粒粒soso
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《名侦探柯南:绀青之拳》是动画《名侦探柯南》电影系列的第23部作品,由永冈智佳担任导演,大仓崇裕担任编剧。
作品以新加坡为舞台,围绕在19世纪末沉入海底的世界最大蓝宝石——绀青之拳展开故事。
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美羊羊小P
《沉默的天使》,在美国播出打破收视纪录,仅播出第一集时,总观众人数就达1600万。
单看三位“电影咖”级别的主演阵容就已经足够服气了:【丹尼尔·布鲁尔】【卢克·伊万斯】【达科塔·范宁】
其次是既符合时代又符合剧情的服化道,尤其是剧中那泥泞的街道,简直太有味道了!。
当然,一部剧最重要的还是故事----
1896年,纽约,暴雪,“乔治奥”被杀。尸体惨不忍睹,脖伤见骨、右手被斩、双眼被挖、内脏散落一地、生殖器也没了……
新上任的纽约警察局局长罗斯福,本就想对警局进行改革,奈何警局势力错综复杂,难以下手,这件离奇的谋杀案正好是一个契机。
精神病专家“克雷泽勒”(准确说他是一个心理学家),对此案有着不同的见解,他回想起之前发生在自己病人身上的类似案件,他怀疑凶手是同一个人。他需要查看更多的杀童案卷宗,于是他找到了纽约警局第一位女性职员“萨拉霍华德”,霍华德小姐帮他拿到了卷宗,并且在局长罗斯福的默许下,成为了克雷泽勒医生在警察局的内应……
水瓶座A型
看过众多版本共计数百万字的有关一代英豪、武术大师李小龙死亡研究文字后,我的判断是:李小龙和他的儿子均死于谋杀! 请看表面偶然却实是人为“导演”的难忘两幕: 李小龙的最后一部电影《死亡游戏》里有一个情节:李小龙出演的角色在拍戏时,被另一个演员用道具枪射出的真子弹击中,随即毙命——这一幕是李小龙亲自导演的; 20年后的1993年,27岁的李小龙之子李国豪在美国拍摄《乌鸦》,竟然真的被人在道具枪中装入真子弹而一枪毙命——这一幕是杀害李小龙的凶手一手策划的,目的是斩草除根。 李国豪死后第四天,20年前杀害李小龙的凶手在李小龙死后的第四天(1973年7月25日)录制的一盘录音带被公布,其中详尽披露了谋杀李小龙的原因和经过。 请对这个问题有研究的网友发表看法。可以和我的判断相同,也可以不同,可以引用网上的东西,但一定要有分析和推理。没有自己思想的请回避(不要参与)对这个问题的探讨。 我非常崇敬李小龙,打算和香港一位作家(现在美国)写一本有关李小龙死亡之谜的书。问题补充:央视首播的《李小龙传奇》昨天晚上(2008年11月5日)播完了。 最后击败黄皮小子的那场对决很经典。大师风采让人震撼。 可惜,一代功夫大师很快就离我们而去了。7月20日这个日子成了许多人心中永远的痛。 也许,追究李小龙死因依然将在很长一段时间内成为人们寄托惋惜之情的入口。 《死亡游戏》之后,他在死之前打算拍的下一部片子《细凤》,除了武术,开始关注到中国的其他文化,还将狠狠地揶揄那些“开口社稷民生,闭口家国安危,却让许多人死于战争家破人亡的伪君子”——这个主题在今天不是都很有意义吗? 李小龙一直在寻求突破,武功如此,拍电影也一样。我们学不来他的武功,但可以被他的精神所感染。 《细凤》也许会是李小龙电影的转型之作,由突出武术到眷顾国家民族的命运,可惜,我们看不到了…… ——深深怀念李小龙!!
