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二、弱碱性电解水的用途 (一)长期饮用促进人体健康 在日本等发达国家,许多科学家通过长期大量实验研究,均证实弱碱性电解水具有多方面确切的医疗保健功能,许多国家政府主管部门把电解水生成器批准为医疗器械。经过数十年大量推广使用,均证实弱碱性电解水的安全性和功能性。 近十多年来,我国也有数十位专家进行了长期深入研究,均证实弱碱性电解水不仅安全而且有多种确切的医疗保健功能。现将近年来的部分研究成果摘要如下: 1、弱碱性电解水,具有调节血脂和抗疑作用,可减缓动脉粥样硬化,保护心血管。 (资料来源:《中国老年学杂志》2003年第10期,作者:韩志涛等,单位:解放军总医院,老年医学研究所) 2、弱碱性电解水,能清除自由基并且可清除人体内70%自由基。 (资料来源:2005年版《电解水是好水》 一书,作者:吕锋洲,单位:台大医学院生化研究所) 3、弱碱性电解水对原发性高血压、糖尿病、高脂血症有辅助治疗作用。 (资料来源:《上海预防医学杂志》2001年第13卷第13期,作者:王豫廉, 单位:上海市纺一医院) 4、弱碱性电解水可以促进胆固醇和三油酸甘油酯的乳化,降低血脂。 (资料来源:《沈阳医学院学报》2002年4卷第1期,作者:曾艳等,单位:沈阳医学院医学基础部生化教研室) 5、弱碱性电解水对大鼠胃溃疡有愈合作用。 (资料来源:《中国公共卫生》2005年21卷第6期,作者:刘景兰等,单位:中国疾病预防控制中心环境与键康相关产品安全所) 6、弱碱性电解水可改善或解除便秘状况 (资料来源:2005年版《电解水挑战亚健康》 北京:军事医学科学出版社,作者:陶国枢等,单位:解放军总医院,老年医学研究所) (二)用于烹饪饭菜更可口 1、煮饭。用弱碱性电解水煮出的饭颗粒膨润,能够持久,不易腐烂,不易变色。即使冷了,吃起来也非常美味。 2、煮面。用弱碱性电解水煮荞麦面、乌龙面能取得非常好的效果。较粗的面用弱碱性电解水能较快煮熟。 3、烹饪蔬菜。弱碱性电解水能迅速去除牛蒡、竹笋的涩液,也很适合用来泡洋葱。用来烫黄绿色的蔬菜,可以让菠菜、生菜、花椰菜、小油菜等具有鲜艳的绿色。用弱碱性电解水煮黑豆,能煮出漂亮的颜色。 4、做面食。自己做面包、蛋糕或点心时,面粉要具有粘性,才容易做出美丽的形状,吃起来美味。弱碱性电解水就有这个良好效果。 5、腌渍菜。弱碱性电解水腌渍菜可以使菜更容易入味,保存度极佳。 6、干燥食品复水。豆类、羊栖菜、萝卜干、豆腐干等,使用弱碱性电解水浸泡还原的话,所需时间比自来水短。 7、烹饪肉类。用弱碱性电解水将肝脏、羊肉等浸泡20~30分钟,可以去除其臭味。 8、煮蛋。用弱酸性水煮蛋、然后以弱碱性电解水浸泡,煮熟后壳容易剥下。 9、卤制食品。用弱碱性电解水卤制食品,可以令食物及调味品出味,且变得柔软滑嫩。 10、煮汤。用弱碱性电解水煮汤,速度更快,味道更美。 (三)用于冲泡饮品味道更佳 1、冲奶粉。用弱碱性电解水冲泡奶粉,对婴儿身体很好,能补充钙质,维持及增进健康。 2、泡茶。用弱碱性电解水泡茶能消除涩味,使茶的颜色鲜艳、香气极佳。同时可防止单宁酸的溶解,冷了后也具有良好色泽。 3、泡咖啡。弱碱性电解水冲泡的咖啡味道清淡爽口,香气极佳,非常适合国人的口味。如果冲泡冰咖啡,更能去除苦涩味。 (四)用于养花养宠物效果好 1、浇花。