的流式图也有可能是由其中一图经过修改后得到的。
进口的最强的1:10000都能做出条带(Upstate,现在被Minipore招安了),国内分装的也好用,但就是不好回收重复使用,国产的一般只能用一次。我要特别强调的是,实验室里最贵的抗体实际上是内参抗体,因为只要WesternBlot开工,每次都得用内参抗体,而一般目的蛋白的抗体也就用几次,重复三…
高分文献中的WesternBlot定量柱状图是如何实现的?Westernblot可以用于蛋白含量的测定,对其进行(半)定量分析。.我们在论文中经常会看到除了Westernblot条带图片之外,还会附带一个条带量化分析的柱状图,更为直观和客观地展示表达量的差别。.图源:WielC...
yunchenxia我正在写硕士毕业论文,做了很多关于western检测蛋白质表达的实验,我想问一下这些试验结果是直接将图片贴到论文上还是要用软件对电泳条带进行光密度(OD)分析,然后进行统计,我看到国外的文献直接是贴图片的,国内有一些进行了统计,所以想问一下要不要统计?
如果你是学生,写的是毕业论文,除开博士毕业论文,99%这一辈子也不会有人发现。.1%的情况是抽查并且被人严密推导数据了,那你就是是天选之人,赶紧买彩票吧,而且如果你不在学术界,发现了对你一点影响没有,当然如果你的上级知道了,那还是挺危险的...
这篇文章被爆料出来有两个原因,首先就是WB条带重复利用。在下图中20%O2条带和AKT条带相同。图片来源于pubpeer其次便是图片的拼接,着实拼接痕迹很明显。在Glut1条带的第二个泳道可以明显的看到裁剪的痕迹。图片来源于pubpeer
我们都习惯把WB叫做'玄学',意思就是这门技术让人琢磨不透,很难做到结果可重复,明明上了两个相同体积的同个样品,可总是这两个泳道的条带趋势不一致。然而,经过...
ElizabethBik博士表示,这些涉嫌造假的论文并不是图片完全重复,而且因为图片风格和形状非常相似。在WB图中,免疫印迹条带非常规则地排列,并且呈哑铃状或T形的光...
蛋白是刚刚提取的蛋白,蛋白是120kd,跑了多次都是下面样子,同时转膜的内参β-actin条带很漂亮。看下面...
你可以给编辑部的邮箱发一个邮件说明情况并附上你的正确条带只要证据充分就没什么问题或者可以...
根据以上步骤做出来的WB结果,蛋白质印迹带的形状和间距变化很大。条带的形状可以像煎饼,哑铃,鱼,等等等等。这取决于研究人员如何将样品加载到凝胶上,蛋白质的量以及凝胶设备的特性。...
WB实验时,是每次要做三个重复吗?做三次?就是一个目的蛋白的检测要做九个样本吗?细胞实验和体内...
如题,论文投了快2年,被拒了无数次,已经延期一年毕业了,这次总算有些希望,不过对于审稿人提的这个问题真的不知道该怎么回答了,请高人帮忙想想怎么回答才好啊!审...
我们都习惯把WB叫做'玄学',意思就是这门技术让人琢磨不透,很难做到结果可重复,明明上了两个相同体积的同个样品,可总是这两个泳道的条带趋势不一致。然而,经过...
WesternBlot(WB)可以说是生物学方向的同学最...最基本的实验技能了,在之前我们讲到过WB的实验步骤零基础实验|Westernblot操作流程也有提到过WB的结果作图如何通过...
WB二抗westernblot二抗免疫组化抗体免疫组化二抗磷酸化抗体磷酸化特异抗体激酶和磷酸化抗体亚型对照抗体裂解液对照组织对照其他抗体蛋白A,GPLUS抑制/凋亡抗体信号分子抗体结构蛋白...