水里漂浮的雨
与传统多色流式实验一样,质谱流式同样需要「烧脑」考虑配色(panel design),在实验前「步步精心」,正所谓一步错,步步错,策划周全的实验方案是获得有效数据的关键。下面就让我们一起揭秘质谱流式,文末更有CyTOF / Luminex 多重检测技术交流会,现场体会质谱流式的魅力。
了解更多质谱流式原理,请查看:质谱流式,一个富二代的自白
特色同位素标记
质谱流式相对于传统流式技术的主要差异在于使用金属元素及其同位素作为抗体标签,目前用作标签的主要有稀土元素、惰性元素、后过渡金属和卤素,这些元素在细胞内含量少,不会引起高背景,也不会影响细胞正常的生理功能,目前用作质谱流式标签的主要同位素如下图所示:
通过这些标签标记的抗体,可以检测细胞相关生物标志物的表达及修饰、细胞活性、细胞功能及细胞周期等。
相较传统流式而言,质谱流式技术中相邻通道的干扰已经降低了很多,然而溢漏现象依然存在,主要由以下几个原因导致:
①.同位素纯度不够(Impurities)。
②. M ± 1,是指相邻通道的溢漏,被称为丰度灵敏度(Abundance Sensitivity),简单说就是质量为M的峰的拖尾,在M + 1和M – 1质量上的信号干扰。
③. M + 16,是指同位素氧化导致的干扰(Oxidation)。如轻镧系元素(139~160 AMU)因为氧化物的形成,导致了对重镧系元素(155~176 AMU)通道产生干扰,目前通过实验体系的优化,最容易氧化的镧系元素同位素的干扰降低到以下。89Y,102Pd,104Pd,105Pd,106Pd,108Pd,110Pd,113In,115In,和209Bi同位素不会产生氧化干扰,也不会对轻、重镧系元素产生氧化干扰。
(A)质谱流式技术干扰信号源示意图[1]
Chevrier S 等使用单染微球计算出通道间溢漏的矩阵,可作为通道选择的参考,如图B 所示:
(B)基于单染微珠计算的溢漏矩阵。对角线上的值是1。默认情况下,溢漏只计算潜在受影响的通道,包括M ± 1,对应已知同位素纯度,M + 16。小格中的数字表示行中的元素溢漏到列中通道的百分比。最后一列中的数字表示在相应通道中接收到的溢漏信号总量。
Panel Design 基本策略
同传统流式一样,针对不同表达丰度的标志物,也遵循「强弱搭配」原则,即表达丰度高的标志物选择较低或中等灵敏度的同位素标签;表达丰度低的标志物选择高灵敏度的同位素标签。
表达丰度低或未知的抗原:
表达丰度高的抗原:
此外,还可以遵循以下规则:
①. 互斥抗原(如CD4 和CD8)可以安排在有干扰的通道。
②.共表达抗原(如CD3和CD4)安排在互不干扰的通道。如果无法避免,可以安排下级(如CD4)影响上级通道(如CD3)。
③.设置完善的对照。除实验必需对照外,可以设置Mass-minus-one (MMO) controls,类似传统流式的FMO(荧光减一对照),以此判断通道的干扰。
④.区分单细胞群和活细胞群。质谱流式仪无FSC / SSC参数来区分细胞,因此常使用铱(iridium)或铑(rhodium)的同位素作为核酸嵌入剂,根据DNA含量来识别整体细胞群、区分粘连体和碎片。化学治疗剂顺铂(铂)能够和有损伤的细胞膜共价结合,常被用来区分死活细胞。
技术大咖面对面
由Bio-Techne 主办的「2019 CyTOF / Luminex 多重检测技术交流会」将在深圳举行,邀请您与质谱流式及Luminex 多重检测技术专家面对面,探讨其技术原理、实验设计及最新应用。
一、讲师风采
二、日程安排
三、时间地点
四、报名咨询
文章来源:Bio-Techne 图片来源:Bio-Techne、站酷海洛 题图来源:站酷海洛 Image byGerd AltmannfromPixabay
阳光小暖哈
医学在我们的生活中有着必要的存在,医学 毕业 论文涵盖基础医学、临床医学、中医学以及其他相关学科。下面我给大家带来2021医学毕业论文题目选题推荐,希望能帮助到大家!