蜡笔小新新XU
马晓年,出生于1945年,1969年毕业于北京医科大学医学系马晓年,1969年毕业于北京医科大学医学系1981年毕业于中国协和医科大学。获医学硕士学位。1982-1983年在英国进修;2015年4月2日起,在北京市燕都医院出诊;任北京中山医院医学顾问,现为中山男科医院性功能司法鉴定法医,重庆市前列腺疾病研究所会员。北京中山医院男科特聘专家、荣誉教授及首席专家顾问特邀专家。 马晓年,出生于1945年,1969年毕业于北京医科大学医学系。1981年毕业于中国协和医科大学。获医学硕士学位。1982-1983年在英国进修;2015年4月2日起,在北京市燕都医院出诊;任北京中山医院医学顾问,现为中山男科医院性功能司法鉴定法医,重庆市前列腺疾病研究所会员。北京中山医院男科特聘专家、荣誉教授及首席专家顾问特邀专家。马晓年 1969 年毕业于北京医科大学医学系, 1981 年毕业于中国协和医科大学,获医学硕士学位, 1982---1983 年在英国利物浦大学进修,自 1993 年起连续 3 次获美国性学委员会颁发的性治疗学家资格证书,是我国大陆唯一获此殊荣的医生,成为它的国际会员(该会共 1500 人,国际会员仅 90 余人)。目前任中国性学会性医学专业委员会主任委员、中华医学会男科学分会常委、中国婚姻家庭研究会理事、北京性健康教育研究会副会长。 20 多年来一直把全部精力投入社会需求迫切的性医学及性教育工作:目前已诊治 19000 多例患者,具有丰富的临床实践经验;指导进修生 10 名(含 3 名研究生);与外院医生合作开展男女性治疗药物临床研究和性医学的临床研究,任务完成后均以论文形式发表于国内杂志上。著有《现代性医学》、《马大夫谈性健康》、《性的学习》等 50 余种性医学专著和科普书籍,发表了 20 余篇学术论文和 1000 多篇科普文章,曾获卫生部科技进步三等奖和全国优秀科普书籍三等奖,其中《男性学咨询》被收入 20 世纪优秀科普佳作;编讲 30 余部性医学与性教育录象片或光盘;多年来任北京电视台《生命、生育、生活》及北京电台《今夜私语时》长期特邀嘉宾。219 浏览25102017-12-15关于晓年的资料清华大学玉泉医院 性医学科 主任医师 性别:男 民族:汉 籍贯:山西汾阳 出生日期1945-5-8 主要学历:1963---1969 北京医科大学医学系 本科生 1979---1981 中国协和医科大学基础所 医学硕士生 1982---1983 英国利物浦大学 进修 自1984年起至1996年在国家计生委科研所从事药理及男性临床研究,自20世纪80年代后期把更多精力转向社会需求更迫切的性医学及性教育工作。由于前期做了大量工作在国内性学界享有一定的知名度,自1993年起连续3次获美国性学委员会颁发的性治疗学家资格证书,是我国大陆唯一获此殊荣的医生,成为它的国际会员(该会共1500人,国际会员仅100人左右)。目前任中国性学会性医学专业委员会主任委员、中华医学会男科学分会常务理事、中国婚姻家庭研究会理事、北京性健康教育研究会副会长。系《现代性医学》第一版主编之一,该书获得1998年卫生部科技进步三等奖;系《现代性医学》第二版主编(2003年11月)。18年来已主编共同编写和翻译50多种专业和科普书籍,发表了50多篇论文和综述等,发表了1000多篇科普文章。其中《男性学咨询》获全国优秀科普书籍三等奖并被收入20世纪优秀科普佳作。编讲30余部性医学与性教育录象片或光盘。编讲30余部性医学与性教育录象片或光盘。多年来任北京电视台《生命、生育、生活》及北京电台《今夜私语时》栏目长期特邀嘉宾。通过对17000多名病人的临床诊治积累了相当丰富的实践经验。近年来指导进修生10名(含2名研究生)并和外院医生开展男科学和性医学的临床研究,任务完成后均以论文形式发表于国内杂志上。自1993年起,把性教育与计算机技术相结合,先是完成了性教育电脑咨询专家系统全文检索软件的开发(共300万字)并于1994年通过国家计生委科研鉴定,后由国家计生委办公厅向系统内推荐。1996年又开发成功其多媒体版。自1998年起把性教育搬上互联网,开辟了个人主页并开设网上性咨询工作。根据多年来从事性医学和性教育工作的体会,近年来提出了“弘扬性文明、普及性教育,提高性素质,享有性健康”的奋斗目标,这一符合国情的性学理论见解已纳入国家计生委公务员培训教材。 自1998年起先后担任北京市石景山区第十二届、第十三届人大代表。681 浏览43182017-12-15晓年的简介,简单一点马晓年,出生于1945年,1969年毕业于北京医科大学医学系。1981年毕业于中国协和医科大学。获医学硕士学位。1982-1983年在英国进修。