十米之上
灵芝,又名瑞草,芝草,是我国传统的药食两用的珍贵保健药。祖国医学对灵芝的药效研究源远流长,自古以来被认为有起死回生的功效,是名贵药材中的极品,远在周朝《列子》一书中就有“朽壤之上,有南芝者”。东汉时期的《神农本草经》中载有:“益心气”、“安精魂”、“补肝益气”、“坚筋骨”、“好颜色”等功能。明代李时珍的,《本草纲目》对灵芝做如下描述:“苦、平、无毒。主治心中结,益心气。补中、增智慧、不忘。久食轻身不老。灵芝是担子菌纲,多孔菌科,灵芝属真菌。一般供药用的主要是赤芝(Ganoderma lucidum)和紫芝(Ganoderma japonim)。研究表明,灵芝的组成成分复杂,具有多种有效成分和广泛的生物学作用,能治疗多种疾病。本文就灵芝的有效成分和生物活性特别是灵芝多糖的生物活性及提取方法作一综述。1.1灵芝的有效成分和生物活性 研究证明,灵芝含有多糖、氨基酸、蛋白质、多肽、甾类、有机酸、挥发油、油脂、生物碱、长链烷烃以及我种酶和无机离子。经研究不同品种灵芝,同一品种的不同生长阶段,野生与人工培养灵芝,所含的化学成分不同。1.1.1灵芝多糖 灵芝多糖(GLP)是灵芝的主要活性成分,其种类很多,主要有葡聚糖、杂聚糖、半乳糖、甘露糖、甘露岩藻半乳聚糖、阿拉伯糖、阿拉伯木质葡聚糖等。灵芝中多糖的含量因灵芝品种、提取方法与多糖的纯度等不同而有较大差异。灵芝多糖目前已分离到的有200多种,其中大部分为B-型的葡聚糖,少数为A-型的葡聚糖,多糖链由三股单糖链构成,是一种螺旋状立体构形物,其立体构形和DNA、RNA相似,螺旋层之间主要以氢键固定定位,分子量从数百到数十万,除一小部分小分子多糖外,大多不溶于高浓度的酒精中,在热水中溶解,大多存在于灵芝细胞壁内壁。液体培养的发酵液和固体培养基中有灵芝菌丝分泌的胞外多糖。胞内多糖胞外多糖都是有效多糖。灵芝多糖大多为异多糖,即除含有葡萄糖外,大多还含有少量阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖等其它单糖。单糖间糖苷键连接有(1à3),(1à4),(1à6)数种。多数有分枝,部分多糖含有肽链,多糖分枝密度高或含有采访链的其药理活性一般也比较高。灵芝多糖结构中含有较多的糖苷键可能是使其具有强烈药理活性的原因。灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一,因此,也特别受到医学科技工作者的重视,研究报导也最多,现知灵芝多糖有广泛的药理活性,能提高机体免疫力,能提高机体耐缺氧能力,消除自由基,抑制肿瘤,抗放射,提高肝脏、骨髓、血液合成DNA、RNA、蛋白质能力,延长寿命等。灵芝的多种药理活性大多和灵芝多糖有关。1.1.2灵芝酸 灵芝酸(Ganodenic acid)是灵芝的另一主要活性成分。灵芝酸是一种三萜类物质,基本构造为数个异戊烯首尾相连构成,大部分为30个碳原子、部分为27个碳原子。灵芝酸有四环三萜和五环三萜二类。各种灵芝中已分离到的灵芝酸已达100多种。灵芝酸是灵芝的苦味成分的主要来源,可以作为鉴定灵芝品种的依据之一。灵芝酸在不同种的娄芝中或同一品种培养基培养的及不同生长阶段的子实体中,其含量是不同的,所以其苦味程度也有所不同,一般味苦的娄芝其灵芝酸含量往往较高。日本对灵芝商品及灵芝制成品的灵芝酸含量十分重视,认为灵芝酸含量高,灵芝产品质量就好。灵芝酸有强烈的药理活性,有止痛、镇静、抑制组织胺释放、解毒、保肝、毒杀肿瘤细胞等功能,是灵芝的主要有效成分之一。灵芝酸能抑制大鼠巨细胞释入组织胺,抑制血管紧张肽转化酶的活性,降低血压,灵芝酸还能抑制大鼠肝细胞从24,25-二氢羊毛甾醇合成胆固醇,可以用来防治动脉粥样硬化和心脏病。Jorgel等从赤芝提取的几种灵芝酸具有细胞毒性,能杀伤体外培养的肝癌细胞。1.1.3各种元素 灵芝中含有多种元素。不同品种灵芝中元素的种类和含量略有差异,人工培养的灵芝与野生灵活子中的元素种类和含量也不一致。等离子体发射光谱分析(IPC)结果表明:灵芝浸膏中含有25种元素,其中Ca,Mg,P,Fe,Zn,Cu,Ni,Co,Cr,Mo,Li,B,V,Sn,Ge,Sr,Ti,Se等19种为人体必需或有益的常量或微量元素,原子吸收光谱分析(AAS)结果表明:灵芝浸膏粉中含有丰富的钙(2330ppm)、镁(2440ppm)、磷(45000ppm)、及铁(390ppm)、锰(156ppm)、锌(55.3ppm)、锗(25.0ppm)等,这些元素为人体正常生长发育所必需或在人体内起重要的保健作用。已知,Fe,Ca,Zn,Mn等有养血益肝、补肾之功效;Zn,Cu,Mn,Li等微量元素与活血化淤、益气安神等功效有关;微量元素Ti对预防心血管系统疾病起重要作用;此外,Ge,Se,Mn,Cu,Mo,Cr,Ni,等微量元素与人本抗衰老、抗癌等密切相关。