药学毕业论文开题报告篇3 题 目 名 称： 番泻叶对小鼠尿量的影响 研究现状： 一、普鲁兰酶 普鲁兰酶(Pullulanase，. 2. 1. 41)是一种能够专一性切开支链淀粉分支点中的α糖苷键，从而剪下整个侧枝，形成直链淀粉的脱支酶。普鲁兰酶还可以分解普鲁兰多糖，普鲁兰酶来源于微生物，R-酶则来源于植物。普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气气杆菌Aerobacter. aerogenes}(典型菌为肺炎克雷伯氏杆)发酵获得，他们报道了该酶良好的酶学性能。之后，各国的科研人员经过广泛深入研究，从不同的地区、微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。 在淀粉加工工业中，α淀粉酶最为常用，它的功能是水解淀粉的α-1,4糖苷键，单独用它时，产物中含有大量分支结构的糊精，其中就含有大量的α-1,6糖苷键。假如不把淀粉的α-1,6糖苷键彻底分解的话，势必会造成很大的浪费。自然界中，存在有能分解淀粉的α-1,6糖苷键的酶，通称为解支酶。如寡α-1,6葡萄糖苷酶( , Oligo-l,6-glucosidase )，普鲁兰酶( )，异淀粉酶( , Isoamylose )，支链淀粉一6-葡聚糖酶( )，其中普鲁兰酶要求的底物分子结构最小，故而可以将最小单位的支链分解，导致可以最大限度的利用淀粉，所以在淀粉加工工业中有着重要的用途和良好的市场前景。故而许多国家都争相开发，但是到现在为止，只有丹麦的NOVO公司具有普鲁兰酶的生产能力。我国只有向其进口，但是其价格昂贵，限制了普鲁兰酶在我国的应用。其实，我国早在七十年代就开发普鲁兰酶的产生菌，但是该菌的酶学性质不适合生产，至今我国在普鲁兰酶的国产化方面还没有报道。 在淀粉的加工行业上，对普鲁兰酶的酶学性质的要求是耐酸耐热，其原因是因为通常使用外加酶化法，由于所用酶类的限制，普鲁兰酶的添加可以在两步反应的任何一步，但必须满足上述的反应的条件。因此所开发的普鲁兰酶的酶学性质必须满足现有的酶法水解制糖的条件，也就是耐酸耐热。 二、普鲁兰酶的研究现状 1.产普鲁兰酶的微生物 普鲁兰酶最初是由Bender和Wallenfels于1961年通过产气杆菌(Aerobacter aerogenes)发酵获得。他们报道了该酶的良好性能之后，各国的科研人员经过广泛深入的研究，从不同的地区的微生物中获得该酶，掀起了开发普鲁兰酶的高潮。但是迄今为止，尽管发现许多微生物能够产普鲁兰酶，但是由于当今工业生产条件(酸性，温度)，大多数微生物所产的普鲁兰酶并无商业价值。以下便介绍一下普鲁兰酶的生产菌种。 蜡状芽抱杆菌覃状变种(Bacillus cereus ) 由日本的ToshiyukiTakasaki于1975年发现。该菌同时产生两种淀粉酶:β-淀粉酶和普鲁兰酶。最佳作用条件为pH6～，温度50℃，最大转化率(淀粉水解产生麦芽糖)大约为95%.酶学研究中发现，此酶在pH5，温度60℃依然保持大部分活性，该菌的营养细胞呈棒杆状，聚集成长短不等紊乱链状，无运动性，格兰氏阳性，产芽抱时细胞无明显膨胀。该菌最适生长温度30℃～37℃ ,最高生长温度在41℃～45℃，可以利用葡萄糖，甘露糖，麦芽糖，海藻糖，淀粉和糖原。 嗜酸性分解普鲁兰多糖芽抱杆菌() 上世纪八十年代初，丹麦Novo公司获得此菌，此菌所生产的普鲁兰酶耐热 (60℃)，耐酸()。该公司经过投入巨资开发研究，1983年Nov。公司在日本和欧洲市场同时商业化销售，商品名Prornozyme。如今，它是应用最广，产量最大的普鲁兰酶。呈棒状，深层发酵几小时后，可观察到类原生质体的膨胀细胞，较稳定，饱子呈圆柱体或椭圆体。格兰氏反应阳性，37℃生长良好，45℃以上和pI-1高于以上不长，在以普鲁兰糖为碳源的培养基(( ～)上生长良好。 枯草芽饱杆菌(Bacillus subtilis) 1986年，日本的Yushiyuki Takasaki报道了一株能产生耐热耐酸普鲁兰酶的菌种，被命名为Bacillus subtilis TU。此菌种所产生的酶为普鲁兰酶和淀粉酶的混合物，可水解淀粉为麦芽三糖和麦芽搪.水解普鲁兰糖为麦芽三糖，其中普鲁兰酶最佳作用pH为～，但在时亦有约50%的酶活，此普鲁兰酶最佳作用温度60℃。 耐热产硫梭菌(Clostridum Themosulfurogenes) 1987年.德国的等报道了一株能同时产a淀粉酶、普鲁兰酶和葡萄糖淀粉酶的菌种:耐热产硫梭菌。该菌种所产普鲁兰酶有较广的温度适应范围(40℃～85℃)，在～有较高的活性，在如此广的范围内都有较强活力无疑将扩大该普鲁兰酶的应用领域. Bacillusnaganoensis,Bacillus deramificans, 上世纪九十年代，Deweer发现了普鲁兰酶产生菌Bacillus naganoensis;Tomimura筛选出Bacillus deramifrcans。这两株菌所产的普鲁兰酶的酶学性质与Bacillus. Acidopullulyticus的酶学性质相似。这两株菌都是中度嗜酸菌，在以上就不生长，温度超过45℃以上同样也不生长。这两株普鲁兰酶产生菌的发现，进一步拓宽了普鲁兰酶的应用。 产普鲁兰酶的高温菌菌种 自上世纪八十年代以来，人们逐渐意识到在通常的自然条件下，很难筛选得到极端耐热的普鲁兰酶生产菌种，于是各国的科学家便把目光转移到温泉嗜高温细菌的筛选，而且现在已经取得较多的成果。Bacillus如vorcaldarius所产普鲁兰酶的最适温度和pH分别是75～85℃, , Thermotoga maritime的最适温度和pH分别是90℃, , Thermurs caldopHilus的最适温度和pH分别是75℃,, Fenidobacterion pernnavoran最适温度和pH分别是80～85℃, 2.普鲁兰酶的分子结构 至今为止，许多普鲁兰酶的基因己经被克隆，但是还没有见到任何有关普鲁兰酶结构的报道，但是在根据序列相似性对糖普键水解酶的分类，普鲁兰酶属于第13家族，α淀粉酶家族，这个家族中包含了30多种酶，可以分为水解酶，转移酶。异构酶三大类。这些酶能够水解和合成α～,α～,α～,α～,α～,α～糖苷键。其中很多酶的结构已经被报道，它们都采取了(β/α)8的结构，通过生物信息学的研究，这个家族的蛋白都有一个共同的结构，酶的活性中心都是(β/α)8折叠筒的结构，命名为结构域A。第13家族的大多数酶还具有结构域B，它是位于(β/α)8折叠筒中，第三个β片层与第三个α螺旋之间的一段序列，其特点是结构和长度差异较大，推测其功能是与底物的结合有关。在紧接着(β/α)8折叠筒后，还有C结构域，紧接C结构域，部分家族成员还有结构域D。 3.普鲁兰酶的应用 普鲁兰酶，在食品工业中是一种用途广泛的酶制剂和加工助剂。它能专一性分解淀粉中的支链淀粉和糖原分子及其衍生的低聚糖分支中的α～l, 6糖苷键，使分支结构断裂，形成长短不一的直链淀粉。因此，将该酶与 其它 淀粉酶配合使用时，可使淀粉糖化完全。近年来，普鲁兰酶己作为淀粉酶类中的一个新酶种，应用于淀粉为原料的食品等工业部门，在食品工业中有如下几方面的作用: 单独使用普鲁兰酶，使支链淀粉变为直链淀粉 直链淀粉具有凝结成块，易形成结构稳定的凝胶的特性，因此，可作为强韧的食品包装薄膜。这种薄膜对氧和油脂有良好的隔绝性，又因涂布开展性好，故适合于作为食品的保护层。它还适合于淀粉软糖制造，也可用作果酱增稠剂，用于装油脂含量高的食品，以防止油的渗出以及肉食品加工。近年来在食品工业中提倡使用可被生物降解的薄膜，直链淀粉在这些方面具有较大的发展前途。豆类直链淀粉含量较高，因此绿豆淀粉制成的粉丝韧性比其它淀粉好，如果用普鲁兰酶处理谷物淀粉，再制成直链淀粉后，可以制成高质量的粉丝。一般谷物淀粉中，直链淀粉含量仅占20%，支链淀粉含量约为80%。工业上每生产1吨直链淀粉就有4吨副产品的支链淀粉。美国虽然通过遗传育种的方法.得到含直链淀粉60%玉米新品种，但不大适于大量生产。国外已采用普鲁兰酶改变淀粉结构，可使支链淀粉变为直链淀粉。据报道，采用此法收率可达100%.制造直链淀粉的方法为，先采用普鲁兰酶分解经液化的分支部分，使其转变为直链淀粉，并以丁醇或缓慢冷却法沉淀淀粉。再回收含少量水分的晶型沉淀物，最后通过低温喷雾干燥法制成粉状的直链淀粉。 普鲁兰酶与β～淀粉酶配合使用生产麦芽搪 饴糖是我国传统的淀粉糖产品，其中所含部分麦芽糖，广泛用于糖果、糕点等食品工业。目前生产方法是以α～淀粉酶进行液化，再用β～淀粉酶水解支链淀粉，这样只能水解侧链部分。接近交叉地位的α～糖苷键时，水解反应停止。但如果使用普鲁兰酶共同水解，便能使分支断裂，提高淀粉酶水解程度，降低了β极限糊精的含量，大大提高了麦芽糖的产率，有利于生产麦芽搪浆。目前对加普鲁兰酶进行糖化己作了较大规模的试验。 试验条件为。每批投料量约为900公斤碎米，粉浆浓度为15～16Be°数皮用量(对碎米计)，β～淀粉酶活性2,000单位/克以上，;普鲁兰酶活性45,000～55,0 00单位/克，系由产气气杆菌生产，每批用量为1公斤。试验结果表明，加入普鲁兰酶糖化的试验糖与对照糖品相比，还原糖平均增加，麦芽糖含量平均增加了，糊精含量平均减少了高浓度麦芽糖浆较之高浓度葡萄搪浆，具有不易结晶，吸湿性小的特点，所以高浓度麦芽糖浆在食品工业中有着广泛的用途。采用普鲁兰酶与p一淀粉酶配合使用，成本低廉，麦芽糖收率达到70%左右，其至更高。 用于啤酒外加酶法糖化 啤酒生产中麦芽，既是酿造啤酒的主要原料，也为酿造过程提供了丰富的酶源。在啤酒酿造的糖化过程中，麦芽中分解淀粉的主要酶是α～淀粉酶、β～淀粉酶和分解淀粉α～1. 6糖瞥键的R一酶(植物普鲁兰酶或植物茁霉多糖酶)。β～淀粉酶与另两种淀粉酶协同作用，可使淀粉分解成麦芽糖(也包括少量的麦芽三糖和极少量的葡萄糖)和低分子糊精。使麦芽汁有比较理想的糖类组成。在工业生产中为了节约麦芽用量，采用所谓外加酶法糖化，即在减少麦芽用量的前提下，增加淀粉质辅助原料的比率，并加入适当种类的酶制剂进行搪化。要使大麦及其它辅助原料糖化完全，需要外加a一淀粉酶和分解α～糖苷键的普鲁兰酶制剂等。单独使用a一淀粉酶时产生麦芽糖和麦芽三搪是很不完全的。假如分解淀粉α～糖苷键的酶活性不足，淀粉分解就不完全，其结果是可发酵性糖含量低，制成的啤酒发酵度达不到要求。若采用能分解α～和α～糖苷键的糖化型淀粉酶，则其反应产物为葡萄糖，容易使酒味淡薄。采用普鲁兰酶与α～淀粉酶协同，效果良好，其分解产物主要是麦芽糖和少量的麦芽多糖。采用外加酶法糖化时，加入酶制剂的用量为:淀粉酶6～7单位/克大麦及大米:蛋白酶，60-80单位/克，并配合以菠萝蛋白酶10ppm，普鲁兰酶50单位/克大麦。以上三种酶制剂均添加于糖化或酒化开始。 总之，普鲁兰酶无论作为酶制剂和食品工业的加工助剂均有广阔的发展前途。 研究目的和意义： 酶制剂工业是上世纪七十年代就己经形成的一个重要的产业，目前世界酶制剂总产值达100亿美元，我国的产值约为100亿人民币，并且随着其应用领域的不断扩大以及新酶种的开发，这一市场正在迅猛发展。但是全球酶制剂产业几乎被几家外国公司所垄断，其中丹麦的NOVO公司几乎占全球总销售额的一半。本研究对普鲁兰酶的开发，对酶制剂产业的发展有重要的意义。 其次我国自从七十年代开始便对普鲁兰酶进行研究开发，但是所开发得到的普鲁兰酶，既不耐热也不耐酸，这就使其在工业化应用中受到了局限。为了改变我国对进口产品的依赖，填补我国这一领域的空白，寻找一条国产化的道路，本研究的目的是利用自然微生物资源，普鲁兰酶，提高我国淀粉原料的利用率，从而提高整个淀粉加工行业的生产率，这对我国淀粉加工产业的意义是不言而喻的。 研究内容(内容、结构框架以及重点、难点)： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集; (2)菌种初筛; (3)菌种复筛; (4)菌种保藏方法; (5)酶活力测定方法的建立。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响; (2)初始PH对发酵产酶的影响; (3)接种量对发酵产酶的影响; (4)发酵温度对产酶的影响; (5)金属离子对产酶的影响。 重点或关键技术： (1)纯菌株的分离; (2)菌株的鉴定方法的选择。 研究方法、手段： 一.普鲁兰酶产生菌的筛选 (1)样品的采集：选择适合产生的地点(面粉厂.菜地.果园等)采集土样 (2)菌种初筛：在采集的土样用无菌水稀释后，在含有淀粉类的培养基中做平板涂步， 37℃培养48h后，用碘液进行显色反应，将有淀粉酶产生的菌落接于斜面中保存。 (3)菌种复筛：将前期分离的能产生淀粉酶的菌株涂步于普鲁兰糖平板上，37℃培养48h后用95%乙醇进行透明圈实验。有透明圈产生说明菌株产生普鲁兰酶，将产生透明圈的菌落挑于斜面培养基培养。 (4)菌种保藏方法： 采用4℃低温保藏。 (5)酶活力测定方法的建立：采用发酵培养液经过离心后利用DNS显色法 520nm测定吸光值，测定标准葡萄糖标准曲线，利用标准曲线计算普鲁兰酶酶活大小。 二.