现任北京中山医院医学顾问,现为中山男科医院性功能司法鉴定法医,重庆市前列腺疾病研究所会员。北京中山医院男科特聘专家、荣誉教授及首席专家顾问特邀专家。浏览12262020-03-03马晓年的个人简介马晓年,主任医师、教授,中国性学第一人,国医汇再生医学中心主任(现每周出诊地点),北京协和医科大学教授,中国性学会性医学专业委员会委员,中华医学会男科分会委员,北京性健康教育研究会副会长。 数十余年专业致力于两性医学的临床科研工作,并斩获国家级科研成果、卫生部科技进步奖,诺贝尔奖获得者医学峰会、美国性学委员会认证性治疗学家。 参与主持国家七五攻关项目“准弹性激光光散射精子测量仪的研制”,评为国家级科技成果并获1990年全国发明展览会金牌奖;完成部委级科研项目“精子运动特性自动检测系统的临床应用”;完成性教育电脑咨询专家系统(计算机软件)的开发并由国家计生委向全系统推荐。编辑于 2021-03-24TA的回答是否帮助到你了?能够帮助到你是知道答主们最快乐的事啦!有帮助,为TA点赞无帮助,看其他答案查看全部49个回答怎么去挽留一个男人的心—聪明女人这样做—怎么去挽留一个男人的心值得一看的一个男人相关信息推荐怎么去挽留一个男人的心有这些方法,用这3招就能怎么去挽留一个男人的心,一对一私密咨询,高效保密!感情破裂,婚姻危机,婆媳关系,拯救爱情,用这3招搞定!广告再青春全文免费阅读「七猫免费小说」全部免费看值得一看的再青春相关信息推荐再青春全文免费阅读_海量人气小说,统统全本免费,更新快不花钱,马上下载!注册领红包,当天能提出!本月155759人下载咨询上海七猫文化传媒有限公司广告8条评论热心网友2写的非常详细查看全部8条评论— 你看完啦,以下内容更有趣 —中国百家姓最新排名,来看看你的姓能排第几?中国百家姓?立即下载拼多多APP,迅速了解中国百家姓你想知道的,这里全都有!更多精彩内容,尽在拼多多广告2021-03-29晓年的简介,简单一点马晓年,出生于1945年,1969年毕业于北京医科大学医学系。1981年毕业于中国协和医科大学。获医学硕士学位。1982-1983年在英国进修。现任北京中山医院医学顾问,现为中山男科医院性功能司法鉴定法医,重庆市前列腺疾病研究所会员。北京中山医院男科特聘专家、荣誉教授及首席专家顾问特邀专家。59赞·2,166浏览2021-03-14青山处处埋忠骨作者简介青山处处埋忠骨的作者是晓年。 晓年是笔名,原名马晓年,出生于1945年,1969年于北京医科大学医学系毕业。1981年于中国协和医科大学毕业。获得医学硕士学位。1982-1983年在英国进修。现任北京中山医院医学顾问,现为中山男科医院性功能司法鉴定法医,重庆市前列腺疾病研究所会员。北京中山医院男科特聘专家、荣誉教授及首席专家顾问特邀专家。 扩展资料: 《青山处处埋忠骨》这篇课文是人教版五年级上册第八单元的二十七课。本文主要讲了毛泽东的爱子毛岸英在抗美援朝的战争中光荣牺牲后,毛泽东得知这个噩耗后极度痛苦的心情和对岸英遗体是否归葬的抉择过程,表现了毛泽东常人的情感,超人的胸怀。 全文以毛泽东的思想感情变化为线索,先写彭德怀从朝鲜发出来的有关毛岸英牺牲的电报内容和毛泽东收到电报后的巨大悲痛;再写彭司令要求送回岸英遗体,而金日成主席要求把岸英葬在朝鲜的意见分歧,面对这两种抉择,毛泽东的矛盾心理,最后作出了将爱子葬于朝鲜的艰难、痛楚的决定;之后写毛泽东强忍悲痛,在电报上写下了“青山处处埋忠骨,何须马革裹尸还”的批示。 文章截取最能表现人物精神境界的一个片段,通过细节描写反映出毛泽东的崇高境界,展示了他凡人的情怀和不同凡人的胸怀,读后让人肃然起敬。 “青山处处埋忠骨”改自“青山有幸埋忠骨,白铁无辜铸佞臣。”这是刻在杭州西湖岳王墓石柱上的一副对联。263赞·2,051浏览2019-04-04巜青山处处埋忠骨》作者晓年的资料晓年是笔名:马晓年,出生于1945年,1969年毕业于北京医科大学医学系。1981年毕业于中国协和医科大学。获医学硕士学位。 1982-1983年在英国进修。现任北京中山医院医学顾问,现为中山男科医院性功能司法鉴定法医,重庆市前列腺疾病研究所会员。北京中山医院男科特聘专家、荣誉教授及首席专家顾问特邀专家。 由于前期做了大量工作在国内性学界享有一定的知名度,自1993年起连续3次获美国性学委员会颁发的性治疗学家资格证书,是我国大陆唯一获此殊荣的医生,成为它的国际会员(该会共1500人,国际会员仅100人左右)。 自1993年起,把性教育与计算机技术相结合,先是完成了性教育电脑咨询专家系统全文检索软件的开发(共300万字)并于1994年通过国家计生委科研鉴定,后由国家计生委办公厅向系统内推荐。 