关于提高核酸检测率论文

在平时的学习、工作或生活中，大家都接触过作文吧，作文根据体裁的不同可以分为记叙文、说明文、应用文、议论文。还是对作文一筹莫展吗？下面是我帮大家整理的做核酸检测作文，供大家参考借鉴，希望可以帮助到有需要的朋友。

妈妈带着我和妹妹来到体育中心做核酸检测。

虽然现在已经是秋天了，但天气还是跟三伏天似的。大中午的太阳像一个超级大的火球一样，炙烤着大地，阳光是那么强烈，整个世界都笼罩在一片耀眼的光芒之中。

到了体育中心，只见做核酸检测的队伍像一条条长龙，一眼望不到边，每人间隔一米，大家井然有序地排着队，等待做核酸检测。

左等右等，终于轮到我了。我手拿身份证给工作人员登录信息。登记完之后，我就往前走，由另一位医人护人员给我做核酸检测。我打量着眼前这位医护人员，她顶着炎炎烈日，身上穿着密不透风的防护服，只见她拿出一支棉签让我张开嘴巴。这时，我很紧张。医护人员看我很紧张，便安慰我：“检查真不可怕，只是有点痒。”然后，我照着她说的做了。这时，我仔细观察这位医护人员，她被防护服包得很紧，紧得和一个在蒸笼里的一个包子一模一样，她的汗水像豆子般滴下。哦，在这样闷热的如包包子似的医务人员，对待我们却还却还是那样有耐心。她们真了不起。

在这里，我想说：“医护人员们，你们辛苦了！谢谢你们顶着炎炎烈日给我们做核酸检测。谢谢你们！”

一阵阵秋风吹落了金黄的树叶，带来了丝丝寒意，同时也没收了我的健康。看到体温表上37。3度的数字，我的心怦怦直跳，心想：“按照学校的要求，我必须做核酸检测。”

于是，我被衣服包成了一个大圆球和妈妈飞快的来到人民医院发烧门诊。下了楼远远望去在干净明亮的大厅我们看见有三四名小朋友在等待。我走到那个可怕的地方，一看见白大褂就想起了姐姐说的话太吓人了！正好，我透过窗户看见美丽的喷泉，心想：“这应该能让我变得不害怕吧。”但是我刚看了一会儿，就想，“我是小孩儿，应该不会从鼻子里吧。”我自言自语的说。但是，该干啥还得干啥，我只能面对现实。

只见那位医生拿出一个大概有1分米长的棉签，直向我嘴巴冲去，“哦，兴好，兴好，不是从鼻子眼儿里捅到嗓子眼儿里，如果是的话我就该跑了。”我正想着，一边张大嘴巴，当那根又细又长的棉签，捅到我嗓子眼儿那一刻，我都快吐了，那个味儿是真的难受，现在回想起那个味儿还想吐呢，等他把那根又细又长又难闻的棉签拿出来时，我的心情由阴变成了晴，心从紧张到放松，我心想，啊，终于结束“战斗”了，终于不用在难受了。但是啊，我觉得核酸检测并不疼，就是恶心，其他也到没有我想的那么怕。

这件事让我知道了在生活上其实有些事并不像想象的那样可怕，一定要面对现实。

突然爆发的疫情打破了往日的宁静，为防控疫情，烟台市全体市民要做核酸检测。8月4日，妈妈接到了村里的通知，说是明天早上在村广场做核酸检测。听到这个消息，我又惊又喜，心想：做核酸会不会很痛呢？

8月4日傍晚，跟着妈妈到广场排队拿号。我看到敬爱的医护人员，穿着防护服，戴着护目镜和口罩，早就做好了准备。不一会下起了大雨，我们赶紧找地方躲避。一会儿，雨停了，我们回到广场等候。激动的心，颤抖的手，我的心像打鼓一样砰砰直跳。“我的妈呀，做核酸检测疼不疼呀！”我非常忐忑，心里直犯嘀咕。我的腿就像灌了铅一样，一步都不想往前迈，可是医生的检测真是神速，不一会儿就轮到我了。

