天下武功2016
你在CNKI里面去搜一下这篇文章，原文我没有留，译文留了里面的图表自己补Gas chromatographic-mass spectrometric characterization of some fatty acids from white 和 interior spruce（云杉种子脂肪酸的GC-MS分析）译文出处：D.-J. Carrier et al./J. Chromatogr. A715 (1995)317-324外文译文正文：摘要：本文主要是研究测定云杉种子中脂肪酸的成分。一是通过气相色谱分析种子油中获得的脂肪酸甲酯化衍生物。云杉脂肪酸甲酯化衍生物的洗脱时间不受有效标样类别的影响。二是将提取物二乙氨化，并通过气相色谱-质谱进行分析。由所得图谱分析确定样品中含有cis-ll-18:l,cis-5,cis-9-18:2和 和 cis-5,cis-9,cis-12-18:3等脂肪酸。1 引言内陆云杉(Picea glauca engelmannii Complex)是白云杉(Picea glauca) 和恩格尔曼(Picea engelrnannii) 在它们重叠地带的自然杂交品种。它是一种重要的经济作物，在英国的哥伦比亚每年有8千万株的种植量。本文研究的目的是通过胚离体培养的克隆繁殖系统来改进优化云杉的生产。人工种子的生产是研究目的之一，涉及到人工胚乳（幼苗发芽储存物质）的形成。本文的研究旨在为发展人工胚乳，更好的了解云杉幼苗发育的营养需要提供有用的基础数据。云杉种子中含有约30%的脂类物质[1]。和其它裸子植物一样，高脂质含量表明脂类代谢是幼苗获得自养能力前的重要营养供给 [2]。本文测定内陆云杉种子的脂类及其组成。据调查，目前还没有关于云杉种子脂肪酸研究的报道。在前期研究中，用气相色谱法（GC）分析内陆云杉种子脂肪酸的甲酯化产物，但是其中丰度第二的脂肪酸甲酯化产物很难由现有的标准图谱进行确定。这些洗脱峰存在于cis-9,cis-12-18:2和cis-9,cis-12,cis-15-18:3的脂肪酸甲酯衍生物之间。初始GC-MS测定显示分子离子峰与18：3甲酯衍生物相匹配。前人有关白云杉脂肪酸含量的研究中，丰度第二的成分是5，9-18：2。为明确和完善云杉种子脂肪酸成分研究，本文对内陆白云杉种子大量脂肪酸进行测定。通过GC-MS测定不饱和脂肪族的许多方法是可行的。与丙酮、硼酸反应后，接着与临位二元醇作用是确定不饱和双键的常用方法，硅烷基化及甲酯化也是惯常方法[3]。质谱数据结果能提供丰富的资料，但是锇的四氧化物反应过程中存在着潜在危险。研究发现，氢化作用后进行环氧化也能确定不饱和双键的位置[3]，虽然这是一个不错的方法，但两步衍化十分耗时。另一种确定双键位置的方法是在羧基端加入一稳定基团，例如掺入形成酰胺基[4]，双键数可能会在形成质谱图谱时减少。吡咯烷一般作为质谱洗脱脂肪酸识别酰胺的物质[3]。然而，对于未知脂肪酸成分是否含有羟基、环氧基及其他保守基团，二乙胺化是有效的方法[4]。该方法优点是较其他方法容易获得衍生物及进行质谱分析，现已成功应用于对欧洲云杉脂肪酸双键位置的确定[5]。本文报道内陆白云杉种子的总脂类中脂肪酸的含量及种类。脂类提取然后一部分甲酯化，再进行GC分析；另一部分则二乙胺化，并进一步进行GC-MS测定。2 实验部分2 1 化学药品化学药品均达到试剂级别。氯化氢甲醇购买于Supelco Canada Oakville, (Ont., Canada)，二乙胺及冰醋酸分别购于Aldrich(Milwaukee, WI, USA)和Fisher Scientific(Nepean, Ont., Canada)。白云杉和及青冈云杉种子分别由Prairie Farm Rehabilitation Administration(Indian Head, Sask., Canada)和British Columbia Research (Vancouver,BC,Canada)提供。十七碳脂肪酸及其他脂肪酸甲酯化物标品购于Nu-Chek-Prep (Elysian, MN,USA)。2.2 方法初始甲酯化研究根据成熟的方案[6-8]提取内陆云杉种子并进行甲醇反应。十七碳脂肪酸作为内参标品。如前所述对脂肪酸甲酯进行分析[8]。