医学检验论文题目
1、医学检验和卫生检验与检疫专业学生学习风格的研究
2、分子生物学技术在医学检验中的有效应用
3、国际化视野下医学检验技术专业建设的探讨
4、医学检验知识的图谱构建与应用
5、关于医学检验实践教学的思考
6、 创新思维 和问题意识在医学检验教学中的培养
7、大数据背景下医学检验技术专业教学模式变革
8、基于双创能力培养的医学检验专业课程体系改革研究
9、不同实习教学模式对医学检验专业课程教学的影响
10、医学检验进展与临床应用研究
11、项目导向教学法在医学检验实习生临床实习中的应用
12、临床医学检验技术质量管理中存在的问题及对策
13、浅析医学检验临床技术的提高
14、分子生物学技术在医学检验中的应用进展
15、影响医学检验分析质量因素的探究
16、医学检验高职生血细胞形态学检验综合学习模式的构建
17、第三方医学检验公司在县级市场的营销策略分析研究
18、浅谈医学检验危急值 报告 制度的建立
19、医学检验青年教师担任兼职班主任的探索
20、探讨医学检验面临的生物安全问题
21、循证检验医学结合PBL教学在医学检验实践带教中的应用研究
22、医学检验专业实践教学体系的建立与实践
23、临床医学检验质量控制的影响因素探讨及应对 措施 探讨
24、信息化背景下的高职医学检验专业生物化学实验课程改革探索
25、基于信息技术的教学模式在医学检验类专业课程应用效果分析
26、整合信息化教学策略在医学检验教学中的应用与实践
27、我国区域医学检验中心的发展现状与挑战
28、基于转化医学理念的医学检验专业实习带教模式探索
29、信息化在医学检验实训教学中的应用
30、输血科医学检验专业学生实习教学的改革与实践
31、教学医院医学检验进修生带教模式探讨
32、高职高专医学检验技能竞赛备赛水平提升探索
33、影响医学检验分析质量因素的探究
34、医学职业终身 教育 技能培训 方法 的研究--以医学检验为例
35、医学检验实验教学信息化平台建设的探讨
36、医学检验质量控制中出现的问题及解决方法
37、临床医学检验中影响血液细胞检测质量的有关因素及其控制方法研究
38、临床医学检验中血液细胞检验的质量控制方法探究
39、独立学院医学检验技术专业分析化学教学新途径的探索
40、流式细胞术应用于医学检验的研究进展
医学毕业论文题目参考
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12、菌毒清颗粒治疗风热感冒的临床疗效观察
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37、丹鳖胶囊的临床疗效观察
38、拔罐辅助治疗肥胖型2型糖尿病临床疗效观察
39、体外超声波碎石治疗输尿管结石的临床疗效观察
40、CO2激光治疗丝状疣的临床疗效观察
41、低温等离子射频消融治疗儿童腺样体肥大临床疗效观察
42、万应理伤膏临床疗效观察
43、卵巢癌化疗的临床疗效观察
44、金因肽治疗50例日光性皮炎临床疗效观察
45、复方丹参滴丸联合阿司匹林肠溶片治疗168例脑卒中的临床疗效观察
46、胆宁片治疗黄疸型病毒性肝炎的临床疗效观察
47、综合疗法治疗神经根型颈椎病的临床疗效观察
48、微管人流与药物流产临床疗效观察
49、参杉癌康汤Ⅱ号治疗原发性肝癌的临床疗效观察
50、益气活血汤用于冠心病心绞痛的临床疗效观察
医学检验免疫毕业论文题目
1、基于纳米颗粒的分子展示应用于超灵敏检测
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12、乙型肝炎表面抗原胶体金免疫层析法血清快速测定的性能评估
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14、长江三角洲地区犬猫皮肤真菌病调查及体外药敏试验
15、我国医学检验本科专业人才培养的问题与对策研究
16、基于电化学分子信标基因传感技术的HIV-1核酸检测新方法研究
17、Free β-hCG和PAPPA光激化学发光免疫分析试剂的研制
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19、阿托伐他汀对动脉粥样硬化患者外周血中PPAR γ的作用研究及相关炎症因子与动脉粥样硬化关系的建模分析
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21、全自动多功能免疫检验过程关键问题的优化研究
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26、高血压病证型与血清褪黑色素水平的相关性研究
27、医用臭氧与α-干扰素对照治疗慢性乙型病毒性肝炎
28、网织血小板在系统性红斑狼疮患者的临床应用
29、G公司第三方独立医学实验室服务营销策略研究
30、临床毛细管电泳的研究
31、基于光电检测与信息处理技术的纳米金免疫层析试条定量测试的研究
32、贫铀长期作用后的吸收分布特点及其主要蓄积器官的损伤效应研究
33、基于磁性微球的PMMA微流控免疫分析芯片系统的研究
34、hr HPV、L1壳蛋白、p16蛋白与宫颈病变的关系及诊断价值研究
35、76例急性白血病的MICM分型及预后
36、国产化学发光法诊断系统检测乙肝表面抗原的评价
37、蛋白A-藻蓝蛋白β亚基双功能蛋白的性质及其在免疫检测中的应用
38、上海市社区卫生服务中心检验开展现状及检验项目合理化设置研究
39、__医学检验集团发展战略研究