首先要登记，负责登记的志愿者对我说：“贺玉利，你害不害怕啊？”正在我疑惑之际，我发现原来是我们学校老师在跟我说话，看着穿防护服的老师，顿时我觉得不那么害怕了。登记之后，医生让我坐下，和蔼地对我说：“小朋友，把口罩摘下来吧。”哎呀！把我吓得都忘了摘口罩了，我飞快地摘下口罩。医生又说：“把嘴巴张开，啊——”我照着做了，医生拿出棉棒，向我口中伸去，直达咽部，在喉咙里转了一圈儿，我的喉咙里痒了一下，很快就好了。“小朋友，你可以走啦。”抬起头，看到医护人员浸湿防护服，看到志愿者老师忙碌的身影，我不由得一阵心酸，情不自禁的打了一个庄严的队礼。他们真不容易，我真盼望疫情早点儿结束！

今天是8月19日，妈妈接到了通知，说是明天早上7：45准时到达学校做核酸检测。妈妈告诉了我，我又惊又喜，心想：做核酸会不会很痛呢？但是能和好朋友一起学习，玩耍，能和老师相遇，再痛我也不怕！

一大早我就起来了，听见外面正在下着倾盆大雨，即使再大的雨也阻挡不了我的脚步。我和爷爷打着伞往学校走去。到了学校，我看到了一个小篮球厂，大树的叶子非常茂盛，到了教室，老师说了几句话，就去楼道找家长排队，我站在第十三个，过了一会儿，终于走到了做核酸的地？方了，我往前面看到了医护人员在准备，我快坚持不住了，心里还是特别的紧张，老师告诉我不要害怕，一点儿都不痛，只是拿着棉签往嘴里搅一圈，就好了。轮到我了，医护人员首先拿出一根棉签伸到我的嘴里。搅一圈，然后又拿出来把它放到小瓶子里，最后把它弄断。我感到很恶心，想吐，爷爷说我很坚强！

其实一点儿都不可怕，我希望结果早点儿出来，这样我就能和好朋友一起学习、玩耍，还能跟老师相遇，还能学习更多的知识！

“啊……”你问我为什么要“啊”，接着往下看，你就明白了。

今天一大早，我就被妈妈叫醒了。唉，我的梦还没做完呢！我还想再睡一会儿，但是今天得做第二次全民核酸检测（放假前做了第一次核酸检测），所以我只好慢悠悠地起床。起床后，我想吃完饭再去，妈妈说：“做完核酸检测，再吃饭吧！”于是，我就和妈妈戴上口罩出发了。

来到学校门口，这里已经有许多人在排队了。忽然，一位老奶奶说：“啊，身份证忘拿了！”她这么一说，妈妈才想起来我们也没带证件。“苍天啊，为什么你也忘带了？！”我感叹了一声，赶紧和妈妈回家去拿。

等我们再次来到学校时，人已经所剩无几，我们连忙跑过去，正好十个人。走进校门，只见许多阿姨坐在椅子上，她们是给我们统计信息的。轮到我做核酸检测了。我先张开嘴巴，“啊……”了几声，医生用棉签在我的喉咙里转了几圈，就放进了一个管子里，我有点想吐的感觉。听妈妈说，这些管子都要统一送到城里去做检测，一天以后才能出结果。

但愿这是我们定州最后一次做全民核酸检测，希望病毒早日被消灭，人们重新过上安居乐业的生活。

前段时间郑刚刚经历了一小场千年不遇的暴雨，汛情还未结束，疫情又来势汹汹，让我们的城市雪上加霜，为了能够尽快控制疫情，郑州市全员进行核酸检测。

今天下午，我们一家人也来到了小区的检测点。离检测点还有很远我就看见了一条“长龙”，爸爸妈妈带着我连忙加入了检测大军。我抬头一看，根本就看不到队首，心想：这要等多长时间才能轮到我呀！

10分钟过去了，30分钟过，一个小过去了还没有轮到我，我等得不耐烦了，于是就问爸爸：“什么时候到我们呀？我都快热死了，站了这久我又累又热，难受死了，我不想检测了，咱们回家吧。”爸爸看了我一眼说：“不行疫情当前，我们要严格遵守国家规定，这也是为抗疫做出自己的贡献。”我点了点头，又继续等待。

又过了半个小时，终于轮到了我。我坐在座位上，看到了身穿防护服的白衣天使，突然想起了我刚才的抱怨，羞愧万分。炎炎烈日这些白衣天使牺牲了自己的休息时间，穿着密不透风的防护服为我们检测，她们不累吗？她们不热吗？我有什么理由抱怨呢？她们才是最辛苦的。做完检测我站了起来向她们深深地鞠了一躬说道：“您们辛苦了，谢谢！”