GC-MSGC-MS分析均用Fison 8000型GC-MS仪（Fisons Instruments,Manchester, UK），具60m×0.32mm ID.DB-23 熔融石英毛细管柱（J&W Scientific, Folsom, CA, USA）和与Fison Tri2000质谱四极杆相接的接口。所有样品以逐一注入的模式注入。最初柱温70℃，然后以20℃/min升至180℃，接着以每秒4℃/min升至240℃。GC接口及物料保持在250℃。每1.1s以70eV的电子能量从50-510的质量范围重复检测。总脂类提取和二乙氨衍生化作用100mg种子提取中加入1.5ml异丙醇，用TP型匀浆器（Janke & Kunkel, Germany）以最大速度均质3min；密封并沸水浴5min；冷却后加入0.75ml CH2Cl2，室温放置30min，间断漩涡振荡；再加入1ml水及2mlCH2Cl2 。涡旋振荡并830g离心。保留有机相，用2mlCH2Cl2再次抽提水相。合并获得的有机相，蒸发溶剂获得总脂。根据Ref.[5]设计的方案获得二乙氨衍生物。总脂转移至1ml穿刺反应瓶中，反应瓶中含0.8ml二乙氨和0.1ml冰醋酸，然后在氮气保护下净化，再密封置于穿刺反应仪（Rockford, IL, USA）中，105℃下反应75min。而后反应混合物转移至带有瓶塞的玻璃试管中。在氮气流中蒸发掉二乙氨，然后加入1ml水及3mlCH2Cl2，涡旋震荡并830g离心。最后蒸发至得到干物质并回收二乙氨衍生物的有机相。3 结果及讨论3.1甲酯化每毫克鲜重的种子直接甲酯化[6]能产生150µg的总脂肪酸。但种方法并不能总是能定量的测定从植物组织中提取出来的脂肪酸。它能够像最初一样很好地测定植物叶片中的脂肪酸，对其他植物组织就未必能起到很好的作用，例如内陆云杉种子。按Hara等人提出的总脂肪酸提取方案，然后再用甲酯化气相色谱分析法，可以测出每毫克鲜重种子300µg范围内的总脂肪酸。上文均用Holbrooketal提出的提取方案和转甲基化方法。内陆云杉种子总脂肪酸的气相色谱-质谱分析结果如图1，通过与标样的保留时间和图谱比较可以得知1、2、3、6的峰值分别代表16:0, 18:0, 9-18:1和9,12-18:2脂肪酸甲酯。根据现有的色谱条件trans-9-18:l和trans-9,trans-12-18:2脂肪酸甲酯的洗脱时间比相应的顺式异构体cis-9-18:1和cis-9,cis-12-18:2脂肪酸甲酯要早0.5min。结合植物油脂多为顺式异构体这一事实，可以推知在这次测定中所得的同样应该是顺式异构体。所以在图1.中的峰值3和6可以确定为cis-9-18:1和cis-9,cis-12-18:2脂肪酸甲酯。在图1.（标注为7）的质谱数据图谱中的丰度第二的组分显示的离子峰为292，这和18:3脂肪酸甲酯相匹配，但是它的保留时间与现有的任一标样都不符。同样地，组分5的离子峰为294，显示为一种不明双键位置的18:2二烯酸甲酯。白杉种子总脂肪酸提取物的GC-MS分析结果如图2.所示。从中可以观察到两个物种的脂肪酸甲酯的结构是相似的。离子峰D和E分别是296和294，表明它们分别为18:1和18:2脂肪酸甲酯。图1.中的峰5、7和图2.中的峰D和E对应的物质的结构阐述将在下文介绍。3.2 二乙氨衍生物二乙氨衍生物提供一分子电荷稳定基团给分析物，使其在断片发生之前重新电荷分布产生峰值[3]。以cis-9,cis-12,cis-15-18:3（a-亚麻酸）作为参考物质对这种方法进行了首次评定，依照Ref.[5]介绍的规律解释质谱结果显示：每隔14u出现一个饱和键，而片段在Cn和Cn+1之间被12u所分隔则表示在Cn+1和Cn+2存在一个不饱和双键。可以用这一结论解释二乙氨衍生物质谱分析中的cb-9,cis-12,cis-15-18:3的双键位置。质谱分析结果基本符合Ref.[5]介绍的规律。电子轰击后的二乙氨衍生物的质谱图谱显示于图3的A和B，对应的峰分别是第6和7。图3A显示离子峰为335u，对应的二乙氨衍生物为18:2。片段m/z 198-210和 m/z 238-250的差别表示在C9-C10和C12- C13各存在一个双键，就如Ref.[5]叙述的，经测定该化合物为cis-9,cis-12-18:2。