对花草树木等喷洒弱碱性电解水,能使之活性化,延长寿命,使花和叶的颜色鲜艳,而且不易遭受病虫害的损害。 2、插花。弱碱性电解水能够维持插花的鲜度,延长鲜花的寿命。 3、种子。种子用弱碱性电解水浸泡一昼夜后,能促进发芽,成为很有元气的苗。 4、宠物。给宠物也饮用弱碱性电解水,宠物会更健康,更活泼可爱。 三、弱酸性电解水的用途 (一)美容护肤 1、洗脸、化妆水。早上或晚上用弱酸性电解水洗脸,可使肌肤美丽,容易上妆。最好不要擦拭,让它自然干燥更有效。 2、刮胡水。男性刮完胡子后,以弱酸性电解水作为刮胡水,可消毒肌肤、紧缩肌肤。 3、日晒处理。弱酸性电解水最适合用来处理日晒的问题,能够预防晒伤,能迅速治疗因紫外线而造成的晒伤,能够抑制斑点等的形成。 4、泡澡。洗澡时,在水桶中放入3~4杯弱酸性电解水,能使身体温热、肌肤紧绷、可以很好去除污垢。 5、洗发。用弱酸性电解水洗发,毛发不会受损、干燥。 (二)家庭用具清洗和个人卫生 1、除垢。茶垢、锅盖上的焦黑用弱酸性电解水浸泡一晚就能很方便地洗净。 2、清洗餐具。用弱酸性电解水清洗餐具,不但能洗得非常干净,洗完的餐具还能非常光亮。 3、清洗抹布、毛巾。能防止发霉、去除难闻的臭味。 4、洗涤衣物。脱水前浸泡在酸性电解水中,然后晒干,即使是不易干燥的季节,也不会产生臭味,还能防止静电。 5、打扫和擦拭。镜子、眼镜、玻璃、家具、车子等都可以用弱酸性电解水擦得光鲜亮丽、同时达到洗净效果,不易生霉。 6、漱口水。早晚、外出及回家,用弱酸性电解水漱口,能缓和口内炎,具有消毒蛀牙、预防感冒及扁桃腺炎的效果。 7、尿布疹。尿布疹或痱子也可以使用弱酸性电解水,用纱布等打湿后擦拭,具有一定的防治效果。 8、牙痛、牙龈痛。漱口具有镇静效果,还能预防蛀牙。 9、蚊虫叮咬。将弱酸性电解水适当涂抹在被蚊虫叮咬的部位,具有镇静止痒的效果。 10、宠物。用弱酸性电解水给宠物洗澡,可以使宠物的毛发更为整齐,毛具有光泽,还能预防皮肤病。
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在我国,中国医学科学院的余钰教授,中国军事医学科学院的梁增辉教授,中国农业大学李里特教授。中国人民解放军总医院陶国枢教授等几十位专家通过大量研究,均证实弱碱性电解水是一种安全并具有改善人体健康功能的新型饮用水。同时,科学家们还发现从电解槽阳极流出的弱酸性水也是外用的健康好水,弱酸性电解水具有对皮肤的收敛作用,可保持皮肤的pH值不变,防止皮肤干燥,增加皮肤弹性,因此可用于洗脸、洗手、或用作爽肤水、收缩水等化妆水,具有皮肤和美容的作用。一、 弱减性电解水的用途(一) 长期饮用促进人体健康 在日本等发达国家,许多科学家通过长期大量实验研究,均证实弱减性电解水具有多方面确切的医疗保健功能。 近十多年来,我国也有数十位专家进行了长期深入研究,也均证实弱减性电解水不仅安全而且有多种确切的医疗保健功能,现将近年离开的部分研究成功摘要如下:1、弱碱性电解水具有调节血脂和抗凝作用,可减缓动脉粥样硬化,保护心血管。 (资料来源:《中国老年学杂志2003你第10期。作者:韩志涛等。单位:解放军总医院。老年医学研究所》)2、弱碱性电解水可清楚人体内70%自由基。 (资料来源:2005年版《电解水是好水》一书。作者:吕峰洲。单位:台大医学院生化研究所)3、弱碱性电解水对原发性性高血压,糖尿病,高血脂症有辅助治疗作用。4、弱碱性电解水可以促进胆固醇和三油酸甘油酯的乳化,降低血脂。