回到家，爸爸表扬我，说我长大了，懂得感恩了。疫情当前，人人有责！作为小学生应该积极响应国家号召，遵守国家规定，就是为抗疫做出贡献。

今天早上，妈妈说要带我去做核酸检测，我有点紧张，因为我听说核酸检测要戳到我的喉咙。

我们来到检测点，人非常非常多。妈妈说，核酸检测其实就是用一根棉签往嘴里一搅就好了，很简单的。我一听，原来就是在喉咙里捣鼓几下嘛，有什么好怕的，心里顿时安定了许多。

马上要轮到我了。我看到前面一个人正在做核酸检测。医生刚把棉签伸进她的嘴巴，她就往后一缩。医生又把棉签伸进去，她还是一缩，也不知道最终医生到底有没有采到样。我想，我要做得更好一点，做一个大人都佩服的榜样。于是，我就大踏步走向前，很快就轮到我了。

可是想起来容易做起来难，我还是紧张起来了。医护人员拿出一根棉签，要往我嘴里塞。我感觉这根棉签像一条毒蛇要钻进我的嘴里。“别怕！”我一边默默给自己打气，一边张开了嘴巴。一开始，棉签在我的舌头根部搅和着。我平时有个小癖好，喜欢用舌头在自己的嘴巴里卷来卷去，医生搅和的这个地方我平时好像都卷过，我感觉不怎么难受，稍微有点梗，就像感冒时鼻腔堵塞的那种感觉。接下来，就来点猛料了。棉签突然往我喉咙里一戳，我感觉我的后脑勺好像被戳出了一个洞。正当我快承受不住的时候，医生把棉签拿了出来。呀，终于好了，我松了口气。我看到医生在棉签上涂了点红药水，放进了一个试管里，大概是要拿到医院里去做检查吧。

唉，虽然核酸检测没有我想象中那么恐怖，但是也有点儿难受的。真希望疫情赶快过去，让我们能开开心心地过一个暑假。

5月17日，早上八点，外婆带着我去做核酸检测，地点在金水农场幼儿园。

我们来到幼儿园，就发现一条长龙似的的队伍，从幼儿园的办公室门口一直延伸到幼儿园的大铁门，我们跟着队伍排在后面。每个人都要站在同一条黄线上，并且要保持一米的距离。

大约站了二十分钟的时候，一位穿着防护服的医务人员来到我的身旁，核对我的身份信息，给我一张写着我名字的小纸条。另一位医务人员用消毒液在我身上喷了一下。

又过了五分钟的时刻，终于轮到我做检测了。只见一位穿着防护服的医务人员让我把身份证给她看，她核实信息之后，就把身份证还给了我。还递给我一个小药瓶和一根棉签。

接着，一位医生叫我坐在椅子上，仰起头，张开嘴，她用那根棉签在我口腔里刮了几下，核酸检测就做完了。

一开始，我很害怕，做完之后，才发现并没有我想象中的那么可怕。

在回家的路上，我想：这么热的夏天，我就只穿着一件单衣服，都感到很热，那些穿着像大熊猫的医生们，一定会很难受的。长大以后，我也要当一位医生，治好病人，保护大家!

第一次做核酸检测，真兴奋！

妈妈一大清早就去当志愿者了，我起床后只喝了一杯牛奶，吃了几片面包，然后跟随爸爸去他们学校做核酸检测。由于学校在村里，自然少不了走山路。

公路像一条带子，沿着山坡，或者就搭在坡上，车子一会儿左拐弯，一会儿右拐弯，一会儿上坡，一会儿下坡，很颠簸。车子前行，只见一座一座山躲到了我的后面，一、二、三，我默默地数着山，不一会儿就睡着了……

车停了，我被惯性震了一下，顿时清醒起来。我打开车门，深吸了一空气，农村的气息好清爽！周围都是矮矮的居民房，一个院子一户人家，像极了老家村里的样子，太亲切了。我不觉兴奋起来，可我要保持冷静，因为爸爸顺便稍上了同事家的老奶奶和一个小女孩，要注意形象。我双手插兜，挺胸抬头，佯装自若，尽量把自很己装得很帅很酷。

