心脏病药物研究进展论文

中图分类号： 文献标识码：A 文章编号：16721349（2012）08098502通过建立多种动物模型探讨心复康口服液治疗充血性心力衰竭（心衰）的作用机制,现将有关的研究内容综述如下。 1 心复康口服液对心室重塑及心功能的影响 心复康口服液对急性缺血性心衰的影响 马文礼等［1］采用冠状动脉结扎法制作心肌梗死模型，研究表明中药心复康口服液在明显减少左室舒张末期内径（LVEDD）和左室舒张末期容积（LVEDV）的同时，使急性心肌梗死（AMI）模型大鼠减小的左室射血分数（LVEF）、左室短轴缩短率（FS）值显著增加。心复康口服液口服液可以改善心室重塑大鼠的心功能，保护心脏结构重整；抑制心脏胶原纤维的增生［1］。胡元会等［2］采用冠脉结扎法制作心肌梗死模型，研究后认为心复康口服液能显著改善心肌梗死心衰大鼠的血流动力学状态，可使心肌梗死心衰大鼠心输出量（CO）增加,左室内压最大变化速率（±dp/dtmax）上升,说明心复康口服液能显著改善心肌梗死心衰大鼠的心脏收缩和舒张功能。 心复康口服液对慢性心衰的影响 胡元会等［3］通过腹腔注射阿霉素复制心衰大鼠模型,研究认为心复康可使心衰大鼠心排血量（CO）增加，±dp/dtmax上升,证实心复康口服液对阿霉素心衰模型大鼠心功能有明确保护作用。 2 心复康口服液对大鼠心肌Ca2+定位及Ca2+ATPase活性的影响［3,4］ Ca2+稳态对维持心肌细胞正常的形态和功能是不可或缺的,在心肌细胞膜及线粒体膜、肌浆网膜等生物膜上存在转运Ca2+的CaATPase，线粒体和肌浆网等细胞内Ca2+贮库可调节细胞内Ca2+在一定范围,若过多的Ca2+进入细胞或CaATPase活性降低可使上述调节失常,导致Ca2+超载,从而损伤细胞结构和功能。CaATPase具有主动转运Ca2+的作用,是调节心肌细胞内Ca2+稳态的主要酶之一，通过腹腔注射阿霉素复制大鼠心衰模型,证实ADR模型组心肌细胞CaATPase反应较弱,沉淀物多在肌膜和线粒体膜上,提示由于细胞生物膜上CaATPase活性降低,以至进入细胞内过多的Ca2+不能被及时转运出细胞或转进Ca2+内贮库,从而使细胞内Ca2+超负荷,导致心肌细胞变性、坏死。而心复康治疗组心肌细胞CaATPase反应较正常对照组、ADR组增强,反应物广泛分布于肌纤维膜、线粒体膜及肌浆网膜各处,说明药物可通过增强细胞膜上Ca2+泵活性,将进入细胞内的Ca2+移出,防止Ca2+超负荷,同时,线粒体和肌浆网膜上Ca2+泵活性增强,将部分Ca2+移入内贮库,推测该药改善心功能的机制可能是在Ca2+超负荷时减少胞浆内Ca2+浓度,并在心肌收缩时由内贮库释放出一定的Ca2+以满足心肌收缩所需。提示心复康口服液有显著改善阿霉素心衰模型大鼠的心脏收缩和舒张功能的作用,可能与通过提高CaATPase活性、促进Ca2+转运、防止心肌细胞Ca2+超载有关。 3 心复康口服液对心肌的保护作用及可能的作用机制 心复康口服液对阿霉素亚急性心肌毒性的防治作用 胡元会等［5］通过腹腔注射阿霉素复制亚急性心肌损伤大鼠模型,以心肌超微结构及心肌组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)活性、丙二醛(MDA)含量为观察指标。结果阿霉素模型组GSHPx活性和MDA含量分别为(±)U/（min?mg）和(±)nmol/(mg?pr),与正常对照组比较有统计学意义(P<)；心复康组GSHPx活性和MDA含量分别为(±)U/(min?mg)和(±) nmol/(mg?pr),与模型组比较有统计学意义(P<),接近正常对照组。同时电镜观察发现,阿霉素模型组心肌细胞的超微结构有严重损伤,硝酸镧标记可见镧颗粒进入细胞内,在细胞内有大量电子致密的镧颗粒,线粒体外膜周围亦有致密的镧颗粒沉积,坏死的肌原纤维之间亦有少量散在的镧颗粒沉积。