(资料来源:《沈阳医学院学报》2002年4卷第1期。作者:曾艳等。单位:沈阳医学院医学基础部生化研究室)5、弱碱性电解水对胃溃疡有愈合作用。(资料来源:《中国公共卫生》2005年21卷第6器,作者:刘景兰等。单位:中国疾病预防控制中心环境与健康相关产品安全所)6、弱减性电解水可改善或接触便秘状况(资料来源:2005年版《电解水挑战亚健康》北京:军事医院科学出版社。作者:陶国枢等。单位:解放军总医院,老年医学研究所)7、弱碱性水不含有害物质,减少了致病、致癌物质的可能性。8、弱碱性水富含平衡人体所需的有益矿物质和微量元素。9、呈弱碱性,维持体内酸碱平衡。10、弱碱性水的水分子团小,渗透力和溶解力强,可以溶解肠壁油脂油酸、侵化结石颗粒、促进血液循环,能够加强体内的新陈代谢。11、弱碱性水呈负电位,可清除体内的过氧化物即自由基,具有防病抗衰老作用。12、弱碱性水含有丰富的氧(≥5ml/L),喝入后弱碱性水进入血液,可为人体机制提供更多的氧份,可以使人保持活力。(二) 用于烹饪饭菜可口1、 煮饭,用弱减性电解水煮出的饭颗粒膨润,不易腐烂,不易变色,即使冷却了,吃起来也非常美味。2、 煮面,用弱碱性电解水煮荞麦面、乌龙面能取得非常好的效果,较粗的面用弱碱性水能较快煮熟。3、 烹饪蔬菜,弱减性电解水能迅速祛除牛芬、竹笋的涩液,也很适合用来泡洋葱,用来烫黄绿色的蔬菜,可以让蔬菜、生菜、花椰菜、小油菜等具有鲜艳的绿色,用弱减性电解水煮黑豆,能煮出漂亮的颜色。4、 做面食,自己做面包、蛋糕或点心时,面粉要具有粘性,才容易做出美丽的形状,吃起来美味,弱碱性电解水就有这个良好的效果。5、 腌菜,弱碱性电解水腌菜可以使菜梗容易入味,保存度极佳。6、 干燥食品复水,豆类、羊栖菜、萝卜干、豆腐干等,使用弱碱性电解水浸泡还原的话,所需时间比自来水短。7、烹饪肉类,用弱碱性电解水将肝脏、羊肉等浸泡20-30分钟,可以去除其臭味。8、煮蛋,用弱酸性谁煮蛋,然后以弱碱性电解水浸泡,煮熟后壳容易剥下。9、卤制食品,用弱碱性电解水卤制食品,可以令食物及调味品出味,且变得柔软滑嫩。10、煮汤,用弱碱性电解水煮汤,速度更快,味道更美。 (三) 用于冲泡饮品味道更佳1、 冲奶粉,用弱碱性电解水冲泡奶粉,对婴儿身体很好,能补充钙质,维持及增进健康。2、 泡茶,用弱碱性电解水能消除涩味,使茶的颜色鲜艳,香气极佳,同时可防止单宁酸的溶解,冷冷后也具有良好色泽。3、 泡咖啡,弱碱性电解水冲泡的咖啡味道清淡爽口,香气极佳,非常适合国人口味,如果冲泡冰咖啡,更能够除去苦涩味。(四) 用于养花宠物效果好1、 浇花,喜减的植物喷洒弱碱性电解水,能使之活性化,延长寿命,使花和叶的颜色鲜艳。而且不易遭受病虫害的损害。2、 插花,弱碱性电解水能够维持插花的鲜度,延长鲜花的寿命。3、 种子,种子用弱碱性电解水浸泡一昼夜后,能促进发芽,成为很有元气的苗。4、 宠物,给宠物也引用弱碱性电解水,宠物会更健康,更活泼可爱。二、 弱酸性电解水的用途1、 除垢,茶垢、锅盖上的焦黑用弱酸性电解水浸泡一晚就能很方便的洗净。2、 清洗餐具,用弱酸性电解水清晰餐具,不但能洗得非常干净,洗完的餐具还能非常光亮。3、 清洗抹布,毛巾,能防止发霉,去除难闻的臭味。4、 洗涤衣物,脱水前浸泡在酸性电解水中,然后晒干,即使是不易干燥的季节,也不会产生臭味,还能防止静电。5、 打扫和擦拭,镜子、眼镜、玻璃、家具、车子等多可以用弱酸性电解水擦得光鲜亮丽,同时达到洗净效果,不易生霉。