今天村里要检测的.人不多，我们很快排上了队。排在前面的人也就有五六个。医护人员的操作真熟练，从录入信息到咽拭子检测不到三分钟，挺快的。可是不知为什么检测突然中止了，我向前瞄去，只见几个医护阿姨正拿着手机点着一个系统，可半天也没动静。于是，爸爸上前去帮助，掏出手机登录那个系统，可还是不行，听说是登录用户太多，系统正在抢修升级。此刻，我仿佛看到了很多网络工程师忙碌的身影。

我前面只剩一个人了，虽然近在咫尺，可又仿佛遥隔千里！没办法，等，再等，还是没办法。很快到午饭时间了，大家只好作罢，各自离去。

爸爸带我到了学校食堂，狼吞虎咽地吃了满满一大碗面条。吃完了，我就去找那个女孩儿玩，不一会儿，我们熟悉了，我们玩捉迷藏，跳方格，玩健身器材，玩得很开心。

下午时间到了，医护阿姨又来了，系统也修好了，不一会儿就到轮我了，我坐在椅子上，仰头张嘴，喉咙里发出“啊……”阿姨拿着一根像棉棒的细长木棍，在我的嗓子眼里桶了几下，顿时感觉嗓子里翻江倒海，恶心想吐！眼泪也瞬间涌出了眼眶，不疼，有点难受而已。“好了”，只见医护阿姨把细棍子折断，有棉的一截给放进了玻璃管里。

啊！终于完了，再回头看看医护阿姨，她们依旧在忙碌，医护阿姨可真伟大！

疫情期间“核酸检测”是我们经常听到的一个词，那你们知道做核酸检测时，是会感到舒服，还是会感到疼痛呢？是用什么工具进行检测呢？会不会打麻药呢？今天，就让这个刚刚做完检测的我，给大家提个醒吧！

最近鼻子总是一到晚上睡觉就容易堵塞，呼吸不畅，妈妈今天决定带我去医院做个检查。因为需要做鼻腔镜检查，必须先做核酸检测，没有问题才能去做进一步检查，我怀着一颗既忐忑又期待的心跟着妈妈去缴费。不一会就来到专门做核酸检测的小帐篷前排队。

“韩欣格来了吗？”随着工作人员的叫喊声，我也被妈妈“推”到了医生面前，其实我一开始也跟别人一样满怀期待地在小帐篷前排队等候。但当我看到前面检测的人满脸恶心地从帐篷里出来时，我那期待的眼神在下一秒就凝固了。“到你啦！快过去啊！”妈妈把我往前推了推，“这个……我……”我开始犹豫了，可妈妈的力气就像大力水手，一下子就把我送到医生面前，我知道，这场灾难甩不掉了。

只见一位医生冲我微微一笑，但在我心里，这个微笑让我浑身一颤。随后她拿出一根长长的棉签，对我保证地说：“一定不会痛的，我会很轻哟！”可在我心里，长长的棉签仿佛一根长针，迎接我的必定是强烈的疼痛感，我身体紧绷的站着。一切准备就绪后，那位医生拿起“针”慢悠悠地伸进我的喉咙，不停地搅动，搞得我满脸通红，十二分的难受，恶心的感觉慢慢向我袭来。可那医生完全没有停下来的意思，哎，算了，忍不住了“呕！呕！不行了——”看着我那狼狈的样子，妈妈也是哭笑不得。

这就是我惊心动魄的全部检查过程，现在，你们还对核酸检测感兴趣吗？

莆田，敲响了抗疫的警钟，还启动全市核酸的方案。这个方案一确定下来，我家楼下和小区里的人，不管是老幼妇孺都从四面八方涌向马路。那空荡荡的马路一眨眼的工夫就排起了一条长龙。于是我们决定明天再去做核酸检测。

可到了晚上凌晨一点左右，正在睡梦中的我被一个电话吵醒了，是姑姑打来的电话。她说：“赶紧起床下来做核酸，这个时候人不会多。"于是我揉了揉眼睛爬下了床，很不情愿地下楼来到了马路上。一看，虽然人没有白天那么多，但还是排着一条“龙”。刚排没一会儿，我和妹妹就开始有些不耐烦了，妹妹一直吵着要睡觉，这时妈妈把手机给了她，并让我边排队边照看妹妹，妈妈就飞奔到楼上搬了把椅子下来，让我和妹妹坐在旁边等待。