心复康治疗组心肌细胞超微结构损伤较轻,细胞间隙和外膜可见镧沉积的电子致密颗粒,线粒体、肌丝之间有少量的镧颗粒沉积。结果显示ADR模型组心肌细胞超微结构损伤严重,膜通透性亦发生明显改变。心复康治疗组心肌细胞超微结构损伤较轻,膜通透性改变不明显。心复康口服液具有抗氧自由基作用和保护心肌细胞超微结构及膜通透性的作用。提示这种心肌保护作用的机制可能与心复康口服液增强心肌细胞对半醌式自由基的清除能力有密切关系。 心复康口服液对注射去甲肾上腺素兔心肌损伤的保护作用及可能的机制 通过注射去甲肾上腺素复制兔心肌损伤模型，何建成等［6］用透射电镜观察发现心复康口服液对心肌细胞超微结构有明确的保护作用，可改善去甲肾上腺素心肌病心肌微循环，防治心肌内毛细血管内皮受损，保护心肌细胞超微结构免受损伤。曹雪滨等［7］应用半定量计算心肌坏死面积证实其可以减轻心肌组织损伤程度,并且可以防止钙离子过度内流，证实心复康口服液对兔实验性心肌损伤有明确保护作用。琥珀酸脱氢酶(SDH)为心肌细胞线粒体能量代谢的关键酶,反应心肌细胞能量代谢的水平［8］。曹雪滨等［9］应用电镜细胞化学方法结合图像分析研究表明，心复康口服液可以明显提高去甲肾上腺素性损伤的心肌细胞线粒体SDH活性,证实心复康口服液对心肌细胞能量代谢具有一定的保护作用。并应用电镜硝酸镧电子示踪技术证实，对心肌细胞膜通透性的保护可能为心复康口服液对心肌细胞的超微结构保护作用的重要机制之一。 4 心复康口服液对心肌能量代谢产物及相关调节酶基因和蛋白的表达的影响 心复康口服液对心肌能量代谢产物的影响 心肌能量代谢障碍是心肌细胞损伤的始动环节，是引起和促进心力衰竭发生、发展的重要因素。王艳飞等［10］通过建立腹主动脉部分缩窄致压力超负荷大鼠模型，用高效液相法（HPLC）测定心肌高能 磷酸盐的浓度，通过透射电镜观察大鼠心肌线粒体的形态，观察大鼠第 6周、第8周心功能的指标及心肌高能磷酸盐［三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）、腺嘌呤核苷酸总量(TAN)及能荷(EC)］ 的含量。治疗组与模型组相比，大鼠心功能指标及 ATP、ADP、AMP、TAN 的含量均明显改善（P<）。治疗组大鼠心功能指标及 ATP、ADP、AMP、TAN的含量在8周时明显高于6周时（P<）；治疗组大鼠心肌线粒体的受损程度较模型组轻。证实心复康口服液能明显改善慢性压力超负荷大鼠心肌能量代谢和心脏功能，并对心肌线粒体起到保护作用。

这是我已经发表的药理方面的综述，你可以看一下，但不能用来发表，否则自己会有麻烦的。再者，综述参考文献一般较多，10篇左右的基本没有。国内综述一般参考文献20-30篇左右即可，而国外的好多综述的参考文献都是上百篇或者更多心肌细胞凋亡与梗塞的研究进展关键词：细胞凋亡 心肌缺血 心肌梗塞 细胞凋亡是细胞在正常的生理或病理状态下发生的一种自发的、程序化的死亡过程。细胞凋亡发生时呈现出独特的形态学和生物化学特征，其表现为细胞膜完整，细胞器形态改变较轻，细胞核固缩、断裂，最终形成凋亡小体并被巨噬细胞等清除。而且，凋亡细胞基因组的裂解产物在琼脂糖凝胶电泳图谱上呈现出典型的DNA ladder。心肌缺血可引起缺血区及缺血边缘区心肌细胞的死亡，并可随后发展为心肌梗塞(myocardial infarction, MI)，使心肌细胞死亡进一步加剧，最终可导致心衰的发生。近年来研究显示，细胞凋亡参与MI心肌细胞的死亡，并在心室重构、心功能改变过程中起关键作用[1,2]。现就心肌细胞凋亡与梗塞的研究进展综述如下。 1 心肌细胞凋亡存在于MI中的依据心肌细胞凋亡是缺血所致MI心肌细胞死亡的途径之一。