产普鲁兰酶菌株的产酶条件的研究 (1)碳源，氮源对发酵产酶的影响：采用不同碳源，氮源培养基培养一段时间，测定酶活力。(其他条件相同：接种量，装瓶量，初始PH值，转速，培养时间。) (2)初始PH对发酵产酶的影响：采用相同发酵培养基，在不同初始PH下接种等量种子液。在相同条件下培养，测定发酵液的酶活。(其他条件相同：接种量，装瓶量，转速，最佳培养温度，最佳培养时间。) (3)接种量对发酵产酶的影响：在发酵培养基中分别接入2%，4%，6%，8%， 10%，14%，18%的种子培养液于最佳碳源，氮源，最佳初始PH的培养基中，在相同条件下培养，分别检测酶活。(采用以上确定的最佳碳源，氮源，最佳初始PH。) (4)发酵温度对产酶的影响：采用相同培养基，在不同温度下(25℃，30℃，35℃，40℃，45℃)培养一定时间，测定酶活力。 (5)金属离子对产酶的影响：在基础培养基中加入少量不同金属离子，发酵后测酶活。(金属离子有： 锰离子，钙离子，锌离子，镁离子，铁离子，铜离子。) 研究进度 ：完成项目总体进度30%，样品土样的采集及前期的准备工作,菌株的初筛，包括(样品土样原液的涂步培养及摇床培养，产支链淀粉酶菌株的挑选及斜面培养)。 ：完成项目总体进度50%,菌株的复筛，包括(产普鲁兰酶菌株的筛选及斜面培养),葡萄糖标准曲线的测定,酶活测定方法的建立,并以酶活大小对菌株进行再次筛选。 ：完成项目总体进度80%,产酶条件的研究。包括：碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。并通过各中单因素试验确定发酵培养基的最佳碳源，氮源，初始PH值，接种量，发酵温度，金属离子。 2009、4—2009、5 ：完成项目总体进度100%,课题总结，撰写论文。 文献综述(包括：国内外研究理论、研究方法、进展情况、存在问题、参考依据等) 自从1961年Bender H.等人在研究一株产气气杆菌Aerobacter aerogenes(典型菌为肺炎克雷伯氏杆菌)时首次发现普鲁兰酶后，国际上对产生这种酶的微生物进行了广泛研究，发现许多微生物可以产生此酶，并筛选出一些适用于工业化生产的优良菌株。随着该酶的应用发展，对耐热性普鲁兰酶的研究也逐渐增多，已成功克隆并表达了该酶的基因。国内1976年开始对一株产气气杆菌(Aerobacteraerogenes 10016)的普鲁兰酶进行研究，对该菌株的产酶条件、酶的分离提取及酶学性质作了报道，并研究了该酶的食品级提取技术。此外，陈朝银、刘涛等人从云南温泉水样中筛选到一株产普鲁兰酶高温栖热菌菌株，通过诱导等实验将该酶的酶活从提高到170u/mL，酶产量提高了近2500倍左右，酶的最适作用温度及pH分别是75℃和，具有一定的耐热和耐酸特性。 陈金全等从温泉水样中筛选到一株产耐热耐酸普鲁兰酶的野生菌株，并根据形态、生理生化特征、细胞化学组分分析及16SrDNA序列比对、基因组DNA的G+C摩尔百分含量、同源性比对等实验，鉴定其为脂环酸芽抱杆菌属(Alicyclobacillus)的一个新种，所产酶最适作用温度为60℃，最适pH值，具有较好的耐热耐酸特性。杨云娟等利用毕赤酵母成功构建了普鲁兰酶表达量较高的基因工程菌，摇瓶发酵酶活可达，最佳发酵条件下产量可达 .酶的最适作用温度为600C，最适pH值，具有较好的耐热耐酸性。目前我国仍没有具备独立生产普鲁兰酶能力的厂商，要实现低成本、国产化的生产，还有很长的路要走。 技术应用于耐热脱支酶的研究，使耐热异淀粉酶的研究有了很大发展。Coleman等人将嗜热厌氧菌T. brockii普鲁兰酶基因克隆到中得到的克隆子分泌的普鲁兰酶数量高于出发菌株，Okada等人将Bacillus Steanther, onhiu:中编码热稳定异淀粉酶的基因克隆到:中，得到的转化菌株其异淀粉酶能在60 ℃稳定15分钟。Burchadf将。ostridium thermosulf urogenes DSM38%的嗜热异淀粉酶基因克隆并在中表达，所得酶的最适pH和最适温度与出发菌相同，而且在高温下仍能保持活性.Antranikiam等人将Pyrococcus舟riousous的异淀粉酶基因克隆到中并分离得到了酶蛋白。尽管如此，目前尚未有已将转基因的耐热性异淀粉酶工程菌应用到工业生产中的报道。众所周知，利用物理和化学诱变剂单独或复合处理微生物细胞是选育高产变种菌株行之有效的经典方法，它在为培育多种抗生素、氨基酸、核苷酸激酶(尤其是蛋白酶和淀粉酶)的高产变种菌株方面曾经起过极为重要的作用，至今仍然是方便易行和行之有效的方法之一。 主要参考文献： [1][美]惠斯特勒等编王雏文等译.淀粉的化学与工艺学[M].北京：中国食品出版社，1988 [2]张树政.酶制剂工业[M]. 北京: 科学出版社，1998 [3]邬显章.酶的工业生产技术[M]. 吉林: 吉林科学技术出版社，1988 [4]Taniguchi H, Sakano Y, Ohnishi M, Okada G(1985) Pullulanase[J].TanpakushitsuKakusan Koso. Ju1;30(8):989-992. Japanese [5] Jensen, B. F., and B. E. Norman. 1984. Bacillus acidopullulyticus pullulanase[J].:application and regulatory aspects for use in the food industry. Process [6]Tomimura E, Zeman NW, Frankiewicz JR, Teague WM. [J]. Description of Bacillus naganoensis sp. J Syst Bacteriol. I 990 Apr; 40(2):123-125 [7]吴燕萍，等. 微生物法生产普鲁兰酶的研究[J]. 生物学技术, 2003，8(6)：14-17 [8]金其荣，等. 普鲁兰酶初步研究[J]. 微生物学通报, 2001，28(1):39-43 [9]程池. 普鲁兰酶Promozyme 200L. 及其生产菌种[J].食品与发酵工业，1992 ，(6) [10]唐宝英等.耐酸耐热普鲁兰酶菌株的筛选及发酵条件的研究[J].微生物学通报，2001 28(1):39-43 猜你喜欢： 1. 关于医学开题报告范文 2. 药学论文开题报告 3. 生物制药毕业论文开题报告范文 4. 药理学开题报告范文 5. 药品市场营销毕业论文开题报告 6. 药学论文题目大全
生物学是一门能打通很多跨界知识的学科。相比物理学等自然科学，生物学更深刻地揭示了世界的底层规律，其思想放之四海而皆准。下面我给大家带来生物类专业的论文题目及选题方向，希望能帮助到大家!
生物技术 毕业 论文选题
[1]生物技术本科拔尖创新型人才培养模式的探索与实践
[2]禽源HSP70、HSP40和RPL4基因的克隆和表达
[3]中间锦鸡儿CiNAC038启动子的克隆及对激素响应分析
[4]H9和H10亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测 方法 的建立
[5]单细胞测序相关技术及其在生物医学研究中的应用
[6]动物细胞工程在动物生物技术中的应用
[7]现代生物化工中酶工程技术研究与应用
[8]GIS在生物技术方面的应用概述
[9]现代生物技术中酶工程技术的研究与应用
[10]两种非洲猪瘟病毒检测试剂盒获批
[11]基因工程技术在生物燃料领域的应用进展
[12]基于CRISPR的生物分析化学技术
[13]生物信息技术在微生物研究中的应用
[14]高等工科院校创新型生物科技人才培养的探索与实践
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[19]鸡细小病毒与H_9亚型禽流感病毒三重PCR检测方法的建立
[20]基于化学衍生-质谱技术的生物与临床样本中核酸修饰分析
[21]合成生物/技术的复杂性与相关伦理 政策法规 研究的科学性探析
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[23]应用型本科高校生物技术专业课程设置改革的思考
[24]知识可以改变对转基因食品的态度吗?——探究科技争议下的极化态度
[25]基因工程在石油微生物学中的研究进展
[26]干细胞技术或能延缓人类衰老速度
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[29]合成生物学与专利微生物菌种保藏
[30]加强我国战略生物资源有效保护与可持续利用
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[33]生物技术推进蓝色经济——NOAA组学战略介绍
[34]人工智能与生物工程的应用及展望
[35]中国合成生物学发展回顾与展望
[36]桓聪聪.浅谈各学科领域中生物化学的发展与应用
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[38]现代化技术在农业 种植 中的应用研究
[39]生物技术综合实验及其考核方式的改革
[40]生物技术处理船舶舱底含油污水
[41]校企合作以产学研为平台分析生物技术类人才培养
[42]生物技术专业“三位一体”深化创新创业 教育 改革
[43]基于环介导等温扩增技术的生物传感器研究进展
[44]分子生物学技术在环境工程中的应用
[45]生物有机化学课程的优化与改革
[46]地方农业高校生物技术专业“生物信息学”课程的教学模式探索
[47]不同育种技术在乙醇及丁醇高产菌株选育中的应用
[48]探秘生命的第三种形式——我国古菌研究之回顾与展望
[49]适应地方经济发展的生物技术专业应用型人才培养模式探索
[50]我国科研人员实现超高密度微藻异养培养
生物教学论文题目
1、本地珍稀濒危植物生存现状及保护对策
2、中学生物实验的教学策略
3、如何上好一节生物课
4、中学生生物实验能力的培养
5、激活生物课堂的教学策略
6、中学生物课堂教学中存在的问题及对策
7、中学生物教学中的创新教育
8、本地生物入侵的现状及其防控对策
9、论生物多样性与生态系统稳定性的关系
10、室内环境对人体健康的影响
11、糖尿病研究进展研究及策略
12、心血管病研究进展研究及策略
13、 儿童 糖尿病的现状调查研究
14、结合当地遗传病例调查谈谈对遗传病的认识及如何优生
15、“3+X”理科综合高考试题分析
16、中学生物教学中的差生转化教育
17、中学生物学实验教学与学生创新能力的培养
18、在当前中学学科分配体制下谈谈如何转变学生学习生物学的观念
19、中学生物教学中学生科学素养的提高
20、直观教学在中学生物学教学中的应用
21、中学生物学实验教学的准备策略
22、编制中学生物测验试题的原则与方法
23、浅析生态意识的产生及其培养途径
24、生物入侵的危害及防治对策
25、城镇化建设对生态环境的影响
26、生态旅游的可持续发展-以当地旅游区为例
27、城市的生态环境问题与可持续发展
28、农村的生态环境问题及其保护对策-以当地农村为例
29、全球气候变化与低碳生活
30、大学与高中生物学教育的内容与方法衔接的初步研究
31、国内、国外高中生物教材的比较研究
32、中学生物实验教学模式探索
33、河北版初中生物实验教材动态分析研究 “
34、幼师生物学教材改进思路与建议
35、中学生物学探究性学习的课堂评价体系研究及实践
36、中学生物双语教材设计编写原则探索与研究
37、信息技术应用于初中生物课研究性学习的教学模式构想
38、生物学课堂教学中学生创新能力培养的研究与实践
39、中学生物学教学中的课程创生研究初探
40、信息技术与中学生物学教学的整合
41、中学生物学情境教学研究
42、游戏活动在高中生物学教学中的实践与思考
43、合作学习在高中生物教学中的实践性研究
44、尝试教学法在高中生物教学中的应用与研究
45、生物科学探究模式的研究与实践
46、生物课堂教学引导学生探究性学习的实践与探索
47、白城市中学生物师资队伍结构现状的调查及优化对策
48、结合高中生物教学开展环境教育的研究
49、让人文回归初中生物教育
50、课程结构的变革与高中生物新课程结构的研究
51、在中学生物教学中，如何培养学生的创新能力
52、在中学生物教学中如何激发学生的学习兴趣
53、实验在中学生物教学中的重要性探讨
54、中学生物教学现状研究
55、中学生物课堂教学艺术探讨
56、“生态系统”一节的 教学方法 探讨
57、中学生物教学中的学生科学素质培养
58、初中生物教学中观察能力的培养
59、浅谈生物教学中的科学素质教育
60、中学生物探究性教学的实践与思考
生物技术本科毕业论文题目
1、生物反馈技术在运动性疲劳监控中的应用研究
2、微流控生物催化技术酶促合成天然产物的增效机理研究
3、海洋生物污损过程的分子标记技术研究
4、浮游生物多样性高效检测技术的建立及其在渤海褐潮研究中的应用
5、基于QCM生物传感器技术的组氨酸标签蛋白芯片和悬浮细胞芯片的研制及其应用
6、蛋白核小球藻油脂检测技术评价及光生物反应器培养的研究