丰度为第二的脂肪酸的二乙氨衍生物被显示于图3B，其离子峰显示为333u，测定对应的物质为18:3的二乙氨衍生物，在m/z 142-154, 196-208 和236-248间存在12u的差异说明在5、9、12三处各有一个双键。而在云杉属中，9,12-18:2表示cis构象，故可以确定该化合物为cis-5,cis-9,cis-12-18:3。电子轰击后，二乙氨衍生物的质谱图谱（图1中对应峰5）不能有效说明双键的所在位置，但白云杉脂肪酸二乙氨衍生物的图谱（图2对应峰E）能有效地说明，如图4A所示：离子峰为335确定为18:2二乙氨衍生物，双键位置分别在碳5、9位，测定为cis-5，cis-9-18:2。图4B中显示的二乙氨衍生物的图谱，在图2中对应着峰D。离子峰337u对应18:1二乙氨衍生物，尽管不是很清晰，但该图谱仍显示在226-238质量单位间存在12u，说明双键位置在碳11、12间，化合物确定为cis-11-18:1。通过比较两种云杉种子的脂肪酸甲酯的保留时间可以推测图1.中的峰值5和图2中的峰值是相同的（即两者都是cis-5,cis-9-18:2）同样的，图2.中的峰值D和图1.中的峰值4也有相似的保留时间。因此初步鉴定它们为cis-11-18:1。图2.中的峰值A、B、C、D、E、F和G被确定为16:0,18:0,cis-9-18:l,cis-i1-18:1,cis-5,cis-9-18:2,cis-9,cis-12-18:2 和cis-5,cis-9,cis-12-18:3。这些脂肪酸在白杉和内陆云杉种子中的分布如表1.所示。白杉和内陆云杉种子的油脂含量分别是鲜重的49±5%和41±1%。相对于其它族的脂肪链来说cis-5,cis-9-18:2和cis-5,cis-9,cis-12-18:3的三乙氨衍生物的图谱在m/z182处均显示出强烈的离子效应。这种强的离子效应可能是由在形成烯丙基片段时两个亚甲基将双键分隔而引起。这一假设是从图3B.和图4A.中的脂肪酸衍生物图谱分析中提出来的。在图3A.和图4B.中的图谱并没有显示出在m/z182强烈的离子效应。脂肪酸cis-5,cis-9,cis-12-18:3 在对P.abies[5,9,11] 和 P.engelmannii, mariana, obovata, orientalis和sitchensis [10]的研究中都有检测到。我们在P. glauca 和 P. glauca engelmannii Complex的研究中也检测到了这些物质。其他文章[1，12]报道P. glauca中丰度第二的脂肪酸为cis-5,cis-9-18:2，我们实验室所得的P. glauca种子提取物的确含有这些脂肪酸，但却是次要组分，结果见表1.。参考文献[1] S.M. 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karenchao1983
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，吕瑞恒.油松幼龄人工林土壤质量对间伐强度的响应.水土保持通报，2008,28（3）：65～70.79李国雷，刘勇，李瑞生，徐扬，郭蓓.油松叶凋落物分解速率、养分归还及组分对间伐强度的响应.北京林业大学学报，2008,30（5）：52～57.80GuoleiLI,YongLIU,JingGAN,BeiGUO,YangXU.SeasonalresponseofsoilenzymeactivitytothinningintensityofaerialseededPinustabulaeformisstands.FrontiersofForestryinChina,2008,3(3):286-292.DOI10.1007/s11461-008-0061-4.81刘勇，李国雷，李瑞生，郭蓓，徐扬.密度调控对油松人工林土壤肥力的影响.西北林学院学报，2008,23（6）：18-23.82李国雷，刘勇，李瑞生，吕瑞恒，徐扬.油松人工林土壤质量的演变.林业科学，2008，44（9）：76-81.83吕瑞恒，刘勇.北京山区不同林分类型土壤酶及土壤肥力的关系.第九届全国森林培育学术研讨会论文集.2008年11月22-24日，中国北京，69-74.优秀论文奖84徐庆华，刘勇，马履一，姜长吉，刘福森，李雪莲，姜辉.长白落叶松苗木生长的数学模型拟合分析.