不知过了多久，队伍慢慢地移动到了学校门口，工作人员要求十人一组出示健康码才可以入校。进入校内，我们来到第一个帐蓬前，工作人员要求将身份证放在胸前拍照登记，随后我们便来到护士面前，我有些紧张地四处张望，有正在排队的，有在维持程序的，还有一些不肯配合哭闹的幼小儿童……终于到我了，只见穿着密不透风的防护服的护士将一根一次性的棉签伸入我的嘴里不停搅动后，拿出来放入装着药水的瓶子里折断，我和妈妈、妹妹做完核酸检测便火速离开了现场。

回家路上，我边走边想，这些护士太伟大了！她们冒着危险、不眠不休、加班加点地给我们做核酸检测，我才是半夜排了一会儿队都不耐烦，可她们还要从早忙到黑地为我们做核酸检测啊！我真想对她们说:“谢谢您们！您们辛苦了！”

当你第一次做一件事之前，可能会觉得很难，但在你真正去做的时候，可能会发现并没有想象中的那么难。

记得上学的一天，全体学生要核酸检测。我是第一次做核酸检测，所以并不知道核酸检测是怎样的。我便提心吊胆，想着核酸检测是什么样？：打针？吃药？量体温？……这些我并不害怕，但是打针和吃药让我有一点点紧张，想着想着，我变得又害怕，又紧张！

排队的时候，我紧张地在原地踱步，突然看见一间教室里有几名“白衣战士”不知道，在给学生干什么？有几个学生从后门走出去，边走边擦眼泪。啊！他们一定非常痛苦吧？他们到底遭受了怎样的痛苦呢？走进教室，我的心“怦怦，怦怦”的打起鼓来，脚步也变得沉重了，不敢再往前移，真想打退堂鼓。

这时，一名“白衣战士”对我说：“小朋友，过来。”他那没有学生了，我坐在椅子上，张大嘴巴，只感觉喉咙痒痒的。不一会儿，“白衣战士”就说好了，耶，终于好了！我高兴地回到了教室，原来核酸检测就一下子，几秒钟而已，把嘴巴张大，说个“啊”字就结束了，而且一点也不疼！

我明白了一个道理：一些事情看起来很难，但只要勇敢去面对，就会发现这并没有自己想象中的那样可怕。

从十五号起，小区的广场上就总有一长条队伍，也不知到是干什么的。后来我才知道楼下在做核酸检测。

今天是周末，所以我还在床上睡懒觉。睡到了十点多才起来。我赶紧洗漱了一下就来吃早餐了。刚吃完早餐，我们就接到了爸爸的电话。“吴佳璇，赶紧叫妈妈他们准备准备，马上就要去做核酸检测了，快点换好衣服下楼吧!”我跟妈妈报告：“妈，爸爸叫我们下楼做核酸检测。”“那你先叫弟弟去换衣服，我马上好。”

我们做好了准备，拿上身份证就下楼了。在去核酸检测的路上，我问妈妈：

“妈，啥是核酸检测啊?”

“就是拿一根很长的棉签在你喉咙里转来转去。”

“那会不会把我弄吐吧!”

“有可能。”

听到这里，我有点害怕了，因为我以前一吐就要把胆汁也吐出来，嘴里还非常苦，所以我非常怕我吐。

我们来到“长龙”的“尾巴”那里，排了进去，后面还有人不断的排过来。队伍中的人们看上去很轻松的样子。我却表现得很沉重，因为我从来没有做过核酸检测。眼看我马上就要成为“龙头”了，因此，我非常紧张。我只好找吴佳烨(我的弟弟)玩“石头剪刀布”来缓解。我俩玩的很开心，一下就把紧张抛到了九霄云外。排着排着，我们来到了一个棚子底下妈妈在帮我们登记。我又开始紧张了：完了完了，马上要做核酸检测了我肯定要吐了，到时候可不要丢人啊!妈妈带着我们来到检测处，我拿着一个小瓶子，想着：它是干嘛的?难道是放样品的?还是抽血的?我来到了另一个棚子下，棚子下有一个医护人员，旁边有一个牌子，上面写着“二号检测处”。由于我害怕，就让弟弟先去检测。弟弟出于好奇，就真的走过去检查，没有犹豫一下。只见医务人员拿出了一根比普通棉签长两倍的棉签伸到弟弟嘴里搅，然后又拿出来，把它放在小瓶子里，然后把它弄断。我看弟弟一下就做完了，我也去做。也就是把棉签伸到喉咙里转。然后就是喉咙有点干。

其实核酸检测也不是很恐怖，只不过是我的心理作用而已……

PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。下面是我整理的关于pcr技术论文，希望你能从中得到感悟!