7、基因工程制备微藻生物柴油中两项关键技术的研究
8、农业水污染治理环节中的生物技术应用问题研究
9、人工构建耐热大肠杆菌的分子设计与应用
10、我国合成生物技术产业发展战略及政策分析
11、基于原子力显微镜的细胞生物特征识别技术研究
12、利用菊粉和木薯淀粉生产高浓度山梨醇和葡萄糖酸的生物技术
13、转基因生物安全评价中的非科学因素探究
14、面向分子生物系统的计算技术应用研究
15、大规模生物数据中的生物信息挖掘技术研究
16、电化学生物传感技术用于重金属和蛋白质的检测
17、电化学生物传感技术用于单碱基突变与蛋白质的检测
18、基于功能核酸的生物传感技术的研究
19、论我国生物技术专利保护
20、纳米生物相关技术专利分析系统设计与开发
21、生物技术发展困境及其人文 反思
22、基因发明专利制度相关问题分析
23、转基因动物专利研究
24、GAPDH作为原核及真核生物通用型内标蛋白的研究及相关生物技术研发
25、基于生物信息与影像技术识别材料缺陷的研究
26、基于金属纳米材料的光学生物传感技术用于酶活性的检测
27、DNA assembler技术在顺
28、晋西黄土高原生物农业发展初探
29、睡眠剥夺差异表达基因的筛选及生物信息学分析
30、太赫兹时域光谱技术对生物组织的初步研究
31、我国农业转基因生物技术安全管理研究
32、人类基因专利战略布局
33、Web Services和XML技术在生物信息数据发布及整合中的应用
34、面向快速成型技术高分子生物医学材料的研究
35、化学修饰电极与液相色谱-电化学检测技术联用在生物分析中的应用
36、小型底栖生物样品自动分离技术研究
37、激光诱导荧光技术及其在生物仪器中的应用
38、强电场常压离子注入方法研究
39、生物信息学中的模式发现算法研究
40、聚类和分类技术在生物信息学中的应用
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浅谈食用菌产业发展的前景 农民脱贫致富的“短、平、快”项目 食用菌是农村脱贫致富奔小康的“短、平、快”项目，具有显著的经济、社会和生态效益。自然界有大型真菌3800——4000种，其中食用菌约2000种。目前世界上人工栽培的食用菌已超过40多种。食用菌对观代人的诱惑，不仅仅在于它色香俱佳，老幼皆宜，更重要它是安全、优质、保健、无污染、高营养的天然绿色食品，已被国际公认为是绿色食品中的珍宝。因此，在我市开发食用菌产业有很大潜力。 —、发展机遇良好我国栽培食用菌的历史悠久，是世界上最早认识、食用、栽培食用菌的国家之一。在国家实施“星火计划”、“扶贫计划”、“菜篮子工程”等一系列重大举措中，都把食用菌列为重点项目。目前，市委提出“举特色旗，走富民路、建小康市”的总体目标和“一纲九目”的发展思路,给我市食用菌特色产业发展创造了前所未有的机遇。 近年来，我市食用菌产业虽然没有形成规模化，缺乏宏观调控，种类单一，品种老化，科技含量低，呈无序状生产。但是，市委、市政府对食用菌产业高度重视，安排县级分管领导牵头，积极争取食用菌开发项目，建立健全食用菌开发和科研机构，引导科技工作者和广大群众用先进的生产技术和管理方法，培育高产、抗杂的优质品种，利用玉米芯、麦秸、稻草、木屑、豆秸等农林作物废弃的下脚料大规模生产木耳、香菇、猴头、银耳、金针菇、平菇、天麻、猪苓等食药用菌，并在全市范围内建立产、供、销一条龙的服务体系，有效调整农业产业结构，切实增加农民收入，努力提高城乡居民生活水平，大力发展区域经济，真正做到把食用菌产业做大做强，使其成为我市社会主义新农村建设的生力军。 二、增收效果明显食用菌是农民增收的重要项目之一，该项目投资省、见效快、消耗低、产出大、效益好。我市地处甘肃东南部，气候温和，雨量充沛，光热资源丰富，食用菌种类和栽培食用菌的原料较多，适宜各种食用菌的生长发育。如在大田的生态条件下，一年生产六茬，每667m2地一年可产菇(耳)24000千克，年产值51000元，纯盈利27000元，是当地蔬菜生产效益的10倍；庭院经济栽培面积，年产鲜菇(耳)千克，年产值元，年利润元，一个五口之家，人均收入元。康县、武都区、文县、徽县、成县等县(区)的一些乡镇不少农民因在家庭小规模栽培平菇、木耳、香菇、金针菇、猪苓、天麻等而过上了幸福的日子，一部分群众已迈上小康路。由此说明，发展食用菌可获得显著的经济效益。 三、保健性能突出食用菌中含有丰富的蛋白质、脂类、无机盐、维生素和活性酶，是人体必须的营养物质，具有提高免疫力、延缓衰老、促进生长发育、改善肠胃功能、增强记忆力、改善骨质疏松、调节血脂、降低血糖、抗癌、美容减肥十大保健功能，长期食用有利健康，防治高脂血症、高血压、动脉硬化、冠心病、糖尿病、肥胖症等现代病。营养科学家综合评定结果发现，食用菌是优质的绿色食品。 近年来，随着社会的进步、科技的发展、饮食观念的更新和整体生活水平的提高，用食用菌制成的酒类、饮料、调料、冲剂、酱渍、方便食品、风味食品等系列保健食品，以其天然的质地日益受到人们的喜爱。菌类食品逐渐被人们重视并发展起来，正在成为重要菜肴部分，已融入百姓的餐饮之中。科学养生，增进健康，追求三低一高(即低盐、低糖、低脂肪、高蛋白)的健康饮食新观念，将成为陇南人民新的饮食潮流。 四、市场前景广阔目前，陇南市场上虽然有平菇、香菇、金针菇、木耳、双孢蘑菇、猴头、银耳、茶树菇、竹荪、牛肝菌、天麻、猪苓等食用菌，但这些菌类产品大部分都是从康县、汉中等地出产的。如果有效地整合食用菌科技资源，建立和完善食用菌科技开发机构，引导和开发食用菌产业，促进科技成果向生产力转化，为人们生产高蛋白、低脂肪、低热量的食用菌保健食品。这样，不但可以满足当地市场的需求，提高人们生活水平，而且还能出口创汇，增加农民收入，加快全市社会主义新农村建设步伐。 21世纪初是我国现代化建设三步战略目标的关键时期，人民生活将提高到一个新水平，据有关专家预言，食用菌将成为21世纪的主要食品之一。这给食用菌产业提供了广阔的国内市场，同时由于我国已加入WTO，也为食用菌产业发展开辟了广阔的国际市场。专家预计，2010年我国食用菌鲜品总产量将达到一个新的高度，出口创汇近8亿美元，2015年将出口创汇约9亿美元。可见，在我市发展食用菌产业前景广阔。
会存档的 一稿 二稿 定稿 都要存档，你毕业的时候就知道了，如果是优秀毕业论文还要发表
北京交通大学本科毕业论文留存时间是纸质文档将会保存5至6年，但电子版学校会一直保存，教育局相关部门还会进行复查，以抽查的形式。本科论文毕业后查重的原因可能有上级领导检查，或是毕业后教育部抽查，刚好抽到你，还有一种情况就是有人检举，或者在其他需要上，需要进行论文查重，论文七年后查重的结果是没有通过，那么你的学位也会被取消。关于学位论文造假问题，教育部令《学位论文作假行为处理办法》第三条，学位论文作假行为包括下列情形：购买、出售学位论文或者组织学位论文买卖的；由他人代写、为他人代写学位论文或者组织学位论文代写的；剽窃他人作品和学术成果的；伪造数据的；有其他严重学位论文作假行为的。第七条 学位申请人员的学位论文出现购买、由他人代写、剽窃或者伪造数据等作假情形的，学位授予单位可以取消其学位申请资格；已经获得学位的，学位授予单位可以依法撤销其学位，并注销学位证书。取消学位申请资格或者撤销学位的处理决定应当向社会公布。从做出处理决定之日起至少3年内，各学位授予单位不得再接受其学位申请。《高等学校预防与处理学术不端行为办法》第二十七条经调查，确认被举报人在科学研究及相关活动中有下列行为之一的，应当认定为构成学术不端行为：剽窃、抄袭、侵占他人学术成果；篡改他人研究成果；伪造科研数据、资料、文献、注释，或者捏造事实、编造虚假研究成果；未参加研究或创作而在研究成果、学术论文上署名，未经他人许可而不当使用他人署名，虚构合作者共同署名，或者多人共同完成研究而在成果中未注明他人工作、贡献；在申报课题、成果、奖励和职务评审评定、申请学位等过程中提供虚假学术信息；买卖论文、由他人代写或者为他人代写论文；其他根据高等学校或者有关学术组织、相关科研管理机构制定的规则，属于学术不端的行为。第二十八条有学术不端行为且有下列情形之一的，应当认定为情节严重：造成恶劣影响的；存在利益输送或者利益交换的；对举报人进行打击报复的；有组织实施学术不端行为的；多次实施学术不端行为的；其他造成严重后果或者恶劣影响的。教育部印发《本科毕业论文（设计）抽检办法（试行）》（以下简称《办法》），要求自2021年1月1日起，启动本科毕业论文（设计）（以下简称本科毕业论文）抽检试点工作，要求抽检每年进行一次，抽检对象为上一学年度授予学士学位的论文，抽检比例原则上应不低于2%，过往的博士论文抽查比例10%，硕士论文抽查比例5%，有些地区或学校自查比例会更高，博士论文抽查比例有报道部分院校达到50%的抽查比例。现在大多数学校都是在毕业论文答辩前都要求学生自行论文检测，或每年本校按一定的抽查比例进行抽检，现在抽查都是有专门的检测系统进行对比，知网，维普等等系统，相信大学的图书馆或内网系统都提供这种服务。毕业论文或设计的一般检测“文字复制比R”（指被检测毕业论文（毕业设计）与非本人学术成果的文字重合字数占全文的百分比）参数为准，以下为参考标准：以上标准为本科论文，不一定对所有院校专业适用，保险的一点的标准是20%以下的查重率，20%~30%都要谨慎处理，表格标准范围及处理办法不一定适用用所在院校或专业要求。
是放在学校图书馆归档的。同时学校对数字版本的也有保存。论文就是学校的研究成果，当然要保存起来，不会销毁的
（1）急性败血症 1～4周龄鸡最为常见。本型对肉仔鸡危害较大。最急性无症状突然死亡。病程稍长的病鸡精神沉郁、羽毛松乱，食欲减退，排黄白色稀粪，肛门周围有粪污，个别有神经症状。伴有脐炎、心包炎及肠炎。发病率和死亡率较高。急性死亡鸡剖检表现，肝脏肿大，色深红，有的呈绿色，部分鸡肝上有灰白色小的坏死灶，胆囊胀大。肺呈灰红色，表面有出血斑点。腹腔及心包有淡黄色渗出液。亚急性败血症表现为心包膜混浊、增厚、心包内充满淡黄色纤维素性渗出物，有时心包与心肌粘连，常伴发心肌炎。肝脏肿大，浆膜表面有灰白色纤维素性渗出物，严重者表面被覆一层纤维素性膜。气囊混浊、增厚、上有纤维素样渗出物。上述纤维素性炎症是大肠杆菌感染的典型症状，具有临床诊断意义。
（2）卵黄性腹膜炎 主要发生于笼养蛋鸡和种鸡。病鸡腹腔和输卵管发生炎症。病鸡表现腹部膨胀、重坠，走路摇摆。腹膜炎产生的大量毒素可引起病鸡死亡。剖检可见纤维素性腹膜炎，腹腔内有大量凝固性卵黄或淡黄色腥臭蛋黄液，肠道及腹腔浆膜有多量淡黄色纤维素性渗出物附着，易剥离。严重时肠道或脏器间发生粘连。
（3）输卵管炎 多见于产蛋期母鸡。大多表现为慢性输卵管炎。病鸡粪便中含有蛋清，凝固蛋白或蛋黄。发病鸡群产蛋量下降，并产出畸形蛋和带菌蛋，严重者会停止产蛋甚至死亡。剖检病初输卵管黏膜充血、出血，内有多量淡黄色或黄色纤维素性渗出物，内有凝固的卵黄或蛋白存留。后期输卵管变性、黏膜脱落，内有干酪样坏死物团块。该病型在人工授精的种鸡群中常有发生。
（4）生殖器管病 此型危害产蛋母鸡和公鸡，绝大多数发生于产蛋期，以产蛋初期发病率和死亡率较高。主要通过人工授精、交配和泄殖腔感染引起。发病母鸡除有卵黄性腹膜炎和输卵管炎症状及病变外，卵巢病变较为严重。患病公鸡阴茎肿大充血，有时有干酪样结节。从上述病变部位均可分离出致病性大肠杆菌。
（5）关节炎及足垫肿 本型多见于幼、中雏，病雏关节、足垫肿胀，跛行，运动和采食困难。少数可在1～2周内康复，但大部分因维持慢性感染而导致生长发育停滞最终淘汰。从此类病鸡的关节和足垫中常能分离到大肠杆菌。
（6）脐炎和卵黄囊炎 主要见于孵化后期的胚胎和1～2周龄的雏鸡。卵黄囊、脐部及周围组织发炎，死亡率3%～10%，严重者可达40%。病雏卵黄吸收不良，脐部闭合不全，胀大，卵黄呈青绿色或褐色，严重者呈豆腐渣样。
（7）死胚及孵化率低下 当致病性大肠杆菌经蛋传播或穿透蛋壳进入蛋内即可发生。胚胎死亡多见于孵化后期。出壳后死雏、弱雏增多，常在1～7日龄内引起大批雏鸡死亡。
（8）眼球炎 病鸡眼皮肿胀，眼内蓄积脓性分泌物，呈灰白色，角膜混浊。本型一般呈零星散发，多见于单眼发炎，常导致失明。
（9）肠炎 1日龄死亡1%～5%，11～38日龄死亡3%～10%，严重拉稀或腹泻，粪便稀薄，呈灰白色或黄绿色，肛门下羽毛潮湿污秽并粘结。肠黏膜充血、出血，泄殖腔黏膜潮红。
（10）大肠杆菌性脑病（神经型）大肠杆菌某些血清型可突破鸡的血脑屏障进入脑内，引起鸡昏睡、瘫痪，歪头转圈、头颈震颤、食欲废绝。发病率达10%～25%。病变主要见于头部皮下出血。骨质炎波及几乎整个头骨，并损害脑硬膜，使之出血、糜烂，脑软膜充血，膜下有少量黄色渗出物。脑内大肠杆菌的分离率达94%。本病的发生除与菌株的血清型及其嗜组织特性有关外，还与高温应激有关。另外该型也可与慢性呼吸道病、传染性鼻炎、传染性支气管炎等继发或混合感染。
（11）肉芽肿 本型较少见，但某些血清型亦可引起很高死亡率。特征是在鸡的盲肠、十二指肠、肠系膜等处出现典型的菜花状肉芽肿。病变可从很小的结节到大块组织坏死。
（12）肿头综合征（SHS）主要发生于4～6周龄肉鸡，由大肠杆菌和冠状病毒共同引起。病鸡头部毛细血管受损，造成皮下水肿。