在灵芝的菌丝体和发酵液中,磷的含量相当丰富,磷具有镇静安神的作用,灵芝对神经衰弱和顽固失眠的疗效与磷的作用有着密切关系。文献报道,担子菌纲多孔菌中有机锗的含量高达800—2000mg/kg,它有抑制多种肿瘤的生长,调节免疫功能等作用,因此有人认为灵芝中的有机锗有某种生理活性。但文献报道灵芝中的有机锗含量差异很大,不同产地的野生灵芝,人工培养与野生灵芝的有机锗含量均不相同。野生灵芝中有机锗的含量一般都很低,有的甚至不能检出。有一日本作者报道,不同地区和生长阶段的灵芝,有机锗含量为13—78ug/kg,而水提物中未检出。这证明,灵芝水提物的生物学作用与锗无关。中国医学科学院药物牵研究所有人将有机锗加入深层发酵培养菌丝体的培养液中,可使菌丝体中有机锗的含量显著增高。由此可见,对于人工培养的灵芝,无论是子实体还是菌丝体,都可以根据人们的需要认为的在培养基中加入某种成分,而使灵芝中该成分的含量显著提高。1.1.4生物碱 灵芝腺苷是一种活性很强的物质,是灵芝的主要有效成分之一。灵芝含有腺嘌呤和腺嘌呤核苷,尿嘧啶和尿嘧啶核苷。灵芝有多种腺苷衍生物,都有较强的药理活性,能降低血液黏度,抑制体内血小板聚集,能提高血液供氧能力和加速血液微循环,提高血液对心、脑的供氧能力。Akira Shimizu 等报道,腺嘌呤核苷是赤芝水提取物抑制血小板凝集的有效成分。动物实验表明,尿嘧啶和尿嘧啶核苷对实验性肌强直症小鼠血清醛缩酶有降低作用。紫芝中含有五种生物碱,一种为Y-三甲胺基丁酸,在窒息性缺氧模型中,有提高存活时间的作用,并能使离体豚鼠心脏冠状动脉流量增加。1.1.5其它 灵芝中含有少量蛋白质、多肽、氨基酸。赤芝孢子内脂A有降胆固醇的作用。赤芝孢子酸A有降转氨酶作用。灵芝、紫兰、薄树芝中的薄醇醚,灵芝孢子中的孢醚,可使部分切除肝脏的小鼠的肝脏再生能力增强。灵芝纤维能降胆固醇,预防动脉粥样硬化、便秘、糖尿病、高血压、脑血栓等。余竟光等从薄盖灵芝深层发酵菌丝体中分离到4种呋喃衍生物。药理实验表明其中5-羟甲基呋喃甲醛有抑制血小板聚集的作用。曾惜春等从当归分离得5-羟甲基呋喃甲醛,认为可能是扩张冠状动脉、提高小鼠心肌摄取铷的有效物质。此外,灵芝还含有多种长链脂肪酸、长链烷烃、甾类及多种酶类等,这些成分是否参与某处生理活性尚不清楚。1.2灵芝多糖的生物活性 1.2.1调节免疫 灵芝对免疫系统的影响是双向的:对抗病的特异性和非特异性免疫能力,灵芝有促进作用,而对致病的过敏反应,则有抑制作用。从两个不同角度加强了机体保持稳态、抵抗疾病的能力。此种双向作用的详细机制尚待阐明。但已可认为,调整免疫功能,抑制过敏反应也是扶正培本作用的重要内容。灵芝对支气管哮喘等与过敏有关的疾病有效,提示它可能有抑制过敏反应的作用。雷林生等控讨了GLP 对免疫抑制剂和抗肿瘤药引起的免疫作用的拮抗作用。结果表明,GLP 的拮抗作用的强度取决于这些药物的免疫抑致作用的程度,只有这些药物轻度抑致免疫反应时,GLP 才具有完全拮抗作用。1.2.1.1灵芝多糖对T细胞的影响灵芝多糖在体外直接活化脾淋巴细胞,但活化水平较低,远不如ConA或PHA的作用强,使活性E-玫瑰花结形成率增高。灵芝多糖体外协助ConA诱导的脾淋巴细胞转化,促进活化T细胞的增殖,其程度远远高于单用ConA和灵芝多糖T细胞增殖的和。但超过一定剂量时,这种促进作用消失,甚至显示出抑制作用。灵芝多糖对不同品系小鼠脾细胞的活化与增殖作用相似,对C3H、C57BL/6J、LACA、swiss等品系的小鼠脾细胞,均有显著的协同ConA诱导其转化的作用。体内给药,同样能明显促进ConA对小鼠脾淋巴细胞的活化增殖。灵芝多糖在体外能显著促进ConA诱导Th细胞产生淋巴因子IL-2和Y-IFN,但单独刺激小鼠脾细胞,只有微弱的活化作用。灵芝多糖超过一定浓度时,可Th细胞产生IL-2。其浓度比引直脾细胞拉殖抑制的浓度更低。灵芝多糖对荷S180肿瘤的小鼠IL-2活性亦有促进作用。赤芝和树舌多糖在体外能明显对抗氢化可的松和环磷酰胺对ConA诱导脾淋巴细胞转化增殖的抑制。体内给药能荷S180肿瘤小鼠的IL-2和-IFN活性降低。灵芝多糖对正常成年鼠和免疫功能衰退的老龄鼠显示出相同的活性。从赤芝提取的三种灵芝多糖能显著促进正常ConA诱导正常成年鼠和免疫功能衰退的老龄鼠的脾淋巴细胞增殖,使老龄鼠的脾淋巴细胞增殖接近正常成年鼠,显示出抗衰老的作用。平盖灵芝(树舌)多糖能显著增强甲基化的细菌a-淀粉酶和不完全的福氏佐剂(M-BaA-IF)引起的迟发性过敏反映,这一作用是由于此药能激活非特异性的具有扩大细胞免疫效应的T细胞所致,灵芝多糖成分BN3 C与 ConA 合用,可显著提高小鼠脾脏T细胞增殖,并部分对抗环磷酰胺对脾细胞增殖的抑制作用。