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dyanne1987
医学论文写作提纲
医学,是通过科学或技术的手段处理人体的各种疾病或病变的学科,对它的研究更利与社会的发展。
摘要 4-7
Abstract 7-10
英文缩略词 11-12
目录 12-14
前言 14-16
第一章 氧化应激模型的建立 16-29
引言 16-17
第一节 实验方法 17-20
1 仪器与材料 17-18
2 N2a细胞的培养 18-19
3 氧化应激模型的建立 19-20
4 在光学显微镜下观察细胞之形态 20
第二节 实验结果 20-26
1 不同浓度过氧化氢对N2a细胞作用相同时间的结果 20-24
3 80μM过氧化氢氧化损伤N2a细胞不同时间的形态变化 24-26
第三节 讨论 26-28
第四节 结论 28-29
第二章 氧化应激状态下CDK1对caspase-2活性及高尔基体形态的.影响 29-51
引言 29-30
第一节 实验方法 30-38
1 仪器与材料 30-31
2 N2a细胞培养 31
3 流式细胞术及Hoechst染色检测细胞凋亡情况 31-33
4 Western blot检测caspase-2的表达 33-36
5 分光光度法检测caspase-2活性 36-37
6 免疫荧光观察高尔基体形态 37-38
7 统计学分析 38
第二节 实验结果 38-46
1 抑制CDK1活性对氧化应激中N2a细胞凋亡率的影响 38-40
2 Caspase-2的表达及活性的变化 40-41
3 免疫荧光观察高尔基体形态 41-45
4 Hoechst染色观察细胞核 45-46
第三节 讨论 46-50
1 高尔基体应激 46
2 CDK1对氧化应激中N2a细胞损伤的影响 46-47
3 CDK1对高尔基体形态的影响 47
4 CDK1与caspase-2活性的关系 47-48
5 总结 48-50
第四节 结论 50-51
参考文献 51-55
综述 55-61
参考文献 58-61
致谢 61-62
摘要 4-6
Abstract 6-7
目录 8-10
符号说明 10-11
1 导论 11-14
2 HLA-G结构功能、作用机制以及在各种病理过程中的作用 14-37
初步介绍 14-15
HLA-G的结构功能、作用机制及其在多种病理情况下的作用与应用 15-36
HLA-G的各种结构 15-17
HLA-G及其受体表达的调控 17-19
HLA-G在免疫突触诱导免疫耐受的机制 19-22
HLA-G1通过膜片转移的作用机制 22-24
HLA-G诱导抑制性调节T细胞的形成 24-28
HLA-G诱导移植耐受 28-31
HLA-G在肿瘤免疫逃逸和免疫治疗中的作用 31-33
HLA-G与妊娠免疫耐受 33-34
HLA-G与炎症性疾病和自身免疫性疾病 34-35
HLA-G与感染性疾病 35-36
结束语和未来的展望 36-37
3 HLA-G诱导大鼠肾移植免疫耐受的实验研究 37-46
建立携带HLA-G基因的慢病毒表达体系 37-43
实验目的 37
实验材料 37
实验方法 37-43
包装慢病毒 43-45
实验目的 43
实验材料 43-44
具体包装(慢病毒)步骤 44
通过有限稀释法,测定慢病毒滴度 44-45
注意事项 45
实验结果与结论 45-46
4 建立大鼠肾移植急性排斥反应模型 46-56
实验目的 46
实验材料与方法 46-51
实验材料 46-47
实验方法 47-51
统计分析 51
实验结果 51-53
肾移植急性排斥反应模型的建立及手术成功率 51-52
手术时间 52
术后病理切片 52-53
实验讨论与结论 53-56
5 HLA-G慢病毒在大鼠排斥模型中转染移植肾诱导免疫耐受的实验研究 56-64
引言 56-57
实验材料与方法 57-59
大鼠肾移植与标本采集 58
逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) 58
Western印迹检测 58-59
实验结果 59-61
实验讨论 61-64
6 HLA-G慢病毒转染诱导免疫耐受的细胞实验研究 64-70
实验目的 64
实验材料 64
实验方法 64-69
细胞转染实验 64-65
RT-PCR的实验步骤 65-66
Western Blot实验步骤 66-67
应用MTT法法检测人类和大鼠内皮细胞表达HLA-G对健康人和大鼠NK细胞杀伤活性的影响: 67-69
实验讨论与结论 69-70
参考文献 70-76
综述 76-86
参考文献 84-86
在读期间发表的文章及获奖 86-87
致谢 87
细胞结构解读绝大多数的真核生物细胞都有核、质、膜三个部分,膜是生命系统的边界,是控制物质交换的门户;质是新陈代谢的主要中心,质中的细胞器在系统内分工合作;核是遗
前言 细胞凋亡通常称为细胞程序性死亡,是由基因控制的主动性细胞死亡过程。越来越多数据发现,细胞凋亡与多种疾病密切相关,如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力,利
nature cell biology即自然细胞生物学杂志,是国际顶级期刊。 《自然细胞生物学》是英国著名杂志《Nature》五个学科主题其中之一,也是该领域经
什么是干细胞
细胞工程论文 细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说,它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模