自1998年起把性教育搬上互联网,开辟了个人主页并开设网上性咨询工作。 现任北京中山医院医学顾问,现为中山男科医院性功能司法鉴定法医,重庆市前列腺疾病研究所会员。北京中山医院男科特聘专家、荣誉教授及首席专家顾问特邀专家。 扩展资料 《青山处处埋忠骨》这篇课文是人教版五年级上册第八单元二十七课。本文主要讲了毛泽东爱子毛岸英在抗美援朝的战争中光荣牺牲后,毛泽东得知这个噩耗后极度痛苦的心情和对岸英遗体是否归葬的抉择过程,表现了毛泽东常人的情感,超人的胸怀。 全文以毛泽东的思想感情变化为线索,先写彭德怀从朝鲜发出来的有关毛岸英牺牲的电报内容和毛泽东收到电报后的巨大悲痛;再写彭司令要求送回岸英遗体,而金日成主席要求把岸英葬在朝鲜的意见分歧。 面对这两种抉择,毛泽东的矛盾心理,最后作出了将爱子葬于朝鲜的艰难、痛楚的决定;之后写毛泽东强忍悲痛,在电报上写下了“青山处处埋忠骨,何须马革裹尸还”的批示。 参考资料来源:百度百科-青山处处埋忠骨1780赞·30,365浏览2019-07-04马晓年有哪些代表作?1.《性心理病理学》( Psychopathia Sexualis), 出版于 1886年,作者是德国精神病学家克拉夫特·埃宾( Richard von Krafft-Ebing),属于系列的病例报告,谈的都是“变态”的性行为,如现在说的恋物症、乱伦、施虐症、同性恋等。 2.《性学家的回忆录》( Memoirs of a Sexologist), 作者Ludwig Lenz,出版于1940年代中期, 记录了他在20世纪初期的工作,从治疗想要改变性别的人,到一战期间跟着军营跑的妓女。他对早期性医学的描述令人毛骨悚然,简单地说当时的时尚是给男人植入兔子的睾丸以增强男人的活力。他对病人的描述都是富于同情心的,试图帮助他们保持健康和找到他们的生活方式,不像克拉夫特·埃宾总是谴责病人“变态”,当然像目前的同性恋婚姻和恋物时尚在当时只是未来主义者的梦。 3.《人类男性性行为》( Sexual Behavior in the Human Male), 作者Alfred Kinsey等,他们的另一本书是《人类女性性行为》( Sexual Behavior in the Human female),这两本书都是调查报告,被誉为现代性学的第一座里程碑。 4. 《人类性反应》(Human Sexual Response),作者是 William Masters 和 Virginia Johnson,他们的第二本书是《人类性功能失调》(Human Sexual disorders),这两本书是实验室研究和临床工作的总结报告,被誉为现代性学的第二座里程碑。 5.《我的秘密花园》( My Secret Garden), 作者 Nancy Friday,1980年代出版的书,这是作者基于对几百位妇女访谈的基础,未加编辑整理,比较原汁原味的专门介绍女性性幻想的书,可以说是半色情、半性学的,颂扬了女性的性想象,肯定会让克拉夫特·埃宾这样的歧视妇女的人感到脸红。它帮助提高社会主流意识对性幻想的正确认识,其实有些性幻想仅仅是想想而已,并非真的要那样做,何苦自己跟自己过不去呢? 6.《心灵的交媾》(The Mating Mind), 作者 Geoffrey Miller20世纪后期性学最有趣的工作莫过于更加恰当地理解为进化心理学,进化心理学家米勒在书中探索了这样的概念,即人类的性选择是由先祖们的欲望所驱使,也就是说人们希望后代是聪明的和具有创新性的,那么人们就会选择具有这些特征的人去交配以获得更加聪明的子女。这是让人激动和令人愉快的观点,但是它基本上是一个进化论的理论,假设智力超群的人都是自然的结果。 7.《道德浪女》(The Ethical Slut), 作者Dossie Easton 和 Janet Hardy,1990年代出版,这是治疗学家和作家一起创作的秘密的畅销书,对同时与一个以上的人具有健康、信任的浪漫和性关系的读者提供很有帮助的心理建议。它有助于把“一夫多妻”的概念通俗化,运用到多伴侣的两性关系中,通过展示这样的伴侣关系并非都是破坏性的“欺”性安排,颠覆了几十年以来对非一夫一妻制的错误见解,其实他们也可以像一夫一妻制那样健康,当然也更忠诚。 8.《一夫一妻制的神话》( The Myth of Monogamy), 作者 David Barash 和 Judith Lipton,在这本书里,心理学家和生物学家就道德浪女那本书提出不同的见解,指出许多动物都是践行一夫一妻制的。 他们提出一个新的概念,即在社会的一夫一妻制(终身伴侣)与性的一夫一妻制(性的排他性)是有区别的,并且通过遗传性检测显示出许多动物是生物学的一夫一妻制,但是几乎没有什么是性的一夫一妻制,包括人类。 