第九届全国森林培育学术研讨会论文集.2008年11月22-24日，中国北京，206-212.85尹伟伦，刘勇，李国雷，王兰珍，吕瑞恒.用系统思想提高林业学生的创造力----一个新的创造力理论及其在北京林业大学的实践案例.林业教育国际研讨会暨第一届中国林业教育培训论坛论文集,2008年12月8-9日，中国北京，152-157.86李国雷，刘勇，吕瑞恒，于海群，李瑞生.2009.华北落叶松人工林密度调控对林下植被发育的作用过程.北京林业大学学报，31（1）：19-24.87李国雷，刘勇，于海群，吕瑞恒，李瑞生.2009.油松（Pinustabulaeformis）人工林林下植被发育对油松生长节律的响应.生态学报.29(3):1264-1275.88刘勇，李国雷，林平，姜辉，于海群，吕瑞恒.2009.华北落叶松人工幼、中龄林土壤肥力变化.北京林业大学学报，31（3）：17-23.89吕瑞恒，刘勇，李国雷，于海群，杨占军，李秀玲.2009.北京延庆飞播林区不同植被类型土壤肥力的差异.东北林业大学学报，37（5）：39-42.90Shu-LanBai,Guo-LeiLi,YongLiu,R.KastenDumroese,andRui-HengLv.2009.OstryopsisdavidianaseedlingsinoculatedwithectomycorrhizalfungifacilitateformationofmycorrhizaeonPinustabulaeformisseedlings.Mycorrhiza,19:425-434.DOI10.1007/s00572-009-0245-2.91GuoleiLI,YongLIU,RuishengLI,BeiGUO,YangXU.Responsesofdecompositionrate,nutrientreturn,andcompositionofleaflittertothinningintensitiesinaPinustabulaeformisplantation.FrontiersofForestryinChina,2009,4(13):XXXX.DOI10.1007/s11461-009-0058-792GuoleiLI,YongLIU,LvyiMA,RuihengLV,HaiqunYU,ShulanBAI,YaoyaoKANG.ComparisonoftreegrowthandundergrowthdevelopmentinaeriallyseededandplantedPinustabulaeformisforests.FrontiersofForestryinChina,2009,4(3):283-290.DOI10.1007/s11461-009-0049-8.93吕瑞恒，刘勇，于海群，李国雷，刘辉，王玉江.北京山区不同林分类型土壤肥力的研究.北京林业大学学报，2009,31（6）：158-163.94孙慧彦，刘勇，马履一，贾忠奎，康瑶瑶，金虎范，祝燕，侯炳柱，尹凤君.长白落叶松苗木质量与造林效果关系的比较.北京林业大学学报，2009,31（6）：176-180.95刘勇，李国雷，吕瑞恒，赵华.关于加强森林培育学理论研究的探讨.第二届中国林业学术大会——人工林培育理论与技术分会论文集.优秀论文二等奖。96祝燕，刘勇，李国雷，马跃，朱中一.控释氮肥在长白落叶松苗木培育中的应用.第二届中国林业学术大会——人工林培育理论与技术分会论文集.97金虎范，刘勇，山本福寿，李国雷，吕瑞恒.日本琦玉县饭能市的山村环保旅游业.世界林业研究，2010,23（1）：67-70.98徐庆华，刘勇，马履一，徐程杨，魏红旭.土壤含水率对长白落叶松幼苗生长的影响.东北林业大学学报，2010,38（1）：31-33.99江俐妮，魏红旭，刘勇，徐程扬，马履一.长白落叶松播种苗根系形态可塑性与氮素空间异质性关系.东北林业大学学报，2010,38（1）：24-27.100徐庆华，刘勇，马履一，王少华，侯炳柱，尹凤君.长白落叶松苗高生长与气象因子相关关系分析.林业科技，2010，35（1）：1-3.101徐庆华，刘勇，马履一，李友安.长白落叶松幼苗耗水速率与气象因子的关系.西北林学院学报，2010，25（3）：12-14.102刘勇，何斌.毕节试验区生态现代化实现途径探讨.