6、 漱口水,用酸性电解水漱口,能缓和口内炎症,具有消毒蛀牙、预防感冒及扁桃腺炎的效果。7、 尿布疹,尿布疹或瘫子也可以使用弱酸性电解水,用纱布等打湿后擦拭,具有一定的防止效果。8、 牙痛,牙龈痛,用弱酸性电解水漱口具有镇静效果,还能预防蛀牙。9、 蚊虫叮咬,将弱酸性电解水机适当涂抹在被蚊虫叮咬的部位,具有镇静止痒的效果。10、宠物,用弱酸性电解水机给宠物洗澡,可以使宠物的毛发更为整齐,还能预防皮肤病。
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含羞草(Mimosa pudica L.),是豆科含羞草属多年生草本花卉,原产于美洲热带地区.我为大家整理的含羞草科学论文,希望你们喜欢。 含羞草科学论文篇一 含羞草中总黄酮提取纯化工艺研究 【摘要】 目的研究提取纯化含羞草中总黄酮的最佳工艺条件。方法以芦丁为对照,含羞草总黄酮得率为考察指标,通过正交实验法优选超声提取总黄酮的最佳工艺。在此基础上,采用真空薄膜浓缩,超声脱色,大孔吸附树脂Diaion HP-20吸附分离纯化含羞草总黄酮提取物。结果最佳提取工艺为用10倍量的80%乙醇为溶剂超声提取3次,10 min/次。最佳分离纯化工艺为:采用大孔吸附树脂Diaion HP-20进行分离富集,以不同浓度的乙醇进行梯度洗脱,洗脱流速为5 ml/min,收集40%~60%乙醇洗脱部位并减压浓缩得总黄酮提取物,总黄酮的含量达到76%。结论优化了含羞草中总黄酮的提取纯化方法,为含羞草资源的综合利用和产业化开发提供了 参考 。 【关键词】 含羞草 总黄酮 提取 纯化 含羞草为豆科含羞草属植物含羞草Mimosa pudica的全草[1],又名知羞草、怕羞草、喝乎草、刺含羞草等。主要分布在我国华东、华南、西南等地的山坡丛林、湿地、路旁,具有清热利尿、化痰止咳、安神止痛、凉血止血之功效,临床多用于急性肝炎、神经衰弱、失眠、肺结核咳血、血尿、结膜炎、跌打损伤、带状疱疹等症[2]。含羞草中含有大量对人体有益的活性物质,包括黄酮类、酚类、生物活性多糖、氨基酸类、有机酸类和其它微量元素。其中的黄酮类化合物具有显著的生理活性[3~5],如抗脂质过氧化、抗衰老、清除自由基、抗肿瘤,降低血脂、抗菌抑菌、增强免疫力等作用。本文通过正交实验考察了超声提取含羞草总黄酮的工艺,同时采用大孔吸附树脂进行吸附分离,并结合真空薄膜浓缩、超声脱色等方法对含羞草提取物进行分离与纯化,以期为 工业 化生产提供参考依据。 1 仪器与材料 仪器UV-2102PCS紫外可见分光光度计(上海龙尼柯仪器有限公司);KQ-250B超声波提取器(昆山市超声仪器有限公司);NJL07-3型实验专用微波炉(南京杰全微波设备有限公司,额定功率800W);Millipore Simplicity型超纯水器(美国Millipore公司);RE-52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);真空薄膜浓缩装置[6](自装);101-1型电热恒温干燥箱;微量分析天平(EETTLER AE 240瑞士),微孔滤膜(上海医药工业研究院);芦丁对照品( 中国 药品生物制品鉴定所提供)。 材料与试剂 含羞草于2003-05采自海南三亚,由海南大学植物学教授黄世满鉴定为豆科含羞草属植物含羞草的全植株;所用试剂均为分析纯。 