9.《性高潮的科学》(The Science of Orgasm),作者Barry Komisaruk, Carlos Beyer-Flores, 和 Beverly Whipple,出版于2005年,作者研究的是高潮底层潜伏的科学机制,他们利用功能磁共振技术研究了高潮时大脑的活动。当然,要想帮助妇女解决高潮问题还是有很长的路要走,期待女版伟哥的早日问世。 10.《进化的彩虹 》(Evolution's Rainbow), 作者 Joan Roughgarden,进化生物学家指出性的多样性是自然的,无论是同性恋还是易性症都是正常的,都不是克拉夫特·埃宾所说是“变态”,可以说我们的社会或其它一些种属因为他们的存在而丰富多彩并且依然正常发展。 11. 《性在黎明》(Sex at Dawn), 作者是Christopher Ryan 和Cacilda Jetha,人类文化的早期历史表明多伴侣制和母系社会与后来的父系社会和一夫一妻制在人类早期的心理学发展方面同样具有重要的关键的意义。14赞·1,546浏览2020-07-26晓年的资料马晓年 1969 年毕业于北京医科大学医学系, 1981 年毕业于中国协和医科大学,获医学硕士学位, 1982---1983 年在英国利物浦大学进修,自 1993 年起连续 3 次获美国性学委员会颁发的性治疗学家资格证书,是我国大陆唯一获此殊荣的医生,成为它的国际会员(该会共 1500 人,国际会员仅 90 余人)。目前任中国性学会性医学专业委员会主任委员、中华医学会男科学分会常委、中国婚姻家庭研究会理事、北京性健康教育研究会副会长。 20 多年来一直把全部精力投入社会需求迫切的性医学及性教育工作:目前已诊治 19000 多例患者,具有丰富的临床实践经验;指导进修生 10 名(含 3 名研究生);与外院医生合作开展男女性治疗药物临床研究和性医学的临床研究,任务完成后均以论文形式发表于国内杂志上。著有《现代性医学》、《马大夫谈性健康》、《性的学习》等 50 余种性医学专著和科普书籍,发表了 20 余篇学术论文和 1000 多篇科普文章,曾获卫生部科技进步三等奖和全国优秀科普书籍三等奖,其中《男性学咨询》被收入 20 世纪优秀科普佳作。
麦麦咔咔
李小龙和李国豪死于谋杀,可能就是死于国人之手。很有可能是香港内部武林同仁的蓄意谋杀。 谋杀李小龙的案情很复杂,促成他非正常死亡的恐怕不止一个原因,他的死很可能是多重谋杀的最后结果。其中关键的一环是投毒。 李小龙死后,美国名人艾伯嘉即认为这是一起谋杀,凶手用的是一种草药。这种草药在人体死亡后迅速分解,可以顺利避开法医的药理检测。1995年,一本叫《李小龙之死》的地下出版物悄然上市,原作者声称对李小龙的死负责。虽然李小龙的崇拜者力言其说荒诞不经,但书上所讲的药理与病理均与李小龙症候相同,其说似非空穴来风。其实要证实此书所说真伪很简单,只要到曼哈顿查一下是否真有原作者其人,立便真相大白。奇怪的是,李小龙的亲属弟子竟没一个人去做这不过是举手之劳的事。这件事交给私人侦探,其实也花不了几个钱。问题很明白,有人宁愿保持一个谜,而不愿知道一个事实。 1998年,美国俄亥俄州侦破了一起药物谋杀案,一个流浪艺人毒杀了一个单身妇女。为了继承这个女子的巨额财产,艺人取了她的芳心,结婚之后,偷偷地给她吃了一种慢性毒药。痴女体质迅速下降,经常头晕,甚至几次昏倒。终于有一天她发现了“丈夫”的秘密,激怒之下突然死亡。警察介入了调查死因,艺人的猴子把剩下的毒药交给了警察,于是真相大白。顺藤摸瓜,警察发现艺人已用相同的方法毒杀了几个女人,她们均死于脑部病变,而且死后均因查无毒痕而被判为正常死亡。请大家注意一点,那就是:死者的后期症状与李小龙惊人地类同! 相同的结果往往出之于相同的起因,所以,我相信李小龙死于谋杀。至于谁杀害了李小龙?这并不难固定一个范围:李小龙伤害了谁?李小龙妨碍了谁?谁可以从李小龙的死亡中受益? 李小龙早期曾经得罪过很多武林门派,后来在美国宣传中国武术更是违背了武林中传统的观点,就是“国术不传外人”的忌讳。很多迂腐的人认为他背叛了师门,背离咏春拳而另立截拳道门户,因此,李小龙可谓周围杀机重重。 李小龙是死于周密的策划。下午四点,李小龙独自留在了公寓。下午六点,附近的清洁工听见有人大喊大叫并似乎是用刀撞击大门。晚上七点,李小龙的好友陈正先生从李家知道李小龙已经死亡。 而守在李小龙身边的人的说法却是,他们九点半才发现李小龙昏迷,十点半抢救无效才送医院,十一点正式宣布死亡。这中间四点至七点之间究竟发生过什么事,七点至十点又究竟发生了什么事,我觉得只能用三个表述,那就是“天知道”!