阿菈VinU菟
在KEGG或BioCarta这些pathway数据库里找到你感兴趣的通路,在pathway图上找到你感兴趣的蛋白后就能确认它的下游。实验方法大体上就是上调(瞬时表达、mimics)或下调(Knockout、RNAi)你的Gene of Interest,再检测下游的蛋白发生了上调还是下调,看看你的GOI和它们什么联系。
小捞出吱吱吱
般的转录组测序可以得到大量差异表达基因和调控代谢通路,但由于基因与表型难以直接关联,导致关键信号通路难以确定,因此往往达不到预期研究目的。相信很多做过转录组测序的老师都深有体会。总感觉中间缺少了一步?没错,就是代谢物!代谢物是基因型与表型之间的桥梁,代谢物的变化更能直接揭示基因的功能,因此能够更有效地揭示生物学及其生化、分子机理。在植物研究中,目前代谢组+转录组的策略已经被广泛运用于植物生理、生长发育、及逆境胁迫研究中。那么如何进行代谢组与转录组的关联分析?总的来说,是基于“参与同一生物过程中的基因或代谢物具有相同或相似的变化规律”这一原理进行分析的。举个例子,研究不同颜色品种的菊花颜色差异的原因,首先通过代谢物检测,发现不同颜色品种的菊花积累的花青素类型和含量并不一致;然后进行转录组测序,在众多差异基因及代谢通路中,我们可以重点研究与花青素合成相关的代谢通路上的基因,从而一方面快狠准地找到导致颜色差异的功能基因,另一方面代谢组的结果也相当于是对转录组结果的验证。
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