毕节学院学报，2010,28（5）：53-58.103刘勇，李国雷，吕瑞恒，赵华.关于加强森林培育学理论研究的探讨.世界林业研究，2010,23（3）：64-68.104林娜，刘勇，李国雷，吕瑞恒，王少华，侯炳柱，尹凤君.抚育间伐对人工林凋落物分解的影响.世界林业研究，2010,23（3）：44-47.105何斌，王兰珍，刘勇.3个种源异株荨麻光合特性的比较.吉林农业大学学报，2010,32（4）：355-361,370.106YongLiu，Guo-LeiLi,Hai-QunYu,Rui-HengLv.Creativitytheoryofecosystems:Anewapproachtostudythemechanismsofbiodiversity.23rdIUFROWorldCongress,August23-28,2010,Seoul,RepublicofKorea.Oralpresentation.InTheInternationalForestryReview,2010,12(5):86107YongLiu,KastenDumroese,GuoleiLi,RuihengLv.Studyingrelationshipsofbiodiversityandecosystemfunction:anewparadigmforresearchers.23rdIUFROWorldCongress,August23-28,2010,Seoul,RepublicofKorea.Posterpresentation.InTheInternationalForestryReview,2010,12(5):88108赵华，刘勇，李国雷，吕瑞恒.造林工程规划设计与实施过程中的系统方法论研究.中南林业调查规划，2010,29（3）：6-10,15.109林娜，刘勇，李国雷，于海群.森林土壤酶研究进展.世界林业研究，2010,23（4）：21-25.110李国雷，刘勇.SPSS统计软件在林业试验设计课程中的应用.中国林业教育，28（5）：66-68.111孙宇，刘勇，李国雷，马履一.磷肥施肥方式对长白落叶松苗木生长的影响.第十一届全国森林培育学术研讨会论文集，中国林学会造林分会，2010,10,9-12.四川雅安.436-443.112林娜，刘勇，李国雷，于海群.ThecomparisonofsoilenzymeactivityindifferentageofPinustabulaeformisaerialseedingforests.第十一届全国森林培育学术研讨会论文集，中国林学会造林分会，2010,10,9-12.四川雅安.418-425.113徐庆华，刘勇，马履一，贾忠奎，丰庆荣.不同播种覆盖物对种子出苗率和土壤蒸发量的影响.南京林业大学学报，2010，34（5）：149-152.114吴雅婧，刘勇，郭素娟，王静.植物性原料堆沤基质化处理及氮素释放特性.东北林业大学学报，2010,38（10）：95-98.115PingJiang,YuyangSong,YongLiu.ComparativeStudyonCommunityCharacteristicsofDesertNon-CommercialForestsinNorthwestChinaofXinjiangafterBeingClosed6Years.InternationalConferenceonCombatingLandDegradationandAnnualCouncilorMeetingofWASWACLANDCON1010,October11-15,2010,108.116孙宇，刘勇，李国雷，马履一.磷肥施肥方式对长白落叶松苗木生长的影响.东北林业大学学报，201主,39（1）:24-27.117祝燕，马履一，刘勇，李国雷，马跃，朱中一.控释氮肥对长白落叶松苗木生长的影响.