灵芝多糖(GLP)是从灵芝菌培养物的菌丝体中提取的多糖。向小鼠腹腔连续注射大剂量的GLP(4/mg只,2mg/只)5天,对T细胞增殖、细胞表型的表达、T细胞诱生IL-2及B细胞产生溶血素抗体均有抑制作用:当适量的GLP(0.1mg/只,0.05mg/只)连续向小鼠腹腔注射5天,可明显增强上述免疫指标。表明GLP是一种生物反应调节剂,适量可增强机体的细胞及体液免疫功能,为临床应用GLP治疗免疫功能紊乱提供了理论依据。1.2.1.2灵芝多糖对B细胞的影响赤芝多糖对抗SRBC空斑形成细胞的产生有促进作用,但对正常成年鼠作用不明显,而对免疫功能衰退的老龄鼠则有明显的促进作用。体外单独用赤芝多糖,对B细胞有轻度活化作用,高斌等报道,杩舌多糖能提高荷瘤鼠的NK细胞活性,并认为与抗肿瘤作用有关。1.2.1.3灵芝促进巨噬细胞的吞噬功能腹腔注射灵芝提取物,能促进腹膜渗出细胞、巨噬细胞和多型核白细胞的积聚。灵芝与氯喹合用,可以改善氯喹所引起的免疫抑制现象,显著增强腹腔巨噬细胞系统的吞噬功能。灵芝腹腔注射给药可使巨噬细胞的吞噬能力和巨噬细胞溶酶体酶的活性明显增强,并呈剂量反应关系。高斌等报道,树舌多糖有体外诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌IL-1样物质,较对照组增加约2倍。灵芝液及灵芝多糖连续给药,能提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红血球的活力。天噬百分率和吞噬指数均有提高。1.2.2抑制肿瘤 从不同品种或同一品种灵芝中提取的多糖,其抗肿瘤活性因提取方法、多糖的种灯和纯度等不同而有很大差异,其有效剂量(相当于生药)也有很大差异。口服多糖的有效剂量要比腹腔注射大得多,同等剂量时,口服一般不显示任何活性,因此各作者均采用腹腔注射给药。不同灵芝的不同多糖,其抑瘤率差异很大,与生药的有效剂量相差几十至几百倍。日本学者从灵芝中提取的多糖对S-180肉瘤有抗肿瘤作用,能抑抑制瘤细胞增殖。关洪昌等发现,灵芝多糖D6对小鼠艾氏腹水癌也有一定抑制作用。1.2.3对核酸、蛋白质合成的影响 核酸,蛋白质是生命的物质基础,体内一切重要的生命过程都与核酸,蛋白质发生联系,有的灵芝多糖能促进核酸、蛋白质的生物合成。这对机体细胞物质代谢和能量代谢的调节可能产生积极的影响,从而增强机体抗病能力,促进病人康复。这可能是灵芝扶正固本作用的机制之一。灵芝多糖D6、银耳多糖及糖及银耳孢子多糖均能促进H-亮氨酸掺入小鼠血清蛋白更新率,进一步研究证实,灵芝多糖D6、银耳多糖还能促进H-亮氨酸掺入小鼠肝脏蛋白质,这些都反映肝脏合成蛋白质的能力增强。由于引此二多糖均能促进H-尿嘧啶核苷掺入小鼠肝脏RNA,但不能促进H-胸腺嘧啶核苷掺入小鼠肝脏DNA,似表明它们能促进转录过程,加速RNA合成,但对DNA合成无影响。灵芝多糖D6还分别能促进H-Leu和H-TdR掺入小鼠骨髓蛋白质、RNA和DNA,但对H-TdR掺入艾氏腹水癌细胞DNA无影响。灵芝多糖可引起体外培养的小鼠脾细胞核DNA、RNA含量的显著增加,细胞内超微核结构改变,细胞质和细胞核的平均截面积增加,核质比下降,促进细胞的增殖。灵芝多糖可明显促进混合淋巴细胞培养中脾细胞对[H]TdR的摄取,增加脾细胞中DNA多聚酶a的活性。表明灵芝多糖可通过诱导DNA多聚酶的产生,促进免疫细胞中DNA的合成和细胞增殖,加速免疫应答过程和同种异型坑原刺激的淋巴细胞转化。灵芝多糖也可以完全拮抗环胞素A、丝裂霉素C、氟尿嘧啶和阿糖胞对小鼠混合淋巴细胞反映(MLR)的轻度抑制作用,部分拮抗氢化可的松对MLR的严重抑制作用。灵芝的一种小分子多糖,促进H-尿嘧啶核苷掺入肝RNA,其增加率为20.5%,促进H-胸腺核苷,H-尿嘧啶核苷掺入骨髓RNA和DNA,其增加率分别为48.7%和43.3%。所以这些多糖对肝病恢复,骨髓造血均有促进作用。1.2.4其它 从赤芝提取的葡萄糖、杂多糖、肽聚糖等具有降血糖作用。赤芝葡聚糖能刺激分泌胰岛素,并促进葡萄糖在外周组织的利用,对正常鼠和高血糖均有明显的陈旧降血糖作用。抗放射与促进骨髓造血机能:灵芝液具有抗放射作用,可明显降低Coγ射线照射小鼠的死亡率,并使平均存活时间显著延长。灵芝多糖D6促进蛋白质合成、改善造血机能、诱导细胞色素p-450等作用均有利于增强机体的防御功能,提高机体保持稳态的能力。灵芝多糖能增强小鼠耐缺氧存活的能力。灵芝制剂能降低机体及心肌的耗氧量,增加缺氧状态下豚鼠的冠状动脉血流量、增加心肌ATP,改善心肌缺血缺氧状态;对由于缺氧引起的家兔缺血型心电图改变有显著的对抗作用。提高小鼠耐缺氧的能力、延长缺氧小鼠平均存活时间。我的毕业论文,呵呵!