Yue等[3]发现，在缺血导致的大鼠MI 模型3d后通过原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的切口末端标记法(TUNEL)和DNA laddering检测，梗塞边缘区(离梗塞区~500um)心肌细胞凋亡指数明显增高。Gu等[4]在心肌缺血诱发的MI动物模型中发现，与远离梗塞区相比，梗塞边缘区存在不规则形状的心肌细胞及大量的凋亡细胞核。Baldi等[5]报道在人类急性心肌梗塞(AMI)晚期尸解中，心肌细胞凋亡仍然非常活跃，而且远离梗塞区细胞凋亡指数()远远低于梗塞区()。以上说明细胞凋亡主要存在于梗塞区及梗塞边缘区。也有研究发现，在早期MI患者中远离梗塞区凋亡细胞数量仍然可观，但心肌细胞凋亡的存在并不能作为MI的诊断标志[6]。2 心肌细胞凋亡与梗塞后心室重构MI发生时引起心肌细胞丢失以及细胞外基质的一系列变化，导致心室重构的发生。心肌细胞凋亡与心室重构关系密切，抑制心肌细胞凋亡有利于心室功能的改善。研究发现，通过药物抑制心肌细胞凋亡可提高左心室射血分数，减少左心室舒张末期内径，改善心功能[4]。Sinagra等[7]研究发现,MI后由细胞凋亡引起的细胞丢失导致左心室舒张功能障碍，这可能是心室功能恶化的原因之一。Abbate等[8]最近发现，在两个不同的实验动物模型中，MI 24h之内通过抑制心肌细胞凋亡能够显著改善心室重构过程。Diwan等[9]在敲除鼠心脏促凋亡基因Bnip3的MI模型中研究发现，2d后梗塞边缘区及远离梗塞区的心肌细胞凋亡减少，3周后则显示出改善左心室收缩及抑制左心室扩张的功能，从而证实Bnip3是MI后心室重构的一个主要决定性因子。另外，AMI后远离梗塞区的左心室正常区域，心肌细胞凋亡明显增加，通过抑制此区域的心肌细胞凋亡能够逆转AMI后的不利反应，起到保护左心室功能的作用[10]。3 与MI有关的凋亡调控因子心肌细胞凋亡受多种蛋白、基因、生长因子的调控，Bcl-2家族是迄今研究最深入的凋亡调控因子之一，其促凋亡蛋白与抗凋亡蛋白的比值在决定细胞存亡中起关键作用。P53在调控心肌细胞凋亡中同样起重要作用。有研究证明，通过药物预处理能明显抑制实验性AMI大鼠心肌细胞中P53及Bax、Fas的表达，Bcl-2表达则增加，从而明显减少心肌细胞的凋亡[2]。人类血液中还存在可溶性Fas(sFas)和FasL(sFasL)，前者通过抑制Fas与细胞膜上的FasL结合阻断细胞凋亡，后者可诱导细胞发生凋亡。Soeki等[11]研究发现，在AMI后1d血浆sFas浓度显著增加，14d后浓度减少，而sFasL浓度无明显变化。说明AMI早期，机体自身sFas浓度增加抑制心肌细胞凋亡；随着时间推移，sFas浓度减少，细胞凋亡加剧。该研究还发现，在心室重构患者中sFasL浓度于AMI 后14d及21d高于无心室重构患者，说明MI晚期发生心室重构的患者心肌细胞凋亡增多，sFasL起了诱导作用。另外，hsp70是热休克蛋白家族(hsps)在心肌细胞保护中研究最成熟的成员之一[1]。Dybdahl[12]等对28例AMI患者研究发现，血液中hsp70和C反应蛋白(CRP)及白细胞介素-6(IL-6)显著增加，hsp70峰值浓度与心脏肌钙蛋白T及心肌肌酸激酶同工酶的峰值浓度相关。而且AMI后1d左心室射血分数与hsp70浓度呈负相关，说明hsp70浓度可能与梗塞面积有关。一些生长因子也参与心肌细胞凋亡的发生，如Davis等[13]在大鼠MI模型中通过生物素化的那诺芬使胰岛素样生长因子-1持续释放28d，与仅有那诺芬的组别比较，Akt活性增强，caspase-3减少28%。 4 心肌细胞凋亡的信号转导途径在心肌细胞凋亡的信号转导途径中死亡受体途径与线粒体途径研究最成熟。 最近发现，阻断AT1受体能够明显减少Fas表达，从而抑制Fas/FasL介导的心肌细胞凋亡[14]。TNF-α也能通过与Fas/FasL相同的途径诱导心肌细胞凋亡。