蔬菜中链球菌检测论文

MM_FS_CNJ_0352出口食品 B群链球菌 CAMP试验法MM_FS_CNJ_0352出口食品中B群链球菌检验方法1.适用范围本方法适用于出口肉类、奶和奶制口中B群链球菌的检验。其他食品可参照使用。2.主要试剂和仪器2.1.主要试剂(包括培养基)Todd,Hewitt肉汤〔参见附录A(补充件)A1〕;牛心汤培养基〔参见附录A(补充件)A2〕;牛心汤增菌培养基〔参见附录A(补充件)A3〕;选择性牛心汤琼脂〔参见附录A(补充件)A4〕;绵羊血琼脂平板〔参见附录A(补充件)A5〕;β-溶血素带〔参见附录A(补充件)A6〕;溶血素带〔参见附录A(补充件)A7〕; β-绵羊血球〔参见附录A(补充件)A8〕;生理盐水:灭菌的0.85,NaCl;(补充件)A9〕; 革兰氏染色液〔参见附录A接触酶(过氧化氢酶)试验〔参见附录B(补充件)〕。2.2.仪器离心机5000r,min，离心管50mL，10mL;蔡氏滤器;微孔滤膜，孔径0.45μm;玻璃抽滤瓶;玻璃水循环真空泵;电热恒温箱;温度20,60?;显微镜;定性滤纸;不锈钢厌氧菌培养罐;电冰箱;乳钵、研棒或均质器;L形玻璃棒;金黄色葡萄球菌菌体ATCC,25923。3.样品的制备3.1.肉类3.1.1.冷冻产品应在2,5?过夜解冻，或在45?及以下经15min解冻，立即检验。若不能及时检验，应置于,15?左右暂存。其他非冷冻易腐的食品，亦应置于4?冰箱保存。3.1.2.以无菌操作称取剪碎的肉类样品25g，置于灭菌之乳钵内或均质杯内，加入25mL灭菌生理盐水进行研磨或均质(8000,10000r,min，均质1min)，移1/5页入盛200mL生理盐水的5000mL广口瓶内，混合均匀，制成1?10稀释液。3.2.奶和奶制品类3.2.1.鲜奶、酸奶:以无菌手续去掉瓶罩纸盖，瓶口经火焰灭菌后，用无菌操作吸取25mL检样，放入装有225mL灭菌生理盐水的三角烧瓶内，振摇均匀。3.2.2.奶粉:以无菌手续开封取样，称取25g放入盛有225mL温热的灭菌生理盐水且装有适量玻璃珠的灭菌广口瓶内，振摇使其充分溶解混匀。3.2.3.奶酪:先用灭菌刀削去部分表面封蜡，然后用点燃的酒精棉球灭菌表面后，用灭菌刀切开奶酪，再用无菌操作切取表层和深层检样25g，置于灭菌乳钵内切碎，加入25mL生理盐水研成糊状，移入盛有200mL灭菌生理盐水的广口瓶内，混合均匀。制成1?10的稀释液。3.3.其他食品样品的制备取决于食品的种类和状态。固体或半固体食品按3.1.2或3.2.3进行。液体食品按4.2.1进行。4.过程简述.1.增菌培养 4将上述制备的检样各取10mL分别接种于100mL牛心汤培养基内，如检样污染较严重，可同时按上述量接种于选择性牛心汤增菌液内，经35?1?培养15h，-带或CAMP-点试验。 再进行CAMP4.2.CAMP试验的条件?1?培将CAMP试验的绵羊血琼脂平板置于不锈钢厌氧菌培养罐内，在35养。4.3.CAMP-带试验取β-溶血素带1,2条平行轻贴于绵羊血琼脂平板上，间距20mm，将样品或经过增菌的培养物直接在β-溶血素带两侧(相距3,5mm)处垂直划线3,4条或涂布接种，经14,18h培养后观察结果。如在接种线与β-溶血素带周围朦胧溶血区重叠处能见到协同产生清晰的“箭头”状的增强溶血区为阳性反应，可鉴定为B群链球菌。