（13）皮肤病变 多见肉鸡的皮肤蜂窝织炎（靠近泄殖腔部，大腿部，偶尔见于背部）在屠宰脱毛后方能发现。在肉禽处理场，本病的淘汰率平均为～，有时可超过5%。肉眼见突起的皮肤呈淡黄色或赤褐色，偶尔见结痂。皮下组织见浆液性、纤维素性渗出物、化脓性渗出物或肉芽组织。
鸡大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的一种常见多发病。其中包括大肠杆菌性腹膜炎、输卵管炎、脐炎、滑膜炎、气囊炎、肉芽肿、眼炎等多种疾病，对养鸡业危害较大。流行特点各种年龄的鸡均可感染，但因饲养管理水平、环境卫生、防治措施的效果，有无继发其它疫病等因素的影响，本病的发病率和死亡率有较大差异。集约化养鸡在主要疫病得到基本控制后，大肠杆菌病有明显的上升趋势，已成为危害鸡群主要细菌性疾病之一，应引起足够重视。大肠杆菌在自然环境中，饲料、饮水、鸡的体表、孵化场、孵化器等各处普遍存在，该菌在种蛋表面、鸡蛋内、孵化过程中的死胚及毛液中分离率较高。因经构成了养鸡全过程的威胁。本病在雏鸡阶段、育成期和成年产蛋鸡均可发生，雏鸡呈急性败血症经过，火鸡则以亚急性或慢性感染为主。多数情况下因受各种应激因素和其它疾病的影响，本病感染更为严重。成年产蛋鸡往往在开产阶段发生，死淘率增多，影响产蛋，生产性能不能充分发挥。种鸡场发生，直接影响到种蛋孵化率、出雏率，造成孵化过程中死胚和毛蛋增多，健雏率低。本病一年四季均可发生，每年在多雨、闷热、潮湿季节多发。大肠肝菌病在肉用仔鸡生产过程中更是常见多发病之一。临床表现鸡大肠杆菌病没有特征的临床表现，但与鸡只发病日龄、病程长短、受侵害的组织器官及部位、有无继发或混合感染有很大关系。（1）初生雏鸡脐炎，俗称“大肚脐”。其中多数与大肠杆菌有关。病雏精神沉郁，少食或不食，腹部大，脐孔及其周围皮肤发红，水肿。此种病雏多在一周内死亡或淘汰。另一种表现为下痢，除精神、食欲差，可见推出泥土样粪便，病雏1－2天内死亡。死亡不见明显高峰。（2）在育雏期间其中包括肉用仔鸡的大肠杆菌病，原发感染比较少较少见，多是由于继发感染和混合感染所致。尤其是当雏鸡阶段发生鸡传染性法氏囊病的过程中，或因饲养管理不当引起鸡慢性呼吸道疾病时常有本病发生。病鸡食欲下降、精神沉郁、羽毛松乱、拉稀。同时兼有其它疾病的症状。育成鸡发病情况大致相似。（3）产蛋阶段鸡群发病，多由饲养管理粗放，环境污染严重，或正值潮湿多雨闷热季节发生。这种情况一般以原发感染为主。另外可继发于其它疾病如鸡白痢、新城疫、传染性支气管炎、传染性喉气管炎和慢性呼吸道疾病发生的过程中。主要表现为产蛋量不高，产蛋高峰上不去，产蛋高峰维持时间短，鸡群死淘率增加。病鸡临床表现有如鸡冠萎缩、下痢、食欲下降等表现。3、病理剖检变化 初生雏鸡脐炎死后可见脐孔周围皮肤水肿、皮下瘀血、出血、水肿，水肿液呈淡黄色或黄红色。脐孔开张，新生雏以下痢为主的病死鸡以及脐炎致死鸡均可见到卵黄没有吸收或吸收不良，卵囊充血、出血、囊内卵黄液粘稠或稀薄，多呈黄绿色。肠道呈卡他性炎症。肝脏肿大，有时见到散在的淡黄色坏死灶，肝包膜略有增厚。与霉形体混合感染的病死鸡，多见肝脾肿大，肝包膜增厚，不透明呈黄白色，易剥脱。在肝表面形成的这种纤维素性膜有的呈局部发生，严重的整个肝表面被此膜包裹，此膜剥脱后肝呈紫褐色；心包炎，心包增厚不透明，心包积有淡黄色液体；气囊炎也是常见的变化，胸、腹等气囊囊壁增厚呈灰黄色，囊腔内有数量不等的纤维素性渗出物或干酪样物如同蛋黄。有的病死鸡可见输卵管炎，粘膜充血，管腔内有不等量的干酪样物，严重时输卵管内积有较大块状物，输卵管壁变薄，块状物呈黄白色，切面轮层状，较干燥。有的腹腔内见有外观为灰白色的软壳蛋。较多的成年鸡还见有卵黄性腹膜炎，腹腔中见有蛋黄液广泛地布于肠道表面。稍慢死亡的鸡腹腔内有多量纤维素样物粘在肠道和肠系膜上，腹膜发炎，腹膜发炎，腹膜粗糙，有的可见肠粘连。大肠杆菌性肉芽肿较少见到。小肠、盲肠浆膜和肠系膜可见到肉芽肿结节，肠粘连不易分离，肝脏则表现为大小不一、数量不等的坏死灶。其它如眼炎、滑膜炎、肺炎等只是在本病发生过程中有时可以见到。总之，根据本病流行特点和较典型的病理变化，可以作出诊断。临床诊断用实验室病原检验方法，排除其他病原感染（病毒、细菌、枝原体等），经鉴定为致病性血清型大肠杆菌，方可认为是原发性大肠杆菌病；在其他原发性疾病中分离出大肠杆菌时，应视为继发性大肠杆菌病。防治方法鉴于该病的发生与外界各种应激因素有关，预防本病首先是在平时加强对鸡群的饲养管理，逐步改善鸡舍的通风条件，认真落实鸡场兽医卫生防疫措施。种鸡场应加强种蛋收集、存放和整个孵化过程的卫生消毒管理。另外应搞好常见多发疾病的预防工作。所有这些对预防本病发生均有重要意义。鸡群发病后可用药物进行防治。在防治本病过程中发现，大肠杆菌对药物极易产生抗药性，如青霉素、链霉素、土霉素、四环素等抗生素几乎没有治疗作用。氯霉素、庆大霉素、氟哌酸、新霉素有较好的治疗效果。但对这些药物产生抗药性的菌株已经出现且有增多趋势。因此防治本病时，有条件的地方应进行药敏试验选择敏感药物，或选用本场过去少用的药物进行全群给药，可收到满意效果。早期投药可控制早期感染的病鸡，促使痊愈。同时可防止新发病例的出现。鸡已患病，体内已造成上述多种病理变化的病鸡治疗效果极差。本病发生普遍，各种年龄的鸡均可发病，药物治疗效果逐渐降低而且又增加了养鸡的成本。国内已试制了大肠杆菌死疫苗，有鸡大肠杆菌多价氢氧化铝苗和多价油佐剂苗，经现场应用取得了较好的防治效果。由于大肠杆菌血清型较多，制苗菌株应该采自本地区发病鸡群的多个毒株，或本场分离菌株制成自家苗使用效果较好。种鸡在开产前接种疫苗后，在整个产蛋周期内大肠杆菌病明显减少，种蛋受精率、孵化率，健雏率有所提高，减少了雏鸡阶段本病的发生。在给成年鸡注射大肠杆菌油佐剂苗时，注苗后鸡群有程度不同的注苗反应，主要表现精神不好，喜卧，吃食减少等。一般1－2天后逐渐消失，无须进行任何处理。因此应在开产前注苗较为合适。开产后注苗往往会影响产蛋。预防指南1、优化环境（1）选好场址和隔离饲养，场址应建立在地势高燥、水源充足、水质良好、排水方便、远离居民区（最少500m），特别要远离其他禽场，屠宰或畜产加工厂。生产区与生产区及经营管理区分开，饲料加工、种鸡、育雏、育成鸡场及孵化厅分开（相隔500m）。（2）科学饲养管理：禽舍温度、湿度、密度、光照、饲料和管理均应按规定要求进行。（3）搞好禽舍空气净化：降低鸡舍内氨气等有害气体的产生和积聚是养鸡场必须采取的一项非常重要的措施。常用方法如下：①饲料内添加复合酶制剂：如使用含有β～葡聚糖的复合酶，每吨饲料可按1kg添加，可长期使用。②饲料内添加有机酸：如延胡索酸、柠檬酸、乳酸、乙酸及丙醇等。③使用微生态制剂：A：可赛优；B：EM制剂，国产商品名称为“亿安”。④药物喷雾：A、过氧乙酸，常规方法是用0.3%过氧乙酸。按30ml/m3喷雾，每周1～2次，对发病鸡舍每天1～2次。B、多聚甲醛：在25m2垫料中加入多聚甲醛，它可和空气中氨中和，氨浓度很快下降到5×10-6，但21d后又回升到100×10-6，因此应重新使用。⑤惠康宝使用：该制剂是由丝兰科植物茎部提取物，主要成分是沙皂素。⑥寡聚糖又称寡糖，A、糖萜素，使用方法，蛋鸡（鸭）400×10-6（配以25%大蒜素50×10-6），肉仔鸡400～450×10-6，猪300～350×10-6拌料。B、飞尔达2000，使用添加剂（抖料或饮水），发病群（如MD、ND、IB、IBD、AI）等增加～，连用3～5d后，再按添加使用。C、速达菌毒清，使用方法：肉仔鸡保健程序，1～10日龄、21～30日龄、31～40日龄及41～50日龄各阶段饮用4～5d，每毫升速达菌毒清加水1kg饮用。蛋鸡保健程序，每隔10d饮水4d，其他同上。⑦机械清除：及时清粪，并堆积密封发酵，及时通风换气。⑧重视环境治理，饲养场地绿化，种草植树。2、加强消毒（1）种蛋，孵化厅及禽舍内外环境要搞好清洁卫生，并按消毒程序进行消毒，以减少种蛋、孵化和雏鸡感染大肠杆菌及其传播。（2）防止水源和饲料污染：可使用颗粒饲料，饮水中应加酸化剂（唬利灵）或消毒剂，如含氯或含碘等消毒剂；采用乳头饮水器饮水，水槽料槽每天应清洗消毒。（3）灭鼠、驱虫。（4）禽舍带鸡消毒有降尘、杀菌、降温及中和有害气体作用。3、加强种鸡管理（1）及时淘汰处理病鸡。（2）进行定期预防性投药和做好病毒病、细菌病免疫。（3）采精、输精严格消毒，每鸡使用一个消毒的输精管。4、提高禽体免疫力和抗病力（1）疫苗免疫：可采用自家（或优势菌株）多价灭活佐剂苗。一般免疫程序为7～15日龄，25～35日龄，120～140日龄各一次。（2）使用免疫促进剂：首选乳化维生素ADE，左旋咪唑200×10-6。Vc（高稳西为微囊化Vc）按～拌饲或饮水；～2万u/kg饲料拌饲；加强维他旺多维按饮水连用3～5d。亿妙灵：可以用于细菌或细菌病毒混合感染的治疗，提高疫苗接种免疫效果，对抗免疫抑制和协同抗菌素的治疗。使用方法，预防：1：2000倍，治疗：1000倍，加水稀释，每天1次，1h时内饮完，连用3d（预防）及5d（治疗）。（3）搞好其他常见病毒病的免疫：如ND、IB、IBD、MD、及AI等。（4）控制好枝原体，传染性鼻炎等细菌病，可做好疫苗免疫和药物预防。5. 药物防治应选择敏感药物在发病日龄前1～2d进行预防性投药，或发病后作紧急治【1】抗生素（1）青霉素类A、氨苄青霉素（氨苄西林）：按饮水或按5～10mg/kg拌料内服。B、阿莫西林：按饮水。（2）头孢菌素类头孢菌素类是以冠头孢菌培养得到的d然头孢菌素作原料，经半合成改造其侧链而得到的一类抗生素，常用的有20种，按其发明年代的先后和抗菌性能不同而分为1～4代。第三代有头孢噻肟钠（头孢氨噻肟），头孢曲松钠（头孢三嗪），头孢呱酮纳（头孢氧哌唑或先锋必），头孢他啶（头孢羧甲噻肟、复达欣），头孢唑肟（头孢去甲噻肟），头孢g肟（世伏素，FK207），头孢甲肟（倍司特g），头孢木诺纳、拉氧头孢钠（羟羧氧酰胺菌素、拉他头孢）。先锋必1g/10l水，饮水，连用3d，首次为1g/7l水。八仙宝：水，连用3d，首次为1g/7l水。（3）氨基糖苷类庆大霉素：2～4万u/l饮水。卡那霉素：2万u/l饮水或1～2万u/kg肌注，每日一次，连用3d。硫酸新霉素：饮水或拌饲。链霉素：30～120mg/kg饮水，13～55g/吨拌饲，连用3～5d。（4）四环素类土霉类：按～拌饲或饮水，连用3～5d。强力霉素：～拌饲，连用3～5d。四环素：～拌饲，连用3～5d。（5）酰胺醇类氯霉素：按～拌饲，连用3～5d或按40mg/kg肌汪。甲砜霉素：按～拌饲，连用3～5d。（6）大环内脂类红霉素：50～100g/吨拌饲，连用3～5d。泰乐菌素：～拌饲，连用3～5d。泰妙菌素：125～250g/吨饲料，连用3～5d。【2】合成抗菌药（1）磺胺类磺胺嘧啶（SD）：拌饲，～饮水，连用3d。磺胺喹恶啉（SQ）：～拌饲，～饮水，连用2～3d，停2d，再用3d。（2）硝基呋喃类呋喃唑酮：～混饲，～饮水，连用3～5d，一般不超过7d。（3）喹诺酮类环丙沙星、恩诺沙星、洛美沙星、氧氟沙星等，预防量为25×10-6，治疗量50×10-6，连用3～5d。（4）抗感染植物药（中草药）黄连、黄岑、黄柏、秦皮、双花、白头翁、大青叶、板兰根、穿心莲、大蒜、鱼腥草。
Abstract: ten kinds of antimicrobial drugs on chicken e. coli comparison drug susceptibility test results show that the majority of amoxicillin, strains, flubendazolum ahmed card, star test, acid apragaz amphotericin, chloromycetin, ciprofloxacin hydrochloride highly sensitive; For gentamycin sulfate, hydrochloric acid doxycycline grain, hydrochloric acid obvious moderate sensitive; Low-alcohol sensitive to streptomycin sulphate. Amy card star, flubendazolum jinggangmeisu, brulamycin, sulfuric acid test good effect in treatment group; Hydrochloric acid doxycycline element, streptomycin sulphate treatment group therapy effect is poor, other effect in general. Overall, Amy card star, that Nebuchadnezzar flubendazolum brulamycin, sulfuric acid test for jinggangmeisu chicken escherichia coli sensitivity is highest.