技术的研究进展

摘要 PCR技术是一种体外酶促合成、扩增特定DNA片段的方法。因其高强的特异性和灵敏度以及检测速度快、准确性好等优点，已被广泛地应用于水产、微生物检测等许多领域。该文从PCR技术的原理及应用方面进行了综述，并对其发展做出了展望。

关键词 PCR技术;研究进展;应用

中图分类号 Q819 文献标识码 A 文章编号 1007-5739(2012)10-0047-02

PCR(polymerase chain reaction，PCR)即聚合酶链式反应，它是一种体外酶促合成，扩增特定DNA片段的方法。1985年，美国Karray等学者首创了PCR技术，并由美国Cetus公司开发研制[1]。随着科学技术的发展和突破，PCR技术已在多个领域得到广泛地应用，如微生物检测、兽医学、水产养殖等方面。由于该技术具有较强的灵敏度、准确度和特异性，又能快速进行检测，因而其应用领域也在不断延伸[2-3]。随着PCR技术的不断发展，在常规PCR技术的基础上又衍生出了许多技术，如多重PCR(mutiplex PCR)技术[4]、实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR，FQ-PCR)技术[5]、单分子PCR技术[6]。

1 PCR技术原理

PCR技术是根据待扩增的已知DNA片段序列、人工合成与该DNA 2条链末端互补的2段寡核苷酸引物，在体外将待检DNA序列(模板)在酶促作用下进行扩增。PCR的整个技术过程经若干个循环组成，一个循环包括连续的3个步骤：第1步是高温条件下的DNA模板变性，即模板DNA在93~94 ℃的条件下变性解链;第2步是退火，即人工合成的2个寡核苷酸引物与模板DNA链3’端经降温至55 ℃退火;第3步是延伸，即在4种dNTP底物同时存在的情况下，借助TaqDNA聚合酶的作用，引物链将沿着5’-3’方向延伸与模板互补的新链[7]。经过这个循环后，合成了新链，可将其作为DNA模板继续反应，由此循环进行。循环进程中，扩增产物的量以指数级方式增加，一般单一拷贝的基因循环25~30次，DNA可扩增l00万~200万倍[1]。PCR反应的步骤很简单，但是具体的操作是复杂的，如退火温度的确定、延伸时间的长短以及循环数等。因此，不同的反应体系应该确定适当的反应条件，以避免假阴性或假阳性等情况的产生。

2 PCR技术的分类

在传统PCR技术的基础上，根据人们的需要以及各个领域的应用要求，又衍生出很多种类的PCR技术。新技术在各领域广泛应用并逐渐改进，为进一步的研究提供了基础。

2.1 实时荧光定量PCR技术

1996年，学者经过研究，在传统PCR技术的基础上，首创了实时荧光定量PCR技术，新技术已经应用至医学领域、分子生物学和其他基础研究领域。实时荧光定量PCR技术基于传统技术的优势，还具有实时性、准确性、无污染，实现了自动化操作和多重反应，是PCR技术研究史上从定性到定量的飞跃[8]。

荧光定量PCR技术最大的特点是能将荧光基团加入到PCR反应体系中，借助于荧光信号，累积实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析[9]。实时监测这一特点是常规PCR技术所不具有的，因为其对扩增反应不能进行随时的检测。常规PCR技术的扩增终产物需要在凝胶电泳等条件下才能进行，无法对起始模板进行准确的定量，而荧光定量PCR技术的反应进程可以根据荧光信号的变化做出准确的判断[10-11]。一个PCR循环反应结束之后，定量PCR仪可以收集1个荧光强度信号，荧光信号强度的变化可以反映产物量的变化情况，这样就可以得到1条荧光扩增曲线[12]。荧光信号在指数扩增阶段，PCR产物荧光信号的对数值与起始模板量之间存在线性对应关系，然后进行定量分析[13]。