事实只能是:李小龙六点左右已经死于非命,“当事人”在七点前已经把李小龙的死讯通知了他的家人。这个通知李家的人是谁?找到他,或者是她,也就等于找到了凶手。 令人奇怪的是,闻知凶信的李家的平静出人意外,好像发生的事与他们无关……令人奇怪的是,法庭传唤了许多无关紧要的证人,却偏偏不要陈先生出庭作证。法庭问了许许多多无关紧要的事,却偏偏不问李家是怎样在七点之前就知道李小龙已经离开了人间!令人奇怪的是,法庭竟没有把莲达、邹文怀、丁佩三个人的谎言列为案情侦破的突破点,全然不考虑他们各自隐瞒了什么,共同隐瞒了什么!而这此些,对于侦破上此案并非不重要!警方装聋作哑,法官装聋作哑,律师装聋作哑——于是,李小龙的死就不了了之。大家感到奇怪吗? 大洋彼岸一声冰冷的枪响,传来了李国豪死于非命的消息时,我就知道这又是一桩不了了之的千古疑案。 李国豪明明白白地死于枪口之下,可是科技水平天下第一的美国警方,竟然无法判定凶手是谁。还有比这更奇怪的事情吗?开枪的是麦西,枪来于总管,弹药来于特技——三个人都有嫌疑,但都证据不足。于是,“法不责众”,大家都走吧!警方认为,一种可能是枪里装了真子弹,一种可能是枪膛里原有一颗子弹头,空弹击发射出了它。警方至少漏掉了一种假设:一个弹头从枪口上方塞进了枪膛。警方还可能漏掉了另一种可能:一个杀手用套了高级消声器的枪袭击了李国豪。警方无法判定,只好以死于非命论定,放过了三个嫌疑人,同时也放过了真凶。难道事情真的就那么复杂,能难倒世界一流的美国警方吗? 事情其实很简单,任何一个武器专家都可以轻而易举地解决这些难题。只要计算一下射程和穿透效果,就可以判断这是不是一颗常规子弹。只要检验一下枪膛药痕和弹道擦痕,就可以判断枪膛里是不是先有一颗子弹。只要检测一下弹头旋转系数,就可以判断弹头是不是从枪口塞进去的。只要对现场枪声进行声纳比较,即可判定这一枪击发的是真子弹还是空弹。只要校对一下弹头的射入角度,就可以判断李国豪是不是真的死于麦西开的那一枪…… 令人难以置信的是,警方无人想到这些、法庭无人想到这些、律师也无人想到这些……这是为什么? 答案似乎只有一个,警方无意追究事实真相! 没有什么可怀疑的——李国豪确实死于布置周密的谋杀,其周密程度甚至不次于谋杀李小龙。李国豪本身并没有什么罪过,他的死仅仅因为他是李小龙的儿子。他受了株连。
自由的红枫叶
分子层面对生物的研究,在个体水平上主要是看单个基因的变化以及全转录本的变化(RNA-seq);在对个体的研究的基础上,开始了群体水平的研究。如果说常规的遗传学主要的研究对象是个体或者个体家系的话,那么群体遗传学则是主要研究由不同个体组成的群体的遗传规律。 在测序技术大力发展之前,对群体主要是依靠表型进行研究,如加拉巴哥群岛的13中鸟雀有着不同的喙,达尔文认为这是自然选择造成的后果 。达尔文的进化论对应的观点可以简单概括为“物竞天择,适者生存”,这也是最为大众所接受的一种进化学说。直到1968年,日本遗传学家提出了中性进化理论[2],也叫中性演化理论。中性理论的提出很大程度上是基于分子生物化学的发展。可以这样理解中性理论:一群人抽奖,在没有内幕的情况下,每个人抽到一等奖的概率是相等的,这个可能性和参与抽奖的人的身高、年龄、爱好等因素都没有关系。中性理论常作为群体遗传研究中的假设理论(CK)来计算其他各种统计指标。 群体遗传学,研究的单位是群体,比如粳稻、籼稻、野生稻,就能够构成不同的群体;我们国内的各省份的水稻也可以作为一个个群体。 群体遗传学大概可以分为群体内的研究和群体间的研究。比如研究云南元阳的水稻的遗传多样性;如果研究是的云南元阳的水稻和东北的水稻,那就可以算成是群体间的研究。群体间和群体内的研究是相互的。 测序价格的急剧下降[3]使得大规模的群体测序得以实现。
常见的变异类型有SNP、IdDel、SV、CNV等。重测序中最关注的是SNP,其次是InDel。其他的几种结构变异的研究不是太多。
有参考基因组的物种的全基因组测序叫做重测序,没有参考基因组的物种的全基因组测序则需要从头组装。随着测序价格的降低,越来越多物种的参考基因组都已经测序组装完成。 plant genomes [4]网站实时显示全基因组测序已经完成的植物,其中2012年以后爆发式增长。在群体遗传学研究中更多的是有参考基因组的物种,尤其是模式物种,植物中常见的是拟南芥、水稻和玉米。
主要的分析流程见下图。现在的测序公司基本上都会帮客户完成整个的分析流程,因为主要耗费的资源是计算资源。我认为在整个分析的流程中最重要的是Linux目录的构建,混乱的目录会导致后续的分析频频出问题,重测序分析会生成很多的中间文件,良好的目录管理会使得项目分析流程井然有序。 该部分涉及到的软件的安装和基础的Linux基础知识就不详细说明了。