我是飞儿
高等中医药本科 教育 中药学专业设置标准是规范中药教育的重要文件,编制该标准是中医药教育的一件大事,它的制订为保证本科中药学专业教学质量和中药教育的评估提供了依据,对规范中药专业的办学标准,促进本科中药学专业的健康和持续发展具有积极的意义。下面是我为大家推荐的本科中药学论文,供大家参考。
本科中药学论文 范文 一:不同厂家卡马西平片溶出度考察
摘 要 :一种快速的,有选择性的,灵敏度高的反向高效液相色谱法同时测定血浆样品中奥卡西平,其主要代谢产物(单羟基和双羟基卡马西平),拉莫三嗪,卡马西平和卡马西平-环氧丙烷的 方法 已实现。
在固相色谱柱(SPE)上提取得到被分析组分,在Zorbax SB-CN 柱上实现色谱分离。 在紫外吸收波长为214nm下,该色谱峰面积比用于定量分析。这高效液相色谱法已成功的用于对我们研究所中癫痫患者得血药浓度监测的日常评价,以及用于关于病人由于药物诱导或抑制OXC代谢产生治疗效果的药代动力学研究。
关键词:奥卡西平;代谢物;HPLC;监测
1. 前言
奥卡西平(OXC),10酮基卡马西平(CBZ)衍生物,是一个比较新的抗癫痫药物,其作用机制与适应症与卡马西平相似。口服给药后,OXC被胃肠道完全吸收,迅速且几乎完全(96%-98%)得降解为药理活性代谢物单羟基衍生物(MHD)。MHD主要通过与葡萄醛酸结合而代谢,另外一小部分MHD被氧化成二羟基衍生物(DHD)。DHD是一个无药理活性得代谢物,同时也参与了卡马西平的代谢途径。(图1.)
OXC可以作为单一疗法以及与其他AEDs(抗癫痫药物)联合的多疗法,如拉莫三嗪 (LTG),丙戊酸(VAL),托吡酯(TPM)的和非班酯(FBM)。我们研究所的癫痫患者通常用CBZ或OXC与LTG等其他抗癫痫药物联用进行治疗。虽然目前没有数据显示,OXC血药浓度监测对癫痫患者的药物治疗有用,药物诱导或抑制的相互作用清楚得表明,对照LTG[2,3]可被视为一个理由,对可能会由于OCX相互作用而进行仔细的监测。另一个原因是实施一分析程序的同时测定LTG,CBZ,CBZ 10,11-环氧化物(CBZ- epox),OXC和其主要代谢物而不受其他目前
相关的药物(如苯妥英,乙琥胺,非班酯 , 苯巴比妥和丙戊酸)干扰,可以不需要改变分析程序时,药物在不同的样本中测试会改变。这样可以节省双方的时间和金钱。
HPLC-UV方法目前用于OXC治疗药物监测(TDM)的做法也只是分析这种药物和它的代谢产物[4,5][1];有些是反向选择[6,7],并要求昂贵的手性柱和长度的分析倍。
由于OXC与CBZ有一个化学结构和性质很相似,Lensmeyer[8]提出的操作程序是目前HPLC法发展的出发点。不过,我们决定要修改方法,因为lensmeyer的分析程序不允许量化LTG和DHD ,因为这两个组分是一起洗脱出的。
2. 材料与方法
2.1 标准
OXC,MHD和DHD由Novartis Pharma (Basel, Switzerland)友好提供;LTG由
GlaxoSmithKline
(Verona, Italy)提供;CBZ, CBZ-epox, and cyeptamide (CYE)购自Sigma-Aldrich (Steinheim, Germany). CYE,CBZ储存溶液(1μgμl),在-80℃下储存,CBZ-epox and LTG 制成甲醇溶液,MHD和DHD溶于去离子水中,OXC溶于丙酮中,丙酮醇流动相包含CBZ, CBZ-epox, OXC, MHD, DHD 和
LTG,内标物溶液(100ngμg-1), 水/乙腈(3/1)制成。
2.2 试剂与萃取剂
所有溶剂为HPLC等级:乙腈和醋酸购自Merck (Darmstadt,Germany); 甲醇来自Carlo Erba (Milano,Italy); 醋酸铵和三乙胺来自Sigma-Aldrich (Steinheim, Germany).固相萃取柱(SPE)Isolute C8柱(EC)含有200毫克的稳定相,并以3ml容积规格购自StepBio(Bologna, Italia).在Milli-Q Plus 的试剂级别的给水系统中的水是去离子的,过滤且净化的,来自Millipore (St. Quentin, France).
2.3 色谱条件
HPLC系统包括一个126溶剂传递装臵模型(Beckman Instruments, Berkerley, CA),一个LC 295 UV-VIS 模型(Perkin Elmer, USA),设在214nm,与一个406接口单元模型(Beckman Instruments, Berkerley,CA)连接,用于一个GOLD色谱工作仪(version 6) (Beckman Instruments).
色谱分离分别采用一个Zorbax SB-CN柱Hewlett Packard (USA), 250mm×4.6mm i.d.,粒子大小5m,一个保护柱LichroCART 4-4 RP-8, 5 m (Merck, Darmstadt, Germany)被连接到保护分析柱上。柱子和前臵柱分别被设在50℃的恒温箱中(Jones Chromatographic,USA)。流动相由水/乙腈/甲醇/乙酸/三乙胺(体积比为725/150/125/1/0.6)混合,超声脱气Branson (USA)。流动相PH用乙酸调整为4.20以获得LTG与DHD峰的完全分离(图2)。流速设为12mlmin。 制备标准品和对照品
标准品和对照品包括CBZ,CBZepox,OXC, MHD, DHD, 和LTG添加已知含量的分析物于空白血浆中。他们包括每批患者的样本。
2.5 样品制备
我们结合含30μl CYE(I.S.)(100ngμl-1)的500μl 血清和500μl饱和的醋酸铵溶液。混合后,样品被转移至含3ml甲醇的萃取柱,然后3ml水洗。在用3ml水洗萃取柱后,样品将在3ml甲醇中被洗脱出来。然后在40℃的氮气流通下蒸发有机相,残留物用200μl水/乙腈(3/1)溶解,然后取50μl注入到HPLC系统中。 -1
3. 结果
3.1 选择性
用上述的色谱条件我们可靠地将六个组分与内标物分离。色谱性能良好,使所有物质峰形与合适的保留时间有效。在一个干扰研究中,提取空白血浆与抗癫痫药物或内标物共同洗脱得到了一个游离的峰。(图.3.)在对病人的多药疗法中,非班酯,加巴喷丁,托吡酯,乙拉西坦和乙琥胺在这过程中不被提取,因为它们不断地离解。丙戊酸酸和苯妥英分别提取,而不是共同与有趣的组分被洗脱出来。苯巴比妥( Pb )和MHD是共同洗脱出来的。因此,在有PB和OXC9(和MHD)存在时,样品用盐酸(1N)和乙醚预处理。在SPE程序允许PB通过并进入有机相并在此后从水相中柱提取其他组分前进行样品酸化。
3.2 线性
我们的线性方法检查是通过三份标准品分析的,在范围为0.3-60μgml的CBZ,0.3-50μgml的CBZ-epox,0.1-50μgml的OXC,0.5-150μgml的MHD,0.5-50μgmlDHD 和0.3-80μgml-1的LTG是优良的。(图.4.)