2 方法与结果 标准曲线的绘制 准确称取干燥恒重的芦丁对照品 mg,加60%乙醇(体积分数,下同)溶解并定容置100 ml的量瓶中,摇匀得质量浓度为 g/L的对照品溶液。分别取上述芦丁标准溶液0,,,,, ml于6只10 ml量瓶中,用60%乙醇补充至5 ml,各加入 ml 5%亚硝酸钠,摇匀,放置5 min后各加入10%硝酸铝 ml,摇匀。5 min后再加入1 mol/ml的氢氧化钠溶液4 ml,混匀,用60%乙醇稀释至刻度。10 min后于510 nm处测吸光度,试剂为空白参比,以芦丁质量浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线,用最小二乘法进行线行回归,得芦丁含量与吸光度之间的回归方程:A= 1C+ 4, r= 7。 不同溶剂提取所得提取物得率及总黄酮得率的比较 不同溶剂提取所得提取物的得率比较 称取粉碎并过60目筛后的含羞草原料4份,每份20 g,分别选用50%的乙醇、80%的乙醇、甲醇、70%的丙酮4种不同的溶剂进行索氏提取,溶剂用量均为200 ml,提取时间为5 h。分别将提取液浓缩至稠膏状移入烘箱中烘干至恒重。称重, 计算 得率。结果见表1。表1 不同溶剂提取所得提取物及得率的比较(略) 不同溶剂提取所得总黄酮的得率比较 分别吸取一定量由不同溶剂提取所制得的含羞草提取液于10 ml量瓶中,添加60%乙醇溶液使体积约为5 ml,按照上述绘制芦丁标准曲线的方法,依次加入 ml 5%亚硝酸钠、 ml 10%硝酸铝、4 ml 1 mol/ml的氢氧化钠溶液,混匀,用60%乙醇稀释至刻度。静置20 min后用紫外可见分光光度计法测定不同溶剂提取所得提取液的吸光度,重复3次测定,并根据标准曲线换算出总黄酮的得率,计算平均含量及RSD。结果见表2。表2 不同溶剂提取所得提取物中总黄酮的得率比较(略) 由表1可以看出,由4种不同的溶剂进行索氏提取,以70%丙酮进行提取所得提取物的得率为最高;由表2可以看出,以80%乙醇为溶剂进行提取,所得提取物中总黄酮得率相对最高。虽然以70%丙酮提取得率最高且总黄酮的得率与用80%乙醇提取相当,但考虑到乙醇与丙酮相比,具有无毒安全,廉价易得的优点,故提取溶剂选用80%乙醇。 超声提取工艺的优选 样品溶液的制备与测定分别精密称定干燥并过60目筛的含羞草粗粉9份,每份 g,以80%乙醇为溶剂,按正交实验表中所选取的因素水平分别进行超声提取。分别吸取一定量含羞草超声提取液于10 ml 量瓶中,添加80 %乙醇溶液使体积约为5 ml,按照上述绘制芦丁标准曲线的方法,依次加入亚硝酸钠、硝酸铝和氢氧化钠溶液,混匀,用80%乙醇稀释至刻度。静置20 min后测定吸光度, 计算 样品中总黄酮的含量。 正交设计通过正交实验,以芦丁的含量为考察指标,通过紫外法对超声提取方法进行正交实验,以优选出最佳提取工艺。选用L9(34)正交方案,以超声时间、超声次数及溶剂用量3个因素,每个因素3个水平设计实验方案。结果见表3~4。表3 考察因素与水平(略)表4 正交实验设计及实验数据(略) 超声提取最佳工艺 从表4中的直观分析可以明显看出提取的最佳组合为A1B3C3,即用10倍量的80%乙醇为溶剂超声提取3次,10 min/次。 分离纯化工艺优选大孔吸附树脂Diaion HP-20特别适合对黄酮苷类化合物的富集分离,因此本实验采用大孔吸附树脂Diaion HP-20对含羞草黄酮粗提物进行分离纯化。