不见增强溶血为阴性反应，判为B群链球菌阴性。4.4.CAMP-点试验将样品或经过增菌的培养物直接划线或用L形玻璃棒涂布接种于绵羊血琼脂平板上，经14,18h培养后，用接种环取β-溶血素滴加在圆形突起，细小的可疑为链球菌的单个菌落边缘，再将平板进行孵育，分别在30，45，60min检查溶血变化情况。在滴加β-溶血素的菌落边缘有协同产生“扇形”增强溶血区的为阳性反应，可鉴定为B群链球菌。不出现增强溶血现象的为阴性反应，判为非B群链球菌。每次检验时都要用已知阳性菌株作为对照试验。 4.5.CAMP-带或CAMP-点试验阳性反应，再进行革兰氏染色，镜检和接触酶试验，以此来与其他溶血性细菌如李斯特氏菌，肉毒梭状芽胞杆菌和葡萄球菌等区别开。

油菜中有丰富的维生素和铁元素。显著功效：抗高血压 花菜中含有的维生素C是芹菜的15倍，西红柿的8倍，大白菜的4倍。显著功效：防癌抗癌 芹菜中含有丰富的维生素C，铁以及植物纤维素。显著功效：天然降压药 萝卜含有大量的维生素A,C和一种糖化酵素。显著功效：排气顺毒的良药 胡萝卜含有丰富的维生素A。显著功效：保健“小人参” 空心菜性微寒，味甘，对金黄色葡萄糖球菌，链球菌等有抑制作用，可清热解毒，凉血止血。主要功效：清热解毒圣手 卷心菜含有丰富的钙。主要功效：壮骨的蔬菜 茼蒿含有较多胡萝卜素，可以养心安神，稳定情绪，更含有丰富的维生素A。另外含有特殊香味，能消食开胃，促进食欲。主要功效：养心开胃 生菜性干凉，味甘甜微苦，茎叶含有莴苣素，可镇痛止痛，清热提神。主要功效：清热提神 西红柿含大量的维生素C和一定量的维生素A。主要功效：眼睛的保护神 辣椒含有一种叫番辣椒素的物质，可降低胆固醇。主要功效：杀菌 土豆中含有丰富的钾，在蛋白质价值和保健功能上比黄豆还高，含有人体所需碳水化合物，维生素B，维生素C，钙，镁等，主要功效：地下“苹果” 芦蒿对心脏病，动脉硬化，低钾症和缺钠，镁症等有显著的理疗功效。主要功效：“高档保健蔬菜” 竹笋性寒，可清热解毒，含有高纤维素，脂肪和糖的含量很低。主要功效：“素菜第一品” 莴笋含有丰富的烟酸，含钾量较高，还含有大量纤维素。主要功效：糖尿病的克星 冬瓜不含脂肪，碳水化物含量少，热量低，含有丙醇二酸，可防止人发胖。主要功效：最佳减肥蔬菜 南瓜能防止血管动脉硬化，具有防癌功效，还可调节糖代谢，增强肌体免疫力，含有丰富的不饱和脂肪酸。主要功效：最佳美容食品 黄瓜很有非常娇嫩的纤维素。主要功效：厨房里的美容剂 茄子含黄酮类化合物，具有抗氧化功能，还含有丰富的粗纤维，可增加胃肠蠕动。主要功效：保护血管和心脏 莲藕中含有丰富的维生素K，有收缩血管和止血的功效，还含有一定量的维生素c和食物纤维和铁元素。主要功效：干爽可口的瘦身蔬菜 洋葱含有一种特殊物质-烯丙基二硫化物以及少量硫氨基酸，可降脂。洋葱还含激活纤溶蛋白的活性成分，具有舒张血管功能；具有杀菌功能，帮助防治流行感冒；含有微量元素硒以及维生素C和胡萝卜素，可抗氧化;含抗衰老物质，可延缓衰老。主要功效：蔬菜皇后 金针菜含有丰富的钙，磷，钾，维生素，胡萝卜素等，具有清脑健脑，抗衰老功能。主要功效：上好的“健脑菜“ 苦瓜是去火圣品，主要功效：去火泄热 豌豆含有大量粗纤维，丰富维生素A原，且是很好的护脑食物。