3.3 回收率
提取回收率(在五种不同浓度下评价以及在相同浓度下对血浆样本提取物和未提取标准物的 4 -1-1-1-1-1
峰面积比较评价)很好。OXC为90.35-101.4%,MHD为93.73-104.21%,DHD为95.58-103.46.CBZ为95.78-102.84,CBZ-epox为97.54-101.87,LTG为95.78-102.54。
3.4 限量
在信噪比3:1下,限量为OXC(0.1μgml-1),MHD(0.4μgml-1),DHD、LTG、CBZ和CBZ-epox(0.2μgml)。
3.5 日内和日间精密度与准确度
在三个不同浓度下,范围为OXC(0.1-1μgml-1),MHD和CBZ(1-20μgml-1),DHD,CBZ-epox和LTG(1-10μgml-1),制备五组质量控制样品。相同的提取样本跑了三次后计算日内准确度,在连续四天分析后计算日间准确度。(表 1)对于所有组分,由变异系数(CV)确定的日内和日间精密度低于6%。
4. 讨论
这项研究的目的是如何用HPLC-UV法同时测量联合用CBZ或OXC与LTG和其他抗癫痫药物进行治疗的癫痫患者的血浆中CBZ,OXC和它们的主药代谢产物及LTG。该法适用于用这些药进行单一或多疗法的病人。我们选择SPE样品前处理,因为这种技术比起液液萃取能获得回收率高且更洁净的样本。
该法非常灵敏且其重现性非常好,用高效液相色谱技术,再加上紫外检测允许同时测定人血浆中三种抗癫痫药物(OXC,CBZ和LTG)和它们的主药代谢物(MHD,DHD和CBZ-epox)。在我国实验室经过数月的例行评价这种方法,我们结论是,它对这些药物的TDM有用处。通过使用这一程序,提取不需要超过30分钟,色谱分离只需时17分钟,且色谱系统呈现长期的稳定性;在进行1200次分析后,色谱分离才变差(宽峰和低分辨率)。
参考文献:
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[4] Mandrioli R, et al. Liquid chromatographic determination of oxcarbazepine and its
本科中药学论文范文二:裕丹参不同播期育苗比较研究
摘 要 目的:本研究以河南方城裕丹参为材料,探讨裕丹参育苗的最佳播种时期,以期为当地裕丹参的规范化生产提供一定的理论依据。方法:采用大田试验的方法,通过对不同播期间的株高、根长、折干率等方面进行比较研究,探讨不同播期对丹参育苗生长发育的影响。结果:发现播期2(即6月28日播)的丹参发育最好。结论:6月28日左右为该地区丹参育苗播种的最佳时期。(注意黑体内容的变换)
关键词: 丹参 ;播期;育苗
1 文献综述
1.1 丹参概述
1.1.1 植物形态
丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge.)为多年生草本植物,茎高达80cm,叶柄及叶轴均被长柔毛,羽状复叶对生,小叶3~5(7)卵形或椭圆状卵形,长1.5~8cm,
两面疏被柔毛。轮伞花序为假总状,花序轴和花萼密被腺毛和长柔毛;花萼钟形,长约11mm;花冠紫蓝色,长20~27mm,冠桶内具斜向毛环,下唇中裂片宽偏心形,药隔下臂先端连合,药室不育。子房4深裂,花柱着生于子房底,小坚果椭圆状倒卵形,花期4~6月,果期7~8月。
1.1.2 生境与习性
野生丹参生于山坡林下、草丛或溪谷旁,海拔120m~1300m。产于河北、山西、陕西、山东、河南、江苏、浙江、安徽、江西、湖南、及四川。适应性强,喜气候温暖湿润、阳光充足的环境。春季地温10℃时开始返青,在气温低的地区,植株生长发育不良,幼苗出土亦慢,温度20℃~26℃相对湿度80%时生长旺盛,秋季气温降至10℃以下时,地上部分开始枯萎。丹参耐寒,在北方能露土越冬,根在-15℃的情况下可安全越冬。为深根植物对土壤要求不严,但以疏松肥沃的沙质壤土生长良好。中性、微碱性的土壤最适宜 种植 ,粘土排水不良易烂根。
1.1.3 丹参的应用历史和药用价值
我国应用丹参历史悠久。始载于东汉的《神农本草经》“主心腹邪气,肠鸣幽幽如走水,寒热积聚;止烦渴,益气。”被列为上品。北魏《吴普本草》载:“治心腹痛。”表明丹参自古用于热证和肠鸣,泻肠内积聚物和腹中之邪气。列为上品表明它无毒副作用并作清补之用。以后随着中医实践的发展,人们逐渐转向丹参可养血、调经、安神并可治风邪热证。
明代《本草纲目》载“活血、通心包络、治疝痛”按《妇人明理论》云:“四物汤治妇女病,不问产前产后经水多少,皆可多用,唯一味丹参散主治与之相同,盖丹参散能宿血,补新血,安生胎,罗斯泰,止崩中带下,调经脉,其功大类当归、地黄、芍药之故也。”清代《本草逢源》记有:“丹参本经治心腹邪气,肠鸣幽幽如走水等疾,皆积血内滞而化为水之候,止烦漫益气者,淤积去而烦漫愈,正气复也。”即在《神农本草经》对丹参描述的基础上,进一步强调了丹参在活血化瘀、养血、安神、调妇人经血、止崩带下及治疗肿瘤的功效,并记述一味丹参散即可用于治疗妇科疾病。