Sun等[15]在TNF-α敲除小鼠MI模型中发现，与正常小鼠相比远离梗塞区及无梗塞心肌中细胞凋亡数目非常少。线粒体在细胞凋亡过程中起着主开关作用。Cyt C释放到胞浆中后与凋亡活化因子-1、caspase-9分子形成凋亡体。凋亡体活化caspase-9，从而激活下游caspase分子，如caspase-3等，最终诱导凋亡的发生。有研究证明，抑制凋亡体的形成同时伴随caspase-9和-3的失活能够抑制心肌细胞凋亡[16]。另外，Bcl-2家族可调节线粒体途径中Cyt C的释放。通过抑制Bax通道的活化能够抑制Cyt C的释放，从而抑制细胞凋亡 [17]。Akt在调节心肌细胞生长及存活中起重要作用，其途径的激活能够抑制心肌细胞凋亡[3]。Akt又称磷酸激酶B，是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，包括Akt1、Akt2、Akt3三个亚型。其中Akt1和Akt2已被证实有抑制心肌细胞凋亡作用[3,4]。Akt激活后可使促凋亡因子Bad、caspase-9磷酸化及上调P53的负向调节蛋白，阻断以上因子介导的凋亡途径。有研究发现，三碘甲状腺原氨酸能够明显诱导MI边缘区Akt自身Ser473磷酸化，使此区域心肌细胞凋亡减少，而且MI后正常区Akt2有轻微表达但与模型组相比差异显著，其意义有待进一步研究[3]。最近丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径在心肌细胞凋亡中的作用日益受到关注。MAPK有3个主要的亚家族：细胞外信号调节激酶(ERK)，c-Jun氨基末端激酶(JNK)和P38 MAPK。其中P38 MAPK在心肌缺血后细胞凋亡的信号转导途径中起中枢作用，通过抑制P38 MAPK能明显上调Bcl-2蛋白表达[18]。5 MI心肌细胞凋亡的防治 基因治疗 在包含人类A20基因的转基因小鼠MI模型中发现，在心脏中特异性过度表达人类A20基因可阻断IκB激酶β和P65活性，抑制NF-κB信号通路，减少caspase-3、-9及Cyt C和第二线粒体来源的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶激活剂(Smac)的释放，抑制心肌细胞凋亡。进一步研究发现，A20能够增强抗凋亡蛋白Bcl-2、X染色体凋亡蛋白抑制剂(XIAP)、细胞型Fas相关死亡域样白介素-1β转换酶抑制蛋白(cFLIP)的表达，减少促凋亡蛋白Fas、FasL、Bax的表达，明显缩小心肌梗塞面积，阻止左心室功能障碍和重构，延迟随后心衰的发生[19]。Rong等[20]在移植人生长激素(hGH)基因的大鼠心肌缺血模型中发现，缺血4周后GH可下调Bax表达，Bcl-2/Bax比率增加，心肌细胞凋亡被抑制；而且，左心室舒张末期内径和梗塞面积明显减小，心功能明显改善，这可能与血中IGF-1浓度升高、脑钠素水平明显降低有关。大量研究表明，P38 MAPK激活可诱导心肌细胞凋亡。MAPK磷酸化酶-1(MKP-1)可使P38 MAPK去磷酸化而钝化，在心肌缺血MKP-1转基因小鼠中，MKP-1过度表达明显抑制P38 MAPK活性，从而明显减轻梗死损伤程度[18]。也有研究发现，MI早期通过局部P38α基因转移增强P38 MAPK活性，同时增加血管发生相关因子表达，明显降低心肌细胞凋亡指数和减少心肌梗塞面积，改善MI后心室重构[21]。 干细胞移植治疗 干细胞移植为目前治疗缺血性心脏病的热点之一。由于胚胎干细胞的研究受到伦理道德及取材困难等因素的影响，研究者把更多的希望寄予成体干细胞。目前用于心肌细胞研究的成体干细胞主要有骨髓干细胞、骨髓间充质干细胞、内皮祖细胞、骨骼肌干细胞等。Uemura等[22]在鼠心肌缺血导致的MI模型中发现，骨髓干细胞(BMSC)治疗组心肌细胞Akt活性增加，TUNEL阳性细胞数明显减少。