具体操作为:取药材1 kg,干燥后粉碎过60目筛,按照以上最佳工艺进行超声提取,得到的粗提物经真空薄膜浓缩至体积减半,加2%活性碳室温超声脱色2次,20 min/次。抽滤,除去滤渣后继续真空薄膜浓缩至无醇味,得提取物。用大孔吸附树脂Diaion HP-20进行湿法装柱(色谱柱:6 cm×80 cm,柱体积:450 ml),以水、20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇、乙醇溶剂系统进行梯度洗脱,控制洗脱流速为5 ml/min。分别收集不同浓度的乙醇洗脱液。将各部分洗脱液进行真空薄膜浓缩、后转移至旋转蒸发仪中真空浓缩至干燥粉末,计算得率。同时按照上述的紫外法检测总黄酮的含量。结果见表5。表5 大孔吸附树脂分离纯化实验结果(略) 由表5可看出,用中等浓度40%乙醇洗脱效果较好,总提取物得率达到,总黄酮含量可达到;从洗脱情况看,总黄酮主要集中在40%~60%乙醇洗脱部位,水洗脱部位经理化检测发现除含少量的黄酮外,还含有较多的多糖等大极性化合物,可将这部分弃去,而20%乙醇、80%乙醇及乙醇洗脱部位相比之下则含少量的黄酮类成分。因此,按照以上方法对含羞草总黄酮粗提物进行分离富集与纯化,收集各洗脱部位,将40%~60%乙醇洗脱部位合并,进行真空薄膜浓缩后即可得到总黄酮提取物,经紫外测定总黄酮的含量达到76%。 最佳提取纯化工艺 由实验得到最佳提取纯化含羞草总黄酮的工艺:新鲜含羞草→干燥后粉碎→过60目筛→室温超声提取→提取液→真空薄膜浓缩至体积减半→浓缩液→加2%活性炭室温超声波脱色2次→抽滤除去滤渣→脱色液→继续真空薄膜浓缩至无醇味→上大孔树脂Diaion HP-20柱→用水及乙醇混合溶剂梯度洗脱→分别收集洗脱液→将40%~60%乙醇洗脱液合并减压浓缩至干→干浸膏样品→检测含量→成品。 3 讨论 本实验选用芦丁作为对照品,因为芦丁是黄酮化合物中比较有代表性的一种,其B环的3,4-邻二酚羟基部位发生紫外吸收,可以通过测定芦丁对照品的吸收度,从而求算供试品中总黄酮的含量。这是总黄酮含量测定实验中比较经典的方法。 通过实验证明,提取含羞草中总黄酮的最佳工艺为用10倍量的80%乙醇为溶剂超声提取3次,10 min/次。 本实验采用大孔吸附树脂Diaion HP-20分离含羞草中的黄酮类成分,选择不同浓度的乙醇溶液进行洗脱,得出40%乙醇溶液洗脱效果较好,总分离物得率达到,总黄酮含量达到。另外水洗脱部位得率较高,含少量黄酮,还含有较多的大极性化合物。在用大孔吸附树脂分离含羞草总黄酮时,可先用水洗脱,除去大量的大极性化合物,减少影响,再用40%乙醇进行洗脱。 现代 药理研究表明,黄酮类化合物在心血管系统、内分泌系统和抗肿瘤方面具有明显的药理作用。含羞草总黄酮的药理活性未见深入研究。本文利用大孔吸附树脂分离纯化含羞草总黄酮,为进一步研究含羞草总黄酮的药理活性,更好地开发利用含羞草资源奠定了基础。 【 参考 文献 】 [1]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海 科学 技术出版社,1986:1147. [2]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].北京:人民卫生出版社,1975:464. [3]华光军, 郭 勇. 黄酮类化合物药理研究进展[J]. 