现代科学研究和临床表明:丹参可治疗迁延性和慢性肝炎,血栓闭塞性脉管炎,迁延性肺炎,慢性肾功能不全等。目前丹参更是中医活血化瘀、调经、安神、止崩带下与抗菌消炎的一味常用良药。《中华人民共和国药典》2005版归纳丹参的功效为祛瘀止痛,活血通经,清心除烦,主治“月经不调,经闭痛经,症瘕积聚,胸腹刺痛,热痹疼痛,疮疡肿痛,心烦不眠,肝脾肿大”。复方丹参滴丸,复方丹参注射液等就是利用复方治疗,主要用于心绞痛等冠心病。其中复方丹参滴丸(天津产)作为中成药于1997年12月被美国食品与药品管理局准许在美国进行临床研究,为丹参进入国际市场奠定了基础。
1.2 中药材GAP 与丹参的规范化种植
1.2.1中药材GAP
中药材GAP是《中药材生产质量管理规范(试行)》(Good Agricultural Practice for Chinese Crude Drugs)的简称。其中GAP是Good Agricultural Practice的缩写,是由我国国家食品药品监督管理局组织制定,并负责组织实施的行业管理法规。该规范从保证药材质量出发,规范了中药材生产的全过程。其内容包括中药材的产前(产地生态环境:对大气、水质、土壤环境生态因子的要求:种质和繁殖材料;正确鉴定物种,种质资源的优化)、产中(优良的栽培技术 措施 ,要点是田间管理和病虫害防治),产后(采收与产地加工:确定适宜采收期及产地加工技术)包装、储藏、质量管理等全过程的系统原理,是一套完整的管理体系。
GAP针对植物药材、动物药材和矿物药材,以控制产品质量为核心以制定出科学的符合中药材社会化生产的标准操作规程(SOP)为手段,以实现中药材生产的优质高效为目标,以达到药材“真实、优质、稳定、可控”为最终目的。
1.2.2 中药材GAP 的实施及基地建设的意义
建立中药材的生产、采收、加工的规范标准,对于保证中药材产品以至中成药产品质量具有特别重要的意义。在中药现代化国际化进程中首先必须从中药材的质量抓起。中药材标准化是中药现代化和国际化的基础和先决条件。而中药材的标准化有赖于中药材生产的规范化。因为中药材是通过一定的生产过程形成的,药用植物的不同种植、不同生态环境、不同栽培和研制技术及采收、加工等方法都会影响药材的产量和质量,所以中药材生产是中药药品研制、生产、开发和应用整个过程的源头,只有首先抓住源头,才能从根本上解决中药的质量问题及中药标准化和现代化的问题 。
制定及实施GAP是促进农业产业化的重要措施。产业化不仅仅是制药企业和医疗保健事业的需要,也是农业结构调整的一条道路。中药是我国医药 传统 文化 的组成部分,但是许多传统道地药材往往生长于经济不发达的偏远地区,长期以来约80%的常用药材主要依靠采挖野生资源来满足社会需求。长期采挖的结果导致资源枯竭,生态环境破坏。建设中药材生产基地是中药资源保护扩大再生和生态环境保护最有效的手段,也是持续供应中药材产品的根本途径。因此,通过对道地中药材品种、种质、产地土壤、气候、栽培、加工等的系统研究,开展规模化规范化人工栽培,可在保证药材质量的同时保护野生资源和生态环境,实现药材资源的持续利用。
1.2.3 中药材GAP实施的进展
2002年2月国家食品药品监督管理局(CFDA)发布了《中药材生产质量管理规范(试行)》(即GAP的认证)。2003年11月1日起,SFDA开始正式受理
中药企业GAP认证申请。继国内第一批中药材规范化种植基地通过GAP认证试点工作,GAP认证将开始在我国中药材种植行业作为自愿认证逐渐推广。2005年6月止,已有26家中药材生产企业种植的26个中药材品种通过了中药材GAP认证。如河南西峡山茱萸生产基地、山西商洛丹参生产基地、四川雅安鱼腥草生产基地、安徽阜阳板蓝根生产基地等。
1.2.4 丹参的规范化生产
1)种质资源(四级标题一律去掉)
张国兴等[1]从生态型出发,研究国产著名道地药材川丹参大叶型、小叶型和野生型品种资源特性。首次确立了川丹参的品种资源类型建立了丹参品种资源分型研究的性状和生产力特性指标体系。小叶型丹参为川丹参的优质高产新品种。郭保林等[2]通过不同产区的丹参样品进行RAPD分析将扩增条带用NTSY-pc和AMDVA软件进行数据处理。研究表明,丹参居群内遗传多样性十分丰富;山东和河南产的栽培居群栽培种源来自当地野生居群,尚没有进行人工选择,丹参酮A等成分减少的原因主要是栽培条件不理想;地区间居群的遗传分化不均衡,四川中江和河北承德居群与 其它 居群较远;丹参道地性的确定应当依据现代的优质药材评价系统,山东和河南产的丹参也可认为是丹参的道地药材。
2) 产地生态环境
