糖的检测方法论文

有许多不同的分析技术用于糖的分离和测定,包括化学分析、比色分析、纸色谱、薄层色谱、气相色谱和高效液相色谱等。本文总结了近十年植物组织中糖类化合物的研究进展，为其含量测定提供理论依据。

1 分光光度分析法

分光光度法是基于长链多糖在水溶液中离解后可与染料等阳离子相互结合发生反应，从而引起染料吸收光谱的变化进行测定。这种方法具有较好的选择性，可以用于实际样品的测定，通常有两种常见方法。

蒽酮 - 硫酸比色法

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量。糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为 630 nm，可在此波长下进行比色。该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖和己糖而且可以测寡糖和多糖，在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量。蒽酮比色法是一种快速而简便的定糖方法，但测定结果误差较大，只能测定样品中可溶性糖总量。陈鸿英等人用蒽酮硫酸法测定淫羊藿多糖的含量，得到的结果较稳定。

苯酚 - 硫酸比色法

植物体内的糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定糖的原理是在浓硫酸作用下，糖脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10mg～100 mg 范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在485 nm 波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，试剂便宜，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色可稳定 160 min 以上。

2 气相色谱法

气相色谱法是以气体作为流动相的一种色谱分析方法气相色谱法测定糖类，具有选择性好、样品用量少、分辨率高、快速准确、灵敏等优点。曾昭睿采用三 - 端烯丙基 - 不对称二苯并 14- 冠 - 4- 二羟基冠醚做固定相分离了鼠李糖、岩藻糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖的乙酸酯衍生物。吴建元等人利用气相色谱法分析茯苓多糖的单糖组成结果 6 种标准单糖的衍生物实现了良好的分离并具有良好的峰形。胡磊等人用 1 一甲基咪唑为溶剂和催化剂、盐酸羟胺和乙酸酐为肟化和乙酰化试剂，对植物样品中糖与糖醇进行乙酰化衍生化利用气相色谱分离和质谱鉴定的分析方法。

3 高效毛细管电泳法

除了少数带有羧基和磺酸基的糖类化合物，绝大多数糖类化合物不带电荷，极性很大且没有发色基团。所以用一般的高效毛细管电泳系统无法得到分离和检测。为了使糖类化合物能产生电迁移而得以相互分离，可采用的方法有：（1）衍生化使之带上发色、荧光基团或电荷；（2）与硼酸盐等络合；（3）与缓冲液中的添加剂形成包合配合物；（4）高 pH缓冲条件下使之电离；（5）加入表面活性剂使形成胶束。20世纪 90 年代以来毛细管电泳因具备分离快速，所需样品量少和自动化程度高的特点，已广泛应用于糖化合物的分析。

4 高效液相色谱法

HPLC 用于糖的定性和定量分析具有快速、灵敏、样品处理简单等优点。从大量的文献报道和综述中可以看出，由于糖的特殊结构及它本身不含强紫外和荧光吸收的官能团，到目前为止还没有建立一个统一的方法来分析所有的单糖和低聚糖。分析糖的色谱柱有化合键合烷基柱、阴阳离子交换柱、氨基键合硅胶柱和硅胶柱等。

文献来源：孙艳涛，由欣. 植物组织中糖化合物测定方法的研究进展.科教文汇(上旬刊).  2011,10(上旬刊) ：134-135.网页链接

鉴定糖是一个很严谨的过程，这并不是什么简单的方法就能鉴定的。糖为多羟基醇与多羟基醛类化合物，由于化学结构随便变动一个氢就可以变成另外一种物质，所以这里给出具体的测定流程。在有标准品的情况下：首先，通过纸层析法、凝胶柱色谱法进行分离，得到单个化合物（多糖化合物）。之后，将此化合物通过一定的试剂水解成众多单糖化合物。用气相色谱和凝胶柱层析分析，与众多标准品进行比较如：葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸等。采用三种以上的不同展开剂展开，对比比移值，如果比移值三次以上都是同样的数字，那么可以说是同一种物质。从而，确定此为什么物质。在通过气象色谱法-质谱法连用，进行官能团的结构内连接、排列与数量的分析。在没有标准品的情况下：如果是未知物质，没有标准品的话。可采用四大光谱联合应用并与仪器分析进行联合分析。四大光谱：紫外光谱，核磁共振，红外光谱，质谱。将四大广谱数据汇总，进行大量计算。如还不能判断是什么物质的不话。如果物质结晶，则可考虑用X射线单晶衍射（X射线单晶衍射，是世界上最先进的检测结构的方法了）。相关知识拓展：随着科技的发展，鉴定物质的方法已经不仅仅局限于上述方法。网传的什么“鉴定还原糖”的方法。这里说一句：这种方法不过是利用了某些糖的性质而已，并不代表所有糖都有。鉴定不是鉴别，需要说出具体结构以及内部分子链接方式，这些不可能是一个简单的化学反应就可以鉴定出来的。如果本体题目说的是“鉴别”，那么方法会简单很多，可以把糖分成还原糖与非还原糖两种进行分别鉴别。但是本题说的是鉴定，那么就不能通过简单的方法进行测定。

用糖度计几秒就可准确高精度的测量出来 绘普

不可能会有这么好的事情，你老是绝对是在你...