2.2 多重PCR技术

多重PCR(mutiplex PCR)技术是PCR技术的一种，为同一管中加入多对特异性引物，与PCR管内的多个模板反应，在一个PCR管中同时检测多个目标DNA分子。多重PCR技术可以扩增一个物种的一个片段，也可以同时扩增多个物种的不同片段[14]。

在同一反应体系中，多重PCR技术进行多个位点的特异性扩增时，引物间的配对、引物间的竞争性扩增等会对扩增效果产生重要影响。一方面，如果能选择适宜的反应体系和反应条件，可极大地提高多重PCR的扩增效果[15]。主要包括退火温度、退火及延伸时间、PCR缓冲液成分、dNTP的用量、引物及模板的量等。另一方面，DNA的抽提质量也影响多重PCR扩增效率，如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果[16]。

2.3 单分子PCR技术(SM-PCR)

单分子PCR技术是在传统PCR技术的基础上发展的，基本循环过程相同，但在反应条件、模板数量、DNA 聚合酶选择、引物设计方面具有不同点。该技术是以少量或单个DNA分子为模板进行的PCR[17]。

单分子PCR技术反应中，DNA 模板浓度极低，这就要求模板有较高的质量。因为这是试验成败的决定性因素。在设计引物时，应该严格控制GC的含量和Tm值，同时尽量避免引物间存在可配对序列。在反应混合物模板数极低的情况下，若引物之间存在少量配对序列，扩增时极易形成二聚体，使反应无法进行，得不到所需要的产物[18]。由于单分子PCR技术反应的变性温度(96~98 ℃)大多比常规PCR技术(94 ℃)略高，因而对DNA 聚合酶热稳定性的要求也更加严格，需要有较好的热稳定性，以防止温度过高而使其失活。其变性时间(5~15 s)、退火时间及延伸时间也短于常规PCR技术[17]。

3 PCR技术的应用

3.1 PCR技术在水产上的应用

基因表达是检测某个基因在不同发育期或不同组织中的表达量变化，或受到某种试验处理过程中的影响而出现表达量变化的情况。有学者应用real-time PCR技术研究碳水化合物含量对翘嘴红鲴糖代谢酶G6Pase、GK以及PEPCK表达量的影响[19-21]，研究结果可为翘嘴红鲴饲料配方中的最合适糖含量提供理论依据。孙淑娜等[22]研究叶酸拮抗剂对斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2表达的影响，表明叶酸拮抗剂对早期胚胎的心脏发育影响较大，可导致斑马鱼心脏发育延迟及心脏形态异常，并下调斑马鱼心脏发育相关基因BMP2b及HAS2的表达，这可能是叶酸生物学活性受抑后导致心脏发育异常的机制之一。Sawyer et al[23]以斑马鱼的未受精卵、胚胎、仔鱼和成鱼为研究材料，采用实时荧光定量PCR技术，检测了P450aromA和P450aromB在不同组织的表达量，表明在各组织中均有2种基因的表达，但表达量显著不同，呈现组织特异性。

3.2 PCR技术在微生物检测上的应用

1990年，Bej et al[24]在利用多重PCR的方法检测了Leg-ionella类菌种和大肠类细菌，其结果是通过点对点方法固定的多聚dT尾捕捉探针和生物素标记的扩增DNA进行杂交来检测的。张志东等检测口蹄疫病毒(FMDV)持续性感染的带毒动物，表明实时荧光定量PCR技术具有快速检测、准确、客观等优势，较优于传统的检测方法[25-26]。Metzger-Boddien et al[27]对PCR-ELISA的方法进行了评价，结果显示，样品中沙门氏菌的检出率可以达到98%。

4 展望

传统PCR技术以及衍生出来的新型PCR技术自面世以来，已被广泛应用到生命科学的各个领域。随着技术方法的不断改进与完善，荧光定量PCR技术将会逐渐完善并广泛应用。多重PCR技术在食品病原微生物、非致病微生物及环境微生物检测中具有重要作用;未来的研究主要集中在去除食品抑制因子干扰、改进样品前处理技术等方面，其次是整合应用多重PCR与其他技术，必将在未来食品微生物检测中有非常好的应用前景。

5 参考文献

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要在人们的居住点多设置几个核酸检测点，保证人们在生活和上班路上都能够就近进行核酸检测，对与核酸检测的设置时间点也要考虑到人们上班下班的时间，尽量能够让人们在保证正常生活和工作的条件下，完成常态化的核酸检测工作。