伍均等[3]对四川中江县丹参产区生态环境和土壤条件进行了调查研究,结果表明:丹参主要栽培在该县西北部地山区海拔600m~900m坡地气候温暖湿润,主产土壤为中壤质的石灰性和中性紫色土。一般土壤有机质和氮钾属于中低水平,速效磷丰富;在微量营养元素中,有效铁、锰、铜充足,有效锌、硼普遍缺乏。黄志勇等[4]用GAP质控下栽培的中药丹参作为重金属内控标准物,经过不同实验室测试和不同市区稳定性测试的试验结果表明,丹参内控标准金属含量的数据准确可靠,稳定性好可作为丹参中药材重金属质量控制的参考标准,也可作为其它中药GAP规范管理中有毒元素的内部质量控制的参考标准。蒋传中等[5]报道:山西商洛是丹参的道地产区,其独特的地理气候条件特别适宜丹参生长;其大气、灌溉水质、土壤环境无污染,特别适宜建立丹参GAP基地。张国兴等[6]根据主产区高产丹参和低产丹参药材质量的差异性,研究了非地带紫色土区丹参土壤发生学特征值分子比率的特性。试验结果表明,紫色土发生学特征值是丹参生药产量及规格品质的中药土壤因素之一,土壤风化程度深浅与丹参产量密切相关。
3) 栽培技术措施
朱小强等[7]为解决丹参春栽出苗慢,出苗不齐,缺苗多,影响产量的问题。采用分根法春栽,地膜覆盖,对土壤温度、土壤养分、出苗时间与出苗率等因素进行了对比试验,结果表明地膜覆盖后的丹参生态效应十分明显,产量也明显高于
露地对照组。韩建萍等[8-11]利用盆栽和大田实验研究了施肥对丹参植株生长及有效成分的影响。实验结果表明:丹参移栽时作基肥的氮肥不能施用太多,否则会影响成活,苗期也会出现烧苗症状;生长中期可施用适量氮肥,以利于茎叶的生长,为后期的生长发育提供光合产物。氮:磷=1:1时,产量比对照提高了112.9%;氮:磷:钾=1:2.5:2时,丹参素和丹参酮的总含量比对照提高25.9%和18%;总丹参酮的含量与丹参根的直径呈负相关,细根影响产量和外观品质,建议生产上应适当密植。刘文婷等[11]报道丹参的产量和其有效成分的含量均以20cm ×25cm的栽培密度为最佳,根产量以鲜重记可达163kg/亩。丹参素含量可达2.15%,丹参酮的含量可达0.42%。建议在进行丹参规范化栽培时可选择株行距为20cm×25cm的栽培密度。
1.3 影响药材质量的因素
商品药材的质量常有很大差异,为保证临床用药的安全、有效,必须要保证所用药材的质量。但是,影响药材质量的因素错综复杂,如物种的遗传基因、产地环境条件、栽培技术措施、采收、加工和贮藏等。其中物种的遗传因素、产地生态环境、栽培技术措施是影响药材质量的主要因素。研究影响药材质量的各种因素,找出它们对药材质量的影响的一般规律和特殊规律,进而实现对药材质量从生产、采收、加工、贮藏到应用全过程的动态调控,确保药材的安全、有效和质量的稳定均一。
1.4 裕丹参简介
方城古称裕州,盛产丹参,因品质优良、疗效显著,为别与其它产地丹参而冠以地名 “裕丹参”,裕丹参始于金、元,鼎盛在明、清。清《方城志》(康熙三十六年刊)载:方城疆域之广轮,盖同古裕州,星夜分之桐柏山淮水之上游 峰峦联络,溪涧环绕,野多陂陀膏腴,物产桔梗、丹参极佳,乃地道之帮,医崇之上。《名医别录》曰:“诸药所生,皆有境界, ……丹参生桐柏山川谷及太山,桐柏山乃淮水发源之山,非江东之桐柏也。”孔志云:“动植形生,因地舛生;春秋节变,感气殊功。离其本土,则质同而效异;乘于采取,则物是而时非,名实既虚,寒温多谬,施于君父,逆莫大焉。”为别丹参之良莠,好恶真伪,医者用之有据,故金代谓之“裕丹参”。
参考文献(文献标号用方括号)
[1] 张国兴,王义明.丹参品种资源特性的研究[J].中草药,2002,33(8):247.
[2] 郭宝林,林生.丹参主要居群的遗传关系及药材道地性的初步研究[J].中草药,2002,33(12):3111.
[3] 武均,陈远学.中江县丹参产区的生态环境与土壤条件[J].四川农业大学学报,2005,27(3):284~288.
[4] 黄志勇,庄峙夏.GAP质控下栽培丹参重金属内控标准物的制备和表征[J].中国中药杂志,2003,28(9):808-811.
5 蒋传中,卫新荣.丹参种植地点的选择依据及标准研究[J].现代中药研究与实践,2004,18(1):51~52.
6 张兴国,程方叙.中江丹参土壤发生学的[J].中国中药杂志,2004,29(7):636~638.
7 朱小强,王新军.丹参地膜覆盖栽培技术实验[J].商洛师范高等专科学校校报,2001,15(4):22~24.
(4)8 韩建萍,梁宗锁,孙群等.施肥对丹参植株生长及有效成分的影响[J].西北农业学报,2002,11:67~71.
磷对丹参根系生长及总丹参酮积累的影响[J].西北植物学报,(3)9 韩建萍,梁宗锁.氮、2003,24:603~607.
10 韩建萍,梁宗锁.丹参根系氮、磷营养的吸收及丹参酮累积规律研究[J].中国中药杂志,2004,29(3):208~211.
11 刘文婷,梁宗锁,付亮亮等.栽植密度对丹参产量和有效成分含量的影响[J],现代中药研究与实践,2003,17(4):14~17.
12 王新军,朱小强,吴珍等.丹参播种育苗技术的试验研究[J],商洛师范专科学校学报,2004,18(1):87~89.