原文粘贴不便，要原文的话联系我邮箱吧（点我可见）。【篇名】 平菇的栽培技术 CAJ原文下载 PDF原文下载【作者】 戴文宏. 任连敏.【刊名】 农业与技术 2005年02期 编辑部EmailCJFD收录期刊【机构】 山东省济宁市任城区农业局. 山东省济宁市任城区农业局 272133 .【关键词】 平菇. 栽培技术.【聚类检索】 同类文献 引用文献 被引用文献【摘要】 平菇比较耐寒,从11月份到翌年1月都可直接由生料进行栽培,比较省事。1配制培养料平菇的栽培料种类较多,棉籽壳、玉米芯、稻草、麦秸、花生壳等都可以,但不同用料出菇率不一样,出菇率最高的是棉籽壳。其配方是:棉籽壳100份,加生石灰2～5份,水120～150份(料水比1:～)。按50千克棉籽壳计算:50千克棉籽壳加生石灰1～千克,加水60～75千克,并且加100克多菌灵以防杂菌。2接种平菇栽培可采用袋装、箱装或者菌砖栽培。而塑料袋栽培省工,管理方便,病虫害少易于成功,目前生产上多以塑料袋装为主要栽培方式,采用的塑料袋规格多为袋口径25～28厘米,袋长45～【光盘号】 AGRI0506【篇名】 五项食用菌栽培技术 CAJ原文下载 PDF原文下载【作者】 贺元超.【刊名】 农家参谋 2004年11期 编辑部EmailCJFD收录期刊【机构】 河南省南召县一职高 474650.【聚类检索】 同类文献 引用文献 被引用文献【摘要】 一、木屑开放式四季栽培香菇木屑开放式栽培香菇,是在有杂菌的条件下,进行栽培的一种方法。具体作法:1.原料处理。木屑加水煮沸10～20分钟(蒸料也可),滤水放凉,若加辅料(米糠、麦麸、玉米皮),可在料滤水后,立即加入10%～20%的辅料,拌匀后,闷30～60分钟。料温一般在65℃～85℃之间,再加入磷酸二氢钾。2.原料处理后,即可用于种植。必须注意,一定要选用经过小型试验,适合开放式栽培的,萌发力及抗杂力强的菌种。①在5℃～10℃之间,加入30%～50%的菌种。若加辅料,菌种一定要加到50%左右,不需要加杀绿霉菌的药物,这是开放式栽培的保险温度。②在10℃～20【光盘号】 AGRI0501【篇名】 发展平菇生产,开发食用菌资源 CAJ原文下载 PDF原文下载【作者】 张剑雄.【刊名】 上海农业科技 2005年02期 编辑部EmailCJFD收录期刊【机构】 江苏省张家港市后塍镇农业服务中心 215600.【聚类检索】 同类文献 引用文献 被引用文献【摘要】 张家港市后塍镇学田村自1982年就开始生产平菇,至今已有20多年种植历史。近年随产业结构调整,该村的平菇生产总量不断提高。到2002年,全村共50户农户生产平菇,全年消耗棉籽壳340t,平菇生产面积达34万尺2,平均每尺2生产平菇,总产达万kg。按成本1元/kg计,年投入成本万元。按平均零售价2元/kg计,年产值万元。按平均每kg获利1元计,年总利润万元,生产农户足不出户户均年可获利万元。平菇生产周期短,一年四季均可生产。同一批菌,夏季为70d左右,冬季为90d左右,生产农户流水作业,分批次生产,一年到头,均有平菇出售。1配料每t棉籽壳【光盘号】 AGRI0508【篇名】 日光温室平菇番茄立体组合栽培技术 CAJ原文下载 PDF原文下载【作者】 吴铁.【刊名】 食用菌 2005年02期 编辑部Email“中国期刊方阵”入选期刊 CJFD收录期刊【机构】 安徽阜阳市颍东区口孜职高 236146.【聚类检索】 同类文献 引用文献 被引用文献【摘要】 日光温室蔬菜生产 ,是一项高投入高产出的农业生产。如何充分利用日光温室的设施和有限面积获取最大效益 ,始终是生产者最关心的。菇菜间作是一个好模式 ,但能间作的菇量有限 ,且出菇管理不便。笔者在温室内进行平菇番茄立体组合栽培试验 ,几年来效益良好。现将技术要点简介如下 :1 制平菇菌袋 平菇菌袋的制作 ,按常规袋栽法 ,只要所培养的菌体健壮无污染即可。本技术要注意以下几点 : 选择浅色平菇良种 笔者选用浅色杂交 17(引自上海农科院食用菌所 ) ,这样可避免头潮菇因番茄未封行 ,光线强而造成的菇色过重。 确定接种时间 平菇完成发菌【光盘号】 AGRI05069 【篇名】 利用种草菇后的废渣栽平菇技术 CAJ原文下载 PDF原文下载【作者】 杨自轩.【刊名】 食用菌 2004年06期 编辑部Email“中国期刊方阵”入选期刊 CJFD收录期刊【机构】 广东惠州农校 汤泉516023.【聚类检索】 同类文献 引用文献 被引用文献【摘要】 草菇是人们十分喜食的鲜美食用菌 ,广东省气候炎热 ,特别适宜种植草菇。近年来栽培面积很大。由于草菇生育期极短 ,对原料利用不多 ,菇渣中还有大量养分未分解。据估计 ,广东 1年用 12 ,0 0 0t原料种草菇 ,大约产生 10 ,0 0 0t废渣 ,这些废料 90 %直接作肥料或丢弃 ,利用率很低。对此 ,我们研究用种草菇的几种废渣再种平菇技术 ,并进行规模化生产 ,前 3潮菇生物学效率都在 70 %左右 ,使每公斤废料又多产生 1～ 2元效益 ,很有推广价值。1 以棉子壳为主的草菇废渣栽平菇 ①草菇配方 :棉子壳87% ,麸皮 10 % ,复合肥 1% ,石灰 2 %。按常规拌料 ,发酵 3～4【光盘号】 AGRI0501【篇名】 平菇高温季节栽培技术研究 CAJ原文下载 PDF原文下载【作者】 凌亚飞.【刊名】 吉林农业大学学报 1998年S1期 编辑部Email《中文核心期刊要目总览》来源期刊 ASPT来源刊 CJFD收录期刊【机构】 浙江农村技术师专农学系 宁波315101.【关键词】 平菇. 高温. 栽培.【聚类检索】 同类文献 引用文献 被引用文献【摘要】 代料栽培平菇由于都是秋末、冬季开始出菇上市,鲜菇不易加工贮藏,造成货多价低,栽培效益不高.夏、秋季在宁波属蔬菜淡季,鲜菇罕见,货紧价高,故进行本试验.培养料采用3种配方,配方1:棉籽壳60％,已种过平菇的废料16％.木屑20％,石灰2％,多菌灵％～％.碳酸钙2％.配方2:废棉(棉丁、棉纺厂的下脚料)96％.石灰2％,多菌灵％.碳酸钙2％.配方3:棉籽壳95％,石灰2％,过磷酸钙1％,多菌灵％.碳酸钙2％.棉籽壳、废棉、废料木屑需曝晒.供试菌种:平菇831、平菇C_4佛罗里达平菇.配方1和配方2采用熟料栽培,用15cm×35cm×的聚乙烯袋作容器,每袋干重400【光盘号】 AGRI98S7【篇名】 平菇高温季节栽培的关键技术 CAJ原文下载 PDF原文下载【作者】 谷业理.【刊名】 食用菌 1995年06期 编辑部Email“中国期刊方阵”入选期刊 CJFD收录期刊【机构】 安徽农业技术师范学院 凤阳 233100.【聚类检索】 同类文献 引用文献 被引用文献【摘要】 <正> 平菇一年四季都能栽培,这不仅延长了供应期,而且还有利于提高平菇生产的综合经济效益。当然在夏季栽培平菇,由于受到高温的影响,技术如果掌握不好,大面积栽培效益便不那么令人满意。根据,我们的推广实践,认为高温季节栽培平菇应掌握下列关键技术: (一)选择适宜的优质菌种平菇栽培品种较多,夏季栽培应选用高温型菌种,此菌种子实体形成的最适温度为24～28℃,如榆黄蘑、侧5、红平菇、新平1012、鲍鱼菇、佛罗里达等。其中菇农普遍应用被称为平菇高产之王的“新平1012”效果更好,这是一株高产、优质的广温型新菌种,子实体发生的最低温度3℃,最高温度35【光盘号】 AGRI95S3【篇名】 平菇覆土栽培技术 CAJ原文下载 PDF原文下载【作者】 娄现英. 王永善. 胡铭. 车照海.【刊名】 现代农业 2005年06期 编辑部EmailCJFD收录期刊【机构】 河南省太康县农业局 .【聚类检索】 同类文献 引用文献 被引用文献【摘要】 在平菇生产中,采用履土栽培技术,长出的平菇菇体肥大、柄短、盖厚、色亮,口感与风味俱佳,产量一般可提高30%～50%,是不需要增加投资的增产措施,是平菇栽培上的一种技术创新。1.理论依据平菇栽培中的水分管理,是平菇获得高产优质的一个要素,包括对培养基的水分调控,对周围湿度的水分调控,对出菇期的水分调控,以及在生长期的水分调控等等。而覆土栽培,则易于灵活地进行水分调控,可以较好地解决过干过湿的问题。2.覆土材料选择以土质质地疏松,毛细孔多,团粒结构好,湿不黏,干不散,蓄水力强,有机质含量高的偏碱性重壤土比较好。避免土块、沙土、生土过多。也【光盘号】 AGRI0507
食用菌栽培技术的不断发展，使得食用菌不仅成为了富含人类生活所需的各种蛋白质，还能够广泛用于医药等领域。下面是由我整理的食用菌栽培技术论文，希望能对大家有所帮助。食用菌栽培技术论文篇一：《食用菌(平菇)的温室栽培技术》 摘要：食用菌的生长发育是由其生长习性和所处环境两种因素共同影响的，这两种因素共同作用影响着食用菌的产量和质量。随着国民经济的迅速发展，人们的物质生活极大丰富，进而导致人们的消费需求大幅度增加，从而对于食物的要求也从原来追求的吃饱转向吃好，大都讲究营养均衡。食用菌味道鲜美，营养价值高，越来越得到人们的青睐。生产食用菌的厂商为了获得更多的经济效益，也为了满足人们日益增长的多样化需求，由此开始采用温室栽培技术培育食用菌。本文以平菇为代表，从平菇的基本情况、鄂尔多斯达拉特旗王爱召镇地区的气候、地理位置条件出发，对食用菌温室栽培的技术要求和益处进行了综合论述。 1 平菇的基本情况 类型 平菇可以分为三种类型伞菌目、口蘑科、侧耳属。 品种类型多 除了平菇之外，还可以栽种许多侧耳属科目的菌类，例如凤尾菇、红平菇等等。 营养丰富 平菇营养丰富，味道鲜美。研究表明，平菇中含有多种微量元素和丰富的维生素，食用后可以给人补充丰富的营养，有极高的营养价值和食用价值。 药用价值高 平菇具有较高的药用价值，例如平菇可以抑制人体内癌细胞的产生和发展;降低血液中血脂、胆固醇等物质的浓度;促进人体肠胃蠕动，从而帮助消化;可以起到改善人体生理机能、促进新陈代谢等作用。 2 内蒙古鄂尔多斯达拉特旗王爱召镇地区的概述 地理位置 内蒙古鄂尔多斯达拉特旗王爱召镇地区位于鄂尔多斯高原北边、黄河中游地区的南岸部分，是“金三角”经济中心地带的中心处;并且当地所跨地形区域类型复杂，由此导致海拔相对高度差较大，进而使得温差较大，还有就是内蒙古鄂尔多斯达拉特旗王爱召镇地区经济发达，综合下来可以很好地满足食用菌温室培养所需的温度、水源、交通、经济等方面的因素，非常有利于食用菌的买卖流转。 气候条件 内蒙古鄂尔多斯达拉特旗王爱召镇地区是典型的温带大陆性气候，具有冬冷夏热，昼夜温差大，全年干燥少雨，降水主要集中在夏季，日照时间长等气候特点。特别是在冬季时节，昼夜温差大，更有利于子实体的分裂分化，促进食用菌的生长发育。 人口因素 内蒙古鄂尔多斯达拉特旗王爱召镇地区土壤资源丰富，灌溉便利，是我国有名的粮食产地和农业开发区。而且是经济发达的中心地带，人口聚集，人口数目众多。人口众多，对食用菌的需求量较大。 3 食用菌温室栽培的选用标准 位置要求 在冬天，温室栽培是最有效的栽培方式，应将大棚位置选在比较冷的地方。在比较冷的地方可以实行管道、暖气或者人工供暖，应采用最适合的供暖方式，冷暖的交替，可以促进子实体的生长发育，实现低成本、高利润的栽培。