广东药学,1999,9(4):9. [4]黄河胜. 黄酮类化合物药理作用研究进展[J]. 中国 中药杂志,2000,25(10):499. [5]王 玮, 王 琳.黄酮类化合物的研究进展[J]. 沈阳医学院学报,2002,4(2):115. [6]袁 珂, 俞 莉.真空薄膜浓缩装置的研制及应用研究[J]. 分析化学,2005,33(9):1358. 含羞草科学论文篇二 含羞草的总黄酮提取技术 【摘要】文章分析了提取纯化含羞草中总黄酮的最佳工艺条件。优化了含羞草中总黄酮的提取纯化方法,为含羞草资源的综合利用和产业化开发提供了参考。 【关键词】含羞草 总黄酮 提取 纯化 含羞草为豆科含羞草属植物含羞草Mimosa pudica的全草,又名知羞草、怕羞草、喝乎草、刺含羞草等。主要分布在我国华东、华南、西南等地的山坡丛林、湿地、路旁,具有清热利尿、化痰止咳、安神止痛、凉血止血之功效,临床多用于急性肝炎、神经衰弱、失眠、肺结核咳血、血尿、结膜炎、跌打损伤、带状疱疹等症。含羞草中含有大量对人体有益的活性物质,包括黄酮类、酚类、生物活性多糖、氨基酸类、有机酸类和其它微量元素。 一、材料与试剂 含羞草采自海南三亚,由海南大学植物学教授黄世满鉴定为豆科含羞草属植物含羞草的全植株;所用试剂均为分析纯。 二、方法与结果 1、 标准曲线的绘制 准确称取干燥恒重的芦丁对照品 mg,加60%乙醇(体积分数,下同)溶解并定容置100 ml的量瓶中,摇匀得质量浓度为 g/L的对照品溶液。分别取上述芦丁标准溶液0,,,,, ml于6只10 ml量瓶中,用60%乙醇补充至5 ml,各加入 ml 5%亚硝酸钠,摇匀,放置5 min后各加入10%硝酸铝 ml,摇匀。 2 、不同溶剂提取所得提取物得率及总黄酮得率的比较 1)不同溶剂提取所得提取物的得率比较 称取粉碎并过60目筛后的含羞草原料4份,每份20 g,分别选用50%的乙醇、80%的乙醇、甲醇、70%的丙酮4种不同的溶剂进行索氏提取,溶剂用量均为200 ml,提取时间为5 h。分别将提取液浓缩至稠膏状移入烘箱中烘干至恒重。称重,计算得率。 2)不同溶剂提取所得总黄酮的得率比较 分别吸取一定量由不同溶剂提取所制得的含羞草提取液于10 ml量瓶中,添加60%乙醇溶液使体积约为5 ml,按照上述绘制芦丁标准曲线的方法,依次加入 ml 5%亚硝酸钠、 ml 10%硝酸铝、4 ml 1 mol/ml的氢氧化钠溶液,混匀,用60%乙醇稀释至刻度。静置20 min后用紫外可见分光光度计法测定不同溶剂提取所得提取液的吸光度,重复3次测定,并根据标准曲线换算出总黄酮的得率,计算平均含量及RSD。 3 、 超声提取工艺的优选 样品溶液的制备与测定分别精密称定干燥并过60目筛的含羞草粗粉9份,每份 g,以80%乙醇为溶剂,按正交实验表中所选取的因素水平分别进行超声提取。分别吸取一定量含羞草超声提取液于10 ml 量瓶中,添加80 %乙醇溶液使体积约为5 ml,按照上述绘制芦丁标准曲线的方法,依次加入亚硝酸钠、硝酸铝和氢氧化钠溶液,混匀,用80%乙醇稀释至刻度。静置20 min后测定吸光度,计算样品中总黄酮的含量。 4 、 分离纯化工艺优选大孔吸附树脂Diaion HP-20特别适合对黄酮苷类化合物的富集分离,因此本实验采用大孔吸附树脂Diaion HP-20对含羞草黄酮粗提物进行分离纯化。