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谈药用植物学的实践教学改革赵宜红,李寅超(郑州大学药学院,河南郑州450001)摘要:对药用植物学实践教学体系进行了探索,改进传统验证性实验,加强综合性、设计性和研究性实验,重视野外实习,并在实验教学中增加自由开放型实验,旨在提高药用植物学实践教学质量,培养学生的实践能力和创新精神。关键词:药用植物学;实践教学;教学改革中图分类号:G420文献标识码:B文章编号:1008-0805(2007)12-3148-02在药用植物学教学过程中,实验教学和野外实习是药用植物学的重要的实践性教学环节,其教学要求既涵盖实验教学和野外实习的一般原则,又要突出药用植物学的学科特点[1]。本文结合自身教学工作实践和文献报道,就如何提高药用植物学实践教学质量,培养学生的实践能力和创造性,以及在实验教学中如何进行自由开放型实验室初步尝试,谈谈自己的见解。1改进传统实验教学方法,确保教学质量1. 1传统的实验教学传统的药用植物学实验内容多为验证性实验,在实验教学中采取的教学方法一般是带教老师介绍实验目的、实验材料、实验内容和实验方法,然后由学生根据实验材料,按照实验内容、实验方法的描述验证学过的理论知识。虽然通过教师的讲解,学生对实验内容和方法己经有了较详细的了解,并在实验过程中对学生实验操作也有较详尽而规范的要求和不断的督导,但是学生因为缺少实验学习的能动性,在实验过程中大多敷衍了事、照本宣科,不去分析实验的机理,不去探讨实验中的问题,使实验教学的质量在教学活动中大打折扣。1. 2传统实验教学方法改进为了配合药用植物学的教学改革,对药用学实验课程的教学内容和方法要进行一些必要改革。在实验内容方面,可以把实验内容分为四部分,即基本实验技术;基础的验证性实验、综合性实验、探索性实验;在实验教学方法方面:对于不同的实验内容采取不同的教学方法,目的是让学生能积极主动的通过实验课的学习获取知识[2, 3]。1. 2. 1基本实验技术基本实验技术是指一些基本的实验技能,如显微镜的使用方法、临时装片的制作、生物绘图技术、显微化学方法以及实验室常用药品、试剂、染液等的配制,玻璃器皿的洗涤方法等等,这些基础性的实验技术,要求每一位学生都能熟练掌握,并在期末的实验考核中能有所反映。实验教学方法就采用传统的教师先讲授,然后学生进行验证的教学方法。1. 2. 2基础的验证性实验以巩固课堂所学的理论知识为目的,通过药用植物学中的经典实验和观察性实验,使学生掌握基本的实验方法和培养学生的观察能力,如植物细胞的基本形态与结构观察;植物组织的主要类型及结构观察;植物营养器官和生殖器官的结构观察等实验。这些实验按传统的教学方法虽然有利于学生基础知识的巩固,但这种单一的教学模式不能调动学生进行积极的思维,实验课显得枯燥,没有生机和活力。如果我们尝试把“验证性”实验转变为“探索性”的实验,就会有截然不同的教学效果。如在实验教学方法上,采取让学生在课前预习实验,上课时教师通过提问检查学生预习情况并对实验要点和实验注意事项简要提示,留出较多时间让学生自己动手观察,然后通过相互讨论来解决实验中出现的问题,最后由教师做总结。对有些实验的材料,除了教师准备的实验材料外,鼓励学生自己准备实验材料,如细胞、植物营养器官、生殖器官的观察、分类学上的实验都可以通过鼓励学生自己准备实验材料,提高学生学习积极性。同时在实验过程中,穿插徒手切片法、染色法、生物绘图法等基本实验技能的培养。1. 2. 3综合性实验主要针对的是植物分类学的实验,以基本实验技术和基础的验证性实验的技能为基础,变实验室单一观察的方法为实验室与野外观察相结合的方法,把传统分类学实验设计为以比较解剖和野外资源调查为主的综合实验。比如,先通过学习让学生直观的认识不同类群的植物,总结各类植物的特征,然后带学生到野外进行对比和扩展实验,巩固理论知识。如对裸子植物、被子植物常见重要类群的特征和分布特点;校园常见物种的鉴定,检索表的编制;某一地区的药用植物资源的调查;珍惜濒危植物的调查等均可设计为综合实验。通过综合性的实验,使学生既了解植物物种的多样性、植物资源的丰富性,又增强学生保护植被,保护生态环境的决心。1. 2. 4探索性实验通过基本技能实验,基础实验和综合性实验的训练,学生已经具备了一定的植物学基础知识、操作和动手能力,可以根据学生的实际能力和实验室的具体情况确定几个研究方向,让学生自己查资料,自行设计实验方案,经教师检查修改后,利用野外实习和课外假日时间来完成实验的题目。通过探索性实验可以培养学生发现问题、分析问题、解决问题的能力,培养学生创造力和科研能力,为学生完成毕业论文和将来的自我发展打下坚实的基础。2重视野外实习,培养学生的观察能力[4~6]2. 1对生态环境的观察任何生物的生存都必须依托于一定的环境,药用植物也不例外。野外实习首先要指导学生认识各种生态环境。指出各类生态环境的特点,尤其指出重点考查的药用植物的主要生态环境。2. 2对单株植物的观察在观察其形态后,要注重从植物的分类学特征上进行观察,观察植物的根、茎、叶、花、果实等器官。对于一些当地特产的药用植物要重点观察药用部分器官的形态特征。对于细部的观察可以在采集后整理标本时进行。2. 3培养学生的采集标本能力2. 3. 1对采集标本的选择药用植物的采集要特别注意其标本的典型性和完整性。所谓典型性是指所采标本要具有明显的分类特征,在同种植物中有较强的代表性。所谓完整性,是指整株标本的根、茎、叶、花、果俱全,尤其要采带花的,因为花是鉴定种类的主要依据。对于地下部分有突出特征的药用植物,如百合科、薯蓣科等,应注意采集这此植物的鳞茎、根茎等,它们也是鉴定物种的重要依据。遇到雌雄异株的植物,应分别采集雌、雄株。草木植物的茎生叶和基生叶不同时要注意采集基生叶,如茵陈、荠菜等。寄生植物采集时要把寄生全部或部分采下,并注明关系。2. 3. 2采集的注意事项采集标本要注重质量,尽量减少野外采集的数量,对于植物的产地、生活环境、性状、花的颜色、采集日期等都要做详细记录,这对标本的鉴定和研究有很大帮助。一份
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