且在冬季栽培出来的平菇等食用菌病虫危害少，产量高、质量好、营养价值高。 原料要求 生料栽培是平菇温室栽培的首选 方法 。搭配合适的比例，将营养料在适当的条件下加工进行平菇栽培。让平菇在高温的条件下快速生长。 管理 措施 平菇等食用菌应采用定位出菇法，且装袋时应该提前留出孔，为食用菌提供氧气供其生长。还有就是定位出菇法可以减少水分的蒸发、平菇质量受损等现象，这种方法的应用有效地提升了食用菌的质量。 4 食用菌温室栽培的技术要求 营养要求 平菇等食用菌生长发育需要吸收的营养包括：有机酸、酶类、无机盐、氮元素、碳元素和其他微量元素(磷、钾、钙等)。 温度要求 平菇等食用菌生长发育需要在适宜的温度范围内。在内蒙古鄂尔多斯达拉特旗王爱召镇地区昼夜温差大，可以促进平菇的子实体快速分化，但需注意温度要保持在平菇的承受阈限内。 水分和湿度要求 水是生命之源，对于菇类也是如此。平菇的生长对于水分和湿度的要求比较高，在栽培中，应该将大棚内的水分和湿度控制在合适的范围内。达拉特旗王爱召镇地区位于黄河中游的南部，水资源丰富，易于灌溉，对平菇的培育生长极为有利。 空气要求 平菇好氧。要保证空气中的氧气含量，氧气浓度应较高。应选择在通风条件良好的地方利于空气的流通转换，并定时地进行通风。如果空气中二氧化碳的含量过高，会抑制子实体的呼吸活动，从而影响其生长发育。 光照要求 适度的光照对于平菇的生长发育极为重要。强光会影响到平菇的生长发育，温室大棚里边应该将光线调到较暗的状态。因为强光会刺激到子实体的分裂生长。 管理要求 要致力于追求规范化、精细化的管理。在食用菌的生长发育阶段应对湿度、水分、光照强度等指标做好监控记录工作，将其严格控制在食用菌生长的最佳范围内，以此来确保食用菌的健康生长。 播种要求 将已经按比例调配好的培养料按照严格的标准铺好，且相互之间的宽度间隔应合理规划，最后应该覆盖上保鲜膜进行栽种。 采摘要求 食用菌成熟后的采摘工作也是一项技术活，应该严格按照采摘标准来进行。且应该对食用菌是否成熟进行正确的评判，当食用菌菇盖的颜色由深变浅，孢子处在尚未放射的状态时就是成熟了，此时是进行采摘的最佳时机。 5 食用菌温室栽培的益处 食用菌有较高的营养价值和药用价值，食用后会给人们的身体带来极大的好处。食用菌温室栽培可以满足较高的产量需求和质量要求，通过调节温室大棚内的光照、温度、湿度、水分等条件让其达到食用菌适宜生长的最佳范围，以此来促进食用菌的生长发育。这是一种通过人为调控影响食用菌生长因素的方式来促进其生长的办法。这种方法既促进了食用菌产量的增加，质量的提高，又给人们增加了收入，提升了人们的生活水平，促进了国民经济的发展。此外，温室栽培食用菌的方式也打破季节的限制，打破了人们对新鲜蔬菜需求的限制，让人们能够在一年四季都能吃到新鲜美味的食用菌，避免了自然因素的影响。 6 结论 食用菌的温室栽培技术有效地改善了自然因素对食用菌栽培的限制，利用温室大棚对食用菌生长发育的环境进行了改造，既满足了人们的食用要求，让人们吃上了高质量、高营养的食用菌;还满足了市场需求，使批量化生产成为可能，增加了人民的收入，带动了当地经济的飞速发展。由此可见，温室食用菌(平菇)的温室栽培技术是值得大家学习的、值得推广的。 食用菌栽培技术论文篇二：《果园间套种食用菌栽培技术》 摘要 总结 了果园间套种食用菌的栽培技术，主要包括木耳、金福菇、姬菇等，以供参考。 关键词 果园套种;木耳;金福菇;姬菇;栽培技术 果园内空气湿度大，光照强度低，富含氧气，正符合食用菌生长，食用菌生长所释放出大量的二氧化碳又能使果树加强光合作用，促进果树的生长，食用菌菌渣成为有机肥施进果园，有效改善果园土壤结构，在干旱季节食用菌管理过程中多余的水又可以使果树再利用，果园里建棚栽培食用菌，可以抑制果园杂草滋生，减少水土流失，提高土地利用率，促进生产发展，增加经济收入。近几年来，贵港市农业科学研究所一直从事果园食用菌间套种栽培技术方面的研究，探索出一种创新的农业 种植 模式，果菌结合，做到了树上长果，树下结菇，取得了较好的经济效益和社会效益。现将具体栽培技术总结如下。 1 食用菌栽培场地的选择与建棚 选择树龄较大、遮荫较好的果园建棚，一般用铁管拱成1个长30～40 m，宽～ m、高～ m的拱形棚，距离地面1 m高的周边(除门外)用60目的防虫网围住，棚顶用薄膜盖好(与防虫网相交接)，然后盖上遮光率为90%的遮阳网[1-2]。 2 木耳栽培技术 木耳是一种木腐生型食用菌，其生长发育需要的主要营养为纤维素、半纤维素、木质素，还需要适量的蛋白质、维生素和无机盐。菌丝的最适宜温度为20～28 ℃，子实体生长的最适温度为15～25 ℃，按照贵港地区的气候，出菇季节安排在4―5月出菇，装袋提前50～60 d。 培养基配制 使用的培养基配方为玉米芯20%、桑枝30%、棉籽壳、麦皮5%、石灰2%、石膏1%、防霉剂。 原料处理 按配方所需的已粉碎的玉米芯、桑枝淋湿铺在已淋湿的棉籽壳上，放置1 d让多余的水流走，洒上所需的石灰、石膏，用拌料机将料充分搅拌均匀建堆。 装袋、灭菌与接种 料建堆3～4 d后可进行装袋。先调湿度，把料堆表面的干料淋湿，使料的含水量达料水比为∶(～)，加上配方所需的防霉剂、麦皮，用拌料机把料搅拌均匀即可进行装袋，用聚乙烯塑料袋装袋，装袋时要使培养料松紧适宜，上下均匀一致，周围丰满无空隙，装料过实过紧容易使塑料袋破损，料过松菌丝生长纤细无力。一般1袋装湿料重～ kg，装好袋后用绳子扎紧袋口装进铁框，每框9袋。装袋完毕，立即装炉灭菌，灭菌采用常压灭菌，温度到达100 ℃时保压9 h。灭菌结束后，炉温下降至60～70 ℃时进行御炉，把菌包移入已清洁消毒好的接种培养室的培养架上摆好，待菌包温度降至30 ℃以下时进行接种，1个菌包用种为8～10 g，接种完毕，把培养室打扫干净[3-4]。 发菌管理 培养室的湿度为50%～70%即可，春季气温较低，气温低于20 ℃时要注意加温，使培养室的温度为20～25 ℃，温度高于30 ℃时注意通风换气，以利于菌丝生长。 出菇管理 菌包接种后45～60 d，菌包菌丝吃透料，部分菌包出现耳芽时就可以把菌包移入出菇棚出菇。菇包入棚前首先把菇棚周围的杂草清除干净，把树叶清扫干净烧掉，菇棚及周边杀虫杀螨1次，棚内再撒一些石灰粉后即可把菌包移入出菇棚摆包出菇。摆包时，1个棚留1条纵向的人行道以便喷水和采菇，菌包用绳子把袋口扎紧后摆放成行，行距一般为20～24 cm，菌包摆成行后用小刀在每一个菌包上割3～4个长10 cm、深～ cm的竖裂口，裂口一般距菌包顶部4 cm、距菌包底部5 cm。摆包完毕，向地面洒水以增加空气湿度。割包5～7 d后木耳陆续现蕾，此时期注意加强水分的管理工作，随着耳片的增多增大，逐渐加大喷水量和通风量，喷水量要根据天气变化而变化，晴天多喷，雨天少喷，注意菇体的干湿交替，有利于木耳的正常生长。 采收及转潮管理 当耳片充分展开、边缘起皱就可以采收了，采收的原则是摘大留小，不伤小耳，一般采2～3次把一潮的木耳全部采完。采完一潮后，清除菌包上的残留耳根，将耳床清理干净，杀虫杀螨1次，停水2～3 d，以利于菌丝的恢复，4～5 d第2潮木耳现蕾，又像第1潮一样管理。一般木耳可采3～4潮，生物学转化率可达88%～94%。 3 金福菇的栽培技术 金福菇菇体硕大，菌肉肥厚嫩白，营养丰富，味微甜而鲜，耐贮性好，适宜鲜销。菌丝生长温度15～38 ℃，最适温度为27～30 ℃，子实体形成温度范围为18～30 ℃，最适温度为20～28 ℃，金福菇对低温较敏感，昼夜温差大时对出菇不利。一般在4月上旬湿料、装袋、接种，7月上旬覆土，覆土后10～15 d现蕾出菇。 培养基配制 使用的培养基配方为玉米芯、棉籽壳55%、麦皮5%、石灰2%、石膏1%、防霉剂。 原料处理 方法与木耳的原料处理方法一样。 装袋、灭菌、接种 除了灭菌时间保压6 h不同外，其他的与木耳的装袋、接种方法一样。 发菌管理 在菌包的发菌过程中，气温较高时注意通风换气，及时清除感染杂菌的菌包。 出菇管理 菌包菌丝培养60～65 d后，菌丝吃透料就可以把菌包脱袋覆土，覆土的泥土最好选择塘泥土，它透气性好，富含有机质。覆土前先对塘泥进行调湿与消毒，把土粒敲成～ cm大小的颗粒，调成含水量为 20%～30%，边喷5%福尔马林溶液，建堆，用薄膜密封24 h后揭膜让福尔马林的气味挥发掉，2 d后即可以覆土。覆土前把菌包薄膜全部脱掉侧卧摆成畦，菌棒之间留1～2 cm的空隙，然后盖上3～4 cm厚的已消毒的泥土，把畦面弄平，覆土结束。覆土后可大量淋水，使土壤含水量达饱和状态。6～8 d后白色的菌丝爬出土面，12～14 d后菌丝扭结，保持空间含水量达80%～90%，加强通风换气，促进原基的形成。15～17 d形成菇蕾，菇蕾阶段在小气候中生长，一般不喷水，干燥时喷雾化水于空间使空气相对湿度达80%～90%，当菇体长到3 cm高时每天喷水1～2次，喷水时要掌握菇多菇大的地方多喷，菇小菇少的地方少喷或不喷[5-6]。 采收及转潮管理 从菇蕾形成到成熟采收一般需要5～7 d，当菌盖肥厚紧实、菌膜尚未破伞时采收，品质最好;采收过迟，成熟过度，品质下降;过小采收，会影响产量。采收时成丛拔起，把菇体分开，用小刀削去菇体上的泥土。一潮菇采收结束之后，清除料面的残留菌柄、菇脚和死亡的菇蕾，用泥土把外露菌包的畦面填平，停水2～3 d养菌，然后像第1潮一样管理，2周内会形成第2批原基。一般可采2～3潮，生物学转化率达50%～70%。 4 姬菇的栽培技术 姬菇的菌盖为贝壳状或扇状，侧生，嫩滑可口，是百姓餐桌上的佳品，耐储运，投资少，见效快，收益高，市场前景很好。菌丝的生长温度为6～28 ℃，最适温度为20～26 ℃，高于32 ℃菌丝生长不良;出菇温度为4～26 ℃，最适温度为6～20 ℃，夏季炎热的季节不出菇，低于4 ℃时不易形成原基[1]。根据贵港地区的气候与市场销售情况，一般安排9月中下旬至11月上旬做出菇袋，10月中下旬至翌年的3月收菇结束。 培养基配方 使用的培养基配方为棉籽壳、玉米芯、玉米粉5%、石灰3%、防霉剂。 原料处理 方法与木耳的原料处理方法相同。 装袋、灭菌、接种及发菌管理 料建堆2～3 d后可进行装袋。先调湿度，把料堆表面的干料淋湿，使料的含水量达料比水为∶(～)，加上配方所需的防霉剂、玉米粉，用拌料机把料搅拌均匀即可进行装袋，用36 cm×13/23 cm的聚乙烯塑料袋装袋，装袋时要使培养料松紧适宜，上下均匀一致，周围丰满无空隙。一般1袋装湿料重～ kg，装好袋后用绳子扎紧袋口装进铁框，每框9袋。装袋完毕，立即装炉灭菌，灭菌采用常压灭菌，温度到达100 ℃时保压6 h。灭菌结束后，炉温下降至60～70 ℃时进行御炉，把菌包移入已消毒的清洁的果园里的出菇棚里，待菌包温度降至30 ℃以下时进行接种，1个菌包用种为8～10 g，套上套环，用胶圈把报纸(已灭菌的)扎紧在套环外封口，然后把菌包单个直立成行摆放培养菌丝，菌包之间留1～2 cm的空隙以便散热。在此期间要注意如果气温过高，可以把菇棚的防虫网掀起以通风降温。 