荷叶含量测定毕业论文

通过正交试验探讨用乙醇回流提取荷叶中荷叶碱的最佳工艺,并建立荷叶碱含量测定的高效液相色谱测定方法。结果表明,用75%的乙醇在90℃温度下按固液比为1∶20（m∶V）回流提取,荷叶碱回收率高于95%;高效液色谱检测其含量在～μg/mL有很好的线性关系,相关系数达 3,最低检出量为 4μg/mL。说明用该方法提取荷叶碱可行,测定结果稳定、精确。

荷叶； 化学成分； 药理活性荷叶（Lotus leaf）为睡莲科植物莲Nelumbo nucifera Gaertn. 的干燥叶，据《本草纲目》记载，“荷叶服之，令人瘦劣”、“生发元气，裨助脾胃”。 1991-11中华人民共和国卫生部卫监发（1991）第45 号文件中，荷叶被列入第二批“既是食品又是药品”的名单，其在食用及药用两方面均有较广泛的应用［1］，具有清热解暑、升发清阳、凉血止血之功效，主要用于暑热烦渴，暑湿泄泻，血热吐衄，便血崩漏等症［2］。近年来国内外学者对荷叶进行了系统研究，发现其主要含有生物碱、黄酮、挥发油等成分，其中黄酮和生物碱类化合物的生物活性较高，因而近年来人们加大了对这两种化学成分的研究。药理研究表明，荷叶主要具有调脂减肥、抗氧化抗衰老、抑菌作用。本文对荷叶的化学成分、药理研究进行了总结，希望为荷叶的进一步研究提供参考。1 化学成分荷叶的化学成分十分复杂，至今已从荷叶中分离出生物碱、黄酮、挥发油、有机酸、皂苷、甾体等多种化学成分。 黄酮类成分研究表明，荷叶中含有以槲皮素为主要成分的黄酮类物质，且含量非常丰富［3］。Elegami 等［4］从荷叶中分离出Nympholide A，Nympholide B 和Myricetin-3-（6-p-coumaroyl）-glucoside 3 种黄酮类物质。田娜等［5］从荷叶中分离出金丝桃苷（hyperin）、异槲皮素（quercetin）、紫云英苷（Astragalin）、槲皮素 4 （Quercetin）4 种黄酮类成分。张贇彬等［6］从荷叶中分离出山萘酚（kaempferol）和槲皮素-3-丙酯。王玲玲等［7］从荷叶中首次分离得到异鼠李素（Isorhamnetin）、槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖苷和柯伊利素-7-O-β-D-葡萄糖苷 3种黄酮类成分。 生物碱类成分［8］ 荷叶生物碱的发现始于19 世纪初，是研究最早也是最多的一类天然有机化合物，自日本学者福田真雄等从荷叶中分离出荷叶碱（Nuciferine），莲碱（Roemerine） 及O-去甲基荷叶碱（O-Nornuciferine）3个单体成分以来，至今已从叶中分离出16个生物碱化合物。根据母核结构不同可将荷叶生物碱分为以下3类。 单苄基异喹啉类包括亚美异粟碱（armepavine），衡州乌药碱（co-claurine）［9］，N-甲基异衡州乌药碱（N-methylisococlaurine），N-甲基衡州乌药碱（N-methylcoclaurine），O-去甲基异衡州乌药碱（O-methylcoclaurine）。 阿朴啡类包括荷叶碱（nuciferine），N-去甲基荷叶碱（N-nornuciferine），O-去甲基荷叶碱（O-nornuciferine），番荔枝碱（又名牛心果碱）（anonaine），莲碱（roemerine），去氢番荔枝碱（Dehydroanonaine），鹅掌揪碱（liriodenine），N-去甲基亚美罂粟碱（N-norarmepavine），2-羟基-1-甲氧基阿朴啡（2-hydroxy-1-methoxyaporphine）。 去氢阿朴啡类包括去氢荷叶碱（dehydronuciferinene），去氢莲碱（又名去氢罗默碱）（dehydroroemerine）。 挥发油类成分尹慧晶等［10］采用均匀设计法以萃取压力、萃取温度、萃取时间为因素，考察超临界CO2 萃取荷叶的最佳萃取工艺条件并对萃取物进行GC-MS分析，从萃取物中分离出37 个可识别峰，共鉴定26 个成分，主要成分为1-乙基-吡咯-2-甲醛。曾虹燕等［11］用超临界CO2萃取和水蒸气蒸馏法提取荷叶挥发油，利用GC-MS对它们进行了定性、定量分析。超临界萃取所得的荷叶挥发油共分离出66 个峰，鉴定出54 种成分，占其挥发油相对总含量的；主要化学成分为反式石竹烯、反式异柠檬烯、十六酸、11-14-二烯二十酸甲酯、白菖油萜、3，7，11，15-四甲基-2-十六烯-1-醇、β-法呢烯。水蒸气蒸馏所得的荷叶挥发油共分离出41 个峰，鉴定出31 种成分，占其挥发油总相对含量的；水蒸气蒸馏所得挥发油的主要化学成分为反式石竹烯、反式异柠檬烯、1-莰醇、α- 2-葎草烯、4-甲基-1-异丙基-3-环己烯-1-醇、环辛烯、樟脑、白菖油萜、2-炔-1-醇。 有机酸类成分在荷叶中发现了酒石酸（tartaric acid）、柠檬酸（citric acid）、苹果酸（malic acid）、草酸（oxalic acid）、葡萄糖酸（maltonic acid）、琥珀酸（amber acid）、没食子酸（gallic acid），正十八烷酸（stearic acid），苯甲酸（benzoic acid），邻羟基苯甲酸（O-hydroxybenzoic acid）等有机酸和非挥发性有机酸［12］。 其他类成分荷叶中还含有β-谷甾醇、胡萝卜苷、β-胡萝卜素、鞣质、皂类、甾体、维生素C［13］、荷叶多酚［14］、原花青素［15］、碳水化合物、脂质、蛋白质、荷叶多糖及抗有丝分裂作用的碱性成分［16］。

荷叶碱的提取不是轻易能够做到的，包括国内很多企业都是无法实现提取高纯度荷叶碱的，下面是对荷叶碱提取的介绍：国际上铭文划分80%浓度的荷叶碱为高纯度荷叶碱，而高纯度荷叶碱提取工艺及其复杂，国内大部分荷叶碱制备企业都无法自主提取，大部分高纯度荷叶碱需求企业只能依赖进口。日企一般采用专利的微波粉碎技术，在第一道荷叶碱提取工序之后实施粉碎，但成本极高。Lee-ma科研中心正在采用分离提取法，提取纯度至98%以上的荷叶碱，并且取得了突破性的进展。同时美国的专利LUX膜内分离技术是国际最认可的荷叶碱提取工艺，能有效将第一道工序提取的荷叶碱进一步分离出杂质和水分（即超细小分子荷叶碱），生理性提纯至90%以上。