主要功效：脑力劳动者的理想补品 豇豆含有丰富的膳食纤维，丰富的维生素C，其含有的磷脂可促进胰岛素分泌，参加糖代谢。主要功效“糖尿病人的理想食品” 蚕豆含有丰富的碳水化合物，优质蛋白质，磷脂，丙胺脂和酪氨酸，性味甘平，能益气健脾。主要功效：益气健脾的好食物 红薯含有大量的钙和镁，含有独特的生物类黄酮成分和膳食纤维，主要功效：可以当作主食的蔬菜 平菇中的蛋白多醣体对癌细胞有很强的抑制作用。主要功效：抗癌的良药 金针菇含有丰富的锌元素，促进智力发育，健脑，称“益智菇”金针菇还是高钾低钠食品，含朴菇素与糖蛋白，膳食纤维主要功效：丰富的蛋白质库 香菇含有丰富的维生素D，有助与骨骼和牙齿的发育；香菇中有嘌呤，胆碱，酪氨酸，氧化酶以及某些核酸物质，可以有效预防和治疗胆固醇和高血压；香菇中的蘑菇核糖酸可以刺激人体产生干扰素，消灭人体内的病毒;香菇中还含有丰富的钙，磷，铁，钾等无机盐,有较好的保健作用；香菇中含有的微量元素及丰富的维生素B2，维生素D及维生素A原，是美容养颜护发养发的好原料。主要功效：菌类中的“灵芝草” 黑木耳具有排毒解毒，凝血止血的功效。黑木耳中富含铁元素，经常使用可防缺铁性贫血，并能养血驻颜；黑木耳中的维生素K能减少血液凝结成块，预防脑血栓；其内含有胶质，有清胃肠的作用；另外黑木耳对胆结石，肾结石等内源性异物有比较显著的化解作用，还可防癌抗癌。主要功效：营养丰富的“菌中之花” 海带含有大量的碘，有降血脂，降血压，降低血清胆固醇，加快胆固醇的代谢和排出，预防动脉硬化的作用，还有美容作用。主要功效：含碘之冠 紫菜含较多甘露醇，具有利尿作用和消水肿的作用；富含硒元素，有利于预防大肠癌。主要功效：微量元素的宝库 豆腐含有白酶抑制素，及春六磷酸酶，植物固醇，皂苷以及异黄酮，这些物质都是抗癌尖兵，所以豆腐有显著的预防癌症作用;豆腐中含特殊物质抑制黑色素的合成。主要功效：肌肤美白的好食物 苹果中含有维生素C，可保护血管，预防心脏病。苹果中含铁丰富，有益补血；含有丰富的糖类，维生素，和影响记忆的元素锌。主要功效:记忆之果 梨属寒性水果，味甘中稍带酸，能清内热，清除上火，具有清心润肺的作用；梨中含有大量的水分和均衡的电解质，发烧病人和脱水患者服用梨汁，可以快速平衡电解质。主要功效:天然矿泉水 香蕉含有泛酸等成分，可以有效减轻心理压力，解除忧郁，令人快乐开心。香蕉中含有5-羟色胺，可以保护胃粘膜；富含维生素A，有效维护皮肤毛发；富含钾元素，有明显降血压的功效；富含膳食纤维，可预防便秘 葡萄含有丰富的铁质，有补血作用；葡萄中的果糖和葡萄糖含量丰富，可补充热量；葡萄中含的类黄酮可抵抗衰老；另外，葡萄中含有番茄红素，多吃可增加男性精子数量，对原因不明的不育症有较好的效果。主要功效：补血良果 桃中含铁丰富，在水果中居首位，含果胶可预防便秘，含钠少，含钾多，多治疗肺病有非常好的效果。主要效果：天下第一果 苦杏仁能止咳平喘，润肺通便可治疗肺病，咳嗽等疾病。而甜杏仁和干果杏仁偏于滋润，有一定的补肺作用。杏中含黄酮类物质较多，可预防心脏病。杏有很强的抗癌作用，因为它富有维生素B17，而维生素B17又是极有效的抗癌物质。杏中还富含维生素C和多酚类成分。主要功效：不含脂肪的低热量水果 荔枝性温和甘酸，有补脑健身，开胃理气，益血生津，促进食欲等功效。主要功效：健美养颜 西瓜富含维生素C有助于保护肝脏；富含丰富的糖和盐，有助于利尿；有明显的解酒解毒作用。