出菇管理 菌包菌丝培养30 d左右，菌丝吃透料，少数菌包现蕾，就可以叠包解报纸出菇，叠包时菇棚中间留1条便于淋水和采菇的人行道，在人行道两侧把菌包垒成4～6个菌包高单排或双排的墙式堆码，把菌包口的报纸解完后立即淋水进入第1潮的出菇管理工作，每天喷水2次，3～4 d现蕾，菇棚的空气湿度保持85%～95%，喷水的次数与多少应根据天气情况、出菇数量和菇体大小而定，宜喷雾状水，子实体珊瑚期不宜直接向菇体喷水[2]。 采收及转潮管理 当一丛菇中大部分子实体菌盖直径达2～3 cm、菌柄长度4～5 cm时，及时采收，用手握住整丛菇的基部，拔下整丛菇体，小心放入框内，避免损伤，然后在距菌盖3～4 cm处剪去菌柄基部，将连接的菇体分为单个，去掉小菇，分级真空包装，每袋 kg。采完一潮后，清理菇脚，停水2～3 d让菌丝休复，5～7 d即可转潮，又像第1潮一样管理。姬菇一般可采5～7潮，生物学转化率可达90%～110%。 5 参考文献 [1] 储利慧，陈生良，俞田华.姬菇栽培技术[J].上海农业科技，2007(6)：92-93. [2] 陈建辉.珍稀食用菌真姬菇栽培技术[J].科技致富向导，2004(9)：34-35. [3] 刘岩岩，张敏，宋莹.北方林下黑木耳栽培技术[J].现代农业科技，2014(2)：130-131. [4] 张怀荣.黑木耳立森261菌株的生物特性及其栽培技术要点[J].食用菌，2014(1)：23-24. [5] 沈渊，姚明军，沈新芬.大棚草莓-金福菇栽培技术初探[J].上海农业科技，2014(1)：144-145. [6] 赖育斌，郭明，巫世芬，等.金福菇高产栽培技术[J].现代园艺，2013(15)：41. 食用菌栽培技术论文篇三：《浅谈食用菌高产栽培技术》 摘要：食用菌不仅富含人类生活所需的各种蛋白质，还能够广泛用于医药等领域。目前我国的食用菌培植技术目前正处于飞速发展阶段，如何科学合理的进行食用菌的栽培成为了发展白色农业的重要课题。 关键词：食用菌;栽培技术 食用菌是人类食用的大型真菌，2000年统计中国的食用菌达938种，人工栽培的50余种，中国广泛栽培的食用菌有蘑菇、香菇、草菇、木耳、银耳、平菇、滑菇等7类，它们分别生长在不同的地区、不同的生态环境中。食用菌产业是一项集经济效益、生态效益和社会效益于一体的农村经济发展项目，食用菌又是一类有机、营养、保健的绿色食品。发展食用菌产业符合人们消费增长和农业可持续发展的需要，是农民快速致富的有效途径。因此，食用菌产业作为一种适应社会市场经济的产业日益发展壮大起来，人们对于食用菌的栽培技术研究也是越来越多，既要达到绿色自然、无公害的目标，又要做到保质保量的要求。 一、培养料的配置 食用菌培养料的配制要注意以下问题，首先将原料的干料按照比例要求进行充分的搅拌混合，需要添加的一些微量元素先要用水化开之后再拌入料中，接着进行反复的搅拌，将存在的团料尽量打散，确保料的干湿程度均匀;其次，影响菌丝生长的另一个重要因素就是培养料的含水量，一般培养料的含水量在55%左右就非常适合食用菌的生长，如果培养料的含水量偏低将会导致出菇产量大幅降低，如果培养料的含水量偏高，则会让处于下层的菌丝缺氧而不能正常吃料，导致原料浪费。因此必须要按照培养料原料的木屑情况灵活的调整含水量，在这个过程中，主要是注意木屑的粗细以及质地的软硬、空气湿度等具体情况对含水量进行配比;最后，培养料配置工作结束后，要尽快进行装袋，一般装袋时间不超过培养料配置 完成的7小时左右，装袋完成后要注意及时灭菌。灭菌时先把装袋完成的培养料放入锅中，用猛火快速加热到100℃，之后利用冷气阀降温到0℃，再重新将温度加热到100℃左右。进行灭菌作业时一定要确保猛火加热、温火保温，定时查看灭菌锅内的温度情况，防止漏气的现象，否则无法达到有效的灭菌效果。经过这些阶段，培养料的配置工作已经算是初步完成，培养料的配置对于提高食用菌的产量，降低生产成本具有重要意义。 二、选择优质的菌种及接种 要挑选优质的菌种来培养，根据要栽培的食用菌的生长特点以及适宜的生长环境来选择选择适宜本地生长的优质、高产、高抗的优良菌株。在挑选菌 种时一定要严格查看菌种，确保其没有杂质污染和虫害，适用于栽培养育。必须按照科学、严谨的接种程序来为所要栽培的食用菌接种，并在接种后及时将装菌种的袋子放入无污染、空气适宜的培养室内进行发菌培养。 三、培育环境的要求 在经过几个月的生长后，菌袋就要搬入出菇棚进行培育，但是受到培育环境等因素的影响，菌袋的出菇时间也不尽相同，只有保持培育环境适合菌袋成长才能让菌袋在一定的时间范围内正常出菇。而将菌袋搬入出菇棚的时间要尽量避免午间气温较高时进行，因为过高的温度容易影响出菇时间;入棚的时间一般选在晴天的早晚进行，要防止人棚过程中菌袋受到雨淋。菌袋人棚后的摆放要按照一定的规范进行操作，菌袋要并列排放整齐，且其间需要留5厘米左右的间隔以保持菌能够正常呼吸，只有创造出一个有利于菌袋出菇的环境才能保证出菇更加优质、高产。 (1)空气湿度。作为影响子实体生长的重要因素，如果培育环境的空气湿度太低，子实体表面的水分蒸发就会加快，其基质中的含水量就会大幅度降低，进而影响食用菌的产量;相反空气湿度如果偏高，子实体表面的水份蒸发作用不明显，菌体内的营养运输受到阻碍，造成子实体无法进行呼吸作用而停止生长。如果栽培环境中的空气湿度长期处于偏高的状态，子实体会因为倒吸空气中的水份而出现腐烂的情况，严重时甚至会造成大范围的细菌传染。 (2)保持通风。食用菌的生长发育需要足够的氧气，和我们人需要呼吸一样，食用菌也会进行呼吸作用，它们吸人空气中的氧气释放出二氧化碳。虽然适量程度的二氧化碳对某些特别种类的食用菌菌丝生长有利，但是很多食用菌如果长期处在二氧化碳过多的环境下，它们很有可能停止生长，而高浓度的二氧化碳环境甚至会让菌丝体死亡。因此，出菇棚必须要保持通风，将二氧化碳的浓度控制在合适的范围之内，确保空气流通。 (3)光照环境。多数食用菌在出菇时需要散射光进行刺激，只有极少数品种要较强的散射光。通常情况下，光照越强时子实体的颜色就越深，光照越弱时子实体的颜色就越浅。栽培人员需要根据食用菌种类的差异对出菇棚的光照进行调节，如可以采用遮阳网、草帘等物品来调节室内光照。 四、使用无污染的肥料对食用菌进行施肥 (1)喷洒酵母膏以及蛋白胨等溶液。用的酵母膏和的蛋白胨喷洒在食用菌的表面，能够使食用菌的身体变厚变肥，促进转潮，在温度为14℃～l6℃时效果最佳。 (2)人粪或人尿的喷洒。在喷洒人粪人尿时应当注意对人粪及人尿的加热，最适合的人粪和人尿应该是煮熟20分钟后的，对其进行对水，比例为1：10或者是1：20进行喷洒，或者也可以用新鲜的牛畜尿液，煮熟与没有泡沫即可，进行对水，比例在l0倍～17倍之间。 (3)米醋的喷洒 在食用菌生长的中后期，可以用300倍的米醋对其进行喷洒，在采摘前的1～3天，每天必须喷洒一次，通常情况下可以使食用菌产量提高6%，而且色泽会呈现出洁面。 (4)豆浆水的喷洒 黄豆一千克，将其磨成豆浆后加入75千克～UI00千克的水，喷洒到食用菌表面，喷洒完成后再用清水喷洒一遍。 五、科学合理的管理方式 在管理栽培养育的食用菌时，要严格按照科学的管理方式进行管理。通过以往的栽培 经验 ，并结合实际的培育现状，研究出最适合、最科学的食用菌栽培管理方式。以无公害、绿色健康为前提，运用无农药危害的病虫害的防治措施，栽培工具和培育工作人员进出时要做好清洁和消毒工作。根据食用菌的实际生长状况及时对周围环境 做出处理，调节培育室内的通风、通气、采光条件，掌控好温度和湿度情7兕，在培育长成后采取时，也需要做好消毒工作，要以正确的方式、适时地采收。 六、结语 食用菌已经成为人们日常生活中不可缺少的食用产品，食用菌产业也是社会市场上不可忽视的市场经济发展项目无公害、高产的食用菌栽培技术是目前社会市场发展的需要，是促进社会市场经济发展的一部分，也是人们高品质的日常生活的需求，必将得到大力的推广和应用。 猜你喜欢： 1. 食品保藏技术论文 2. 农学论文范文 3. 人工栽培桑黄的技术 4. 双孢菇种植的技术 5. 平菇栽培技术论文 6. 平菇的栽培技术论文
微生物育种-诱变育种摘要：分析了近几年来我国常用的几种物理诱变和化学诱变育种方法的原理、特点以及成功案例等, 为微生物诱变育种提供了依据。综述了其在酶制剂、抗生素、氨基酸、维生素、杀虫剂等高产菌种选育中的应用进展;对该技术与离子束技术、空间技术的结合在微生物菌种选育中的应用前景进行了展望。关键词：诱变；微生物育种；应用进展；展望 微生物与酿造工业、食品工业、生物制品工业等的关系非常密切, 其菌株的优良与否直接关系到多种工业产品的好坏,甚至影响人们的日常生活质量,所以培育优质、高产的微生物菌株十分必要。微生物育种的目的就是要把生物合成的代谢途径朝人们所希望的方向加以引导, 或者促使细胞内发生基因的重新组合优化遗传性状, 人为地使某些代谢产物过量积累,获得所需要的高产、优质和低耗的菌种。作为途径之一的诱变育种一直被广泛应用。目前,国内微生物育种界主要采用的仍是常规的物理及化学因子等诱变方法。此外,原生质体诱变技术已广泛地应用于酶制剂、抗生素、氨基酸、维生素等的菌种选育中,并且取得了许多有重大应用意义的成果。1、诱变育种物理诱变紫外照射紫外线照射是常用的物理诱变方法之一, 是诱发微生物突变的一种非常有用的工具。DNA 和RNA 的嘌呤和嘧啶最大的吸收峰在260nm, 因此在260nm 的紫外辐射是最有效的致死剂。紫外辐射的作用已有多种解释,但比较确定的作用是使DNA 分子形成嘧啶二聚体[1]。二聚体的形成会阻碍碱基间正常配对,所以可能导致突变甚至死亡[2]。紫外照射诱变操作简单,经济实惠,一般实验室条件都可以达到,且出现正突变的几率较高,酵母菌株的诱变大多采用这种方法。电离辐射γ- 射线是电离生物学上应用最广泛的电离射线之一,具有很高的能量,能产生电离作用,可直接或间接地改变DNA 结构。其直接效应是可以氧化脱氧核糖的碱基,或者脱氧核糖的化学键和糖- 磷酸相连接的化学键。其间接效应是能使水或有机分子产生自由基, 这些自由基可以与细胞中的溶质分子发生化学变化,导致DNA 分缺失和损伤[2]。除γ- 射线外的电离辐射还有X- 射线、β- 射线和快中子等。电离辐射有一定的局限性,操作要求较高,且有一定的危险性,通常用于不能使用其他诱变剂的诱变育种过程。离子注入离子注入是20 世纪80 年代初兴起的一项高新技术,主要用于金属材料表面的改性。1986 年以来逐渐用于农作物育种,近年来在微生物育种中逐渐引入该技术[3]。离子注入时,生物分子吸收能量,并且引起复杂的物理和化学上的变化,这些变化的中间体是各类活性自由基。这些自由基,可以引起其它正常生物分子的损伤,可使细胞中的染色体突变,DNA 链断裂,也可使质粒DNA 造成断裂。由于离子注入射程具有可控性, 随着微束技术和精确定位技术的发展,定位诱变将成为可能[4]。离子注入法进行微生物诱变育种, 一般实验室条件难以达到,目前应用相对较少。 激光激光是一种光量子流,又称光微粒。激光辐射可以通过产生光、热、压力和电磁场效应的综合应用,直接或间接地影响有机体,引起细胞染色体畸变效应、酶的激活或钝化,以及细胞分裂和细胞代谢活动的改变。