具体操作为:取药材1 kg,干燥后粉碎过60目筛,按照以上最佳工艺进行超声提取,得到的粗提物经真空薄膜浓缩至体积减半,加2%活性碳室温超声脱色2次,20 min/次。抽滤,除去滤渣后继续真空薄膜浓缩至无醇味,得提取物。用大孔吸附树脂Diaion HP-20进行湿法装柱(色谱柱:6 cm×80 cm,柱体积:450 ml),以水、20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇、乙醇溶剂系统进行梯度洗脱,控制洗脱流速为5 ml/min。分别收集不同浓度的乙醇洗脱液。将各部分洗脱液进行真空薄膜浓缩、后转移至旋转蒸发仪中真空浓缩至干燥粉末,计算得率。同时按照上述的紫外法检测总黄酮的含量。 用中等浓度40%乙醇洗脱效果较好,总提取物得率达到,总黄酮含量可达到;从洗脱情况看,总黄酮主要集中在40%~60%乙醇洗脱部位,水洗脱部位经理化检测发现除含少量的黄酮外,还含有较多的多糖等大极性化合物,可将这部分弃去,而20%乙醇、80%乙醇及乙醇洗脱部位相比之下则含少量的黄酮类成分。因此,按照以上方法对含羞草总黄酮粗提物进行分离富集与纯化,收集各洗脱部位,将40%~60%乙醇洗脱部位合并,进行真空薄膜浓缩后即可得到总黄酮提取物,经紫外测定总黄酮的含量达到76%。 5 、最佳提取纯化工艺 由实验得到最佳提取纯化含羞草总黄酮的工艺:新鲜含羞草→干燥后粉碎→过60目筛→室温超声提取→提取液→真空薄膜浓缩至体积减半→浓缩液→加2%活性炭室温超声波脱色2次→抽滤除去滤渣→脱色液→继续真空薄膜浓缩至无醇味→上大孔树脂Diaion HP-20柱→用水及乙醇混合溶剂梯度洗脱→分别收集洗脱液→将40%~60%乙醇洗脱液合并减压浓缩至干→干浸膏样品→检测含量→成品。 三、讨论 本实验选用芦丁作为对照品,因为芦丁是黄酮化合物中比较有代表性的一种,其B环的3,4-邻二酚羟基部位发生紫外吸收,可以通过测定芦丁对照品的吸收度,从而求算供试品中总黄酮的含量。这是总黄酮含量测定实验中比较经典的方法。 通过实验证明,提取含羞草中总黄酮的最佳工艺为用10倍量的80%乙醇为溶剂超声提取3次,10 min/次。 本实验采用大孔吸附树脂Diaion HP-20分离含羞草中的黄酮类成分,选择不同浓度的乙醇溶液进行洗脱,得出40%乙醇溶液洗脱效果较好,总分离物得率达到,总黄酮含量达到。另外水洗脱部位得率较高,含少量黄酮,还含有较多的大极性化合物。在用大孔吸附树脂分离含羞草总黄酮时,可先用水洗脱,除去大量的大极性化合物,减少影响,再用40%乙醇进行洗脱。 现代药理研究表明,黄酮类化合物在心血管系统、内分泌系统和抗肿瘤方面具有明显的药理作用。含羞草总黄酮的药理活性未见深入研究。本文利用大孔吸附树脂分离纯化含羞草总黄酮,为进一步研究含羞草总黄酮的药理活性,更好地开发利用含羞草资源奠定了基础。 参考文献: 1、黄河胜. 黄酮类化合物药理作用研究进展[J]. 中国中药杂志,2000,25(10):499. 2、全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编[M].北京:人民卫生出版社,1975:464. 看了含羞草科学论文的人还看 1. 关于植物的科学论文 2. 关于植物生长的科学论文 3. 草业科学论文 4. 关于写植物的科技论文 5. 科学论文范文
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