BMSC预处理组可通过旁分泌途径抑制心肌细胞凋亡，明显缩减梗塞面积，提高左心室射血分数，减轻MI后左心室重构。Berry等[23]将骨髓间充质干细胞(MSC)直接注入MI大鼠梗塞区及边缘区表现为TUNEL阳性细胞减少，梗塞面积减少，心肌收缩和舒张功能改善。虽然干细胞改善缺血心肌功能的机制尚不明确，其治疗结果存在争议，但大多数研究表明干细胞治疗缺血性心脏病是安全有效的，其最终疗效需进一步进行大样本、随机双盲、多中心的临床研究后才能确定。 天然产物活性成分治疗 天然产物中许多活性成分具有良好的抗心肌细胞凋亡的作用，这些成分主要集中于生物碱、苷类、萜类和黄酮类等化合物中。羟基积雪草苷(MA)是积雪草中的一种主要萜类化合物，研究发现经MA预处理的缺血所致的大鼠MI模型中乳酸脱氢酶、肌酸磷酸激酶释放减少，超氧化物歧化酶活性增强，丙二醛浓度及CRP活性显著降低，心肌细胞凋亡减轻，心肌梗塞面积缩小[24]。Ling等[25]研究发现，四方蒿总黄酮通过调节Bcl-2家族(Bcl-2表达增强，Bax表达降低)抑制心肌细胞凋亡，缩减心肌梗塞面积。绿茶的主要活性成分是表没食子儿茶精没食子酸酯(EGCG)，Townsend等[26]研究发现，EGCG可通过抑制信号传导与转录活化因子-1(STAT-1)磷酸化，减少离体大鼠心脏中缺血诱导的心肌细胞凋亡，缩减心肌梗塞面积，改善心功能。在培养的乳鼠心肌细胞中，经EGCG预处理后同样能够抑制STAT-1自身酪氨酸701和丝氨酸727磷酸化，明显减少缺血诱导的Fas受体表达，降低caspase-3活性，抑制心肌缺血损伤诱导的心肌细胞凋亡。从苦苣中提取的单体木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷可明显减少缺氧培养的乳鼠心肌细胞凋亡，使凋亡小体数目降低[27]。 联合治疗 随着对MI心肌细胞凋亡的研究深入，大量药物治疗可以减少心肌细胞凋亡，改善MI后心功能。有研究发现，MI发生时一些炎症因子参与其中[12,28]，通过研究炎症因子与细胞凋亡的关系，抗炎类药物可能会成为今后抑制MI心肌细胞凋亡的一个重要策略之一。另外，血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)、β受体阻滞剂(BB)、他汀类药物等都显示出一定的疗效。最近研究发现，通过药物和治疗方法之间的联合运用显示出优于单独运用其中任一方法的疗效。Boyle等[30]在缺血诱发的MI裸大鼠中分别通过ACEI和BB治疗、内皮祖细胞移植(EPC)治疗、EPC和ACEI/BB治疗，结果发现ACEI和BB治疗组在局部远离梗塞区减少75%的心肌纤维化，EPC治疗组通过诱导梗塞边缘区血管形成而阻抑此区域81%的心肌细胞凋亡，EPC联合ACEI/BB治疗组改善左心室功能的效果优于单独运用其中任一方法。Li等[31]在MI大鼠心肌内直接注射Bcl-2基因修饰的MSC与单独MSC移植相比，心肌细胞存活率明显升高，梗塞面积减少17%，心功能恢复显著。6 小结心肌缺血可导致心肌梗塞，国内外针对缺血引起的心肌梗塞中细胞凋亡的研究日益深入，并对参与心肌细胞凋亡的相关因子进一步明确，为此研发的一系列治疗方法及药物已经或即将应用到临床。但基因治疗中载体的选择、基因表达的调控等问题尚未解决，干细胞移植治疗仍缺乏大量随机双盲的临床证据，而联合治疗则显示出了更佳的疗效。另外，天然产物活性成分因其资源丰富、毒副作用少、疗效独特已引起广泛关注，从天然产物中寻找有效的活性成分抑制心肌细胞凋亡将成为防治MI极具潜力的途径之一。参考文献[1]Gill C, Mestril R, Samali A. 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