正选择似乎可以更好地用自然选择来解释。就是一个基因or位点能够使个体有着更强的生存力或者是育性,这样就会使得这个个体的后代更多,如此一来,这个基因or位点在群体中就越来越多。
正选择能够使有利的突变基因or位点在群体中得到传播,但是与此同时却降低了群体的多态性水平。也就是说原先该位点周围的核苷酸组成是多样性的,在经过正选择之后,这个位点周围核苷酸的多样性就渐渐的趋于同质化了。这就好比一块田,里面本来有水稻和稗草及其他杂草,由于稗草的适应性增强,稗草在逐渐增多,水稻慢慢变少,最后甚至是只剩下了稗草。 我们将这种选择之后多态性降低的情况叫做选择扫荡(Selective Sweep)。检测选择扫荡的软件有SweeD[7]。选择扫荡有可能是人工选择的结果,如2014年 Nature Genetics关于非洲栽培稻的文章就使用了SweeD来检测非洲栽培稻基因组上受人工选择的区域[8]。
负选择和正选择刚好是相反的。简单理解成群体中的某个个体出现了一个致命的突变,从而自己或者是后代从群体中被淘汰。这也导致群体中该位点的多态性的降低。就好比我有10株水稻,其中一株在成长过程中突然不见了,那么对我的这个小的水稻群体来说,这个消失的水稻的独有的位点在群体中就不见了,整体的多态性就降低了。
平衡选择指多个等位基因在一个群体的基因库中以高于遗传漂变预期的频率被保留,如杂合子优势。
平衡选择检测的算法有BetaScan2[10],这是个Python脚本,输入文件只需要过滤好的SNP数据即可。
计算公式为: 其中 是有效群体大小, 是每个位点的突变速率。 但是群体大小往往是无法精确知道的,需要对其进行估计。
分离位点数 是 的估计值,表示相关基因在多序列比对中表现出多态性的位置。计算公式为: 其中 为分离位点数量,比如SNP数量。 为个体数量的倒数和:
指的是核苷酸多样性,值越大说明核苷酸多样性越高。通常用于衡量群体内的核苷酸多样性,也可以用来推演进化关系[11]。计算公式为: 可以理解成现在群体内两两求 ,再计算群体的均值。计算的软件最常见的是 vcftools ,也有对应的R包 PopGenome 。通常是选定有一定的基因组区域,设定好窗口大小,然后滑动窗口进行计算。 3KRGP文章就计算了水稻不同亚群间4号染色体部分区域上的 值[12],能够看出控制水稻籽粒落粒性的基因 Sh4 位置多态性在所有的亚群中都降低了。说明这个基因在所有的亚群中都是受到选择的,这可能是人工选择的结果。
Tajima's D是日本学者Tajima Fumio 1989年提出的一种统计检验方法,用于检验DNA序列在演化过程中是否遵循中性演化模型[14]。计算公式为: D值大小有如下三种生物学意义:
叫固定分化指数,用于估计亚群间平均多态性大小与整个种群平均多态性大小的差异,反映的是群体结构的变化。其简单估计的计算公式为: 的取值范围是[0,1]。当 时,表明亚群间有着明显的种群分化。 在中性进化条件下, 的大小主要取决于遗传漂变和迁移等因素的影响。假设种群中的某个等位基因因为对特定的生境的适应度较高而经历适应性选择,那该基因的频率在种群中会升高,种群的分化水平增大,使得种群有着较高的 值。 值可以和GWAS的结果一起进行分析, 超过一定阈值的区域往往和GWAS筛选到的位点是一致的,如2018年棉花重测序的文章[15]:
ROD可以基于野生群体和驯化群体间核苷酸多态性参数 的差异识别选择型号,也可以测量驯化群体和野生型群体相比损失的多态性。计算公式为: 和 一样,ROD也可以和GWAS结合起来:
群体结构分析可以简单理解成采样测序的这些个体可以分成几个小组,以及给每个个体之间的远近关系是怎么样的。群体结构分析三剑客, 分别是 进化树 、 PCA 和 群体结构图 。
进化树就是将个体按照远近关系分别连接起来的图。
常用的绘图软件是 Phylip 和 Snpphylo 。进化树修饰的软件有 MEGA , ggtree 等,推荐网页版工具 iTOL ,无比强大。 外群定根法:当群体的个体的差异很小时,可以引入其他物种作为根。如在对三叶草建树时可以引入水稻的序列作为根进行建树。
PCA是很常见的降维方法,如微生物研究中常用来检验样品分群情况。PCA计算的软件很多,plink可以直接用vcf文件计算PCA,R语言也可以进行PCA计算。
PCA图在群体重测序中有如下几种作用:
进化树和PCA能够看出来群体是不是分层的,但是无法知道群体分成几个群合适,也无法看出群体间的基因交流,更无法看出个体的混血程度。这时候就需要群体分层图了。
可以将进化树和群体分层图结合进行展示,如下图:
先了解下概念,此处借鉴基迪奥生物网站的解释[22]。 要理解 LD 衰减图,我们就必须先理解连锁不平衡(Linkage disequilibrium,LD)的概念。连锁不平衡是由两个名词构成,连锁 + 不平衡。前者,很容易让我们产生概念混淆;后者,让这个概念变得愈加晦涩。因此从一个类似的概念入手,大家可能更容易理解 LD 的概念,那就是基因的共表达。 基因的共表达,通常指的是两个基因的表达量呈现相关性。比较常见的例子就是:转录组因子和靶基因间的关系。因为转录因子对它的靶基因有正调控作用,所以转录因子的表达量提高会导致靶基因的表达量也上调,两者往往存在正相关关系。这个正相关关系,可以使用相关系数 来度量,这个数值在 - 1~1 之间。总而言之,相关性可以理解为两个元素共同变化,步调一致。 类似的,连锁不平衡(LD)就是度量两个分子标记的基因型变化是否步调一致,存在相关性的指标。如果两个 SNP 标记位置相邻,那么在群体中也会呈现基因型步调一致的情况。比如有两个基因座,分别对应 A/a 和 B/b 两种等位基因。如果两个基因座是相关的,我们将会看到某些基因型往往共同遗传,即某些单倍型的频率会高于期望值。 参照王荣焕等[23]的方法进行LD参数计算:
随着标记间的距离增加,平均的LD程度将降低,呈现出衰减状态,这种情况叫LD衰减。LD衰减分析的作用:
GWAS(genome-wide association study),全基因组关联分析,常用在医学和农学领域。简单理解成将SNP等遗传标记和表型数据进行关联分析,检测和表型相关的位点,然后再倒回去找到对应的基因,研究其对表型的影响。这些被研究的表型在医学上常常是疾病的表型;在农学上常常是受关注的农艺性状,比如水稻的株高、产量、穗粒数等。GWAS思想首次提出是在心肌梗塞的治疗上[24],首次应用是在2005年的文章上[25]。
目前使用最广泛的模型是混合线性模型[26]:
所有的参数软件(如Emmax)会自动完成计算。
GWAS结果文件通常只有两个图,一个是曼哈顿图,另外一个是Q-Q图。一般是先看Q-Q图,如果Q-Q正常,曼哈顿图的结果才有意义。
MSMC(multiple sequentially Markovian coalescent)[27],底层算法很复杂,类似于PSMC。MSMC的主要功能是推断有效群体大小和群体分离历史。
这样看起来更直观:
LAMP(Local Ancestry in Admixed Populations,混杂群体的局部族源推断),用于推断采用聚类的方法假设同时检测的位点间不存在重组情况,对每组相邻的 SNP 进行检测分析[28],在运算速度和推断准确度上都有了质的飞跃。
用于推断群体分离和混合[29]。图是这样的:
测序方案关系到后续的分析,不同的样本量对应不同的测序方法和分析方法。
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《名侦探柯南》是1994年出的。
《名侦探柯南》是青山刚昌创作的漫画作品,于1994年在《周刊少年Sunday》1994年5号上开始连载。单行本由小学馆出版,在中国大陆由长春出版社出版,在中国台湾由青文出版社出版,在中国香港由安乐文潮出版。电子版由《名侦探柯南》官方应用,SundayWebry发布。
《名侦探柯南》的创作背景:
《名侦探柯南》是小学馆为对抗《金田一少年事件簿》在侦探漫画领域里压倒性的优势而推出的。最初,青山刚昌打算创作一个拥有特殊能力,譬如触碰物体就能读取记忆的侦探。但编辑希望青山刚昌画正统推理漫画。
刚刚拿到这个提案时,青山刚昌完全没有动力,但不久他就想起自己自小时候起就喜欢福尔摩斯那一类侦探的事情,于是开始着手创作。日本推理剧《古畑任三郎》也一定程度上刺激了作者的创作欲。
因为“名侦探柯南”这个名字会让人想到《未来少年柯南》,所以杂志主编说用“道尔”更好。但是青山觉得“柯南”比“道尔”的语感更好,所以坚持使用“名侦探柯南”这个名字。不过在连载前,发表预告时主编还将漫画名字错写成了“侦探少年柯南”。
连载之初,青山刚昌感觉作品的创作难度太高,曾产生放弃的念头,但这个想法被编辑部驳回。随后,青山刚昌决定到拉斯维加斯去度假。就在度假期间,青山刚昌接到了责任编辑的联络,得知《名侦探柯南》决定电影化。在这件事的推动下,名侦探柯南的连载才得以继续进行。
马晓年,出生于1945年,1969年毕业于北京医科大学医学系马晓年,1969年毕业于北京医科大学医学系1981年毕业于中国协和医科大学。获医学硕士学位。1982
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