主要功效：消夏解渴 草莓中有一种胺类物质，可预防白血病；含鞣酸，可防癌；含有果胶和丰富的膳食纤维；还含有较丰富的胡萝卜素。主要功效：果中皇后 樱桃含铁特别高，位居各水果之首；富含果胶，可降低血糖；除含丰富的维生素，还含有花色素，花青素，红色素等多种生物素，有止痛消炎的效果。主要功效：含铁之冠 猕猴桃含的粗纤维和膳食纤维是生食水果中最高的，对高血压，高血脂及冠心病均有防治效果；富含大量的维生素C和蛋白酶；其中的血清具有稳定情绪，镇静心情的作用。主要功效：维C之王 山楂的含钙量食各种水果中最高的，不仅可以增强食欲，改善睡眠，保持骨和血中钙的稳定，还能预防动脉粥样硬化。山楂中含有三萜类和黄酮类成分，能加强和调节心率;山楂中含有不饱和酸，能起到软化血管，降血脂，降血压，降胆固醇的作用；山楂含有可溶性纤维，有利于保持餐后血糖的平衡。主要功效：含钙量高的长寿水果 石榴含有多种生物碱，具有光谱抗菌作用；含有熊果酸，具有明显的收敛作用，能够涩肠止血；石榴汁是有效的抗氧化果汁，能抵抗心血管疾病；石榴汁的多酚含量比绿茶高的多，是抗衰老和防治癌症的上好水果。主要功效：九州奇果 菠萝性味甘平，具有健胃消食，解热，利尿，解酒，消暑，降血压，抗癌，补脾止泻，清胃解渴等功效。主要功效：清香四溢的热带水果 哈密瓜性质偏寒，有清凉消暑，生津止渴的作用，是夏季解暑除烦热的佳品；哈有疗饥，利便，益气，清肺热止咳的功效；食用哈密瓜对人体造血机能有显著的促进作用。主要功效：瓜中之王 木瓜富含17种以上的氨基酸及多种营养元素，能抗菌消炎，舒筋活络，祛风止痛消肿；所含的齐墩果成分，有护肝降酶，抗菌消炎，降低血脂等功效；独有的番木瓜碱具有抗肿瘤功效；其中的维生素C含量非常高，是苹果的48倍，具有平肝和胃，舒筋活络，抗衰养颜，增强体质的功效；所含的木瓜酶对乳腺发育很有助益，有催奶效果。主要功效：万寿瓜 大枣中含有一种叫芦丁的物质，可以软化血管，防治高血压；含有的抗过敏物质-环磷酸腺苷，能阻止过敏症状的发生；富含维生素C，是柑橘的20倍，是苹果，犁的100倍左右，大枣中所含的维生素P，维生素E等也居百果之冠。主要功效：天然维生素丸 柑橘所含营养成分以维生素C和维生素P为主，可有效预防高血压和防治脑溢血；纤维含量高，可润肠通便；鲜橘汁能够有效抑制和阻断癌细胞的生长。主要功效；高纤维含量的水果 核桃中含有丰富的亚油酸和不饱和脂肪酸，能防止胆结石的形成；核桃仁有顺气补血，止咳化痰，润肺补肾等功能；其中丰富的蛋白质，维生素和矿物质，对人体有较高的保健作用；核桃富含不饱和脂肪酸，磷脂，蛋白质等多种营养元素，对胚儿胚胎的脑发育非常有利。主要功效：营养丰富的益智果。 这样回答希望你能满意采纳哦

食品中链球菌检测方法？1、范围本标准规定了食品中溶血性链球菌的检验方法。本标准适用于各类食品和食物中毒样品中溶血性链球菌的检验，2、规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单〔不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准．GB/T4789.28一2003食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂3、设备和材料3.1冰箱：O℃——4℃。