南京林业大学学报，2011,35（1）：24-28.118HaoHu,YongLiu,Guang-LuShi,Yue-PingLiu,Rui-JieWu,Ai-ZhenYang,Yi-MingWang,Bao-GuangHuaandYou-NianWang.Proteomicanalysisofpeachendocarpandmesocarpduringearlyfruitdevelopment.PhysiologiaPlantarum2011，142:390-406.ISSN0031-9317.doi:10.111/j.1399-3054.2011.01479.x(SCI收录，影响因子3.067).119G.L.Li,Y.Liu,Y.Zhu,J.Yang,H.Y.Sun,Z.K.Jia,L.Y.Ma.InfluenceofinitialageandsizeonthefieldperformanceofLarixolgensisseedlings.NewForests2011,42:215-226.DOI10.1007/s11056-011-9248-x(SCI,correspondenceauthor)120康瑶瑶,刘勇,李国雷;马履一,贾忠奎,姜长吉,刘福森,李学莲.长白落叶松播种苗移栽期失水胁迫对其活力的影响.林业科学,2011，47(6):188-193.121刘勇，李国雷，祝燕，吴雅婧，林娜，邹尚庆，蒋乐.中国林木种子生物学与种子经营技术进展.林业科学，2011,47（8）：143-150.122李国雷，刘勇，祝燕.苗木切根技术研究进展.林业科学，2011,47（9）：140-147.123祝燕，刘勇，李国雷，林平，康瑶瑶，孙宇.氮素营养对长白落叶松移植苗生长及养分状况的影响.林业科学，2011,47（9）：168-172.124李国雷，刘勇，祝燕.秋季施肥调控苗木质量研究评述.林业科学，2011,47（11）：166-171.125赵华，刘勇，金小麒.贵州林业发展区划数量化划分研究.北京林业大学学报，2011,33（2）：7-13.126康瑶瑶,刘勇,马履一，李国雷，祝燕，马跃.施肥对长白落叶松苗木养分库氮磷吸收及利用的影响.北京林业大学学报，2011,33（2）：31-36127孙宇，刘勇，李国雷，马履一.磷肥施肥方式对长白落叶松苗木生长的影响.东北林业大学学报，2011,39（1）:24-27.128祝燕，马履一，刘勇，李国雷，马跃，朱中一.控释氮肥对长白落叶松苗木生长的影响.南京林业大学学报，2011,35（1）：24-28.129林娜，刘勇，于海群，李国雷，.吕瑞恒.不同林龄飞播油松林下植被多样性研究.南京林业大学学报，2011,35（3）：16-20.130李国雷，刘勇，祝燕，孙宇，邹尚庆.苗木稳态营养加载技术研究进展.南京林业大学学报，2011,35（2）：117-123.131李国雷，刘勇，祝燕，李庆梅，孙宇，邹尚庆，蒋乐.国外苗木质量研究进展.世界林业研究，2011,24（2）：27-35.132陈晓，刘勇，李国雷，孙巧玉，张硕，许飞.土壤真菌研究方法及人为干扰对森林土壤真菌群落影响研究进展.世界林业研究，2011,24（5）：7-12.133.孙宇，李国雷，刘勇，马履一，贾忠奎，祝燕.磷肥施用方式对长白落叶松播种苗生长的影响.南京林业大学学报（自然科学版），2011，35（5）：16-20.134孙宇，李国雷，刘勇，马履一，祝燕，姜长吉，刘福森，李学莲.水施磷肥对长白落叶松苗木生长和磷吸收的影响.浙江农林大学学报，2011,28（2）：219-226.
雷公山原生森林成片，生长着近2000种动、植物。列为国家保护的植物有秃杉(台湾杉)等43种。其中，国家一级保护的古老孑遗植物秃杉(Taiwaniaflousia
狂睡不醒 2人参与回答 2023-12-11 你在CNKI里面去搜一下这篇文章，原文我没有留，译文留了里面的图表自己补Gas chromatographic-mass spectrometric chara
王家姑娘0122 2人参与回答 2023-12-05 紫杉醇是红豆杉属植物中的一种复杂的次生代谢产物，也是目前所了解的惟一一种可以促进微管聚合和稳定已聚合微管的药物。同位素示踪表明，紫杉醇只结合到聚合的微管上，不与
chengjiebgjicom 4人参与回答 2023-12-11 云杉树介绍： 云杉（拉丁学名：Picea asperata Mast.），别名：茂县云杉（中国树木分类学），茂县杉（中国裸子植物志），异鳞云杉、大云杉、大果云杉
红颜一笑吧 5人参与回答 2023-12-05 法律分析：一要及时组织企业人员认真学习研究《云浮市推进石材废渣规范处理处置工作方案》、《云浮市石材生产加工污染防治条例》等有关文件；二要持续发力推进与石材废渣产
非你莫属88 3人参与回答 2023-12-06