光量子对细胞内含物中的任何物质一旦发生作用, 都可能导致生物有机体在细胞学和遗传学特性上发生变异。不同种类的激光辐射生物有机体,所表现出的细胞学和遗传学变化也不同[5]。激光作为一种育种方法,具有操作简单、使用安全等优点,近年来应用于微生物育种中取得不少进展。 微波微波辐射属于一种低能电磁辐射, 具有较强生物效应的频率范围在300MHz~300GHz,对生物体具有热效应和非热效应。其热效应是指它能引起生物体局部温度上升。从而引起生理生化反应;非热效应指在微波作用下,生物体会产生非温度关联的各种生理生化反应。在这两种效应的综合作用下,生物体会产生一系列突变效应[6]。因而,微波也被用于多个领域的诱变育种,如农作物育种、禽兽育种和工业微生物育种,并取得了一定成果。 航天育种航天育种,也称空间诱变育种,是利用高空气球、返回式卫星、飞船等航天器将作物种子、组织、器官或生命个体搭载到宇宙空间, 利用宇宙空间特殊的环境使生物基因产生变异,再返回地面进行选育,培育新品种、新材料的作物育种新技术。空间环境因素主要有微重力,空间辐射,以及其它诱变因素如交变磁场,超真空环境等,这些因素交互作用导致生物系统遗传物的损伤,使生物发生诸如突变、染色体畸变、细胞失活、发育异常等。航天育种较其它育种方法特殊, 是航天技术与微生物育种技术的有机结合,技术含量高,成本高,个体研究者或一般研究单位都难以实现,只能与航天技术相结合,由国家来完成。2．1 化学诱变 烷化剂烷化剂能与一个或几个核酸碱基反应,引起DNA 复制时碱基配对的转换而发生遗传变异, 常用的烷化剂有甲基磺酸乙酯、亚硝基胍、乙烯亚胺、硫酸二乙酯等。甲基磺酸乙酯( ethylmethane sulphonate ,EMS) 是最常用的烷化剂,诱变率很高。它诱导的突变株大多数是点突变，该物质具有强烈致癌性和挥发性,可用5%硫代硫酸钠作为终止剂和解毒剂。N- 甲基- N'- 硝基- N- 亚硝基胍( NTG) 是一种超诱变剂,应用广泛,但有一定毒性,操作时应该注意。在碱性条件下,NTG 会形成重氮甲烷(CH2N2),它是引起致死和突变的主要原因。它的效应很可能是CH2N2 对DNA 的烷化作用引起的[2]。硫酸二乙酯( DMS) 也很常用,但由于毒性太强,目前很少使用。乙烯亚胺,生产的较少,很难买到。使用浓度,高度致癌性,使用时需要使用缓冲液配置。 碱基类似物碱基类似物分子结构类似天然碱基,可以掺入到DNA 分子中导致DNA 复制时产生错配,mRNA 转录紊乱,功能蛋白重组,表型改变。该类物质毒性相对较小,但负诱变率很高,往往不易得到好的突变体。主要有5- 氟尿嘧啶( 5- FU) 、5- 溴尿嘧啶( 5- BU) 、6- 氯嘌呤等。程世清等[25]用5- BU 对产色素菌( 分枝杆菌T17- 2- 39) 细胞进行诱变,生物量平均提高． 无机化合物诱变效果一般,危险性较小。常用的有氯化锂,白色结晶,使用时配成的溶液, 或者可以直接加到诱变固体培养基中,作用时间为30min～2d。亚硝酸易分解,所以现配现用。常用亚硝酸钠和盐酸制取,将亚硝酸钠配成 的浓度, 使用时加入等浓度等体积的盐酸即可。 其他盐酸羟胺,一种还原剂,作用于C 上,使G- C 变为A- T。也较常用,使用浓度为～,作用时间60min～2h。此外,诱变时将两种或多种诱变因子复合使用,或者重复使用同一种诱变因子,效果更佳。顾正华等[7]以谷氨酸棒杆菌ATCC- 13761 为出发菌株,经DMS 和NTG 多次诱变处理,获得一株L- 组氨酸产生菌。2、诱变剂 诱变剂的选择在选择诱变剂时, 需要注意诱变剂的专一性, 即某一诱变剂或诱变处理优先使基因组的某些部分发生突变而别的部分即使有也很少发生突变。对诱变剂专一性的分子基础不十分了解万尽管有关的修复途径必定对此有影响, 但它们的关系并不那么简单, 其它各种因素,包括诱变处理的环境条件也能影响突变类型。工业遗传学家很难正确地预言改良某一菌种时需要何种类型的分子水平的突变。因此, 为了产生类型尽可能多的突变体, 最适当的方法是采用几种互补类型的诱变处理。远紫外无疑是所有诱变剂中最为合适的, 似乎可以诱导所有已知的损伤类型。采取有效、安全的预防方法也很容易。在化学诱变剂中, 液体试剂比粉末试剂更易进行安全操作。的另一个不利因素是它有产生紧密连锁的突变丛的趋势, 尽管这种效应在某些体系中能成为有利条件。最后, 必须认识到可能某些特异菌系用某些诱变剂是不能被诱变的。当然这一点通过测定易检出的突变体, 如抗药性突变体或原养型回复突变体的诱变动力学可以相当容易地得到验证。[8] 诱变剂的剂量从随机筛选的最佳效果看, 诱变剂的最适剂量就是在用于筛选的存活群体中得到最高比例的所需要的突变体, 因为这会使在测定效价的阶段更省力。因此在菌株改良以前,为了决定所用诱变剂的最适剂量, 并为突变性的增强技术打下基础, 聪明的做法通常是测定不同诱变剂处理不同菌种时的突变动力学。用高单位突变本身来测定最适剂量有时是不可能的, 因为这种突变的检测很困难。但如使用容易检出的标记如耐药标记, 只要估计到方法的局限性, 还是可以提供一些有价值的资料的。[9]3、原生质体诱变在工业微生物育种中的应用进展 在酶制剂菌种选育中的应用酶制剂是活的有机体产生的有催化活性的蛋白质,是所有新陈代谢过程必不可少的要素。应用原生质体诱变技术对酶制剂的生产菌株进行诱变,已经获得了许多高产菌株。胡杰等[10 ]对沪酿(Aspergillus oryzae) 31042米曲霉的原生质体进行紫外线-氯化锂、N-甲基- N′-硝基-N - 亚硝基胍( N - methyle - N′- nitro - N -nitrosogunidinc, NTG)复合诱变,筛选到8 株高产中性蛋白酶突变株群,其中最高产酶活力为出发菌株的1162倍,为以后的细胞融合、基因组改组等提供了优良的候选文库。3．2抗生素高产菌种选育中的应用抗生素是微生物细胞的次级代谢产物,目前主要采用微生物发酵法进行生物合成。由于生产菌种产量的高低受多步代谢调控的制约,高产菌株的选育也很困难。原生质体诱变作为一种诱变技术,在抗生素的高产菌种选育中已有着广泛的应用。朱林东等[ 11 ] 通过紫外线诱变始旋链霉菌( S treptom ycespristinaespiralis)的原生质体, 得到了产普那霉素为1159g/L的高产突变株,比出发菌株提高10113%。 在氨基酸、生产溶剂及有机酸菌种选育中的应用氨基酸是生物功能大分子蛋白质的基本组成单位,在食品、饲料、医药、化学工业、农业等行业中应用广泛,各国都在大力发展氨基酸生产。发酵法已成为氨基酸生产的主要方法。因此选育高产菌株是氨基酸工业发展的重要方向。生产溶剂和有机酸是微生物的初级代谢产物,原生质体诱变技术在生产溶剂和有机酸生产菌种选育中也取得了成效。 生素菌种选育中的应用维生素是维持人和动物生命活动必需的、但不能自身合成的一类有机物质,在生长、代谢、发育过程中发挥着重要的作用。韩建荣等用激光处理青霉( Penicillium sp) PT95 的原生质体,选育到一株菌核生物量和类胡萝卜素含量均有显著提高的突变株L05。该突变株的菌核生产量提高 ,菌核中的类胡萝卜素含量提高 ,类胡萝卜素产率的增加幅度达到。 虫菌种选育中的应用苏云金杆菌(B acillus thuringiensis)是从自然界中筛选出来的一大类细菌型微生物杀虫剂,多应用于农林害虫的防治中。王丽红等[ 12 ] 对苏云金杆菌NU- 2的原生质体进行紫外线-氯化锂复合诱变,筛选到的突变株发酵周期从44h缩短到,晶体蛋白含量提高。4、 展望未来近年来,随着新的诱变源的出现,原生质体诱变技术的应用也会有新的进展。离子束作为一种新的诱变源,有其特有的作用机理[ 13 ] ,使得离子束诱变具有诱变谱广、变异幅度大、突变率高等优点,其应用也取得了很多重要的成果,特别是运用离子注入选育Vc菌株的成功,为我国的VC 行业增添了活力。航天搭载的微生物菌种,能借助微重力、空间辐射、超真空等综合空间环境因素的转换,在较短时间里创造目前其它育种方法难以获得的罕见基因突变,以此来进行微生物育种是空间技术育种的一个重要的应用领域。利用空间技术对某些抗生素的产量提高及酶制剂研究曾有些可喜的结果。将离子注入、空间技术与微生物原生质体技术结合起来,微生物原生质体诱变技术将会有更加广阔的应用前景。5、结语随着遗传学和分子生物学领域的飞速发展, 许多新型复杂的技术被应用于菌种选育, 如原生质体融合育种技术和基因工程育种技术等, 但是诱变育种技术仍是提供菌株生产能力的重要有效手段。它获得的正突变率相对较高,可以得到多种优良突变体和新的有益基因类型。另一方面,诱变育种存在一定的盲目性和随机性,在实际应用中,研究者应根据出发菌株及实验室条件等具体情况来选择合适的诱变方法。本实验室将物理因子和化学因子结合起来对多种酵母菌株进行复合诱变,均得到了理想菌株。此外,我们正在尝试反复采用几种诱变因子进行多次诱变,以期得到更为理想的菌株。参考文献：[1] Madigan,(美),(美),Parker,J.(美).微生物生物学[M].北京:科学出社,2001:390.[2] 曹友声,刘仲敏.现代工业微生物学[M].长沙:湖南科学技术出版社,1998.[3] 陈义光,李铭刚,徐丽华,等.新型物理诱变方法及其在微生物诱变育种中的应用进展[J].长江大学学报,2005,2(5):46- 48[4] 余增亮.离子注入生物效应及育种研究进展[J].安徽农学院学报,1991,18(4):251- 257.[5] 胡卫红.激光辐照微生物的研究概况[J].激光生物学报,1999,8(1):66- 69.[6] Leach and reproductive effects of microwave radiation[J].Bull NYAcademicMedicine,1980,55(2):249- 257.[7]顾正华.L- 组氨酸产生菌的选育[J].无限轻工大学学报,2002,21(5): 533- 535.[8]施巧琴,吴松刚.工业微生物育种学(2 版)[M].北京:科学出版社,2003:1- 4,76- 78.[9]戴四发, 黎观红, 吴石金.现代工业微生物育种技术研究进展.微生物学杂志, 2000 年6 月, 20 卷, 2 期.[ 10] 胡杰,潘力,罗立新,等1米曲霉孢子原生质体复合诱变及高活力蛋白酶菌株选育[ J ]1食品工业科技, 2007, 28 (5) :116～1191[ 11 ] 朱林东,金志华1普那霉素产生菌的原生质体诱变育种[ J ]1中国抗生素杂志, 2006, 31 (10) : 591～5941[ 12 ] 王丽红,郭爱莲1苏云金杆菌NU- 2原生质体复合诱变的研究[ J ]1微生物学杂志, 2006, 26 (4) : 23～261[ 13 ] Huiyun Feng, Zengliang Yu, Paul K Chu1 Ion imp lantationof organisms [ J ] 1Materials Science and Engineering, 2006, 54(3- 4) : 49～1201