3.2恒温培养箱：36℃士1℃。3.3恒温水浴锅：36℃土1℃。3.4显微镜：10*～l00*。3.5均质器或灭菌乳钵。3.6离心机：4000r/min。3.7架盘药物天平：0g——5009，精确至0.5g。3.8灭菌试管：10mm*100mm、l6mm*160mm。3.9灭菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、5mL、10mL（具0.1mL刻度）。3.10灭菌锥形瓶：100mL。3.11灭菌培养皿：直径90mm。3.12灭菌棉签、镊子等。4、培养基和试剂4.1葡萄糖肉浸液肉汤：按GB/T4789.28一2003中4.1规定。在肉浸液肉汤内加人1％葡萄糖。4.2肉浸液肉汤：按GB/T4789.28一2003中4.1规定。4.3匹克氏肉汤：按GB/T4789.28一2003中4.62规定。4.4血琼脂平板：按GB/T4789.28一2003中4.6规定。4.5人血浆。4.6 0.25%氯化钙。4.7 0.85％灭菌生理盐水。4.8杆菌肤药敏纸片（含0.04单位）。5、操作步骤5.1样品处理按无菌操作称取食品检样25g（ml)，加人225mL灭菌生理盐水，研成匀浆制成混悬液。5.2培养将上述混悬液吸取5ml，接种于50ml工葡萄糖肉浸液肉汤，或直接划线接种于血平板。如检样污染严重，可同时按上述量接种匹克氏肉汤，经36℃ 土l℃ 培养24h接种血平板，置36℃ 士1℃ 培养24h,挑起乙型血圆形突起的细小菌落，在血平板上分纯，然后观察溶血情况及革兰氏染色，并进行链激酶试验及杆菌肤敏感试验。5.3形态与染色本菌里球形或卵圆形，直径0.5um ——1um链排列，链长短不一，颊者4个～8个细胞组成，长者20个一30个，链的长短常与细菌的种类及生长环境有关；液体培养中易呈长链；在固体培养基中常呈短链，不形成芽抱，无鞭毛，不能运动。5.4培养特性该菌营养要求较高，在普通培养纂上生长不良，在加有血液、血清培养荃中生长较好。溶血性链球菌在血清肉汤中生长时管底呈絮状或颗粒状沉淀。血平板上菌落为灰白色，半透明或不透明，表面光滑，有乳光，直径约0.5mm～0.75mm，为圆形突起的细小菌落，乙型溶血链球菌周围有2mm—4mm。界限分明、无色透明的溶血圈。5.5链激酶试验致病性乙型溶血性链球菌能产生链激酶（即溶纤维蛋白酶），此酶能激活正常人体血液中的血浆蛋白酶原，使成血浆蛋白酶，而后溶解纤维蛋白。吸取草酸钾血浆0.2ml，加0.8ml灭菌生理盐水，混匀，再加人18h～24卜、36℃ 士1℃ 培的链球菌培养物0.5 m及0.25％氯化钙0.25ml（如氯化钙已潮解，可适当加大至0.3%——0.35 %)振荡摇匀，置于36℃ 士1℃ 水中10min，血浆混合物自行凝固（凝固程度至试管倒置，内容物不流动），然后观察凝固块重新完全溶解的时间，完全溶解为阳性，如24h后不溶解即为阴性。草酸钾人血浆配制：草酸钾0.01g放人灭菌小试管中，再加人5ml血，混匀，经离心沉淀，吸取上清液即为草酸钾人血浆。5.6杆菌肚敏感试验挑取乙型溶血性链球菌液，涂布子血平板上，用灭菌镊子夹取每片含有。．04单位的杆菌肤纸片，放于上述平板上，于36℃ 士1℃ 培养18h—24h，如有抑菌带出现即为阳性，同时用已知阳性菌株作为对照。